CN1105758A - 稳定接触透镜用处理剂的方法 - Google Patents
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Abstract
通过将表面活性剂加至含有效量蛋白酶的溶液
中以稳定含蛋白酶的接解透镜用处理剂的方法和制
备含蛋白酶的接触透镜用冻干处理剂的方法。本发
明方法可使在液体中的蛋白酶得以稳定保存。用单
一溶液就能同时进行清洁、灭菌和保存,而且仅通过
将接触透镜浸入溶液状态的所述处理剂中就能有效
地去除污垢。制备本发明冻干处理剂的方法能使蛋
白酶在制备过程中稳定地进入冻干制剂中。因此本
发明冻干处理剂能使蛋白酶保持稳定而且溶解性极
佳。
Description
本发明涉及稳定含蛋白酶的接触透镜用处理剂的方法,它包括将表面活性剂加至所述处理剂中。本发明还涉及含蛋白酶的接触透镜用的冻干的处理剂的生产方法,而且,本发明涉及含蛋白酶的冻干的接触透镜用处理剂。
接触透镜可分为硬接触透镜和软接触透镜两类。尽管硬接触透镜是非亲水性的且透氧性较差,但近年来已开发出透氧性得到改善的硬接触透镜。这些透镜同软接触透镜一样,易被蛋白质等弄脏,需每天进行清洗、灭菌和保存处理以增加维持透氧性的效应。
附着在接触透镜表面的蛋白质污垢可以通过已被推荐并实际使用的蛋白酶和各种清洁剂的作用分解和去除。然而蛋白酶在水中不稳定,已采取多种措施来克服这个缺陷。例如已有含蛋白酶为主要成分的固体形式的药剂,如片剂、颗粒剂、粉剂等,用户在每次实际使用前将其溶于净化水等中。这种每次使用时将固体清洁剂溶解的方法花费大,而且使用户不得不进行麻烦的操作。此外,所述的固态制剂往往具有较差的溶解性。已提出若干种稳定处于溶液状态的蛋白酶的方法以提供用于接触透镜的处理液。例如,日本专利公开第167726/1989号公开了含具有季铵基团和羟基的水溶性聚合物和酶的保存液。该保存液清洁效果差,不足以用作清洁液。日本专利公开第159822/1988和180515/1989号还建议采用通过将蛋白酶加至含可与水混溶的有机液体的溶液中来稳定该酶的方法。但该溶液的酶活性极低,以致无清洁作用。一些这类接触透镜用常规的酶稳定的溶液需稀释使用以达到高酶活性。该方法的缺点在于:当有机液体的浓度高时,蛋白酶缺乏活性;尽管当用水稀释时可以增强所述活性,但稳定性却降低了。
鉴于上述情况,作出了本发明,目的在于稳定溶液(尤其是水溶液)中的蛋白酶,最终提供用一单一溶液就能同时对接触透镜进行清洁、灭菌及保存的接触透镜用处理剂。
本发明的另一目的是:在生产含蛋白酶的接触透镜用冻干的处理剂时,在将该处理剂冻干过程中稳定所述蛋白酶。
本发明的再一个目的是提供含蛋白酶的接触透镜用处理剂,它可使所述蛋白酶保持稳定。
本发明人观察了稳定能除去蛋白质污垢的蛋白酶的方法并进行了深入细致的研究,发现少量的表面活性剂能够起到稳定溶液中、尤其是在水溶液中的蛋白酶的作用。
如上所述,人们知道蛋白酶在水存在下失活。许多表面活性剂含水,为此,按照本领域的技术水平,当这两者共存时,推测蛋白酶会因含在表面活性剂中的水分而失活。由此看来,上述发现完全是意想不到的。
此外,本发明者发现:将含蛋白酶的接触透镜用处理剂冻干足以去除水分,这也能获得确保稳定的蛋白酶;而且所述的冻干产物在使用时溶解性较佳。
然而,在制备冻干制剂时,甚至在制备含欲实施冻干处理的蛋白酶的液体组合物时,蛋白酶就可能失活,这样就使得冻干处理剂的生产非常困难。具体来讲,将通常装在小瓶等中的含蛋白酶的水性溶液进行冻干处理以获得冻干制剂。在所述的操作过程中,将含蛋白酶的水性溶液装入小瓶等中并将其冷冻则花费相当长的时间,这使所述蛋白酶失活。
意想不到的是,本发明人现已发现:在生产冻干制剂过程中蛋白酶的失活可因表面活性剂的存在而显著得到抑制。
也就是说,本发明涉及稳定含蛋白酶的接触透镜用处理剂的方法,它包括:将表面活性剂加至含有效量蛋白酶的溶液中,这样便可以用单一溶液来清洁、灭菌和保存接触透镜。所述表面活性剂尤其是指至少一种选自阴离子表面活性剂、两性表面活性剂和非离子表面活性剂的表面活性。
本发明还涉及生产含蛋白酶的接触透镜用冻干处理剂的方法,它包括对含蛋白酶的水性组合物在表面活性剂存在下进行冻干处理。
此外,本发明涉及含蛋白酶和表面活性剂的接触透镜用的冻干处理剂。
用于本发明的表面活性剂的例子有非离子表面活性剂、阴离子表面活性剂和两性表面活性剂。可将这些表面活性剂以适当合用的方式有效地使用。已知这些表面活性剂通常显示抗菌作用,并具有清洁作用。
阴离子表面活性剂的例子有月桂酰肌氨酸钠、月桂酰基-L-谷氨酸三乙醇胺和肉豆蔻基肌氨酸钠;两性表面活性剂的例子有月桂基二甲氨基乙酸甜菜碱、2-烷基-N-羧甲基-N-羟乙基咪唑啉鎓甜菜碱和盐酸烷基二氨基甘氨酸;以及非离子表面活性剂的例子包括吐温80、聚氧乙烯蓖麻油60、硬脂酸聚烃氧基酯40和聚氧乙烯月桂基醚。表面活性剂合用的例子有月桂酰基-L-谷氨酸三乙醇胺(阴离子表面活性剂)和吐温80(非离子表面活性剂);以及月桂酰基-L-谷氨酸三乙醇胺(阴离子表面活性剂)和月桂基二甲氨基乙酸甜菜碱(两性表面活性剂)。
所述表面活性剂的浓度为能使足够的酶稳定而对接触透镜无有害影响,优选约0.01-10(W/V)%,更优选约0.1-3(W/V)%。
用于本发明的蛋白酶的例子有:得自植物的木瓜蛋白酶、得自动物的胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶以及得自芽胞杆菌属的蛋白酶,根据需要来选择。根据酶在液体中的稳定性,最优选的是得自属于芽胞杆菌的微生物的蛋白酶,例如Bioprase(商标,日本Nagase Seikagaku Kogyo K.K.制选)。在本发明中,蛋白酶的用量宜根据可获得所需清洁效果的有效量来预测,优选约10-5000单位/ml,更优选约50-1000单位/ml;太小量则导致清洁作用不够,太大量则在清洁透镜时易引起皮肤疾病。
用本发明方法稳定的接触透镜用处理剂的pH优选4-8,以稳定蛋白酶。
在本发明中,对接触透镜用处理剂的形式无特别限制,只要能将其在用时制成液体组合物就可以,例如液体制剂和可长时贮存并能在用时溶解的固体制剂。固体制剂的例子包括片剂、颗粒剂、粉剂和冻干产品。若从组合物的快速溶解性、稳定性和均匀性方面来看,冻干产品是优选的。注意上述表面活性剂和蛋白酶的量和pH是当接触透镜用处理剂是固体制剂时,为将其制成接触透镜用液体处理剂时的量和pH;若为含蛋白酶的接触透镜用冻干处理剂,则为欲冻干的含蛋白酶的水性组合物中的量和pH。
就本发明而言,在接触透镜用处理剂的稳定性不受损的情况下,所述处理剂可以含各种添加剂,例如常规用防腐剂(例如氯苄烷铵、Chlorohexyzine gluconate、对羟苯甲酸酯类、盐酸烷基二氨乙基甘氨酸、氯丁醇、山梨酸),pH调节剂(例如盐酸、磷酸、硫酸、氢氧化钠、氨),缓冲剂(例如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐、三乙醇胺),螯合剂,赋形剂如崩解剂和粘合剂,以及其它酶例如脂酶。
用本发明方法稳定的接触透镜用处理剂的使用包括:将从眼睛上取下的接触镜片放入液体处理剂(例如溶液状态的本发明接触透镜用的处理剂)中,并浸泡1至12小时。通过所述浸泡,由于表面活性剂所具有的抗菌作用所获得的灭菌作用的发挥,浸泡后,将所述接触镜片用自来水等冲洗,再戴上。已证实:将所述溶液连续使用一周不会产生任何问题。
在本发明中,接触透镜有用的处理剂优选是硬接触透镜用的处理剂。
顺便提一句,甚至在制备欲进行冻干处理的含蛋白酶的水性组合物时,蛋白酶就会失活。为避免所述失活问题,在本发明中,冻干制剂在表面活性剂存在下制备。冻干制剂例如按下述方法来制备。
将蛋白酶和表面活性剂溶于或分散于水中,优选净化水中。在进行此项操作时,优选低速搅拌溶解或分散,以抑制由表面活性剂所致发泡。
冷冻通常于-10至-40℃进行。冷冻后干燥在不高于40℃的温度下进行。所述干燥优选随增温来实施。
经冷冻后于不高于40℃的温度下进行干燥,可以获得使用时溶解性较佳的产品。
接触透镜用冻干处理剂使用前以冻干状态贮存稳定,使用时将其溶于水(优选净化水或注射用蒸馏水)中。蛋白酶和表面活性剂的浓度和液体组合物的pH优选在上述范围内。因此,优选的是:应将预定量的接触透镜用冻干处理剂和预定量溶解所述处理剂的水放在一个盒内。不用说,溶于水中使用的处理剂的稳定性由于表面活性剂的存在而得到改善。
下面用实施例详述本发明,但它们对本发明并无限制。
实施例1
将表1所示各成分溶于净化水中,得到各样品。将得到的各样品在制备后立即测定酶含量,并在于30℃保存7天后测定酶含量。剩余活性(%)按下式计算。结果见表1。
剩余酶活性(%)= (于30℃保存7天的酶活性)/(制得样品当时的酶活性) ×100
如表1所示,将表面活性剂加到含蛋白酶的溶液中可显著改善该蛋白酶的稳定性。将硬接触透镜浸入各样品(样品1-12)中7天。结果未观察到细菌显著发育,而且使该硬接触透镜的湿润度得以保持。
实施例2
Bioprase 1200单位
月桂酰肌氨酸钠 0.03g
月桂基二甲氨基乙酸甜菜碱(35%) 0.05g
月桂酰基-L-谷氨酸三乙醇胺(30%) 0.1g
硼酸 0.03g
硼酸钠 0.018g
乙二胺四乙酸钠 6mg
Chlorohexydine glaconate 0.3mg
硫代硫酸钠 0.015mg
将净化水(6ml)加至以上组成的冻干制剂中并将该混合物静置5秒钟。结果,该制剂被令人满意地溶解了。得到无色、澄清的液体组合物。将得到的样品于室温静置7天,并按实施例1测定剩余酶活性。结果发现剩余酶活性为93.9%,而且该液体组合物对类脂和蛋白质污垢显示出优良的清洁作用。此外,未观察到细菌显著发育。
实施例3
Bioprase 1200单位
月桂酰肌氨酸钠 0.03g
月桂基二甲氨基乙酸甜菜碱(35%) 0.05g
月桂酰基-L-谷氨酸三乙醇胺(30%) 0.1g
硼酸 0.03g
硼酸钠 0.018g
乙二胺四乙酸钠 6mg
对羟基苯甲酸甲酯 6mg
硫代硫酸钠 0.015mg
按与实施例2相同的方法制备液体组合物,并对其进行与实施例2相同的试验。结果,剩余活性为95.1%,且该液体组合物显示出对类脂和蛋白质污垢具有优良的清洁作用。此外,未观察到细菌显著发育。
实施例4
Bioprase 1200单位
聚乙二醇40硬脂酸酯 0.03g
月桂酰基-L-谷氨酸三乙醇胺(30%) 0.1g
盐酸烷基二氨乙基甘氨酸 0.6mg
硼酸 0.03g
硼酸钠 3mg
乙二胺四乙酸钠 0.6mg
将以上成分溶于6ml净化水中,得到含蛋白酶的接触透镜用处理剂。对获得的样品进行与实施例2相同的试验,得到更佳的效果。
本发明的稳定含蛋白酶的接触透镜用处理剂的方法使用于含蛋白酶的接触透镜用处理剂的蛋白酶在液体中得以稳定保存。此外,用含蛋白酶的接触透镜用处理剂的单一溶液可同时进行清洁、灭菌和保存。本发明处理剂仅通过将接触透镜浸入液体形式的处理剂中就能够有效地去除污垢。因此,本发明处理剂通过简单处理就能很容易地被有利使用,本发明的制备含蛋白酶的接触透镜用冻干处理剂的方法使蛋白酶在生产过程中能够稳定进入冻干制剂中,因而提供在蛋白酶活性方面优越的含蛋白酶的接触透镜用处理剂。此外,本发明的含蛋白酶的接触透镜用冻干处理剂能使所述蛋白酶保持稳定,并在溶解性方面极佳。当以水溶液形式保存时,该蛋白酶的稳定性由于其中所所含的表面活性剂的作用可以被长时间保持。
Claims (13)
1、稳定包含蛋白酶的接触透镜用处理剂的方法,它包括将表面活性剂加至该处理剂中。
2、权利要求1的方法,其中,表面活性剂是至少一种选自阴离子表面活性剂、两性表面活性剂和非离子表面活性剂的表面活性剂。
3、权利要求1或2的方法,其中表面活性剂以0.01-10(W/V)%的比例被包括。
4、权利要求1至3之任一方法,其中,蛋白酶以10-5000单位/ml的浓度被包括。
5、权利要求1至4之任一方法,其中,蛋白酶是来自属于杆菌属的微生物的Bioprase。
6、权利要求1至5之任一方法,它是用于硬接触透镜的。
7、制备包含蛋白酶的接触透镜用冻干处理剂的方法,它包括将含所述蛋白酶的水性组合物在表面活性剂存在下冻干。
8、权利要求7的方法,其中,冷冻在-40℃至-10℃的温度下进行。
9、权利要求7的方法,其中,冷冻后干燥在不高于40℃温度进行。
10、权利要求7的方法,其中,表面活性剂是至少一种选自阴离子表面活性剂、两性表面活性剂和非离子表面活性剂的表面活性剂。
11、权利要求7的方法,其中表面活性剂以0.01-10(W/V)%的比例被包括。
12、包含蛋白酶和表面活性剂的接触透镜用冻干处理剂。
13、权利要求12的处理剂,其中,表面活性剂是至少一种选自阴离子表面活性剂、两性表面活性剂和非离子表面活性剂的表面活性剂。
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