CN102727571A - 牡蛎葛根天然解酒剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及牡蛎葛根天然解酒剂及其制备方法，该方法是（1）将牡蛎加水，破碎匀浆，调节浆的pH值，进行酶解，酶解完成后将水解液冷冻离心取上清液，喷雾干燥或真空冷冻干燥得到牡蛎提取物粉；（2）将葛根磨粉后加水，恒温水浴中浸提，粗滤后得到浸提液；残渣再浸提，过滤得到滤液，合并两次滤液，在滤液中加入淀粉酶，搅拌后放入恒温水浴中，用沸水灭酶，多次离心得到淡黄色葛根提取液，喷雾干燥或冷冻干燥得到葛根提取物粉；（3）将牡蛎提取物粉与葛根提取物粉按比例配合，即得牡蛎葛根天然解酒剂；本方法原料来源非常广泛，营养丰富，可以保肝、安神、清热解毒，容易被身体吸收，无毒副作用，安全性高，可以做成多种形式的产品。

Description

牡蛎葛根天然解酒剂及其制备方法

技术领域

 本发明涉及一种解酒剂及其制备方法，具体涉及一种牡蛎葛根天然解酒剂及其制备方法，属于生物技术及功能保健技术领域。

背景技术

作为酒文化源远流长的国度，酒在我国社会生活中有着举足轻重的地位。适量饮酒对身体有一定的好处，比如活血、化瘀等，但过量饮酒不仅对身体造成巨大损害增加死亡率，而且也会对心理健康造成不同程度的影响。世界卫生组织2006年10月30日于日内瓦公布了人类健康的10大威胁，酗酒是其中之一。如今在美国，酗酒已是继吸烟、饮食不当之后导致死亡的第3大因素。而在我国每年则有超过20万的人死于酒精中毒。面对如此高的酒精中毒死亡率，寻求有效的解酒解毒剂已是目前的当务之急。

牡蛎是一种世界性的贝类，也是我国著名四大养殖经济贝类之一，分布广，产量大，营养丰富，含有丰富的糖原、蛋白质、牛磺酸、微量元素和维生素等。作为中国卫生部第一批公布的药食同源的68种食品之一，牡蛎肉味道鲜美，营养丰富，蛋白质含量高，氨基酸组成完善合理，在食品领域有很大的利用价值；另外牡蛎含有多种重要的生物活性物质，如糖原、牛磺酸、EAP、DHA以及维生素锌、硒、钙、铁等，在医药领域也有很高的利用价值。现代科技文献研究发现，牛磺酸具有广泛的生物作用，如抗氧化、保护细胞膜、调节渗透压、参与糖代谢的调节、抗疲劳等作用；而牡蛎糖原有明显的防治心血管病及抗凝血、降血脂、抗血栓、提高机体免疫功能、抗白细胞降低、抗肿瘤和抗氧化等生物活性，并无毒副作用，可开发为药用保健品。因此综合考虑牡蛎在食品领域和医药领域的利用价值，利用其药食同源的特点，可将牡蛎开发成各种保健和功能性食品。

我国用中草药解酒的记载始于《神农本草经》，书中水萍条载其“胜酒”，腐婢条云主治“病酒头痛”。魏晋《名医别录》明确记载一些药物具有解酒功效，可见对药物解酒功用的认识已具备相当的水平，其中葛花、积棋子二药自此以后一直作为解酒常用药。唐《食疗本草》论述具有醒酒解毒功效的鱼菜类食物。宋《证类本草》反映了宋代以前解酒药的发展概貌，明确记载有解酒作用的药物30种，分布于玉石、草、木、虫鱼、果、米谷、菜等部类之中，如柑皮、黄栌、诃边木、甘蔗等。其中不少药物如柑皮、甘蔗等至今仍被常用。明时李时珍的《本草纲目》中解酒药的内容是最为丰富的，广泛分布于矿物药、动物药、植物药之中，其中就记载了田螺、蛤蜊、黄颡鱼、鳅鱼、蜗螺等海洋生物具有解酒功效。而葛根味甘微辛，气清香，性凉，主入脾胃经。有解表退热，生津，透疹，升阳止泻。用于外感发热头痛、高血压颈项强痛、口渴、消渴、麻疹不透、热痢、泄泻。常食葛粉能调节人体机能，增强体质，提高机体抗病能力，抗衰延年，永葆青春活力。现代医学研究表明：葛根中的异黄酮类化合物葛根素对高血压、高血脂、高血糖和心脑血管疾病有一定疗效。对症治疗，副作用极小。

本发明将牡蛎与葛根中的活性成分提取出来，两者进行复配，制备了牡蛎葛根天然解酒剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种牡蛎葛根天然解酒剂及其制备方法，研制一款以海洋贝类——牡蛎和名贵中药葛根为原料的解酒剂，其制备过程是：

（1）1份牡蛎，加1~7份水，破碎匀浆，调节浆的pH值为5~8，添加3000~8000U/g的蛋白酶，在40~65℃下酶解2~8小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为8-30%时沸水浴灭酶10-15分钟；然后将水解液在6000 r/min的条件下冷冻离心10分钟，取上清液，喷雾干燥或真空冷冻干燥得到牡蛎提取物粉；

（2）1份葛根，磨粉后加6~15份水，于40~100℃恒温水浴中浸提6-15小时，粗滤后得到一次葛根浸提液；残渣再加3~8份水，煮沸提取10~60分钟，粗滤后得二次滤液，合并一次葛根浸提液和二次滤液，在滤液中加入淀粉酶，搅拌后放入40~60℃恒温水浴中3~8h，用沸水灭酶10-15分钟，多次离心得到淡黄色葛根提取液，喷雾干燥或冷冻干燥得到葛根提取物粉；

（3）将牡蛎提取物粉与葛根提取物粉按比例配合，即得牡蛎葛根天然解酒剂。

所述的蛋白酶为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、动物蛋白水解复合酶或碱性蛋白酶中的一种或几种。

所述的牡蛎提取物粉与葛根提取物粉的比例为6:4、7:3、8:2或9:1。

所述的淀粉酶的添加量为葛根质量的0.1-0.8%。

    本发明具有如下优点：

1、本发明采用的牡蛎肉，在我国产量巨大，来源非常广泛；葛根清凉、味甘，为大家所接受。

2、牡蛎肉营养丰富，具有护肝、安神、清热解毒等作用。

3、本解酒剂容易被身体吸收，无毒副作用，安全性高；且使用方便，可以做成多种形式的产品。

4、该提取物提取过程所用酶为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、动物蛋白水解复合酶、碱性蛋白酶中的一种或几种。

    5、该提取物性状稳定，使用方便，可以以不同形式添加到很多产品中。如：将牡蛎葛根解酒剂罐装为胶囊或压成片剂；牡蛎葛根解酒剂调和口味后杀菌、液体罐装机罐装、封盖后得到具有解酒作用的口服液；还可以添加到食品、饮料中制成具有解酒保肝作用的功能食品等。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。

实施例1

解酒剂制备方法：1份牡蛎，加3份水，破碎匀浆；调节pH值为6.5，按3000U/g蛋白加酶量添加胃蛋白酶，在40℃下酶解2小时后再按3000U/g蛋白加酶量添加木瓜蛋白酶，在55℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为21%时沸水浴灭酶10分钟；然后6000 r/min冷冻离心10分钟，取上清液，喷雾干燥成粉；1份葛根，磨粉后加6份水， 100℃恒温水浴中浸提6小时，粗滤后得到一次葛根液；残渣加3份水，煮沸提取10分钟，粗滤后合并滤液。滤液中加入葛根质量0.3%的淀粉酶，搅拌后放入60℃恒温水浴中3h，沸水灭酶10min，多次离心得到淡黄色葛根液，喷雾干燥成粉。将牡蛎提取物粉与葛根提取物粉按照6:4比例配合，即得牡蛎葛根天然解酒剂。

将上述天然解酒剂配制成高中低3种浓度，进行动物试验，试验方法如下：

小鼠醒酒试验

试验材料：上述“牡蛎葛根天然解酒剂”高、中、低剂量；白酒：红星二锅头，56°，北京红星股份有限公司；SPF级小鼠，体重20±2g，雄性，合格证号SYXK（粤）2003－0007，由广东医学院动物中心提供。

方法：小白鼠50只，禁食12小时，按体重随机分为A、B、C、D、E组，每组10只，5组小鼠全部用56°的红星二锅头灌胃，0.16mL/10g体重，灌酒后立即灌药，A组（乙醇模型组）灌胃生理盐水，B组（阳性对照组）灌胃市售解酒药、 C、D和E组分别灌胃低、中、高剂量的解酒剂，0.2mL/10g体重。记录小鼠醉酒只数、翻正反射消失时间及恢复时间，计算出耐受时间（从灌胃酒精至翻正反射完全消失的时间）和醉酒维持时间（从翻正反射消失到恢复时间）。

从表1可见，与乙醇模型相比，各给药组小鼠醉酒只数均减少，延长了对酒精的耐受时间缩短了醉酒维持时间，其中解酒剂中剂量组及高剂量组能够显著延长小鼠对酒精的耐受时间，显著水平分别为（P＜0.05）及（P＜0.001），而所进行的药物组对于缩短醉酒维持时间而言均具有显著性效果，其中阳性对照药物以及解酒剂低剂量组的显著水平为（P＜0.05），解酒剂中剂量组与高剂量组效果更显著（P＜0.001）。与阳性对照组相比，解酒剂低剂量及中剂量组在对小鼠的耐受时间延长及缩短醉酒时间方面并无显著性差异（P>0.05）；而高剂量组则与之存在统计学上的差异，显著水平分别为P＜0.001及P＜0.01。

表1小鼠醒酒试验

组别	小鼠数(只)	醉酒数(只)	耐受时间(min)	维持时间(min)
					乙醇模型组	10	9	14.7+10.1	384.0+71.9
阳性对照组	10	8	30.3+10.6	307.9+72.2*
					低剂量组	10	8	28.4+7.3	303.3+62.1*
中剂量组	10	7	37.6+14.7*	253.1+47.1 ***
					高剂量组	10	7	57.9+21.6***ΔΔΔ	212.3+36.9 ***ΔΔ

注：与乙醇模型组显著性比较 * p < 0.05,** p < 0.01,*** p < 0.001;与阳性对照相比Δ p<0.05, ΔΔ p<0.01, ΔΔΔ p<0.001。下同。

实施例2：

解酒剂制备方法：1份牡蛎，加4份水，破碎匀浆；调节pH值为6.5，按5000U/g蛋白加酶量添加中性蛋白酶，在60℃下酶解4小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为17%时沸水浴灭酶10分钟；然后6000 r/min冷冻离心10分钟，取上清液，喷雾干燥成粉；1份葛根，磨粉后加10份水，70℃恒温水浴中浸提8小时，粗滤后得到一次葛根液；残渣加6份水，煮沸提取20分钟，粗滤后合并滤液。滤液中加入葛根质量0.1%的淀粉酶，搅拌后放入50℃恒温水浴中4h，沸水灭酶10min，多次离心得到淡黄色葛根液，喷雾干燥成粉。将牡蛎提取物粉与葛根提取物粉按照8:2比例配合，即得牡蛎葛根天然解酒剂。

将上述天然解酒剂配制成高中低3种浓度，进行动物试验，试验方法如下：

小鼠防醉试验

试验材料：上述“牡蛎贝葛根天然解酒剂”高、中、低剂量；白酒：红星二锅头，56°，北京红星股份有限公司；SPF级小鼠，体重20±2g，雄性，合格证号SYXK（粤）2003－0007，由广东医学院动物中心提供。

方法：小白鼠50只，禁食12小时，按体重随机分为A、B、C、D、E组，每组10只，A组（乙醇模型组）灌胃生理盐水，B组（阳性对照组）灌胃市售解酒药、 C、D和E组分别灌胃低、中、高剂量的解酒剂，0.2mL/10g体重，30分钟后，5组小鼠全部用56°的红星二锅头灌胃，0.16mL/10g体重。记录醉酒只数及小鼠翻正反射消失时间及恢复时间，计算出耐受时间（从灌胃酒精至翻正反射完全消失的时间）和醉酒维持时间（从翻正反射消失到恢复时间）。结果见表2。

表2 不同剂量醒酒剂对小鼠防醉试验

组别	小鼠数(只)	醉酒数(只)	耐受时间(min)	维持时间(min)
					乙醇模型组	10	9	11.3±7.4	363.6±67.5
阳性对照组	10	7	31.1±9.3**	287.6±56.6*
					低剂量组	10	8	32.3±8.8**	294.9+51.1*
中剂量组	10	7	44.1+15.2***	248.6+53.4***
					高剂量组	10	5	76.4+19.8***ΔΔΔ	185.1+44.4***ΔΔ

注：与乙醇模型组显著性比较 * p < 0.05,** p < 0.01,*** p < 0.001;与阳性对照相比Δ p<0.05, ΔΔ p<0.01, ΔΔΔ p<0.001。

与乙醇模型相比，各给药组小鼠醉酒只数均明显减少并显著延长了对酒精的耐受时间其中阳性对照组及解酒剂低剂量组显著水平为P＜0.01，解酒剂中剂量及高剂量组的显著水平为P＜0.001；药物组还能显著缩短了醉酒维持时间，其中阳性对照组及解酒剂低剂量组显著水平为P＜0.05，解酒剂中剂量及高剂量组的显著水平为P＜0.001。

与阳性对照组相比，解酒剂低剂量及中剂量组在对小鼠的耐受时间延长及缩短醉酒时间方面并无显著性差异（P>0.05）；而高剂量组则与之存在统计学上的差异，显著水平分别为P＜0.001及P＜0.01。

实施例3：

解酒剂制备方法：1份牡蛎，加6份水，破碎匀浆；调节pH值为7，分别按3000U/g蛋白加酶量添加木瓜蛋白酶与中性蛋白酶，在50℃下酶解4小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为25%时沸水浴灭酶10分钟；然后6000 r/min冷冻离心10分钟，取上清液，真空冷冻干燥成粉；1份葛根，磨粉后加12份水，70℃恒温水浴中浸提10小时，粗滤后得到一次葛根液；残渣加5份水，煮沸提取20分钟，粗滤后合并滤液。滤液中加入葛根质量0.6%的淀粉酶，搅拌后放入40℃恒温水浴中3h，沸水灭酶10min，多次离心得到淡黄色葛根液，冷冻干燥成粉。将牡蛎提取物粉与葛根提取物粉按照9:1比例配合，即得牡蛎葛根天然解酒剂。

将上述天然解酒剂配制成高中低3种浓度，进行动物试验，试验方法如下：

抗急性酒精性肝损伤试验：

试验方案：将小鼠随机分为正常组、阳性药物对照组、酒精肝损伤模型组，解酒剂低、中、高剂量组，每组10只。阳性药物组每天给药800mg/kg·bw，解酒剂低、中、高剂量组每天给药分别为100、200、400mgkg·bw，连续灌胃2周；正常组、模型组给予等量生理盐水，每次给药1h后，除正常组外，各组均灌胃52°红星二锅头12mL/kg·bw。各组均于末次给药后禁食不禁水。酒精肝损伤小鼠于末次给药24h 后，眼眶取血，分离血清备测；立即摘取肝脏，右叶组织用4℃的生理盐水漂洗，除去血液与结缔组织，采用滤纸拭干，以1:9（m/V）的生理盐水于研磨棒下成肝匀浆， 5000r/min、4℃条件下离心。按试剂盒说明书方法分别测定血清中ALT 与AST 活性、TG 含量，肝组织中MDA、GSH、SOD 酶活力并称量肝脏及体质量，计算肝指数。结果见表3、4。

表3 小鼠血清ALT、AST活性与CHOL及 TG 含量

组别	AST/ALT	CHOL/（mg/dL）	TG/（mmol/L）
				正常组	2.66+0.32	1.74+0.24	0.47+0.07
模型组	3.73+0.58ΔΔ	2.77+0.48ΔΔ	1.26+0.74ΔΔ
				阳性对照	3.26+0.54	2.39+0.67Δ	0.96+0.06Δ
低剂量组	3.50+0.81Δ	2.59+0.29Δ	0.85+0.21
				中剂量组	3.19+0.51	2.57+0.49Δ	0.79+0.25
高剂量组	2.75+0.34**	2.12+0.31*	0.71+0.24*

由表3结果可见，与模型组相比，阳性药物组、解酒剂低、中剂量组AST/ALT比值、CHOL及TG 含量均在一定程度上有所下降，但并无显著性变化（P >0.05）；而解酒剂高剂量组与模型组相比则显著降低血清中AST/ALT比值，显著水平为（P＜0.01），并能显著降低血清中CHOL与TG的含量，显著水平为（P＜0.05）。

    由表4 可见，解酒剂高剂量组的SOD活性较模型组有极显著的提高（P＜0.05），中、低剂量的配方组与阳性对照组也在一定程度上提高了乙醇肝损伤小鼠中的SOD活性但并无显著性变化（P>0.05）；阳性药物组以及各剂量的解酒剂组均能减缓肝匀浆中MDA含量的升高与GSH 的降低，其中解酒剂中剂量及高剂量组效果极显著（P＜0.01）；根据《保健食品检验与评价规范》的判定方法，肝脏MDA、GSH和TG 3项检测指标其中任意两项结果为阳性，即可判定该物质对酒精性肝损伤具有辅助保护功能。本实验结果显示，牡蛎葛根解酒剂对酒精性肝损伤具有辅助保护功能。

表4小鼠肝组织中SOD、GSH活性及 MDA 含量

Claims (6)

1.牡蛎葛根天然解酒剂的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）1份牡蛎，加1~7份水，破碎匀浆，调节浆的pH值为5~8，添加3000~8000U/g的蛋白酶，在40~65℃下酶解2~8小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为8-30%时沸水浴灭酶10-15分钟；然后将水解液在6000 r/min的条件下冷冻离心10分钟，取上清液，喷雾干燥或真空冷冻干燥得到牡蛎提取物粉；

（2）1份葛根，磨粉后加6~15份水，于40~100℃恒温水浴中浸提6-15小时，粗滤后得到一次葛根浸提液；残渣再加3~8份水，煮沸提取10~60分钟，粗滤后得二次滤液，合并一次葛根浸提液和二次滤液，在滤液中加入淀粉酶，搅拌后放入40~60℃恒温水浴中3~8h，用沸水灭酶10-15分钟，多次离心得到淡黄色葛根提取液，喷雾干燥或冷冻干燥得到葛根提取物粉；

（3）将牡蛎提取物粉与葛根提取物粉按比例配合，即得牡蛎葛根天然解酒剂。

2.用权利要求1所述的牡蛎葛根天然解酒剂的制备方法制备的牡蛎葛根天然解酒剂。

3.根据权利要求1所述的牡蛎葛根天然解酒剂的制备方法，其特征在于：所述的蛋白酶为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、动物蛋白水解复合酶或碱性蛋白酶中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的牡蛎葛根天然解酒剂的制备方法，其特征在于：所述的牡蛎提取物粉与葛根提取物粉的比例为6:4、7:3、8:2或9:1。

5.根据权利要求1所述的牡蛎葛根天然解酒剂的制备方法，其特征在于：所述的淀粉酶的添加量为葛根质量的0.1-0.8%。

6.根据权利要求2所述的牡蛎葛根解酒剂，其特征在于：牡蛎葛根解酒剂可以罐装为胶囊或压成片剂或牡蛎葛根解酒剂调和口味后杀菌、液体罐装机罐装、封盖后得到具有解酒作用的口服液，还可以添加到食品、饮料中制成具有解酒保肝作用的功能食品。