CN109748950B - 一种固相合成血管升压素受体肽激动剂selepressin的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种固相合成血管升压素受体肽激动剂SELEPRESSIN的方法，其包括如下步骤：1)固相树脂依次偶联氨基保护的氨基酸，合成多肽树脂H‑Cys(allocam)‑Phe‑Ile‑Hgn(Trt)‑Asn(Trt)‑Cys(allocam)‑Pro‑Org(i‑Pr)‑Gly‑树脂；2)固相条件下，以三元催化氧化体系脱除半胱氨酸的保护基allocam并氧化巯基为二硫键；3)裂解液脱除树脂及并Hgn和Asn侧链保护基，并纯化。本发明的方法没有使用碘催化剂，极大的降低了后续处理的问题，具有操作简单、工艺简化、环境友好、经济效益高、可规模化生产等优点。

Description

一种固相合成血管升压素受体肽激动剂SELEPRESSIN的方法
技术领域
本发明本发明属于制药技术领域，尤其是涉及一种固相法合成Selepressin的方法。
背景技术
Selepressin，即FE-202158，是一种血管升压素受体肽激动剂，由辉凌公司开发的一种治疗化脓性休克的多肽类药物，目前处于临床III期。Selepressin为人工合成的九肽化合物，C端为酰胺，含有一对二硫键(1-6)，肽序见式I，Cas：876296-47-8。
Figure BDA0001455678810000011
到目前为止，专利CN1964732B公开报道了制备Selepressin的方法：使用氨基树脂，通过标准的Fmoc固相肽合成制备粗肽，然后在液相中在醋酸甲醇溶液中碘氧化二硫键，反向高效液相法纯化得到Selepressin精肽。此方法的缺点在于用碘氧化二硫键时，杂质较多，产率与纯度不高，同时过量的碘很难除掉。
发明内容
为了解决上述问题，本发明的目的是提供一种高效环保的Selepressin合成方法。本发明先使用氨基树脂和便宜的氨基酸原料，通过Fmoc/tBu策略固相合成线性肽，然后使用本发明特定的三元催化氧化体系在固相中催化氧化二硫键，高效液相纯化制备得到目标肽。该方法新颖、合成条件温和、工艺简单且工艺稳定。
本发明一个方面提供了一种血管升压素受体肽激动剂Selepressin的合成方法，其包括如下步骤：
1)固相树脂依次偶联氨基保护的氨基酸，合成多肽树脂H-Cys(allocam)-Phe-Ile-Hgn(R1)-Asn(R2)-Cys(allocam)-Pro-Org(i-Pr)-Gly-树脂；
2)固相条件下，以三元催化氧化体系脱除半胱氨酸的保护基allocam并氧化巯基为二硫键；
3)裂解液脱除树脂及并Hgn和Asn侧链保护基，并纯化；
其中，步骤1)中的R1为Hgn的侧链保护基，优选为Trt；R2为Asn的侧链保护基，优选为Trt。
其中，步骤2)脱除半胱氨酸的保护基allocam并氧化二硫键的反应条件为步骤1)所得多肽树脂中的三元催化氧化体系为二价钯盐催化剂、捕获剂以及溶剂形成的反应体系。
步骤2)中所述二价钯盐催化剂选自Pd(OAc)2、PdCl2、PdSO4、Pd(OTf)2中的一种或多种的组合，优选Pd(OAc)2；
所述捕获剂选自NMM、苯硅烷、三乙胺中的一种或多种的组合，优选为NMM；
步骤2)中所用溶剂为乙酸与二甲亚砜的混合液，优选比例为：乙酸：二甲亚砜＝1:100—1:1(体积比)，更优选1:10—1:70；最优选1:18-1:20。
步骤2)反应温度为0℃-100℃，优选20℃-40℃；
步骤2)二价钯盐催化剂的用量为0.5-10当量，优选1.0-1.5当量。
本发明步骤2)中不使用碘或碘相关试剂作催化剂。
步骤1)中所述树脂为氨基树脂，优选为Rink Amide树脂、Rink Amide-AM树脂、MBHA树脂、PAL树脂，树脂替代度为0.1-2.0mmol/g，优选0.5-1.5mmol/g，更优选0.5-1.0mmol/g。
步骤1)中所述的氨基保护的氨基酸中氨基保护基为Fmoc或tBu，偶联氨基酸依次为Gly、Org(i-Pr)、Pro、Cys(Allocam)、Asn(Trt)、Hgn(Trt)、Ile、Phe、Cys(Allocam)。
所述固相多肽合成方法包括以下步骤：
i)脱除氨基保护，至完全；
ii)将待偶联的氨基保护的氨基酸和偶联剂溶解并活化后，一起加入到固相反应柱中，直至反应完全；
iii)重复i)和ii)直至形成完整的多肽树脂。
其中，脱除Fmoc的试剂为20％的哌啶/DMF溶液(DBLK)，即哌啶：DMF(体积比)为1:4的混合溶液。
本发明步骤2)中的偶联剂为DIC和化合物A的组合物、DIC和化合物俄A和化合物B的组合物、DIPCDI和化合物A的组合物或DIPEA和化合物A和化合物B的组合物，其中化合物A为HOBt或HOAt，化合物B为PyBOP、PyAOP、HATU、HBTU或TBTU，优选为DIC和化合物A的组合物。
进一步地，偶联剂中各成分的比例以摩尔比计为DIC:A＝1.2:1.1、DIC:A:B＝2.0:1.1:1.0、DIPEA:A＝1.2:1.1、DIPEA:A:B＝2.0:1.1:1.0。
在本发明中，固相反应在固相反应柱中进行。本发明对固相反应柱无特别限制，可为可实现此目的的任意固相反应柱。
此外，每种氨基酸进行偶联反应的时间通常为1.5-4小时，优选2-3小时；压力优选为常压，也可在适当提高或降低的压力下进行；温度优选为室温(即20±5℃)，也可在适当提高或降低的温度下进行。
步骤1)的反应优选将树脂在偶联之前进行溶胀，所述洗涤和溶胀的步骤本领域可采用实现该目的的任何试剂进行，包括DMF、NMP、二氯甲烷等，优选DMF。
在本发明中，每一步反应均可以采用检测方法监测反应终点，反应中应用的检测方法是本领域已知的可实现此目的的任意方法，例如色谱法或化学标定法，优选使用可判定反应终点的试剂，优选茚三酮，当使用茚三酮时，若树脂显色则说明多肽中有游离的胺，即胺上无保护基。
步骤3))所述的裂解液为TFA、H2O、PhOMe、苯甲硫醚的不同比例混合物；优选地，各组分的比例为TFA:H2O:PhOMe:苯甲硫醚90:5:4:1。
步骤4)所述纯化步骤采用反相高压液相色谱法。进一步地，所述反相高压液相色谱法包括：以反相十八烷基硅烷为固定相，以体积比0.1％醋酸水溶液/乙腈为流动相，流动相体积比0.1％醋酸水溶液/乙腈的比例优选为98:2至50:50，更优选80:20至60:40，最优选70:30。收集目的峰馏分，浓缩冻干。
在本发明中，本发明的英文缩写及中文含义，如下表所示。
Figure BDA0001455678810000031
Figure BDA0001455678810000041
有益效果
本方法采用固相氧化二硫键，反应体系采用特殊的三元催化氧化体系，反应效率高，没有使用碘，从而提交了后续纯化的步骤。具有操作简单、工艺简化、环境友好、经济效益高、可规模化生产等优点。
附图说明
图1为本发明的合成路线图。
具体实施方式
下面通过具体实施案例对本发明做进一步说明，本发明的技术方案和保护范围不受下述实施案例的任何限制。
实施例1多肽树脂的制备
称取替代度为1.0mmol/g的Rink Amide树脂50g于固相反应柱中，加入50mLDMF，氮气鼓泡溶胀60分钟；然后用50mL DBLK脱保护6min+8min，100mLDMF洗涤6次。称取74.3g(250mmol)Fmoc-Gly-OH和33.8g(250mmol)HOBT用150mL DMF溶解，冰水浴下加入31.5g(210mmol)DIC活化3min后，将混合液加入到反应柱中，室温反应2小时，以茚三酮检测反应终点(如树脂无色透明则终止反应；如树脂显色则延长反应1小时)。反应结束，用150mLDMF洗涤树脂3次，加入150mLDBLK脱保护6min+8min，150mLDMF洗涤树脂6次，茚三酮检测树脂有颜色。重复上述偶联操作，按照肽序继续依次偶联Fmoc-Org(i-Pr)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Cys(Allocam)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Hgn(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Cys(Allocam)-OH。每种氨基酸、HOBT及DIC每次分别投料210mmol。反应结束后，用DMF洗涤6次，每次100mL，然后用200mL甲醇收缩树脂，抽干，得到多肽树脂127.6克。肽树脂增重88.8克，增重率为98％。计算公式：88.8/(50×1812×0.001)×100％。
实施例2多肽树脂的制备
称取替代度为1.0mmol/g的Rink Amide-AM树脂50g于固相反应柱中，加入50mLDMF，氮气鼓泡溶胀60分钟；然后用50mL DBLK脱保护6min+8min，100mLDMF洗涤6次。称取74.3g(250mmol)Fmoc-Gly-OH和33.8g(250mmol)HOBT用150mL DMF溶解，冰水浴下加入31.5g(210mmol)DIC活化3min后，将混合液加入到反应柱中，室温反应2小时，以茚三酮检测反应终点(如树脂无色透明则终止反应；如树脂显色则延长反应1小时)。反应结束，用150mLDMF洗涤树脂3次，加入150mLDBLK脱保护6min+8min，150mLDMF洗涤树脂6次，茚三酮检测树脂有颜色。重复上述偶联操作，按照肽序继续依次偶联Fmoc-Org(i-Pr)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Cys(Allocam)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Hgn(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Cys(Allocam)-OH。每种氨基酸、HOBT及DIC每次分别投料210mmol。反应结束后，用DMF洗涤6次，每次100mL，然后用200mL甲醇收缩树脂，抽干，得到多肽树脂113.6克。肽树脂增重73.4克，增重率为81％。计算公式：73.4/(50×1812×0.001)×100％。
实施例3多肽树脂的制备
称取替代度为1.0mmol/g的MBHA树脂50g于固相反应柱中，加入50mLDMF，氮气鼓泡溶胀60分钟；然后用50mL DBLK脱保护6min+8min，100mLDMF洗涤6次。称取74.3g(250mmol)Fmoc-Gly-OH和33.8g(250mmol)HOBT用150mL DMF溶解，冰水浴下加入31.5g(210mmol)DIC活化3min后，将混合液加入到反应柱中，室温反应2小时，以茚三酮检测反应终点(如树脂无色透明则终止反应；如树脂显色则延长反应1小时)。反应结束，用150mLDMF洗涤树脂3次，加入150mLDBLK脱保护6min+8min，150mLDMF洗涤树脂6次，茚三酮检测树脂有颜色。重复上述偶联操作，按照肽序继续依次偶联Fmoc-Org(i-Pr)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Cys(Allocam)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Hgn(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Cys(Allocam)-OH。每种氨基酸、HOBT及DIC每次分别投料210mmol。反应结束后，用DMF洗涤6次，每次1000mL，然后用200mL甲醇收缩树脂，抽干，得到全保护多肽树脂128.9克。计算公式：90.6/(50×1812×0.001)×100％。
实施例4固相氧化二硫键
将按照实施例3制得的128.9克肽树脂中，依次加入1.5L二甲亚砜、80mL乙酸、75mmol醋酸钯、1.5mol N-甲基吗啉，然后25℃反应。反应结束后，用DMF洗6次，每次1000mL，然后用200mL甲醇收缩树脂，抽干，得到环肽树脂121.9克。肽树脂增重71.9克，增重率为92％。计算公式：71.9/(50×1578×0.001)×100％。
实施例5固相氧化二硫键
将按照实施例3制得的128.9克肽树脂中，依次加入1.5L二甲亚砜、80mL乙酸、75mmol氯化钯、1.5mol N-甲基吗啉，然后25℃反应。反应结束后，用DMF洗6次，每次1000mL，然后用200mL甲醇收缩树脂，抽干，得到环肽树脂120.2克。肽树脂增重70.2克，增重率为89％。计算公式：70.2/(50×1578×0.001)×100％。
实施例6固相氧化二硫键
将按照实施例3制得的128.9克肽树脂中，依次加入1.5L二甲亚砜、80mL乙酸、75mmol硫酸钯、1.5molN-甲基吗啉，然后25℃反应。反应结束后，用DMF洗6次，每次1000mL，然后用200mL甲醇收缩树脂，抽干，得到环肽树脂118.9克。肽树脂增重68.9克，增重率为87％。计算公式：68.9/(50×1578×0.001)×100％。
实施例7固相氧化二硫键
将按照实施例3制得的128.9克肽树脂中，依次加入1.5L二甲亚砜、80mL乙酸、75mmol醋酸钯、1.5mol苯硅烷，然后25℃反应。反应结束后，用DMF洗6次，每次1000mL，然后用200mL甲醇收缩树脂，抽干，得到环肽树脂120.9克。肽树脂增重70.9克，增重率为90％。计算公式：70.9/(50×1578×0.001)×100％。
实施例8粗肽的制备
将实施例4得到的环肽肽树脂121.9g加入到3L三口瓶中，加入预先配置好的TFA:H2O:PhOMe:苯甲硫醚＝90:5:4:1(V:V)1200mL，室温反应2小时，减压过滤树脂，收集滤液。用少量TFA洗涤树脂，合并滤液。将滤液缓慢加入12L冰乙醚中沉淀，离心，冰乙醚5L洗涤5次，减压干燥得到粗肽46.1克，收率88％(收率计算公式：46.1/(50×0.001×1048)×100％)，纯度87％。
实施例9粗肽的制备
将实施例5得到的环肽肽树脂120.2g加入到3L三口瓶中，加入预先配置好的TFA:H2O:PhOMe:苯甲硫醚＝90:5:4:1(V:V)1200mL，室温反应2小时，减压过滤树脂，收集滤液。用少量TFA洗涤树脂，合并滤液。将滤液缓慢加入12L冰乙醚中沉淀，离心，冰乙醚5L洗涤5次，减压干燥得到粗肽40.3克,收率77％(收率计算公式：40.3/(50×0.001×1048)×100％)，纯度82％。
实施例10粗肽的制备
将实施例6得到的环肽肽树脂118.9g加入到3L三口瓶中，加入预先配置好的TFA:H2O:PhOMe:苯甲硫醚＝90:5:4:1(V:V)1200mL，室温反应2小时，减压过滤树脂，收集滤液。用少量TFA洗涤树脂，合并滤液。将滤液缓慢加入12L冰乙醚中沉淀，离心，冰乙醚5L洗涤5次，减压干燥得到粗肽38.1克,收率73％(收率计算公式：38.1/(50×0.001×1048)×100％)，纯度78％。
实施例11粗肽的制备
将实施例7得到的环肽肽树脂120.9g加入到3L三口瓶中，加入预先配置好的TFA:H2O:PhOMe:苯甲硫醚＝90:5:4:1(V:V)1200mL，室温反应2小时，减压过滤树脂，收集滤液。用少量TFA洗涤树脂，合并滤液。将滤液缓慢加入12L冰乙醚中沉淀，离心，冰乙醚5L洗涤5次，减压干燥得到粗肽42.1克,收率80％(收率计算公式：42.1/(50×0.001×1048)×100％)，纯度70％。
实施例12Selepressin的制备
将实施例8得到的粗肽46.1克加入到1000ml反应瓶中，加入乙腈水溶液(体积比1:1)500ml溶解，上样15cm×25cm制备柱高效液相纯化制备。以反相十八烷基硅烷为固定相，以体积比0.1％醋酸水溶液/乙腈为流动相，比例为70:30；等梯度洗脱制备；流速：70-80ml/min；检测波长：280nm；收集目的峰馏分，浓缩冻干，得纯品36.2g，纯度为99.5％，总收率69％。总收率计算公式36.2÷(50×0.001×1048)×100％。MS[M+H]+理论值1048.5，实验值1048.5。
对比实验：利用碘固相氧化二硫键制备Selepressin
实施例13多肽树脂的制备
称取替代度为1.0mmol/g的MBHA树脂50g于固相反应柱中，加入50mLDMF，氮气鼓泡溶胀60分钟；然后用50mL DBLK脱保护6min+8min，100mLDMF洗涤6次。称取74.3g(250mmol)Fmoc-Gly-OH和33.8g(250mmol)HOBT用150mL DMF溶解，冰水浴下加入31.5g(210mmol)DIC活化3min后，将混合液加入到反应柱中，室温反应2小时，以茚三酮检测反应终点(如树脂无色透明则终止反应；如树脂显色则延长反应1小时)。反应结束，用150mLDMF洗涤树脂3次，加入150mLDBLK脱保护6min+8min，150mLDMF洗涤树脂6次，茚三酮检测树脂有颜色。重复上述偶联操作，按照肽序继续依次偶联Fmoc-Org(i-Pr)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Hgn(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH。每种氨基酸、HOBT及DIC每次分别投料210mmol。反应结束后，用DMF洗涤6次，每次1000mL，然后用200mL甲醇收缩树脂，抽干，得到全保护多肽树脂151.1克。肽树脂增重101.1克，增重率为98％。计算公式：101.1/(50×2064×0.001)×100％。
实施例14固相氧化二硫键
将按照实施例13制得的151.1克肽树脂中，依次加入1.5LDMF、12.7g碘，然后25℃反应。反应结束后，用DMF洗6次，每次1000mL，然后用200mL甲醇收缩树脂，抽干，得到环肽肽树脂119.2克。肽树脂增重69.2克，增重率为88％。计算公式：69.2/(50×1578×0.001)×100％。
实施例15粗肽的制备
将实施例14得到的环肽肽树脂119.2g加入到3L三口瓶中，加入预先配置好的TFA:H2O:PhOMe:苯甲硫醚＝90:5:4:1(V:V)1200mL，室温反应2小时，减压过滤树脂，收集滤液。用少量TFA洗涤树脂，合并滤液。将滤液缓慢加入12L冰乙醚中沉淀，离心，冰乙醚5L洗涤5次，减压干燥得到粗肽26.2克,收率50％(收率计算公式：26.2/(50×0.001×1048)×100％)，纯度55％。
实施例16Selepressin的制备
将实施例15得到的粗肽26.2克加入到1000ml反应瓶中，加入乙腈水溶液(体积比1:1)500ml溶解，上样15cm×25cm制备柱高效液相纯化制备。以反相十八烷基硅烷为固定相，以体积比0.1％醋酸水溶液/乙腈为流动相，比例为70:30；等梯度洗脱制备；流速：70-80ml/min；检测波长：280nm；收集目的峰馏分，浓缩冻干，得纯品14.0g，纯度为99.5％，总收率27％。总收率计算公式14.0/(50×0.001×1048)×100％。
实施例17多肽树脂的制备
称取替代度为1.0mmol/g的MBHA树脂50g于固相反应柱中，加入50mLDMF，氮气鼓泡溶胀60分钟；然后用50mL DBLK脱保护6min+8min，100mLDMF洗涤6次。称取74.3g(250mmol)Fmoc-Gly-OH和33.8g(250mmol)HOBT用150mL DMF溶解，冰水浴下加入31.5g(210mmol)DIC活化3min后，将混合液加入到反应柱中，室温反应2小时，以茚三酮检测反应终点(如树脂无色透明则终止反应；如树脂显色则延长反应1小时)。反应结束，用150mLDMF洗涤树脂3次，加入150mLDBLK脱保护6min+8min，150mLDMF洗涤树脂6次，茚三酮检测树脂有颜色。重复上述偶联操作，按照肽序继续依次偶联Fmoc-Org(i-Pr)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Cys(Acm)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Hgn(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Cys(Acm)-OH。每种氨基酸、HOBT及DIC每次分别投料210mmol。反应结束后，用DMF洗涤6次，每次1000mL，然后用200mL甲醇收缩树脂，抽干，得到全保护多肽树脂135.2克。肽树脂增重85.2克，增重率为99％。计算公式：85.2/(50×1722×0.001)×100％
实施例18固相氧化二硫键
将按照实施例17制得的135.2克肽树脂中，依次加入1.5LDMF、12.7g碘,然后25℃反应。反应结束后，用DMF洗6次，每次1000mL,然后用200mL甲醇收缩树脂，抽干，得到环肽肽树脂119.2克。肽树脂增重68.5克，增重率为87％。计算公式：68.5/(50×1578×0.001)×100％。
实施例19粗肽的制备
将实施例18得到的环肽肽树脂119.2g加入到3L三口瓶中，加入预先配置好的TFA:H2O:PhOMe:苯甲硫醚＝90:5:4:1(V:V)1200mL，室温反应2小时，减压过滤树脂，收集滤液。用少量TFA洗涤树脂，合并滤液。将滤液缓慢加入12L冰乙醚中沉淀，离心，冰乙醚5L洗涤5次，减压干燥得到粗肽25.1克，收率48％(收率计算公式：25.1/(50×0.001×1048)×100％)，纯度59％。
实施例20Selepressin的制备
将实施例19得到的粗肽25.1克加入到1000ml反应瓶中，加入乙腈水溶液(体积比1:1)500ml溶解，上样15cm×25cm制备柱高效液相纯化制备。以反相十八烷基硅烷为固定相，以体积比0.1％醋酸水溶液/乙腈为流动相，比例为70:30；等梯度洗脱制备；流速：70-80ml/min；检测波长：280nm；收集目的峰馏分，浓缩冻干，得纯品13.9g，纯度为99.5％，总收率26.5％。总收率计算公式13.9/(50×0.001×1048)×100％。
由以上实验结果可以得知，采用传统的Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Cys(Acm)-OH为原料，固相碘氧化制备Selepressin，产率较低(总收率分别为27％和26.5％)，且产品颜色发黄；而采用Fmoc-Cys(Allocam)-OH为原料，并以本发明所述的三元催化体系固相氧化制备Selepressin，产率和纯度较高，总收率接近70％。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。

Claims (21)

1.一种血管升压素受体肽激动剂Selepressin的合成方法，其包括如下步骤：
1)固相树脂依次偶联氨基保护的氨基酸，合成多肽树脂H-Cys(allocam)-Phe-Ile-Hgn(R1)-Asn(R2)-Cys(allocam)-Pro-Org(i-Pr)-Gly-树脂；
2)固相条件下，以三元催化氧化体系脱除半胱氨酸的保护基allocam并氧化巯基为二硫键；
3)裂解液脱除树脂及并Hgn和Asn侧链保护基，并纯化；
其中，步骤1)中的R1为Hgn的侧链保护基，R1为Trt；R2为Asn的侧链保护基，R2为Trt；
其中，步骤2)脱除半胱氨酸的保护基allocam并氧化二硫键的反应条件为步骤1)所得多肽树脂中的三元催化氧化体系为二价钯盐催化剂、捕获剂以及溶剂形成的反应体系；
步骤2)中所述二价钯盐催化剂选自Pd(OAc)2、PdCl2、PdSO4中的一种或多种的组合；
所述捕获剂选自NMM、苯硅烷、三乙胺中的一种或多种的组合；
步骤2)中二价钯盐催化剂的用量为1.0-1.5当量；
步骤2)中所用溶剂为乙酸与二甲亚砜的混合液。
2.根据权利要求1所述的合成方法，其中，二价钯盐催化剂选自Pd(OAc)2。
3.根据权利要求1或2所述的合成方法，其中，所述捕获剂选自NMM。
4.根据权利要求1-2任一项所述的合成方法，其中，步骤2)反应温度为0℃-100℃。
5.根据权利要求1-2任一项所述的合成方法，其中，步骤2)反应温度为20℃-40℃。
6.根据权利要求1-2任一项所述的合成方法，其中，固相多肽合成方法包括以下步骤：
i)脱除氨基保护基，至完全；
ii)将待偶联的氨基保护的氨基酸和偶联剂溶解并活化后，一起加入到固相反应柱中，直至反应完全；
iii)重复i)和ii)直至形成完整的多肽树脂。
7.根据权利要求1-2任一项所述的合成方法，其中，步骤1)中所述树脂为氨基树脂。
8.根据权利要求1-2任一项所述的合成方法，其中步骤1)中所述树脂为Rink Amide树脂、Rink Amide-AM树脂、MBHA树脂、PAL树脂。
9.根据权利要求8所述的合成方法，其中步骤1)中树脂替代度为0.1-2.0mmol/g。
10.根据权利要求8所述的合成方法，其中步骤1)中树脂替代度为0.5-1.5mmol/g。
11.根据权利要求8所述的合成方法，其中步骤1)中树脂替代度为0.5-1.0mmol/g。
12.根据权利要求6所述的合成方法，其中，步骤1)中所述的氨基保护的氨基酸中氨基保护基为Fmoc或tBu，偶联氨基酸依次为Gly、Org(i-Pr)、Pro、Cys(Allocam)、Asn(Trt)、Hgn(Trt)、Ile、Phe、Cys(Allocam)。
13.根据权利要求12所述的合成方法，其中，脱除Fmoc的试剂为20％的哌啶/DMF溶液，即哌啶：DMF的体积比为1:4的混合溶液。
14.根据权利要求6所述的合成方法，步骤ii)中的偶联剂为DIC和化合物A的组合物、DIC和化合物A和化合物B的组合物、DIPCDI和化合物A的组合物或DIPEA和化合物A和化合物B的组合物，其中化合物A为HOBt或HOAt，化合物B为PyBOP、PyAOP、HATU、HBTU或TBTU。
15.根据权利要求14所述的合成方法，步骤ii)中的偶联剂为DIC和化合物A的组合物。
16.根据权利要求14所述的合成方法，步骤ii)的偶联剂中各成分的比例以摩尔比计为DIC:A＝1.2:1.1、DIC:A:B＝2.0:1.1:1.0、DIPEA:A＝1.2:1.1、DIPEA:A:B＝2.0:1.1:1.0。
17.根据权利要求1-2任一项所述的合成方法，步骤3)所述的裂解液为TFA、H2O、PhOMe、苯甲硫醚的混合物；比例为TFA:H2O:PhOMe:苯甲硫醚90:5:4:1。
18.根据权利要求1-2任一项所述的合成方法，所述合成方法还包括步骤4)，步骤4)纯化步骤采用反相高压液相色谱法。
19.根据权利要求18所述的合成方法，所述反相高压液相色谱法包括：以反相十八烷基硅烷为固定相，以0.1％醋酸水溶液/乙腈为流动相，0.1％醋酸水溶液:乙腈的体积比为98:2至50:50，收集目的峰馏分，浓缩冻干。
20.根据权利要求19所述的合成方法，0.1％醋酸水溶液:乙腈的体积比为80:20至60:40。
21.根据权利要求19所述的合成方法，0.1％醋酸水溶液:乙腈的体积比70:30。
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