CN109953316A - 一种富硒香菇多肽的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种富硒香菇多肽的制备方法，包括粉剂制备、酶解、醇沉、浓缩干燥等步骤。本发明使用以硒酸精氨酸为硒源培育而得的富硒香菇为原料，无机硒残留量少，安全性高；利用酶解技术将香菇子实体中的大分子蛋白质降解为小分子多肽，与其他组分分离；通过醇沉除去可溶性杂质，提高多肽含量。本发明得到的富硒香菇多肽硒含量高，无机硒残留量低，香气浓郁，具有易消化吸收、抗原性低、抗氧化、增强人体免疫力等多种生理功能，可作为硒营养强化剂添加到食品中，也可应用于保健品和药品的开发，前景广阔。
Description
技术领域
本发明涉及一种含硒多肽的制备方法，具体地，本发明涉及一种富硒香菇多肽的制备方法。
背景技术
多肽是生物体内的有效活性成分，具有多种营养保健作用。香菇多肽是香菇蛋白的水解产物，氨基酸含量丰富且种类齐全，还富含在谷物蛋白和蔬菜蛋白中缺乏的亮氨酸和赖氨酸。富硒香菇多肽，富含有机硒，从富硒香菇中提取而得。富硒香菇与蛋白相比在体内更易消化，抗原性低，具有许多独特的生理功能特性和理化性质，更易添加到食品中，用途更广泛。富硒香菇多肽进一步增加了香菇多肽的营养保健价值，是一种安全、高效的有机硒保健品。
硒是人体必需的微量元素之一，许多疾病的发生与硒的摄入量偏低有关，在膳食中适当增加硒的摄入，可以提高人体对某些疾病的抵御能力。硒是谷胱甘肽过氧化物酶的活性中心，是体内重要的抗氧化酶，能清除体内自由基和确保细胞膜的完整性，因此在预防肿瘤、抗衰老和预防心血管等疾病方面起着非常重要的作用。
目前，食用菌活性肽提取的研究较少。含硒多肽与普通的多肽提取不同，一方面要减少硒的损失，另一方面要保证多肽的活性。水提醇沉法是多肽的制备方法之一，这种方法多肽得率不高。酶解法也常用于多肽制备，这种方法的杂质较多。本方法，先将香菇蛋白酶解增加多肽含量，再利用醇沉法除去可溶性杂质提高多肽含量，不仅多肽的纯度较高，而且硒的损失少，许多含硒物质保留了下来。
发明内容
本发明提供了一种富硒香菇多肽的制备方法，利用酶解技术将蛋白质与其他组分分离降解为小分子多肽，通过醇沉进一步纯化多肽，利用真空冷冻技术进行干燥。
本发明实现目的的技术方案是：一种富硒香菇多肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)取新鲜的富硒香菇子实体，在温度60℃条件下，鼓风干燥10～16h，然后粉碎成粒径为小于75μm的富硒香菇粉剂；
(2)酶解：取重量份数为100～200份的步骤(1)中富硒香菇粉剂加入到重量份数为1000份的pH8.0稀氢氧化钠溶液中，混合均匀，然后加入重量份数为10份的碱性蛋白酶搅拌酶解，酶解温度55℃，搅拌速率50～70rpm，酶解4～8h后，过滤除杂，得滤液；
(3)醇沉：向步骤(2)中的滤液中加入3倍～4倍体积的无水乙醇，在温度4℃条件下，沉淀10～14h后，5000g冷冻离心20min，除去可溶性杂质，取上清液；
(4)浓缩干燥：将步骤(3)中的上清液在温度50～60℃条件下，以30～40rpm的转速，旋转蒸发浓缩8～10倍，浓缩液在温度-20℃冰柜冷冻24h，然后在真空度20Pa，温度-75℃的条件下，连续真空冷冻干燥24h，得富硒香菇多肽冻干粉。
其中富硒香菇粉剂的硒含量为20～80mg/kg。
其中富硒香菇多肽冻干粉硒含量为50～200mg/kg，小分子多肽的含量超过80％。
本发明的优点和积极效果是：本发明使用以硒酸精氨酸为硒源培育而得的富硒香菇为原料，无机硒残留量少，安全性高；本发明所得富硒香菇多肽硒含量高，杂质少，且香气浓郁，具有易消化吸收、抗原性低、抗氧化、增强人体免疫力等多种生理功能，可作为硒营养强化剂添加到食品中，也应用于保健品和药品的开发，前景广阔。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。
实施例1:选择以硒酸精氨酸为硒源培育得到的新鲜富硒香菇，在温度60℃条件下，鼓风干燥12h，然后粉碎成粒径小于75μm的富硒香菇粉剂；称取重量份数为100份的富硒香菇粉剂加入到重量份数为1000份的pH8.0稀氢氧化钠溶液中，混合均匀，然后加入重量份数为10份的碱性蛋白酶搅拌酶解，酶解温度55℃，搅拌速率60rpm，酶解5h后，过滤除杂，得滤液；向滤液中加入4倍体积的无水乙醇，4℃沉淀12h，5000g冷冻离心20min，除去可溶性杂质，取上清。将上清在55℃，以40rpm的转速，旋转蒸发浓缩10倍，浓缩液在-20冰柜冷冻24h后，在真空度20Pa，温度-75℃的条件下，连续真空冷冻干燥24h，得富硒香菇多肽冻干粉。
其中富硒香菇粉剂的硒含量为50mg/kg。
其中富硒香菇多肽冻干粉硒含量为105mg/kg，小分子多肽的含量83％。
实施例2:选择以硒酸精氨酸为硒源培育得到的新鲜富硒香菇，在温度60℃条件下，鼓风干燥12h，然后粉碎成粒径小于38μm的富硒香菇粉剂；称取重量份数为150份的富硒香菇粉剂加入到重量份数为1000份的pH8.0稀氢氧化钠溶液中，混合均匀，然后加入重量份数为10份的碱性蛋白酶搅拌酶解，酶解温度55℃，搅拌速率60rpm，酶解6h后，过滤除杂，得滤液；向滤液中加入4倍体积的无水乙醇，4℃沉淀12h，5000g冷冻离心20min，除去可溶性杂质，取上清。将上清在55℃，以40rpm的转速，旋转蒸发浓缩10倍，浓缩液在-20冰柜冷冻24h后，在真空度20Pa，温度-75℃的条件下，连续真空冷冻干燥24h，得富硒香菇多肽冻干粉。
其中富硒香菇粉剂的硒含量为69mg/kg。
其中富硒香菇多肽冻干粉硒含量为146mg/kg，小分子多肽的含量89％。
Claims (5)
1.一种富硒香菇多肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)取新鲜的富硒香菇子实体，在温度60℃条件下，鼓风干燥10～16h，然后粉碎成粒径为小于75μm的富硒香菇粉剂；
(2)酶解：取重量份数为100～200份的步骤(1)中富硒富硒香菇粉剂加入到重量份数为1000份的pH8.0稀氢氧化钠溶液中，混合均匀，然后加入重量份数为10份的碱性蛋白酶搅拌酶解，酶解温度55℃，搅拌速率50～70rpm，酶解4～8h后，过滤除杂，得滤液；
(3)醇沉：向步骤(2)中的滤液中加入3倍～4倍体积的无水乙醇，在温度4℃条件下，沉淀10～14h后，5000g冷冻离心20min，除去可溶性杂质，取上清液；
(4)浓缩干燥：将步骤(3)中的上清液在温度50～60℃条件下，以30～40rpm的转速，旋转蒸发浓缩8～10倍，浓缩液在温度-20℃冰柜冷冻24h，然后在真空度20Pa，温度-75℃的条件下，连续真空冷冻干燥24h，得富硒香菇多肽冻干粉。
2.根据权利要求1所述的富硒香菇多肽的制备方法，其特征在于所述富硒香菇以硒酸精氨酸为硒源培育而得。
3.根据权利要求1所述的富硒香菇多肽的制备方法，其特征在于所述富硒香菇粉剂硒含量为20～80mg/kg。
4.根据权利要求1所述的富硒香菇多肽的制备方法，其特征在于所述富硒香菇多肽冻干粉硒含量为50～200mg/kg。
5.根据权利要求1所述的富硒香菇多肽的制备方法，其特征在于所述富硒香菇多肽冻干粉中小分子多肽的含量超过80％。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| WW01 | Invention patent application withdrawn after publication |
Application publication date: 20190702 |
|
| WW01 | Invention patent application withdrawn after publication |