CN1102482A - 接触镜片用制剂的稳定方法 - Google Patents
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Abstract
为了防止含有某一蛋白水解酶的接触镜片用制
剂中的蛋白水解酶在水溶液状态变质,本发明提供了
(1)一种稳定含有蛋白水解酶的接触镜片用制剂的方
法,该方法包括把某种吡咯烷酮化合物配入上述制剂
中,(2)一种生产接触镜片用制剂的方法,(3)一种接
触镜片用制剂。
本发明的制剂可加工成液态或固态制剂形式,其
中液态制剂可加工成单组分型制剂。即使在溶于水
中之后液态制剂和固态制剂均能使蛋白水解酶的活
性保持较长时间,而且能有效地用于接触镜片的清
洗、洁净、保护和消毒。
Description
本发明涉及一种新颖而实用的蛋白水解酶的稳定方法。更具体地说,本发明涉及包含蛋白水解酶的接触镜片用制剂的稳定方法,该方法包括将一种吡咯烷酮化合物加入制剂中。
接触镜片大致分为两种类型,即硬质和软质接触镜片。硬质接触镜片由于它们的非亲水性一般被认为具有减低的透氧性,可是最近已经开发出具有增高的透氧性的硬质接触镜片。然而,这两种接触镜片均易沉积蛋白质等污垢,另外,氧气可透过的镜片需要通过清洗、洁净、消毒和保护进行日常护理,以使它们所希望有的透氧性保持正常。
蛋白水解酶用来除去粘附于接触镜片表面上的蛋白质污垢,而事实上现在已经有人提出了许多包含此类蛋白水解酶的清洗和洁净制剂,而且已经投入使用。例如,在戴镜片者清洗和洁净接触镜片时,将以固体形式(如片剂、颗粒和粉剂)供给的、主要由蛋白水解酶构成的制剂溶于纯化了的水中。然而,因为此种应用工序要求戴镜片者在每次使用时将固体形式的蛋白水解酶溶于纯化的水中,所以他们被迫承受增加的费用和麻烦的工序所引起的不便,与此同时还要受溶解后酶催活性时效降低的困扰。鉴于以上情况,还有人提出了稳定处于溶液状态的蛋白水解酶的方法。例如,日本未审查专利公开No.159822/1988和180515/1989提出了稳定蛋白水解酶的方法,它包括把某一蛋白水解酶掺入含有水混溶性的多羟基醇的溶液中。然而这样得到的溶液制剂几乎不具有酶催活性,可以用水稀释它而产生增高的酶催活性,但缺点是稳定性变差。
鉴于上述情况本发明得以完成。本发明着眼于稳定溶液中的蛋白水解酶,从而提供一种不需使用任何辅助配合剂就能单独使接触镜片同时被清洗、洁净、消毒和保护的接触镜片用液态制剂。
本发明的发明者对能除去蛋白质污垢的蛋白水解酶的稳定性进行了反复深入的研究,结果发现,某种吡咯烷酮化合物的加入出人意料地增加了在设计用于清洗和洁净接触镜片的溶液中的此类蛋白水解酶的稳定性,而不会降低其活性。这一发现使本发明得到成功,在此之后我们进行了更进一步的连续研究。
本发明涉及一种稳定包含蛋白水解酶的接触镜片用液态制剂的方法,该方法包括将某种吡咯烷酮化合物加入含有有效量蛋白水解酶的溶液中。本发明还涉及含有用上述方法稳定的蛋白水解酶的接触镜片用液态制剂和生产此类液态制剂的方法。
在本发明中有用的吡咯烷酮化合物可以是2-吡咯烷酮,D-,L-或DL-吡咯烷酮羧酸(即2-吡咯烷酮-5-羧酸);或它们的盐,例如钠盐、钾盐或胺盐(如三乙醇胺盐);或它们的酯(例如乙酯)中的任何一种,这些化合物可以适当地使用。此类吡咯烷酮化合物的用量可以根据吡咯烷酮化合物的种类,需要洁净的接触镜片的类型,待除去的沉积污垢的性质和程度等而被适当地选择。鉴于此类吡咯烷酮化合物在溶液中的浓度低于5(W/V)%时不能提供令人满意的酶催稳定性,向未来的使用者提供此类溶液状态的制剂是困难的。因此,希望此类吡咯烷酮化合物的使用浓度一般不低于5(W/V)%,优选在10-60(W/V)%的范围内。
在本发明中有用的蛋白水解酶包括胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶以及来源于芽孢杆菌属等生物的蛋白酶。此类蛋白水解酶的配方量根据足以达到预期清洗和洁净效果的有效量而适当地加以限定,其使用比率可对应于优选为10-5000单位/毫升,更优选为50-1000单位/毫升的范围内。这仅仅是因为配入量太少时此类蛋白水解酶不能产生令人满意的清洗和洁净效果,而使用浓度太高时会导致在清洗和洁净过程中引起对皮肤的损害。
根据本发明制备的接触镜片用制剂的pH值一般希望调到4-8的范围内,以达到稳定所使用的蛋白水解酶的目的。
根据本发明,接触镜片用制剂可以采取固态或液态形式,而且只要能在使用时变成溶液状态,制剂的形式不需特别限制。例如可以是液态制剂及能够长时间储存且在使用时适于通过溶解而使用的固态制剂。尤其是在液态制剂情况下,含有本发明的蛋白水解酶的溶液是非常有用的,而且具有如下优点:当把某种吡咯烷酮化合物配入上述溶液时,该溶液不仅在保持蛋白水解酶在水溶液中的稳定性同时发挥出增加的酶催活性,而且在使用时不需要用水稀释,而在一般情况下使用含有多羟基醇(如甘油)的、传统的稳定化的接触镜片用酶溶液则需要用水稀释。制剂的固态形式可以是片剂,颗粒,粉剂和冻干物(lyophilizates),冻干物优选能快速溶解,具有消毒作用并能提供均一组成。上述待配入的吡咯烷酮化合物、表面活性剂和蛋白水解酶的量以使用时它们在由固态制剂制得的溶液形式的接触镜片用制剂中所存在的量来表示。
除了上述组分外,还可进一步配入赋形剂,如其他表面活性剂,杀菌剂,pH调节剂,缓冲剂,螯合剂,崩解剂和粘合剂,及不同的酶,如脂肪酶,和其他各种添加剂。
作为表面活性剂,非离子、阴离子和两性表面活性剂是有效的,必要时这些表面活性剂可以混合使用。
阴离子表面活性剂包括,例如,月桂酰肌氨酸钠,月桂酰-L-谷氨酸三乙醇胺和十四烷基肌氨酸钠;两性表面活性剂的实例包括月桂基二甲氨基乙酸甜菜碱,2-烷基-N-羧甲基-N-羟乙基咪唑甜菜碱和烷基二氨基甘氨酸盐酸盐;而非离子表面活性剂可以是多乙氧基醚,聚氧化乙烯化的硬化蓖麻油60,硬脂酸-40-聚烃氧基酯,和聚氧化乙烯月桂醚。
表面活性剂的配入量可以随意选择,只要其浓度能使酶催活性达到令人满意的程度,而不会对接触镜片和眼组织产生不利影响,同时使用方式应能使其浓度优选在0.01-10(W/V)%,更优选为0.1-5(W/V)%的范围内。
按本发明的方法稳定了的接触镜片用制剂可按如下方式使用:将一片从眼球取出的接触镜片放入5毫升液态形式的接触镜片用制剂(例如,水溶液状态的接触镜片用制剂)中,然后浸泡不少于30分钟,从而同时完成自动清洗、洁净和消毒。浸泡后的接触镜片用自来水漂洗,然后再戴于眼睛的角膜上。本发明的发明者进行的现场试验表明,溶液状态的接触镜片用制剂在经过一周连续昼夜使用后未引起任何争论和疑问。
因此,本发明能使含有蛋白水解酶的接触镜片用制剂中的蛋白水解酶在液体状态下维持稳定。因此含有本发明的蛋白水解酶的稳定化的接触镜片用制剂不需使用任何辅助试剂就能独自完成接触镜片的同时清洗、消毒和保护,并能提供如下优点:它可以以具有改进加工性能的简单方便的方式加以使用,因为只需通过浸泡和保持就能有效地除去接触镜片上的污垢;另外在使用溶液制剂时任何进一步的处理工序(如用水稀释)是不必要的。
下述试验实施例和实施例用来具体说明本发明,但应该理解的是它们仅用来说明本发明,而决不是限制其范围。
试验实施例1
检测蛋白质污垢的除去
将两块粘有基于氯化溶菌酶等的人造污垢的、氧气可透过的硬质接触镜片(由甲基丙烯酸硅氧烷基酯制成)分别浸入组成如表1所示、各自含10%和40%DL-吡咯烷酮羧酸钠作为稳定剂的接触镜片用清洗和洁净溶液和含40%甘油的清洗和洁净溶液中,然后保持15小时。用水冲洗接触镜片,裸眼观测沉积于其上的人造污垢的除去和洁净情况。结果如下表所示,由表中结果我们可以证实DL-吡咯烷酮羧酸钠含量为10%和40%的洁净溶液能彻底除去人造污垢,而含40%甘油的洁净溶液根本不能除去人造污垢。
结果:
实验溶液 浸泡前 浸泡后
10%DL-吡咯烷酮羧酸钠 +++ -
40%DL-吡咯烷酮羧酸钠 +++ -
40%甘油 +++ +++
注:+++:在镜片表面观察到白色混浊状态。
-:在镜片表面来观察到污垢。
沉积有人造污垢的接触镜片按如下工序制备:
按下述配方制备人造污垢溶液,脱气并在约60℃下加热,将镜片置入该溶液中,当它们混浊到合适的程度后从溶液中取出,去掉块状污垢,然后储存于水中。
物质 用量
氯化溶菌酶 0.1g
磷酸氢二钠 0.2g
氢氧化钠 适量
纯化水 适量
总计 100ml(pH7.2)
实施例1
混合表1和表2所示的配方成分,溶解得到不同的试验溶液。根据Anson-Ogiwara的改良方法在制备完成后立即测定这样制备的实验溶液的酶催活性,并分别测定在30℃下贮存7天和14天之后的酶催活性,然后按下面方程式计算酶催活性的残留率(%),结果示于表1和表2。
A(%)=E/Eo×100
其中:A为酶催活性残留率
E为在30℃下贮存7天或14天后的酶催活性
Eo为制备刚完成时的酶催活性
从表1和表2明显可以看出,把吡咯烷酮化合物加入含有蛋白水解酶的溶液中使上述溶液中的蛋白水解酶得到了显著的稳定。
实施例2
混合表3所示的配方成分,溶解得到一种试验溶液,用实施例1中的相同方法测定酶催活性残留率(%),结果示于表3。
从表1中B-6栏和表3中的B-8栏所示的试验数据可以明显看出,吡咯烷酮化合物及阴离子表面活性剂和非离子表面活性的掺入使蛋白水解酶的稳定性增大。
实施例3
物质 用量
生物绿石英(Bioprase) 1,500单位
月桂酰-L-谷氨酸三乙醇胺(30%) 0.1g
烷基二氨基甘氨酸盐酸盐 0.03g
DL-吡咯烷酮羧酸钠(50%) 4.8g
硼酸 0.03g
四硼酸钠 0.018g
乙二胺四乙酸钠 0.006g
葡萄糖酸洗必太 0.3mg
上述配方成分溶于6ml纯化水中得到含有蛋白水解酶的接触镜片用制剂,按实施例1中所述相同方法测定酶催活性的残留率。在30℃下贮存14天后发现该制剂的酶催活性不低于95%,且能产生好的洁净效果。在除去类脂和蛋白质的试验中,该制剂具有令人满意的结果,而未发现显著的微生物生长。
实施例4
物质 用量
胰蛋白酶 1,400单位
硬脂酸-40-聚烃氧基酯 0.03g
2-吡咯烷酮 2.1g
葡萄糖酸洗必太 0.6mg
磷酸氢二钠 0.012g
磷酸 适量
氯化钠 0.051g
上述配方成分溶于6ml纯化水中产生含有蛋白水解酶的接触镜片用制剂。所得试验溶液进行实施例3所述的相同试验,同样得到了令人满意的结果。
实施例5
物质 用量
生物绿石英 2,880单位
月桂酰-L-谷氨酸三乙醇胺 0.2g
硬脂酸-40-聚烃氧基酯 0.06g
月桂基二甲氨基乙酸甜菜碱(35%) 0.17g
硼酸 0.03g
乙二胺四乙酸钠 0.006g
DL-吡咯烷酮羧酸钠(50%) 3.6g
上述配方成分溶于6ml纯化水中,然后用盐酸把pH值调到6.0,从而得到含有蛋白水解酶的接触镜片用制剂。所得试验溶液进行实施例3所述的相同试验,同样得到了令人满意的结果。
实施例6
物质 用量
生物绿石英 2,800单位
月桂酰肌氨酸钠 0.06g
月桂基二甲基乙酸甜菜碱(35%) 0.17g
聚氧化乙烯月桂醚 0.03g
DL-吡咯烷酮羧酸乙酯 1.5g
山梨酸 0.006g
硼酸 0.06g
四硼酸钠 适量
上述配方组分溶于6ml纯化水中,然后用盐酸将pH调到6.0,从而产生含有蛋白水解酶的接触镜片用制剂。所得试验溶液进行实施例3所述的相同试验,同样得到令人满意的结果。
表3
注:1阴离子表面活性剂
2非离子表面活性剂
Claims (17)
1、一种稳定含有蛋白水解酶的接触镜片用制剂的方法,其特征在于该方法包括在该制剂中配入一种吡咯烷酮化合物。
2、根据权利要求1所要求的一种稳定方法,其中吡咯烷酮化合物是吡咯烷酮,或吡咯烷酮羧酸或其盐或酯。
3、根据权利要求1或2所要求的一种稳定方法,其中配入制剂中的吡咯烷酮化合物的浓度不低于5(W/V)%。
4、根据权利要求1,2或3所要求的一种稳定方法,其中接触镜片用制剂为液态或固态形式,且它本身或当它溶于水时表现出的pH值在4-8的范围内。
5、根据权利要求1,2,3或4所要求的一种稳定方法,其中蛋白水解酶是来源于芽孢杆菌属微生物的蛋白酶或来源于动物的胰蛋白酶。
6、根据权利要求1所要求的一种稳定方法,其中制剂中还配入非离子表面活性剂、阴离子表面活性剂和两性表面活性剂中的至少一种。
7、根据权利要求6所要求的一种稳定方法,其中配入制剂中的表面活性剂的浓度在0.01-10(W/V)%的范围内。
8、一种生产接触镜片用制剂的方法,其特征是该方法包括把蛋白水解酶和吡咯烷酮化合物配入制剂中。
9、根据权利要求8所要求的一种生产方法,其中吡咯烷酮化合物为吡咯烷酮或吡咯烷酮羧酸或其盐或酯。
10、根据权利要求8或9所要求的一种生产方法,其中配入制剂中的吡咯烷酮化合物的浓度不低于5(W/V)%。
11、根据权利要求8所要求的一种生产方法,其中制剂中还进一步配入非离子表面活性剂,阴离子表面活性剂和两性表面活性剂中的至少一种。
12、根据权利要求11所要求的一种生产方法,其中配入制剂中的表面活性剂浓度在0.01-10(W/V)%的范围内。
13、一种含有蛋白水解酶的接触镜片用制剂,它包含配入其中的蛋白水解酶和吡咯烷酮化合物。
14、根据权利要求13所要求的一种接触镜片用制剂,其中吡咯烷酮化合物为吡咯烷酮或吡咯烷酮羧酸或其盐或酯。
15、根据权利要求13所要求的一种接触镜片用制剂,其中配入制剂中的吡咯烷酮化合物的浓度不低于5(W/V)%。
16、根据权利要求13所要求的一种接触镜片用制剂,其中制剂中还配入非离子表面活性剂,阴离子表面活性剂或两性表面活性剂中的至少一种。
17、根据权利要求13所要求的一种接触镜片用制剂,其中配入制剂中的表面活性剂的浓度在0.01-10(W/V)%的范围内。
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