CN102648926A

CN102648926A - 一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法

Info

Publication number: CN102648926A
Application number: CN201110045307XA
Authority: CN
Inventors: 李法庆; 刘东锋
Original assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2011-02-25
Filing date: 2011-02-25
Publication date: 2012-08-29

Abstract

本发明提供一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法。方法步骤包括：将三七粉碎，加水提取2～4次，过滤，合并提取液，过阳离子树脂柱层析，收集下柱液、水洗液(I)和碱洗液(II)，合并下柱液和水洗液(I)，上大孔树脂柱层析，收集水洗液(III)，醇洗液(IV)，合并洗脱液(II)和(III)，上阴离子树脂柱脱色，脱色液浓缩至小体积，加有机溶剂沉淀1～3次得到三七总氨酸；醇洗液(IV)中加入氧化镁回流脱色，滤除氧化镁，浓缩干燥得三七皂苷。本发明同时制得三七皂苷和三七总氨酸，原料利用率高，且操作简单，易于工业化放大生产。

Description

一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法

技术领域：

本发明属于天然产物提取分离领域，特别是涉及一种以三七为原料制备三七皂苷及三七总氨酸的方法。

背景技术：

三七：Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen，又名参三七、田七、山漆、金不换，五加科人参属植物，性温，味甘、微苦。功能主治：散瘀止血，消肿定痛。用于各种内、外出血，胸腹刺痛，跌扑肿痛。《本草纲目》记载三七“颇似人参之味”，“止血散血定痛”能治一切血症。三七的有效成分包括三七皂苷、三七素、黄酮、挥发油等，其中三七不同生长部位含有的二十多种皂苷成分(三七皂苷)，现代药理研究表明，具有增加冠脉血流量，保护脑组织、扩血管和降压等作用；三七水溶性部位(主要成分为三七素)，现代药理研究表明，具有非常好的止血效果，是三七的主要止血成分。

三七皂苷：淡黄色无定形粉末，味苦，微甘。易溶于甲醇，乙醇和水，难溶于丙酮、乙醚和苯，易吸潮。

三七总氨酸，主要成分为三七素(田七氨酸)，易溶于水，不溶于甲醇、乙醇、丙醇、丙酮等有机溶剂。

三七皂苷是三七的主要有效成分，具有扩张血管，降低心肌耗氧量，抑制血小板凝集，降血脂，清除自由基，抗炎，抗氧化等作用。近年来，随着人们的生活水平不断提高，饮食结构及生活方式的变化，罹患心脑血管疾病的患者逐年增加。而三七皂苷对心脑血管方面疾病具有良好的药理作用，因此它的应用前景极为广阔。

目前同时提取这两种物质的方法较少，大多是对某种物质的单一提取，造成三七药材的浪费。三七皂苷常用的提取方法有水煎醇沉法、乙醇回流法和渗漉法。水煎醇沉法醇沉后由于沉淀的吸附作用皂苷损失较大，因而提取率很低；乙醇回流法方法简便，工艺条件易于控制，但提取率较低；渗漉法提取率较高，操作简单，提取液杂质少，但是溶剂消耗过大，提取周期较长。对三七总氨酸的提取分离方法多是采用水或醇提取，Sephadex LH-20和CMSephadex C-25树脂柱分离，成本高，且分离量少。谭朝阳等发表的文献“三七有效成分的分离纯化研究”，该文献采用D101大孔树脂分离纯化三七总皂苷，采用732强酸型阳离子交换树脂和CM Sephadex C-25分离三七素。但该方法制备的三七皂苷与三七素含量均较低。

发明内容：

本发明的目的是提供一种同时制备三七皂苷和三七总氨酸的方法。采用该方法能提高原料利用率，产品纯度较高。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于包含以下步骤：

1)提取：将三七粉碎，加水提取2～4次，过滤，合并提取液；

2)阳离子树脂柱分离：将上述提取液调酸后上阳离子树脂柱吸附，先用少量去离子水洗，再用碱性溶液洗脱，分别收集下柱液、水洗液(I)和茚三酮反应阳性部分碱洗液(II)；

3)大孔树脂柱分离：将上述下柱液和水洗液(I)合并，上大孔树脂柱吸附，先用3～7BV去离子水洗，再用5～8BV40～70％乙醇溶液洗脱，分别收集茚三酮反应阳性部分水洗液(III)和醇洗液(IV)；

4)三七总氨酸的纯化：合并上述碱洗液(II)和水洗液(III)，加酸调节至中性，上阴离子树脂柱脱色，先用中性去离子水或醇溶液洗脱，再用pH1～3的酸性溶液洗脱，收集洗脱液加有机溶剂沉淀1～3次得到三七总氨酸。

5)三七皂苷的纯化：向上述醇洗液(IV)中加入氧化镁，加热回流脱色，过滤，滤液浓缩干燥得到三七皂苷。

所述步骤2)中阳离子树脂可选用强酸性阳离子树脂或弱酸性阳离子树脂。

所述步骤2)中的碱性洗脱液可选用pH8～11的氢氧化钠、氢氧化钾、氨水溶液。

所述步骤4)中的酸可选用盐酸、硫酸或磷酸。

所述步骤4)中的有机溶剂可以选用甲醇、乙醇或丙酮，用量是洗脱液的1～3倍量。

所述步骤5)中的氧化镁的用量是2～6∶100(w/v)。

综上所述，本发明具有以下优点：

1.本发明采用阴离子树脂脱色技术对三七总氨酸进一步纯化，使三七总氨酸吸附于阴离子树脂，用水和醇液分别清洗后，再用酸液洗脱，相当于一次浓缩的过程，此法具有路线短，操作简单，低能耗的优点；

2.本发明采用氧化镁对三七皂苷进行脱色处理，脱色过程成本低，对环境无污染，设备要求低。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

将三七粉碎取1Kg，加10L水回流提取2次，过滤，合并提取液，加盐酸调节至酸性，取600g001×7型强酸性阳离子树脂装柱，将酸性提取液注入吸附，先用500ml去离子水洗，再用2LpH8的氢氧化钠溶液洗脱，分别收集下柱液、水洗液(I)和茚三酮反应阳性部分碱洗液(II)；将上述下柱液和水洗液(I)合并，上HPD450大孔树脂柱吸附，先用3BV去离子水洗，再用5BV40％乙醇溶液洗脱，分别收集茚三酮反应阳性部分水洗液(III)和醇洗液(IV)；

三七总氨酸的纯化：合并碱洗液(II)和水洗液(III)，加盐酸调节至中性，上D301大孔弱碱性阴离子树脂柱脱色，吸附流速为2.5ml/min，吸附结束后，先用中性去离子水洗去杂质，再用pH1的盐酸洗脱，收集洗脱液加等量乙醇沉淀得到三七总氨酸7.9g，三七素含量92％。

三七皂苷的纯化：向上述醇洗液(IV)中加入50g氧化镁，加热回流脱色1h，过滤，滤液浓缩干燥得到三七皂苷93.8g，含量94％。

实施例2：

将三七粉碎取1Kg，加8L水回流提取4次，过滤，合并提取液，加硫酸调节至酸性，取800gD151型弱酸性阳离子树脂装柱，将酸性提取液注入吸附，先用600ml去离子水洗，再用2.5LpH11的氢氧化钾溶液洗脱，分别收集下柱液、水洗液(I)和茚三酮反应阳性部分碱洗液(II)；将上述下柱液和水洗液(I)合并，上HPD600大孔树脂柱吸附，先用7BV去离子水洗，再用8BV70％乙醇溶液洗脱，分别收集茚三酮反应阳性部分水洗液(III)和醇洗液(IV)；

三七总氨酸的纯化：合并碱洗液(II)和水洗液(III)，加硫酸调节至中性，上D293大孔强碱性阴离子树脂柱脱色，吸附流速为2.5ml/min，吸附结束后，先用30％乙醇洗去杂质，再用pH3的盐酸洗脱，收集洗脱液加等量甲醇沉淀，滤出沉淀加水溶解，再加入甲醇沉淀2次，得到三七总氨酸8.2g，三七素含量89％。

三七皂苷的纯化：向上述醇洗液(IV)中加入70g氧化镁，加热回流脱色2h，过滤，滤液浓缩干燥得到三七皂苷89.3g，含量96％。

实施例3：

将三七粉碎取2Kg，加15L水回流提取3次，过滤，合并提取液，加盐酸调节至酸性，取1Kg001×7型强酸性阳离子树脂装柱，将酸性提取液注入吸附，先用1.5L去离子水洗，再用5LpH9的氨水溶液洗脱，分别收集下柱液、水洗液(I)和茚三酮反应阳性部分碱洗液(II)；将上述下柱液和水洗液(I)合并，上HPD500大孔树脂柱吸附，先用4BV去离子水洗，再用6BV50％乙醇溶液洗脱，分别收集茚三酮反应阳性部分水洗液(III)和醇洗液(IV)；

三七总氨酸的纯化：合并碱洗液(II)和水洗液(III)，加磷酸调节至中性，上D215大孔强碱性阴离子树脂柱脱色，吸附流速为2.5ml/min，吸附结束后，先用中性去离子水洗去杂质，再用pH2的磷酸洗脱，收集洗脱液加两倍量丙酮沉淀，滤出沉淀加水溶解，再加入丙酮沉淀1次得到三七总氨酸14.1g，三七素含量91％。

三七皂苷的纯化：向上述醇洗液(IV)中加入150g氧化镁，加热回流脱色1.5h，过滤，滤液浓缩干燥得到三七皂苷191.4g，含量93％。

实施例4：

将三七粉碎取10Kg，加90L水回流提取2次，过滤，合并提取液，加硫酸调节至酸性，取5Kg001×7型强酸性阳离子树脂装柱，将酸性提取液注入吸附，先用6L去离子水洗，再用22LpH10的氢氧化钠溶液洗脱，分别收集下柱液、水洗液(I)和茚三酮反应阳性部分碱洗液(II)；将上述下柱液和水洗液(I)合并，上HPD450大孔树脂柱吸附，先用5BV去离子水洗，再用7BV55％乙醇溶液洗脱，分别收集茚三酮反应阳性部分水洗液(III)和醇洗液(IV)；

三七总氨酸的纯化：合并碱洗液(II)和水洗液(III)，加硫酸调节至中性，上D392大孔强碱性阴离子树脂脱色，吸附流速为2.5ml/min，吸附结束后，先用40％乙醇洗去杂质，再用pH2的盐酸洗脱，收集洗脱液加等量乙醇沉淀得到三七总氨酸73.9g，三七素含量90％。

三七皂苷的纯化：向上述醇洗液(IV)中加入50g氧化镁，加热回流脱色1h，过滤，滤液浓缩干燥得到三七皂苷869g，含量91％。

Claims

1.一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于包含以下步骤：

1)提取：将三七粉碎，加水提取2～4次，过滤，合并提取液；

5)三七皂苷的纯化：向上述醇洗液(IV)中加入氧化镁，加热回流脱色1～2h，过滤，滤液浓缩干燥得到三七皂苷。

2.如权利要求1所述的一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于所述步骤2)中阳离子树脂可选用强酸性阳离子树脂或弱酸性阳离子树脂。

3.如权利要求1所述的一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于所述步骤2)中的碱性洗脱液可选用pH8～11的氢氧化钠、氢氧化钾、氨水溶液。

4.如权利要求1所述的一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于所述步骤4)中的酸可选用盐酸、硫酸或磷酸。

5.如权利要求1所述的一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于所述步骤4)中的有机溶剂可以选用甲醇、乙醇或丙酮中的一种，用量是洗脱液的1～3倍量。

6.如权利要求1所述的一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于所述步骤5)中的氧化镁的用量是2～6∶100(w/v)。