CN109362882B

CN109362882B - 发酵乳杆菌cqpc07及其在制备食品或改善溃疡性结肠炎的药品中的应用

Info

Publication number: CN109362882B
Application number: CN201811639723.0A
Authority: CN
Inventors: 赵欣; 杜木英; 周先容
Original assignee: Chongqing University of Education
Current assignee: Jiangsu New Bio Biotechnology Co ltd
Priority date: 2018-12-29
Filing date: 2018-12-29
Publication date: 2022-04-15
Anticipated expiration: 2038-12-29
Also published as: CN109362882A

Abstract

本发明公开了保藏编号为CGMCC NO.14956的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)CQPC07，还公开了该发酵乳杆菌在制备食品或改善溃疡性结肠炎的药品中的应用，不仅丰富了乳酸菌菌种资源，而且扩大了发酵乳杆菌CQPC07的应用范围，有助于功能保健制品的开发，也给溃疡性结肠炎的改善带来了新的希望。

Description

发酵乳杆菌CQPC07及其在制备食品或改善溃疡性结肠炎的药品中的应用

技术领域

本发明属于微生物技术领域，涉及一种乳酸菌，还涉及该乳酸菌在制备食品或药品中的应用。

背景技术

四川泡菜的生产过程是将新鲜的泡菜洗净，密封于坛内，在盐水中厌氧发酵浸泡的泡菜。泡菜水中含有丰富的天然乳酸菌，对泡菜风味和品质的形成起着关键作用。其使用可溶性成分(主要是糖和含氮物质)进行增殖，产生酸性物质并代谢出风味成分，使泡菜产生独特的酸脆口味。泡菜水中含有的乳酸菌主要包括发酵乳杆菌、L.短杆菌、干酪乳杆菌、发酵酵母菌、嗜酸乳杆菌等。乳酸菌种类的差异可能是由于地域、气候和生产工艺习惯等因素造成的。某些乳酸菌也被用作益生菌，对人体健康有多种益处，包括维持肠道菌群的微生态平衡、加强机体免疫功能、预防和抑制肿瘤发生、降低胆固醇、延缓机体衰老等。为了更好的利用这些微生物资源，应开展更广泛的分离和鉴定工作，积累丰富的菌种资源，开发出丰富的工业用益生菌种类。

溃疡性结肠炎是一种炎症性肠病，主要表现为腹痛、腹泻和血便，其发病机制至今尚未完全阐明。研究发现，溃疡性结肠炎患者肠黏膜上皮细胞调亡增加、肠上皮细胞间紧密连接缺损、肠上皮黏液层变薄或缺失、肠道菌群失调或易位、固有层肠黏膜免疫系统异常激活，从而导致肠道上皮黏膜通透性增加、屏障功能受损。

发明内容

本发明的目的在于对泡菜水中的乳酸菌进行分离鉴定，并考察其对溃疡性结肠炎的作用效果，以丰富乳酸菌菌种资源、开发功能保健制品。

经研究，本发明提供如下技术方案：

1.发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)CQPC07，保藏编号为CGMCC NO.14956。

2.发酵乳杆菌CQPC07在制备食品或改善溃疡性结肠炎的药品中的应用。

优选的，所述食品为发酵食品。

优选的，所述发酵食品为乳酸菌奶饮料、发酵乳、乳粉或乳粉胶囊。

本发明对泡菜水中的乳酸菌进行了分离鉴定，将其中一株发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)命名为CQPC07，于2017年11月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为CGMCC NO.14956。

本发明的发酵乳杆菌CQPC07具有很好的抗胃酸能力，经pH3.0人工胃液处理3h后的存活率达到91.76％；在0.30％胆盐中该菌也能缓慢生长，生长效率达到无胆盐培养的11.91％。

葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导溃疡性结肠炎小鼠模型实验结果显示，发酵乳杆菌CQPC07能够抑制结肠缩短和结肠重量/结肠长度比值变大；能够很好地保护结肠粘膜的完整性，减少炎症对结肠的损伤；能够提升结肠炎小鼠血清中SS、VIP和IL-2的水平，同时降低ET、SP和IL-10水平；能够增加结肠炎小鼠体内GSH和SOD的活力，降低MPO和MDA的含量；能够加强小鼠结肠组织中nNOS和eNOS的表达，同时减弱iNOS、IL-8和CXCR2的表达；且随着CQPC07的剂量增加，上述作用也加强，接近药物柳氮磺胺吡啶的作用。由此可见，发酵乳杆菌CQPC07可以有效地改善溃疡性结肠炎。

本发明的有益效果在于：本发明提供了一种发酵乳杆菌CQPC07，消化道抗性较强，而且可以有效地改善溃疡性结肠炎，不仅丰富了乳酸菌菌种资源，而且扩大了发酵乳杆菌CQPC07的应用范围，有助于功能保健制品的开发，也给溃疡性结肠炎的改善带来了新的希望。

附图说明

图1为发酵乳杆菌CQPC07的菌落形态。

图2为发酵乳杆菌CQPC07的革兰氏染色结果。

图3为发酵乳杆菌CQPC07的16S rDNA PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳图，其中M为DNA分子量标准，0为阴性对照，1为发酵乳杆菌CQPC07。

图4为小鼠结肠组织形态学观察。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明的优选实施例进行详细的描述。

一、发酵乳杆菌CQPC07的分离与鉴定

1、实验材料

采自重庆市南岸区农家自然发酵泡菜水6份，分别吸取40mL泡菜水放入无菌离心管中，置于食品采样箱内，放于实验室4℃冰箱保存备用。

2、乳酸菌的分离纯化

分别取1mL泡菜水样品，用无菌生理盐水进行10倍梯度稀释至10^-6，然后分别取10^-4、10^-5、10^-63个梯度的稀释液100μL进行平板涂布，37℃培养24-48h，观察并记录菌落形态。挑取平板上不同形态的菌落进行划线分离，经37℃培养48h后，再次挑取平板上不同形态的单菌落进行划线分离，如此重复2至3次，直至得到形态一致的纯的单菌落。

编号为CQPC07的菌株菌落形态如图1所示，菌落颜色多为白色或乳白色，形状为圆形，边缘整齐，表面湿润光滑。

3、乳酸菌的初步鉴定

挑取平板上的纯菌落接种于5mL MRS液体培养基中，37℃培养24h。取上述含菌培养基1mL于无菌离心管中，4000r/min离心10min后弃去上层培养基，菌体沉淀重悬于无菌生理盐水并进行革兰氏染色镜检，革兰氏染色镜检为阳性的初步鉴定为乳酸菌。

编号为CQPC07的菌株革兰氏染色呈现阳性，在100倍油镜下，菌株细胞形态如图2所示，细胞形态有长杆、短杆，且不存在出芽生殖。

4、乳酸菌DNA提取

将已纯化的疑似目标菌株接种于MRS肉汤中，37℃培养18-24h后，采用细菌基因组DNA提取试剂盒进行DNA提取。提取的DNA放于-20℃冰柜保藏备用。

5、基因组DNA PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测

取提取的DNA，PCR扩增16S rDNA，其中上游引物27F(5'－AGAGTTTGATCCTGGCTCAG－3'，SEQ ID No.1)1μL、下游引物1495R(5'－CTACGGCTACCTTGTTACGA－3'，SEQ ID No.2)1μL，2×Taq plus Buffer 12.5μL、模板DNA 1μL，用无菌dd H₂O将体系补足至25μL。以无菌超纯水替代模板DNA作为阴性对照。扩增条件为：94℃5min；94℃30s，55℃30s，72℃1min，共29个循环；最后72℃延伸5min。然后取5μL扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，琼脂糖浓度为1.5％，电泳条件为110V，45min。

编号为CQPC07的菌株16S rDNA扩增产物的琼脂糖凝胶电泳检测结果如图3所示，阴性对照组的泳道无条带，表明PCR扩增过程中未受到污染；编号为CQPC07的菌株的泳道有一条长度约为1500bp的条带，符合预期扩增片段的长度。

将编号为CQPC07的菌株的16S rDNA扩增产物委托北京擎科生物技术有限公司进行测序，测得序列如SEQ ID No.3所示。使用NCBI中的BLAST(Basic Local AlignmentSearch Tool)程序对测得序列进行同源性比对分析，结果显示，编号为CQPC07的菌株为乳酸菌中的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)，其与Gene Bank数据库中已知乳酸菌的同源性均达99％。

6、乳酸菌体外抗性筛选

(1)耐受0.3％胆盐的能力

在MRS-THIO培养基(含0.2％巯基乙酸钠的MRS肉汤)中添加猪胆盐使其浓度为0.3％，121℃灭菌15min；将活化好的5mL菌种以2％(v/v)的接种量分别接入不含胆盐(0.0％)的MRS-THIO培养基和含0.3％胆盐的MRS-THIO培养基中，以空白培养基(未接菌的MRS-THIO培养基)为对照，37℃培养24h后，分别测定上述不同浓度培养基的OD_600nm值，按公式(1)计算菌株对胆盐的耐受力：

结果显示，编号为CQPC07的菌株在0.3％胆盐中能够缓慢生长，生长效率达到无胆盐培养的11.91±0.20％。

(2)人工胃液耐受性试验

人工胃液的配制：由0.2％NaCl和0.35％胃蛋白酶组成，用1mol/L HCl调节pH为3.0，再用孔径为0.22μm的滤膜过滤除菌备用。

在超净工作台中吸取5mL培养好的含菌培养基于10mL无菌离心管中，经3000r/min离心10min，弃去上层培养基并收集菌体，加入5mL无菌生理盐水混匀制成菌悬液，然后取1mL菌悬液与9mL pH 3.0的人工胃液混匀，取1mL混合液作为人工胃液处理0h的样品，剩余9mL混合液置于恒温水浴摇床(37℃，150r/min)中培养3h。0h和3h的样品分别经10倍梯度稀释，选择合适梯度采用平板涂布的方法测定活菌数，在MRS固体培养基上37℃培养48h，按公式(2)计算存活率(％)。

结果显示，编号为CQPC07的菌株具有很好的抗胃酸能力，经pH3.0人工胃液处理3h后的存活率达到91.76±7.92％。

二、发酵乳杆菌CQPC07对溃疡性结肠炎的改善作用

1、实验动物

SPF级6周龄雄性昆明小鼠50只，购于重庆医科大学实验动物中心。饲养于室温25±2℃、相对湿度50±5％、12h光照/12h黑暗的标准化实验室中，适应性喂养一周后开始实验。

2、实验方法

50只小鼠随机分为5组，每组10只，分别为正常组、模型组、CQPC07高剂量组、CQPC07低剂量组和柳氮磺胺吡啶(主治炎症性肠病即Crohn病和溃疡性结肠炎的药物)组。整个实验周期为5周，正常组和模型组每天灌胃生理盐水；CQPC07高、低剂量组每天灌胃发酵乳杆菌CQPC07菌悬液，高剂量组浓度为1.0×10⁹CFU/mL，低剂量组浓度为1.0×10⁸CFU/mL；柳氮磺胺吡啶组每天按20mg/kg灌胃柳氮磺胺吡啶水溶液；每组小鼠灌胃体积均为0.1mL/10g.bw；第3周对实验小鼠进行结肠炎造模，造模方法如下：各组小鼠除正常灌胃外，正常组小鼠每天自由饮用无菌蒸馏水，模型组、CQPC07高、低剂量组和柳氮磺胺吡啶组小鼠每天自由饮用5％DSS溶液，造模期间每隔2天换用新鲜的无菌水和5％DSS溶液，总共造模7天。整个实验结束后，所有小鼠禁食不禁水24h，通过摘眼球取血收集全血，4℃、4000r/min离心10min，收集上层血清，分装后于-80℃超低温冰箱保藏备用；然后脱颈处死小鼠，解剖取出结肠，称量重量，测量长度；取0.5cm左右的结肠组织，立即放于10％福尔马林溶液中固定48h，经脱水、透明、浸蜡、包埋、切片后进行HE染色；其余结肠经液氮冷冻后置-80℃超低温冰箱中保藏备用。

3、小鼠结肠长度测量和结肠重量/结肠长度比值计算

DSS诱导小鼠结肠炎会导致结肠缩短和结肠重量/结肠长度比值变小，所以结肠长度和结肠重量/结肠长度比值是评价结肠炎小鼠炎症严重程度的重要指标之一。

各组小鼠的结肠长度和结肠重量/结肠长度比值见表1，正常组小鼠的结肠长度最长、结肠重量/结肠长度比值最小；模型组小鼠的结肠长度最小、结肠重量/结肠长度比值最大，和正常组存在显著差异(p<0.05)，说明结肠炎造模成功；与模型组相比，CQPC07低剂量组、高剂量组和柳氮磺胺吡啶组小鼠的结肠长度均显著增加(p<0.05)、结肠重量/结肠长度比值均显著减小，且高剂量CQPC07的效果优于低剂量CQPC07，接近柳氮磺胺吡啶的作用。以上实验结果说明，发酵乳杆菌CQPC07能够抑制结肠缩短和结肠重量/结肠长度比值变大的情况。

表1各组小鼠结肠长度和结肠重量/结肠长度比值

注：标有相同英文字母(a-e)的组之间不存在显著差异，标有不同英文字母(a-e)的组之间存在显著差异(p<0.05)。

4、小鼠结肠组织切片观察

取HE染色的小鼠结肠组织切片，在光学显微镜下观察组织形态变化。结果如图4所示，正常组小鼠结肠粘膜上皮细胞完整，隐窝正常，腺体排列整齐有序，且无溃疡存在；与正常组相比，模型组小鼠结肠粘膜糜烂严重，隐窝几乎全部被破坏，杯状细胞急剧减少，固有层细胞浸润严重，腺体排列紊乱，而且可见严重溃疡灶；CQPC07低剂量组小鼠结肠粘膜存在糜烂现象，杯状细胞有所减少，可见少量溃疡灶，但损伤程度明显轻于模型组；CQPC07高剂量组和柳氮磺胺吡啶组小鼠结肠粘膜未出现明显糜烂，而且隐窝完整，腺体排列整齐，杯状细胞完整，与正常组结肠组织形态接近。以上实验结果表明，发酵乳杆菌CQPC07能够很好地保护结肠粘膜的完整性，减少炎症对结肠的损伤。

5、小鼠血清中ET、SS、SP和VIP水平测定

ET是一种持久且有效的血管活性物质，ET引起血管收缩会导致结肠粘膜糜烂，严重情况下会引起溃疡，在溃疡性结肠炎的发病机制中起着关键作用。SS是一种重要的胃肠激素，能抑制胃酸和其他胃肠液的分泌。SS减少会加剧胃肠液的分泌，加重胃肠道炎症。P物质是一种具有免疫调节作用的神经物质。P物质对神经系统和免疫系统的调节可能在结肠炎的调节中起作用。P物质的大量积累可能加剧结肠炎。同时，P物质可诱导结肠炎，拮抗动物P物质后结肠炎的炎症程度减轻。VIP水平与结肠炎程度密切相关，VIP水平的降低直接导致溃疡性结肠炎的免疫调节紊乱和炎症加重。

按照常规生化试剂盒说明书测定小鼠血清中ET、SS、SP和VIP的含量。结果见表2，与其它组相比，正常组小鼠血清中SS、VIP水平最高，ET、SP水平最低；模型组呈现出相反的趋势，小鼠血清中SS、VIP水平最低，ET、SP水平最高；发酵乳杆菌CQPC07和柳氮磺胺吡啶都能够提升结肠炎小鼠血清的SS、VIP水平，同时降低ET、SP水平，且高剂量CQPC07的效果优于低剂量CQPC07，接近柳氮磺胺吡啶的作用。

表2各组小鼠血清中ET、SS、SP和VIP水平

6、小鼠血清中IL-2和IL-10水平测定

IL-2是Th2细胞分泌的细胞因子，与结肠炎直接相关。IL-2通过抑制Th2细胞和减轻结肠炎的程度起到抑制炎症的作用。IL-10是Treg细胞分泌的细胞因子，具有免疫抑制作用。IL-10在结肠炎的炎症中具有促炎作用，可加重结肠炎。

采用ELISA试剂盒测定小鼠血清中IL-2和IL-10的水平。结果见表3，与正常组相比，模型组小鼠血清中IL-10水平显著升高(p<0.05)，IL-2水平显著下降(p<0.05)；与模型组比较，CQPC07高、低剂量组均能显著降低小鼠血清中IL-10水平(p<0.05)，同时显著提升IL-2水平(p<0.05)，而且随着CQPC07剂量的增加，炎症因子的改变越显著。

表3各组小鼠血清中IL-2和IL-10水平

注：标有不同英文字母(a-e)的组之间存在显著差异(p<0.05)。

7、小鼠结肠组织中MPO、GSH、MDA和SOD活力的测定

已有研究表明氧自由基在结肠炎发病过程中具有重要作用。机体正常情况下，氧自由基的生成和清除处于平衡状态，当炎症发生时，机体局部缺氧导致氧自由基大量生成，从而导致细胞凋亡或者损伤。结肠炎发生后，中性粒细胞聚集在炎症组织中开始下降，更多中性粒细胞流入组织，MPO活性急剧增加。结肠组织被氧化破坏后，结肠组织中GSH活性显著降低。MDA是脂质过氧化的产物，它能引起DNA损伤、酶及激素失活。SOD是一种抗氧化酶，能特异性清除机体内的超氧阴离子，并把超氧化自由基分解为对机体无害的水和氧分子。

按照常规生化试剂盒说明书测定小鼠结肠组织中MPO、GSH、MDA和SOD的含量。结果见表4，与其它组相比，模型组小鼠结肠组织中MPO、MDA的含量最高，GSH、SOD的含量最低，而正常组的趋势与其完全相反；与模型组相比，CQPC07低剂量组、高剂量组和柳氮磺胺吡啶组小鼠结肠组织中MPO、MDA的含量均显著降低(p<0.05)，GSH、SOD的含量均显著升高(p<0.05)。以上结果说明，发酵乳杆菌CQPC07能够增加结肠炎小鼠体内GSH和SOD的活力，降低MPO和MDA的含量，从而减少氧自由基对结肠炎小鼠造成的氧化损伤。

表4各组小鼠结肠组织中MPO、GSH、MDA和SOD活力

8、小鼠结肠组织中nNOS、eNOS、iNOS、IL-8和CXCR2 mRNA表达水平检测

按照Trizol(Invitrogen公司)说明书提取结肠总RNA，用超微量分光光度计测定总RNA的纯度和浓度，将每个样本的RNA浓度调整到同一水平(1μg/μL)。然后取1μg/μL的RNA样品1μL，加入(oligo)primer dT 1μL和无菌超纯水10μL，混合，65℃反应5min，再加入Ribolock RNase Inhibitor 1μL、100mM dNTP mix 2μL、5×Reaction buffer 4μL和Revert Aid M-mu/v RT 1μL，混匀，在42℃、60min和70℃、5min条件下合成cDNA。接着对目标基因进行反转录和扩增(所用引物序列见表5)。反应条件为：95℃变性15min，60℃退火1h，95℃延伸15min，总共40个循环。以GAPDH作为持家基因，通过2^-ΔΔCT计算目标基因的相对表达量。

表5引物序列

控制NOS可以调控NO的产生，从而维持结肠组织的正常状态。eNOS对结肠炎引起的结肠损伤有重要的控制作用；iNOS可转化大量的NO，过量的NO对结肠组织的损伤有提升作用；nNOS可以控制组织中的NO浓度并保护组织免受过量NO的影响，也可以控制iNOS过表达和抑制炎症。

小鼠结肠组织中nNOS、eNOS和iNOS的mRNA表达水平见表6，与其它组相比，模型组小鼠结肠组织中nNOS、eNOS的表达最弱，iNOS的表达最强，灌胃发酵乳杆菌CQPC07可加强小鼠结肠组织中nNOS、eNOS的表达同时减轻iNOS的表达，且随着CQPC07的剂量增加，作用也加强。

表6各组小鼠结肠组织中nNOS、eNOS和iNOS mRNA表达

IL-8是中性粒细胞趋化和激活因子，介导多种途径诱导的炎症反应，包括介导结肠炎。CHIC-1是IL-8家族中的中性粒细胞趋化因子，CXCR2是CHIC-1的受体。CXCR2在调节器官相互作用中起中介作用。降低组织中CXCR2含量，有助于减少结肠炎引起的结肠损害。

小鼠结肠组织中IL-8和CXCR2的mRNA表达水平见表7，与其它组相比，模型组小鼠结肠组织中的IL-8和CXCR2表达最强，灌胃发酵乳杆菌CQPC07可减弱小鼠结肠组织中IL-8和CXCR2的表达，且随着CQPC07的剂量增加，使IL-8和CXCR2表达减弱的作用也加强。

表7各组小鼠结肠组织中IL-8和CXCR2 mRNA表达

实施例3、利用发酵乳杆菌CQPC07制备发酵食品

发酵乳杆菌CQPC07原始菌种的保存：在温度-75℃下以30wt％甘油悬液形式保存，或在温度4℃下以冷冻干燥菌粉的形式保存。

发酵乳杆菌CQPC07工作发酵剂的制备，采用下述两种方法中的任意一种：

第一种方法：将发酵乳杆菌CQPC07的原始菌种接种于经110℃灭菌10min的12wt％脱脂乳中，37℃培养14-16h至凝乳，连续培养活化两代，用作母发酵剂；然后将母发酵剂按3-5vol％接种于灭菌乳中，培养14-16h至凝乳，凝乳中的活菌数约10⁹cfu/mL，用作工作发酵剂。

第二种方法：将发酵乳杆菌CQPC07的原始菌种接种于MRS液体培养基中，37℃培养12-16h进行活化，连续活化两代，然后将活化培养物按2-4vol％接种于MRS培养基中，培养16-18h，4℃、4000r/min离心15min，去除上清夜，细胞沉淀用无菌脱脂乳制成悬浮液，用作工作发酵剂。

1、制备乳酸菌奶饮料

将原料乳(选自脱脂奶、鲜奶和复原奶中的一种或多种)在95℃下加热杀菌20min或在140℃下高温热杀菌2s，冷却到4℃，加入发酵乳杆菌CQPC07工作发酵剂使其浓度达到10⁶cfu/ml以上，即得到含发酵乳杆菌CQPC07的乳酸菌奶饮料，4℃冷藏保存。

2、制备发酵乳

将原料乳(选自脱脂奶、鲜奶和复原奶中的一种或多种)在95℃下加热杀菌20min或在140℃下高温热杀菌2s，冷却到37℃，按照原料乳体积的4％加入发酵乳杆菌CQPC07工作发酵剂，37℃发酵16h，即得到发酵乳杆菌CQPC07发酵乳，4℃冷藏保存。

或者，将原料乳(选自脱脂奶、鲜奶和复原奶中的一种或多种)在95℃下加热杀菌20min或在140℃下高温热杀菌2s，冷却到37℃，按照原料乳体积的4％加入发酵乳杆菌CQPC07工作发酵剂，再按照原料乳体积的4％加入其它可共生的制备发酵乳的商业发酵剂(如保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌)，混匀，37℃混菌发酵至滴定酸度以乳酸计为0.6-0.7％，即得到混菌发酵乳，4℃冷藏保存。

3、制备乳粉

将原料乳(选自脱脂奶、鲜奶和复原奶中的一种或多种)在95℃下加热杀菌20min或在140℃下高温热杀菌2s，冷却到37℃，按照体积比3：1加入发酵乳杆菌CQPC07发酵乳，均质，真空浓缩，喷雾干燥，即得到含发酵乳杆菌CQPC07的乳粉。

4、制备乳粉胶囊

将含发酵乳杆菌CQPC07的乳粉装入胶囊壳中，即得到乳粉胶囊。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。

序列表

<110> 重庆第二师范学院

<120> 发酵乳杆菌CQPC07及其在制备改善溃疡性结肠炎的食品或药品中的应用

<160> 15

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

agagtttgat cctggctcag 20

<210> 2

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

ctacggctac cttgttacga 20

<210> 3

<211> 1420

<212> DNA

<213> 发酵乳杆菌CQPC07 (Lactobacillus fermentum CQPC07)

<400> 3

ttaggcggtg gctctaaagg ttaccccacc gactttgggt gttaaaactc tcatggtgtg 60

acgggcggtg tgtacaaggc ccgggaacgt attcaccgcg gcatgctgat ccgcgattac 120

tagcgattcc gacttcgtgc aggcgagttg cagcctgcag tccgaactga gaacggtttt 180

aagagatttg cttgccctcg cgagttcgcg actcgttgta ccgtccattg tagcacgtgt 240

gtagcccagg tcataagggg catgatgatc tgacgtcgtc cccaccttcc tccggtttgt 300

caccggcagt ctcactagag tgcccaactt aatgctggca actagtaaca agggttgcgc 360

tcgttgcggg acttaaccca acatctcacg acacgagctg acgacgacca tgcaccacct 420

gtcattgcgt tcccgaagga aacgccctat ctctagggtt ggcgcaagat gtcaagacct 480

ggtaaggttc ttcgcgtagc ttcgaattaa accacatgct ccaccgcttg tgcgggcccc 540

cgtcaattcc tttgagtttc aaccttgcgg tcgtactccc caggcggagt gcttaatgcg 600

ttagctccgg cactgaaggg cggaaaccct ccaacaccta gcactcatcg tttacggcat 660

ggactaccag ggtatctaat cctgttcgct acccatgctt tcgagtctca gcgtcagttg 720

cagaccaggt agccgccttc gccactggtg ttcttccata tatctacgca ttccaccgct 780

acacatggag ttccactacc ctcttctgca ctcaagttat ccagtttccg atgcacttct 840

ccggttaagc cgaaggcttt cacatcagac ttagaaaacc gcctgcactc tctttacgcc 900

caataaatcc ggataacgct tgccacctac gtattaccgc ggctgctggc acgtagttag 960

ccgtgacttt ctggttaaat accgtcaacg tatgaacagt tactctcata cgtgttcttc 1020

tttaacaaca gagctttacg agccgaaacc cttcttcact cacgcggtgt tgctccatca 1080

ggcttgcgcc cattgtggaa gattccctac tgctgcctcc cgtaggagta tgggccgtgt 1140

ctcagtccca ttgtggccga tcagtctctc aactcggcta tgcatcatcg ccttggtagg 1200

ccgttacccc accaacaagc taatgcaccg caggtccatc cagaagtgat agcgagaagc 1260

catcttttaa gcgttgttca tgcgaacaac gttgttatgc ggtattagca tctgtttcca 1320

aatgttgtcc cccgcttctg ggcaggttac ctacgtgtta ctcacccgtc cgccactcgt 1380

tggcgaccaa aatcaatcag gtgcaagcac catcaatcaa 1420

<210> 4

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

atgtcctcaa agccatccag 20

<210> 5

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 5

actcagatct aaggcggttg 20

<210> 6

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 6

tgtctgcggc gatgtcact 19

<210> 7

<211> 17

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 7

catgccgccc tctgttg 17

<210> 8

<211> 21

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 8

cagctgggct gtacaaacct t 21

<210> 9

<211> 21

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 9

cattggaagt gaagcgtttg g 21

<210> 10

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 10

ctaggcatct tcgtccgtcc 20

<210> 11

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 11

ttgggccaac agtagccttc 20

<210> 12

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 12

tctgctcaca aacagcgtcg ta 22

<210> 13

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 13

gagtggcatg ggacagcatc 20

<210> 14

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 14

tgcaccacca actgcttag 19

<210> 15

<211> 18

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 15

gatgcaggga tgatgttc 18

Claims

2.权利要求1所述的发酵乳杆菌CQPC07在制备食品或改善溃疡性结肠炎的药品中的应用。

3.如权利要求2所述的发酵乳杆菌CQPC07在制备食品或改善溃疡性结肠炎的药品中的应用，其特征在于，所述食品为发酵食品。

4.如权利要求3所述的发酵乳杆菌CQPC07在制备食品或改善溃疡性结肠炎的药品中的应用，其特征在于，所述发酵食品为乳酸菌奶饮料、发酵乳、乳粉或乳粉胶囊。