CN105218654A - 一种鉴别枣花蜜花源的特征蛋白 - Google Patents

一种鉴别枣花蜜花源的特征蛋白 Download PDF

Info

Publication number
CN105218654A
CN105218654A CN201510231749.1A CN201510231749A CN105218654A CN 105218654 A CN105218654 A CN 105218654A CN 201510231749 A CN201510231749 A CN 201510231749A CN 105218654 A CN105218654 A CN 105218654A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mel jujubae
protein
honey
sample
mel
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201510231749.1A
Other languages
English (en)
Inventor
曹炜
陈妮
周厚报
高慧
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Northwest University
Original Assignee
Northwest University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Northwest University filed Critical Northwest University
Priority to CN201510231749.1A priority Critical patent/CN105218654A/zh
Publication of CN105218654A publication Critical patent/CN105218654A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/43504—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
    • C07K14/43563—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from insects
    • C07K14/43572—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from insects from bees
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/43504—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from invertebrates
    • G01N2333/43552—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from invertebrates from insects
    • G01N2333/43565—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from invertebrates from insects from bees

Abstract

本发明涉及枣花蜜特征蛋白质及其分离纯化，首先将8种单花蜜进行SDS-PAGE，结果发现枣花蜜在～17ku处存在一条蛋白质谱带，而其他蜂蜜的蛋白质电泳谱图则不含；此外，该蛋白质的分子量与其他蛋白质谱带的分子量之间相差非常大，利于分离。因此该种蛋白质可作为枣花蜜区别于其他蜂蜜的特征蛋白质。为了弄清该种蛋白质的分子量和结构信息，本发明人通过LC-Chip/ESI-QTOF-MS方法进行鉴定。本发明操作简单、分离效果好、可行性强，为枣花蜜的真伪鉴别提供了一种新的方法。

Description

一种鉴别枣花蜜花源的特征蛋白
技术领域
本发明涉及一种鉴别枣花蜜特征蛋白质及其分离纯化，属于食品科学领域。
背景技术
蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物混合后，经充分酿造而成的天然甜物质。蜂蜜营养丰富且成分复杂，含有多种必需氨基酸、维生素、酚类化合物、黄酮类物质等，因而具有多种生物活性，如抗氧化、抗菌、加速创伤修复和提高免疫力，对肝炎、胃病、贫血和高血压等具有一定的辅助疗效作用。由于蜂蜜的感官特征易受加工、贮存和结晶等因素影响，不同种类蜂蜜的主要成分间含量不显著，传统的方法难以辨别蜂蜜品种。此外，采自不同花源的蜂蜜之间的价格差异较大，一些不法生产商以次充好、以假乱真为其谋取暴利，严重影响到了中国蜂蜜产业的健康发展和消费者的权益保护。因此亟需开发一种快速、简单和准确的方法来鉴别蜂蜜真伪。
枣花蜜（ZiziphusjujubaMill．）是我国比较大宗的蜂蜜产品，也是消费群体比较推崇的蜂蜜类型之一。枣花蜜的颜色从浅琥珀色到深琥珀色不等，略带微红；质地粘稠，不易结晶；气味浊香，有特殊的浓郁气味（枣花香味）。枣花蜜主要产于我国华北和西北地区，其中陕西、山西和河南三省产量较大。枣花蜜内含丰富的葡萄糖、果糖和多种维生素及矿物质，具有抗菌消炎，促进组织再生，解毒保肝，强心造血，调节神经、改善睡眠，抗衰强身等特殊功效。然而蜂蜜的生产易受到植物地理位置、植物花期、气候、蜂群强弱以及取蜜时间等的影响，使得枣花蜜的产量不稳定，以致枣花蜜的市场供不应求。因枣花蜜与其他蜂蜜（如荆条蜜）在色泽、气味和成分上较为相似；另外，蜂蜜造假不断地向规模化和专业化发展，假蜂蜜产品的感官指标和部分理化指标与天然蜂蜜产品极为相似，已经很难通过这些指标对蜂蜜的真伪进行鉴别。
为了完善蜂蜜真伪的鉴别技术，需要对蜂蜜中微量且特异性强的组分进行分析。蜂蜜中蛋白质的含量约为蜂蜜总质量的0.2-1.0%，主要来自蜜蜂以及蜜源植物的花粉或花蜜，是蜂蜜中重要的成分。蜂蜜蛋白质作为蜂蜜特有的内标物，根据其之间的差异可以确定蜂蜜的来源。
发明内容
本发明的目的是提供一种分离纯化的枣花蜜特征蛋白。
本发明的另一个目的是提供一种分离纯化和鉴定枣花蜜特征蛋白质的方法。
本发明的实现过程如下：
一种枣花蜜蛋白，其氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。
上述枣花蜜特征蛋白质通过SDS-PAGE电泳获得，其分子量在17ku左右。分离权利要求1所述枣花蜜蛋白的方法，其特征在于，包括步骤：
（1）枣花蜜粗蛋白的制备
称取枣花蜜样品，按照质量体积比1:1溶于蒸馏水中，5000g离心10分钟，收集上清液并定容得枣花蜜粗蛋白溶液，于4℃保存；
（2）SDS-PAGE
将枣花蜜粗蛋白溶液与样品溶解液按体积比1:1混合均匀，沸水煮沸3-5分钟；使用12%的分离胶和5%的浓缩胶恒压电泳，样品在浓缩胶中用低压70-80V，当样品进入分离胶界面时调节电压至120V，直至样品达到分离胶底部上方约1cm处，关闭电源，结束电泳；然后将胶片取下，用蒸馏水清洗，加入染色液染色，染色后，加入脱色液进行脱色，直到胶中的蛋白质条带清晰可见。
上述枣花蜜蛋白的方法中，步骤（2）样品溶解液、电极缓冲液、染色液和脱色液的具体配制方案如下，
（1）样品溶解液：在50mmol/LTris-HCl缓冲液（pH6.8）中含有1%SDS、1%巯基乙醇、10%甘油和0.02%溴酚蓝，配制50ml样品缓冲液；
（2）电极缓冲液：分别称取3.02gTris、14.42gGly、1gSDS，溶于蒸馏水中并定容至1000ml；
（3）染色液:称取0.25g考马斯亮蓝R-25，溶于100ml固定液，固定液为含50%乙醇和10%冰乙酸的水溶液；
（4）脱色液：含20%乙醇和7%冰乙酸的水溶液。
发明人研究发现，枣花蜜的蛋白质电泳图谱与其他7种蜂蜜（即油菜蜜、洋槐蜜、荆条蜜、椴树蜜、龙眼蜜、枸杞蜜和葵花蜜）的蛋白质图谱存在显著差异（如图1）。其中～17ku蛋白质谱带是其他7种蜂蜜所不含有的且该蛋白质的分子量与其他蛋白质条带的分子量之间相差非常大，因此该蛋白质有可能作为枣花蜜区别于其他蜂蜜的特征蛋白质。
为了得到～17ku蛋白质的分子信息，通过LC-Chip/ESI-QTOF-MS方法进行鉴定。具体的实现步骤如下：
（1）使用胰蛋白酶将得到的蛋白质胶条进行酶解，然后将酶解后的样品溶于20ml0.1%甲酸水溶液中，10000r/min离心5分钟，取15ml上清液用于LC-Chip/ESI-QTOF-MS分析；
（2）将酶解得到的全部肽段信息在蛋白质数据库中进行检索。结果表明：只有得分在57分以上时，检索结果才有显著性（p＜0.05），而且得分越高，相似度就越高，同种的可信度就越高。
本发明获得了一种鉴别枣花蜜花源的特征蛋白，通过LC-Chip/ESI-QTOF-MS方法进行了鉴定，该枣花蜜的蛋白质电泳图谱与油菜蜜、洋槐蜜、荆条蜜、椴树蜜、龙眼蜜、枸杞蜜和葵花蜜7种蜂蜜的蛋白质图谱存在显著差异，可以用来作为鉴别枣花蜜花源的依据。
附图说明
图1为不同单花种蜂蜜的电泳图谱；
图2为不同地区枣花蜜的电泳图谱；
图3为A.不同地区洋槐蜜的电泳图谱；B.不同地区龙眼蜜的电泳图谱；C.不同地区油菜蜜的电泳图谱；D.不同地区荆条蜜的电泳图谱；E.不同地区葵花蜜的电泳图谱；F.不同地区枸杞蜜的电泳图谱；G.不同地区椴树蜜的电泳图谱；
图4为枣花蜜特征蛋白质的肽段得分分布图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例作进一步的说明。
实施例1蜂蜜粗蛋白质的制备
分别称取5g蜂蜜样品，并将其溶于5ml蒸馏水中，混匀，5000g离心10分钟，收集上清液，定容至10ml，置于4℃冰箱中保存备用。
实施例2枣花蜜特征蛋白质的分离
（1）装片取合适的2块已清洁干燥的玻璃板，组装成灌浇平板膜，用强有力的夹子夹紧后放在平板膜座上；
（2）装胶使用12%的分离胶和5%的浓缩胶，凝胶缓冲体系的具体配方如表1。根据表1配制分离胶溶液，轻轻混匀后，立即通过恒流泵将凝胶溶液灌入组装好的平板凝胶膜中，至分离胶溶液高度离玻璃板上端3.5厘米为止。再在分离胶表面加入一层水，封住胶面，以促进聚合并使分离胶表面平直。室温下凝胶40分钟到一个小时后，可以看到一层界面，表示已经凝胶完全。吸除水层，然后灌注浓缩胶溶液并插入相应的梳子。静置30分钟左右。待凝胶结束后取出梳子；
（3）加样分别取各种蜂蜜粗蛋白20μl,加入到等体积的样品溶解液中，摇匀，沸水煮沸3-5分钟，使蛋白质变性，只保留分子量的效果因素。用移液枪分别吸取10μl蛋白质Marker和各种蜂蜜粗蛋白质样品加到电泳泳道，具体加样顺序如下，图1：泳道1：枣花蜜；泳道2：油菜蜜；泳道3：洋槐蜜；泳道4：荆条蜜；泳道5：椴树蜜；泳道6：龙眼蜜；泳道7：枸杞蜜；泳道8：葵花蜜。图2：泳道M：Marker泳道1：陕西佳县泳道2：陕西延川泳道3：陕西吴堡；泳道4：陕西大荔泳道5：山西临县泳道6：山西五台山泳道7：河北赵县泳道8：河南灵宝。图3为其他7种单花蜜的电泳图谱，按照不同地区分别加样；
（4）电泳加样后立即进行电泳，样品在浓缩胶中用低压70-80V，当样品进入分离胶界面时调节电压至120V，直至样品达到分离胶底部上方约1cm处，关掉电源，结束电泳；
（5）染色及脱色将胶片轻轻取下，用蒸馏水清洗干净后，加入200ml染色液，染色一个半小时左右；染色后，加入200ml脱色液进行脱色（前三次30分钟换一次脱色液），直到胶中的蛋白质条带清晰可见。
通过SDS-PAGE分析发现，不同地区的同种蜂蜜的蛋白质的电泳图谱差异不显著（如图2、3），但是不同单花蜜的蛋白质电泳图谱之间存在较大差异（如图1）。其中，枣花蜜与其他7种蜂蜜的蛋白质组成差异最大，～17ku蛋白质条带是其他7种蜂蜜不含，该蛋白质为枣花蜜的特征蛋白质。
枣花蜜特征蛋白质鉴定
（1）酶解
使用胰蛋白酶酶解枣花蜜的蛋白质胶条，然后将酶解液溶于20ml0.1%甲酸水溶液中，10000r/min离心5分钟，取15ml上清液用于LC-Chip/ESI-QTOF-MS分析；
（2）LC-Chip/ESI-QTOF-MS分析
色谱条件为：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，流动相为0.1%甲酸水溶液，流速4.0ml/min；使用混合溶剂（溶剂A：0.1%甲酸水溶液；溶剂B：含0.1%甲酸的乙腈溶液）进行梯度洗脱：洗脱液为(a)0→1min,3%B;(b)2→6min,8%B;(c)6→7min,40%B;(d)7→9min,85%B。质谱条件为：正离子模式；升压电容正极：1900V；干燥气体流速：5l/min；干燥气体温度：350℃；分段电压：175v；挡热电压：65v；参考质荷比：149.02332和1221.02332。将酶解得到的全部肽段信息在蛋白质数据库中进行检索，得到枣花蜜特征蛋白质的肽段得分分布图（图4）和枣花蜜特征蛋白质的氨基酸序列。
图4结果表明，枣花蜜的～17ku蛋白质与数据库中的王浆主蛋白质2的匹配度为26%，可以确定该蛋白质为王浆主蛋白质2。
<110>西北大学
<120>一种鉴别枣花蜜花源的特征蛋白
<160>1
<170>PatentInVersion2.1
<210>1
<211>452
<212>PRT
<213>枣花蜂蜜
<221>mat_peptide
<222>(1)...(452)
<400>SEQIDNo.1
MetThrArgTrpLeuPheMetValAlaCysLeuGlyIleAlaCys
151015
GlnGlyAlaIleValArgGluAsnSerProArgAsnLeuGluLys
202530
SerLeuAsnValIleHisGluTrpLysTyrPheAspTyrAspPhe
354045
GlySerGluGluArgArgGlnAlaAlaIleGlnSerGlyGluTyr
505560
AspHisThrLysAsnTyrProPheAspValAspGlnTrpArgAsp
657075
LysThrPheValThrIleLeuArgTyrAspGlyValProSerThr
808590
LeuAsnValIleSerGlyLysThrGlyLysGlyGlyArgLeuLeu
95100105
LysProTyrProAspTrpSerPheAlaGluPheLysAspCysSer
110115120
LysIleValSerAlaPheLysIleAlaIleAspLysPheAspArg
125130135
LeuTrpValLeuAspSerGlyLeuValAsnArgThrValProVal
140145150
CysAlaProLysLeuHisValPheAspLeuLysThrSerAsnHis
155160165
LeuLysGlnIleGluIleProHisAspIleAlaValAsnAlaThr
170175180
ThrGlyLysGlyGlyLeuValSerLeuAlaValGlnAlaIleAsp
185190195
LeuAlaAsnThrLeuValTyrMetAlaAspHisLysGlyAspAla
200205210
LeuIleValTyrGlnAsnAlaAspAspSerPheHisArgLeuThr
215220225
SerAsnThrPheAspTyrAspProArgTyrAlaLysMetThrIle
230235240
AspGlyGluSerPheThrLeuLysAsnGlyIleCysGlyMetAla
245250255
LeuSerProValThrAsnAsnLeuTyrTyrSerProLeuAlaSer
260265270
HisGlyLeuTyrTyrValAsnThrAlaProPheMetLysSerGln
275280285
PheGlyGluAsnAsnValGlnTyrGlnGlySerGluAspIleLeu
290295300
AsnThrGlnSerLeuAlaLysAlaValSerLysAsnGlyValLeu
305310315
PheValGlyLeuValGlyAsnSerAlaValGlyCysTrpAsnGlu
320325330
HisGlnSerLeuGlnArgGlnAsnLeuGluMetValAlaGlnAsn
335340345
AspArgThrLeuGlnMetIleAlaGlyMetLysIleLysGluGlu
350355360
LeuProHisPheValGlySerAsnLysProValLysAspGluTyr
365370375
MetLeuValLeuSerAsnArgMetGlnLysIleValAsnAspAsp
380385390
PheAsnPheAspAspValAsnPheArgIleLeuGlyAlaAsnVal
395400405
LysGluLeuIleArgAsnThrHisCysValAsnAsnAsnGlnAsn
410415420
AspAsnIleGlnAsnThrAsnAsnGlnAsnAspAsnAsnGlnLys
425430435
AsnAsnLysLysAsnAlaAsnAsnGlnLysAsnAsnAsnGlnAsn
440445450
AspAsn
452

Claims (4)

1.一种枣花蜜蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。
2.分离权利要求1所述枣花蜜蛋白的方法，其特征在于，包括步骤：
（1）枣花蜜粗蛋白的制备
称取枣花蜜样品，按照质量体积比1:1溶于蒸馏水中，5000g离心10分钟，收集上清液并定容得枣花蜜粗蛋白溶液，于4℃保存；
（2）SDS-PAGE
将枣花蜜粗蛋白溶液与样品溶解液按体积比1:1混合均匀，沸水煮沸3-5分钟；使用12%的分离胶和5%的浓缩胶恒压电泳，样品在浓缩胶中用低压70-80V，当样品进入分离胶界面时调节电压至120V，直至样品达到分离胶底部上方约1cm处，关闭电源，结束电泳；然后将胶片取下，用蒸馏水清洗，加入染色液染色，染色后，加入脱色液进行脱色，直到胶中的蛋白质条带清晰可见。
3.根据权利要求2所述枣花蜜蛋白的方法，其特征在于，步骤（2）中，样品溶解液、电极缓冲液、染色液和脱色液的具体配制方案如下，
（1）样品溶解液：在50mmol/LTris-HCl缓冲液（pH6.8）中含有1%SDS、1%巯基乙醇、10%甘油和0.02%溴酚蓝，配制50ml样品缓冲液；
（2）电极缓冲液：分别称取3.02gTris、14.42gGly、1gSDS，溶于蒸馏水中并定容至1000ml；
（3）染色液:称取0.25g考马斯亮蓝R-25，溶于100ml固定液，固定液为含50%乙醇和10%冰乙酸的水溶液；
（4）脱色液：含20%乙醇和7%冰乙酸的水溶液。
4.权利要求1所述枣花蜜蛋白在鉴定枣花蜜中的应用。
CN201510231749.1A 2015-05-08 2015-05-08 一种鉴别枣花蜜花源的特征蛋白 Pending CN105218654A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510231749.1A CN105218654A (zh) 2015-05-08 2015-05-08 一种鉴别枣花蜜花源的特征蛋白

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510231749.1A CN105218654A (zh) 2015-05-08 2015-05-08 一种鉴别枣花蜜花源的特征蛋白

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105218654A true CN105218654A (zh) 2016-01-06

Family

ID=54987982

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510231749.1A Pending CN105218654A (zh) 2015-05-08 2015-05-08 一种鉴别枣花蜜花源的特征蛋白

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105218654A (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106198691A (zh) * 2016-08-30 2016-12-07 南京林业大学 一种利用双向电泳体系获取北美鹅掌楸花蜜蛋白质二维电泳图谱的方法
CN108519423A (zh) * 2018-04-10 2018-09-11 天津商业大学 一种用于滑菇溯源的多糖电泳方法
CN109142596A (zh) * 2018-08-27 2019-01-04 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心 一种蜂蜜或蜂王浆真实性的识别方法
CN109991303A (zh) * 2019-02-27 2019-07-09 北京工商大学 利用毛细管电泳技术快速鉴别单花蜂蜜的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102252979A (zh) * 2011-03-20 2011-11-23 浙江大学 一种蜂蜜真伪鉴别方法及应用
CN103059135A (zh) * 2012-12-26 2013-04-24 浙江大学 蜂王浆主蛋白MRJP1特异性抗体及其制备方法与Elisa定量检测

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102252979A (zh) * 2011-03-20 2011-11-23 浙江大学 一种蜂蜜真伪鉴别方法及应用
CN103059135A (zh) * 2012-12-26 2013-04-24 浙江大学 蜂王浆主蛋白MRJP1特异性抗体及其制备方法与Elisa定量检测

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FANG YU等: "Royal Jelly Proteome Comparison between A.mellifera ligustica and A.cerana cerana", 《JOURNAL OF PROTEOME RESEARCH》 *
JOZEF SIMUTH: "Immunochemical approach to detection of adulteration in honey: physiologically active royal jelly protein stimulating TNF-αrelease is a regular component of honey", 《AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY》 *
SE-RA WON等: "Honey major protein characterization and its application to adulteration detection", 《FOOD RESEARCH INTERNATIONAL》 *
孙崇臻: "枇杷蜜中酚类、脱落酸、蛋白质的检测及其指纹图谱的研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》 *
无: "NP_001011580.1:major royal jelly protein 2 precursor(Apis mellifera)", 《GENBANK》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106198691A (zh) * 2016-08-30 2016-12-07 南京林业大学 一种利用双向电泳体系获取北美鹅掌楸花蜜蛋白质二维电泳图谱的方法
CN108519423A (zh) * 2018-04-10 2018-09-11 天津商业大学 一种用于滑菇溯源的多糖电泳方法
CN109142596A (zh) * 2018-08-27 2019-01-04 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心 一种蜂蜜或蜂王浆真实性的识别方法
CN109991303A (zh) * 2019-02-27 2019-07-09 北京工商大学 利用毛细管电泳技术快速鉴别单花蜂蜜的方法
CN109991303B (zh) * 2019-02-27 2023-10-03 北京工商大学 利用毛细管电泳技术快速鉴别单花蜂蜜的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105218654A (zh) 一种鉴别枣花蜜花源的特征蛋白
CN103937864B (zh) 一种从鳀鱼中分离的活性多肽
CN102329381B (zh) 同时分离高纯度的藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的方法与应用
CN104738081B (zh) 一种促进沉香树或白木香树生产沉香的微胶囊及其制备方法和应用
CN105241720B (zh) 一种适合双向电泳的红树植物秋茄叶片总蛋白提取方法
CN102321149A (zh) 红树植物总蛋白的提取以及双向电泳方法
CN1908007A (zh) 一种植物总蛋白的提取方法及其专用提取液
CN103172724B (zh) 从鸡蛋清中提取卵巨球蛋白的方法
CN102241730B (zh) 香蒲假茎总蛋白质的提取和双向电泳分析方法
CN104076082B (zh) 一种正品冬虫夏草的检测方法
CN108892704A (zh) 一种花生叶可溶性蛋白的提取方法及其应用
CN103900881A (zh) 适合双向电泳的马尾松针叶蛋白质提取方法
CN102796193A (zh) 一种从鸡蛋清中提取卵转铁蛋白的方法
CN108484717A (zh) 一种碎米荠植物硒蛋白的提取方法
CN101933960B (zh) 一种川牛膝与其易混物种的鉴别方法
CN109557228A (zh) 一种利用特征标记肽段鉴别燕窝及其掺假物的方法
CN107473979A (zh) 一种膜提取茶氨酸的处理方法
CN114324650B (zh) 一种基于（z）-edto特征标志物鉴别九龙藤蜂蜜的方法
CN112098530B (zh) ɑ-亚麻酸、亚油酸联合作为特征识别物在翅果油蜂蜜鉴别中的应用
CN103709013A (zh) 一种杨树胶中特有成分的分离纯化方法及应用
CN103728171B (zh) 一种适用于双向电泳实验的蚯蚓总蛋白的提取方法
CN104593339A (zh) 一种生物活性酶及其提取工艺
CN106008626A (zh) 一种快速制备黑米花青素矢车菊素-3-葡萄糖苷的方法
CN208462857U (zh) 一种植物蛋白提取装置
CN106198691A (zh) 一种利用双向电泳体系获取北美鹅掌楸花蜜蛋白质二维电泳图谱的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20160106