CN109700841A

CN109700841A - 一种高纯度三七总皂苷生产制备方法

Info

Publication number: CN109700841A
Application number: CN201910195030.5A
Authority: CN
Inventors: 赵锋宁; 郭文; 毕荣璐; 王红军
Original assignee: Chuxiong Cloud Planting Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Chuxiong Cloud Planting Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2019-03-14
Filing date: 2019-03-14
Publication date: 2019-05-03

Abstract

本发明提供了一种高纯度三七总皂苷生产制备方法，该方法包括以下步骤：(1)三七粉碎过筛，醇提，浓缩；(2)加入丙酮萃取，去丙酮，加水溶解沉淀物；或加入正丁醇萃取，保留正丁醇，浓缩，加水溶解；(3)上大孔吸附树脂，经碱水洗、纯化水洗、乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩；(4)上精制树脂纯化，水洗；(5)水洗液加乙醇后过脱色树脂；(6)活性炭脱色，过滤，浓缩，干燥。本发明在生产制备三七总皂苷过程中，上大孔吸附树脂后先用碱水洗，可有效去除阴离子杂质，之后再通过精制树脂纯化，可将三七提取中富含的黄酮类伴生物质及其脂质进行有效去除，再通过与其它步骤结合，可使最终七总皂苷中三七总皂苷总含量达90％以上。

Description

一种高纯度三七总皂苷生产制备方法

技术领域

本发明涉及中药提取物技术领域，具体涉及一种高纯度三七总皂苷生产制备方法。

背景技术

中药三七为五加科植物三七(Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen)的干燥根，是云南省特有的传统名贵药材，主产于云南省文山州，其味甘、微苦、性温，主入肝、胃、大肠，具滋补、补血、消肿、镇痛、止血、增强免疫力等功效。三七主要成分为三七总皂苷、三七多糖、三七素、黄酮、挥发油及各种氨基酸微量元素等。三七总皂苷是从三七根提取的主要药用有效成分，其中人参皂苷Rg1、Rb1是三七总皂苷中含量最高的两个成分，而三七皂苷R1是三七总皂苷的特征化合物。2015年版《中国药典》规定：三七总皂苷按干燥品计算，含三七皂苷R1不得少于5.0％、人参皂苷Rg1不得少于25.0％、人参皂苷Re不得少于2.5％、人参皂苷Rb1不得少于30.0％、人参皂苷Rd不得少于5.0％，且三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd总量不得低于75％(供口服用)或85％(供注射用)。

三七提取液中三七总皂苷的提纯方法有醇沉去杂法、有机溶剂萃取法、大孔吸附树脂法、聚酰胺柱法等。其中大孔吸附树脂法操作简便、无污染、成本较低，较其它方法所得提取物体积小、不吸潮、易制成各种剂型，中性氧化铝能去除部分三七总皂苷中的伴生物质，有利于澄明度符合要求。2017年9月国家药监局正式发布停用三七总皂苷老对照品检测，启用新对照品，新对照品启用后，注射用三七总皂苷含量很难达到标准，远远不能满足市场供货需求，所以必须进行工艺改进来提高三七总皂苷的纯度。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高纯度三七总皂苷生产制备方法，

在生产制备过程中，上大孔吸附树脂后先用碱水洗，可有效去除阴离子杂质，在之后再通过精制树脂进一步纯化，可将三七提取中富含的黄酮类伴生物质及其脂质进行有效去除，再通过与其它步骤结合，可使最终生产制备得到的七总皂苷中三七总皂苷总含量达90％以上。

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：

一种高纯度三七总皂苷生产制备方法，包括以下步骤：

(1)三七药材经粉碎过筛后，加入质量分数为50～95％的乙醇提取，浓缩提取液，得浓缩液Ⅰ；

(2)向浓缩液Ⅰ中加入2～5倍量体积丙酮搅拌萃取，放置4～12小时，滤去丙酮，加药材投料量3～6倍量体积水溶解沉淀物，得溶解液；或浓缩液Ⅰ中加入2～5倍量体积正丁醇搅拌萃取，放置4～12小时，弃水液，保留正丁醇液，浓缩至无正丁醇，再加药材投料量3～6倍量体积水溶解，得溶解液；

(3)溶解液上大孔吸附树脂，经碱水洗、纯化水洗除杂，使用质量分数为50～80％的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇味，得浓缩液Ⅱ；

(4)将浓缩液Ⅱ上精制树脂进一步纯化，水洗，收集水洗液；所述精制树脂为聚酰胺树脂、中性氧化铝、碱性氧化铝中的一种；

(5)步骤(4)所得水洗液加乙醇至醇质量浓度为30～70％后过脱色树脂，收集过柱液；

(6)步骤(5)所得过柱液中加入活性炭脱色，过滤，浓缩，干燥得三七总皂苷。

优选地，步骤(1)中所述的乙醇提取为回流提取。

优选地，步骤(1)中所述浓缩液Ⅰ的比重为1.10±0.05。

优选地，步骤(3)中所述大孔吸附树脂为D101、AB-8、HPD-100、LX-100B中的一种。

优选地，步骤(5)中所述脱色树脂为D941、D941H、D900、LSI-52、LK30中的一种。

优选地，步骤(1)、步骤(3)、步骤(6)中，浓缩为≤80℃减压浓缩。

优选地，步骤(3)碱水浓度为0.05～2.0％，配置碱水的碱试剂为Ca(OH)₂、NaOH、KOH的一种。

优选地，步骤(3)碱水洗倍量为三七药材投料量4～8倍，水洗倍量为三七药材投料量10～15倍；步骤(4)水洗量为三七药材投料量10～20倍；步骤(6)中活性炭用量为三七药材投料量0.01～0.05倍。

本发明的有益效果：

本发明在生产三七总皂苷时，在经过醇提、浓缩、有机溶剂萃取等步骤后，沉淀物溶解液中的三七总皂苷呈弱酸性，上大孔吸附树脂后先用碱水洗，其氢氧根离子可交换吸附溶液中的阴离子杂质，之后再结合水洗，可有效去除阴离子杂质，以达到纯化三七总皂苷的目的。

大孔吸附树脂仅能除去三七提取液中大部分糖类物质，对于三七提取中富含的黄酮类伴生物质及其脂质无法除尽。本发明采用精制树脂进行精制树脂进一步纯化，当精制树脂为聚酰胺树脂、中性氧化铝、碱性氧化铝的一种时，纯化效果好，可将三七提取中富含的黄酮类伴生物质及其脂质进行有效去除。例如当精制树脂为聚酰胺树脂时，聚酰胺是一类结构中含有重复单位酰胺键(-CO-NH-)的高分子聚合物，聚酰胺基团上的O、N原子在酸性介质中结合质子而带正电荷，以静电引力形成吸附溶液中的阴离子，故可与酚类、酸类、醌类、黄酮类等富含酚羟基的化合物形成氢键而被吸附，而与不能形成氢键的化合物分离。聚酰胺树脂对三七总皂苷没有吸附作用，但是能去除三七总皂苷中的伴生性杂质，因此可有效纯化三七总皂苷。

通过本发明中的生产制备方法制备得到的七总皂苷按干燥品计算，含三七皂苷R1≥7.0％、人参皂苷Rg1≥35.0％、人参皂苷Re≥4.0％、人参皂苷Rb1≥32.0％、人参皂苷Rd≥10.0％，三七总皂苷总含量可达90％以上，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量分别提高至少2.0％。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1：

三七药材50kg粉碎成粗粉，过筛，加6倍量质量分数为70％的乙醇回流提取3次，每次2h，过滤，合并提取液，≤80℃减压浓缩至比重为1.10±0.05，得浓缩液Ⅰ。

浓缩液Ⅰ中加入其3倍体积量丙酮搅拌均匀，静置12h。滤去丙酮液后，下层沉淀物加三七药材投料量4倍体积水溶解，上AB-8大孔吸附树脂，加三七药材投料量6倍量的质量分数为1.5％的Ca(OH)₂溶液洗柱后，再加三七药材投料量12倍量纯化水洗柱，加质量分数为60％的乙醇洗脱三七总皂苷，收集洗脱液，≤80℃减压浓缩至无醇味，得浓缩液Ⅱ。

浓缩液Ⅱ上聚酰胺树脂，加入七药材投料量10倍量纯化水进行水洗，收集水洗液，加乙醇至醇质量浓度为50％(即水洗液与乙醇的混合溶液中乙醇的质量浓度为50％)，过D941脱色树脂，收集过柱液，加1.5kg活性炭，回流30min，抽滤，≤80℃减压浓缩并干燥至干，即得三七总皂苷产品。

用液相法按2015版《中国药典》规定方法检测，产品含三七皂苷R1：8.2％、人参皂苷Rg1：35.3％、人参皂苷Re：4.5％、人参皂苷Rb1：33.2％、人参皂苷Rd：10.9％，三七总皂苷总含量为92.1％。

实施例2：

三七药材50kg粉碎成粗粉，过筛，加7倍量质量分数为60％的乙醇回流提取3次，每次2h，过滤，合并提取液，≤80℃减压浓缩至比重为1.10±0.05，得浓缩液Ⅰ。

浓缩液Ⅰ中加入其3倍体积量正丁醇搅拌均匀，静置12h。滤弃水液，保留正丁醇液，浓缩至无正丁醇，浓缩所得物加三七药材投料量5倍体积水溶解，上LX-100B大孔吸附树脂，加三七药材投料量7倍量质量分数为1.0％的KOH溶液洗柱后，再加三七药材投料量15倍量纯化水洗柱，加质量分数为70％的乙醇洗脱三七总皂苷，收集洗脱液，≤80℃减压浓缩至无醇味，得浓缩液Ⅱ。

浓缩液Ⅱ上中性氧化铝树脂柱，加入投料量15倍量纯化水水洗，收集水洗液，加乙醇至醇质量浓度为50％，过LSI-52脱色树脂，收集过柱液，加1.0kg活性炭，回流30min，抽滤，≤80℃减压浓缩并干燥至干，即得三七总皂苷产品。

用液相法按2015版《中国药典》规定方法检测，产品含三七皂苷R1：8.7％、人参皂苷Rg1：35.8％、人参皂苷Re：4.3％、人参皂苷Rb1：32.5％、人参皂苷Rd：10.4％，三七总皂苷总含量为91.7％。

实施例3：

三七药材50kg粉碎成粗粉，过筛，加8倍量质量分数为50％的乙醇回流提取3次，每次2h，过滤，合并提取液，≤80℃减压浓缩至比重为1.10±0.05，得浓缩液Ⅰ。

浓缩液Ⅰ中加入其3倍体积量丙酮搅拌均匀，静置8h。滤去丙酮液后，下层沉淀物加三七药材投料量3倍体积水溶解，上D101大孔吸附树脂，加三七药材投料量4倍量的质量分数为2％的NaOH溶液洗柱后，再加三七药材投料量12倍量纯化水洗柱，加质量分数为50％的乙醇洗脱三七总皂苷，收集洗脱液，≤80℃减压浓缩至无醇味，得浓缩液Ⅱ。

浓缩液Ⅱ上聚酰胺树脂，加入七药材投料量10倍量纯化水进行水洗，收集水洗液，加乙醇至醇质量浓度为30％，过LK30脱色树脂，收集过柱液，加2.5kg活性炭，回流30min，抽滤，≤80℃减压浓缩并干燥至干，即得三七总皂苷产品。

用液相法按2015版《中国药典》规定方法检测，产品含三七皂苷R1：8.1％、人参皂苷Rg1：35.4％、人参皂苷Re：4.3％、人参皂苷Rb1：33.3％、人参皂苷Rd：10.7％，三七总皂苷总含量为91.8％。

实施例4：

三七药材50kg粉碎成粗粉，过筛，加5倍量质量分数为95％的乙醇回流提取3次，每次2h，过滤，合并提取液，≤80℃减压浓缩至比重为1.10±0.05，得浓缩液Ⅰ。

浓缩液Ⅰ中加入其5倍体积量丙酮搅拌均匀，静置4h。滤去丙酮液后，下层沉淀物加三七药材投料量6倍体积水溶解，上AB-8大孔吸附树脂，加三七药材投料量8倍量的质量分数为0.05％的Ca(OH)₂溶液洗柱后，再加三七药材投料量10倍量纯化水洗柱，加质量分数为80％的乙醇洗脱三七总皂苷，收集洗脱液，≤80℃减压浓缩至无醇味，得浓缩液Ⅱ。

浓缩液Ⅱ上聚酰胺树脂，加入七药材投料量20倍量纯化水进行水洗，收集水洗液，加乙醇至醇质量浓度为70％，过D900脱色树脂，收集过柱液，加1.2kg活性炭，回流30min，抽滤，≤80℃减压浓缩并干燥至干，即得三七总皂苷产品。

用液相法按2015版《中国药典》规定方法检测，产品含三七皂苷R1：8.2％、人参皂苷Rg1：35.5％、人参皂苷Re：4.5％、人参皂苷Rb1：33.2％、人参皂苷Rd：10.6％，三七总皂苷总含量为92.0％。

实施例5：

浓缩液Ⅰ中加入其3倍体积量正丁醇搅拌均匀，静置12h。弃水液，保留正丁醇液，浓缩至无正丁醇，浓缩所得物加三七药材投料量4倍体积水溶解，上HPD-100大孔吸附树脂，加三七药材投料量6倍量的质量分数为1.5％的KOH溶液洗柱后，再加三七药材投料量15倍量纯化水洗柱，加质量分数为60％的乙醇洗脱三七总皂苷，收集洗脱液，≤80℃减压浓缩至无醇味，得浓缩液Ⅱ。

浓缩液Ⅱ上碱性氧化铝树脂，加入七药材投料量15倍量纯化水进行水洗，收集水洗液，加乙醇至醇质量浓度为50％，过D941脱色树脂，收集过柱液，加1.5kg活性炭，回流30min，抽滤，≤80℃减压浓缩并干燥至干，即得三七总皂苷产品。

用液相法按2015版《中国药典》规定方法检测，产品含三七皂苷R1：7.9％、人参皂苷Rg1：35.2％、人参皂苷Re：4.2％、人参皂苷Rb1：33.1％、人参皂苷Rd：10.4％，三七总皂苷总含量为90.8％。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims

1.一种高纯度三七总皂苷生产制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的高纯度三七总皂苷生产制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的乙醇提取为回流提取。

3.根据权利要求1所述的高纯度三七总皂苷生产制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述浓缩液Ⅰ的比重为1.10±0.05。

4.根据权利要求1所述的高纯度三七总皂苷生产制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述大孔吸附树脂为D101、AB-8、HPD-100、LX-100B中的一种。

5.根据权利要求1所述的高纯度三七总皂苷生产制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述脱色树脂为D941、D941H、D900、LSI-52、LK30中的一种。

6.根据权利要求1所述的高纯度三七总皂苷生产制备方法，其特征在于，步骤(1)、步骤(3)、步骤(6)中，浓缩为≤80℃减压浓缩。

7.根据权利要求1所述的高纯度三七总皂苷生产制备方法，其特征在于，步骤(3)碱水浓度为0.05～2.0％，配置碱水的碱试剂为Ca(OH)₂、NaOH、KOH的一种。

8.根据权利要求1所述的高纯度三七总皂苷生产制备方法，其特征在于，步骤(3)碱水洗倍量为三七药材投料量4～8倍，水洗倍量为三七药材投料量10～15倍；步骤(4)水洗量为三七药材投料量10～20倍；步骤(6)中活性炭用量为三七药材投料量0.01～0.05倍。