LV13871B - Pediococcus pentosaceus laktozes pozitīvais celms un tā sintezētais fruktānus saturošais eksopolisaharīdu komplekss - Google Patents

Pediococcus pentosaceus laktozes pozitīvais celms un tā sintezētais fruktānus saturošais eksopolisaharīdu komplekss Download PDF

Info

Publication number
LV13871B
LV13871B LVP-07-79A LV070079A LV13871B LV 13871 B LV13871 B LV 13871B LV 070079 A LV070079 A LV 070079A LV 13871 B LV13871 B LV 13871B
Authority
LV
Latvia
Prior art keywords
pediococcus pentosaceus
strain
lactose
complex
synthesized
Prior art date
Application number
LVP-07-79A
Other languages
English (en)
Other versions
LV13871A (lv
Inventor
Pavels Semjonovs
Peteris Zikmanis
Original Assignee
Univ Latvijas
Pavels Semjonovs
Peteris Zikmanis
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Latvijas, Pavels Semjonovs, Peteris Zikmanis filed Critical Univ Latvijas
Priority to LVP-07-79A priority Critical patent/LV13871B/lv
Priority to EP07120798A priority patent/EP2011859B1/en
Priority to DE602007005792T priority patent/DE602007005792D1/de
Priority to AT07120798T priority patent/ATE463556T1/de
Priority to DK07120798.9T priority patent/DK2011859T3/da
Publication of LV13871A publication Critical patent/LV13871A/lv
Publication of LV13871B publication Critical patent/LV13871B/lv

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

PEDIOCOCCUS PENTOSACEUS LAKTOZES POZITĪVAIS CELMS UN TĀ SINTEZĒTAIS FRUKTĀNUS SATUROŠAIS EKSOPOLISAHARĪDU KOMPLEKSS
Tehnikas joma
Izgudrojums attiecas uz pārtikas biotehnoloģiju, tai skaitā - sinbiotisko fermentētu funkcionālas pārtikas produktu ar bifidogēnām īpašībām ražošanu, pārtikas produktu funkcionālo īpašību uzlabošanu, fermentēšanas procesā izmantojot Pediococcus pentosaceus laktozes pozitīvo celmu, vai arī bagātinot galaproduktu ar celma sintezētajiem eksopolisaharīdiem (EPS).
Tehnikas līmenis
Pienskābes baktērijas to tehnoloģisko, funkcionālo un terapeitisko īpašību dēļ plaši lieto fermentētas pārtikas ražošanā un pārtikas produktu funkcionālo īpašību uzlabošanā.
Pediococcus pentosaceus pieder homofermentatīvo pienskābes baktēriju grupai. Tās ir atzītas par cilvēka veselībai nekaitīgām (GPAS - generally recognized as safe) un droši izmantojamām pārtikas ražošanā. To celmi ir dabiski mikrofloras pārstāvji spontāni fermentētajos produktos - piena produktos, fermentētajos gaļas un zivju produktos, skābētos dārzeņos, skābbarībā, maizes ieraugos. Pienskābes baktērijām ir būtiska loma šo produktu garšas un aromāta veidošanā. Pediococcus pentosaceus ir viens no visbiežāk izdalāmajiem mikroorganismiem tradicionālajos maizes ieraugos, kā ar citos tradicionāli fermentētajos pārtikas produktos (Simpson, W.J. Taguchi, H. 1995. The gēnus Pediococcus, witb notēs on the genera Tetratogenococcus and Aerococcus, pp. 125-172. In: B.J.B. Wood and W.H. Holzapfel (eds). The genera of Lactic acid Bacteria. Chapman & Hall, London). Pediococcus pentosaceus celmu probiotiskais potenciāls ir novērtēts gan attiecībā uz cilvēkiem, gan dzīvniekiem. Pediococcus pentosaceus celmi ir izrādījuši antibakteriālu aktivitāti attiecībā uz cilvēku zarnu trakta patogēnajām baktērijām (Brink, M., Fraser, T. et al. A combined use of probiotics and prebiotics in a soymilk-based food supplement aimed at improving the gastrointestinal flora of children with HIV AIDS. Electron. J Environ Agrie Food Chem. (2003) 2, 4; 504509.); kopā ar citiem probiotiķiem tie tiek iekļauti sinbiotiskajos preparātos cilvēka gastrointestinālā līdzsvara uzturēšanai (Bengmark, S., Gil, A. Bioecological and nutritional control of disease: prebiotics, probiotics and synbiotics. Nutr. Hosp. (2006) 21, 2; 72-84.). Pediococcus pentosaceus celmu pievienošana cūku barībai ļauj būtiski samazināt to zarnu traktā Enterobacteriaceae daudzumu, tādējādi tie ir uzskatāmi par perspektīvām probiotiskām piedevām cūku barībai (Gardiner, G. E., Casey, P. G. et al. Relative ability of Oraly Administrated Lactobacillus murinus to predominate and persist in the porcine gastrointestinal tract. Appl Environ Microbiol. (2004), 70 (4): 1895-1906.). Pediococcus pentosaceus saturošus ieraugus izmanto skābētu kāpostu, gurķu, zaļo pupiņu, sojas piena un skābbarības fermentēšanai. Šo ieraugu lietošana kāpostu skābēšanai samazina tajos biogēno amīnu līmeni (Spieķa, J., Kalac, P., et al. Application of lactic acid bacteria starter cultures for decreasing the biogenic amine Ievels in sauerkraut. Eur Food Res Technol. (2002) 215, 6, 509-514.). Pediococcus pentosaceus saturošos ieraugus plaši izmanto fermentēto desu ražošanā, kas vienlaicīgi ar tehnoloģiskām īpašībām, pateicoties bakteriocīnu sintēzei, aizsargā pret nevēlamās un patogēnās mikrofloras (Lisīeria, Pseudomonas, Staphylococcus, Enterobacteriaceae, Salmonella, īersinia) attīstību (Mattila-Sandholm, T., Haikara, A., Skytta, E. The effect of Pediococcus damnosus and Pediococcus pentosaceus on the growth of pathogens in minced meat. Int J Food Microbiol. (1991) 13,1; 87-94.), kā ari mazina atlikušo nitrītu līmeni. Pediococcus pentosaceus celmi ietilpst komerciāli pieejamos ieraugos fermentēto gaļas produktu ražošanai.
Pienskābes baktēriju EPS un tos sintezējošie celmi tiek izmantoti, lai uzlabotu fermentēto produktu Teoloģiskās, tekstūras un organoleptiskās īpašības. Pienskābes baktēriju EPS piemīt prebiotiska, pretaudzēju, imunostimulējoša aktivitāte, spēja pazemināt holesterīna līmeni asinīs (Welman, A. D., Maddox, I. S. Exopolysaccharides from lactic acid bacteria: perspectives and chalenges. Trends in Biotechnology. (2003) 21, 8; 269 - 343.).
Ģenētiski modificētu organismu izmantošana pārtikas tehnoloģisko un funkcionālo īpašību uzlabošanā pagaidām ir ierobežota. Pediococcus pentosaceus celmu plašāku pielietošanu pārtikas biotehnoloģijā būtiski ierobežo šai ģintij raksturīgā nespēja izmantot laktozi. Šī iemesla dēļ Pediococcus pentosaceus laktozes negatīvo celmu nav lietderīgi izmantot piena produktu ieraugos (Caldwell, S. L., McMahon, D. J. et al. Development and Characterisation of Lactose-Positive Pediococcus species for Milk Fermentation. Appl Environ Microbiol. (1996) 62,3; 936-941.). Pašlaik Pediococcus pentosaceus celmus izmanto tikai tādu produktu ražošanā, kur to nespēja izmantot laktozi nav būtiska, t.i. laktoze nav galvenais substrāts fermentācijas procesā, piem., fermentēto gaļas produktu, skābo kāpostu ražošanā. Ir ziņas par ģenētiski modificēto laktozes pozitīvo celmu iegūšanu, piemēram, bakteriofagu apdraudēto Steptococcus termophilus celmu aizstāšanai siera ražošanā, taču nav ziņu par to komerciālu izmantošanu, iespējams, to pazīmes stabilitātes un tehnoloģisku iemeslu dēļ (Caldwell, S. L., McMahon, D. J. et al. Development and Characterisation of Lactose-Positive Pediococcus species for Milk Fermentation. Appl Environ Microbiol. (1996) 62,3; 936-941.).
Līdz šim nav ziņu par komerciāli pieejamu ieraugu Pediococcus pentosaceus eksopolisaharīdus (EPS) sintezējošiem celmiem. EPS sintezējošo celmu klātbūtne būtu visai vēlama, piemēram, maizes un fermentētas gaļas ieraugos, kas varētu būtiski uzlabot galaproduktu kvalitāti, tai skaitā, piešķirot tam prebiotiskas īpašības. Probiotiskie mikroorganismi (dzīvie mikroorganismi vai pārtikas produkti un piedevas, kas tos satur) pozitīvi ietekmē cilvēka un dzīvnieku gremošanas trakta mikrobiālo līdzsvaru, tādējādi uzlabojot saimniekorganisma veselību un labsajūtu (Mason, P. Probiotics and Prebiotics. The Pharmaceutical Journal. (2001) 266, 7132; 118-121).
Ir pierādīts, ka fruktāniem piemīt preobiotiskas un citas cilvēka veselību pozitīvi ietekmējošas īpašības (Kaur, N., Gupta, A. K. Application of inulin and oligofructose in health and nutrition. J Biosci. (2002) 27, 7; 703-714), taču nav komerciāli pieejamu ieraugu, kas saturētu fruktānus sintezējošos celmus. Fruktānu klātbūtne Pediococcus pentosaceus EPS kompleksā var būtiski uzlabot pārtikas produktu funkcionālās un, it īpaši, prebiotiskas un probiotiskas īpašības, kam ir pozitīva ietekme uz cilvēka veselību.
Izgudrojuma izpaušana
Izolēts jauns homofermentatīvo pienskābes baktēriju fruktānus saturošo eksopolisaharīdu kompleksu sintezējošs Pediococcus pentosaceus laktozes pozitīvais celms. Mikroorganisma celms ir deponēts Starptautiskā deponējošā iestādē - Latvijas Mikroorganismu kultūru kolekcijā (LMKK) 2007.gada 29.martā. Mikroorganismam piešķirtais numurs - P 773. Izolētais jaunais Pediococcus pentosaceus P 733 celms spēj izmantot laktozi kā vienīgo oglekļa avotu un attīstīties dažādu grupu pārtikas substrātos - pienā, graudu substrātos, augļu un dārzeņu sulās, sojas pienā un citos. Pateicoties šīm celma īpašībām tas var tikt izmantots kā tehnoloģiskā kultūra visu veidu fermentācijas procesos, kā ierauga kultūra - atsevišķi vai maisījumā ar citām kultūrām. Tiek piedāvāts ari paņēmiens fruktānus saturošo eksopolisaharīdu kompleksa ar prebiotiskām īpašībām sintezēšanai, izmantojot Pediococcus pentosaceus P 733 celmu.
īss zīmējumu apraksts
Fig. 1 ir parādīta Pediococcus pentosaceus homoloģija un filoģenētiskais koks, celmu identificējot ar 16S rDNS salīdzināšanu.
Fig. 2 atspoguļo Pediococcus pentosaceus celma bioķīmiskos rādītājus, kas iegūti izmantojot API 50CHL identificēšanas sistēmu.
Fig. 3 ir Pediococcus pentosaceus celma sintezēta eksopolisaharida gelfitrācijas profils.
Pediococcus pentosaceus laktozes pozitīvais celms ir izdalīts no ieskābuša alus un identificēts pēc 16S rDNA sekvences (Fig. 1) un bioķīmiskajiem rādītājiem (Fig. 2) līdz sugai 16S rDNS, API.
Celms saharozes vai rafinozes klātbūtnē veido EPS maisījumu, kas pārstāvēts ar fruktānu un glikānu (Fig. 3). Celms spēj izmantot laktozi kā vienīgo oglekļa avotu (tabula 1).
Tabula 1
Pediococcus pentosaceus P 773 eksopolisaharidu (EPS) 20,0 g/L ietekme uz probiotisko piena produktu kultūru specifisko augšanas ātrumu modificētajā MRS barotnē (laktoze 45,0 g/L)
Kultūras Specifiskais augšanas ātrums - μ, h'1
Laktoze (Kontrole) Laktoze + EPS
B. lactis 0,18 + 0,01 0,22 + 0,01
L. acidophilus 0,50 + 0,01 0,55 + 0,01
S. thermophilus 0,59 + 0,01 0,67 + 0,02
Celma sintezētie EPS veicina pienskābes baktēriju, tai skaitā probiotisko kultūru attīstību (tabula 2), sintezējoties in situ pienskābās rūgšanas procesā, vai arī pievienojot tos kādā no produkta ražošanas stadijām, un var kalpot tām par vienīgo oglekļa avotu (tabula 1). Celma sintezētos EPS var pievienot produkta ražošanas procesā kā funkcionālo un tehnoloģisko piedevu.
Tabula 2
Pediococcus pentosaceus P 773 eksopolisaharidu spēja kalpot par vienīgo oglekļa avotu probiotisko piena produktu ieraugu kultūrām modificētajā MRS barotnē (glikoze ir aizvietota ar Pediococcus pentosaceus P 773 EPS, 20,0 g/L (48 h)
Kultūras Biomasa, g/L Pienskābe, g/L Orjhidrātu patēriņš, % no sākotnējā
B. lactis 0,91+0,04 3,15 + 0,17 19,15 + 1,12
L. acidophilus 0,30 + 0,01 3,24 + 0,16 7,45 + 0,52
S. thermophilus 0,74 + 0,02 3,78 + 0,19 23,40+ 1,52
Celms attīstās dažādos pārtikas substrātos (tabula 3) un ir piemērots sinbiotisko funkcionālo produktu iegūšanai. Celma īpašības to raksturo kā īpaši perspektīvu pārtikas ražošanas procesos.
Tabula 3
Pediococcus pentosaceus P 773 celma raksturojums (48 h) modificētajā MRS barotnē ar dažādiem oglekļa avotiem (100 g Γ1)
Oglekļa avots barotne
Saharoze Rafinoze Laktoze Glikoze
Biomasa, g/L 6,1 + 0,2 3,2 +0,1 2,4 ±0,1 2,5 ±0,1
EPS sintēze, g 1/L 3,9 ±0,15 1,2 + 0,4 _* -*
Pienskābe, g/L 17,5 + 0,7 24,7 ±0,9 26,6 + 0,8 26,3 ±0,9
Ogļhidrātu patēriņš, g/L 63,0 + 3,1 48,1+2,2 44,0 ± 2,0 50,0 + 2,8
Biomasas iznākums - Yx/s, g/g 0,10 0,07 0,05 0,06
Skābju iznākums - Yx/s, g/g 0,28 0,51 0,53 0,60
*EPS netiek sintezēti
Celma sintezētais EPS ar LR Pārtikas un Veterinārā Dienesta Diagnostikas Centra atzinumu ir novērtēts kā netoksisks. Celma ieviešana ražošanas praksē ļautu dažādot funkcionālās pārtikas produktu klāstu, samazināt sinbiotisko produktu ražošanas izmaksas, uzlabot tradicionālo pārtikas produktu kvalitāti un drošumu (piemēram, bakteriocīnu sintēze) un dažādot to organoleptiskās īpašības (tabula 4).
Tabula 4
Dažādu pārtikas substrātu fermentēšana (42 h) ar Pediococcus pentosaceus P 773
Fermentejamais pārtikās substrāts Šunu skaits , l°g κ w / mL Pienskābe, g/L
Govs piens 8,85 ±0,035 8,82 ±0,45
Kazas piens 8,84 ±0,037 12,96 ±0,55
Sojas piens 7,08 ±0,030 5,58 + 0,22
Burkānu sula 9,11+0,042 12,24 + 0,58
Ābolu sula 7,28 + 0,030 10,08 ±0,52
Auzu substrāts 8,06 + 0,039 2,70 + 0,11
Miežu substrāts 7,92 + 0,035 3,06 ±0,12
Zirņu substrāts 9,01 ±0,046 4,32 ± 0,25
Griķu substrāts 7,93 + 0,040 3,06 + 0,13
Rudzu substrāts —:-:—:— -;—:-:--- 7,49 ± 0,038 3,06 ±0,12
Sākotnējais šūnu skaits 6,22 logKvv / mL
Fruktānu saturošā eksopolisaharīdu kompleksa ar prebiotiskām īpašībām sintezēšanai Pediococcus pentosaceus P 733 celmu kultivē fermentācijas vidē 15° +- 42° C, labāk 30° + 37° C, vēl labāk 37° C temperatūrā 12 + 72 stundas, labāk 36 +60 stundas. Fermentācijas vide satur saharozi vai rafmozi koncentrācijā 0,1 +120 g/L; maksimāls polimēra iznākums tiek sasniegts, ja saharozes vai rafinozes koncentrācija ir 100 +120 g/L.
Pediococcus pentosaceus P 733 celma audzēšanas paņēmiens un fruktānu saturošo eksopolisaharīdu kompleksa ar prebiotiskām īpašībām sintezēšanas paņēmiens, izmantojot Pediococcus pentosaceus P 733 celmu ir paskaidrots ar piemēriem.
Piemērs 1
Pediococcus pentosaceus P 773 celmu audzē MRS šķidrajā barotnē (DSMZ, Medium 11), kas satur (g/L): kazeīna peptons (tryptic digest), 10.00; gaļas ekstrakts, 10.00; rauga ekstrakts, 5.00; glikoze, 20.00; Tween 80, 1; K2HPO4, 2; Nātrija acetāts, 5.00; (NH4)2 citrāts, 2.00; MgSO4 x 7 H20, 0.20; MnSO4 x H2O, 0.05; destilētais ūdens, 1000 mL. Pēc barotnes sterilizēšanas ar HC1 vai NaOH pH līmeni iestāda 6.2 - 6.5 robežās. Šūnu dzīvotspējas un kontaminācijas pārbaudi, morfoloģijas novērtējumu, dzīvo šūnu uzskaiti veic, izmantojot agarizēto pamatbarotni (piem., MRS, vai jebkuru citu, kas piemērota celma augšanai), pievienojot agaru 12,0 g/L. Optimālā temperatūra celma augšanai ir 37° C, bet celma audzēšana ir iespējama an pie zemākas vai augstākas temperatūras. Celma audzēšanu veic anaerobā (BBL Gas Pak 150TM System, USA) vai semianaerobā vidē. Oglekļa pamatavots MRS barotne - glikoze, var tikt aizstāts ar kādu citu Pediococcus pentosaceus P 773 celmam asimilējamo oglekļa avotu, piemēram, laktozi, saharozi, rafīnozi koncentrācijā 10-120 g/L.
Piemērs 2
Pediococcus pentosaceus P 773 EPS sintēzi veic MRS modificētajā barotnē ar 120g/L saharozes vai 120g/L rafinozes, kolbā ar tilpumu 2 1, 37° C temperatūrā, anaerobos apstākļos (BBL Gas Pak 150TM System, USA). Modificētajā MRS barotnē ienes Pediococcus pentosaceus P 773 diennakts kultūras sējmateriālu (2%). Kultivāciju pārtrauc pēc 72 stundām, kad šūnu koncentrācija sasniegusi ~ lg/lOOOg. Lai atdalītu šūnas no kultūras šķidruma, to centrifugē 30 min. ar ātrumu 5 000 apgr/min. Lai izgulsnētu EPS, vienai daļai supematanta pievieno trīs daļas auksta (4°C) etanola (96%) un 48 stundas atstāj ledusskapī 4° C temperatūrā. Iegūto suspensiju centrifugē 45 min. ar ātrumu 5 000 apgr/min. Iegūtās EPS nogulsnes izšķīdina destilētajā ūdenī un atkārtoti izgulsnē ar etanolu un centrifugē.
Ja nepieciešams iegūt EPS augstāku tīrības pakāpi, nogulsnes atkārtoti izšķīdina un veic šķīduma dialīzi.
Piemērs 3
Pasterizētajam govs vai kazas pienam pievieno Pediococcus pentosaceus P 773 sējmateriālu (diennakts kultūra MRS barotnē) 2 % apmērā. Inkubē termostatā 48 stundas pie 37° C. Fermentācijas beigās piens satur 8.8 log kvv/mL Pediococcus pentosaceus P 773 šūnu un fermentācijas gaitā izveidojušos pienskābi 8 - 13 g/L (sk. 4. tabulu). Pediococcus pentosaceus P 773 attīstību pienā veicina rauga ekstrakta, kazeīna hidrolizāta, glikozes vai saharozes pievienošana.
Piemērs 4
Auzu, rudzu, miežu, griķu vai zirņu miltiem (5g) pievieno 100 mL destilēta ūdens, labi samaisa un uzbriedina 6 stundas 4° C temperatūrā. Substrātus sterilizē pie 121 °C, 20 min. Graudu vai pākšaugu substrātiem pievieno Pediococcus pentosaceus P
773 sējmateriālu (diennakts kultūra MRS barotnē) 2 % apmērā. Inkubē termostatā 48 stundas pie temperatūras 37° C. Fermentācijas beigās graudu vai pākšaugu substrāti satur 7.0 - 9.0 log kvv/mL dzīvās Pediococcus pentosaceus P 773 šūnas un pienskābi (sk. 4. tabulu). Pediococcus pentosaceus P 773 attīstību graudu vai pākšaugu substrātos veicina to apstrāde ar α-amilāzi, rauga ekstrakta, kazeīna hidrolizāta, glikozes, saharozes vai piena pievienošana.
Piemērs 5
Svaigi spiestu burkānu vai ābolu sulu pasterizē, pievieno Pediococcus pentosaceus
P 773 sējmateriālu (diennakts kultūra MRS barotnē) 2 % apmērā. Inkubē termostatā stundas pie temperatūras 37° C. Fermentācijas beigās iegūst 9.1 un 7.2 log kvv/mL burkānu un ābolu sulas, attiecīgi Pediococcus pentosaceus P 773 šūnu un fermentācijas gaitā izveidojušos pienskābi 10-12 g/L (sk. 4. tabulu).
Piemērs 6
MRS barotni modificē, glikozi 20. 0 g/L aizstājot ar 45.0 g/L laktozi, un pievieno 20.0 g/L Pediococcus pentosaceus P 773 EPS preparāta. Barotni sterilizē pie 0.5 atm. 15 min. Barotni inokulē ar Bifidobakterium lactis, Lactobacillus acidophilus vai Streptococcus thermophilus kultūru sējmateriālu (diennakts kultūra MRS barotnē) 2 % apmērā. Inkubē termostatā pie temperatūras 37° C, nodrošinot vides anaerobitāti (BBL Gas Pak 150TM System, USA). Spektrofotometriski (Shimadzu UV-vis, Japāna) pie 550 nm kontrolē kultūru biomasas veidošanās ātrumu.
Pediococcus pentosaceus P 773 EPS klātbūtnē konstatē Bifidobakterium lactis,
Lactobacillus acidophilus un Streptococcus thermophilus kultūru specifiska augšanas ātruma (μ, h'1) pieaugumu, salīdzinot ar kontroli, kur laktoze ir vienīgais oglekļa avots (sk. 1. tabulu).

Claims (4)

  1. Pretenzijas
    1. Pediococcus pentosaceus celms, kas deponēts Latvijas Mikroorganismu kultūru kolekcijā ar reģistrācijas numuru P 773.
  2. 2. Pediococcus pentosaceus P 773 celma sintezētais eksopolisaharīdu komplekss, kas satur glikānu un fruktānu.
  3. 3. Produkti, kas satur Pediococcus pentosaceus P 773 celma sintezēto
    10 eksopolisaharīdu kompleksu, saskaņā ar 2. pretenziju.
  4. 4. Paņēmiens eksopolisaharīdu kompleksa ar prebiotiskām īpašībām sintezēšanai, raksturīgs ar to, ka 1. pretenzijā nosauktais mikroorganisma celms fermentācijas vidē tiek kultivēts 15° + 42° C, labāk 30° + 37° C, vēl labāk 37° C temperatūrā 12 +
    15 72 stundas, labāk 36 60 stundas, pie kam fermentācijas vide satur saharozi vai rafinozi koncentrācijā 0,1 Ή 20 g/L.
LVP-07-79A 2007-07-05 2007-07-05 Pediococcus pentosaceus laktozes pozitīvais celms un tā sintezētais fruktānus saturošais eksopolisaharīdu komplekss LV13871B (lv)

Priority Applications (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
LVP-07-79A LV13871B (lv) 2007-07-05 2007-07-05 Pediococcus pentosaceus laktozes pozitīvais celms un tā sintezētais fruktānus saturošais eksopolisaharīdu komplekss
EP07120798A EP2011859B1 (en) 2007-07-05 2007-11-15 Pediococcus pentosaceus lactose-positive strain and a complex of fructan-containing exopolysaccharides synthesized by the strain
DE602007005792T DE602007005792D1 (de) 2007-07-05 2007-11-15 Der Lactose-positive Stamm von Pediococcus pentosaceus und der davon synthesierte fruktanenenthaltende Komplex von Exopolysachariden
AT07120798T ATE463556T1 (de) 2007-07-05 2007-11-15 Der lactose-positive stamm von pediococcus pentosaceus und der davon synthesierte fruktanenenthaltende komplex von exopolysachariden
DK07120798.9T DK2011859T3 (da) 2007-07-05 2007-11-15 Laktose-positiv Pediococcus pentosaceus-stamme og et deraf syntetiseret fruktanholdigt exopolysaccharidkompleks

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
LVP-07-79A LV13871B (lv) 2007-07-05 2007-07-05 Pediococcus pentosaceus laktozes pozitīvais celms un tā sintezētais fruktānus saturošais eksopolisaharīdu komplekss

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LV13871A LV13871A (lv) 2009-02-20
LV13871B true LV13871B (lv) 2009-06-20

Family

ID=39761011

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LVP-07-79A LV13871B (lv) 2007-07-05 2007-07-05 Pediococcus pentosaceus laktozes pozitīvais celms un tā sintezētais fruktānus saturošais eksopolisaharīdu komplekss

Country Status (5)

Country Link
EP (1) EP2011859B1 (lv)
AT (1) ATE463556T1 (lv)
DE (1) DE602007005792D1 (lv)
DK (1) DK2011859T3 (lv)
LV (1) LV13871B (lv)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101650328B1 (ko) * 2014-09-26 2016-08-23 재단법인 발효미생물산업진흥원 바이오제닉 아민 분해 활성 및 유해 미생물에 대한 항균 활성이 있는 페디오코커스 펜토사세우스 균주 및 이의 용도
EP3103879B1 (en) 2015-06-09 2017-06-21 Latvijas Universitate Extracellular fructans producing acetic acid bacterial strain gluconobacter nephelii p1464
KR102001994B1 (ko) * 2018-06-20 2019-07-19 재단법인 발효미생물산업진흥원 면역 활성, 항바이러스 활성 및 프로바이오틱스 특성을 갖는 페디오코커스 펜토사세우스 srcm102736 균주 및 이의 용도
CN110408663B (zh) * 2019-08-01 2021-04-06 浙江一鸣食品股份有限公司 一种高产胞外多糖的乳酸菌及制备方法和应用
CN114437990B (zh) * 2022-03-07 2024-02-20 中粮麦芽（大连）有限公司 戊糖片球菌、菌剂及其应用以及制备低血糖生成指数食品的方法
CN117106666A (zh) * 2023-09-25 2023-11-24 贵州大学 戊糖片球菌ll-07、戊糖片球菌ll-07胞外多糖及其生产方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
DK2011859T3 (da) 2010-06-28
DE602007005792D1 (de) 2010-05-20
ATE463556T1 (de) 2010-04-15
EP2011859A1 (en) 2009-01-07
EP2011859B1 (en) 2010-04-07
LV13871A (lv) 2009-02-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100911115B1 (ko) 내산성, 내담즙산성 및 항균 효과를 가진 신규한 유산균 및 이를 포함하는 조성물
CN100455203C (zh) 包含至少两种能定居在胃肠道中以及具有肠存活特性,肠结合特性,感染保护特性和纤维发酵特性的乳酸菌株的益生菌组合物
EP2568815B1 (en) Synergistic fermentation of lactobacillus rhamnosus and lactobacillus paracasei subsp paracasei
CN103857297A (zh) 水果饮料中的益生菌
CA2811390C (en) Method of production of fermented, pro-healthy, cereal beverages
KR20080109585A (ko) 내산성, 내담즙산성, 내염성 및 항균 효과를 가진 신규한식물성 유산균 및 이를 포함하는 조성물
Tambekar et al. Acid and bile tolerance, antibacterial activity, antibiotic resistance and bacteriocins activity of probiotic Lactobacillus species
CN115340965A (zh) 一株副干酪乳酪杆菌pc724及其应用
LV13871B (lv) Pediococcus pentosaceus laktozes pozitīvais celms un tā sintezētais fruktānus saturošais eksopolisaharīdu komplekss
Ashraf et al. In-vitro screening of locally isolated lactobacillus species for probiotic properties.
CN111635875A (zh) 一种长双歧杆菌cz70及其制备活菌型黑莓果浆的方法
EP2041263A1 (en) Method and medium for preserving lactic acid bacteria in a viable state
Rayes Enhancement of probiotic bioactivity by some prebiotics to produce bio-fermented milk
CN112804880A (zh) 在环境温度时稳定的新食品
JP4794592B2 (ja) 新規乳酸菌
CA2383021C (en) Cereal .beta. glucan - probiotic compositions
Pophaly et al. Functional Starter Cultures for Fermented Dairy Products
KR101871904B1 (ko) 류코노스톡 메센테로이데스 ｙｓｍ１２１９ 균주 및 이의 용도
El Bashiti Production of Yogurt by locally isolated starters: Streptococcus thermophilus and Lactobacillus bulgaricus
WO2022185419A1 (ja) 新規乳酸菌株、及び新規乳酸菌株を含有する組成物
Kiti et al. Antagonistic activity of isolated lactic acid bacteria from Pliek U against gram-negative bacteria Escherichia coli ATCC 25922
JP2003047462A (ja) ケフィア粒から分離したラクトコッカス属乳酸菌とそれを用いた食品の製造法
Varga-Visi et al. How to maintain the effective levels of probiotics throughout the shelf life in yoghurt: a review.
Worku et al. The Role of Starter Culture in Producing Probiotic Yoghurt: Significance for Human Health—A Review
Nawaz et al. Exopolysaccharide production and lipolytic activity of promising Lactic acid bacteria isolated from traditional artisan curds of Karnataka for quality yoghurt preparation