CN109820957A - 一种中药组合物在制备治疗眼底黄斑病变药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种中药组合物在制备治疗眼底黄斑病变药物中的应用，其特征在于，所述中药组合物包括下述重量份比例的原料药：黄芪400‑600重量份、当归400‑600重量份、党参400‑600重量份、玄参400‑600重量份、金银花400‑600重量份、石斛400‑600重量份、牛膝400‑600重量份、甘草400‑600重量份。并采用Matrigel注射方法建立兔CNV实验模型，以及激光诱导棕色挪威(BN)大鼠脉络膜新生血管(CNV)作为模型进行实验，结果表明通塞脉片对家兔的视网膜、脉络膜具有明显的保护作用，对CNV的形成和生长均有一定抑制作用。

Description

一种中药组合物在制备治疗眼底黄斑病变药物中的应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种中药组合物在制备治疗眼底黄斑病变药物中的应用。

背景技术

眼部黄斑病变是一种常见的慢性眼病，患者主要临床表现为中心视力大幅度降低，中医学认为黄斑病变属于“暴盲”、“视瞻昏渺”等疾病范畴。眼底黄斑病变是老年患者视力丧失的主要诱发原因，随着黄斑病变的发病率逐年升高，中老年患者例数也逐年增加，随着人口老龄化时代的加速到来，眼底黄斑病变已成为我国患者致盲的主要原因，严重影响患者的生活质量。

黄斑病变常以脉络膜新生血管形成(choroidal neovascularization，CNV)为特征，常引起黄斑区出血、纤维瘢痕化。黄斑病变严重时导致患者的视网膜功能完全丧失，甚至失明，是引起视力丧失的最主要原因。脉络膜新生血管是由多种病因所致的脉络膜血管芽穿越Bruch膜并在视网膜色素上皮下增殖形成的纤维血管膜，是导致湿性黄斑病变患者严重视力损害的罪魁祸首。

目前，CNV治疗方法包括玻璃体腔注射抗VEGF类药物、光动力疗法、经瞳孔温热疗法、激光光凝、手术和中西医结合治疗等。目前黄斑病变的一线治疗方法是抗VEGF治疗，但在临床上需要局部给药，且给药途径为玻璃体注射，会对患者的眼球造成轻微的损伤，患者顺应性差，并且治疗费用昂贵。中医药物治疗黄斑病变大多是口服形式，能起到全身治疗的目的，但相关制剂的开发研究不够，需要加强。未来开发治疗黄斑病变的中药制剂具有巨大的经济价值及社会效益。

发明内容

本发明的目的在于提供一种中药组合物在制备治疗眼底黄斑病变药物中的应用，其特征在于，所述中药组合物包括下述重量份比例的原料药：黄芪400-600重量份、当归400-600重量份、党参400-600重量份、玄参400-600重量份、金银花400-600重量份、石斛400-600重量份、牛膝400-600重量份、甘草400-600重量份。其中，所述原料药可以直接研磨成粉，也可以是经过常规手段制得的提取物或其它形态等。

进一步地，所述中药组合物包括下述重量份比例的原料药：黄芪450-500重量份、当归450-500重量份、党参450-500重量份、玄参450-500重量份、金银花450-500重量份、石斛450-500重量份、牛膝450-500重量份、甘草450-500重量份。

优选地，所述中药组合物包括下述重量份比例的原料药：黄芪480重量份、当归480重量份、党参480重量份、玄参480重量份、金银花480重量份、石斛480重量份、牛膝480重量份、甘草480重量份。

进一步地，所述治疗眼底黄斑病变药物选自口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。

具体地，所述治疗眼底黄斑病变药物选自汤剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂、注射剂、滴眼剂。

本发明还提出了一种中药组合物在制备抑制脉络膜新生血管药物中的应用，其特征在于，所述中药组合物包括下述重量份比例的原料药：黄芪400-600重量份、当归400-600重量份、党参400-600重量份、玄参400-600重量份、金银花400-600重量份、石斛400-600重量份、牛膝400-600重量份、甘草400-600重量份。

优选地，所述中药组合物包括下述重量份比例的原料药：黄芪480重量份、当归480重量份、党参480重量份、玄参480重量份、金银花480重量份、石斛480重量份、牛膝480重量份、甘草480重量份。

进一步地，所述抑制脉络膜新生血管药物选自口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。

具体地，所述抑制脉络膜新生血管药物选自汤剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂、注射剂、滴眼剂。

优选地，所述中药组合物的制备方法可以用以下步骤制得：按原料药配比，加水煎煮两次，每次煎煮1～2小时，煎液合并、静置，取上清液浓缩成相对密度为1.2左右的稠膏，用乙醇进行醇沉，使含醇量达60～70％，搅匀，静置，上清液回收乙醇并浓缩成浸膏。

本发明中使用的中药组合物是在《验方新编》四妙勇安汤的基础上，经名老中医临床经验研制而成的中成药，由黄芪、党参、当归、石斛、金银花、玄参、牛膝、甘草8味中药组成，具有活血通络、益气养阴的功效，商品名为通塞脉片。

本发明通过建立了两种脉络膜新生血管(CNV)实验模型，考察了通塞脉片高、中、低三个剂量下对CNV的抑制作用情况。

首先，本发明采用Matrigel注射方法建立兔CNV实验模型，通过眼底彩照、荧光素眼底血管造影术对治疗效果进行评价。结果显示，通塞脉片各剂量均能减少眼底荧光渗漏的面积，对眼底组织病变有保护作用，且高剂量组效果最明显，其表明通塞脉片对家兔的视网膜、脉络膜具有明显的保护作用。

其次，本发明还以激光诱导棕色挪威(BN)大鼠脉络膜新生血管(CNV)为模型，观察通塞脉片对CNV的组织病理学影响。结果显示通塞脉片各剂量均能有效减少纤维血管组织增生、减少组织破坏、减轻组织水肿以及减小CNV发生面积和厚度，而高剂量组效果最明显，其表明通塞脉片对实验性CNV有一定的抑制作用。

具体实施方式

以下通过具体实施方式对本发明进行更加详细的说明，以便能够更好地理解本发明的方案及其各个方面的优点。然而，以下描述的具体实施方式的内容仅是说明的目的，而不是对本发明的限制。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用与本发明。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

对实验性有色家兔脉络膜新生血管(CNV)的动物模型的作用

1.1药品来源

通塞脉片为市售，由江苏康缘阳光药业有限责任公司生产，批准文号：国药准字Z32020535。

通塞脉片的处方组成为：黄芪480g，当归480g，党参480g，玄参480g，金银花480g，石斛480g，牛膝480g，甘草480g。具体制法包括：按上述用量配比，加水煎煮两次，每次煎煮1～2小时，煎液合并、静置，取上清液浓缩成相对密度为1.2左右的稠膏，用乙醇进行醇沉，使含醇量达60～70％，搅匀，静置，上清液回收乙醇并浓缩成浸膏，再经过干燥、粉碎、过筛、制粉、压片、包衣制成片剂，共制成1000片。

1.2实验方法

有色家兔随机分成五组，空白组、模型组、通塞脉片高、中、低剂量组，每组8只。除空白组，每组家兔全麻散瞳后，于颞侧中外1/3有髓神经纤维视网膜下注射Matrigel(基质胶)20uL，视网膜无大面积出血、晶状体无划伤视为造模成功。造模后局部抗炎眼药水点眼预防感染。造模后开始灌胃给药，空白组和模型组每日以生理盐水2mL灌胃，通塞脉片组分别以6.46g生药/kg、3.23g生药/kg和1.41g生药/kg灌胃，每组给药1次/d，连续给药28d。

检测方法：

1.眼底彩照、荧光素眼底血管造影术(FFA)检查：给药28d后麻醉、散瞳，10％荧光素钠(1ml/kg)自耳缘静脉注入，行眼底彩照、FFA检查，图像分析处理荧光素渗漏面积。

2.石蜡组织切片及光镜标本制备：空气栓塞处死动物，摘除眼球，取眼后段于10％甲醛固定，去除眼角膜和晶状体，在眼视网膜区域内分散取5块眼视网膜组织，梯度酒精脱水，石蜡包埋，每个眼球组织间断切片3张，厚度4μm，HE染色，拍照，每个眼视网膜共观察15个部位的眼视网膜、脉络膜及巩膜。

1.3实验结果

荧光素眼底血管造影术检查结果如表1，模型组眼底彩照注射区域色素紊乱，边界清晰，检查血管荧光渗漏明显，表明造模成功。与模型组比较，通塞脉片高、中、低3个剂量组均能有效减少病变部位荧光渗漏的面积，说明药物对脉络膜新生血管的形成和生长具有一定抑制作用。

观察记录各组兔的眼底病理情况，对网膜各层炎症反应、坏死、水肿以及血管和纤维组织增生进行评价，统计结果见表2，通塞脉片对家兔的视网膜、脉络膜具有明显的保护作用，且以高剂量效果最好。

表1治疗28d后各组眼底荧光渗漏面积

表2各组家兔眼底损伤发生病理情况(只，n＝8)

注：BF(blood vessel and fibrous tissue proliferation)：血管、纤维组织增生

对激光诱导棕色挪威(Brown Norway，BN)大鼠脉络膜新生血管(CNV)模型的作用

2.1实验方法

成年雄性棕色挪威大鼠30只，200～300g，经裂隙灯显微镜检查及眼底检查，排除屈光介质和眼底异常大鼠。随机分为模型组、通塞脉片高、中、低剂量组，每组6只。大鼠腹腔注射氯胺酮(5ml/kg)麻醉，双眼滴0.5％托比卡胺溶液，大鼠放置于半导体激光机前，用氪激光(647nm)在视乳头1-2PD外围绕视乳头等距离视网膜光凝10个点。眼底光凝后14d各组大鼠麻醉，将10％荧光素钠(2.5ml/kg)自左下腹膜内注射行荧光素眼底血管造影。模型组每日以生理盐水2mL灌胃，通塞脉片组分别以12.44g生药/kg、6.22g生药/kg和3.11g生药/kg灌胃。

检测方法：

给药30d后麻醉处死，立即取出大鼠眼球。置于10％甲醛溶液中室温过夜后，经石蜡包埋、切片、染色制备光镜标本。组织切片在光镜100倍视野下选取CNV，采用图像分析仪，对连续切片的CNV最大中央厚度(色素上皮层至视网膜内CNV最高点的距离)及面积(包括血管平滑肌细胞、分化较差的肌纤维细胞、炎症细胞以及增殖的视网膜色素上皮细胞等)进行测量。

2.2实验结果

观察组织切片，测量各组大鼠CNV厚度及面积，结果见表3。与空白组相比，通塞脉片各剂量均能有效减少纤维血管组织增生、减少组织破坏、减轻组织水肿以及减小CNV发生面积和厚度，高剂量组效果最明显，表明通塞脉片对实验性CNV有一定的抑制作用。

表3各组大鼠CNV厚度及面积测量结果

综上所述，表明通塞脉片在实验性CNV兔和大鼠模型中均具有明显的治疗效果，表明通塞脉片对CNV的形成和生长均有一定抑制作用，在黄斑病变临床治疗上有良好的前景。

以上仅实施例也仅是本发明的优选实施方式，本发明如未注明具体条件者，均按照常规条件或制造商建议的条件进行，所用原料药或辅料，以及所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种中药组合物在制备治疗眼底黄斑病变药物中的应用，其特征在于，所述中药组合物包括下述重量份比例的原料药：黄芪400-600重量份、当归400-600重量份、党参400-600重量份、玄参400-600重量份、金银花400-600重量份、石斛400-600重量份、牛膝400-600重量份、甘草400-600重量份。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物包括下述重量份比例的原料药：黄芪450-500重量份、当归450-500重量份、党参450-500重量份、玄参450-500重量份、金银花450-500重量份、石斛450-500重量份、牛膝450-500重量份、甘草450-500重量份。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物包括下述重量份比例的原料药：黄芪480重量份、当归480重量份、党参480重量份、玄参480重量份、金银花480重量份、石斛480重量份、牛膝480重量份、甘草480重量份。

4.根据权利要求1-5任一所述的应用，其特征在于，所述治疗眼底黄斑病变药物选自口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述治疗眼底黄斑病变药物选自汤剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂、注射剂、滴眼剂。

6.一种中药组合物在制备抑制脉络膜新生血管药物中的应用，其特征在于，所述中药组合物包括下述重量份比例的原料药：黄芪400-600重量份、当归400-600重量份、党参400-600重量份、玄参400-600重量份、金银花400-600重量份、石斛400-600重量份、牛膝400-600重量份、甘草400-600重量份。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述中药组合物包括下述重量份比例的原料药：黄芪480重量份、当归480重量份、党参480重量份、玄参480重量份、金银花480重量份、石斛480重量份、牛膝480重量份、甘草480重量份。

8.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述抑制脉络膜新生血管药物选自口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述抑制脉络膜新生血管药物选自汤剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂、注射剂、滴眼剂。

10.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述中药组合物制备方法包括以下步骤：

按原料药配比，加水煎煮两次，每次煎煮1～2小时，煎液合并、静置，取上清液浓缩成相对密度为1.2左右的稠膏，用乙醇进行醇沉，使含醇量达60～70％，搅匀，静置，上清液回收乙醇并浓缩成浸膏。