CN110004092A - 一种干酪乳杆菌、解酒解毒保肝益生菌组合物及该组合物的制备方法和应用 - Google Patents
一种干酪乳杆菌、解酒解毒保肝益生菌组合物及该组合物的制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于益生菌健康食品技术领域，公开了一种干酪乳杆菌、解酒解毒保肝益生菌组合物及该组合物的制备方法和应用，所述干酪乳杆菌菌种保藏于中国典型培养物保藏中心，所述干酪乳杆菌菌种的保藏号为CCTCC NO：M2018886。该干酪乳杆菌，具有高效降氨功能，可用于因酒精中毒导致的肝脏中毒等。用前述干酪乳杆菌，配以酿酒酵母、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和巴氏醋杆菌得到的解酒解毒保肝益生菌组方，可在饮酒前服用、酒后服用、解因饮酒后氨引起的肝中毒或解因饮酒后乙醛引起的肝中毒，也可用于制备饮酒前服用、酒后服用、解因饮酒后氨引起的肝中毒或解因饮酒后乙醛引起的肝中毒的益生菌健康食品，解酒效果良好，且无毒副作用。
Description
技术领域
本发明属于益生菌健康食品技术领域，具体涉及一种干酪乳杆菌、解酒解毒保肝益生菌组合物及该组合物的制备方法和应用。
背景技术
科学实验证明，长期过量饮酒可引起肝功能受损，严重者可发生脂肪肝、酒精性肝炎、肝硬化等疾病。在美国，因饮酒引起的肝脏疾患已成为男性的第四大主要死亡原因。在我国，肝病发生率是美国人的36倍，每年约有11万人死于酒精中毒，致残270万人。因此，酒精的毒性作用正日益危害人们的健康。
酒的主要成分是酒精，化学名称为乙醇。人体对乙醇的消除反应主要是通过代谢途径来实现的，仅有少量的乙醇是通过呼吸、汗液及尿液所排出。乙醇的消除反应主要通过在肝脏的氧化，且主要受乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase，ADH)及乙醛脱氢酶(Aldehyde dehydrogenase，ALDH)催化特性的调控，其过程为：酒(乙醇)—通过口腔食管进入胃肠直接吸收(约80％被胃吸收、约18％被小肠吸收、约2％随呼吸、汗液及尿液排出)—进入血液—乙醇脱氢酶将乙醇脱掉一个氢分子后变成了乙醛—乙醛脱氢酶再将乙醛脱掉一个氢分子后变成乙酸—身体里的其他氧化酶将乙酸分解成二氧化碳、水和热量排出体外。
人体中，一般都存在前一种酶ADH，而且数量基本是相等的。但缺少后一种酶ALDH的人就比较多；ALDH的缺少，使乙醇不能被完全分解为二氧化碳和水，而是以乙醛的形式继续留在体内，乙醛在人体内的过度堆积是醉酒的主要原因，也是过量饮酒引发酒精性肝损伤的主要毒性因子，醉酒所引起的头晕、头痛、恶心、呕吐，主要就是乙醛中毒的结果。同时，饮酒时摄入大量含高蛋白质的食物，蛋白质经体内蛋白酶分解成氨基酸，氨基酸进一步分解成氨和胺(亚硝酸胺是一种致癌物质)，氨在肝脏内的过度积累，也是引发肝细胞损伤的重要因素。所以说，饮酒有害健康。
近年来，大量动物及临床实验证明，肠源性内毒素血症(intestinalendotoxemia,IETM)和酒精性肝损伤的发生、发展及预后转归有着密切的关系。正常的肠道屏障有阻止内毒素等大分子毒性物质入血的栅栏作用。乙醇被摄入肠道，会引起肠黏膜损伤，肠道菌群紊乱，产生大量内毒素，若细胞间紧密连接occludin蛋白结构及功能改变，就可能导致肠上皮细胞通透性增加，从而发生细菌移位及内毒素血症。内毒素引起肝细胞脂肪变性，肝脏损伤又可加重肠道微生态紊乱与内毒素血症，从而形成一个恶性循环。
目前，上述通过外源补充活性益生菌起解酒解毒保肝作用的主要原理是，过量饮酒造成肠道微生态失衡而产生大量内毒素，直接或间接损伤肝脏；通过补充益生菌调节肠道菌群平衡，有助于减少肠源性内毒素的产生和吸收，从而维护肝脏健康，但此种方式仍然解酒效果不佳。
由此可见，急需开发一种能克服上述缺陷且可有效解酒的组方。
发明内容
为了解决现有技术存在的上述问题，本发明目的在于提供一种干酪乳杆菌、解酒解毒保肝益生菌组合物及该组合物的制备方法和应用。
本发明所采用的技术方案为：
本发明提供了一种干酪乳杆菌，所述干酪乳杆菌菌种保藏于中国典型培养物保藏中心，所述干酪乳杆菌菌种的保藏号为CCTCC NO：M2018886。
本发明还提供了一种解酒解毒保肝益生菌组合物，包含前述的干酪乳杆菌。
具体的，上述解酒解毒保肝益生菌组合物，包括如下重量百分数的组分：干酪乳杆菌菌粉10％～60％、酿酒酵母菌粉10％～60％、植物乳杆菌菌粉10％～60％、嗜酸乳杆菌菌粉10％～60％和巴氏醋杆菌菌粉10％～60％。
具体的，上述解酒解毒保肝益生菌组合物，所述干酪乳杆菌菌粉的活菌数为1.0×1010～5.0×1011CFU/g，酿酒酵母菌粉的活菌数为1.0×109～2.0×1011CFU/g，植物乳杆菌菌粉的活菌数为1.0×1010～5.0×1011CFU/g，嗜酸乳杆菌菌粉的活菌数为1.0×1010～5.0×1011CFU/g，巴氏醋杆菌菌粉的活菌数为1.0×109～1.0×1011CFU/g。
本发明还提供了一种前述解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)将干酪乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、酿酒酵母和巴氏醋杆菌分别接种，培养，得到干酪乳杆菌发酵液、植物乳杆菌发酵液、嗜酸乳杆菌发酵液、酿酒酵母发酵液和巴氏醋杆菌发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、酿酒酵母、巴氏醋杆菌发酵液分别离心，收集沉淀，得到干酪乳杆菌菌泥、植物乳杆菌菌泥、嗜酸乳杆菌菌泥、酿酒酵母菌泥和巴氏醋杆菌菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌菌泥、植物乳杆菌菌泥、嗜酸乳杆菌菌泥、酿酒酵母菌泥和巴氏醋杆菌菌泥分别添加冻干保护剂进行乳化处理得到乳化液，将乳化液冷冻干燥，得到干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中所述的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
具体的，上述制备方法，所述步骤(1)中干酪乳杆菌、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌的发酵温度为36～38℃，发酵时间为6～36h，所用培养基为MRS培养基或包含MRS培养基的改良培养基。
具体的，上述制备方法，所述步骤(1)中酿酒酵母的发酵温度为28～30℃，发酵时间为12～96h，所用培养基为MD或YPD培养基或包含MD或YPD培养基的改良培养基。
具体的，上述制备方法，所述步骤(1)中巴氏醋杆菌的发酵温度为28～30℃，发酵时间为6～36h，所用培养基为YPG培养基或包含YPG培养基的改良培养基。
具体的，上述制备方法，所述步骤(3)中干燥方式为真空冷冻干燥，所述真空冷冻干燥的时间为24～72h。
本发明还提供了一种前述的解酒解毒保肝益生菌组合物的应用，所述应用包括直接用于饮酒前服用、酒后服用、解因饮酒后氨引起的肝中毒或解因饮酒后乙醛引起的肝中毒，或用于制备饮酒前服用、酒后服用、解因饮酒后氨引起的肝中毒或解因饮酒后乙醛引起的肝中毒的食品。
本发明的有益效果为：
本发明提供的干酪乳杆菌，具有高效降氨功能，可用于因酒精中毒导致的肝脏中毒等。
本发明提供的解酒解毒保肝益生菌组合物：采用前述具有高效降氨功能的干酪乳杆菌、产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酿酒酵母、产乙醛脱氢酶的植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和巴氏醋杆菌，共同组成一种具有高效降氨功能的解酒解毒保肝益生菌组方，可直接用于饮酒前服用、酒后服用、解因饮酒后氨引起的肝中毒或解因饮酒后乙醛引起的肝中毒，也可用于制备饮酒前服用、酒后服用、解因饮酒后氨引起的肝中毒或解因饮酒后乙醛引起的肝中毒的益生菌健康食品，解酒效果良好，且无毒副作用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步阐释。
实施例1：
本实施例的目的在于提供一种干酪乳杆菌。
本实施例提供的干酪乳杆菌的分离鉴定过程如下：
取我国青海传统自然发酵乳，经取样在MRS固体培养基上，37℃培养24～48h，多次划线分离获得单菌落，经培养获得菌液，体外测定其降氨能力，该菌种氨去除率可达到80％以上，获得纯菌种。经16S rRNA基因作为Marker片段，通用引物扩增出基因中16S rRNA序列，再进行电泳检测，使用3730XL测序仪进行一代双末端测序，获得abi测序峰图文件，通过软件组装后，与NT数据库进行比对，获得近源物信息，为干酪乳杆菌。
体外测定降氨能力的方法：取15×150mm试管，装10mlMRS液体培养基，121℃灭菌处理20min，冷却接种1环斜面菌种，置37℃恒温箱，静止培养24h；转接500mL装液量200mL三角瓶(灭菌、冷却方法同上)，接种量5％，置37℃恒温箱，静止培养24h。取18mL上述菌液于2L大烧杯中，并加入500ml/L的氨水2ml，再放入装有20mL 0.0025mol/L硫酸吸收液的50mL小烧杯，盖上双层塑料薄膜密封，开展降氨试验。以等量的无菌水代替菌液作为对照，每个处理重复3次，置30℃恒温箱中，24h后取出小烧杯检测氨浓度。氨的测定采用纳氏试纸比色法。氨去除率(％)＝(对照吸收液中氨浓度-处理吸收液中氨浓度)/对照吸收液中氨浓度×100％。
本实施例提供的干酪乳杆菌PB-LC39的16Sr RNA序列如SEQ ID NO.1所示：
CGAGACCAATTTTGTCACCTTAGACGGCTCGCTCCCTAAAGGGTTACGCCACCGGCTTCGGGTGTTACAAACTCTCATGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCGTGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCGACTTCGTGTAGGCGAGTTGCAGCCTACAGTCCGAACTGAGAATGGCTTTAAGAGATTAGCTTGACCTCGCGGTCTCGCAACTCGTTGTACCATCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCTTACTAGAGTGCCCAACTAAATGCTGGCAACTAGTCATAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCATTTTGCCCCCGAAGGGGAAACCTGATCTCTCAGGTGATCAAAAGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAACCTTGCGGTCGTACTCCCCAGGCGGAATGCTTAATGCGTTAGCTGCGGCACTGAAGGGCGGAAACCCTCCAACACCTAGCATTCATCGTTTACGGCATGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTACCCATGCTTTCGAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGACAGCCGCCTTCGCCACTGGTGTTCTTCCATATATCTACGCATTTCACCGCTACACATGGAGTTCCACTGTCCTCTTCTGCACTCAAGTTTCCCAGTTTCCGATGCGCTTCCTCGGTTAAGCCGAGGGCTTTCACATCAGACTTAAAAAACCGCCTGCGCTCGCTTTTACGCCCAATAAATCCGGATAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGTTGGGATACCGGTCACGCCCGACACAGTTACTCTGCCCGACCATTCTTCTC。
实施例2
本实施例的目的在于提供一种解酒解毒保肝益生菌组合物。
本实施例中一种具有高效降氨功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株，该干酪乳杆菌菌株号为PB-LC39，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2018886；通过纳氏试纸比色法测得该干酪乳杆菌菌株体外除氨效果可达到85％。酒后服用30分钟能明显感觉到醒酒效果。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物由以下菌粉组成：干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株PB-LC39、产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)HH001、产乙醛脱氢酶的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HH056、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)HH026和巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)HH003。各菌粉的重量百分比为：干酪乳杆菌PB-LC39的菌粉20％，酿酒酵母HH001的菌粉20％、植物乳杆菌HH056的菌粉20％、嗜酸乳杆菌HH026的菌粉20％和巴氏醋杆菌HH003的菌粉20％，其中，干酪乳杆菌PB-LC39菌粉的活菌数为1.0×1011CFU/g，酿酒酵母HH001菌粉的活菌数为5.0×1010CFU/g，植物乳杆菌HH056菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，嗜酸乳杆菌HH026菌粉的活菌数为1.0×1011CFU/g，巴氏醋杆菌HH003菌粉的活菌数为2.0×109CFU/g。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法包括如下步骤：
(1)将所述干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026分别接种在改良MRS为基础培养基的培养液中在36～38℃下发酵18h，得到干酪乳杆菌PB-LC39发酵液、植物乳杆菌HH056发酵液、嗜酸乳杆菌HH026发酵液；
将所述酿酒酵母HH001接种在YPD为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵24h，得到酿酒酵母HH001发酵液。
将所述巴氏醋杆菌HH003接种在改良YPG为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵18h，得到巴氏醋杆菌HH003发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026、酿酒酵母HH001、巴氏醋杆菌HH003发酵液分别离心，收集沉淀物，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥，添加冻干保护剂进行真空冷冻干燥处理48h，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌粉、植物乳杆菌HH056菌粉、嗜酸乳杆菌HH026菌粉、酿酒酵母HH001菌粉、巴氏醋杆菌HH003菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
实施例3
本实施例的目的在于提供一种解酒解毒保肝益生菌组合物。
本实施例中一种具有高效降氨功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株，该干酪乳杆菌菌株号为PB-LC39，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2018886；通过纳氏试纸比色法测得该干酪乳杆菌菌株体外除氨效果可达到91％。酒后服用25分钟能明显感觉到醒酒效果。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物由以下菌粉组成：干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株PB-LC39、产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)HH001、产乙醛脱氢酶的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HH056、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)HH026和巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)HH003。各菌粉的重量百分比为：干酪乳杆菌PB-LC39的菌粉60％，酿酒酵母HH001的菌粉10％，植物乳杆菌HH056的菌粉10％，嗜酸乳杆菌HH026的菌粉10％，巴氏醋杆菌HH003的菌粉10％。其中，干酪乳杆菌PB-LC39菌粉的活菌数为1.5×1011CFU/g，酿酒酵母HH001菌粉的活菌数为2.0×1010CFU/g，植物乳杆菌HH056菌粉的活菌数为3.5×1011CFU/g，嗜酸乳杆菌HH026菌粉的活菌数为1.5×1011CFU/g，巴氏醋杆菌HH003菌粉的活菌数为2.5×109CFU/g。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法包括如下步骤：
(1)将所述干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026分别接种在MRS为基础培养基的培养液中在36～38℃下发酵12h，得到干酪乳杆菌PB-LC39发酵液、植物乳杆菌HH056发酵液、嗜酸乳杆菌HH026发酵液；
将所述酿酒酵母HH001接种在MD为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵36h，得到酿酒酵母HH001发酵液；
将所述巴氏醋杆菌HH003接种在YPG为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵16h，得到巴氏醋杆菌HH003发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026、酿酒酵母HH001、巴氏醋杆菌HH003发酵液分别离心，收集沉淀物，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥添加冻干保护剂；酿酒酵母HH001菌泥不添加冻干保护剂，进行真空冷冻干燥处理56h，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌粉、植物乳杆菌HH056菌粉、嗜酸乳杆菌HH026菌粉、酿酒酵母HH001菌粉、巴氏醋杆菌HH003菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
实施例4
本实施例的目的在于提供一种解酒解毒保肝益生菌组合物。
本实施例中一种具有高效降氨功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株，该干酪乳杆菌菌株号为PB-LC39，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2018886；通过纳氏试纸比色法测得该干酪乳杆菌菌株体外除氨效果可达到81％。酒后服用40分钟能明显感觉到醒酒效果。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物由以下菌粉组成：干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株PB-LC39与产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)HH001，产乙醛脱氢酶的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HH056、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)HH026、巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)HH003。各菌粉的重量百分比为：干酪乳杆菌PB-LC39的菌粉40％，植物乳杆菌HH056的菌粉20％，嗜酸乳杆菌HH026的菌粉20％，酿酒酵母HH001的菌粉10％，巴氏醋杆菌HH003的菌粉10％。所述干酪乳杆菌PB-LC39菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，酿酒酵母HH001菌粉的活菌数为5.0×1010CFU/g，植物乳杆菌HH056菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，嗜酸乳杆菌HH026菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，巴氏醋杆菌HH003菌粉的活菌数为1.0×1010CFU/g。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法包括如下步骤：
(1)将所述干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026分别接种在MRS为基础培养基的培养液中在36～38℃下发酵12h，得到干酪乳杆菌PB-LC39发酵液、植物乳杆菌HH056发酵液、嗜酸乳杆菌HH026发酵液；
将所述酿酒酵母HH001接种在YPD为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵18h，得到酿酒酵母HH001发酵液；
将所述巴氏醋杆菌HH003接种在YPG为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵12h，得到巴氏醋杆菌HH003发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026、酿酒酵母HH001、巴氏醋杆菌HH003发酵液分别离心，收集沉淀物，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥，添加冻干保护剂进行真空冷冻干燥处理42h，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌粉、植物乳杆菌HH056菌粉、嗜酸乳杆菌HH026菌粉、酿酒酵母HH001菌粉、巴氏醋杆菌HH003菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
实施例5
本实施例的目的在于提供一种解酒解毒保肝益生菌组合物。
本实施例中一种具有高效降氨功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株，该干酪乳杆菌菌株号为PB-LC39，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2018886；通过纳氏试纸比色法测得该干酪乳杆菌菌株体外除氨效果可达到89％。酒后服用35分钟能明显感觉到醒酒效果。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物由以下菌粉组成：干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株PB-LC39、产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)HH001、产乙醛脱氢酶的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HH056、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)HH026和巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)HH003。各菌粉的重量百分比为：干酪乳杆菌HH039的菌粉10％，酿酒酵母HH001的菌粉60％、植物乳杆菌HH056的菌粉10％、嗜酸乳杆菌HH026的菌粉10％和巴氏醋杆菌HH003的菌粉10％，其中，干酪乳杆菌PB-LC39菌粉的活菌数为1.0×1010CFU/g，酿酒酵母HH001菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，植物乳杆菌HH056菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，嗜酸乳杆菌HH026菌粉的活菌数为1.0×1011CFU/g，巴氏醋杆菌HH003菌粉的活菌数为2.0×109CFU/g。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法包括如下步骤：
(1)将所述干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026分别接种在改良MRS为基础培养基的培养液中在36～38℃下发酵6h，得到干酪乳杆菌PB-LC39发酵液、植物乳杆菌HH056发酵液、嗜酸乳杆菌HH026发酵液；
将所述酿酒酵母HH001接种在YPD为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵24h，得到酿酒酵母HH001发酵液。
将所述巴氏醋杆菌HH003接种在改良YPG为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵18h，得到巴氏醋杆菌HH003发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026、酿酒酵母HH001、巴氏醋杆菌HH003发酵液分别离心，收集沉淀物，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥，添加冻干保护剂进行真空冷冻干燥处理48h，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌粉、植物乳杆菌HH056菌粉、嗜酸乳杆菌HH026菌粉、酿酒酵母HH001菌粉、巴氏醋杆菌HH003菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
实施例6
本实施例的目的在于提供一种解酒解毒保肝益生菌组合物。
本实施例中一种具有高效降氨功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株，该干酪乳杆菌菌株号为PB-LC39，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2018886；通过纳氏试纸比色法测得该干酪乳杆菌菌株体外除氨效果可达到88％。酒后服用50分钟能明显感觉到醒酒效果。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物由以下菌粉组成：干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株PB-LC39、产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)HH001、产乙醛脱氢酶的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HH056、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)HH026和巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)HH003。各菌粉的重量百分比为：干酪乳杆菌PB-LC39的菌粉20％，酿酒酵母HH001的菌粉40％，植物乳杆菌HH056的菌粉20％，嗜酸乳杆菌HH026的菌粉10％，巴氏醋杆菌HH003的菌粉10％。其中，干酪乳杆菌PB-LC39菌粉的活菌数为1.5×1011CFU/g，酿酒酵母HH001菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，植物乳杆菌HH056菌粉的活菌数为3.5×1011CFU/g，嗜酸乳杆菌HH026菌粉的活菌数为1.5×1011CFU/g，巴氏醋杆菌HH003菌粉的活菌数为2.5×109CFU/g。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法包括如下步骤：
(1)将所述干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026分别接种在MRS为基础培养基的培养液中在36～38℃下发酵12h，得到干酪乳杆菌PB-LC39发酵液、植物乳杆菌HH056发酵液、嗜酸乳杆菌HH026发酵液；
将所述酿酒酵母HH001接种在MD为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵72h，得到酿酒酵母HH001发酵液；
将所述巴氏醋杆菌HH003接种在YPG为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵16h，得到巴氏醋杆菌HH003发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026、酿酒酵母HH001、巴氏醋杆菌HH003发酵液分别离心，收集沉淀物，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥添加冻干保护剂；酿酒酵母HH001菌泥不添加冻干保护剂，进行真空冷冻干燥处理56h，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌粉、植物乳杆菌HH056菌粉、嗜酸乳杆菌HH026菌粉、酿酒酵母HH001菌粉、巴氏醋杆菌HH003菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
实施例7
本实施例的目的在于提供一种解酒解毒保肝益生菌组合物。
本实施例中一种具有高效降氨功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株，该干酪乳杆菌菌株号为PB-LC39，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2018886；通过纳氏试纸比色法测得该干酪乳杆菌菌株体外除氨效果可达到89％。酒后服用40分钟能明显感觉到醒酒效果。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物由以下菌粉组成：干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株PB-LC39与产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)HH001，产乙醛脱氢酶的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HH056、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)HH026、巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)HH003。各菌粉的重量百分比为：干酪乳杆菌PB-LC39的菌粉10％，植物乳杆菌HH056的菌粉10％，嗜酸乳杆菌HH026的菌粉60％，酿酒酵母HH001的菌粉10％，巴氏醋杆菌HH003的菌粉10％。所述干酪乳杆菌PB-LC39菌粉的活菌数为1.0×1010CFU/g，酿酒酵母HH001菌粉的活菌数为1.0×109CFU/g，植物乳杆菌HH056菌粉的活菌数为5.0×1011CFU/g，嗜酸乳杆菌HH026菌粉的活菌数为5.0×1011CFU/g，巴氏醋杆菌HH003菌粉的活菌数为1.0×1010CFU/g。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法包括如下步骤：
(1)将所述干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026分别接种在MRS为基础培养基的培养液中在36～38℃下发酵12h，得到干酪乳杆菌PB-LC39发酵液、植物乳杆菌HH056发酵液、嗜酸乳杆菌HH026发酵液；
将所述酿酒酵母HH001接种在YPD为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵96h，得到酿酒酵母HH001发酵液；
将所述巴氏醋杆菌HH003接种在YPG为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵12h，得到巴氏醋杆菌HH003发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026、酿酒酵母HH001、巴氏醋杆菌HH003发酵液分别离心，收集沉淀物，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥，添加冻干保护剂进行真空冷冻干燥处理42h，得到干酪乳杆菌HH039PB-LC39菌粉、植物乳杆菌HH056菌粉、嗜酸乳杆菌HH026菌粉、酿酒酵母HH001菌粉、巴氏醋杆菌HH003菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
实施例8
本实施例的目的在于提供一种解酒解毒保肝益生菌组合物。
本实施例中一种具有高效降氨功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株，该干酪乳杆菌菌株号为PB-LC39，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2018886；通过纳氏试纸比色法测得该干酪乳杆菌菌株体外除氨效果达到93％。酒后服用20分钟能明显感觉到醒酒效果。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物由以下菌粉组成：干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株PB-LC39与产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)HH001，产乙醛脱氢酶的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HH056、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)HH026、巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)HH003。各菌粉的重量百分比为：干酪乳杆菌PB-LC39的菌粉10％，植物乳杆菌HH056的菌粉10％，嗜酸乳杆菌HH026的菌粉10％，酿酒酵母HH001的菌粉60％，巴氏醋杆菌HH003的菌粉10％。所述干酪乳杆菌PB-LC39菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，酿酒酵母HH001菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，植物乳杆菌HH056菌粉的活菌数为1.0×1010CFU/g，嗜酸乳杆菌HH026菌粉的活菌数为5.0×1011CFU/g，巴氏醋杆菌HH003菌粉的活菌数为1.0×109CFU/g。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法包括如下步骤：
(1)将所述干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026分别接种在MRS为基础培养基的培养液中在36～38℃下发酵12h，得到干酪乳杆菌PB-LC39发酵液、植物乳杆菌HH056发酵液、嗜酸乳杆菌HH026发酵液；
将所述酿酒酵母HH001接种在YPD为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵18h，得到酿酒酵母HH001发酵液；
将所述巴氏醋杆菌HH003接种在YPG为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵6h，得到巴氏醋杆菌HH003发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026、酿酒酵母HH001、巴氏醋杆菌HH003发酵液分别离心，收集沉淀物，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥，添加冻干保护剂进行真空冷冻干燥处理42h，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌粉、植物乳杆菌HH056菌粉、嗜酸乳杆菌HH026菌粉、酿酒酵母HH001菌粉、巴氏醋杆菌HH003菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
实施例9
本实施例的目的在于提供一种解酒解毒保肝益生菌组合物。
本实施例中一种具有高效降氨功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株，该干酪乳杆菌菌株号为PB-LC39，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2018886；通过纳氏试纸比色法测得该干酪乳杆菌菌株体外除氨效果可达到85％。酒后服用60分钟能明显感觉到醒酒效果。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物由以下菌粉组成：干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株PB-LC39与产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)HH001，产乙醛脱氢酶的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HH056、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)HH026、巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)HH003。各菌粉的重量百分比为：干酪乳杆菌PB-LC39的菌粉10％，植物乳杆菌HH056的菌粉10％，嗜酸乳杆菌HH026的菌粉10％，酿酒酵母HH001的菌粉10％，巴氏醋杆菌HH003的菌粉60％。所述干酪乳杆菌PB-LC39菌粉的活菌数为1.0×1010CFU/g，酿酒酵母HH001菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，植物乳杆菌HH056菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，嗜酸乳杆菌HH026菌粉的活菌数为5.0×1010CFU/g，巴氏醋杆菌HH003菌粉的活菌数为1.0×1011CFU/g。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法包括如下步骤：
(1)将所述干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026分别接种在MRS为基础培养基的培养液中在36～38℃下发酵12h，得到干酪乳杆菌PB-LC39发酵液、植物乳杆菌HH056发酵液、嗜酸乳杆菌HH026发酵液；
将所述酿酒酵母HH001接种在YPD为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵48h，得到酿酒酵母HH001发酵液；
将所述巴氏醋杆菌HH003接种在YPG为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵36h，得到巴氏醋杆菌HH003发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026、酿酒酵母HH001、巴氏醋杆菌HH003发酵液分别离心，收集沉淀物，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥，添加冻干保护剂进行真空冷冻干燥处理42h，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌粉、植物乳杆菌HH056菌粉、嗜酸乳杆菌HH026菌粉、酿酒酵母HH001菌粉、巴氏醋杆菌HH003菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
实施例10
本实施例的目的在于提供一种解酒解毒保肝益生菌组合物。
本实施例中一种具有高效降氨功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株，该干酪乳杆菌菌株号为PB-LC39，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2018886；通过纳氏试纸比色法测得该干酪乳杆菌菌株体外除氨效果可达到90％。酒后服用35分钟能明显感觉到醒酒效果。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物由以下菌粉组成：干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株PB-LC39与产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)HH001，产乙醛脱氢酶的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HH056、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)HH026、巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)HH003。各菌粉的重量百分比为：干酪乳杆菌PB-LC39的菌粉20％，植物乳杆菌HH056的菌粉10％，嗜酸乳杆菌HH026的菌粉40％，酿酒酵母HH001的菌粉10％，巴氏醋杆菌HH003的菌粉20％。所述干酪乳杆菌PB-LC39菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，酿酒酵母HH001菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，植物乳杆菌HH056菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，嗜酸乳杆菌HH026菌粉的活菌数为1.0×1010CFU/g，巴氏醋杆菌HH003菌粉的活菌数为1.0×1010CFU/g。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法包括如下步骤：
(1)将所述干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026分别接种在MRS为基础培养基的培养液中在36～38℃下发酵6h，得到干酪乳杆菌PB-LC39发酵液、植物乳杆菌HH056发酵液、嗜酸乳杆菌HH026发酵液；
将所述酿酒酵母HH001接种在YPD为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵18h，得到酿酒酵母HH001发酵液；
将所述巴氏醋杆菌HH003接种在YPG为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵6h，得到巴氏醋杆菌HH003发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026、酿酒酵母HH001、巴氏醋杆菌HH003发酵液分别离心，收集沉淀物，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥，添加冻干保护剂进行真空冷冻干燥处理24h，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌粉、植物乳杆菌HH056菌粉、嗜酸乳杆菌HH026菌粉、酿酒酵母HH001菌粉、巴氏醋杆菌HH003菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
实施例11
本实施例的目的在于提供一种解酒解毒保肝益生菌组合物。
本实施例中一种具有高效降氨功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株，该干酪乳杆菌菌株号为PB-LC39，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2018886；通过纳氏试纸比色法测得该干酪乳杆菌菌株体外除氨效果可达到91％。酒前15分钟服用能明显感觉到有提升酒力的效果。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物由以下菌粉组成：干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株PB-LC39与产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)HH001，产乙醛脱氢酶的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HH056、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)HH026、巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)HH003。各菌粉的重量百分比为：干酪乳杆菌PB-LC39的菌粉30％，植物乳杆菌HH056的菌粉10％，嗜酸乳杆菌HH026的菌粉10％，酿酒酵母HH001的菌粉40％，巴氏醋杆菌HH003的菌粉10％。所述干酪乳杆菌PB-LC39菌粉的活菌数为5.0×1011CFU/g，酿酒酵母HH001菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，植物乳杆菌HH056菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，嗜酸乳杆菌HH026菌粉的活菌数为5.0×1010CFU/g，巴氏醋杆菌HH003菌粉的活菌数为1.0×1010CFU/g。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法包括如下步骤：
(1)将所述干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026分别接种在MRS为基础培养基的培养液中在36～38℃下发酵12h，得到干酪乳杆菌PB-LC39发酵液、植物乳杆菌HH056发酵液、嗜酸乳杆菌HH026发酵液；
将所述酿酒酵母HH001接种在YPD为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵36h，得到酿酒酵母HH001发酵液；
将所述巴氏醋杆菌HH003接种在YPG为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵12h，得到巴氏醋杆菌HH003发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026、酿酒酵母HH001、巴氏醋杆菌HH003发酵液分别离心，收集沉淀物，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥，添加冻干保护剂进行真空冷冻干燥处理36h，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌粉、植物乳杆菌HH056菌粉、嗜酸乳杆菌HH026菌粉、酿酒酵母HH001菌粉、巴氏醋杆菌HH003菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
实施例12
本实施例的目的在于提供一种解酒解毒保肝益生菌组合物。
本实施例中一种具有高效降氨功能的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株，该干酪乳杆菌菌株号为PB-LC39，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2018886；通过纳氏试纸比色法测得该干酪乳杆菌菌株体外除氨效果可达到85％。酒前30分钟服用能明显感觉到有提升酒力的效果。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物由以下菌粉组成：干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)菌株PB-LC39与产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)HH001，产乙醛脱氢酶的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HH056、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)HH026、巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)HH003。各菌粉的重量百分比为：干酪乳杆菌PB-LC39的菌粉10％，植物乳杆菌HH056的菌粉20％，嗜酸乳杆菌HH026的菌粉20％，酿酒酵母HH001的菌粉10％，巴氏醋杆菌HH003的菌粉40％。所述干酪乳杆菌PB-LC39菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，酿酒酵母HH001菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，植物乳杆菌HH056菌粉的活菌数为2.0×1011CFU/g，嗜酸乳杆菌HH026菌粉的活菌数为5.0×1010CFU/g，巴氏醋杆菌HH003菌粉的活菌数为1.0×1010CFU/g。
本实施例所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法包括如下步骤：
(1)将所述干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026分别接种在MRS为基础培养基的培养液中在36～38℃下发酵12h，得到干酪乳杆菌PB-LC39发酵液、植物乳杆菌HH056发酵液、嗜酸乳杆菌HH026发酵液；
将所述酿酒酵母HH001接种在YPD为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵60h，得到酿酒酵母HH001发酵液；
将所述巴氏醋杆菌HH003接种在YPG为基础培养基的培养液中在28～30℃下发酵24h，得到巴氏醋杆菌HH003发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39、植物乳杆菌HH056、嗜酸乳杆菌HH026、酿酒酵母HH001、巴氏醋杆菌HH003发酵液分别离心，收集沉淀物，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌PB-LC39菌泥、植物乳杆菌HH056菌泥、嗜酸乳杆菌HH026菌泥、酿酒酵母HH001菌泥、巴氏醋杆菌HH003菌泥，添加冻干保护剂进行真空冷冻干燥处理72h，得到干酪乳杆菌PB-LC39菌粉、植物乳杆菌HH056菌粉、嗜酸乳杆菌HH026菌粉、酿酒酵母HH001菌粉、巴氏醋杆菌HH003菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
实施例2～12中所用到的培养基：
MRS改良培养基：如MRS培养基+莫匹罗星锂盐5mg/100ml；
MD改良培养基：如MD培养基+组氨酸0.004mg/100ml；
YPD的改良培养基：如YPD培养基+Zeocin 10mg/100ml；
YPG改良培养基：如YPD培养基+K2HPO4 33mg/100ml+MgSO4·7H2O11mg/100ml。
实施例2～12中，向不同菌泥中添加冻干保护剂后，得到乳化液，乳化液进冻干机先进行预冻，再进行升华干燥、解析干燥，控制乳化液中心预冻温度低于共晶点温度5-10℃，冷阱温度降至-40℃至-50℃开始抽真空，控制解析干燥温度25-30℃。不同菌种采用不同冻干保护剂组方，冻干保护剂组分包括脱脂奶粉、海藻糖、甘露聚糖、甘油、乳糖、L-半胱氨酸盐酸盐等成分。
实施例2～12中所述的解酒解毒保肝益生菌组合物，作为益生菌健康食品，可直接用于酒前服用减少酒精吸收，在酒后服用可解酒防醉，解氨、乙醛等肝中毒，达到维护肝脏健康的功能作用，也可用于制备解酒的食品。
本发明不局限于上述可选的实施方式，任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品。上述具体实施方式不应理解成对本发明的保护范围的限制，本发明的保护范围应当以权利要求书中界定的为准，并且说明书可以用于解释权利要求书。
序列表
<110> 郑州和合生物工程技术有限公司
<120> 一种干酪乳杆菌、解酒解毒保肝益生菌组合物及该组合物的制备方法和应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1050
<212> DNA
<213> 干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)
<400> 1
cgagaccaat tttgtcacct tagacggctc gctccctaaa gggttacgcc accggcttcg 60
ggtgttacaa actctcatgg tgtgacgggc ggtgtgtaca aggcccggga acgtattcac 120
cgcggcgtgc tgatccgcga ttactagcga ttccgacttc gtgtaggcga gttgcagcct 180
acagtccgaa ctgagaatgg ctttaagaga ttagcttgac ctcgcggtct cgcaactcgt 240
tgtaccatcc attgtagcac gtgtgtagcc caggtcataa ggggcatgat gatttgacgt 300
catccccacc ttcctccggt ttgtcaccgg cagtcttact agagtgccca actaaatgct 360
ggcaactagt cataagggtt gcgctcgttg cgggacttaa cccaacatct cacgacacga 420
gctgacgaca accatgcacc acctgtcatt ttgcccccga aggggaaacc tgatctctca 480
ggtgatcaaa agatgtcaag acctggtaag gttcttcgcg ttgcttcgaa ttaaaccaca 540
tgctccaccg cttgtgcggg cccccgtcaa ttcctttgag tttcaacctt gcggtcgtac 600
tccccaggcg gaatgcttaa tgcgttagct gcggcactga agggcggaaa ccctccaaca 660
cctagcattc atcgtttacg gcatggacta ccagggtatc taatcctgtt cgctacccat 720
gctttcgagc ctcagcgtca gttacagacc agacagccgc cttcgccact ggtgttcttc 780
catatatcta cgcatttcac cgctacacat ggagttccac tgtcctcttc tgcactcaag 840
tttcccagtt tccgatgcgc ttcctcggtt aagccgaggg ctttcacatc agacttaaaa 900
aaccgcctgc gctcgctttt acgcccaata aatccggata acgcttgcca cctacgtatt 960
accgcggctg ctggcacgta gttagccgtg gctttctggt tgggataccg gtcacgcccg 1020
acacagttac tctgcccgac cattcttctc 1050
Claims (10)
1.一种干酪乳杆菌，其特征在于：所述干酪乳杆菌菌种保藏于中国典型培养物保藏中心，所述干酪乳杆菌菌种的保藏号为CCTCC NO：M2018886。
2.一种解酒解毒保肝益生菌组合物，其特征在于：包含权利要求1所述的干酪乳杆菌。
3.根据权利要求2所述的解酒解毒保肝益生菌组合物，其特征在于，包括如下重量百分数的组分：干酪乳杆菌菌粉10％～60％、酿酒酵母菌粉10％～60％、植物乳杆菌菌粉10％～60％、嗜酸乳杆菌菌粉10％～60％和巴氏醋杆菌菌粉10％～60％。
4.根据权利要求3所述的解酒解毒保肝益生菌组合物，其特征在于：所述干酪乳杆菌菌粉的活菌数为1.0×1010～5.0×1011CFU/g，酿酒酵母菌粉的活菌数为1.0×109～2.0×1011CFU/g，植物乳杆菌菌粉的活菌数为1.0×1010～5.0×1011CFU/g，嗜酸乳杆菌菌粉的活菌数为1.0×1010～5.0×1011CFU/g，巴氏醋杆菌菌粉的活菌数为1.0×109～1.0×1011CFU/g。
5.一种权利要求3或4所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将干酪乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、酿酒酵母和巴氏醋杆菌分别接种，培养，得到干酪乳杆菌发酵液、植物乳杆菌发酵液、嗜酸乳杆菌发酵液、酿酒酵母发酵液和巴氏醋杆菌发酵液；
(2)将步骤(1)中所述的干酪乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、酿酒酵母、巴氏醋杆菌发酵液分别离心，收集沉淀，得到干酪乳杆菌菌泥、植物乳杆菌菌泥、嗜酸乳杆菌菌泥、酿酒酵母菌泥和巴氏醋杆菌菌泥；
(3)将步骤(2)中所述的干酪乳杆菌菌泥、植物乳杆菌菌泥、嗜酸乳杆菌菌泥、酿酒酵母菌泥和巴氏醋杆菌菌泥分别添加冻干保护剂进行乳化处理得到乳化液，将乳化液冷冻干燥，得到干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉；
(4)按比混合步骤(3)中所述的干酪乳杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和巴氏醋杆菌菌粉，即得所述解酒解毒保肝益生菌组合物。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中干酪乳杆菌、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌的发酵温度为36～38℃，发酵时间为6～36h，所用培养基为MRS培养基或包含MRS培养基的改良培养基。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中酿酒酵母的发酵温度为28～30℃，发酵时间为12～96h，所用培养基为MD或YPD培养基或包含MD或YPD培养基的改良培养基。
8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中巴氏醋杆菌的发酵温度为28～30℃，发酵时间为6～36h，所用培养基为YPG培养基或包含YPG培养基的改良培养基。
9.根据权利要求5-8任意一项所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中干燥方式为真空冷冻干燥，所述真空冷冻干燥的时间为24～72h。
10.一种权利要求2-4任意一项所述的解酒解毒保肝益生菌组合物的应用，所述应用包括直接用于饮酒前服用、酒后服用、解因饮酒后氨引起的肝中毒或解因饮酒后乙醛引起的肝中毒，或用于制备饮酒前服用、酒后服用、解因饮酒后氨引起的肝中毒或解因饮酒后乙醛引起的肝中毒的食品。
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