CN110357984A - 伏牛山鸡头黄精多糖的提取及制备固体饮料的方法 - Google Patents

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Abstract

伏牛山鸡头黄精多糖的提取方法，包括以下步骤，（1）伏牛山鸡头黄精粗多糖的制备；（2）蛋白去除处理；（3）脱色处理；（4）小分子去除处理；（5）将已除去小分子的粗多糖溶液加无水乙醇并调节乙醇浓度为75%，3℃静置过夜，在8500r/min的转速下离心20min，收集沉淀，得到优化后伏牛山鸡头黄精多糖。本发明具有操作方法简单，便于工业化批量生产，提高伏牛山鸡头黄精多糖的提取含量及纯度，产品质量大大提高，用该多糖制备固体饮料，有助于提高伏牛山鸡头黄精的经济价值。

Description

伏牛山鸡头黄精多糖的提取及制备固体饮料的方法
技术领域
本发明属于天然药用植物提取有效成分技术领域，具体涉及一种伏牛山鸡头黄精多糖的提取及制备固体饮料的方法。
背景技术
《本草纲目》记载，黄精可＂补诸虚、止寒热、填精髓＂，有＂血气双补之王＂美誉，是药食同源性植物之一。根据原植物和药材性状的差异，黄精可分为姜形黄精、鸡头黄精和大黄精三种。鸡头黄精又名鸡头参药名，其叶、花、茎、根均可入药，具有养阴润肺、补脾益气的功能。常用于补气养阴，健脾，润肺，益肾，脾胃气虚，体倦乏力，胃阴不足，口干食少，肺虚燥咳，劳嗽咳血，精血不足，腰膝酸软，须发早白，内热消渴。伏牛山区是我国中草药资源的天然宝库，豫西南地处南北气候过渡带，伏牛山区中草药资源既分享了同类的代表性，有具有自身的特殊性。黄精多糖作为黄精属植物黄精的主要活性成分，其糖类含量、类别、生物学功能受产地影响较大。黄精中小分子糖对正常免疫功能低下小鼠机体免疫功能起到一定的増强作用。正常情况下，小鼠血糖水平不会因黄精多糖而改变和影响，但黄精多糖可降低高血糖小鼠的血糖水平。机体出现感染情况下，黄精多糖具有一定抗菌活性和抗炎作用。黄精多糖不仅能够降低转基因小鼠大脑海马组织中β样淀粉沉积，还能够保护中枢胆碱能神经细胞，能够显著改善转基因小鼠的学习记忆能力。多糖是黄精的主要成分，其含量相对较高，但多糖的含量受环境和疆域的影响比较大。近些年伏牛山鸡头黄精多糖具有显著免疫增强活性和抗衰老、抗辐身等多种功效备受关注。
目前，对伏牛山鸡头黄精多糖的制备方法采用以下步骤：
a. 称取伏牛山鸡头黄精粉末500g，按照液料比1:20加入蒸馏水10L，搅拌混匀；
b. 搅拌液随机分为10等份，每份250W声波辅助提取3次，将3次提取液合并定容至容量瓶中;
c. 将置于容量瓶中超声提取液摇匀，准确量取提取液至离心管中，按照1:5比例加入95%乙醇，摇匀；
d. 4℃冷藏18h，取出后5000 r/min 离心30 min，弃上清留沉淀；
e. 沉淀按照1:5比例加入80%乙醇，洗涤2次；
f. 放置4h后，5000rpm离心20min，收集沉淀，得到伏牛山鸡头黄精粗多糖，冷冻干燥保存。
发明内容
本发明为了解决现有技术中的不足之处，提供一种便于操作、工艺简单、提取多糖纯度高及含量高的伏牛山鸡头黄精多糖的提取及制备固体饮料的方法。
为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：伏牛山鸡头黄精多糖的提取方法，包括以下步骤，
（1）伏牛山鸡头黄精粗多糖的制备；
（2）蛋白去除处理；
（3）脱色处理；
（4）小分子去除处理；
（5）将已除去小分子的粗多糖溶液加无水乙醇并调节乙醇浓度为75%，3℃静置过夜，在8500 r/min的转速下离心20min，收集沉淀，得到优化后伏牛山鸡头黄精多糖。
步骤（1）具体为包括以下工序：
a. 称取伏牛山鸡头黄精粉末500g，按照料液重量比为1:20加入蒸馏水10L，搅拌混匀；
b. 将搅拌液随机分为10等份，采用250W声波对每份搅拌液辅助提取3次，将超声提取液合并定容至容量瓶中；
c. 将置于容量瓶中的超声提取液摇匀，准确量取超声提取液至离心管中，按照体积比为1:5比例加入95%的乙醇，然后摇匀；
d. 将离心管放置在4℃环境下冷藏18h后，取出以转速为5000 r/min 离心30 min，弃上清留沉淀；
e. 沉淀按照重量比为1:5的比例加入80%的乙醇，洗涤2次；
f. 放置4h后，在5000rpm的转速下离心20min，收集沉淀，即得到伏牛山鸡头黄精粗多糖，冷冻干燥保存。
3、根据权利要求1或2所述的伏牛山鸡头黄精多糖的提取方法，其特征在于：步骤（2）包括以下工序，
Ⅰ.先加入蒸馏水溶解伏牛山鸡头黄精粗多糖，按重量比为1:3的比例加入木瓜蛋白酶，接着以37℃的水浴酶解5 h，然后以90℃水浴灭酶，酶解和灭酶过程重复2次；
Ⅱ.酶解和灭酶后加入清除试剂慢速搅拌2 h，在15℃静置10 min，用离心机以转速为10000 r/min 离心15 min，取上层淡黄色上清液，完成伏牛山鸡头黄精粗多糖的蛋白去除处理。
清除试剂采用氯仿和正丁醇的混合溶液，氯仿与正丁醇的体积比为4:1。
步骤（3）具体为包括以下工序：先对已脱蛋白的淡黄色上清液调节pH到8.0，然后在搅拌下加入20%的H2O2，使多糖溶液的浓度达到8%，并控制温度在40℃，在磁力搅拌器中搅拌 24 h, 完成伏牛山鸡头黄精多糖的脱色处理。
步骤（4）具体为包括以下工序：将透析袋清洗干净，装入脱色后多糖溶液，然后将透析袋置于磁力搅拌器上透析24 h，完成伏牛山鸡头黄精多糖中的小分子去除处理。
伏牛山鸡头黄精多糖制备固体饮料的方法，取一定量的伏牛山鸡头黄精多糖，添加柠檬酸和木糖醇，拌匀后得到伏牛山鸡头黄精多糖固体饮料。
伏牛山鸡头黄精多糖制备固体饮料的方法，取一定量的伏牛山鸡头黄精多糖，添加白砂糖、麦芽糊精和环状糊精，拌匀后得到伏牛山鸡头黄精多糖固体饮料。
采用上述技术方案，本发明具有操作方法简单，便于工业化批量生产，提高伏牛山鸡头黄精多糖的提取含量及纯度，产品质量大大提高，用该多糖制备固体饮料，有助于提高伏牛山鸡头黄精的经济价值。
具体实施方式
伏牛山鸡头黄精多糖的提取方法，包括以下步骤，
（1）伏牛山鸡头黄精粗多糖的制备；
（2）蛋白去除处理；
（3）脱色处理；
（4）小分子去除处理；
（5）将已除去小分子的粗多糖溶液加无水乙醇并调节乙醇浓度为75%，3℃静置过夜，在8500 r/min的转速下离心20min，收集沉淀，得到优化后伏牛山鸡头黄精多糖。
步骤（1）具体为包括以下工序：
a. 称取伏牛山鸡头黄精粉末500g，按照料液重量比为1:20加入蒸馏水10L，搅拌混匀；
b. 将搅拌液随机分为10等份，采用250W声波对每份搅拌液辅助提取3次，将超声提取液合并定容至容量瓶中；
c. 将置于容量瓶中的超声提取液摇匀，准确量取超声提取液至离心管中，按照体积比为1:5比例加入95%的乙醇，然后摇匀；
d. 将离心管放置在4℃环境下冷藏18h后，取出以转速为5000 r/min 离心30 min，弃上清留沉淀；
e. 沉淀按照重量比为1:5的比例加入80%的乙醇，洗涤2次；
f. 放置4h后，在5000rpm的转速下离心20min，收集沉淀，即得到伏牛山鸡头黄精粗多糖，冷冻干燥保存。
3、根据权利要求1或2所述的伏牛山鸡头黄精多糖的提取方法，其特征在于：步骤（2）包括以下工序，
Ⅰ.先加入蒸馏水溶解伏牛山鸡头黄精粗多糖，按重量比为1:3的比例加入木瓜蛋白酶，接着以37℃的水浴酶解5 h，然后以90℃水浴灭酶，酶解和灭酶过程重复2次；
Ⅱ.酶解和灭酶后加入清除试剂慢速搅拌2 h，在15℃静置10 min，用离心机以转速为10000 r/min 离心15 min，取上层淡黄色上清液，完成伏牛山鸡头黄精粗多糖的蛋白去除处理。
清除试剂采用氯仿和正丁醇的混合溶液，氯仿与正丁醇的体积比为4:1。
步骤（3）具体为包括以下工序：先对已脱蛋白的淡黄色上清液调节pH到8.0，然后在搅拌下加入20%的H2O2，使多糖溶液的浓度达到8%，并控制温度在40℃，在磁力搅拌器中搅拌 24 h, 完成伏牛山鸡头黄精多糖的脱色处理。
步骤（4）具体为包括以下工序：将透析袋清洗干净，装入脱色后多糖溶液，然后将透析袋置于磁力搅拌器上透析24 h，完成伏牛山鸡头黄精多糖中的小分子去除处理。
本实施例与背景技术中采用不同方法制备的多糖，多糖生成含量比较，相比之下本实施例效果更好，具体见下表。
以本实施例的提取的多糖为例，本发明从伏牛山鸡头黄精中提取的多糖制备固体饮料的方法，包括以下两种实施方式：
实施方式一：伏牛山鸡头黄精多糖添加量分别为0.2、0.4、0.6、 0.8、 1.0 g五种类型，添加柠檬酸添加量为 0.2 g，木糖醇添加后补足五种伏牛山鸡头黄精多糖固体饮料总重量为3g。
实施方式二：伏牛山鸡头黄精多糖添加量分别为0.2、0.4、0.6、 0.8、 1.0 g，添加白砂糖0.2g, 麦芽糊精0.2g, 环状糊精添加后补足五种伏牛山鸡头黄精多糖固体饮料总重量为3g。
不同方法制得伏牛山鸡头黄精多糖固体饮料的感官评分，相比之下实施方式一的效果更好，具体见下表。
本实施例并非对本发明的形状、材料、结构等作任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的保护范围。

Claims (8)

1.伏牛山鸡头黄精多糖的提取方法，其特征在于：包括以下步骤，
（1）伏牛山鸡头黄精粗多糖的制备；
（2）蛋白去除处理；
（3）脱色处理；
（4）小分子去除处理；
（5）将已除去小分子的粗多糖溶液加无水乙醇并调节乙醇浓度为75%，3℃静置过夜，在8500 r/min的转速下离心20min，收集沉淀，得到优化后伏牛山鸡头黄精多糖。
2.根据权利要求1所述的伏牛山鸡头黄精多糖的提取方法，其特征在于：步骤（1）具体为包括以下工序：
a. 称取伏牛山鸡头黄精粉末500g，按照料液重量比为1:20加入蒸馏水10L，搅拌混匀；
b. 将搅拌液随机分为10等份，采用250W声波对每份搅拌液辅助提取3次，将超声提取液合并定容至容量瓶中；
c. 将置于容量瓶中的超声提取液摇匀，准确量取超声提取液至离心管中，按照体积比为1:5比例加入95%的乙醇，然后摇匀；
d. 将离心管放置在4℃环境下冷藏18h后，取出以转速为5000 r/min 离心30 min，弃上清留沉淀；
e. 沉淀按照重量比为1:5的比例加入80%的乙醇，洗涤2次；
f. 放置4h后，在5000rpm的转速下离心20min，收集沉淀，即得到伏牛山鸡头黄精粗多糖，冷冻干燥保存。
3.根据权利要求1或2所述的伏牛山鸡头黄精多糖的提取方法，其特征在于：步骤（2）包括以下工序，
Ⅰ.先加入蒸馏水溶解伏牛山鸡头黄精粗多糖，按重量比为1:3的比例加入木瓜蛋白酶，接着以37℃的水浴酶解5 h，然后以90℃水浴灭酶，酶解和灭酶过程重复2次；
Ⅱ.酶解和灭酶后加入清除试剂慢速搅拌2 h，在15℃静置10 min，用离心机以转速为10000 r/min 离心15 min，取上层淡黄色上清液，完成伏牛山鸡头黄精粗多糖的蛋白去除处理。
4.根据权利要求3所述的伏牛山鸡头黄精多糖的提取方法，其特征在于：清除试剂采用氯仿和正丁醇的混合溶液，氯仿与正丁醇的体积比为4:1。
5.根据权利要求3所述的伏牛山鸡头黄精多糖的提取方法，其特征在于：步骤（3）具体为包括以下工序：先对已脱蛋白的淡黄色上清液调节pH到8.0，然后在搅拌下加入20%的H2O2，使多糖溶液的浓度达到8%，并控制温度在40℃，在磁力搅拌器中搅拌 24 h, 完成伏牛山鸡头黄精多糖的脱色处理。
6.根据权利要求5所述的伏牛山鸡头黄精多糖的提取方法，其特征在于：步骤（4）具体为包括以下工序：将透析袋清洗干净，装入脱色后多糖溶液，然后将透析袋置于磁力搅拌器上透析24 h，完成伏牛山鸡头黄精多糖中的小分子去除处理。
7.采用权利要求1提取的伏牛山鸡头黄精多糖制备固体饮料的方法，其特征在于：取一定量的伏牛山鸡头黄精多糖，添加柠檬酸和木糖醇，拌匀后得到伏牛山鸡头黄精多糖固体饮料。
8.采用权利要求1提取的伏牛山鸡头黄精多糖制备固体饮料的方法，其特征在于：取一定量的伏牛山鸡头黄精多糖，添加白砂糖、麦芽糊精和环状糊精，拌匀后得到伏牛山鸡头黄精多糖固体饮料。
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