CN102614378B - 养阴降糖中药组合物及其制备方法和检测方法 - Google Patents
养阴降糖中药组合物及其制备方法和检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102614378B CN102614378B CN201210126832.9A CN201210126832A CN102614378B CN 102614378 B CN102614378 B CN 102614378B CN 201210126832 A CN201210126832 A CN 201210126832A CN 102614378 B CN102614378 B CN 102614378B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- add
- water
- thin
- reference substance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明提供了一种具有养阴益气,清热活血功能的中药组合物及其制备方法和检测方法。该中药组合物由黄芪、党参、葛根、枸杞子、玄参、玉竹、地黄、知母、牡丹皮、川芎、虎杖、五味子等十二味药组成,制成片剂,包薄膜衣,0.6g/片,其每制剂单位含葛根以葛根素含量计不得少于1.6mg且和黄芪甲苷的含量计不少于0.48mg。优点和效果:其品质更加稳定、疗效更加确切,该检测方法包括采用高效液相色谱法检测中药组合物中葛根素的含量和黄芪甲苷的含量,该方法更加简便、稳定,精密度高、重现性好,能够全面、有效地表征养阴降糖中药组合物的有效成分含量,有利用于监控产品的质量。
Description
技术领域
本发明属于中药学领域,涉及一种具有养阴益气,清热活血功能,用于气阴不足、内热消渴、症见烦热口渴、多饮多食、倦怠乏力的2型糖尿病见上述症状的中药组合物的制备方法和检测方法,具体为养阴降糖中药组合物及其制备方法和检测方法。
背景技术
糖尿病属于中医学消渴病范畴,以三多一少症及尿中有甜味为其症状特征。病机主要表现为本虚标实,气阴虚为本,燥热、瘀血为标。近年来糖尿病的发病率呈快速增长趋势,且并发症严重,治疗手段有限,是现代难治性疾病之一。
国家知识产权局网在2010年9月29日授权公告了名称为“一种治疗糖尿病的药物的质量检测方法”的专利,专利号:CN200810018127.0,申请日:2008.05.05,其具体公开了一种治疗糖尿病的药物的质量检测方法,该方法包括治疗糖尿病的药物的鉴别、检查、浸出物以及含量测定等步骤。本发明通过薄层色谱法,实现了对黄芪甲苷、葛根素、菝葜皂苷元、西洋参和人参皂苷Rb1、Re和Rg1鉴别,同时采用双波长扫描法对人参皂苷Re含量的准确测定,每粒含西洋参以人参皂苷Re(C48H82O18)计,不得少于0.10mg。
国家知识产权局网在2011年12月14日授权公告了名称为“治疗糖尿病的药物组合物”,专利号:CN200810049804.5申请日:2008.05.19,其提出处方配比为黄芪129~516g、地黄129~516g、白芍86~344g、麦冬86~344g、葛根86~344g、丹参86~344g、水蛭51.5~206g、黄芩64.5~258g、黄连64.5~258g、玄参86~344g、川芎64.5~258g、川牛膝64.5~258g的药材组合与适宜的药学可接受辅料;用适宜工艺制成,治疗用途为II型糖尿病周围神经病变、心脑血管粥样硬化、高血压、高血脂症。
发明内容
因此,本发明的一个目的是提供一种养阴降糖中药组合物及其制备方法,该养阴降糖中药组合物的有效成分种类及其含量被进一步优化,质量更稳定且疗效更确切,适用于工业化生产。
本发明的另一个目的是提供一种制备该养阴降糖中药组合物的检测方法,从而能够更加全面、有效地表征养阴降糖中药组合物的有效成分种类及其含量,更有利用于监控产品的质量。
本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的。
一种养阴降糖中药组合物,其特征是:由以下重量配比范围的原料药制成:黄芪460-540份,党参180-240份,葛根240-300份,枸杞子180-240份,玄参240-300份,玉竹180-240份,地黄320-400份,知母180-240份,牡丹皮180-240份,川芎240-300份,虎杖320-400份,五味子100-160份,共十二味药;优选地,制成的中药组合物每制剂单位含葛根以葛根素含量计不得少于1.6mg且和黄芪甲苷的含量计不少于0.48mg。
所述的一种养阴降糖中药组合物,其特征是:由以下重量配比较佳范围的原料药制成:黄芪495-505份,党参215-225份,葛根285-295份,枸杞子215-225份,玄参285-295份,玉竹215-225份,地黄355-365份,知母215-225份,牡丹皮215-225份,川芎285-295份,虎杖355-365份,五味子135-145份,共十二味药;优选地,制成的中药组合物每制剂单位含葛根以葛根素含量计不得少于1.6mg且和黄芪甲苷的含量计不少于0.48mg。
所述的一种养阴降糖中药组合物,其特征是:由以下重量配比定值的原料药制成:黄芪500g,党参220g,葛根290g,枸杞子220g,玄参290g,玉竹220g,地黄360g,知母220g,牡丹皮220g,川芎290g,虎杖360g,五味子140g;优选地,制成的中药组合物每制剂单位含葛根以葛根素含量计不得少于1.6mg且和黄芪甲苷的含量计不少于0.48mg。
根据上面所述的养阴降糖中药组合物的制备方法,其特征在于,所述中药组合物的剂型为片剂、丸剂或者胶囊剂固体制剂,优选为片剂薄膜衣片;其制备方法为以下步骤:知母,枸杞子,牡丹皮和五味子粉碎成细粉,黄芪,葛根粉碎成最粗粉,照中国药典附录流浸膏剂与浸膏剂项下的渗滤法(附录IO),用70%的乙醇为溶剂进行渗滤,收集渗滤液;药渣与其余党参等六味加水煎煮2次,每次2小时,第一次加水10倍量,第二次加水8倍量,合并煎液,滤过,渗滤液回收乙醇后,与上述滤液合并,减压浓缩成稠膏,干燥后粉碎成细粉,与上述细粉混合均匀,加辅料,选自适量填充剂:淀粉、糊精、甘露醇、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠中的至少一种混合,如淀粉适量;混匀,用60%乙醇制软材,过16目筛网制成湿颗粒,干燥,16目筛网整粒;取辅料,选适量自润滑剂:滑石粉、二氧化硅或硬脂酸镁中的至少一种混合,如硬脂酸镁适量加入干颗粒,混匀,压制成1000片,包薄膜衣,0.6g/片,即得。
根据上面所述的养阴降糖中药组合物制备方法制成的中药组合物的检测方法,其特征在于,所述检测方法采用高效液相色谱法检测中药组合物中黄芪的含量,含黄芪甲苷的含量计不少于0.48mg;所述检测中药组合物中黄芪甲苷的含量的高效液相色谱条件为:
色谱柱:BDS HYPERSIL C18柱(250x4.6mm,5um);流动相:乙腈-水(32∶68);用蒸发光散射检测器检测,流速:1.0ml/min;
在以上色谱条件下对照品黄芪甲苷与相邻色谱峰分离度大于2.0,理论塔板数按黄芪甲苷峰记不低于3000;
所述检测中药组合物中黄芪甲苷的含量还包括制备供试品溶液,所述制备供试品溶液步骤:取本品10片,除去糖衣,研细,置具塞锥形瓶中,加80ml甲醇超声提取30min第一次,倒出甲醇液,再加甲醇50ml超声30min,合并提取液浓缩至干,残渣加20ml水溶解,用水饱和正丁醇液萃取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用氨试液充分洗涤2次,每次20ml,弃去氨液,再用水饱和正丁醇洗涤2次,每次25ml,分取正丁醇层,置水浴锅上蒸干,残渣加甲醇溶解后转移到5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,过0.45um微孔滤膜,即得。
所述检测中药组合物中黄芪甲苷的含量还包括制备对照品溶液,所述制备对照品溶液步骤:精密称定黄芪甲苷对照品5.01mg,加甲醇溶解并定容至10ml容量瓶中,即得。
根据上面所述的养阴降糖中药组合物制备方法制成的中药组合物的检测方法,其特征在于:所述检测方法测得的中药组合物每制剂单位含葛根素含量计不少于1.6mg。
根据上面所述的养阴降糖中药组合物制备方法的中药组合物的检测方法,其特征在于:所述检测方法还包括以下步骤:
(1)采用薄层色谱法检测知母;
优选地,采用薄层色谱法检测知母包括以下步骤:取本品10片,除去包衣,研碎,加乙醇50ml,加热回流40分钟,滤过,滤液加盐酸3ml,加热回流1小时,加水15ml,加氯仿25ml振摇提取,将氯仿提取液蒸干,残渣加氯仿2ml使溶解,作为供试品溶液。
取菝葜皂苷元对照品,加氯仿制成每ml含1mg的溶液即得;阴性对照溶液的制备:取不含知母的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液;
分别吸取上述供试品溶液、对照溶液、阴性对照溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-丙酮(9∶1)为展开剂,层析缸另槽加氨水2ml,展开,晾干至无氨味,喷以5%香草醛硫酸溶液,加热至斑点显色清晰,结果显示,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照溶液无干扰。
(2)采用薄层色谱法检测党参;
优选地,采用薄层色谱法检测党参包括以下步骤:取本品10片,除去包衣,研碎,用乙醚超声两次(30,20ml),10min/次,弃去乙醚液,残渣挥尽乙醚,加水30ml,盐酸3ml,置沸水浴中回流30min,冷却,用氯仿萃取两次(30,30ml),合并氯仿液,浓缩至1ml,作为供试液;
取党参对照药材1g,加水适量煮沸30min,滤过,滤液浓缩至30ml,加盐酸3ml,置沸水浴中回流30min,冷却,用氯仿萃取两次(30,30ml)合并氯仿液,浓缩至1ml.取不含党参的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液;
分别吸取供试液,对照品和党参空白对照液各5ul,点于同一硅胶G板,以体积比20∶8∶0.5苯-醋酸乙酯-甲酸为展开剂,展开后晾干,喷以10%硫酸乙醇液,105℃烘至斑点清晰,结果在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照溶液无干扰;
(3)采用薄层色谱法检测川芎;
优选地,采用薄层色谱法检测川芎包括以下步骤:取本品5片,除去包衣,研细,加乙醚20ml,超声提取30min滤过,滤液蒸干,残渣加乙酸乙酯1ml使溶解,作为供试液;
取川芎对照药材1g,加乙醚20ml,超声提取20min滤过,滤液蒸干,残渣加乙酸乙酯1ml使溶解,作为对照药材溶液,取不含川芎的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液;
照薄层色谱法(中国药典2010版一部附录VI B)试验,吸取上述三种溶液各5ul,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比9∶1环己烷-乙酸乙酯为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视,结果在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照溶液无干扰;
(4)采用薄层色谱法检测牡丹皮;
优选地,采用薄层色谱法检测牡丹皮包括以下步骤:取本品10片,除去糖衣,研细,加乙醚30ml,超声提取20min,滤过,合并乙醚液,药渣挥尽乙醚,加甲醇150ml,超声提取20min,滤过,滤液置水浴上蒸干,残渣加水30ml使溶解,再加用水饱和的正丁醇80ml,分2次提取(50,30ml),合并正丁醇液,加2倍量氨试液洗涤,弃去氨溶液,正丁醇液置水浴上蒸干,残渣加80%甲醇3ml,转移至已处理好的中性氧化铝柱(内径约1cm,层析用中性氧化铝100~200目,5g)上,用80%的甲醇50ml洗脱,洗脱液置水浴上蒸干,残渣加醋酸乙酯1ml使溶解,作为供试品溶液;
取芍药苷对照品,加醋酸乙酯制成每毫升1mg的溶液,作为对照品溶液,取不含牡丹皮的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液;
照薄层色谱法(中国药典2010版一部附录VI B)试验,吸取上述溶液各10ul,分别点于同一羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以体积比40∶10∶5∶0.2氯仿-甲醇-醋酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%的香草醛硫酸溶液,在105℃烘至斑点清晰,结果在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照溶液无干扰;
(5)采用薄层色谱法检测葛根
优选地,采用薄层色谱法检测葛根包括以下步骤:取养阴降糖片10片,除去糖衣,研细,加醋酸乙酯20ml,超声处理20min,滤过,滤液蒸干,加甲醇1ml溶解,作为葛根供试液;
取葛根素对照品,加乙醇制成每ml含1mg的溶液即得,取不含葛根的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液;
分别吸取供试液,对照品和葛根空白对照液各5ul,点于同一硅胶G薄层板上,以体积比7∶2.5∶0.25氯仿-甲醇-水为展开剂,取出后晾干,置氨蒸气中熏5~10min,紫外灯365nm下检视,结果与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,阴性对照溶液无干扰。
本发明的优点和效果:为了更充分地保障养阴降糖中药组合物的疗效和品质,本发明申请人经过大量实验和研究,最终明确了影响养阴降糖中药组合物的疗效和品质的主要有效成分种类,即葛根素以及黄芪甲苷的含量,同时还确定了其它影响疗效和品质的有效成分种类,其中包括虎杖、枸杞子、党参、川芎、牡丹皮、葛根、知母等其他成分。基于上述有效成分种类及其含量的研究成果获得的养阴降糖中药组合物品质更加稳定、疗效更加确切。此外,为了进一步全面、准确和有效地的监控养阴降糖中药组合物的上述有效成分,本发明还提供了行之有效的检测方法,与现有养阴降糖中药组合物的检测方法相比,其中除了以高效液相色谱法检测葛根素的含量外,还在相同的高效液相色谱条件下实现了黄芪甲苷的含量检测。此外,本发明还确定了黄芪甲苷含量的高效液相色谱最适检测条件,进一步反映了来自黄芪的有效成分的含量,以及确定了采用薄层色谱法定性检测其他有效成分的适宜条件。实验数据表明,相对于现有技术的常规检测方法而言,由于检测步骤和检测条件的优化,使得本发明提供的检测方法更加简便、稳定,重现性好,能够全面、有效地表征养阴降糖中药组合物的有效成分含量,更有利于监控产品的质量。为实现工业化大规模的生产打下有力的条件和基础。
附图说明
以下,结合附图来详细说明本发明的实施方案,其中:
图1为实施例2获得的检测黄芪甲苷对照及养阴降糖片中黄芪甲苷含量的高效液相-蒸发光散射图谱。
图2为实施例3获得的检测知母的薄层色谱图,1,4为样品120201,2,5为菝葜皂苷元对照品,3,6为阴性对照。
图3为实施例4获得的检测党参的薄层色谱图,1,4为样品120201,2,5为党参对照药材,3,6为阴性对照。
图4为实施例5获得的检测川芎的薄层色谱图,1,4为样品120201,2,5为川芎对照药材,3,6为阴性对照。
图5为实施例6获得的检测牡丹皮的薄层色谱图,1,4为样品120201,2,5为芍药苷对照品,3,6为阴性对照。
图6为实施例7获得的检测葛根素的薄层色谱图,1,4为样品120201,2,5为葛根素对照品,3,6为阴性对照。
具体实施方式
以下参照具体的实施例来详细说明本发明。本领域技术人员能够理解,这些实施例仅用于说明本发明,其不以任何方式限制本发明的范围。特别说明的是:工艺流程和检测方法中的温度和压力参数在没有特别说明的情况下,均指在常温常压下的条件下操作。
实施例1:养阴降糖片的制备
1、处方和制法如下:
由以下重量配比定值的原料药制成:黄芪500g,党参220g,葛根290g,枸杞子220g,玄参290g,玉竹220g,地黄360g,知母220g,牡丹皮220g,川芎290g,虎杖360g,五味子140g;共十二味药。
知母,枸杞子,牡丹皮和五味子粉碎成细粉,黄芪,葛根粉碎成最粗粉,照中国药典附录流浸膏剂与浸膏剂项下的渗滤法(附录I O),用70%的乙醇为溶剂进行渗滤,收集渗滤液;药渣与其余党参等六味加水煎煮2次,每次2小时,第一次加水10倍量,第二次加水8倍量,合并煎液,滤过,渗滤液回收乙醇后,与上述滤液合并,减压浓缩成稠膏,干燥后粉碎成细粉,与上述细粉混合均匀,加适量淀粉,用60%乙醇制软材,过16目筛网制成湿颗粒,干燥,16目筛网整粒;取硬脂酸镁适量加入干颗粒,混匀,压制成1000片,包薄膜衣,即得。
2、处方和制法如下:此处方排除上面的定值处方外,与上相比只是扩大了取值范围,制法同上。
取黄芪460-540份之间任意自然数值均可,如取十组,如460、470、480、490、495、505、515、525、535、540份;
党参180-240份之间任意自然数值均可,如取十组,如240、230、225、210、220、215、200、205、190、180份;
葛根240-300份之间任意自然数值均可,如取十组,如240、250、270、280、285、290、295、300、260、265份;
枸杞子180-240份,之间任意自然数值均可,如取十组,如240、230、215、225、220、180、190、195、200、210份;
玄参240-300份,之间任意自然数值均可,如取十组,如240、300、285、295、290、250、260、270、255、275份;
玉竹180-240份,之间任意自然数值均可,如取十组,如240、230、215、225、220、180、190、195、200、210份;
地黄320-400份,之间任意自然数值均可,如取十组,如320、355、400、385、360、340、370、350、330、365份;
知母180-240份,之间任意自然数值均可,如取十组,如210、180、195、225、220、230、190、215、200、240份;
牡丹皮180-240份,之间任意自然数值均可,如取十组,如200、210、190、180、220、225、240、195、215、230份;
川芎240-300份,之间任意自然数值均可,如取十组,如275、300、285、295、255、250、260、270、290、240份;
虎杖320-400份,之间任意自然数值均可,如取十组,如375、300、400、385、330、340、370、350、360、320份;
五味子100-160份,之间任意自然数值均可,如取十组,如160、100、150、110、135、145、140、115、120、130份;
上述共十二味药,分成十组分别制作,本发明为治疗糖尿病的药物,为胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂中的一种。
实施例2:养阴降糖片中黄芪甲苷含量的检测
本实施例通过高效液相色谱法检测了实施例1制备的养阴降糖片中黄芪甲苷的含量。
仪器:高效液相色谱仪,DIONEX,型号Ultimate 3000,蒸发光散射检测器。
试剂:乙腈为色谱纯试剂;水为超纯水;其余试剂为分析纯。
对照品:黄芪甲苷购自中国药品生物制品检定研究院。
下文各实施例中涉及的相应仪器、试剂和对照品相同。
1、色谱条件:
色谱柱:BDS HYPERSIL C18柱(250x4.6mm,5um);流动相:乙腈-水32∶68;用蒸发光散射检测器检测。流速:1.0ml/min;
在以上色谱条件下对照品黄芪甲苷与相邻色谱峰分离度大于2.0,理论塔板数按黄芪甲苷峰记不低于3000。
2、对照品溶液的制备
精密称定黄芪甲苷对照品5.01mg,加甲醇溶解并定容至10ml容量瓶中即得。
3、供试品溶液的制备
取本品10片,除去糖衣,研细,置具塞锥形瓶中,加80ml甲醇超声提取30min第一次,倒出甲醇液,再加甲醇50ml超声30min,合并提取液浓缩至干,残渣加20ml水溶解,用水饱和正丁醇液萃取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用氨试液充分洗涤2次,每次20ml,弃去氨液,再用水饱和正丁醇洗涤2次,每次25ml,分取正丁醇层,置水浴锅上蒸干,残渣加甲醇溶解后转移到5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,过0.45um微孔滤膜,即得。
4、测定法
设定对照品溶液与供试品溶液进样体积10μl,进行测定,即得。
高效液相-蒸发光散射图谱见图1。将供试品图谱与对照品图谱比较,根据《中华人民共和国药典》2010版附录V D“高效液相色谱法”计算,测得每制剂单位含黄芪甲苷为0.60mg,符合黄芪甲苷的含量计不少于0.48mg的要求。
实施例3:采用薄层色谱法检测知母;
优选地,采用薄层色谱法检测知母包括以下步骤:取本品10片,除去包衣,研碎,加乙醇50ml,加热回流40分钟,滤过,滤液加盐酸3ml,加热回流1小时,加水15ml,加氯仿25ml振摇提取,将氯仿提取液蒸干,残渣加氯仿2ml使溶解,作为供试品溶液。
取菝葜皂苷元对照品,加氯仿制成每ml含1mg的溶液即得。阴性对照溶液的制备:取不含知母的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液。
分别吸取上述供试品溶液、对照溶液、阴性对照溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-丙酮(9∶1)为展开剂,层析缸另槽加氨水2ml,展开,晾干至无氨味,喷以5%香草醛硫酸溶液,加热至斑点显色清晰。结果显示,图2为实施例3获得的检测知母的薄层色谱图,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照溶液无干扰。
实施例4:采用薄层色谱法检测党参;
优选地,采用薄层色谱法检测党参包括以下步骤:取本品10片,除去包衣,研碎,用乙醚超声两次(30,20ml),10min/次,弃去乙醚液,残渣挥尽乙醚,加水30ml,盐酸3ml,置沸水浴中回流30min,冷却,用氯仿萃取两次(30,30ml),合并氯仿液,浓缩至1ml,作为供试液。
取党参对照药材1g,加水适量煮沸30min,滤过,滤液浓缩至30ml,加盐酸3ml,置沸水浴中回流30min,冷却,用氯仿萃取两次(30,30ml)合并氯仿液,浓缩至1ml。取不含党参的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液。
分别吸取供试液,对照品和党参空白对照液各5ul,点于同一硅胶G板,以苯-醋酸乙酯-甲酸20∶8∶0.5为展开剂,展开后晾干,喷以10%硫酸乙醇液,105℃烘至斑点清晰。结果在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照溶液无干扰;参看图3为实施例4获得的检测党参的薄层色谱图。
实施例5:采用薄层色谱法检测川芎;
优选地,采用薄层色谱法检测川芎包括以下步骤:取本品10片,除去包衣,研细,加乙醚20ml,超声提取30min滤过,滤液蒸干,残渣加乙酸乙酯1ml使溶解,作为供试液。
取川芎对照药材1g,加乙醚20ml,超声提取20min滤过,滤液蒸干,残渣加乙酸乙酯1ml使溶解,作为对照药材溶液。取不含川芎的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液。
照薄层色谱法(中国药典2010版一部附录VI B)试验,吸取上述三种溶液各5ul,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-乙酸乙酯(9∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。结果在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照溶液无干扰;图4为实施例5获得的检测川芎的薄层色谱图。
实施例6:采用薄层色谱法检测牡丹皮;
优选地,采用薄层色谱法检测牡丹皮包括以下步骤:取本品10片,除去糖衣,研细,加乙醚30ml,超声提取20min,滤过,合并乙醚液。药渣挥尽乙醚,加甲醇150ml,超声提取20min,滤过。滤液置水浴上蒸干,残渣加水30ml使溶解,再加用水饱和的正丁醇80ml,分2次提取(50,30ml)。合并正丁醇液,加2倍量氨试液洗涤,弃去氨溶液,正丁醇液置水浴上蒸干。残渣加80%甲醇3ml,转移至已处理好的中性氧化铝柱(内径约1cm,层析用中性氧化铝100~200目,5g)上,用80%的甲醇50ml洗脱,洗脱液置水浴上蒸干,残渣加醋酸乙酯1ml使溶解,作为供试品溶液。
取芍药苷对照品,加醋酸乙酯制成每毫升1mg的溶液,作为对照品溶液。取不含牡丹皮的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液。
照薄层色谱法(中国药典2010版一部附录VI B)试验,吸取上述溶液各10ul,分别点于同一羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇-醋酸乙酯-甲酸40∶10∶5∶0.2为展开剂,展开,取出,晾干。喷以5%的香草醛硫酸溶液,在105℃烘至斑点清晰。结果在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照溶液无干扰;图5为实施例6获得的检测牡丹皮的薄层色谱图。
实施例7采用薄层色谱法检测葛根
优选地,采用薄层色谱法检测葛根包括以下步骤:取养阴降糖片10片,除去糖衣,研细,加醋酸乙酯20ml,超声处理20min,滤过,滤液蒸干,加甲醇1ml溶解,作为葛根供试液。
取葛根素对照品,加乙醇制成每ml含1mg的溶液即得。取不含葛根的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液。
分别吸取供试液,对照品和葛根空白对照液各5ul,点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇-水(7∶2.5∶0.25)为展开剂,取出后晾干,置氨蒸气中熏5~10min,紫外灯365nm下检视。结果与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,阴性对照溶液无干扰。图6为实施例7获得的检测葛根素的薄层色谱图。
实施例8
为进一步验证其安全性和有效性,本发明在临床应用中共总结480例,其中试验组360例,对照组120例,收到了显著的临床疗效,未发现任何毒副作用,现总结如下:
1.试验设计类型、原则
1.1试验设计类型:多中心、随机、平行、阳性对照设计
1.2试验设计原则
(1)病例数:按3∶1对照原则,考虑不超过20%的退出率,总的例数确定为480例。
(2)随机分组法:多中心、随机、平行、阳性对照临床观察方法。借助SPSS12.0(医药统计软件名称)统计分析系统产生480例受试者所接受处理(试验药和对照药)的随机安排,即列出流水号为001~480所对应的治疗分配。
本试验由中国人民解放军第三医院、商洛市中医医院和蒲城县医院协同完成。随机指定试验中心号;中国人民解放军第三医院01、商洛市中医医院02、蒲城县医院03。对应药物随机编号为:中国人民解放军第三医院001-120、商洛市中医医院121-300、蒲城县医院301-480。
(3)对照:对照药选用(产地:吉林通化)降糖胶囊。理由:降糖胶囊功能是清热生津,滋阴润燥。用于消渴症,多饮,多尿,多食,消瘦,体倦无力及全身综合症。该药功用主治与试验药物相近,是目前国内疗效较为肯定的同类药物,疗效肯定,符合公认有效、可比原则。
2.治疗方案
2.1试验用药名称和规格
(1)试验药:养阴降糖片,由地黄、玄参、枸杞子、玉竹、葛根、知母等中药制成的片剂。由陕西方舟制药有限公司生产,每一药物随机编号对应全部疗程(8周用量),用药为8周±3天备用药量,
(2)对照药:降糖胶囊,由人参、知母、三颗针、五味子、干姜、人参茎叶皂苷制成的胶囊。由通化东日药业股份有限公司生产,每一药物随机编号对应全部疗程(8周用量),用药为8周±3天备用药量,国药准字Z22022668。
2.2用药方法
(1)试验组:养阴降糖,一次8片,一日3次,口服。
(2)对照组:降糖胶囊,一次4~6粒,一日3次,口服。
2.3合并用药
在试验期间,所有病例除以上治疗以外,不得使用其他同类治疗糖尿病的中西药。医生应要求患者在随访时必须将正在服用的所有药物带来,以检查患者的合并用药。合并疾病所必须继续服用的药物,或其他治疗必须在格式病案记录药名(或其他疗法名)、用量、使用次数和时间等,以便总结时加以分析和报告。
2.观察指标
2.1人口学资料
年龄、身高、体重、职业、生育情况、既往史、合并疾病、合并用药等。
2.2一般体格检查
呼吸、心率、血压、体温。
2.3安全性观测
(1)血、尿、便常规检查
(2)心、肝、肾功能检查。
(3)可能出现的不良反应及其相关检测指标。详细记录不良反应发生时间、临床症状、持续时间、处理措施及消失时间。
2.4疗效性观测
(1)相关症状主症、兼症及舌脉变化。
(2)相关体征
一般情况如体温的变化。
(3)空腹及餐后2小时血糖检测。
3.疗效评定标准
3.1综合疗效评定标准
(1)显效:治疗后症状基本消失,空腹血糖<7.2mmol/L(130mg/dl)餐后2小时血糖<8.3mmol/L(150mg/dl)。
(2)有效:治疗后症状基本消失,空腹血糖<8.3mmol/L(150mg/dl)餐后2小时血糖<10.0mmol/L(180mg/dl)。
(3)无效:达不到以上标准者。
3.2主要指标(局部体征)疗效评定标准
(1)显效:治疗后体征明显减轻,积分值减少≥70%,<95%,或降低1个级别。
(2)有效:治疗后体征有所减轻,积分值减少30%,<70%,或降低不足1级别。
(3)无效:达不大以上标准者。
3.3症候疗效评定标准
(1)显效:治疗后各症状明显减轻,症候积分值减少≥70%,<95%。
(2)有效:治疗后各症状有所减轻,症候积分值减少30%,<70%。
(3)无效:达不到以上标准者。
4.统计学
4.1统计分析人群
FAS集(full analysis set),全分析集,包括所有随机化入组的病例。而且至少服过一次药物,并有至少一次的疗效随访记录。
PPS(per protocol set),符合方案集,这是FAS总体的子集合,符合方案中入选排除标准,依从性好,试验期间未服用禁用药物、完成CRF表。
4.2统计分析方法
统计分析将采用SPSS12.0统计分析软件,采用双侧检验,P值小于或等于0.05将被认为所检验差别有统计学意义。
5试验结果
两组病例分布情况;本试验受试者入组总数为480例,其中试验组360例,对照组120例,试验组脱落数24例,脱落率6.67%,剔除率5例,剔除率1.39%,完成病例数111例,两组脱落,剔除率的比较无显著性差异。
6.综合疗效评定
从表1的两组治疗后综合疗效情况及比较-PPS、FAS来看:试验组总有效率89.73%高于对照组84.668%,试验组总有效率比较P值为0.170。
从表2的两组治疗前后综合疗效情况-PPS、FAS来看:治疗后的试验组空腹血糖(nmol/L)均数为7.184略比对照组7.196低,试验组餐后2小时血糖(mmol/L)均数为8.433略比对照组8.395高,说明两组情况相当,各略有优势。
从表3的两组治疗后主要指标(局部体征)疗效情况及比较-PPS、FAS来看:治疗后的试验组总有效率94.56%比对照组的90.09%高,试验组总有效率比较的P值为0.170。
从表4的两组治疗前后证候各单项评分情况-PPS、FAS来看,说明试验组在改变证候方面比对照组略有优势。
经检验,两组PPS、FAS集治疗后综合疗效比较无显著性差异;愈显率分别为:试验组23.26%,对照组15.32%,无显著性差异;总有效率分别为:试验组89.73%,对照组84.68%,无显著性差异。
主要指标(局部体征)疗效
经检验,两组PPS、FAS集治疗后主要指标(局部体征)疗效比较无显著性差异;愈显率分别为试验组27.79%,对照组19.82%,无显著性差异;总有效率为试验组94.56%,对照组90.09%,无显著性差异。
经检验,两组PPS、PPS集治疗前证候各单项评分比较无显著性差异,均衡可比;治疗前后证候单项评分差值比较心悸失眠有显著性差异,试验组优于对照组;其他各单项评分两组差值比较无显著性差异。
7.结论
养阴降糖片治疗消渴病(气阴两虚证,糖尿病)安全有效。
Claims (3)
1.用水提渗滤方法制备的养阴降糖中药组合物,其特征是:由以下重量配比定值的原料药制成:黄芪500g,党参220g,葛根290g,枸杞子220g,玄参290g,玉竹220g,地黄360g,知母220g,牡丹皮220g,川芎290g,虎杖360g,五味子140g;制成的中药组合物每制剂单位含葛根以葛根素含量计不得少于1.6mg且和黄芪甲苷的含量计不少于0.48mg;所述中药组合物的剂型为片剂、丸剂或者胶囊剂固体制剂,当采用片剂薄膜衣片;其制备方法为以下步骤:知母,枸杞子,牡丹皮和五味子粉碎成细粉;黄芪,葛根粉碎成最粗粉,照中国药典附录IO流浸膏剂与浸膏剂项下的渗滤法,用70%的乙醇为溶剂进行渗滤,收集渗滤液;药渣与其余党参、玄参、玉竹、地黄、川芎和虎杖六味加水煎煮2次,每次2小时,第一次加水10倍重量,第二次加水8倍重量,合并煎液,滤过,渗滤液回收乙醇后,与上述滤液合并,减压浓缩成稠膏,干燥后粉碎成细粉,与上述细粉混合均匀,加辅料,选自适量填充剂:淀粉、糊精、甘露醇、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠中的至少一种混合,混匀,用60%乙醇制软材,过16目筛网制成湿颗粒,干燥,16目筛网整粒;取辅料,选自适量润滑剂:滑石粉、二氧化硅或硬脂酸镁中的至少一种混合,适量加入干颗粒,混匀,压制成1000片,包薄膜衣,0.6g/片,即得。
2.根据权利要求1所述的养阴降糖中药组合物及其制备方法制成的中药组合物的检测方法,其特征在于,所述检测方法采用高效液相色谱法检测中药组合物中黄芪的含量,含黄芪甲苷的含量计不少于0.48mg;所述检测中药组合物中黄芪甲苷的含量的高效液相色谱条件为:
色谱柱:BDS HYPERSIL C18柱规格为250x4.6mm,5um;流动相:
乙腈:水=32:68;用蒸发光散射检测器检测,流速:1.0ml/min;
在以上色谱条件下对照品黄芪甲苷与相邻色谱峰分离度大于2.0,理论塔板数按黄芪甲苷峰记不低于3000;
所述检测中药组合物中黄芪甲苷的含量还包括制备供试品溶液,所述制备供试品溶液步骤:取本品10片,除去糖衣,研细,置具塞锥形瓶中,加80ml甲醇超声提取30min第一次,倒出甲醇液, 再加甲醇50ml超声30min,合并提取液浓缩至干,残渣加20ml水溶解,用水饱和正丁醇液萃取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用氨试液充分洗涤2次,每次20ml,弃去氨液,再用水饱和正丁醇洗涤2次,每次25ml,分取正丁醇层,置水浴锅上蒸干,残渣加甲醇溶解后转移到5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,过0.45um微孔滤膜,即得;
所述检测中药组合物中黄芪甲苷的含量还包括制备对照品溶液,所述制备对照品溶液步骤:精密称定黄芪甲苷对照品5.01mg,加甲醇溶解并定容至10ml容量瓶中,即得。
3.根据权利要求2所述的中药组合物的检测方法,其特征在于:该检测方法步骤如下:
(1)采用薄层色谱法检测知母;
采用薄层色谱法检测知母包括以下步骤:取本品10片,除去包衣,研碎,加乙醇50ml,加热回流40分钟,滤过,滤液加盐酸3ml,加热回流1小时,加水15ml,加氯仿25ml振摇提取,将氯仿提取液蒸干,残渣加氯仿2ml使溶解,作为供试品溶液;
取菝葜皂苷元对照品,加氯仿制成每ml含1mg的溶液即得;阴性对照溶液的制备:取不含知母的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液;
分别吸取上述阴性对照溶液、供试品溶液、对照溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-丙酮=9:1为展开剂,层析缸另槽加氨水2ml,展开,晾干至无氨味,喷以5%香草醛硫酸溶液,加热至斑点显色清晰,结果显示,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照溶液无干扰;
(2)采用薄层色谱法检测党参;
采用薄层色谱法检测党参包括以下步骤:取本品10片,除去包衣,研碎,用乙醚超声两次用量分别为30ml和20ml,10min/次,弃去乙醚液,残渣挥尽乙醚,加水30ml,盐酸3ml,置沸水浴中回流30min,冷却,用氯仿萃取,用量两次分别为30ml,30ml,合并氯仿液,浓缩至1ml,作为供试液;
取党参对照药材1g,加水适量煮沸30min,滤过,滤液浓缩至30ml,加盐酸3ml,置沸水浴中回流30min,冷却,用氯仿萃取, 用量两次分别为30ml,30ml,合并氯仿液,浓缩至1ml ,取不含党参的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液;
分别吸取供试液,对照品和党参空白对照液各5ul,点于同一硅胶G板,以体积比20:8:0.5苯-醋酸乙酯-甲酸为展开剂,展开后晾干,喷以10%硫酸乙醇液,105℃烘至斑点清晰,结果在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照溶液无干扰;
(3)采用薄层色谱法检测川芎;
采用薄层色谱法检测川芎包括以下步骤:取本品5片,除取包衣,研细,加乙醚20ml,超声提取30min滤过,滤液蒸干,残渣加乙酸乙酯1ml使溶解,作为供试液;
取川芎对照药材1g,加乙醚20ml,超声提取20min滤过,滤液蒸干,残渣加乙酸乙酯1ml使溶解,作为对照药材溶液,取不含川芎的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液;
按照中国药典2010版第一部附录VIB薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各5ul,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比9:1环己烷-乙酸乙酯为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯波长为365nm下检视,结果在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照溶液无干扰;
(4)采用薄层色谱法检测牡丹皮;
用薄层色谱法检测牡丹皮包括以下步骤:取本品10片,除去糖衣,研细,加乙醚30ml,超声提取20min,滤过,合并乙醚液,药渣挥尽乙醚,加甲醇150ml,超声提取20min,滤过,滤液置水浴上蒸干,残渣加水30ml使溶解,再加用水饱和的正丁醇80ml,分两次提取,用量分别为50ml,30ml,合并正丁醇液,加2倍量氨试液洗涤,弃去氨溶液,正丁醇液置水浴上蒸干,残渣加80%甲醇3ml,转移至已处理好的中性氧化铝柱上,其内径1cm,层析用中性氧化铝100~200目,5g,用80%的甲醇50ml洗脱,洗脱液置水浴上蒸干,残渣加醋酸乙酯1ml使溶解,作为供试品溶液;
取芍药苷对照品,加醋酸乙酯制成每毫升1mg的溶液,作为对照品溶液,取不含牡丹皮的阴性样品照供试品溶液的制备依法 操作,制成阴性对照溶液;
按照中国药典2010版第一部附录VIB薄层色谱法试验,吸取上述溶液各10ul,分别点于同一羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以体积比40:10:5:0.2氯仿-甲醇-醋酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%的香草醛硫酸溶液,在105℃烘至斑点清晰,结果在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照溶液无干扰;
(5)采用薄层色谱法检测葛根
采用薄层色谱法检测葛根包括以下步骤:取养阴降糖片10片,除去糖衣,研细,加醋酸乙酯20ml,超声处理20min,滤过,滤液蒸干,加甲醇1ml溶解,作为葛根供试液;
取葛根素对照品,加乙醇制成每ml含1mg的溶液即得,取不含葛根的阴性样品照供试品溶液的制备依法操作,制成阴性对照溶液;
分别吸取供试液,对照品和葛根空白对照液各5ul,点于同一硅胶G薄层板上,以体积比7:2.5:0.25氯仿-甲醇-水为展开剂,取出后晾干,置氨蒸气中熏5~10min,365nm紫外灯下检视,结果与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,阴性对照溶液无干扰。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210126832.9A CN102614378B (zh) | 2012-04-26 | 2012-04-26 | 养阴降糖中药组合物及其制备方法和检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210126832.9A CN102614378B (zh) | 2012-04-26 | 2012-04-26 | 养阴降糖中药组合物及其制备方法和检测方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102614378A CN102614378A (zh) | 2012-08-01 |
CN102614378B true CN102614378B (zh) | 2014-01-15 |
Family
ID=46554826
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201210126832.9A Active CN102614378B (zh) | 2012-04-26 | 2012-04-26 | 养阴降糖中药组合物及其制备方法和检测方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102614378B (zh) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102988748B (zh) * | 2012-10-08 | 2014-02-26 | 深圳市三也生物科技有限公司 | 一种养阴降糖片的制备方法及应用 |
CN103439449B (zh) * | 2013-07-25 | 2015-07-29 | 广东远大药业有限公司 | 一种用于补肺活血的药物的检测方法 |
CN104459005B (zh) * | 2014-11-21 | 2016-02-03 | 四川中方制药有限公司 | 一种清脑复神液的质量控制方法 |
CN104698120B (zh) * | 2015-03-17 | 2016-05-04 | 中山市中智药业集团有限公司 | 抗菌消炎胶囊中知母的薄层色谱鉴别方法 |
CN106353446B (zh) * | 2016-08-12 | 2020-06-23 | 上海黄海制药有限责任公司 | 一种安年颗粒鉴别及含量测定方法 |
CN108020616A (zh) * | 2017-12-14 | 2018-05-11 | 山东齐都药业有限公司 | 五岳抗甲方中黄芪甲苷的含量测定方法 |
CN109528927A (zh) * | 2018-12-27 | 2019-03-29 | 广西悬壶生物科技有限公司 | 治疗糖尿病的中药 |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1650990A (zh) * | 2004-12-16 | 2005-08-10 | 贺国政 | 一种治疗糖尿病的中药 |
CN1686529A (zh) * | 2005-05-20 | 2005-10-26 | 李素梅 | 一种治疗糖尿病的中成药 |
CN1726987A (zh) * | 2004-07-26 | 2006-02-01 | 华玉强 | 一种降血糖的中药组合物、制法及其鉴别方法 |
CN1868522A (zh) * | 2005-05-24 | 2006-11-29 | 冯新刚 | 一种药物组合物及其制备方法和质量控制方法 |
CN101361795A (zh) * | 2007-08-09 | 2009-02-11 | 北京亚东生物制药有限公司 | 一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其质量控制方法 |
CN101474274A (zh) * | 2008-12-24 | 2009-07-08 | 贵州信邦制药股份有限公司 | 一种参苏中药制剂的质量控制方法 |
CN102353731A (zh) * | 2011-07-08 | 2012-02-15 | 山西太行药业股份有限公司 | 芪鹰颗粒的检测方法 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN100478683C (zh) * | 2006-03-23 | 2009-04-15 | 江西汇仁药业有限公司 | 一种糖尿乐丸制剂的质量控制方法 |
CN101224283A (zh) * | 2008-02-01 | 2008-07-23 | 赵燕翼 | 治疗糖尿病的中药组合物及其制备方法 |
CN101264226B (zh) * | 2008-05-05 | 2010-09-29 | 陕西康惠制药股份有限公司 | 一种治疗糖尿病的药物的质量检测方法 |
-
2012
- 2012-04-26 CN CN201210126832.9A patent/CN102614378B/zh active Active
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1726987A (zh) * | 2004-07-26 | 2006-02-01 | 华玉强 | 一种降血糖的中药组合物、制法及其鉴别方法 |
CN1650990A (zh) * | 2004-12-16 | 2005-08-10 | 贺国政 | 一种治疗糖尿病的中药 |
CN1686529A (zh) * | 2005-05-20 | 2005-10-26 | 李素梅 | 一种治疗糖尿病的中成药 |
CN1868522A (zh) * | 2005-05-24 | 2006-11-29 | 冯新刚 | 一种药物组合物及其制备方法和质量控制方法 |
CN101361795A (zh) * | 2007-08-09 | 2009-02-11 | 北京亚东生物制药有限公司 | 一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其质量控制方法 |
CN101474274A (zh) * | 2008-12-24 | 2009-07-08 | 贵州信邦制药股份有限公司 | 一种参苏中药制剂的质量控制方法 |
CN102353731A (zh) * | 2011-07-08 | 2012-02-15 | 山西太行药业股份有限公司 | 芪鹰颗粒的检测方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102614378A (zh) | 2012-08-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102614378B (zh) | 养阴降糖中药组合物及其制备方法和检测方法 | |
CN101036774B (zh) | 一种复方斑蝥口服制剂的检测方法 | |
CN102818861B (zh) | 一种清毒安肾胶囊的指纹图谱建立方法 | |
CN101732607B (zh) | 一种花芪中药制剂的质量检测方法 | |
CN103728387B (zh) | 参芪降糖制剂hplc标准指纹图谱及其构建方法 | |
CN101301425B (zh) | 治疗糖尿病的药物组合物 | |
CN104306500B (zh) | 一种治疗肠易激综合征的药物的检测方法 | |
CN103285306B (zh) | 益气补肾的中药组合物的制备方法及检测方法 | |
CN101279001A (zh) | 一种化橘红的提取物及其制备方法和用途 | |
CN101953915A (zh) | 一种药物组合物制剂的含量测定方法和鉴别方法 | |
CN112903882A (zh) | 一种保元汤制剂的hplc特征图谱及其构建方法 | |
CN102068573B (zh) | 用于健胃消食橘半枳术丸的检测方法 | |
CN103344737A (zh) | 一种治疗鼻窦炎的中药片剂的质量控制方法 | |
CN100594034C (zh) | 治疗糖尿病的降糖甲制剂及其制备方法和检测方法 | |
CN103169864A (zh) | 增液汤配方颗粒及其制备方法、用途和检测方法 | |
CN108226325A (zh) | 葶苈生脉口服液组合物指纹图谱的建立方法 | |
CN105004833A (zh) | 一种治疗急性痛风性关节炎、痛风的中药制剂的检测方法 | |
CN102068598A (zh) | 治疗妇女血亏月经不调的养荣百草丸的质量控制方法 | |
CN102068657A (zh) | 中药制剂脉络通的质量控制方法 | |
CN110464825A (zh) | 一种地黄饮子药物组合物、制备方法、检测方法 | |
CN101342230A (zh) | 一种黄芪颗粒及其质量控制方法 | |
CN101391070B (zh) | 一种具有抗癌作用的中药组合物的检测方法 | |
CN100585401C (zh) | 降脂排毒口服制剂的检测方法 | |
CN111562324B (zh) | 一种消乳散结胶囊多指标成分含量检测方法 | |
CN102008541B (zh) | 无糖型复方扶芳藤制剂中3种主要活性成分的同时检测方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |