CN110057960A - 一种颈康胶囊中何首乌的质量及安全性控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种颈康胶囊中何首乌的质量及安全性控制方法。为了克服现有方法测得的大黄素斑点不够清晰的问题,本发明发明人对颈康胶囊中的何首乌的质量及安全性控制方法进行了优化提高,通过优化试验分别从方法的专属性、点样量、展开温度、展开湿度方面进行考察,从而提出了一种新的对颈康胶囊中何首乌的质量及安全性进行控制的方法。试验结果证实优化后的方法专属性较好,检测结果准确、方便,测得的大黄素斑点清晰,能更好的控制颈康胶囊的质量及安全性。
Description
技术领域
本发明涉及一种药物质量的鉴别及安全性控制方法,特别涉及一种颈康胶囊中何首乌的质量及安全性控制方法,本发明属于中药技术领域。
背景技术
颈康胶囊,中成药名。由熟地黄、何首乌、杜仲、鹿衔草、骨碎补(烫)、钩藤、葛根、三七、莱菔子(炒)组成。具有补肾、活血、止痛的功效。用于肾虚血瘀所致的颈椎病。颈椎病又称颈椎综合征,是颈椎骨关节炎、增生性颈椎炎、颈神经根综合征、颈椎间盘脱出症的总称,是一种以退行性病理改变为基础的疾患。颈椎病的临床症状较为复杂。主要有颈背疼痛、上肢无力、手指发麻、下肢乏力、行走困难、头晕、恶心、呕吐,甚至视物模糊、心动过速及吞咽困难等。目前尚无颈椎病的中医证候分型及治疗的统一标准,各医家学者依据多年的临床经验及研究认为本病基本的病机是以“邪实”为主,主要表现为气滞、湿热、寒湿、痰湿,并见血瘀之邪,而正虚主要表现为阴虚、阳虚、气虚和血虚。诸医家对其病因病机的认识上亦离不开本虚标实,因此证候分型上多出现气滞,血瘀,风、寒、湿、热痹阻经络,肝、脾、肾亏虚等。
何首乌又名首乌,其块根为常用大宗中药材,具有补肝肾,益精血,乌须发,强筋骨之功效。主治精血亏虚,头晕眼花,须发早白,腰酸脚软,遗精,崩带等证。《本草备要》纪录:“补肝肾,涩精,养血祛风,为滋补良药。”其经济价值较高。对颈康胶囊中何首乌的质量以及安全性进行鉴别是评价颈康胶囊质量的一个重要方面。
目前对颈康胶囊中何首乌的质量以及安全性检测主要是依照以下方法进行:取供试品颈康胶囊3g,加三氯甲烷50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取大黄素对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。按照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以石油醚(30~60℃)—甲酸乙酯—甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,展开(展开条件:温度24℃、湿度34%RH),取出,晾干。然而采用该鉴别方法得到的薄层色谱图中大黄素薄层斑点不够清晰,因此直接影响了对何首乌质量及安全性的正确判断,也进而影响了对供试品颈康胶囊质量好坏的准确评价。
为了克服现有方法测得的大黄素斑点不够清晰的问题,本发明发明人对颈康胶囊中的何首乌的质量及安全性控制方法进行了优化提高,通过优化试验分别从方法的专属性、点样量、展开温度、展开湿度方面进行考察,从而提出了一种新的对颈康胶囊中何首乌的质量及安全性进行控制的方法。
发明内容
本发明的目的在于克服现有方法测得的大黄素斑点不够清晰的问题,提供一种对颈康胶囊中何首乌的质量及安全性进行控制的方法,使用该方法获得的薄层色谱中,日光灯及紫外灯下大黄素斑点显色清晰,可方便的用于颈康胶囊的质量及安全性的鉴别检验。通过优选高质量的何首乌以确保产品的安全性。
为了达到上述目的,本发明采用了以下技术手段:
本发明提出的一种颈康胶囊中何首乌的质量及安全性控制方法,包括以下步骤:
何首乌的质量控制方法:
(1)取颈康胶囊供试品6g,加水40ml使溶解,再加入盐酸1ml,加热回流30分钟,冷却,滤过,用二氯甲烷分2次振摇提取,每次30ml,合并二氯甲烷液,蒸干,残渣加二氯甲烷1ml使溶解,作为供试品溶液;
(2)取何首乌对照药材0.5g,采用同供试品溶液制法相同的方法制成何首乌对照药材溶液;
(3)另取大黄素对照品,加甲醇溶解制成每1ml含有1mg的溶液,作为对照品溶液;
(4)按照薄层色谱法试验,吸取步骤(3)得到的大黄素对照品溶液1μL、步骤(2)得到的何首乌对照药材溶液5μL、步骤(1)得到的供试品溶液10μL,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以30~60℃石油醚—甲酸乙酯—甲酸的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置日光灯及365nm紫外灯下检视,其中石油醚:甲酸乙酯:甲酸的体积比为15:5:1。
何首乌的安全性控制方法:
按干燥品计算,供试品中二苯乙烯苷含量不得少于1.0%;按干燥品计算,供试品中含结合蔥醌以大黄素(C15H10O5)和大黄素甲醚(C16H12O5)的总量计,不得少于0.05%;
《中国药典》2015版规定何首乌用量为每日3-6g。
其中,优选的,日光灯下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显一个相同的黄色斑点;置紫外光灯(365nm)下检视,在与对照药材色谱相应的位置上,显两个相同的黄色荧光斑点;在与对照品色谱相应的位置上,显一个相同的黄色荧光斑点,则判为符合规定。
其中,优选的,步骤(4)中的展开条件为:展开温度40℃以下、湿度30%-75%RH。
其中,优选的,步骤(4)中的展开距离为8~14cm。
其中,优选的,二苯乙烯苷含量检测按照以下步骤进行:
(1)对照品溶液的制备
取二苯乙烯苷对照品适量,精密称定,加稀乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液,即得;
(2)供试品溶液的制备
取待测样品粉末过四号筛,取0.2g置具塞锥形瓶中,加入稀乙醇25ml,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀,静置,上清液滤过,取续滤液,即得;
(3)测定法
分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl注入液相色谱仪,测定,即得。
其中,优选的,结合蔥醌的测定按照以下步骤进行:
(1)对照品溶液的制备
取大黄素对照品、大黄素甲醚对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成每1ml含大黄素80μg,大黄素甲醚40μg的溶液,即得;
(2)供试品溶液的制备
取待测样品粉末过四号筛,取1g置具塞锥形瓶中,加入甲醇50ml,称定重量,加热回流1小时,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液5ml作为供试品溶液A,测游离蔥醌用;另精密量取续滤液25ml,置具塞锥形瓶中,水浴蒸干,精密加8%盐酸溶液20ml,功率100W,频率40kHz超声处理5分钟,加三氯甲烷20ml,水浴中加热回流1小时,取出,立即冷却,置分液漏斗中,用少量三氯甲烷洗涤容器,洗液并入分液漏斗中,分取三氯甲烷液,酸液再用三氯甲烷振摇提取3次,每次15ml,合并三氯甲烷液,回收溶剂至干,残渣加甲醇使溶解,转移至10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,作为供试品溶液B,测总蒽醌用;
结合蒽醌含量=总蒽醌含量-游离蒽醌含量
(3)测定法
分别吸取对照品溶液与上述两种供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
其中,优选的,所述的颈康胶囊是由以下重量份的各原料组成:熟地黄100-300份,何首乌100-300份,杜仲100-300份,鹿衔草100-300份,骨碎补(烫)100-300份,钩藤50-200份,葛根50-200份,三七10-150份,莱菔子(炒)50-200份。
其中,优选的,所述的颈康胶囊将熟地黄、何首乌、杜仲、鹿衔草、骨碎补(烫)、钩藤、葛根、三七、莱菔子(炒)按照所述的重量份称量,经灭菌干燥、提取、浓缩、制粒整粒、填充、包装的生产方法制得。
其中,优选的,所述的颈康胶囊按照以下方法制备得到:
(1)按本发明所述的重量份数称取各原料:熟地黄100-300份,何首乌100-300份,杜仲100-300份,鹿衔草100-300份,骨碎补(烫)100-300份,钩藤50-200份,葛根50-200份,三七10-150份,莱菔子(炒)50-200份;
(2)生产方法
a、灭菌干燥:
取1/2量的三七粉碎后置灭菌柜中,100℃流通蒸汽灭菌30分钟;取出置干燥柜中70-80℃干燥1-1.5h,干燥后的三七生药粉粉碎、过筛后暂存待用;
b、提取
剩余三七及其余八味中药材置提取罐中,加水蒸煮两次,第一次加10倍量水煎煮3小时,滤过,保存滤液;第二次加8倍量水煎煮2小时,滤过,合并两次滤液;
c、浓缩
滤液真空浓缩至80℃下相对密度为1.30~1.35的稠膏;
d、制粒、整粒
将三七生药粉、淀粉置于制粒机中,加入稠膏混合后进行制粒;置整粒机中整粒,整粒后过筛;
e、填充
整粒后的物料置胶囊填充机中进行填充;
f、包装
胶囊填充后包装,即得。
相较于现有技术,本发明的有益效果是:
本发明发明人对颈康胶囊中的何首乌的质量及安全性控制方法进行了优化提高,通过优化试验分别从方法的专属性、点样量、展开温度、展开湿度方面进行考察,试验结果证实优化后的方法测得的大黄素斑点清晰,能更好的控制颈康胶囊的质量及安全性。
附图说明
图1为实施例2方法得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品2、颈康胶囊样品3、何首乌对照药材、大黄素对照品、颈康胶囊样品4;
图2为实验例1方法得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1;
图3为实验例2方法得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1;
图4为实验例3方法得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1;
图5为实验例4方法得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1;
图6为实验例5方法中不同点样量得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:何首乌对照药材2、3、5、10μL、颈康胶囊样品1 5μL、大黄素对照品5、3、2、1μL;
图7为实验例5方法中点样量再确认后得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:何首乌对照药材10μL、何首乌对照药材5μL、何首乌对照药材5μL、颈康胶囊样品1 5μL、颈康胶囊样品1 10μL、大黄素对照品1μL、大黄素对照品2μL;
图8为实验例5方法中展开温度为20℃时、湿度32%RH时得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1;
图9为实验例5方法中展开温度为30℃、湿度35%RH时得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1;
图10为实验例5方法中展开温度为40℃、湿度20%RH时得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1;
图11为实验例5方法中展开湿度为33%RH时得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1;
图12为实验例5方法中展开湿度为52%RH时得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1;
图13为实验例5方法中展开湿度为75%RH时得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1;
图14为实验例5方法中展开距离为8cm时得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1;
图15为实验例5方法中展开距离为10cm时得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1;
图16为实验例5方法中展开距离为14cm时得到的薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片;
其中,点样顺序从左到右依次为:颈康胶囊样品1、何首乌对照药材、阴性样品、大黄素对照品、颈康胶囊样品1。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
实施例1颈康胶囊的制备
(1)按以下所述的重量份数称取各原料:
熟地黄204.5g、何首乌272.8g、杜仲136.4g、鹿衔草136.4g、骨碎补(烫)136.4g、钩藤100g、葛根100g、三七50g、莱菔子(炒)86.2g;
(2)生产方法
a、灭菌干燥:
将取1/2量的三七粉碎后置灭菌柜中,100℃流通蒸汽灭菌30分钟;取出置干燥柜中70-80℃干燥1-1.5h,干燥后的三七生药粉粉碎、过筛后暂存待用;
b、提取
剩余三七及其余八味中药材置提取罐中,加水蒸煮两次,第一次加10倍量水煎煮3小时,滤过,保存滤液;第二次加8倍量水煎煮2小时,滤过,合并两次滤液;
c、浓缩
滤液真空浓缩至80℃下相对密度为1.30~1.35的稠膏;
d、制粒、整粒
将三七生药粉、淀粉置于制粒机中,加入稠膏混合后进行制粒;置整粒机中整粒,整粒后过筛;
e、填充
整粒后的物料置胶囊填充机中进行填充,0.25g/粒;
f、包装
胶囊填充后包装,即得。
实施例2颈康胶囊中何首乌的质量及安全性控制
一、颈康胶囊中何首乌的质量控制
1、研究用仪器设备、试剂及试药如表1所示:
表1
2、方法
(1)取颈康胶囊供试品1(实施例1制备)6g,加水40ml使溶解,再加入盐酸1ml,加热回流30分钟,冷却,滤过,用二氯甲烷分2次振摇提取,每次30ml,合并二氯甲烷液,蒸干,残渣加二氯甲烷1ml使溶解,作为供试品溶液;阴性样品溶液制备方法同供试品溶液;
(2)取何首乌对照药材0.5g,采用同供试品溶液制法相同的方法制成何首乌对照药材溶液;
(3)另取大黄素对照品,加甲醇溶解制成每1ml含有1mg的溶液,作为对照品溶液;
(4)按照薄层色谱法试验,吸取步骤(3)得到的大黄素对照品溶液1μL、步骤(2)得到的何首乌对照药材溶液5μL、步骤(1)得到的供试品溶液、阴性样品溶液各10μL,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以30~60℃石油醚—甲酸乙酯—甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,取出,晾干,置日光灯及/或365nm紫外灯下检视。
3、结果
薄层色谱在日光灯(A)以及紫外灯365nm(B)下的照片分别如图1A以及图1B所示。可见薄层色谱中,日光灯及紫外灯下斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照品和对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的黄色斑点;置紫外灯(365nm)下检视,显相同颜色的荧光斑点。
二、颈康胶囊中何首乌安全性控制
1、药材及饮片质量控制
近年来国内外关于服用何首乌或其制剂导致肝损伤的报道逐渐增多,因此控制何首乌药材及饮片的安全性尤为重要。同时何首乌也存在几种混伪品,如赭魁、红药子等,其来源及功效均与何首乌大不相同,误用也可能导致不良反应。本发明所使用的何首乌从其药材及饮片安全性方面进行控制,从而最大限度的降低产品风险。
本发明选取四川产地不同生长年限、不同采收期的何首乌样品,采用高效液相色谱法测定其所含的二苯乙烯苷和大黄素、大黄素甲醚含量值,通过数值比较选取最优质量的何首乌。
1.1试验方法
1.1.1仪器:高效液相色谱仪、电子天平、超声波清洗机等
1.1.2试药:二苯乙烯苷对照品、大黄素对照品、大黄素甲醚对照品
1.1.3药材:选取重庆生产基地种植于同一块地的药材,块根大小相近,除去杂质,洗净,浸润,切片后烘干,制得样品。
1.1.4对照品溶液制备:精密称取二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚对照品适量,分别加甲醇溶解并稀释,超声溶解,即得。
1.1.5供试品溶液制备:取待测样品粉末(过四号筛)精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,称定重量,加热回流1小时,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,即得供试品溶液1。取滤液10ml置具塞锥形瓶中,加入盐酸溶液1.5ml,用甲醇溶液定容,摇匀,加热回流1小时滤过,即得供试品溶液2。供试品溶液1、2分别为二苯乙烯苷和游离蒽醌供试品溶液、总蒽醌供试品溶液。
1.1.6样品测定数据。见表2、表3。
表2不同生长年限何首乌中二苯乙烯苷、大黄素和大黄素甲醚的含量测定
样品生长年限 | 二苯乙烯苷(%) | 大黄素(%) | 大黄素甲醚(%) |
四年生 | 1.8136 | 0.0375 | 0.0445 |
三年生 | 1.8329 | 0.0456 | 0.0486 |
二年生 | 1.5457 | 0.0478 | 0.0415 |
一年生 | 1.3815 | 0.0396 | 0.0406 |
表3不同采收期样品(三年生何首乌)中二苯乙烯苷、大黄素和大黄素甲醚的含量测定
采收时间 | 二苯乙烯苷(%) | 大黄素(%) | 大黄素甲醚(%) |
7月中旬 | 1.5185 | 0.0428 | 0.0473 |
8月中旬 | 1.6012 | 0.0468 | 0.0452 |
9月中旬 | 1.7145 | 0.0483 | 0.0426 |
10月中旬 | 1.8159 | 0.0493 | 0.0418 |
11月中旬 | 1.8368 | 0.0487 | 0.0425 |
12月中旬 | 1.8653 | 0.0492 | 0.0458 |
1.2试验结论:通过对1至4年生何首乌中二苯乙烯苷、大黄素和大黄素甲醚的含量测定数据表明:所测定成份的含量随生长年限而增加,其中1至2年间累计较快,3年所测成分含量达到最高值。
通过对两年生何首乌不同采收期样品含量数据表明:何首乌中二苯乙烯苷含量在7月中旬至11月中旬呈现上升趋势,11月中旬时达到最高值,高于12月中旬;蒽醌类成份含量随采收期的不同而不同,总体以11月中旬达到最高值。2015版《中国药典》关于何首乌有规定“秋、冬二季叶祜萎时采挖,削去两端,洗净,个大的切成块,干燥”,由此可见秋季采挖何首乌是合理的。综上试验结果表明:三年生长年限且在秋季采挖的何首乌质量为最优,本发明所使用的何首乌即选取此最优质量的何首乌用于生产,最大限度的降低产品风险。
2、颈康胶囊样品制备使用的何首乌中二苯乙烯苷、大黄素和大黄素甲醚的含量检测
2.1二苯乙烯苷含量检测
2.1.1对照品溶液的制备
取二苯乙烯苷对照品适量,精密称定,加稀乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液,即得。
2.1.2供试品溶液的制备
取待测样品粉末过四号筛,精密称定0.2g,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇25ml,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀,静置,上清液滤过,取续滤液,即得。
2.1.3测定法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl注入液相色谱仪,测定,即得。
2.1.4结果判定
按干燥品计算,含二苯乙烯苷不得少于1.0%。
2.2结合蔥醌含量检测
2.2.1对照品溶液的制备
取大黄素对照品、大黄素甲醚对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成每1ml含大黄素80μg,大黄素甲醚40μg的溶液,即得。
2.2.2供试品溶液的制备
取待测样品粉末过四号筛,精密称定1g,置具塞锥形瓶中,糈密加入甲醇50ml,称定重量,加热回流1小时,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液5ml作为供试品溶液A(测游离蔥醌用)。另精密量取续滤液25ml,置具塞锥形瓶中,水浴蒸干,精密加8%盐酸溶液20ml,超声处理(功率100W,频率40kHz)5分钟,加三氯甲烷20ml,水浴中加热回流1小时,取出,立即冷却,置分液漏斗中,用少量三氯甲烷洗涤容器,洗液并入分液漏斗中,分取三氯甲烷液,酸液再用三氯甲烷振摇提取3次,每次15ml,合并三氯甲烷液,回收溶剂至干,残渣加甲醇使溶解,转移至10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,作为供试品溶液B(测总蒽醌用)。
2.2.3测定法
分别精密吸取对照品溶液与上述两种供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。结合蒽醌含量=总蒽醌含量-游离蒽醌含量。
2.2.4结果判定
按干燥品计算,含结合蔥醌以大黄素(C15H10O5)和大黄素甲醚(C16H12O5)的总量计,不得少于0.05%。
2.3测定结果
本发明实施例中涉及的颈康胶囊样品1、颈康胶囊样品2、颈康胶囊样品3、颈康胶囊样品4所使用的何首乌中二苯乙烯苷、大黄素和大黄素甲醚的含量检测结果见表4。
表4颈康胶囊样品所使用的何首乌二苯乙烯苷、大黄素和大黄素甲醚含量测定
对应样品名称 | 二苯乙烯苷(%) | 大黄素和大黄素甲醚总量(%) |
颈康胶囊样品1 | 1.86 | 0.09 |
颈康胶囊样品2 | 1.88 | 0.09 |
颈康胶囊样品3 | 1.88 | 0.08 |
颈康胶囊样品4 | 1.86 | 0.09 |
3、用药剂量
近年来关于何首乌不良反应信息及文献报道均提示何首乌及其制剂所致的肝损伤与使用剂量相关,药物剂量过大及用药时间过长均能使机体产生毒性反应。
2015版《中国药典》规定何首乌剂量每日3-6g,本发明所述产品颈康胶囊用药剂量合理,避免了用药剂量过大或时间过长产生的毒性反应。
3.1本发明所述产品颈康胶囊规格为0.25g/粒,依据实施例1处方及生产工艺制得,经计算相当于饮片1.22g,其中含何首乌0.27g。
3.2本发明所述产品颈康胶囊用法用量为口服,一次4粒,一日2次。经计算,相当于每日摄入何首乌2.16g,属于安全剂量范围。
3.3小结:本发明所述产品颈康胶囊在服用计量方面进行控制,最大限度的避免了药物剂量过大所产生的毒性反应。
实验例1颈康胶囊中何首乌的质量控制
1、研究用仪器设备、试剂及试药如表1所示。
2、方法
(1)取颈康胶囊供试品1(实施例1制备)3g,加三氯甲烷50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。阴性样品溶液制备方法同供试品溶液;
(2)取何首乌对照药材0.5g,采用同供试品溶液制法相同的方法制成何首乌对照药材溶液;
(3)另取大黄素对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。
(4)按照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取供试品溶液、阴性样品溶液、何首乌对照药材以及对照品溶液各10μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以石油醚(30~60℃)—甲酸乙酯—甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,展开(展开条件:温度24℃、湿度34%RH),取出,晾干,置日光灯及/或365nm紫外灯下检视。
3、结果
薄层色谱鉴别结果日光灯见图2A,紫外灯(365nm)见图2B。由图可见,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的黄色斑点;置紫外光灯(365nm)下检视,显相同颜色的荧光斑点。但采用该鉴别试验方法的薄层色谱鉴别图可得出,阴性样品无干扰,日光灯及365nm紫外灯下,供试品中大黄素薄层斑点不够清晰。
原因分析:由于样品中大黄素含量较低,三氯甲烷浸润性不好,很难将微量的大黄素提取出来,使薄层斑点不够清晰。
实验例2颈康胶囊中何首乌的质量控制
1、研究用仪器设备、试剂及试药如表1所示。
2、方法
(1)取颈康胶囊供试品1(实施例1制备)3g,加水20ml使溶解,再加入盐酸1ml,加热回流30分钟,冷却,用乙醚分2次振摇提取,每次20ml,合并乙醚液,蒸干,残渣加二氯甲烷1ml使溶解,作为供试品溶液。阴性样品溶液制备方法同供试品溶液;
(2)取何首乌对照药材0.5g,采用同供试品溶液制法相同的方法制成何首乌对照药材溶液;
(3)另取大黄素对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。
(4)按照薄层色谱法(中国药典2015年版四部通则0502)试验,吸取供试品溶液、阴性样品溶液、何首乌对照药材以及对照品溶液各10μL,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以石油醚(30~60℃)—甲酸乙酯—甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,展开(展开条件:温度25℃、湿度36%RH),取出,晾干,置日光灯及/或365nm紫外灯下检视。
3、结果
薄层色谱鉴别结果日光灯见图3A,紫外灯(365nm)见图3B。由图可见,供试品色谱中,在与对照品和对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的黄色斑点;置紫外灯(365nm)下检视,显相同颜色的荧光斑点。阴性样品无干扰。在日光灯下肉眼能够看到供试品、大黄素对照品中的黄色斑点,但不明显,且相机拍不下来;在365nm紫外灯下供试品及对照品斑点明显;此方法不可行。
实验例3颈康胶囊中何首乌的质量控制
1、研究用仪器设备、试剂及试药如表1所示。
2、方法
(1)取颈康胶囊供试品1(实施例1制备)6g,加水40ml使溶解,再加入盐酸1ml,加热回流30分钟,冷却,滤过,用二氯甲烷分2次振摇提取,每次20ml,合并二氯甲烷液,蒸干,残渣加二氯甲烷1ml使溶解,作为供试品溶液。阴性样品溶液制备方法同供试品溶液;
(2)取何首乌对照药材0.5g,采用同供试品溶液制法相同的方法制成何首乌对照药材溶液;
(3)另取大黄素对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。
(4)按照薄层色谱法(中国药典2015年版四部通则0502)试验,吸取上述大黄素对照品溶液、阴性样品溶液、何首乌对照药材、供试品溶液各10μL,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以石油醚(30~60℃)—甲酸乙酯—甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,展开(展开条件:温度25℃、湿度36%RH),取出,晾干,置日光灯及/或365nm紫外灯下检视。
3、结果
薄层色谱鉴别结果日光灯见图4A,紫外灯(365nm)见图4B。由图可见,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的黄色斑点;置紫外灯(365nm)下检视,显相同颜色的荧光斑点。阴性不干扰测定,日光灯下样品、何首乌对照药材、大黄素对照品在相同位置均显黄色斑点;365nm下样品、何首乌对照药材、大黄素对照品在相同位置均显荧光斑点。此方法可行,但供试品量稍小,故若选用此方法可加大供试品的量。
实验例4颈康胶囊中何首乌的质量控制
1、研究用仪器设备、试剂及试药如表1所示。
2、方法
(1)取颈康胶囊供试品1(实施例1制备)3g,加甲醇30ml,加热回流1小时,放冷,滤过,滤液蒸干,残渣加水20ml使溶解,再加入盐酸1ml,加热回流30分钟,冷却,用二氯甲烷2次振摇提取,每次20ml,合并二氯甲烷液,蒸干,残渣加二氯甲烷1ml使溶解,作为供试品溶液。阴性样品溶液制备方法同供试品溶液;
(2)取何首乌对照药材0.5g,采用同供试品溶液制法相同的方法制成何首乌对照药材溶液;
(3)另取大黄素对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。
(4)按照薄层色谱法(中国药典2015年版四部通则0502)试验,吸取上述大黄素对照品溶液、阴性样品溶液、何首乌对照药材、供试品溶液各10μL,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以石油醚(30~60℃)—甲酸乙酯—甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,展开(展开条件:温度25℃、湿度36%RH),取出,晾干,置日光灯及/或365nm紫外灯下检视。
3、结果
薄层色谱鉴别结果日光灯见图5A,紫外灯(365nm)见图5B。由图可见,供试品色谱中,在与对照品和对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的黄色斑点;置紫外灯(365nm)下检视,显相同颜色的荧光斑点。阴性不干扰测定,日光灯下样品、何首乌对照药材、大黄素对照品在相同位置均显黄色斑点;365nm下样品、何首乌对照药材、大黄素对照品在相同位置均显荧光斑点。此方法可行。
实验例3与实验例4均能够很好的鉴别出颈康胶囊中的何首乌,且显色斑点均较清晰,但处理方式上实验例3相比较简单,故最终选用实验例3。
实验例5颈康胶囊中何首乌的质量控制方法的建立
1、研究用仪器设备、试剂及试药如表1所示。
2、方法
(1)取颈康胶囊供试品1(实施例1制备)6g,加水40ml使溶解,再加入盐酸1ml,加热回流30分钟,冷却,滤过,用二氯甲烷分2次振摇提取,每次30ml,合并二氯甲烷液,蒸干,残渣加二氯甲烷1ml使溶解,作为供试品溶液。阴性样品溶液制备方法同供试品溶液;
(2)取何首乌对照药材0.5g,采用同供试品溶液制法相同的方法制成何首乌对照药材溶液;
(3)另取大黄素对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。
(4)按照薄层色谱法(中国药典2015年版四部通则0502)试验,吸取上述大黄素对照品溶液、阴性样品溶液、何首乌对照药材、供试品溶液,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以石油醚(30~60℃)—甲酸乙酯—甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,展开取出,晾干。
3、可接受标准:供试品色谱中,在与对照药材和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的黄色斑点;置紫外灯(365nm)下检视,显相同颜色的荧光斑点。
4、方法学考察
4.1点样量考察
4.1.1何首乌对照药材分别点样2、3、5、10μL;样品5μL;大黄素对照品分别点样5、3、2、1μL。
4.1.2点样量确认
薄层色谱结果日光灯见图6A,紫外灯(365nm)见图6B。
4.1.3考察结果:样品5μL斑点在日光灯下稍小。可增大点样量为10μL;何首乌对照药材5μL、10μL斑点较清晰,选用5μL即可;大黄素对照品均较清晰,5μL、10μL斑点较大不选用,选用1μL、2μL即可。根据上图结果,对点样量进行重新确认。何首乌对照药材5μL、10μL;样品10μL;大黄素对照品1μL、2μL。点样量再确认薄层色谱结果日光灯下结果见图7A,紫外灯下结果(365nm)见图7B。
4.1.4结果:由图7结果可以看出,何首乌对照药材5μL、本发明中药组合物样品10μL、大黄素对照品1μL斑点较清晰,故最终确定何首乌对照药材选用5μL、样品选用10μL、大黄素对照品选用1μL。
4.2展开温度考察
4.2.1分别在展开温度为20℃、30℃、40℃下考察方法的可行性。
展开温度为20℃时、湿度32%RH时的薄层色谱结果日光灯见图8A;紫外灯(365nm)见图8B。展开温度为30℃、湿度35%RH时的薄层色谱结果日光灯见图9A;紫外灯(365nm)见图9B。展开温度为40℃、湿度20%RH时的薄层色谱结果日光灯见图10A;紫外灯(365nm)见图10B。
4.2.2结果:当展开温度为40℃时,大黄素斑点与前沿位置较近;20℃、30℃时色谱较好;故应在40℃以下进行展开。
4.3展开湿度考察
4.3.1分别在展开湿度为33%RH、52%RH、75%RH(温度均为25℃)下考察方法的可行性。展开湿度为33%RH时薄层色谱结果日光灯见图11A;紫外灯(365nm)见图11B。展开湿度为52%RH时薄层色谱结果日光灯见图12A;紫外灯(365nm)见图12B。展开湿度为75%RH时薄层色谱结果日光灯见图13A;紫外灯(365nm)见图13B。
4.3.2结果:阴性不干扰测定,各展开湿度条件下对样品无影响。
4.4展开距离的考察
4.4.1分别考察展距为8cm、10cm、14cm时样品的展开情况。展开距离为8cm时薄层色谱结果日光灯见图14A;紫外灯(365nm)见图14B。展开距离为10cm时薄层色谱结果日光灯见图15A;紫外灯(365nm)见图15B。展开距离为14cm时薄层色谱结果日光灯见图16A;紫外灯(365nm)见图16B。
4.4.2结果:展开距离对何首乌质量鉴别无影响,故选用展开距离8~14cm均可。
5、何首乌质量控制方法确认
(1)取颈康胶囊供试品1(实施例1制备)6g,加水40ml使溶解,再加入盐酸1ml,加热回流30分钟,冷却,滤过,用二氯甲烷分2次振摇提取,每次30ml,合并二氯甲烷液,蒸干,残渣加二氯甲烷1ml使溶解,作为供试品溶液;阴性样品溶液制备方法同供试品溶液;
(2)取何首乌对照药材0.5g,采用同供试品溶液制法相同的方法制成何首乌对照药材溶液;
(3)另取大黄素对照品,加甲醇溶解制成每1ml含有1mg的溶液,作为对照品溶液;
(4)按照薄层色谱法试验,吸取步骤(3)得到的大黄素对照品溶液1μL、步骤(2)得到的何首乌对照药材溶液5μL、步骤(1)得到的供试品溶液、阴性样品溶液各10μL,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以30~60℃石油醚—甲酸乙酯—甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置日光灯及/或365nm紫外灯下检视。
本发明通过优化鉴别试验及药材选取、用量范围对何首乌的质量进行控制,试验结果证实优化后的鉴别方法专属性好,检测结果准确方便,测得的大黄素斑点清晰;药材选取及用量范围的控制证实本发明产品选用的何首乌质量优良且用量安全。
Claims (7)
1.一种颈康胶囊中何首乌的质量及安全性控制方法,其特征在于,包括以下步骤:
何首乌的质量控制方法:
(1)取颈康胶囊供试品6g,加水40ml使溶解,再加入盐酸1ml,加热回流30分钟,冷却,滤过,用二氯甲烷分2次振摇提取,每次30ml,合并二氯甲烷液,蒸干,残渣加二氯甲烷1ml使溶解,作为供试品溶液;
(2)取何首乌对照药材0.5g,采用同供试品溶液制法相同的方法制成何首乌对照药材溶液;
(3)另取大黄素对照品,加甲醇溶解制成每1ml含有1mg的溶液,作为对照品溶液;
(4)按照薄层色谱法试验,吸取步骤(3)得到的大黄素对照品溶液1μL、步骤(2)得到的何首乌对照药材溶液5μL、步骤(1)得到的供试品溶液10μL,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以30~60℃石油醚—甲酸乙酯—甲酸的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置日光灯及365nm紫外灯下检视,其中石油醚:甲酸乙酯:甲酸的体积比为15:5:1。
何首乌的安全性控制方法:
按干燥品计算,供试品中二苯乙烯苷含量不得少于1.0%;按干燥品计算,供试品中含结合蔥醌以大黄素(C15H10O5)和大黄素甲醚(C16H12O5)的总量计,不得少于0.05%;
《中国药典》2015版规定何首乌用量为每日3-6g。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,日光灯下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显一个相同的黄色斑点;置紫外光灯(365nm)下检视,在与对照药材色谱相应的位置上,显两个相同的黄色荧光斑点;在与对照品色谱相应的位置上,显一个相同的黄色荧光斑点,则判为符合规定。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(4)中的展开条件为:展开温度40℃以下、湿度30%-75%RH。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(4)中的展开距离为8~14cm。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的颈康胶囊是由以下重量份的各原料组成:熟地黄100-300份,何首乌100-300份,杜仲100-300份,鹿衔草100-300份,骨碎补(烫)100-300份,钩藤50-200份,葛根50-200份,三七10-150份,莱菔子(炒)50-200份。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的颈康胶囊将熟地黄、何首乌、杜仲、鹿衔草、骨碎补(烫)、钩藤、葛根、三七、莱菔子(炒)按照权利要求3所述的重量份称量,经灭菌干燥、提取、浓缩、制粒整粒、填充、包装的生产方法制得。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述的颈康胶囊按照以下方法制备得到:
(1)按以下所述的重量份数称取各原料:熟地黄100-300份,何首乌100-300份,杜仲100-300份,鹿衔草100-300份,骨碎补(烫)100-300份,钩藤50-200份,葛根50-200份,三七10-150份,莱菔子(炒)50-200份;
(2)生产方法
a、灭菌干燥:
取1/2量的三七粉碎后置灭菌柜中,100℃流通蒸汽灭菌30分钟;取出置干燥柜中70-80℃干燥1-1.5h,干燥后的三七生药粉粉碎、过筛后暂存待用;
b、提取
剩余三七及其余八味中药材置提取罐中,加水蒸煮两次,第一次加10倍量水煎煮3小时,滤过,保存滤液;第二次加8倍量水煎煮2小时,滤过,合并两次滤液;
c、浓缩
滤液真空浓缩至80℃下相对密度为1.30~1.35的稠膏;
d、制粒、整粒
将三七生药粉、淀粉置于制粒机中,加入稠膏混合后进行制粒;置整粒机中整粒,整粒后过筛;
e、填充
整粒后的物料置胶囊填充机中进行填充;
f、包装
胶囊填充后包装,即得。
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Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005021018A1 (de) * | 2003-08-22 | 2005-03-10 | Fachhochschule Neubrandenburg | Verfahren zur entfernung von aloin, emodin und/oder iso-emodin aus aloe vera durch behandlung mit oxidase |
AU2009255626A1 (en) * | 2008-06-06 | 2009-12-10 | Bionovo, Inc. | Anthraquinones and analogs from Rhuem palmatum for treatment of estrogen receptor beta-mediated conditions |
CN102133363A (zh) * | 2011-03-22 | 2011-07-27 | 唐秋海 | 一种石椒草咳喘颗粒的质量检测方法 |
CN102998410A (zh) * | 2011-09-13 | 2013-03-27 | 天士力制药集团股份有限公司 | 一种养血清脑颗粒的质量检测方法 |
CN109394889A (zh) * | 2019-01-09 | 2019-03-01 | 山东中泰药业有限公司 | 一种治疗颈椎病的中药胶囊及其制备方法 |
-
2019
- 2019-05-07 CN CN201910375464.3A patent/CN110057960A/zh active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005021018A1 (de) * | 2003-08-22 | 2005-03-10 | Fachhochschule Neubrandenburg | Verfahren zur entfernung von aloin, emodin und/oder iso-emodin aus aloe vera durch behandlung mit oxidase |
AU2009255626A1 (en) * | 2008-06-06 | 2009-12-10 | Bionovo, Inc. | Anthraquinones and analogs from Rhuem palmatum for treatment of estrogen receptor beta-mediated conditions |
CN102133363A (zh) * | 2011-03-22 | 2011-07-27 | 唐秋海 | 一种石椒草咳喘颗粒的质量检测方法 |
CN102998410A (zh) * | 2011-09-13 | 2013-03-27 | 天士力制药集团股份有限公司 | 一种养血清脑颗粒的质量检测方法 |
CN109394889A (zh) * | 2019-01-09 | 2019-03-01 | 山东中泰药业有限公司 | 一种治疗颈椎病的中药胶囊及其制备方法 |
Non-Patent Citations (6)
Title |
---|
LISHUANG LV 等: "Stilbene Glucoside from Polygonum multiflorum Thunb.: A Novel Natural Inhibitor of Advanced Glycation End Product Formation by Trapping of Methylglyoxal", 《J. AGRIC. FOOD CHEM.》 * |
国家药典委员会: "《中华人民共和国药典 2015年版 一部》", 30 June 2015, 中国医药科技出版社 * |
曾翠梅 等: "颈康胶囊的质量标准研究", 《福建中医药》 * |
湖北省食品药品监督管理局: "《湖北省医疗机构制剂规范(2011年版)》", 30 November 2012, 湖北科学技术出版社 * |
牛宇东等: "薄层扫描法测定减肥降脂胶囊中大黄素的含量 ", 《西北药学杂志》 * |
陈志娟等: "降脂冲剂中何首乌与决明子的薄层鉴别 ", 《天津中医药》 * |
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
CB02 | Change of applicant information |
Address after: 150025 Zhuhai Road, Limin District, Hulan District, Heilongjiang, Harbin Applicant after: Letai Pharmaceutical Co.,Ltd. Address before: 150025 Zhuhai Road, Limin District, Hulan District, Heilongjiang, Harbin Applicant before: HARBIN KUAIHAO PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. |
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CB02 | Change of applicant information | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190726 |
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |