CN109520794A - 一种用于出土面食文物的提取与分离方法 - Google Patents

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刘柳
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Abstract

本发明属于文物保护科技领域，具体涉及本发明属于文物保护科技领域，具体涉及一种用于出土面食文物的提取与分离方法。该方法首先将出土面食文物样品在提取液中充分研磨，研磨后进行离心处理，取上层清液；之后将上层清液用超滤管脱盐并浓缩；将脱盐并浓缩后的上层清液与SDS‑PAGE上样缓冲液以体积比4:1的比例直接混合，然后在沸水中加热；加热后的混合液滴加至连续缓冲液系统中的4‑20％预制聚丙烯酰胺凝胶泳道中，进行电泳处理；之后将含有样品的凝胶用考马斯亮蓝染色；最后将染色后的凝胶脱色处理。采用本发明提出的用于出土面食文物的提取与分离方法，在实际应用中可实现降解严重、含量极低的出土面食文物蛋白标志物的提取与分离，为其精确鉴定提供前提条件。

Description

一种用于出土面食文物的提取与分离方法
技术领域
本发明属于文物保护技术领域，具体涉及一种用于出土面食文物的提取与分离方法。
背景技术
面食是以谷物粉为原料，经过发酵等工艺制作而成的食物，它的历史可上溯到新石器时代。出土面食文物多发现于出土陶瓷器、金属器内部。经过了长期保存，其外观及内部含有的物质都会发生明显变化，变化的程度与埋藏环境及年代有关。如果要确定某一出土容器中的文物究竟是否为古代面食，需要采用科学的手段进行鉴定，为研究我国古代饮食文化、植物驯化、古代食谱、社会结构等提供基础信息。
从出土面食文物样品中提取并分离古蛋白残留物作为标志物，采用适当的方法对其进行精确鉴定发现其制作原料及发酵微生物是一种可行的思路。然而，出土面食文物分子标志物含量极低、降解严重，导致其提取与分离难度极大。
由于此项技术具有相当的难度，目前还没有这方面尝试的报道。
发明内容
发明目的：提出一种用于出土面食文物的提取与分离方法解决面食文物中蛋白标志物降解严重、含量极低、难以获取的问题。
技术方案：一种用于出土面食文物的提取与分离方法，具体步骤如下：
步骤一：将出土面食文物样品在提取液中充分研磨，研磨后进行离心处理，取上层清液；步骤二：将上层清液用超滤管脱盐并浓缩；
步骤三：将步骤二中脱盐并浓缩后的上层清液与SDS-PAGE上样缓冲液以4:1[v/v]的比例直接混合，然后在沸水中加热；
步骤四：将步骤三中加热后的混合液滴加至连续缓冲液系统中的4-20％预制聚丙烯酰胺凝胶泳道中，进行电泳处理；
步骤五：完成电泳后，将含有样品的凝胶用考马斯亮蓝染色；
步骤六：将染色后的凝胶用含有30％甲醇和10％乙酸的水溶液脱色。
优选的，所述提取液为1％的三氟乙酸去离子水溶液。
优选的，步骤三中加热时间为5min。
优选的，考马斯亮蓝浓度为0.25％。
优选的，所述染色时间为4h。
优选的，所述脱色时间为24h。
有益技术效果：采用本发明提出的出土面食文物的提取与分离方法，在实际应用中可实现降解严重、含量极低的出土面食文物蛋白标志物的提取与分离，为其精确鉴定提供前提条件。
附图说明
图1为出土面食文物样品电泳图。
具体实施方式
具体案例一：一种用于出土面食文物的提取与分离方法：1将约100μg出土疑似面食文物样品在100μL，1％的三氟乙酸去离子水溶液中充分研磨；在14000g下离心5min后，取上清液；然后用超滤管脱盐并浓缩至20μL。
2将上述提取液与SDS-PAGE上样缓冲液以4:1[v/v]的比例直接混合，然后在沸水中解热5min。将20μL混合液滴加至连续缓冲液系统中的4-20％预制聚丙烯酰胺凝胶泳道中。在150V电压下45min完成电泳后，将含有样品的凝胶用0.25％考马斯亮蓝(R-250)染色4h，然后用含有30％甲醇和10％乙酸的水溶液脱色24h。
从附图1可见，右半区域疑似面食文物样品泳道有明显的着色现象，这表明采用上述方法提取并分离得到了构成出土面食文物的蛋白类物质，为后期出土面食文物种类的精确鉴定提供了前提条件。

Claims (7)

1.一种用于出土面食文物的提取与分离方法，其特征在于：步骤如下：
步骤一：将出土面食文物样品在提取液中充分研磨，研磨后进行离心处理，取上层清液；
步骤二：将上层清液用超滤管脱盐并浓缩；
步骤三：将步骤二中脱盐并浓缩后的上层清液与SDS-PAGE上样缓冲液以体积比为4:1直接混合，然后在沸水中加热；
步骤四：将步骤三中加热后的混合液滴加至连续缓冲液系统中的4-20％预制聚丙烯酰胺凝胶泳道中，进行电泳处理；
步骤五：完成电泳后，将含有样品的凝胶用考马斯亮蓝染色；
步骤六：将染色后的凝胶用含有30％甲醇和10％乙酸的水溶液脱色。
2.根据权利要求1所述的用于出土面食文物的提取与分离方法，其特征在于：所述提取液为1％的三氟乙酸去离子水溶液。
3.根据权利要求1所述的用于出土面食文物的提取与分离方法，其特征在于：步骤六中，脱色处理采用30％甲醇和10％乙酸的水溶液。
4.根据权利要求1所述的用于出土面食文物的提取与分离方法，其特征在于：考马斯亮蓝浓度为0.25％。
5.根据权利要求1所述的用于出土面食文物的提取与分离方法，其特征在于：步骤三中加热时间为5min。
6.根据权利要求1所述的用于出土面食文物的提取与分离方法，其特征在于：所述染色时间为4h。
7.根据权利要求1所述的用于出土面食文物的提取与分离方法，其特征在于：所述脱色时间为24h。
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