CN114703103B - 一株嗜热链球菌菌株wgy001，其复合菌株及其应用 - Google Patents
一株嗜热链球菌菌株wgy001，其复合菌株及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114703103B CN114703103B CN202210432105.9A CN202210432105A CN114703103B CN 114703103 B CN114703103 B CN 114703103B CN 202210432105 A CN202210432105 A CN 202210432105A CN 114703103 B CN114703103 B CN 114703103B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- strain
- streptococcus thermophilus
- wgy001
- lsr
- lactobacillus delbrueckii
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 title claims abstract description 43
- 239000002131 composite material Substances 0.000 title claims abstract description 12
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 31
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 31
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 claims abstract description 25
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 claims abstract description 20
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 14
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 claims description 7
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 claims description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 4
- 241000186672 Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus Species 0.000 claims 3
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 23
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 21
- 238000003860 storage Methods 0.000 abstract description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 6
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 abstract description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 28
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 16
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 16
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 15
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 description 12
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 12
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 12
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 11
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 11
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 8
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 7
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 6
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 4
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N phenolphthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2C(=O)O1 KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 3
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 description 3
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 3
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 3
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 229940040526 anhydrous sodium acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 235000010855 food raising agent Nutrition 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 108020002230 Pancreatic Ribonuclease Proteins 0.000 description 1
- 102000005891 Pancreatic ribonuclease Human genes 0.000 description 1
- 241000194024 Streptococcus salivarius Species 0.000 description 1
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 235000013527 bean curd Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 230000009982 effect on human Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 238000012257 pre-denaturation Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- OARRHUQTFTUEOS-UHFFFAOYSA-N safranin Chemical compound [Cl-].C=12C=C(N)C(C)=CC2=NC2=CC(C)=C(N)C=C2[N+]=1C1=CC=CC=C1 OARRHUQTFTUEOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019614 sour taste Nutrition 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 235000015193 tomato juice Nutrition 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001393 triammonium citrate Substances 0.000 description 1
- 235000011046 triammonium citrate Nutrition 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 238000005491 wire drawing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1238—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt using specific L. bulgaricus or S. thermophilus microorganisms; using entrapped or encapsulated yoghurt bacteria; Physical or chemical treatment of L. bulgaricus or S. thermophilus cultures; Fermentation only with L. bulgaricus or only with S. thermophilus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/137—Delbrueckii
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
- A23V2400/249—Thermophilus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Dairy Products (AREA)
Abstract
本发明提供一株嗜热链球菌菌株WGY001及其应用，其特征在于，所述菌株保藏编号为CGMCC No.21846，本发明还提供一种复合发酵菌种及其应用，所述复合发酵菌种含有所述的嗜热链球菌WGY001及德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR‑L‑L11，所述德氏乳杆菌保加利亚菌株保藏编号为CGMCC No.14755。本发明菌株嗜热链球菌WGY001及复合发酵菌种可有效解决现有活菌型发酵乳制品在储存、运输及销售过程中受冷链要求限制导致产品后酸上升快等问题，使酸奶在28℃条件下保存21天后滴定酸度保持在90°T以下。同时有效降低活菌型发酵乳制品在储存、运输及销售过程中因冷链保护所带来的高昂成本。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株嗜热链球菌菌株 WGY001，其复合菌株及其在生产开发活菌型常温酸奶中的应用。
背景技术
乳制品是除母乳外，营养最为全面的食品，他在人们膳食结构中有着其他食品无法代替的地位和作用，而发酵是人类用于延长乳制品保存时间的最古老方法之一，虽然没有酸奶起源的详细记载，酸奶源于久远的过去并对人类营养和健康产生了深远影响是毋庸置疑的。酸奶是乳制品中的重要部分，因其风味独特、营养价值高以及对人体健康有特殊的作用，从而倍受人们青睐。
酸奶是含活菌的乳制品，正常发酵结束后，为保证产品在贮存、运输、销售、食用过程中因产品中乳酸菌继续生长繁殖导致的后酸化使产品感官质量下降问题，在酸奶制品的贮存、运输及销售过程中均需使用冷链运输。这极大地增加了企业的成本，同时也不利于环境的保护。因此，筛选开发活菌型的常温酸奶对于产品货架期、产品贮存、运输、销售环节具有重要意义。
发明内容
针对现有技术存在的上述问题，本发明的目的是提供一株嗜热链球菌菌株LSE-202002AE320011-WGY001，其复合菌株及其在生产开发活菌型常温酸奶中的应用，使酸奶在28℃条件下保存21天后滴定酸度保持在90°T以下。
为实现上述目的，本发明所述的应用于活菌型常温酸奶开发的一 株嗜热链球菌LSE-202002AE320011-WGY001的筛选方法为：采集乳 扇制作过程中的乳扇，用MRS、TJA液体培养基富集培养，然后通 过平板划线的方法对菌株进行分离纯化，得到不同菌株的纯培养物， 并对分离纯化菌株进行滴定酸度、粘度、胞外多糖产量等特性测定， 最后得到一株低后酸球菌LSE-202002AE320011-WGY001(简称菌株 WGY001)，菌株保藏编号为CGMCCNo.21846，其分类命名为：嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)，于2021年3月1日保藏于中 国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位简称： CGMCC，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科 学院微生物研究所。将获得的菌株进行16SrRNA鉴定，最终鉴定结 果表明菌株WGY001为嗜热链球菌，其16S rRNA基因序列如SEQ IDNo.1所示。
本发明还从毛豆腐卤水中分离得到一株德氏乳杆菌保加利亚(Lactobacillusdelbrueckii subsp.bulgaricus)菌株LSR-L-L11，所述德氏乳杆菌保加利亚菌株保藏编号为CGMCC No.14755，于2017年9 月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位简称：CGMCC，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。本发明中德氏乳杆菌保加利亚菌株 LSR-L-L11在10％脱脂乳培养基中，38℃发酵18h胞外多糖产量为 120-150mg/L。
本发明还提供一种复合发酵菌种，所述复合发酵菌种含有所述的嗜热链球菌WGY001及德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii subsp)菌株LSR-L-L11。
优选地，所述嗜热链球菌菌株WGY001与德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11的比例为9～19∶1。
优选地，所述嗜热链球菌菌株WGY001与德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11的比例为19∶1，所获得的酸奶产品在28℃条件下保存21天滴定酸度低于90°T。
本发明还提供将嗜热链球菌菌株WGY001在生产活菌型常温酸奶中的应用。
本发明还提供将所述的复合发酵菌种在生产活菌型常温酸奶中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果有：
1、本发明菌株嗜热链球菌LSE-202002AE320011-WGY001于38 ℃条件下发酵4h后凝乳，发酵120h滴定酸度为92°T。德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11于38℃条件下发酵8h后凝乳，发酵120h滴定酸度为150°T。
2、本发明中德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11在10％脱脂乳培养基中，38℃发酵18h胞外多糖产量为120-150mg/L。
3、嗜热链球菌LSE-202002AE320011-WGY001与德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11产香好、酸味柔和、粘度高。组合后发酵产品在 28℃条件下保存21天滴定酸度低于90°T。
4、本发明可有效解决现有活菌型发酵乳制品在储存、运输及销售过程中受冷链要求限制导致产品后酸上升快等问题。与此同时，该方法可有效降低活菌型发酵乳制品在储存、运输及销售过程中因冷链保护所带来的高昂成本。
附图说明
图1为嗜热链球菌LSE-202002AE320011-WGY001经革兰氏染色后的显微图片。
图2为嗜热链球菌QMQ004经革兰氏染色后的显微图片。
图3为不同温度对嗜热链球菌LSE-202002AE320011-WGY001生长情况的影响。
图4为不同温度对德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11生长情况的影响。
图5为不同温度对嗜热链球菌QMQ004生长情况的影响。
图6为嗜热链球菌LSE-202002AE320011-WGY001、QMQ004和德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11于38℃条件下，在10％脱脂乳中发酵120h滴定酸度变化情况。
图7为嗜热链球菌QMQ004与德氏乳杆菌保加利亚菌株 LSR-L-L11以不同比例发酵酸奶基料在28℃保存条件下滴定酸度变化情况。
图8为嗜热链球菌LSE-202002AE320011-WGY001与德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11以不同比例发酵酸奶基料在28℃保存条件下滴定酸度变化情况。
图9为嗜热链球菌LSE-202002AE320011-WGY001与德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11发酵产品与常规使用的搅拌型菌株发酵酸奶基料在28℃保存条件下滴定酸度对比。
具体实施方式
下面结合实施例，进一步阐述本发明，但不限于实施例。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
一种常温型活菌酸奶的菌株分离以及制作，所述方法是用MRS 及TJA两种培养基分离纯化乳扇乳扇中的乳酸菌，具体包括下述步骤：
(1)制作MRS液体培养基：具体方法为向1000mL水中加入20g 葡萄糖、10g酪蛋白质胨、10g牛肉浸膏、5g酵母浸粉、5g无水乙酸钠、2g柠檬酸三铵、2g磷酸氢二钾、1mL吐温-80、0.25g硫酸锰及 0.58g硫酸镁，硫酸镁及硫酸锰分开溶解后与其余成分混合，调节pH 值6.4±0.2，121℃灭菌15min，备用。MRS固体培养基配制方法为向 MRS培养基中添加1.5％(质量体积比)琼脂。
(2)制作TJA液体培养基：50mL番茄汁，5g酵母浸粉，10g 牛肉浸膏，20g乳糖，2g葡萄糖，2g磷酸氢二钾，1mL吐温-80，5g 无水乙酸钠，纯净水定容到1000mL，调节pH值6.8±0.2，121℃灭菌 15min，备用。TJA固体培养基配制方法为向TJA培养基中添加1.5％(质量体积比)琼脂。
(3)按5％的接种量将采集获得的乳扇制作过程中的乳扇接种于MRS和TJA液体培养基中进行富集，38℃培养18h。用接种环挑取富集液在MRS和TJA固体培养基上划线，在38℃下培养48h。用接种环挑取样品在MRS和TJA固体培养基上划线，在38℃下培养 48h。
(4)挑取单菌落，接种于MRS和TJA液体培养基中，38℃培养 18h。用接种环挑取富集液在MRS和TJA固体培养基上划线，38℃培养48h，重复上述操作直到获得纯培养菌株为止。
(5)对纯培养的菌株进行革兰氏染色，舍弃革兰氏阴性菌，保留革兰氏阳性菌。
革兰氏染色方法：取菌液常规涂片、干燥、固定；滴加结晶紫(以刚好将菌膜覆盖为宜)染色1-2min，水洗；用碘液冲去残水，并用碘液覆盖1min，水洗；用滤纸吸去玻片上的残水，将玻片倾斜，在白色背景下，用滴管流加95％的乙醇脱色，直至流出的乙醇无紫色时，立即水洗；用番红液复染2min，水洗；干燥后，用油镜观察。
(6)将获得的纯培养菌株革兰氏阳性菌株分别转移至MRS和 TJA斜面培养基中，于4℃条件下保藏。
实施例2
一种常温型活菌酸奶的菌株分离以及制作，所述方法是通过分子生物学方法鉴定分离菌株，具体包括下述步骤：
(1)制作MRS和TJA液体和固体培养基：同实施例1。
(2)纯培养菌株接种至MRS和TJA液体培养基中，38℃静置培养18h，充分活化。
(3)基因组DNA提取：①取活化好的菌液1mL加入1.5mL离心管中，室温8000rpm离心1min，弃上清，收集菌体。②加入100μL Buffer Digestion和80μL溶菌酶溶液重悬菌液，37℃水浴30min。③加入20μL Proteinase K溶液，震荡混匀。56℃水浴30min至细胞完全裂解。④水浴后加入20μL的RNase A(10mg/ml)，室温放置2-5min。⑤加入200μL Buffer BD，充分颠倒混匀，70℃水浴10min。⑥加入 200μL的无水乙醇，充分颠倒混匀。⑦将吸附柱放入收集管中，用移液器将溶液和半透明纤维状悬浮物全部加入吸附柱中，静置2min，再12000rpm室温离心1min，倒掉收集管中的废液。将吸附柱放回收集管，加入500μL PW Solution，10000rpm离心30s倒掉滤液。将吸附柱放回收集管，加入500μL Wash Solution，10000rpm离心30s倒掉滤液。将吸附柱放回收集管，于12000rpm室温离心2min，离去残留的 WashSolution。取出吸附柱，放入一个新的1.5mL离心管中，加入 50-100μL CE Buffer静置3min，12000rpm室温离心2min，收集DNA 溶液，放-20℃保存。
(4)16S rRNA片段扩增：在无菌结净的PCR管中配制反应溶液。
表1 50μLPCR反应体系
轻轻混匀后短暂离心，置于PCR仪中进行反应。PCR反应条件为：94℃预变性5min，94℃变性1min，55℃退火1min，72℃延伸 1.5min，循环结束后72℃延伸10min。反应完成后，将样品置于-20 ℃保存，并将样品送于华大基因进行测序鉴定。
表2球菌测序结果
| 菌株编号 | 测序鉴定结果 |
| QMQ001 | 乳酸乳球菌 |
| QMQ002 | 嗜热链球菌 |
| QMQ003 | 乳酸乳球菌 |
| QMQ004 | 嗜热链球菌 |
| LSE-202002AE320011-WGY001 | 嗜热链球菌 |
| WGY002 | 乳酸乳球菌 |
| WGY003 | 嗜热链球菌 |
| WGY004 | 唾液链球菌 |
实施例3
一种常温型活菌酸奶的菌株分离以及制作，所述方法是通过发酵脱脂乳来筛选低后酸的菌株，具体包括下述步骤：
(1)制作MRS液体培养基：同实施例1。
(2)制作TJA液体培养基：同实施例1。
(3)10％脱脂乳的配制：10g脱脂奶粉溶于90g 50℃水中，根据实验所需要的10％脱脂乳的量称取所需量的脱脂奶粉溶于所需量的 50℃水中，待奶粉全部溶化后，115℃灭菌15min，冷却至38℃后备用。
(4)将保存好的纯菌株取出，用MRS培养基和TJA培养基使其充分活化，按2％接种量接种于10％脱脂乳中，38℃发酵24h。取出测定其酸度。
(5)滴定酸度测定方法为：准确称取相应时间段发酵基料10.0 g，加入20mL水，摇匀后加入2mL酚酞指示剂，以1.0mol/L氢氧化钠进行滴定，记录消耗氢氧化钠体积。滴定酸度(°T)＝消耗氢氧化钠体积(mL)×10。
表3分离出的菌株24h酸度结果
根据后酸结果选取LSE-202002AE320011-WGY001和QMQ004与现有菌株LSR-L-L11进行后续的试验。
LSE-202002AE320011-WGY001在TJA固体培养基上的菌落为乳白色、湿润光滑、不透明，为革兰氏染色阳性菌，显微镜观察结果为链状球菌，革兰氏染色镜检照片见图1。
QMQ004的菌落在MRS固体培养基上的菌落为乳白色、不透明小圆点，为革兰氏染色阳性菌，显微镜观察结果为短链球，QMQ004 革兰氏染色镜检照片见图2。
LSE-202002AE320011-WGY001和QMQ004两株菌株为嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)，LSE-202002AE320011-WGY001 16S rRNA序列如SEQ ID No.1所示。
实施例4
一种常温型活菌酸奶的菌株分离以及制作，所述方法是测定两株菌株嗜热链球菌LSE-202002AE320011-WGY001和QMQ004以及德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11的发酵性能，具体包括下述步骤：
(1)制作MRS和TJA液体和固体培养基：同实施例1。
(2)活化LSE-202002AE320011-WGY001、QMQ004和LSR-L-L11：吸取甘油管保存的菌液50μL，按体积比为2％的接种量接种至MRS 和TJA液体培养基中，38℃静置培养18h。
(3)10％脱脂乳的配制：10g脱脂奶粉溶于90g 50℃水中，根据实验所需要的10％脱脂乳的量称取所需量的脱脂奶粉溶于所需量的50℃水中，待奶粉全部溶化后，115℃灭菌15min，冷却至38℃后备用。
(4)以300μL的样品量为基准按2％接种量接于样品孔中，加样完毕后放入生长曲线仪，分别测定不同温度下(32℃、38℃、42℃)两株菌株的生长曲线，培养时间为24h。
(5)酸度曲线测定：分别测定发酵0h、2h、4h、6h、8h、10h、 12h、24h、48h、72h、96h、120h时的滴定酸度。按步骤(1)、(2)、(3)准备LSE-202002AE320011-WGY001和LSR-L-L11和10％脱脂奶乳，按2％接种量将活化好的菌液接入10％脱脂乳中于38℃发酵。滴定酸度测定方法为：准确称取相应时间段发酵基料10.0g，加入20mL水，摇匀后加入2mL酚酞指示剂，以1.0mol/L氢氧化钠进行滴定，记录消耗氢氧化钠体积。滴定酸度(°T)＝消耗氢氧化钠体积(mL)×10。
三株菌株生长曲线结果如图3、图4和图5所示。LSR-L-L11在 38℃时OD值最高，即最适生长温度为38℃； LSE-202002AE320011-WGY001在32℃和38℃时都能达到最大OD值，但32℃延滞期较长，所以其最适生长温度为38℃；QMQ004在38 ℃和42℃发酵前6h生长速率无显著性差异，发酵6h后，38℃条件下生长速率优于42℃发酵条件下生长速率。32℃条件下发酵最大OD 值与在38℃和42℃条件下发酵无显著性差别，但是此条件下发酵延滞期较长，所以其最适生长温度为38℃。
38℃时LSE-202002AE320011-WGY001、QMQ004和LSR-L-L11 在10％脱脂乳中发酵120h的产酸曲线结果见图6。LSR-L-L11发酵8h 左右凝乳，凝乳时滴定酸度为60°T，发酵120h时滴定酸度为150°T； LSE-202002AE320011-WGY001发酵4h左右凝乳，凝乳时滴定酸度为 50°T，发酵120h时滴定酸度为92°T；QMQ004发酵2h开始出现凝乳现象，4h完全凝乳，酸度为65°T，发酵120h时滴定酸度为88°T。
实施例5
一种常温型活菌酸奶的菌株分离以及制作，所述方法是测定德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11的胞外多糖产量，具体包括下述步骤：
胞外多糖在酸奶中可以改善酸奶常出现的凝胶易断裂，粘稠度低，乳扇易于析出等质量问题，发酵好的酸奶粘稠度与胞外多糖的含量成正相关，LSR-L-L11转接的奶管能看到明显的拉丝状态所以测其胞外多糖的含量。
(1)制作MRS和TJA液体和固体培养基：同实施例1。
(2)活化LSR-L-L11：同实施例4。
(3)10％的脱脂乳配制：同实施例3。
(4)按2％的接种量接种于含10％的脱脂乳中，38℃培养18h取出测定其胞外多糖含量。胞外多糖含量的测定方法如下：将发酵好的样品经100℃水浴加热15min，冷却，以失活降解多糖的酶，加入 80g/100mL三氯乙酸至终质量浓度为4g/100mL，4℃恒温静置18h，后离心(12000rpm，20min，4℃)，去除沉淀蛋白和菌体，上清液添加 95％乙醇至终浓度为75％，摇匀，4℃静置22h，离心(12000rpm，20min， 4℃)，沉淀用去离子水溶解，所得的溶液使用3500MW透析袋进行透析，每天换一次水，共透析3天。透析完成后，冷冻干燥所得样品。
LSR-L-L11用10％脱脂乳在38℃下培养18h后，发酵液胞外多糖含量测定结果为138.9mg/L。
实施例6
一种常温型活菌酸奶的菌株分离以及制作，所述方法是测定不同比例组合两株菌株嗜热链球菌LSE-202002AE320011-WGY001、 QMQ004和德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11在脱脂乳中发酵成工作发酵剂发酵产品的后酸对比，具体包括下述步骤：
(1)制作MRS和TJA液体和固体培养基：同实施例1。
(2)活化LSE-202002AE320011-WGY001、QMQ004和LSR-L-L11：同实施例4。
(3)10％脱脂乳的配制：同实施例3。
(4)基料配制：称取相应的辅料、糖、牛奶，牛奶加热到60℃备用，搅拌机中放入辅料和糖，加入60℃的牛奶，开启搅拌混合10 分钟，搅拌完毕后与剩余牛奶混合，定容到所需的量，在20MPa条件下进行均质，然后分装在玻璃瓶中，进行水浴杀菌，水沸后开始计时，半小时后拿出冷却备用。
(5)将活化好的LSE-202002AE320011-WGY001、QMQ004和 LSR-L-L11，按体积比为2％的接种量接种至10％的脱脂奶管中，38 ℃下静置培养18h。脱脂奶瓶按接种量1％(其中LSE-202002AE320011-WGY001：LSR-L-L11和QMQ004：LSR-L-L11 的比例为1∶1、9∶1、19∶1)接种在10％脱脂奶瓶中，38℃下静置培养8h，4℃后熟后作为酸奶生产发酵剂。
(6)步骤4中基料加热到40℃，按1％接种量接入步骤5中制备的工作发酵剂，放入38℃温箱发酵6h，发酵结束后破乳冷却，放入冰箱后熟。后熟后放入28℃的恒温箱测其21天的后酸，滴定酸度方法同实施例2。
表4成品粘度
28℃恒温保存21天后酸情况见图7、图8，QMQ004：LSR-L-L11 的比例为1∶1时后酸为142°T，9∶1时后酸为117°T，19∶1后酸为110°T。 LSE-202002AE320011-WGY001：LSR-L-L11的比例为1∶1时后酸为 108°T，9∶1时后酸为94°T，19∶1后酸为80°T。
实验结果表明，QMQ004：LSR-L-L11组合后不管是何种比例后酸都高于LSE-202002AE320011-WGY001：LSR-L-L11组合，随着球杆比增大成品的粘度是在下降的，为了保证成品粘度，满足后酸低于90°T 的要求所以选取LSE-202002AE320011-WGY001：LSR-L-L11比例为 19∶1的组合作为生产发酵剂。
实施例7
一种常温型活菌酸奶的菌株分离以及制作，所述方法是测定两株菌株嗜热链球菌LSE-202002AE320011-WGY001和德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11以19∶1组合后做发酵工作发酵剂，用此工作发酵剂发酵基料的后酸变化情况，具体包括下述步骤：
(1)制作MRS和TJA液体和固体培养基：同实施例1。
(2)活化LSE-202002AE320011-WGY001和LSR-L-L11：同实施例4。
(3)基料制作：同实施例6步骤(4)。
(4)制作工作发酵剂：工作发酵剂一同实施例6中步骤(5)，工作发酵剂二为常规使用的搅拌型菌株。
(5)将步骤(3)中的基料加热到40℃，按1％接种量接入步骤(4)中的工作发酵剂，38℃发酵6h，发酵结束后破乳冷却，于4℃温度下后熟。后熟后放入28℃的恒温箱测其21天的后酸，滴定酸度方法同实施例4。
28℃恒温保存21天后酸情况见图7，常规使用的搅拌型菌株发酵的酸奶后酸在第四天超过了100°T，最高后酸为120°T， LSE-202002AE320011-WGY001与LSR-L-L11后酸保持在90°T以下。
序列表
<110> 云南皇氏来思尔乳业有限公司
<120> 一株嗜热链球菌菌株WGY001，其复合菌株及其应用
<130> 2022
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1496
<212> DNA
<213> Streptococcus thermophilus
<400> 1
gagtttggat cctggctcag gacgaacgct ggcggcgtgc taatacatgc aagtagaacg 60
ctgaagagag gagcttgctc ttcttggatg agttgcgaac gggtgagtaa cgcgtaggta 120
acctgccttg tagcggggga taactattgg aaacgatagc taataccgca taacaatgga 180
tgacacatgt catttatttg aaaggggcaa ttgttccact acaagatgga cctgcgttgt 240
attagctagt aggtgaggta atggctcacc taggcgacga tacatagccg acctgagagg 300
gtgatcggcc acactgggac tgagacacgg cccagactcc tacgggaggc agcagtaggg 360
aatcttcggc aatgggggca accctgaccg agcaacgccg cgtgagtgaa gaaggttttc 420
ggatcgtaaa gctctgttgt aagtcaagaa cgggtgtgag agtggaaagt tcacactgtg 480
acggtagctt accagaaagg gacggctaac tacgtgccag cagccgcggt aatacgtagg 540
tcccgagcgt tgtccggatt tattgggcgt aaagcgagcg caggcggttt gataagtctg 600
aagttaaagg ctgtggctca accatagttc gctttggaaa ctgtcaaact tgagtgcaga 660
aggggagagt ggaattccat gtgtagcggt gaaatgcgta gatatatgga ggaacaccgg 720
tggcgaaagc ggctctctgg tctgtaactg acgctgaggc tcgaaagcgt ggggagcgaa 780
caggattaga taccctggta gtccacgccg taaacgatga gtgctaggtg ttggatcctt 840
tccgggattc agtgccgcag ctaacgcatt aagcactccg cctggggagt acgaccgcaa 900
ggttgaaact caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg gtggagcatg tggtttaatt 960
cgaagcaacg cgaagaacct taccaggtct tgacatcccg atgctatttc tagagataga 1020
aagttacttc ggtacatcgg tgacaggtgg tgcatggttg tcgtcagctc gtgtcgtgag 1080
atgttgggtt aagtcccgca acgagcgcaa cccctattgt tagttgccat cattcagttg 1140
ggcactctag cgagactgcc ggtaataaac cggaggaagg tggggatgac gtcaaatcat 1200
catgcccctt atgacctggg ctacacacgt gctacaatgg ttggtacaac gagttgcgag 1260
tcggtgacgg cgagctaatc tcttaaagcc aatctcagtt cggattgtag gctgcaactc 1320
gcctacatga agtcggaatc gctagtaatc gcggatcagc acgccgcggt gaatacgttc 1380
ccgggccttg tacacaccgc ccgtcacacc acgagagttt gtaacacccg aagtcggtga 1440
ggtaaccttt tggagccagc cgcctaagtg ggacagatga ttggggtgaa gtcgac 1496
Claims (7)
1.一株嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)菌株WGY001，其特征在于，所述菌株保藏编号为CGMCC No.21846。
2.如权利要求1所述的一株嗜热链球菌菌株WGY001，其特征在于，所述菌株16S rRNA基因序列如SEQ ID No.1所示。
3.一种复合发酵菌种，其特征在于，所述复合发酵菌种含有权利要求1或2所述的嗜热链球菌WGY001及德氏乳杆菌保加利亚(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)菌株LSR-L-L11，所述德氏乳杆菌保加利亚菌株保藏编号为CGMCC No.14755。
4.如权利要求3所述的一种复合发酵菌种，其特征在于，所述嗜热链球菌菌株WGY001与德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11的比例为9～19∶1。
5.如权利要求4所述的一种复合发酵菌种，其特征在于，所述嗜热链球菌菌株WGY001与德氏乳杆菌保加利亚菌株LSR-L-L11的比例为19∶1。
6.如权利要求1或2所述的嗜热链球菌菌株WGY001在生产活菌型常温酸奶中的应用。
7.如权利要求3～5任一项所述的复合发酵菌种在生产活菌型常温酸奶中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210432105.9A CN114703103B (zh) | 2022-04-22 | 2022-04-22 | 一株嗜热链球菌菌株wgy001，其复合菌株及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210432105.9A CN114703103B (zh) | 2022-04-22 | 2022-04-22 | 一株嗜热链球菌菌株wgy001，其复合菌株及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114703103A CN114703103A (zh) | 2022-07-05 |
| CN114703103B true CN114703103B (zh) | 2024-04-26 |
Family
ID=82174887
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210432105.9A Active CN114703103B (zh) | 2022-04-22 | 2022-04-22 | 一株嗜热链球菌菌株wgy001，其复合菌株及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114703103B (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103609691A (zh) * | 2013-05-20 | 2014-03-05 | 北京三元食品股份有限公司 | 一种发酵乳的制备方法 |
| CN104254600A (zh) * | 2012-04-25 | 2014-12-31 | 科.汉森有限公司 | 乳酸菌用于制造具有增强的天然甜度的发酵食品的用途 |
| CN110358712A (zh) * | 2019-07-26 | 2019-10-22 | 浙江一鸣食品股份有限公司 | 一种乳酸菌组合物及其应用 |
| CN110408663A (zh) * | 2019-08-01 | 2019-11-05 | 浙江一鸣食品股份有限公司 | 一种高产胞外多糖的乳酸菌及制备方法和应用 |
| CN110537575A (zh) * | 2019-07-17 | 2019-12-06 | 石家庄君乐宝乳业有限公司 | 弱后酸酸奶复合发酵剂的制备方法、其应用，及相应的酸奶 |
| CN112262888A (zh) * | 2020-09-11 | 2021-01-26 | 云南皇氏来思尔乳业有限公司 | 一种制备酸奶的菌酶协同发酵剂 |
-
2022
- 2022-04-22 CN CN202210432105.9A patent/CN114703103B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104254600A (zh) * | 2012-04-25 | 2014-12-31 | 科.汉森有限公司 | 乳酸菌用于制造具有增强的天然甜度的发酵食品的用途 |
| CN103609691A (zh) * | 2013-05-20 | 2014-03-05 | 北京三元食品股份有限公司 | 一种发酵乳的制备方法 |
| CN110537575A (zh) * | 2019-07-17 | 2019-12-06 | 石家庄君乐宝乳业有限公司 | 弱后酸酸奶复合发酵剂的制备方法、其应用，及相应的酸奶 |
| CN110358712A (zh) * | 2019-07-26 | 2019-10-22 | 浙江一鸣食品股份有限公司 | 一种乳酸菌组合物及其应用 |
| CN110408663A (zh) * | 2019-08-01 | 2019-11-05 | 浙江一鸣食品股份有限公司 | 一种高产胞外多糖的乳酸菌及制备方法和应用 |
| CN112262888A (zh) * | 2020-09-11 | 2021-01-26 | 云南皇氏来思尔乳业有限公司 | 一种制备酸奶的菌酶协同发酵剂 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| "引起酸奶制品发生后酸化的主要发酵剂菌及性质";郭清泉等;《食品与机械》(第87期);第 14-15页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114703103A (zh) | 2022-07-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20230413837A1 (en) | Streptococcus thermophilus producing gamma-aminobutyric acid and application thereof | |
| JP4772131B2 (ja) | 新規乳酸菌を用いた発酵乳の製造方法 | |
| JP4862053B2 (ja) | 新規乳酸菌 | |
| CN107988106B (zh) | 一种酸奶发酵剂、其制备方法及应用 | |
| CN109536406B (zh) | 弱后酸化的嗜热链球菌jmcc16、分离纯化方法及应用 | |
| CN111575207B (zh) | 一株分离自酸牦牛奶的副干酪乳杆菌及其应用 | |
| CN112852684B (zh) | 一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388及其应用 | |
| CN110106119B (zh) | 一株分离自母乳的鼠李糖乳杆菌m9及其应用 | |
| CN108004167B (zh) | 一株产胞外多糖的嗜热链球菌jmcc0019、其分离纯化方法及应用 | |
| WO2020083119A1 (zh) | 一种哈尔滨乳杆菌及其应用 | |
| CN110537575A (zh) | 弱后酸酸奶复合发酵剂的制备方法、其应用，及相应的酸奶 | |
| Guzel-Seydim et al. | Kefir and koumiss: microbiology and technology | |
| CN107058161B (zh) | 具有抗氧化功能的高加索酸奶乳杆菌jmcc0101、其筛选方法及应用 | |
| CN116814481B (zh) | 一株源自酸马奶的益生副干酪乳酪杆菌pc646及其人工智能筛选方法 | |
| CN112442464B (zh) | 耐氧化胁迫的短双歧杆菌grx201及其应用 | |
| CN116286468A (zh) | 一株具有抗氧化功能的发酵粘液乳杆菌lf-onlly及其在发酵食品中的应用 | |
| CN104911134A (zh) | 一种肠膜明串珠菌及其在干酪生产中的应用 | |
| CN115261264A (zh) | 一株副干酪乳酪杆菌pc804及其应用 | |
| CN107927168B (zh) | 一种含有开菲尔乳杆菌的发酵乳及其制备方法 | |
| JPH0468908B2 (zh) | ||
| CN109504636B (zh) | 一种植物乳杆菌p12及其用途 | |
| CN110484477B (zh) | 一株德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株及其应用 | |
| CN114703103B (zh) | 一株嗜热链球菌菌株wgy001，其复合菌株及其应用 | |
| CN115820512A (zh) | 一株嗜热链球菌菌株EuAS-D-S6及其应用 | |
| CN109810917B (zh) | 唾液乳杆菌及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Country or region after: China Address after: 671003 Dali Town Food Industrial Park, Dali City, Dali Bai Autonomous Prefecture, Yunnan Province Applicant after: Dali laisier Dairy Co.,Ltd. Address before: 671000 Dali Town Food Industrial Park, Dali City, Dali Bai Autonomous Prefecture, Yunnan Province Applicant before: YUNNAN HUANGSHI LESSON DAIRY INDUSTRY Co.,Ltd. Country or region before: China |
|
| CB02 | Change of applicant information | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20240328 Address after: 671003 Dali Town Food Industrial Park, Dali City, Dali Bai Autonomous Prefecture, Yunnan Province Applicant after: Dali laisier Dairy Co.,Ltd. Country or region after: China Applicant after: Yunnan Laisi'er Dairy Co.,Ltd. Address before: 671003 Dali Town Food Industrial Park, Dali City, Dali Bai Autonomous Prefecture, Yunnan Province Applicant before: Dali laisier Dairy Co.,Ltd. Country or region before: China |
|
| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |