CN110123743A - L-多巴、多巴脱羧酶抑制剂、儿茶酚-o-甲基转移酶抑制剂及其组合物的连续施用 - Google Patents

Abstract

本申请涉及L‑多巴、多巴脱羧酶抑制剂、儿茶酚‑O‑甲基转移酶抑制剂及其组合物的连续施用。本文部分提供在需要其的患者中治疗神经或运动病症的方法以及在所述公开的方法中可使用的组合物，所述方法包括向所述患者皮下施用包含左旋多巴和任选的卡比多巴和任选的恩他卡朋或托卡朋，或其药学上可接受的盐的药学上可接受的组合物，其中基本上连续施用所述组合物。

Description

L-多巴、多巴脱羧酶抑制剂、儿茶酚-O-甲基转移酶抑制剂及 其组合物的连续施用

本申请是中国发明专利申请201180064894.5的分案申请。母案的申请日是2011年11月15日，发明名称为L-多巴、多巴脱羧酶抑制剂、儿茶酚-O-甲基转移酶抑制剂及其组合物的连续施用。

技术领域

本发明提供用于治疗诸如帕金森氏病的神经或运动病症的药物组合物，以及通过基本上连续皮下施用所述组合物来治疗这些病症的方法。

背景

帕金森氏病是退行性疾患，其特征在于脑中神经递质多巴胺浓度降低。左旋多巴(L-多巴或L-3,4-二羟基苯丙氨酸)是多巴胺的中间代谢前体，不同于多巴胺，左旋多巴能够穿透血脑屏障，并且最常用于恢复脑中多巴胺浓度。在过去40年中，左旋多巴一直是治疗帕金森氏病的最有效疗法。

然而，左旋多巴在血浆中具有短暂半衰期，即使在最常见护理现行标准下，它也导致脉动的多巴胺能刺激。因此，长期治疗导致运动波动(motor fluctuation)和运动障碍，它们能代表一些患者非常无力的原因。可以更连续以及生理学方式最终递送左旋多巴/多巴胺至脑中的治疗策略提供具有减少运动并发症的标准左旋多巴的益处，并且患有帕金森氏病和其他神经或运动病症的患者非常需要这种治疗方法(Olanow CW；Mov.Dis.2008,23(增刊3):S613-S622)。已经开发出持续释放的口服左旋多巴配制物，但是据发现，这些制剂在最好情况下也不比标准片剂效果好。通过使用移动式泵或贴剂也尝试通过十二指肠内施用或输注来连续施用左旋多巴。这些治疗，尤其是十二指肠内治疗极具侵害性，也不方便。

左旋多巴至多巴胺的代谢转化通过芳香L-氨基酸脱羧酶来催化，芳香L-氨基酸脱羧酶是在肠粘膜、肝脏、脑和脑毛细血管中具有特别高浓度的普遍存在的酶。因为左旋多巴可能脑外代谢，所以必须施用大剂量的左旋多巴来得到高脑外浓度的多巴胺，这导致一些患者恶心。因此，通常与口服施用诸如卡比多巴或苄丝肼的多巴脱羧酶抑制剂同时施用左旋多巴，这减少临床反应需要的60-80％的左旋多巴剂量，并且因而通过抑制脑外的左旋多巴至多巴胺转化来避免其某些副作用。连同与左旋多巴的代谢降解相关的酶抑制剂的各种口服配制物是众所周知的，例如，脱羧酶抑制剂，例如卡比多巴和苄丝肼；儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)抑制剂，例如恩他卡朋和托卡朋；以及单胺氧化酶(MAO)-A或MAO-B抑制剂，例如吗氯贝胺、雷沙吉兰或司来吉兰或沙芬酰胺(safinamide)。当前市售口服药物包括包含卡比多巴或左旋多巴的和CR持续释放片剂；含有卡比多巴、恩他卡朋和左旋多巴的片剂；以及含有左旋多巴和苄丝肼的片剂。存在对可作用于L-多巴的持续刺激以更有效地治疗诸如帕金森氏病的运动病症的方法和组合物的持续和紧迫需求。然而，尚未得到例如在适于皮下或透皮递送的体积中具有有效浓度的稳定液体配制物。

发明概要

本公开通常部分涉及药学上可接受的组合物，其包含1)含有卡比多巴和至少约4重量％的左旋多巴的活性组分；以及精氨酸和任选的葡甲胺。在25℃下这些组合物可具有约9.1至约9.8的pH。

在一些实施方案中，具有精氨酸的所公开的组合物可具有约1:1.8至约1:3.5，或约1:2.3的活性组分与精氨酸的摩尔比。在示例性实施方案中，所公开的组合物可包括约4重量％至约12重量％或更多的左旋多巴和/或可包括1重量％至约6重量％的卡比多巴，例如约1重量％至约2重量％的卡比多巴。

当葡甲胺存在于所公开的组合物时，活性组分与精氨酸的摩尔比可以为例如约1:1.1至约1:1.9，以及活性组分与葡甲胺的摩尔比可以为约1:0.3至约1:1.5，例如，活性组分与葡甲胺的摩尔比可以为约1:0.3至约1:1.2，或例如约1:0.4，或约1:1.1。这些所涵盖的组合物可包括约2.0重量％至约11重量％的葡甲胺。如上所涵盖的组合物可包括10％至约35重量％的精氨酸。

所公开的组合物可进一步包含抑制氧化产物形成的试剂，例如，这些试剂可选自：抗坏血酸、抗坏血酸钠、L-半胱氨酸、N-乙酰半胱胺酸(NAC)、谷胱甘肽(GSH)、Na₂-EDTA、Na₂-EDTA-Ca及其组合。例如，在示例性实施方案中，本文公开的药学上可接受的组合物可进一步包括抗坏血酸或其药学上可接受的盐。在另一或进一步实施方案中，所公开的组合物可包含亚硫酸氢钠。

本文涵盖例如药学上可接受的组合物，其包含左旋多巴、精氨酸和任选的葡甲胺；和抗坏血酸或其药学上可接受的盐，例如组合物可具有约4％至约12重量％的左旋多巴。抗坏血酸盐可例如选自：抗坏血酸盐、抗坏血酸钠、抗坏血酸钙、抗坏血酸钾、抗坏血酸棕榈酸酯和抗坏血酸硬脂酸酯。例如，公开的药学上可接受的组合物可包括抗坏血酸或其药学上可接受的盐(为抗坏血酸钠)，例如，约0.25重量％或更多抗坏血酸或其药学上可接受的盐、约0.2重量％至约3重量％的抗坏血酸或其药学上可接受的盐或者约0.5重量％至约1重量％的抗坏血酸或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，涵盖的药学上可接受的组合物可具有约1:1.8至约1:3.5，例如约1:2.3的左旋多巴与精氨酸的摩尔比。

这些涵盖的组合物可进一步包含卡比多巴，在一些实施方案中，例如，1％至约2重量％的卡比多巴。在这样的实施方案中，左旋多巴连同卡比多巴与精氨酸的摩尔比可以为约1:1.8至约1:3.5，例如约1:2.3。在25℃下这些药学上可接受的组合物可具有约9.1至约9.8的pH。

在室温下所涵盖的组合物和本文公开的配制物可以为液体。在一些实施方案中，公开的药学上可接受的组合物可进一步包含恩他卡朋或托卡朋。

公开的药学上可接受的配制物在25℃±5℃下可稳定至少两周，和/或例如，在-20℃±5℃下可稳定至少两个月。

在实施方案中，本文涵盖的透皮贴剂适于施用公开的药学上可接受的组合物。

本文也提供在需要其的患者中治疗诸如帕金森氏病的神经或运动病症的方法，其包括向所述患者施用本文公开的组合物，例如左旋多巴和/或卡比多巴的液体组合物。在一个实施方案中，本文也提供治疗诸如神经病症，或者特征在于患者脑中多巴胺水平降低的病症，和/或诸如帕金森氏病的病症的疾病或病症的方法，其中该方法包括施用(例如基本上连续施用)所公开的组合物。在实施方案中，连续施用可包括透皮、皮内、皮下、静脉内、鞘内、硬膜外、颅内或十二指肠内施用，例如可包括使用输注泵。这些方法可进一步包括口服施用左旋多巴和/或卡比多巴和任选的恩他卡朋或托卡朋。

可皮下和/或例如基本上连续施用所公开的组合物。这些皮下施用可包括使用一种或多种输注泵和/或透皮和/或皮肤贴剂。例如，本公开的方法可包括在白天或患者活动期间所公开的组合物的施用速率至少约0.01ml/小时至约0.2ml/小时，或至少约0.07ml/小时，或例如约0.15ml/小时；以及在休息或睡眠时约0至约0.075 0.25ml/小时。可选择地，可十二指肠内或静脉内施用所公开的组合物。

在一些实施方案中，静脉内施用的方法包括使用一种或多种输注泵，例如，在白天或患者活动期间组合物的施用速率为约0.20ml/小时至约2.0ml/小时、例如，约1.0±0.5ml/小时，或约1.25±0.5ml/小时；以及在晚上或休息时约0至约0.5ml/小时。

本文也提供用于治疗神经或运动病症的药学上可接受的组合物，其包含(i)卡比多巴、至少4重量％的左旋多巴、精氨酸和任选的葡甲胺；或者(ii)左旋多巴、精氨酸、任选的葡甲胺和抗坏血酸或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，神经或运动病症是帕金森氏病。

在实施方案中，本文公开药学上可接受的配制物，其包含约2.5至约7重量％的左旋多巴、约0至约2重量％的卡比多巴、约5至约18重量％的精氨酸和约0.25％至约3重量％的抗坏血酸或其药学上可接受的盐。

在实施方案中，涵盖包含约8至约12重量％的左旋多巴、约1至约3重量％的卡比多巴、约15至约35重量％的精氨酸的药学上可接受的配制物。在另一实施方案中，提供包含约8至约12重量％的左旋多巴、约1至约3重量％的卡比多巴和约12至约15重量％的精氨酸和约3％至约10重量％葡甲胺的药学上可接受的配制物。这些组合物可进一步包含约0.25-3重量％的抗坏血酸。

本文也提供药学上可接受的液体组合物，其包含精氨酸和至少约7重量％的恩他卡朋或托卡朋，例如至少约8重量％，或至少约10重量％，或约7重量％至约12重量％的恩他卡朋或托卡朋。例如，所公开的组合物可具有约1:0.5至约1:2.5，例如约1:1至约1:1.5的恩他卡朋或托卡朋与精氨酸的摩尔比。在25℃下这些液体组合物可具有约6至约9的pH，和/或在25℃下可基本上稳定48小时或更久。

在实施方案中，本文提供制备包含左旋多巴和/或卡比多巴和精氨酸的稳定液体溶液的方法，其包括：

提供左旋多巴和/或卡比多巴和精氨酸以形成粉末混合物；

加水至所述粉末混合物以形成混悬液；

在约40℃至约90℃的温度下加热所述混悬液以形成溶液；以及

冷却所述溶液以提供稳定液体组合物。在一些实施方案中，其中加热所述混悬液进一步包括搅拌混悬液。

本公开至少部分涉及以下发现：精氨酸可形成卡比多巴，和/或左旋多巴和/或恩他卡朋，或托卡朋的盐，该盐可用于形成适于例如连续皮下、透皮、皮内、静脉内和/或十二指肠内施用的稳定液体配制物。这些所公开的组合物能够基本上连续向需要其的患者施用卡比多巴、恩他卡朋、托卡朋和/或左旋多巴。例如，本文公开与以下公开发现相关的组合物：连同基本上连续施用左旋多巴和任选的恩他卡朋或托卡朋来基本上连续施用诸如卡比多巴的多巴脱羧酶抑制剂可基本上连续刺激L-多巴，并因而例如延长左旋多巴口服给药方案的效果和/或降低左旋多巴的日剂量或者消除口服左旋多巴的需求，同时有效地治疗诸如帕金森氏病的运动和/或神经病症。

附图简述

图1示出卡比多巴对体外和离体左旋多巴稳定性的作用：A.体外测试具有各种浓度(2、1.5、1、0.5％)的卡比多巴或没有卡比多巴的6重量％左旋多巴和精氨酸溶液的物理稳定性。结果显示：在空气存在下卡比多巴以剂量相关方式(右侧小瓶)防止形成暗黄色，并且在没有空气下(在容器中液面上部空间为N₂)，0.5％卡比多巴足以抑制该颜色形成(在图左侧中大瓶)。B.将具有或没有2重量％的卡比多巴的7重量％左旋多巴和精氨酸溶液连续施用至5x5cm新生、全层猪皮肤的皮下组织。右侧示出使用包含卡比多巴的左旋多巴配制物对氧化的抑制。

图2示出在左旋多巴溶液中1％卡比多巴的存在降低猪中局部左旋多巴依赖性皮下毒性的严重性和程度。

图3示出卡比多巴对猪中左旋多巴的药物代谢动力学的作用。A:在连续皮下施用具有各种量的卡比多巴的6％左旋多巴之后左旋多巴的血浆浓度。B:在进行连续皮下施用左旋多巴/卡比多巴配制物获得的左旋多巴的血浆稳态浓度与卡比多巴的配制物浓度之间的相关性。C.在进行连续皮下施用左旋多巴/卡比多巴配制物之后卡比多巴的血浆稳态浓度与卡比多巴的配制物浓度之间的相关性。

图4显示在皮下施用左旋多巴/卡比多巴配制物之后在猪皮肤样品的皮下组织中各种试剂对左旋多巴氧化的作用。

图5A示出在对猪口服施用信尼麦(Sinemet)(100/25左旋多巴卡比多巴)之后连续皮下(SC)恩他卡朋(200mg/24h)和/或卡比多巴(CD)(40mg/24h)对左旋多巴(ng/ml)的血浆浓度的作用。

图5B示出在对猪口服施用信尼麦(100/25)之后连续SC CD(40mg/24h)和/或左旋多巴(LD)(140mg/24h)施用对左旋多巴的血浆浓度的作用。

图6显示在猪中以0.16ml/h 24h-连续皮下施用之后卡比多巴对左旋多巴的局部皮下毒性的作用。

发明详述

在实施方案中，本文公开包含左旋多巴的精氨酸盐(例如，精氨酸和左旋多巴)和任选的卡比多巴的液体组合物，其在室温下稳定。这些所公开的组合物可便于向患者以最小侵害性的方式连续递送有效量的左旋多巴、卡比多巴和/或诸如恩他卡朋或托卡朋的其他活性剂。而且，公开的配制物具有适合例如透皮、皮下、静脉内、鞘内、硬膜外、颅内或十二指肠内施用的pH。

例如，本文提供一旦施用能够获得对COMT活性的基本上恒定抑制的配制物和方法，从而增加施用的左旋多巴的半衰期和基本上降低左旋多巴血浆水平的脉动性以避免血浆左旋多巴的低谷水平。

而且，本文提供左旋多巴和任选的卡比多巴的配制物，其出人意料地使得在例如可接受的pH下可稳定地溶解高浓度(例如，大于2重量％)的左旋多巴用于例如基本上连续皮下或透皮施用。这些配制物也适于静脉内、皮肤内、口服或十二指肠内施用。例如，本文提供能够获得基本上恒定血浆左旋多巴浓度和基本上降低左旋多巴血浆水平的脉动性以避免血浆左旋多巴的低谷水平的配制物和方法。

依照本发明的连续左旋多巴和卡比多巴(和/或恩他卡朋或托卡朋)施用的治疗策略可基本上连续刺激L-多巴。例如，本发明的治疗和/或方法可延长左旋多巴口服给药方案至约2至约3次/天，和/或降低左旋多巴的日剂量，和/或降低或者甚至消除左旋多巴和卡比多巴的口服给药。

组合物

在实施方案中，本文提供包含左旋多巴的精氨酸盐的液体配制物，或者包含精氨酸和左旋多巴的液体配制物。在实施方案中，本文提供包含约1:1.5至约1:2.5的摩尔比的左旋多巴与精氨酸，或者约1:2至约1:2.3左旋多巴：精氨酸的液体配制物，或者，例如，这些液体组合物进一步包含约1:2至约1.3.5的摩尔比的卡比多巴，或者约1:1.8至约1:3.5卡比多巴：精氨酸。

这些左旋多巴和精氨酸配制物或者溶液可具有用于皮下施用的药学上可接受的pH，例如，在25℃下约8至约10的pH，例如，约9.1至约9.8，例如9.2至9.6。具有左旋多巴和精氨酸的所公开的配制物可包含至少约7重量％、8重量％、9重量％，或更多的左旋多巴；例如，可包含约10重量％、20重量％或更多的左旋多巴。在一些实施方案中，所公开的配制物可包含约2.5至约10重量％的左旋多巴、4至约7重量％的左旋多巴，或者约7.5至约12重量％的左旋多巴，或者约5％至约30％，或约10至约20重量％的左旋多巴，以及可进一步包含约9至约20重量％的精氨酸或者约9至约30重量％的精氨酸，例如约10至约18重量％的精氨酸、约10至约20重量％或约15至约30重量％或更多精氨酸或者约12、13、14，或15重量％的精氨酸。例如，精氨酸可以1.5:1至约3:1、例如1.8:1至约3.5:1的精氨酸：总活性成分(其可包含例如左旋多巴、卡比多巴等)的摩尔比存在于涵盖的配制物中。

例如，本文公开在25℃下具有约9.1至约9.8的pH的药学上可接受的组合物，其包含活性组分左旋多巴和卡比多巴(例如约4重量％或更多的左旋多巴)，以及精氨酸和/或葡甲胺。例如，具有左旋多巴和精氨酸的所涵盖的组合物可进一步包含卡比多巴，例如，可进一步包含至少约1％、至少约2％、至少约4重量％的卡比多巴，例如约2％至约4重量％的卡比多巴。例如，本文提供包含精氨酸和约2％至约12重量％的左旋多巴或更多(例如约4％至约10％、约4％至约7％、约5％至约10％，或约6％至约11重量％的左旋多巴，或者约5％至约20重量％的左旋多巴)以及约1％至约6％、约1％至约2％(例如约1.25或约1.5％)，或约2％至约5％或者约2％至约4重量％的卡比多巴的组合物。当皮下和/或皮肤上施用时，例如与皮下或皮肤上施用仅包含左旋多巴的组合物(左旋多巴/精氨酸组合物)相比，具有左旋多巴和卡比多巴的这些组合物可导致最小局部组织损伤。而且，当进一步包含卡比多巴时，如与仅具有左旋多巴和精氨酸的组合物相比，这些左旋多巴和精氨酸组合物可具有更好的稳定性(例如一段时间内可不形成不期望的氧化产物)。

在另一实施方案中，所公开的配制物可包含氨基糖，例如葡甲胺，其可例如取代在配制物中存在的一些或所有精氨酸。例如，本文公开包含左旋多巴和/或卡比多巴以及葡甲胺的配制物。本文也涵盖左旋多巴的葡甲胺盐和卡比多巴的葡甲胺盐。在实施方案中，组合物包含精氨酸和具有诸如左旋多巴和卡比多巴的活性剂，其中活性剂与精氨酸的摩尔比小于约1:2；以便改善这些组合物的稳定性，该示例性组合物可进一步包含例如具有约1:0.3至约1.1.5的活性剂与葡甲胺的比例的葡甲胺。例如，本文提供具有左旋多巴或卡比多巴(或组合)作为活性组分、精氨酸，以及葡甲胺的组合物，其中活性组分与精氨酸的摩尔比为约1:1.1至约1:1.9(例如1:1.3)并且活性组分与葡甲胺的摩尔比为约1:0.3至约1:1.2(例如约1:0.4、1:0.5、1:0.8、1:1.1)的摩尔比。所涵盖的组合物可包含左旋多巴(例如约4至约10重量％或更多)、卡比多巴(例如约0.5至约3重量％，例如约1或2重量％)、约9％至约16重量精氨酸，以及约2％至约10重量％的葡甲胺。

在实施方案中，本文也提供包含左旋多巴、精氨酸，和/或卡比多巴，以及任选的例如抑制氧化产物形成的试剂的配制物。这些配制物可以为在室温下具有约9.1至9.8的pH的液体。例如，本文提供包含抗坏血酸或其盐的组合物。

在实施方案中，所公开的组合物可进一步包含抑制氧化产物形成的一种或多种试剂。这些试剂可以为例如酪氨酸酶抑制剂和/或邻醌净化剂和/或Cu⁺⁺螯合剂和/或抗氧化剂。在一些实施方案中，卡比多巴可用作抑制氧化产物形成的试剂。例如，所涵盖的配制物可包含邻醌净化剂，例如但不限于N-乙酰半胱氨酸、谷胱甘肽、抗坏血酸、抗坏血酸钠，和/或L-半胱氨酸。在实施方案中，配制物可包含选自酪氨酸酶抑制剂中一种或多种的试剂：例如卡托普利；甲巯咪唑；槲皮素；熊果苷；芦荟苦素；N-乙酰葡糖胺；视黄酸；α-生育酚阿魏酸酯；MAP(抗坏血酸磷酸酯镁)；底物类似物(例如，苯甲酸钠、L-苯丙氨酸)；Cu⁺⁺螯合剂，例如Na₂-EDTA、Na₂-EDTA-Ca、DMSA(二巯丁二酸)、DPA(D-青霉胺)、盐酸曲恩汀、二巯基丙醇、氯碘羟喹、硫代硫酸钠、TETA、TEPA、姜黄素、新亚铜试剂、单宁，和/或双环己酮草酰二腙(cuprizone)。可形成所公开的配制物的一部分的其他涵盖的抗氧化剂包含亚硫酸盐(例如，亚硫酸氢钠或焦亚硫酸钠)、二叔丁基甲基酚、叔丁基甲氧基苯酚、多酚、生育酚和/或包括但不限于咖啡酸的泛醌。

在特定的实施方案中，本文提供包含左旋多巴、卡比多巴、精氨酸、任选的葡甲胺，以及抗坏血酸或其药学上可接受的盐的组合物。例如，所涵盖的组合物可进一步包含抗坏血酸盐、抗坏血酸钠、抗坏血酸钾、抗坏血酸钙、抗坏血酸硬脂酸酯，和/或抗坏血酸棕榈酸酯。例如，组合物可包含约0.5重量％或更多(例如，约0.5至约3重量％，或约0.2至约2％或者约0.5至约1重量％，例如约0.75重量％)的抗坏血酸或其盐。

在实施方案中，本文提供使得可基本上连续施用恩他卡朋或托卡朋的包含恩他卡朋(或托卡朋)，以及精氨酸的药学上可接受的配制物。例如，本文提供例如包含恩他卡朋或托卡朋的稳定的液体配制物，以及可适于向患者基本上连续施用。而且，这些配制物可具有生理上可接受的pH，例如，约6至约9.5，或约6.5至约8.5，或者约7至约8。

例如，可将恩他卡朋(或托卡朋)和精氨酸溶解在水性溶液中，(例如，在25℃下或在30℃下具有约6至9的pH，例如，约6.5至约8.5，例如，约7至8)。可选择地，将恩他卡朋(游离碱)(或托卡朋(游离碱))和碱性氨基酸盐(如精氨酸和/或赖氨酸)一起溶解在液体(例如水性液体)中以形成公开的液体配制物。所公开的液体配制物可包含约2重量％的恩他卡朋或托卡朋、约4重量％的恩他卡朋或托卡朋，或约2重量％至约12重量％的恩他卡朋或托卡朋，例如，可包含约7重量％或更多、约8重量％或更多，或者约10重量％或更多的恩他卡朋或托卡朋；例如，可包含约3％至约20重量％或更多的恩他卡朋或托卡朋，例如，约5％至约8重量％、约8％至约12重量％的恩他卡朋或托卡朋。例如，液体配制物可包含约1:0.5至约1:2.5，或者约1:1至约1:2，例如，约1:1或1:1.5的摩尔比的恩他卡朋与碱性氨基酸(例如精氨酸)。这些液体配制物可进一步包含卡比多巴，例如，至少约2重量％或至少约4重量％的卡比多巴，例如约2重量％至约6重量％或者更多的卡比多巴。在另一实施方案中，这些液体配制物可进一步包含左旋多巴，例如，至少约2％、3％、4％、5％、6％，或7重量％的左旋多巴，例如约2.5％至约12重量％的左旋多巴。在示例性实施方案中，包含托卡朋或恩他卡朋的组合物可进一步包含诸如α、β或γ环糊精或衍生物的赋形剂。

在25℃下所公开的液体配制物(例如包含左旋多巴、卡比多巴、恩他卡朋、托卡朋，或者两种或多种的组合的液体组合物)和精氨酸(和/或葡甲胺)，例如，包含左旋多巴和精氨酸的所公开的配制物可稳定24小时、48小时、7天，或更久。例如，示例性液体配制物可包含约1:1的摩尔比的恩他卡朋：精氨酸(或者托卡朋：精氨酸)，其具有约5％至约15％，或约6％至约12％，或6％至约10重量％的恩他卡朋。在一些实施方案中，如与包含恩他卡朋的赖氨酸或组氨酸盐的液体组合物相比，这些恩他卡朋、精氨酸液体配制物可以更加稳定，为7天。在实施方案中，在室温下，例如在20℃至30℃下，例如在25℃下，包含左旋多巴和精氨酸的所公开的配制物可以稳定至少一周，或至少两周或更久。在实施方案中，在低于冰冻的温度下，例如在-10℃下和/或在-20℃下、在-18℃下，或者例如在-20至-80℃下，包含左旋多巴和精氨酸的所公开的配制物可以稳定至少一个月，或至少两个月。在此背景下，术语“稳定”是指在大部分时间内配制物没有显著沉淀出溶液和/或一种或多种活性剂没有显著降解。

在一些实施方案中，所公开的液体配制物或组合物是液体溶液，即基本上均质液体混合物。这些液体混合物可包含水和/或其他药学上可接受的赋形剂。在另一实施方案中，所公开的液体组合物可以为基本上非水性。

在一些实施方案中，在室温下所公开的液体配制物稳定1天、2天、3天、1周，或1个月或更久时间段。在本发明的实施方案中，所公开的液体配制物进一步包含药学上可接受的赋形剂，例如，N-甲基吡咯烷酮(NMP)，或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、EDTA(或其盐)半胱氨酸、N-乙酰半胱胺酸和/或亚硫酸氢钠。

例如，在一个实施方案中，本文提供稳定液体配制物，其包含约4％至约12重量％的左旋多巴，和/或卡比多巴(例如约1％至约6重量％，或约2％至约6重量％)和/或恩他卡朋或托卡朋(例如约7％至约12重量％)以及约1至约40重量％的精氨酸、约0至约10重量％的NMP、约0至约5重量％的PVP，和/或约0至约3.5重量％的一种或多种水溶性抗氧化剂。

本发明进一步提供包含左旋多巴、卡比多巴或恩他卡朋或者左旋多巴、卡比多巴或恩他卡朋的两种或多种的组合的精氨酸盐的稳定冻干粉末。在一个实施方案中，这些稳定冻干粉末可包含约20-99％的左旋多巴或恩他卡朋盐、约0-60％NMP、约0-15％PVP，以及约0-10％的一种或多种水溶性抗氧化剂。通过单独加入水或加入含NMP的水可将冻干粉末重新配成液体配制物，并且该冻干粉末可包含或不包含抗氧化剂。

在一些实施方案中，本文提供适于连续皮下施用的配制物，例如，其包含约4至约7重量％的左旋多巴、约1至约2重量％的卡比多巴，以及约10至约18重量％的精氨酸。在一些实施方案中，这些配制物可进一步包含约1重量％的抗坏血酸(或其药学上可接受的盐)，和/或任选的约0.2重量％的Na₂EDTA-Ca。

在另一实施方案中，提供适于十二指肠内或静脉内施用的配制物，其包含至少约8重量％的左旋多巴(例如8％至约12％)、至少约1.5重量％的卡比多巴(例如约1.5％至约3％)，以及至少约15重量％精氨酸(例如约15％至约30重量％，或者约15％至约20重量％)。这些配制物可包含约1重量％的抗坏血酸和约0.2重量％的Na₂EDTA-Ca。本文也提供适于十二指肠内或静脉内施用的配制物，其包含至少约8重量％的左旋多巴(例如8％至约12％)、至少约1.5重量％的卡比多巴(例如约1.5％至约3％)、至少约10％精氨酸或约12重量％的精氨酸(例如约10％至约15重量％，或约12％至约15重量％)、至少约3重量％的葡甲胺(例如约3％至约8％，或约3％至约5％)，以及任选的约1重量％的抗坏血酸(或其盐)，和/或用于连续十二指肠内或静脉内施用的任选的约0.2％Na₂EDTA-Ca。这些配制物可包含水。

可设计本发明的液体配制物用于向需要其的患者连续施用恩他卡朋、托卡朋、卡比多巴和/或左旋多巴。例如，可向患者基本上连续施用(例如皮下、透皮、十二指肠内、皮内，或静脉内)包含含有精氨酸和恩他卡朋的公开的恩他卡朋组合物的配制物，而例如在不同装置，或在相同装置中单独的隔室中也通过相同装置单独的组合物，或在相同组合物中基本上连续施用卡比多巴、卡比多巴盐，或者包含卡比多巴的组合物，和/或在间隔时间段下口服任选的左旋多巴和/或卡比多巴，例如，2、3、4，或5次/天。

如在说明书中本文所使用，术语“包含左旋多巴的组合物”或者“左旋多巴组合物”涵盖包含左旋多巴、任选连同脱羧酶抑制剂、儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)抑制剂，和/或MAO-A或MAO-B抑制剂的配制物。例如，包含左旋多巴的组合物包含剂量配制物(包含左旋多巴(或其盐)和任选的另一药物)，其中剂量配制物可以为适于口服的立即释放、控制释放、双释放或多释放配制物。

术语“脱羧酶抑制剂”是指多巴脱羧酶抑制剂，例如，通过芳香L-氨基酸脱羧酶抑制左旋多巴至多巴胺的外周代谢的药物，例如卡比多巴和苄丝肼。

运动病症是指导致异常自主或非自主运动，或运动变缓、运动减少的神经系统疾患。

神经病症是身体的神经系统的病症。

如本文所使用的术语“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”是指与药物施用相容的任意和所有溶剂、分散介质、防腐剂、抗氧化剂、涂料、等张和吸收延缓剂等。药物活性物质的这些介质和试剂的使用是本领域众所周知的。组合物也可含有提供补充、另外，或增加的治疗功效的其他活性化合物。

“药学或药理上可接受”包括当视情况向动物，或人施用时不会产生有害、过敏或其他不利反应的分子实体和组合物。对于人施用，制剂应当符合例如美国食品和药品管理局生物办公室(U.S.FDA Office of Biologics)标准所要求的无菌、致热原性、一般安全性和纯度标准。

如本文所使用的术语“药物组合物”是指包含连同一种或多种药学上可接受的载体一起配制的如本文所公开的至少一种活性剂的组合物。

术语“生理上可接受的pH”理解为表示在没有显著副作用下便于向患者施用组合物的组合物pH，例如约4至约9.8的pH(例如，约4±0.3至约9.5±0.3)。

COMT抑制剂是指通过儿茶酚-O-甲基转移酶抑制左旋多巴的3-甲基多巴的降解以及延长左旋多巴的作用的抑制剂，例如恩他卡朋或托卡朋。例如，本文涵盖的包含左旋多巴的组合物也可包含脱羧酶抑制剂(卡比多巴或苄丝肼)和恩他卡朋，例如“三联疗法”。

MAO-A或MAO-B抑制剂防止多巴胺通过单胺氧化酶降解，例如，吗氯贝胺、雷沙吉兰、司来吉兰或沙芬酰胺，例如，雷沙吉兰。

试剂盒和装置

本文部分涵盖适于透皮或皮下施用包含如本文公开的组合物的活性剂的透皮贴剂，例如，其可包含含有如本文公开的左旋多巴和卡比多巴，以及精氨酸的组合物，以及包含卡比多巴和/或左旋多巴的任选的组合物。这些贴剂可具有一个或多个隔室(compartment)，其可具有相同或不同组成，例如，一个隔室可具有所公开的配制物以及另一具有不同的所公开的配制物，或者不同的活性配制物。透皮贴剂是指能够递送一种或多种构成所公开的组合物的活性剂通过皮肤或粘膜至患者血流内的任何装置。

本文也涵盖试剂盒，其包括：a)包含含有卡比多巴和精氨酸的所公开的组合物的第一配制物，其中所述第一配制物适于连续(例如皮肤上或皮下)施用；任选地b)包含左旋多巴或者左旋多巴的精氨酸盐的第二配制物，其中第二配制物适于连续施用；任选地c)包含恩他卡朋和精氨酸的第三配制物，其中第三配制物适于连续施用，和/或任选地d)包含托卡朋和精氨酸的第四配制物，其中第四配制物适于连续施用，任选地e)包含左旋多巴和任选的卡比多巴的第五配制物，其中所述第五配制物适于皮下施用；和/或任选地f)包含左旋多巴和/或任选的卡比多巴的第六组合物，其中所述第六配制物适于口服；以及g)用于施用至少一种配制物a)-f)的说明书。配制物a)-e)可适于通过任何合适的途径来连续施用，例如透皮、静脉内、皮下、皮内、肌肉内或十二指肠内。

在实施方案中，第一配制物包含公开的卡比多巴盐并且适于皮下施用。所涵盖的试剂盒的第六配制物可包含左旋多巴、左旋多巴盐，或者包含左旋多巴的组合物，并且可作为任何合适的口服剂型存在，例如但不限于丸剂、片剂、可分散片剂、胶囊、液体等。在实施方案中，第四配制物可以为包含左旋多巴和苄丝肼，或左旋多巴和卡比多巴的立即释放、控制释放或双释放口服配制物的形式。在丸剂、片剂等中这些口服配制物可包含约1:10至1:4、优选约1:4至1:1的卡比多巴或苄丝肼与左旋多巴的比率。其他涵盖的第二配制物包括配制物，例如，包含左旋多巴、卡比多巴，以及恩他卡朋(或托卡朋)的片剂；或者例如包含左旋多巴精氨酸盐和/或卡比多巴精氨酸的片剂。

涵盖的试剂盒可包括左旋多巴精氨酸盐(和/或卡比多巴精氨酸盐)，或者具有左旋多巴、卡比多巴，和/或恩他卡朋(或组合)和精氨酸的液体组合物。这些组合物可以为可重新配制至液体配制物内的液体或冻干粉末；或者，例如，可形成透皮贴剂的一部分；以及可设计通过例如但不限于透皮、静脉内、皮下、皮内、肌肉内或十二指肠内的任何合适途径来连续施用。

在另一实施方案中，试剂盒包括适于但不限于透皮、静脉内、皮下、皮内、肌肉内、十二指肠内连续施用的包含卡比多巴和精氨酸(以及任选的左旋多巴和/或恩他卡朋或托卡朋)的第一液体配制物，以及以立即释放、控制释放或双释放口服配制物的形式的包含左旋多巴和卡比多巴的第二配制物和/或适于但不限于透皮、静脉内、皮下、皮内、肌肉内、十二指肠内连续施用的包含恩他卡朋和精氨酸(或者托卡朋和精氨酸)的第二液体配制物。

在一些实施方案中，所公开的液体组合物(例如包含左旋多巴、精氨酸和任选的卡比多巴)可在例如适于由患者或医生使用的预先填充的药盒中提供。例如，本文提供包括预先填充的药盒的试剂盒，其中将所公开的液体配制物设置在药盒(例如，具有单剂量或适于单次向患者施用左旋多巴和精氨酸溶液(和任选的卡比多巴)的剂量的预先填充的药盒)内，以及设置任选的使用说明书。

组合物的制备

通过将如上所公开的量的精氨酸和/或葡甲胺与左旋多巴和/或卡比多巴，以及任选的抗氧化剂混合可制备所公开的配制物或组合物以例如上形成粉末混合物。可将水加入混合物以形成混悬液。通过例如加入预热的水和/或通过放置混合物在热(例如72±5℃)水浴(例如约3、约5、约10分钟或更久(例如至多约10分钟))可将混悬液加热至约40至约100℃，或约60至90℃，例如72±5℃，从而形成溶液，可任选一边搅拌，并冷却溶液以形成组合物。可将N₂提供在容器的液面上部空间。例如，然后由热水浴中移除混合物，并冷却至室温，然后例如在N₂气氛和随后搅拌下此后立即加入任选的抗氧化剂。例如，如与成分和后来组合的单独的水混悬液的包括逐步制备的制剂相比，其中将左旋多巴、卡比多巴，以及精氨酸首先作为粉末混合至一起，并使用水形成混悬液，然后将其加热以上的制备可导致更加稳定的溶液。

使用0.2μΜ过滤器，例如具有尼龙或PVDF膜的过滤器可杀菌公开的配制物。在一些实施方案中，当同时存在卡比多巴和左旋多巴时和/或当使用某些抗氧化剂(例如抗坏血酸或其盐)而不是其他(例如亚硫酸氢钠)来制备时，公开的配制物的制备具有较少不期望的副产物(例如毒性副产物)或污染物(例如，肼)。在另一实施方案中，当将预热的水如上公开加入时，如与没有加入预热的水制备的配制物相比，公开的配制物的制备具有较少不期望的副产物。在另一实施方案中，除非使用公开的制备程序，左旋多巴和/或卡比多巴可能不溶解。如与没有加入热水或加热下制备的配制物相比，如上这些公开的制备可提供更加稳定的配制物。

治疗方法

在又一方面，本发明提供治疗诸如神经或运动病症的疾病或病症的方法，其包括基本上连续施用所公开的组合物，和/或施用包含左旋多巴的组合物(例如口服施用左旋多巴组合物或皮下施用例如所公开的左旋多巴组合物)，和任选地向需要其的患者基本上连续共同施用治疗有效量的包含脱羧酶抑制剂或其盐(例如包含卡比多巴和精氨酸)的组合物，任选连同基本上连续施用包含治疗有效量的COMT抑制剂(例如包含恩他卡朋和精氨酸的恩他卡朋组合物，或者包含托卡朋和精氨酸的托卡朋组合物)的例如本文公开的组合物。在一些实施方案中，所提供的方法可包括基本上连续施用包含例如卡比多巴和恩他卡朋或托卡朋的组合物，或者可包括基本上连续施用两种单独的组合物(例如，一种具有恩他卡朋或托卡朋，一种具有卡比多巴和/或左旋多巴)，例如本文公开的组合物。如在实施例中所显示，如与单独连续施用卡比多巴或恩他卡朋由本领域技术人员所预期的血浆水平相比较，连同连续施用卡比多巴和恩他卡朋来向患者施用左旋多巴可导致更高的左旋多巴血浆水平。

例如，本文提供治疗神经或运动病症的方法，其包括口服施用包含左旋多巴和/或卡比多巴的组合物，(以及任选地，口服施用包含COMT抑制剂的组合物)，并且还包括皮下施用例如本文公开的卡比多巴组合物，或者例如本文公开的包含左旋多巴和/或卡比多巴的组合物(并且其中左旋多巴和卡比多巴的皮下施用可以为单独的组合物或者包含左旋多巴和卡比多巴的组合物)。这些方法也可包括皮下施用左旋多巴和/或COMT抑制剂，其可以在不同配制物或在单一配制物中。

本文也提供治疗神经或运动病症的方法，其包括皮下或皮肤上基本上连续施用包含左旋多巴和任选的卡比多巴的组合物(例如液体组合物)(以及可包括任选地基本上施用包含卡比多巴的组合物)，甚至在没有间断(例如口服)服用左旋多巴下，其可足以维持左旋多巴的治疗血浆水平。在实施方案中，所涵盖的方法可包括基本上连续施用左旋多巴和卡比多巴，(在相同组合物或单独的组合物中)，例如其具有约10:1至约1:1的重量百分比的左旋多巴：卡比多巴。在实施方案中，所涵盖的方法可包括在有或没有卡比多巴和/或口服COMT抑制剂下基本上连续施用左旋多巴。

在一些实施方案中，以约0.07ml/小时，或例如约0.01ml/小时至约0.2ml/小时的速率可施用包含左旋多巴(例如公开的液体组合物)的组合物。这些速率可从白天到晚上均恒定或者根据患者的需求改变，例如，可反馈患者休息或睡眠时间表以及清醒或较大活动量水平时间表。例如，诸如本文所公开那些的液体组合物(例如包括左旋多巴)可以在早上(例如在清醒前约2-3小时)约0.15ml/小时、在白天或活动时间约0.1ml/小时(例如约10至约12小时)，和/或在休息或晚上约0.035ml/小时的速率施用。在另一实施方案中，例如本文公开那些的液体组合物(例如，包含左旋多巴的所公开的组合物)可以在白天或活动时间(例如醒来前约2-3小时以及此后约10至约12小时)以约1.0ml/小时，以及在休息或晚上以0至约0.5ml/小时的速率十二指肠内施用。在另一实施方案中，例如本文公开的液体组合物(例如包含左旋多巴和精氨酸)可以在白天或活动时间(例如清醒前后约2-3小时以及此后约10至约14小时)约1.25ml/小时(例如约1.25±0.5ml/小时)以及在休息或晚上以0至约0.5ml/小时(例如约0.5±0.25ml/小时)的速率施用。

按照本公开方法的诸如卡比多巴、恩他卡朋、托卡朋，和/或左旋多巴的所涵盖的施用通常可在规定的时间段内进行(取决于所选择的组合通常为数周、数月或数年)。所涵盖的治疗旨在部分包括多种治疗剂以以下方式施用，其中基本上连续施用多巴脱羧酶抑制剂和任选的COMT抑制剂(例如恩他卡朋或托卡朋)，而在不连续时间间隔下施用左旋多巴，以及以基本上同时方式施用所涵盖的治疗剂，或者治疗剂的至少两种(例如左旋多巴和卡比多巴，以及任选的恩他卡朋或托卡朋，或者左旋多巴和恩他卡朋或托卡朋)，可将其在相同组合物中施用或者例如，同时施用但作为不同组合物。通过包括但不限于口服途径、静脉内途径、粘膜内途径、皮内途径、皮下、透皮，以及通过粘膜组织直接吸收的任何合适的途径可作用于施用。

在一些实施方案中，如与施用例如所涵盖的卡比多巴配制物相比较，通过相同途径或通过不同途径可施用左旋多巴。例如，可皮下，例如，基本上连续施用卡比多巴，而例如在不连续时间段下可口服施用左旋多巴。在实施方案中，基本上连续施用所公开的液体卡比多巴组合物(例如具有卡比多巴和精氨酸)以及液体恩他卡朋组合物(例如具有恩他卡朋和精氨酸)，而在不连续时间段下施用包含左旋多巴的口服组合物(并且还可包含一种或多种其他活性剂，例如多巴脱羧酶抑制剂和/或COMT抑制剂)。可选择地，例如，可皮下或透皮施用左旋多巴和卡比多巴。在12小时、1天、1周或更久时间内可基本上连续施用所公开的组合物。

本文所涵盖的特征在于脑中多巴胺的水平下降的疾病或病症为神经或运动病症，其包括多动腿综合征、帕金森氏病、继发性帕金森氏综合征、亨廷顿舞蹈病(Huntington'sdisease)、希-德二氏综合征(Shy-Drager syndrome)以及由包括一氧化碳或锰中毒的脑损伤所致疾患。通过例如施用(例如，皮下)所公开的组合物来提供在需要其的患者中治疗这些病症的方法。在一个实施方案中，待治疗的疾病是帕金森氏病。

在实施方案中，通过皮下输注的泵(胰岛素泵)可以约10-250μl/小时，或者约160±40μl/小时连续24小时；约200±50μl/小时连续16小时(在清醒数小时中)以及在晚上(8小时，约0至80μl/小时或者通过透皮贴剂)的平均速率基本上连续施用例如液体配制物。在实施方案中，基本上静脉内或腹腔内连续施用例如液体配制物可以为约0.2-2ml/小时，或者约1±0.5ml/小时连续24小时；约1.0±0.5ml/小时连续16小时(在清醒数小时中)以及在晚上(例如8小时，通过泵或透皮贴剂，或者适于例如皮下、静脉内、鞘内，或通过十二指肠的递送装置的组合约0至0.5ml/小时)的平均速率。

现在对本发明进行基本描述，通过参照目的仅在于示意本发明的某些方面和实施方案、而不是旨在以任何方式限制本发明的以下例子更容易理解它。

实施例

实施例1:用于皮下施用的溶液/配制物的制备

A.通过加入预热的0.1％亚硫酸氢钠溶液至卡比多巴[ASSIA Ltd.]来制备2％卡比多巴溶液/配制物。将精氨酸[MERCK]加入以获得1:1.2CD(卡比多巴):arg(精氨酸)。将混合物在60℃下搅拌直至达到完全溶解。停止加热以及使得制剂可冷却至8.5的室温pH。使用0.22μΜPVDF膜来过滤溶液。

B.如下制备10％托卡朋溶液/配制物：通过加入适量的H₂O至托卡朋[SynfineResearch]、缓慢加入精氨酸同时搅拌以获得1:1的最终摩尔比来制备含有10％托卡朋的溶液。将混合物搅拌直至得到完全溶解。在冷却之后，溶液的pH为7.8。

C.通过加入适量的H₂O至恩他卡朋[Suven Life Sciences]，在30-35℃下搅拌以及缓慢加入精氨酸以获得1:1的最终摩尔比来制备含有10％恩他卡朋的溶液。将混合物搅拌直至得到完全溶解。在冷却之后，溶液的pH为6.9。浓度较低的溶液(6％)的pH为7.8。在制备之后，可将这些恩他卡朋溶液稀释至2重量％、3重量％或4重量％的配制物。

恩他卡朋不溶于(在>1％的浓度下)诸如组氨酸和谷氨酸的其他氨基酸或者各pH下的缓冲剂。

D.通过加入预热的0.1％亚硫酸氢钠溶液至精氨酸来制备7％左旋多巴/2％卡比多巴溶液。将左旋多巴加入以获得1:2LD:arg的最终摩尔比。将混合物在75-80℃下搅拌直至得到完全溶解。在冷却至60℃以下之后，将卡比多巴和精氨酸加入以得到1:1.2CD(卡比多巴):arg(精氨酸)的最终摩尔比。将混合物在60℃下搅拌直至得到完全溶解。在冷却之后，将约12.5％的更多的精氨酸加入溶液。溶液的pH为约9.2。

E.通过加入预热的0.1％亚硫酸氢钠溶液至精氨酸来制备7重量％的左旋多巴溶液。将左旋多巴加入以获得1:2LD:arg的摩尔比。将混合物在75-80℃下搅拌直至得到完全溶解。在冷却之后，溶液的pH为约9.4。

实施例2:配制物制备程序

可如下制备左旋多巴(LD)和卡比多巴(CD)配制物。然而，如在表A中所示，制备的方法对所得组合物的物理和化学稳定性具有重要影响。

方法#1(L-Arg溶液)：将L-Arg和Na-Bis(硫酸氢钠)溶解在水中。将溶液加入LD和CD粉末。在75℃下将混合物一边搅拌一边加热13min直至完全溶解。将LD/CD溶液保存在室温(RT)下10min以冷却。

方法#2(连同所有粉末)：称重所有粉末(LD、CD和L-Arg)以及将具有Na-Bis的水加入。在75℃下一边搅拌一边加热混悬液13min直至完全溶解。将LD/CD溶液保存在RT下10min以冷却。

方法#3(与#2相同，没有预先加热Na-Bis)：将所有粉末(LD、CD和L-Arg)一起称重以及将水加入。在75℃下一边搅拌一边加热混悬液13min直至完全溶解。将LD/CD溶液保存在RT下10min以冷却。

方法#4(制备步骤)：称重LD和适量的L-Arg；将水和Na-Bis溶液加入。在75℃下将混悬液加热7min直至全部溶解，随后在RT下7min。称重CD和适量的L-Arg，然后在60℃下加入LD-arg溶液直至完全溶解。最后，将额外的L-Arg加入。

方法#5(与#4相同，没有预先加热Na-Bis)：称重LD和适量的L-Arg；将水加入。在75℃下将混悬液加热7min直至完全溶解，随后在RT下7min。称重CD和适量的L-Arg，并在60℃下加入LD-arg溶液直至完全溶解。最后，将额外的L-Arg加入。

在冷却之后，将所有方法的所有配制物分装置3个小瓶内，并将水、Na-Bis溶液或Na-Bis-Arg溶液加入各小瓶。评估物理和化学稳定性以及表示在表Al和A2中：

表A1-物理稳定性：

-无沉淀 +沉淀

在制备结束和在RT下稳定5天之后取样配制物用于HPLC分析。与T＝0相比，计算在RT下5天之后的回收率。

表A2-化学稳定性

[1]与第一测试相比，第二测试的回收率值较低，这是由于在取样时出现的技术问题。[a]与第一测试相比，第二测试的回收率值较低，这是由于在取样时出现的技术问题。

在表Al和A2中结果明确显示：配制物制备的方法对它的物理和化学稳定性具有重要影响。方法#3的配制物显示显著更加稳定。

实施例3:精氨酸对左旋多巴和左旋多巴/卡比多巴组合物的长期稳定性的作用

使用在实施例2中列出的程序来制备具有左旋多巴、卡比多巴和精氨酸的液体配制物，并进行具有不同浓度的精氨酸和/或氨基糖(例如，葡甲胺)，和/或糖(例如右旋糖)，和/或碱(NaOH)，或者另外的碱性氨基酸(例如赖氨酸、组氨酸)的配制物的比较研究。结果显示在表B中。

表B表明，精氨酸以<1:2.5的摩尔比形成具有高浓度的左旋多巴和卡比多巴(>2.5％)的稳定溶液，而在这些条件下其他碱性氨基酸LD甚至不溶解。在LD/CD与精氨酸1:<2的摩尔比下，除非使用葡甲胺或另外的平衡离子，溶液不具有长期稳定性，并且可使用葡甲胺以降低精氨酸与LD/CD的摩尔比。

表B

·Lys·赖氨酸；His·组氨酸；Arg·精氨酸；Dex·右旋糖；Meg·葡甲胺

通过称重所有粉末(LD、CD和L-Arg)以及加入预热至73±3℃的水来制备液体配制物。将混悬液放置在73±3℃的水浴中以及搅拌10min直至完全溶解。将LD/CD溶液保持在RT下10min以冷却。然后，将抗坏血酸加入。将溶液分装至玻璃小瓶内以及保持在+25℃和-20℃下规定时间段。在分析之前，将冷冻的小瓶放置在RT下直至完全解冻。然后将配制物混合以及进行稳定性分析。

表C表明1-精氨酸对在+25℃和在-20℃下物理和化学长期稳定性的作用。

通过称重所有粉末(LD、CD和L-Arg)以及加入预热至73±3℃的水来制备液体配制物。将混悬液放置在73±3℃的水浴中以及搅拌10min直至完全溶解。将LD/CD溶液保存在RT下10min以冷却。然后，将抗坏血酸加入。将溶液分装至玻璃小瓶中以及保存在+25℃和-20℃下规定时间段。在分析之前，将冷冻的小瓶放置在RT下直至完全解冻。然后混合配制物以及进行稳定性分析。

表C1

表C2

表C3

表C4

表C5

表C6

表C1-C6表明，在精氨酸与LD/CD的摩尔比和稳定性之间无相关性，其中通常具有更多精氨酸的组合物具有更久的稳定性：LD/CD:精氨酸溶液(在1:≥2.1的摩尔比下)在RT下和在-20±5℃下稳定至少一个月。甚至在极高固体浓度(总量>45％)下溶液也稳定。

使用乙酸(100％)或乳酸(85％)来滴定含有6/1.5％和5.4/1.5％LD/CD以及不同浓度的L-Arg的配制物以研究pH和L-精氨酸浓度对溶液的物理稳定性的作用。表D表示结果。

表D

OK-无沉淀 +/-极少颗粒；+少量沉淀；++相当大量沉淀

表E显示在制备用于在表D中显示的稳定性测试的6/1.5/14.8％LD/CD/Arg配制物3周之后的物理和化学稳定性。

表E

表D表明：如与抗坏血酸钠相比，抗坏血酸降低pH 0.1-0.15个单位；以及其他有机酸可进一步降低配制物的pH。但物理稳定性测试结果表明，在pH<9.15±0.5下配制物通常不稳定。在给定L-精氨酸浓度下具有抗坏血酸钠的配制物显现比具有抗坏血酸的配制物更加稳定。因此，这表明在缺乏足量的L-Arg下过量的酸可导致沉淀。

实施例4:具有卡比多巴的左旋多巴配制物的体外和离体稳定性

研究卡比多巴对左旋多巴配制物的作用。使用0、0.5、1、1.5和2重量％的卡比多巴(CD)和恒定浓度的精氨酸来制备左旋多巴(LD)配制物。如表F所显示，评估物理和化学稳定性：

表F

在图1A(参见图片)中显示的试验结果表明：在空气的存在下卡比多巴以剂量相关方式预防暗黄色形成。在没有空气(在液面上空间中具有N₂)下，0.5％CD足以抑制该颜色形成。这表明，CD抑制LD的体外氧化。在表F中显示的试验结果表明，卡比多巴对左旋多巴的化学稳定性不具有显著作用。它也显示，在精氨酸和总活性成分之间的比率对预防沉淀(即，取决于精氨酸相对浓度的配制物的物理稳定性)很重要。

在另外的试验中，使用0、0.5、1和2％CD和各浓度的精氨酸来制备LD配制物。评估物理和化学稳定性，并且结果显示在表G中：

表G

如在表G中所显示，在足够浓度的L-精氨酸的存在下，在解冻之后所有配制物在RT下离体稳定至少一个月。

卡比多巴对左旋多巴配制物的稳定性的作用显示在图1中。在0.08ml/h x18h,37℃下将具有或没有2％CD的7％LD-精氨酸溶液连续施用至5x5cm新生、全层猪皮肤。图1的右侧表明没有黑色副产物形成，这表明CD抑制LD的离体氧化并且还可抑制邻醌和黑色素的形成。

实施例5:具有左旋多巴的卡比多巴配制物的稳定性

研究左旋多巴对卡比多巴的稳定性的作用。表H表示结果。

表H

表H表明，CD对氧化和降解敏感性较差，并在LD的存在下更加稳定：当存在LD时，在需氧条件下在R.T.4.82、5.65、12.7、13.53和14.55下杂质面积显著增加，并且甚至在没有氧气下在R.T.4.82和13.53下杂质的面积增加。LD似乎可防止CD降解。

实施例6:具有卡比多巴的左旋多巴配制物的毒性和药物代谢动力学

研究在猪中卡比多巴对左旋多巴局部毒性的作用：将具有各自量的精氨酸(分别为13.5、14.2或14.8％)的含有6％LD和0、0.5或1％CD的溶液向猪以0.16ml/h x24h连续皮下施用。向2只猪施用各配制物。此后收集8±1天的皮肤样品。图2显示，1％卡比多巴的存在降低左旋多巴依赖性毒性的体内严重性和程度。

研究卡比多巴对左旋多巴和卡比多巴的药物代谢动力学的作用。将含有6％LD和0、0.5、1或2％CD以及各自量的精氨酸(分别为13.5、14.2、14.8或16.5％)的溶液向猪以0.16ml/h x24h连续皮下施用。图3显示，CD对LD的药物代谢动力学起着重要作用。如在实施例6中，在±0.3和±1.2％CD之间该作用为剂量依赖性和线性。

实施例7:酪氨酸酶抑制剂的作用

离体研究在37℃下进行连续皮下施用左旋多巴/卡比多巴配制物至猪皮肤组织之后酪氨酸酶抑制剂、底物类似物、Cu⁺⁺螯合剂和邻醌净化剂对左旋多巴(LD)的氧化的作用。

将全层猪皮肤样品(包括皮下组织)放置在设置为37℃下的培养箱中在使用暖PBS填充顶部的100ml玻璃瓶的顶部。使皮肤与PBS直接接触，然后使用石蜡膜覆盖皮肤和瓶子以尽可能地避免皮肤内部接触空气。使用22G蝶形阀和设置在0.08ml/h的输注泵来皮下施用配制物。

各种可能的左旋多巴稳定剂和氧化/降解/代谢抑制剂的列表列出在表I中。离体测定来自各组的代表及其组合的作用，并将其显示在图4中。

各皮肤样品的编号对应按照以下表J施用的配制物的编号:

表I

Cu⁺⁺螯合剂

NI-未指出；NA-不适用

底物类似物

化学名称	MW	溶解性	pH相容性
				苯甲酸钠			Pka 4.2
L-苯丙氨酸

酪氨酸酶抑制剂

通用名	MW	溶解性	最小需要浓度
				卡托普利	217	可溶解	0.04mg/ml
甲巯咪唑	114	可溶解
				槲皮素	302
熊果苷
				芦荟苦素
N-乙酰葡糖胺
				视黄酸
a-生育酚阿魏酸酯
				MAP(抗坏血酸磷酸酯镁)

NI-未指出；NA-不适用

邻醌净化剂

表J

图4表明在≥0.5％的浓度下的抗坏血酸盐充分抑制在猪皮肤样品中左旋多巴和卡比多巴的颜色变化。其他测试的化学物作用更低。

实施例8酪氨酸酶抑制剂对皮下毒性的体内作用

研究在猪中24h-连续皮下施用LD/CD的施用后6至11天酪氨酸酶抑制剂对皮下毒性的作用。结果显示在表K中：

表K

在所采用的试验条件下，如与避免局部毒性的单独的1％坏血酸盐相比，卡托普利和/或Ca-Na₂EDTA并没有互补作用。

实施例9:在皮下施用之后左旋多巴的血浆水平

在该试验中，目的在于在猪中与口服LD/CD一起进行连续皮下施用卡比多巴、左旋多巴或恩他卡朋及其组合之后测定LD(左旋多巴)的血浆水平。

处理称重约22kg的Landrace×Large White母猪，按照表1从第1天15:00开始，如上所述使其口服LD/CD 100/25和使用精氨酸配制的含有卡比多巴、左旋多巴或恩他卡朋及其组合的各测试配制物，并以0.08ml/h的速率通过皮肤贴剂连续皮下施用。

表L表示各组的处理方案。如实施例1和2制备配制物。

表L

在预定时间点下第3次口服给药之后收集血液样品，并通过HPLC-ECD分析左旋多巴、卡比多巴和3-OMD的血浆水平。

图5表示在猪中在与连续皮下施用以下一起口服施用信尼麦(口服100/25LD/CD)之后的平均左旋多巴血浆浓度：A)恩他卡朋(200mg/24h)±CD(40mg/24h)或者B)左旋多巴(140mg/24h)±CD(40mg/24h)(同上，所有皮下配制物均包括精氨酸)。

结果显示：如与各自单独连续皮下施用CD和恩他卡朋之后通过加入LD的血浆浓度后计算的LD血浆PK相比，当共同连续皮下施用时，恩他卡朋(200mg/24h)和CD(40mg/24h)对左旋多巴(ng/ml)的血浆PK具有协同作用(图1A和表2，C对比B+D)。结果也显示：如与各自单独连续皮下施用CD和LD之后通过加入LD的血浆浓度后计算得到的LD血浆PK相比，当共同连续皮下施用时，左旋多巴(140mg/24h)和CD(40mg/24h)对左旋多巴(ng/ml)的血浆PK有加性效应(图1B和表2，E对比D+F)。而且，结果表明：甚至在没有口服施用LD/CD下，连续皮下施用LD和CD足以维持恒定、连续左旋多巴血浆浓度(图5B虚线和表M‘E减A’)。表M显示口服施用LD/CD6¹/₂和8h之后血浆左旋多巴的谷浓度。

表M

E-恩他卡朋CD-卡比多巴LD-左旋多巴NA-未得到

图6显示左旋多巴-卡比多巴精氨酸组合配制物和左旋多巴/精氨酸配制物的应用位置的组织活检。在左旋多巴-卡比多巴精氨酸配制物中无明显组织刺激或损伤。施用左旋多巴-精氨酸配制物的位置显示具有一些组织变黑。不受任何理论限制，据认为，与左旋多巴(精氨酸)配制物一起联用的卡比多巴和精氨酸通过预防左旋多巴氧化为刺激性副产物来保护局部组织免受左旋多巴的局部损害，并且卡比多巴是强效抗氧化剂。

等同形式

尽管已经讨论主题发明的具体实施方案，但以上说明书是说明性的而非限制性的。通过阅读该说明书，本发明的许多变化形式对于本领域技术人员而言将变得显而易见。应当通过参照权利要求，以及它们等同形式的全部范围和说明书以及这些变化形式来确定本发明的全部范围。

除非另有说明，在本说明书和权利要求中使用的表示成分的量、反应条件等的所有数字均理解为在所有情况下通过术语“约”来修饰。因此，除非相反说明，在本说明书和所附权利要求中提出的数值参数均为近似值，其可根据通过本发明力图获得的所需性质而变化。

通过引用并入

所有专利、公开的专利申请、网站和本文引用的其他参考文献均在此通过引用方式全部明确并入本文中。

Claims (17)

1.一种在25℃下具有9.2至9.8的pH的药学上可接受的液体组合物，其包含：

6重量％至20重量％的左旋多巴；1重量％至6重量％的卡比多巴；精氨酸和葡甲胺，所述卡比多巴和左旋多巴与所述精氨酸的摩尔比为1:1.1至1:1.9，以及所述卡比多巴和左旋多巴与所述葡甲胺的摩尔比为1:0.4至1:1。

2.根据权利要求1所述的药学上可接受的液体组合物，其包含：1重量％至4重量％的卡比多巴。

3.根据权利要求2所述的药学上可接受的液体组合物，其包含8重量％至12重量％的左旋多巴，1重量％至3重量％的卡比多巴，和15重量％至35重量％的精氨酸。

4.根据权利要求1所述的药学上可接受的液体组合物，所述卡比多巴和左旋多巴与所述葡甲胺的摩尔比为1:0.4，或1:1。

5.根据权利要求4所述的药学上可接受的液体组合物，其中所述组合物包含2重量％至11重量％的葡甲胺。

6.根据权利要求1所述的药学上可接受的液体组合物，其进一步包含抑制氧化产物形成的试剂。

7.根据权利要求6所述的药学上可接受的液体组合物，所述试剂选自抗坏血酸或其药学上可接受的盐、L-半胱氨酸、N-乙酰半胱胺酸(NAC)、谷胱甘肽(GSH)、Na₂-EDTA、Na₂-EDTA-Ca、亚硫酸氢钠或其组合。

8.根据权利要求7所述的药学上可接受的液体组合物，其中所述抗坏血酸药学上可接受的盐为抗坏血酸盐、抗坏血酸钠、抗坏血酸钙、抗坏血酸钾、抗坏血酸棕榈酸酯或抗坏血酸硬脂酸酯。

9.根据权利要求8所述的药学上可接受的液体组合物，包含0.2重量％至3重量％、或0.5重量％至1重量％的抗坏血酸药学上可接受的盐。

10.根据权利要求2所述的药学上可接受的液体组合物，其包含：

(ⅰ)8重量％的左旋多巴，1.5重量％的卡比多巴，15.7重量％的精氨酸和3.2重量％的葡甲胺；

(ⅱ)8重量％的左旋多巴，1.5重量％的卡比多巴，12.2重量％的精氨酸和7.9重量％的葡甲胺；

(ⅲ)10重量％的左旋多巴，1.5重量％的卡比多巴，19.2重量％的精氨酸和4重量％的葡甲胺；

(ⅳ)10重量％的左旋多巴，1.5重量％的卡比多巴，14.6重量％的精氨酸和9.9重量％的葡甲胺；

(ⅴ)7重量％的左旋多巴，1.5重量％的卡比多巴，14.1重量％的精氨酸和2.8重量％的葡甲胺；

(ⅵ)7重量％的左旋多巴，1.5重量％的卡比多巴，10.7重量％的精氨酸和6.9重量％的葡甲胺。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的药学上可接受的液体组合物，所述组合物被配制用于连续皮下、透皮、十二指肠内或静脉内施用。

12.根据权利要求1所述的药学上可接受的液体组合物，所述组合物用于治疗神经或运动病症。

13.根据权利要求12所述的药学上可接受的液体组合物，其中所述神经或运动病症是帕金森氏病。

14.一种包含根据权利要求1-10中任一项所述的药学上可接受的液体组合物的透皮贴剂。

15.权利要求1-10中任一项所述的药学上可接受的液体组合物在制备用于治疗神经或运动病症的药物中的用途。

16.根据权利要求15所述的用途，其中配制所述药物用于皮下、透皮、十二指肠内或静脉内施用。

17.根据权利要求15或16所述的用途，其中所述神经或运动病症是帕金森氏病。