CN102133363A - 一种石椒草咳喘颗粒的质量检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明是一种石椒草咳喘颗粒的质量检测方法。石椒草咳喘颗粒的处方组成为：陈皮156g，石菖蒲96g，虎杖312g，天冬188g，石椒草375g，百部96g；通关藤750g，臭灵丹375g，苦杏仁96g，鱼腥草375g，桑白皮188g，制成颗粒剂。本发明在原标准基础上增加了石椒草的薄层色谱鉴别，为该药主要组成之一。在原标准基础上增加了石椒草的薄层鉴别后，对该制剂中石椒草的定性控制提供科学依据，完善石椒草咳喘颗粒质量检测标准同时，对产品真伪、质量控制判断也提供了科学依据。该方法样品试验操作简便，经过阴性干扰等不断验证检验证明，阴性无干扰、重现性良好，专属性强。完善了质量检测标准，提升了对该产品质量控制能力。

Description

一种石椒草咳喘颗粒的质量检测方法

 

技术领域

本发明涉及药品检测技术领域，具体地说是一种石椒草咳喘颗粒的质量检测方法。

背景技术

石椒草咳喘颗粒具有清热化痰、止咳平喘功能，用于肺热引起的咳嗽痰稠、口干咽痒，以及急慢性支气管炎引起的痰湿咳喘。石椒草咳喘颗粒的药物处方为：陈皮156g，石菖蒲96g，虎杖312g，天冬188g，石椒草375g，百部96g；通关藤750g，臭灵丹375g，苦杏仁96g，鱼腥草375g，桑白皮188g。制法：以上十一味药材，石菖蒲、臭灵丹、石椒草、鱼腥草用水蒸汽蒸馏法提取挥发油，收集挥发油，备用；蒸馏后的水溶液另器收集；药渣与其余陈皮等七味药材，加水煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液加入上述蒸馏后的水溶液，浓缩至适量。加乙醇使含醇量为50%，静置12小时，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.32～1.35(80℃)的稠膏，加入蔗糖、糊精，制成颗粒，干燥，喷入上述挥发油，密闭24小时，混匀，即得。本品为浅棕色至棕褐色的颗粒；气香，味甜、微酸。现有的检测质量标准中规定了本方陈皮、天冬、大黄素的薄层色谱鉴别，采用高效液相色谱法测定处方中主要成份之一的陈皮中的橙皮苷，但本方含药材多，而且，主要组成之一的石椒草未有检测项目。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种石椒草咳喘颗粒的质量检测方法，以提高石椒草咳喘颗粒的质量控制标准。

石椒草咳喘颗粒的处方组成为：陈皮156g，石菖蒲96g，虎杖312g，天冬188g，石椒草375g，百部96g；通关藤750g，臭灵丹375g，苦杏仁96g，鱼腥草375g，桑白皮188g。

本发明的石椒草咳喘颗粒的检测方法如下：

1、鉴别：

（1）取本品内容物10g，加水30ml使溶解，通过D₁₀₁型大孔树脂柱用水200ml洗脱，弃去洗脱液，继用体积浓度30%乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，再用50%乙醇150ml洗脱，收集洗脱液，蒸至无醇味；用水饱和的正丁醇振摇提取三次，每次分别为40ml、20ml、20ml，合并正丁醇液；用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次分别为20ml、20ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液，照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以质量浓度0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-水为10：1.7：1.3体积比作为展开剂，展开约4cm，取出，晾干，再以甲苯-醋酸乙酯-甲酸-水为20：10：1：1体积比的上层溶液为展开剂，展至约8cm，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（2）取本品内容物10g，加水30ml与体积浓度20%的盐酸溶液10ml,加热回流30分钟，放冷，加二氯甲烷振摇提取三次，每次分别为：30ml、20ml、20ml，合并二氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取天冬对照药材1g，加水煎煮1小时，滤过，取滤液加水至30ml，用与内容物制成供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯为1：1体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积浓度10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（3）取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B的薄层色谱法试验，吸取鉴别中（2）项下供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯-甲酸为30：10：0.5体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色；

（4）取本品内容物10g，加热水40ml使溶解，放冷，用氨试液调节pH至10～11，移入分液漏斗中，用二氯甲烷提取三次，每次分别为：30ml、20 ml、20 ml，合并二氯甲烷液，蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；另取石椒草对照药材2g，加水煎煮1小时，滤过，取滤液用氨试液调节pH至10～11，用与内容物制成供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-氯仿-甲醇为10～15: 3～11：0.5～1.5体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下观察；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

2）含量测定：

（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.1%磷酸溶液为20～28:72～80体积比作为流动相，检测波长为283nm，理论板数按橙皮苷峰计算应不低于4000；

（2）对照品溶液的制备：称取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得；

（3）供试品溶液的制备：将本品装量差异项下的内容物，研细，混匀，取4g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流提取30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，滤过，取续滤液即得；

（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每袋含陈皮以橙皮苷（C₂₈H₃₄O₁₅）计，不得少于3.0mg。

本发明在原标准基础上增加了处方主要组成之一的石椒草的薄层色谱鉴别，为芸香科松风草属植物石椒草Boenninghausenia sessilicarpa Levl.的全草。秋季割取全草，洗净切段晒干。功能主治为清热解毒，活血止痛。用于感冒，扁桃体炎，腮腺炎，支气管炎，胃痛腹胀，血栓闭塞性脉管炎，腰痛，跌打损伤。为该药主要组成之一。在原标准基础上增加了石椒草的薄层鉴别后，对该制剂中石椒草的定性控制提供科学依据，完善石椒草咳喘颗粒质量检测标准同时，对产品真伪、质量控制判断也提供了科学依据。另外，该检测方法经过反复多次试验的出，该方法样品试验操作简便，经过阴性干扰等不断验证检验证明，阴性无干扰、重现性良好，专属性强。完善了质量检测标准，同时，提升了对该产品质量控制能力。

具体实施方式

实施例1：

本发明的石椒草咳喘颗粒的检测方法如下：

1、鉴别：

（1）取本品内容物10g，加水30ml使溶解，通过D₁₀₁型大孔树脂柱用水200ml洗脱，弃去洗脱液，继用30%乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，再用50%乙醇150ml洗脱，收集洗脱液，蒸至无醇味；用水饱和的正丁醇振摇提取三次，每次分别为40ml、20ml、20ml，合并正丁醇液；用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次分别为20ml、20ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-水（10：1.7：1.3）为展开剂，展开约4cm，取出，晾干，再以甲苯-醋酸乙酯-甲酸-水（20：10：1：1）的上层溶液为展开剂，展至约8cm，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（2）取本品内容物10g，加水30ml与20%的盐酸溶液10ml,加热回流30分钟，放冷，加二氯甲烷振摇提取三次，每次分别为：30ml、20ml、20ml，合并二氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取天冬对照药材1g，加水煎煮1小时，滤过，取滤液加水至30ml，用与内容物制成供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯（1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（3）取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取鉴别中（2）项下供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯-甲酸（30：10：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色；

（4）取本品内容物10g，加热水40ml使溶解，放冷，用氨试液调节pH至10～11，移入分液漏斗中，用二氯甲烷提取三次，每次分别为：30ml、20 ml、20 ml，合并二氯甲烷液，蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；另取石椒草对照药材2g，加水煎煮1小时，滤过，取滤液用氨试液调节pH至10～11，用与内容物制成供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-氯仿-甲醇（15:8：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下观察；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

2、含量测定：

（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.1%磷酸溶液(24:76)为流动相，检测波长为283nm，理论板数按橙皮苷峰计算应不低于4000；

（2）对照品溶液的制备：称取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得；

（3）供试品溶液的制备：将本品装量差异项下的内容物，研细，混匀，取4g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流提取30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，滤过，取续滤液即得；

（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每袋含陈皮以橙皮苷（C₂₈H₃₄O₁₅）计，不得少于3.0mg。

实施例2：

鉴别项中步骤（1）、（2）、（3）与实施例1相同。

（4）取本品内容物10g，加热水40ml使溶解，放冷，用氨试液调节pH至10～11，移入分液漏斗中，用二氯甲烷提取三次，每次分别为：30ml、20 ml、20 ml，合并二氯甲烷液，蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；另取石椒草对照药材2g，加水煎煮1小时，滤过，取滤液用氨试液调节pH至10～11，用与内容物制成供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-氯仿-甲醇为10: 3：0.5体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下观察；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

2）含量测定：

（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.1%磷酸溶液为20:72体积比作为流动相，检测波长为283nm，理论板数按橙皮苷峰计算应不低于4000；

其余步骤与实施例1相同。

实施例3：

鉴别项中步骤（1）、（2）、（3）与实施例1相同。

（4）取本品内容物10g，加热水40ml使溶解，放冷，用氨试液调节pH至10～11，移入分液漏斗中，用二氯甲烷提取三次，每次分别为：30ml、20 ml、20 ml，合并二氯甲烷液，蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；另取石椒草对照药材2g，加水煎煮1小时，滤过，取滤液用氨试液调节pH至10～11，用与内容物制成供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-氯仿-甲醇为15: 11：1.5体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下观察；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

2）含量测定：

（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.1%磷酸溶液为28: 80体积比作为流动相，检测波长为283nm，理论板数按橙皮苷峰计算应不低于4000；

其余步骤与实施例1相同。

石椒草咳喘颗粒质量标准

石椒草咳喘颗粒

Shijiaocao Kechuan Keli

【处  方】     陈  皮156g    石菖蒲96g    虎  杖312g

天  冬188g    石椒草375g   百  部96g

通关藤750g    臭灵丹375g    苦杏仁96g

鱼腥草375g    桑白皮188g

【制  法】以上十一味药材，石菖蒲、臭灵丹、石椒草、鱼腥草用水蒸汽蒸馏法提取挥发油，收集挥发油，备用；蒸馏后的水溶液另器收集；药渣与其余陈皮等七味药材，加水煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液加入上述蒸馏后的水溶液，浓缩至适量。加乙醇使含醇量为50%，静置12小时，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.32～1.35(80℃)的稠膏，加入蔗糖720g及糊精适量，制成颗粒，干燥，喷入上述挥发油，密闭24小时，混匀，制成1000g,即得。

【性  状】 本品为浅棕色至棕褐色的颗粒；气香，味甜、微酸。

【鉴  别】 （1）取本品内容物10g，加水30ml使溶解，通过D₁₀₁型大孔树脂柱（内径：1.5cm，长：15cm），用水200ml洗脱，弃去洗脱液，再用30%乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，继用50%乙醇150ml洗脱，收集洗脱液，蒸至无醇味；用水饱和的正丁醇振摇提取三次（40ml，20ml，20ml），合并正丁醇液；用正丁醇饱和的水洗涤两次（20ml，20ml），弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-水（10：1.7：1.3）为展开剂，展开约4cm，取出，晾干，再以甲苯-醋酸乙酯-甲酸-水（20：10：1：1）的上层溶液为展开剂，展至约8cm，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

（2）取本品内容物10g，加水30ml与20%的盐酸溶液10ml,加热回流30分钟，放冷，加二氯甲烷振摇提取三次（30ml、20ml、20ml），合并二氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。取天冬对照药材1g，加水煎煮1小时，滤过，取滤液加水至30ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯（1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

（3）取[鉴别]（2）项下供试品供试品溶液作为供试品溶液。另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯-甲酸（30：10：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。

（4）取本品内容物10g，加热水40ml使溶解，放冷，用氨试液调节pH至10～11，移入分液漏斗中，用二氯甲烷提取三次（30ml、20 ml、20 ml），合并二氯甲烷液，蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。另取石椒草对照药材2g，加水煎煮1小时，滤过，取滤液用氨试液调节pH至10～11，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-氯仿-甲醇（15:8：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下观察。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

【检  查】 应符合颗粒剂项下有关的各项规定（中国药典2010年版一部附录 IC）。

【含量测定】

色谱条件与系统适用性试验    以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.1%磷酸溶液(24:76)为流动相，检测波长为283nm，理论板数按橙皮苷峰计算应不低于4000。

对照品溶液的制备    称取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备    将本品装量差异项下的内容物，研细，混匀，取4g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流提取30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，滤过，取续滤液即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每袋含陈皮以橙皮苷（C₂₈H₃₄O₁₅）计，不得少于3.0mg。

【功能主治】彝医：搓止拉七。

中医：清热化痰、止咳平喘。用于肺热引起的咳嗽痰稠、口干咽痒，以及急慢性支气管炎引起的痰湿咳喘。

【用法用量】温开水冲服，一次8～16g，一日3～4次。或遵医嘱。

【规  格】 每袋装8g。

【贮  藏】 密封。

【有效期】 2年。

Claims (1)

1.一种石椒草咳喘颗粒的质量检测方法，石椒草咳喘颗粒的处方组成为：陈皮156g，石菖蒲96g，虎杖312g，天冬188g，石椒草375g，百部96g；通关藤750g，臭灵丹375g，苦杏仁96g，鱼腥草375g，桑白皮188g，制成颗粒剂；其质量检测方法按以下步骤进行：

1）鉴别：

（1）取本品内容物10g，加水30ml使溶解，通过D₁₀₁型大孔树脂柱用水200ml洗脱，弃去洗脱液，继用体积浓度30%乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，再用50%乙醇150ml洗脱，收集洗脱液，蒸至无醇味；用水饱和的正丁醇振摇提取三次，每次分别为40ml、20ml、20ml，合并正丁醇液；用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次分别为20ml、20ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液，照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以质量浓度0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-水为10：1.7：1.3体积比作为展开剂，展开约4cm，取出，晾干，再以甲苯-醋酸乙酯-甲酸-水为20：10：1：1体积比的上层溶液为展开剂，展至约8cm，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（2）取本品内容物10g，加水30ml与体积浓度20%的盐酸溶液10ml,加热回流30分钟，放冷，加二氯甲烷振摇提取三次，每次分别为：30ml、20ml、20ml，合并二氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取天冬对照药材1g，加水煎煮1小时，滤过，取滤液加水至30ml，用与内容物制成供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯为1：1体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积浓度10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（3）取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B的薄层色谱法试验，吸取鉴别中（2）项下供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯-甲酸为30：10：0.5体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色；

（4）取本品内容物10g，加热水40ml使溶解，放冷，用氨试液调节pH至10～11，移入分液漏斗中，用二氯甲烷提取三次，每次分别为：30ml、20 ml、20 ml，合并二氯甲烷液，蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；另取石椒草对照药材2g，加水煎煮1小时，滤过，取滤液用氨试液调节pH至10～11，用与内容物制成供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-氯仿-甲醇为10～15: 3～11：0.5～1.5体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下观察；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

2）含量测定：

（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.1%磷酸溶液为20～28:72～80体积比作为流动相，检测波长为283nm，理论板数按橙皮苷峰计算应不低于4000；

（2）对照品溶液的制备：称取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得；

（3）供试品溶液的制备：将本品装量差异项下的内容物，研细，混匀，取4g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流提取30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，滤过，取续滤液即得；

（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。