CN109313181A - 蛋变态反应的抗原 - Google Patents

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Abstract

本发明提供蛋变态反应的新型抗原、蛋变态反应的诊断方法和诊断试剂盒、包含该抗原的药物组合物、去除或降低了该抗原的蛋、蛋加工品或者产生该蛋或由该蛋孵化的鸟、去除或降低了该抗原的蛋加工品的制造方法、以及用于判断对象物中有无蛋抗原的检测仪。

Description

蛋变态反应的抗原
技术领域
本发明涉及蛋变态反应的新型抗原。本发明还涉及蛋变态反应的诊断试剂盒、诊断用组合物以及诊断方法。本发明还涉及包含该抗原的药物组合物、去除或降低了该抗原的蛋、蛋加工品或者产生该蛋或由该蛋孵化的鸟。本发明还涉及去除或降低了该抗原的蛋加工品的制造方法。本发明进而还涉及用于判断对象物中有无蛋抗原的检测仪。
背景技术
变态反应患者的血清和组织中产生了针对特定抗原(以下,也称为变应原)特异的IgE抗体。通过该IgE抗体与特定抗原的相互作用产生的生理学结果,引起了变态反应。抗原广义上是指引起变态反应症状的食品/食材等;狭义上是指特异的IgE抗体所结合的、食品/食材等所包含的蛋白质(以下,也称为变应原成分)。
现有的变态反应检测试剂中,大多是简单地将变应原候补食品/食材等磨碎而制成抗原试剂(专利文献1)。因此,现有的抗原试剂中所包含的变应原成分中,对于与IgE抗体的结合,只有在超过可判定阳性反应阈值的含量时,才能在变态反应检查中检测出阳性反应,是诊断效率还不能说是充分高的状态。
关于蛋变应原,现在已知有以下表中所示的物质(非专利文献1)。
[表1]
变应原候补的食品/食材中,启示了几种变应原成分,作为检测试剂盒而被商品化,但为了提高变态反应检测的可靠度,需要网罗地限定变应原成分,但利用上述变应原成分的测定进行的患者检测率还不充分。鉴定蛋的新型变应原不仅需要提高诊断试剂的精度,作为低变应原食品、低变应原食材、治疗药的靶标也是非常重要的。
另一方面,关于蛋白质的分离/纯化,近年来、作为从少量样品中对多种蛋白质进行分离纯化的方法,使用了第一维进行等电点电泳、第二维进行SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)的二维电泳法。申请人等到目前为止,开发出了分离能力高的二维电泳法(专利文献2~5)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本特开2002-286716
专利文献2:日本特开2011-33544
专利文献3:日本特开2011-33546
专利文献4:日本特开2011-33547
专利文献5:日本特开2011-33548
非专利文献
非专利文献1:Allergen Nomenclature,WHO/IUIS Allergen Nomenclature Sub-Committee,[平成28年5月31日検索],インターネット<URL:http://www.allergen.org/search.php?allergenname=&allergensource=gallus+dome sticus&TaxSource=&TaxOrder=&foodallerg=all&bioname=>
发明内容
发明要解决的问题
本发明提供蛋变态反应的新型抗原。本发明还提供蛋变态反应的诊断方法和诊断试剂盒。本发明还涉及包含该抗原的药物组合物、去除或降低了该抗原的蛋、蛋加工品或者产生该蛋或由该蛋孵化的鸟。本发明进一步提供用于判断对象物中有无蛋抗原的检测仪。
用于解决问题的方案
本发明人等为了解决上述问题,对于蛋变态反应的原因的抗原鉴定进行了深入研究。结果成功地鉴定出患有蛋变态反应的患者血清中IgE抗体所特异地结合的新型的抗原。基于该见解完成了本发明。
即,一实施方式中,本发明如下。
[1]一种蛋变态反应的诊断试剂盒,其包含以下(1)~(3)的蛋白质中的至少一种作为抗原:
(1)(1A)包含卵黄原蛋白-3(Vitellogenin-3)的C末端部分的蛋白质或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(1A-a)~(1A-e)中的任一蛋白质:
(1A-a)含有在序列号2中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(1A-b)含有与序列号2所示的氨基酸序列的同一性(identity)为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(1A-c)含有由在序列号1中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(1A-d)含有由与序列号1所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(1A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号1所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(1B)含有选自由序列号2~11组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(2)(2A)包含卵黄原蛋白-3(Vitellogenin-3)的C末端部分的蛋白质或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(2A-a)~(2A-e)中的任一蛋白质:
(2A-a)含有在序列号13中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(2A-b)含有与序列号13所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(2A-c)含有由在序列号12中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(2A-d)含有由与序列号12所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(2A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号12所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(2B)含有选自由序列号9~11、13、14和16组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(3)(3A)包含卵黄原蛋白-1(Vitellogenin-1)的中央部分或卵黄脂磷蛋白-1(lipovitellin-1)的C末端部分的蛋白质、或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(3A-a)~(3A-e)的任一蛋白质:
(3A-a)含有在序列号18中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(3A-b)含有与序列号18所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(3A-c)含有由在序列号17中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(3A-d)含有由与序列号17所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(3A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号17所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(3B)含有选自由序列号18~45组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质。
[2]一种蛋变态反应的诊断用组合物,其包含上述[1]中作为(1)~(3)限定的蛋白质中的至少一种作为抗原。
[3]一种提供用于诊断对象的蛋变态反应的指标的方法,其包括以下工序:
(i)使由对象得到的试样与抗原接触,此处,该试样是包含有IgE抗体的溶液;
(ii)对由对象得到的试样中的IgE抗体与该抗原的结合进行检测;
(iii)检测到对象的IgE抗体与该抗原结合时,提供对象为蛋变态反应的指标;
此处,该抗原是上述[1]中作为(1)~(3)限定的蛋白质的至少一种。
[4]一种药物组合物,其包含上述[1]中作为(1)~(3)限定的蛋白质的至少一种。
[5]根据上述[4]所述的药物组合物,其用于治疗蛋变态反应。
[6]一种蛋、蛋加工品或鸟,其特征在于,其为去除或降低了抗原的蛋、蛋加工品或者产生该蛋或由该蛋孵化的鸟,该抗原为上述[1]中作为(1)~(3)限定的蛋白质的至少一种。
[7]一种用于判断对象物中有无蛋抗原的检测仪,其特征在于,其包含与上述[1]中作为(1)~(3)限定的蛋白质的至少一种结合的抗体。
[8]一种用于判断对象物中有无蛋变态反应的抗原的检测仪,其特征在于,其包含具有与序列号1、12或17所示的碱基序列的至少一个互补的碱基序列的引物。
[9]一种蛋变态反应的诊断试剂盒,其包含以下(4)~(10)的蛋白质中的至少一种作为抗原:
(4)(4A)包含卵黄原蛋白-3(Vitellogenin-3)的蛋白质或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(4A-a)~(4A-e)中的任一蛋白质:
(4A-a)含有在序列号47中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(4A-b)含有与序列号47所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(4A-c)含有由在序列号46中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(4A-d)含有由与序列号46所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(4A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号46所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(4B)含有选自由序列号47~57组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(5)(5A)包含卵黄原蛋白-2前体(Vitellogenin-2 precursor)的蛋白质或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(5A-a)~(5A-e)中的任一蛋白质:
(5A-a)含有在序列号59中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(5A-b)含有与序列号59所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(5A-c)含有由在序列号58中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(5A-d)含有由与序列号58所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(5A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号58所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(5B)含有选自由序列号59~104组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(6)(6A)卵黄原蛋白-2前体(Vitellogenin-2 precursor)或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(6A-a)~(6A-e)中的任一蛋白质:
(6A-a)含有在序列号106中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(6A-b)含有与序列号106所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(6A-c)含有由在序列号105中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(6A-d)含有由与序列号105所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(6A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号105所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(6B)含有选自由序列号106~150组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(7)(7A)载脂蛋白B前体(Apolipoprotein B precursor)或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(7A-a)~(7A-e)中的任一蛋白质:
(7A-a)含有在序列号152中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(7A-b)含有与序列号152所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(7A-c)含有由在序列号151中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(7A-d)含有由与序列号151所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(7A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号151所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(7B)含有选自由序列号152~235组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(8)(8A)载脂蛋白B前体(Apolipoprotein B precursor)或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(8A-a)~(8A-e)中的任一蛋白质:
(8A-a)含有在序列号237中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(8A-b)含有与序列号237所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(8A-c)含有由在序列号236中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(8A-d)含有由与序列号236所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(8A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号236所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(8B)含有选自由序列号237~249组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(9)(9A)载脂蛋白B前体(Apolipoprotein B precursor)或其突变体,其为作为蛋变态反应的抗原的、以下(9A-a)~(9A-e)中的任一蛋白质:
(9A-a)含有在序列号251中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(9A-b)含有与序列号251所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(9A-c)含有由在序列号250中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(9A-d)含有由与序列号250所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(9A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号250所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(9B)含有选自由序列号251~260组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(10)(10A)卵黄原蛋白-2前体(Vitellogenin-2 precursor)或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(10A-a)~(10A-e)中的任一蛋白质:
(10A-a)含有在序列号262中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(10A-b)含有与序列号262所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(10A-c)含有由在序列号261中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(10A-d)含有由与序列号261所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(10A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号261所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(10B)含有选自由序列号262~271组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质。
[10]一种蛋变态反应的诊断用组合物,其包含上述[9]中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种作为抗原。
[11]一种提供用于诊断对象的蛋变态反应的指标的方法,其包括以下工序:
(i)使由对象得到的试样与抗原接触,此处,该试样是包含有IgE抗体的溶液;
(ii)对由对象得到的试样中的IgE抗体与该抗原的结合进行检测;
(iii)检测到对象的IgE抗体与该抗原结合时,提供对象为蛋变态反应的指标;
此处,该抗原是上述[9]中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种。
[12]一种药物组合物,其包含上述[9]中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种。
[13]根据上述[12]所述的药物组合物,其用于治疗蛋变态反应。
[14]一种蛋、蛋加工品或鸟,其特征在于,其为去除或降低了抗原的蛋、蛋加工品或者产生该蛋或由该蛋孵化的鸟,该抗原是上述[9]中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种。
[15]一种用于判断对象物中有无蛋抗原的检测仪,其特征在于,其包含与上述[9]中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种结合的抗体。
[16]一种用于判断对象物中有无蛋变态反应的抗原的检测仪,其特征在于,其包含具有与序列号46、58、105、151、236、250或261所示的碱基序列的至少一个互补的碱基序列的引物。
[17]一种去除或降低了抗原的蛋加工品的制造方法,其具有如下步骤:在该加工品的制造过程中确认抗原被去除或降低了,
此处,该抗原是上述[1]中作为(1)~(3)限定的蛋白质的至少一种、或者上述[9]中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种。
[18]一种源自蛋的抗原,其是上述[1]中作为(1)~(3)限定的蛋白质的至少一种、或者上述[9]中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种,并且成为蛋变态反应的原因。
发明的效果
通过本发明,能够提供蛋变态反应的新型的抗原。本发明中,鉴定出了引起蛋变态反应的新型的抗原(变应原成分),因此能够提供蛋变态反应的高灵敏度的诊断方法和诊断试剂盒、包含该抗原的药物组合物、去除或降低了该抗原的蛋、蛋加工品或者产生该蛋或由该蛋孵化的鸟、去除或降低了该抗原的蛋加工品的制造方法、以及用于判断对象物中有无蛋抗原的检测仪。
附图说明
图1是表示对于鸡蛋(生的蛋)的蛋黄所包含的蛋白质利用二维电泳的蛋白质的泳动图的凝胶照片。照片左侧的条带是分子量标记物的条带,照片左侧的数值是各分子量标记物的分子量(KDa)。照片上部的数值表示等电点。
图2是对于鸡蛋(生的蛋)的蛋黄所包含的蛋白质的二维电泳图,使用蛋变态反应患者1的血清进行免疫印迹的照片。
图3是表示对于鸡蛋(生的蛋)的蛋黄所包含的蛋白质的二维电泳图的凝胶照片。蛋变态反应患者1的血清特异地进行了反应的斑点1、2和3分别用方框围起来表示。
图4是对于鸡蛋(生的蛋)的蛋黄所包含的蛋白质的二维电泳图,使用蛋变态反应患者2的血清进行免疫印迹的照片。蛋变态反应患者2的血清特异地进行了反应的斑点4~8分别用方框围起来表示。
图5是对于鸡蛋(生的蛋)的蛋黄所包含的蛋白质的二维电泳图,使用蛋变态反应患者3的血清进行免疫印迹的照片。蛋变态反应患者3的血清特异地进行了反应的斑点9和10分别用方框围起来表示。
图6是对于鸡蛋(生的蛋)的蛋黄所包含的蛋白质的二维电泳图,使用蛋变态反应患者4的血清进行免疫印迹的照片。蛋变态反应患者4的血清特异地进行了反应的斑点11用方框围起来表示。
具体实施方式
以下具体地对本发明进行说明,但本发明不限于这些内容。
本说明书中,只要没有特别的定义,与本发明相关联而使用的科学术语和技术术语为本领域技术人员通常理解的意思。
本说明书中变态反应是指:在对某抗原敏感的生物体中,该抗原再次进入时产生的、对生物体表现出不舒服的过敏反应的状态。食物中的大多变态反应疾病,在血液和组织中产生对抗原特异的IgE抗体。IgE抗体与肥大细胞或嗜碱性粒细胞结合。对该IgE抗体特异的抗原再次进入变态反应疾病患者的体内时,该抗原与结合有肥大细胞或嗜碱性粒细胞的IgE抗体组合,然后该IgE抗体在细胞表面交联,产生IgE抗体-抗原相互作用的生理学效果。作为它们的生理学的效果,可列举出组胺、5-羟色胺、肝素、嗜酸性粒细胞趋化因子或各种白三烯等的释放。这些释放物质引起由IgE抗体与特定抗原组合产生的变态反应。由特定抗原产生的变态反应通过上述路径来实现。
本说明书中,蛋是指鸟类的蛋、优选指代鸡蛋。
本说明书中,蛋变态反应是指:具有将蛋所包含的蛋白质等作为抗原而产生的变态反应的状态。蛋变态反应是指:与蛋所包含的抗原接触时或者摄取该抗原时能够产生变态反应。通常将摄取食物时产生的变态反应特别地称为食物变态反应。蛋变态反应也可以是食物变态反应。
本说明书中,抗原是指引起变态反应的物质,也被称为变应原成分。抗原优选为蛋白质。
本说明书中,蛋白质是具有天然氨基酸通过肽键连接而成的结构的分子。对于蛋白质所包含的氨基酸的个数没有特别的限定,有时将2~50个左右的氨基酸通过肽键连接而成的蛋白质称为肽。另外,关于氨基酸,在可能存在旋光异构体的情况下,只要没有特别明示则表示L体。本说明书中使用的蛋白质或肽的氨基酸序列的标记法如下:基于标准的用法和本领域中惯用的标记法,氨基酸用一文字标记表示,左方向是氨基末端方向并且右方向是羧基末端方向。
抗原的限定
对于蛋所包含的蛋白质,利用上述的手法对于蛋变态反应的抗原进行限定。具体而言,将生的鸡蛋分为蛋黄和蛋白,分别对于其中所包含的蛋蛋白质按照下述条件供于二维电泳。
第一维电泳作为等电点电泳用凝胶使用凝胶长度5~10cm范围内并且凝胶的pH范围为3~10、凝胶相对于泳动方向的pH梯度在将凝胶的全长设为1、至pH5为止的凝胶长度设为a、pH5~7的凝胶长度设为b、pH7以上的凝胶长度设为c时,a为0.15~0.3的范围内、b为0.4~0.7的范围内、c为0.15~0.3范围内的凝胶,具体而言,使用GE HealthcareBioscience(以下,简称为GE公司)制的IPG凝胶Immobiline Drystrip(pH3-10NL)进行等电点泳动。电泳仪使用GE公司制的IPGphor。将电泳仪电流值的上限设定为每1根凝胶75μA,将电压程序如下进行设置:(1)以300V恒定电压升压至750Vhr为止,从而进行恒定电压工序(该工序结束前的泳动30分钟的电流変化幅度为5μA);(2)缓缓地使电压从300Vhr升压至1000V为止;(3)进一步,缓缓地使电压从4500Vhr升压至5000V为止;(4)之后,以5000V恒定电压直至Vhr成为12000,进行第一维的等电点电泳。
第二维电泳使用:泳动方向基端部的凝胶浓度被设定为3~6%且泳动方向前端侧部分的凝胶浓度被设定为高于泳动方向基端部凝胶浓度的聚丙烯酰胺凝胶,具体而言,使用Life technologies公司制的NuPAGE 4-12%Bris-Tris Gels IPG well mini 1mm进行SDS-PAGE。电泳仪使用Life technologies公司制的XCell SureLock Mini-Cell。作为泳动缓冲液,使用50mM MOPS、50mM Tris碱、0.1%(w/v)SDS、1mM EDTA,在200V恒定电压下进行约45分钟泳动。
结果可知,对于鸡蛋的蛋白质在上述的条件下进行二维电泳时的凝胶中,斑点1~3的抗原与、蛋变态反应的被诊断为食物依赖性运动引起的变态反应症(Food-DependentExercise-Induced Anaphylaxis)的患者的IgE抗体特异地结合。另外可知,蛋的其他变态反应患者中,斑点4~11的抗原与该患者的IgE抗体特异地结合(图4~6)。
抗原
(1)斑点1的抗原
对于斑点1,利用质谱分析进行序列鉴定的结果,检测到了序列号3~11的氨基酸序列。
另外,对于斑点1,将由质谱分析装置得到的质谱数据(序列号3~11)与NCBI的蛋白质数据进行对照并解析,鉴定为卵黄原蛋白-3(Vitellogenin-3)的C末端部分(氨基酸序列:序列号2、编码其的碱基序列:序列号1)。
因此,本申请中,斑点1的抗原为以下(1A-a)~(1A-e)和(1B)中的任一者。
(1A-a)含有在序列号2中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质。
(1A-b)含有与序列号2所示的氨基酸序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的氨基酸序列的蛋白质。
(1A-c)含有由在序列号1中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(1A-d)含有由与序列号1所示的碱基序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(1A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号1所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交。
(1B)含有选自由序列号2~11组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9种或所有序列的蛋白质。进而优选:含有选自由序列号2、4和序列号9~11组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4种或所有序列的蛋白质。其中,序列号3~11中的任一者所示的氨基酸序列任选缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸。
上述(1A-a)~(1A-e)和(1B)的蛋白质还可以是:上述“抗原的限定”项目中记载的条件下进行二维电泳时的凝胶中,作为分子量20kDa~40kDa、优选为分子量30kDa~35kDa以及等电点4.0~10.0、优选为4.0~9.0的斑点出现的蛋白质。
(2)斑点2的抗原
对于斑点2,利用质谱分析进行序列鉴定的结果,检测到了序列号9~11、14、16的氨基酸序列。
另外,对于斑点2,将由质谱分析装置得到的质谱数据(序列号9~11、14、16)与NCBI的蛋白质数据进行对照并解析,鉴定为卵黄原蛋白-3(Vitellogenin-3)的C末端部分(氨基酸序列:序列号13、编码其的碱基序列:序列号12)。
因此,本申请中,斑点2的抗原为以下(2A-a)~(2A-e)和(2B)中的任一者。
(2A-a)含有在序列号13中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质。
(2A-b)含有与序列号13所示的氨基酸序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的氨基酸序列的蛋白质。
(2A-c)含有由在序列号12中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(2A-d)含有由与序列号12所示的碱基序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(2A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号12所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交。
(2B)含有选自由序列号9~11、13、14和16组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5种或所有序列的蛋白质。进而优选:含有选自由序列号9~11、13和16组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4种或所有序列的蛋白质。其中,序列号9~11、13、14、16中的任一者所示的氨基酸序列任选缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸。
上述(2A-a)~(2A-e)和(2B)的蛋白质还可以是:上述“抗原的限定”项目中记载的条件下进行二维电泳时的凝胶中,作为分子量30kDa~60kDa、优选为分子量35kDa~40kDa附近以及等电点5.0~10.0、优选为6.0~9.0的斑点出现的蛋白质。
(3)斑点3的抗原
对于斑点3,利用质谱分析进行序列鉴定的结果,检测到了序列号19~45的氨基酸序列。
另外,对于斑点3,将由质谱分析装置得到的质谱数据(序列号19~45)与UniProt的蛋白质数据进行对照并解析,鉴定为卵黄原蛋白-1(Vitellogenin-1)的中央部分或其蛋白质的N末端侧的能够利用切断得到的卵黄脂磷蛋白-1(Lipovitellin-1)的C末端部分(氨基酸序列:序列号18、编码其的碱基序列:序列号17)。
因此,本申请中,斑点3的抗原为以下(3A-a)~(3A-e)和(3B)中的任一者。
(3A-a)含有在序列号18中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质。
(3A-b)含有与序列号18所示的氨基酸序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的氨基酸序列的蛋白质。
(3A-c)含有由在序列号17中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(3A-d)含有由与序列号17所示的碱基序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(3A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号17所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交。
(3B)含有选自由序列号18~45组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27种或所有序列的蛋白质。进而优选为:含有选自由序列号18、19、22~31、33~35、37、39、40、42、43和45组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20种或所有序列的蛋白质。其中,序列号18~45中的任一者所示的氨基酸序列任选缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸。
上述(3A-a)~(3A-e)和(3B)的蛋白质还可以是:上述“抗原的限定”项目中记载的条件下进行二维电泳时的凝胶中,作为分子量35kDa~60kDa、优选为分子量40kDa~50kDa附近以及等电点5.0~10.0、优选为6.0~9.0的斑点出现的蛋白质。
(4)斑点4的抗原
对于斑点4,利用质谱分析进行序列鉴定的结果,检测到了序列号48~57的氨基酸序列。
另外,对于斑点4,将由质谱分析装置得到的质谱数据(序列号48~57)与NCBI的蛋白质数据进行对照并解析,鉴定为卵黄原蛋白-3(Vitellogenin-3)(氨基酸序列:序列号47、编码其的碱基序列:序列号46)。
因此,本申请中,斑点4的抗原为以下(4A-a)~(4A-e)和(4B)中的任一者。
(4A-a)含有在序列号47中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质。
(4A-b)含有与序列号47所示的氨基酸序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的氨基酸序列的蛋白质。
(4A-c)含有由在序列号46中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(4A-d)含有由与序列号46所示的碱基序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(4A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号46所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交。
(4B)含有选自由序列号47~57组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10种或所有序列的蛋白质。进而优选:含有选自由序列号47、50、51、53和54组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4种或所有序列的蛋白质。其中,序列号47~57中的任一者所示的氨基酸序列任选缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸。
上述(4A-a)~(4A-e)和(4B)的蛋白质还可以是:上述“抗原的限定”项目中记载的条件下进行二维电泳时的凝胶中,作为分子量20kDa~50kDa、优选为分子量25kDa~40kDa、更优选为分子量30kDa~35kDa附近、以及等电点3.0~8.0、优选为3.5~7.0、进而优选为4.0~6.0的斑点出现的蛋白质。
(5)斑点5和6的抗原
对于斑点5和6,利用质谱分析进行序列鉴定的结果,检测到了序列号60~104的氨基酸序列。
另外,对于斑点5和6,将由质谱分析装置得到的质谱数据(序列号60~104)与NCBI的蛋白质数据进行对照并解析,鉴定为卵黄原蛋白-2前体(Vitellogenin-2 precursor)(氨基酸序列:序列号59、编码其的碱基序列:序列号58)。
因此,本申请中,斑点5和6的抗原为以下(5A-a)~(5A-e)和(5B)中的任一者。
(5A-a)含有在序列号59中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质。
(5A-b)含有与序列号59所示的氨基酸序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的氨基酸序列的蛋白质。
(5A-c)含有由在序列号58中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(5A-d)含有由与序列号58所示的碱基序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(5A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号58所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交。
(5B)含有选自由序列号59~104组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45种序列或所有序列的蛋白质。进而优选为:含有选自由序列号59、60、63、65、68、69、71、73、75~79、81、83~88、91~94、96~99和101~103组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30种或所有序列的蛋白质。其中,序列号59~104中的任一者所示的氨基酸序列任选缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸。
上述(5A-a)~(5A-e)和(5B)的蛋白质还可以是:上述“抗原的限定”项目中记载的条件下进行二维电泳时的凝胶中,作为分子量80kDa~260kDa、优选为分子量90kDa~200kDa、更优选为分子量110kDa~160kDa附近、以及等电点1.0~8.0、优选为2.0~7.0、进而优选为3.0~6.0的斑点出现的蛋白质。
(6)斑点7的抗原
对于斑点7,利用质谱分析进行序列鉴定的结果,检测到了序列号107~150的氨基酸序列。
另外,对于斑点7,将由质谱分析装置得到的质谱数据(序列号107~150)与NCBI的蛋白质数据进行对照并解析,鉴定为卵黄原蛋白-2前体(Vitellogenin-2 precursor)(氨基酸序列:序列号106、编码其的碱基序列:序列号105)。
因此,本申请中,斑点7的抗原为以下(6A-a)~(6A-e)和(6B)中的任一者。
(6A-a)含有在序列号106中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质。
(6A-b)含有与序列号106所示的氨基酸序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的氨基酸序列的蛋白质。
(6A-c)含有由在序列号105中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(6A-d)含有由与序列号105所示的碱基序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(6A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号105所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交。
(6B)含有选自由序列号106~150组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、44种序列或所有序列的蛋白质。进而优选为:含有选自由序列号106、108、110、111、113、114、116、117、120~124、126~131、133、134、136~138、140~143、145~147和149组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、31种或所有序列的蛋白质。其中,序列号106~150中的任一者所示的氨基酸序列任选缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸。
上述(6A-a)~(6A-e)和(6B)的蛋白质还可以是:上述“抗原的限定”项目中记载的条件下进行二维电泳时的凝胶中,作为分子量110kDa~300kDa、优选为分子量130kDa~280kDa、更优选为分子量160kDa~260kDa附近、以及等电点3.0~8.0、优选为3.5~7.0、进而优选为4.0~6.0的斑点出现的蛋白质。
(7)斑点8的抗原
对于斑点8,利用质谱分析进行序列鉴定的结果,检测到了序列号153~235的氨基酸序列。
另外,对于斑点8,将由质谱分析装置得到的质谱数据(序列号153~235)与NCBI的蛋白质数据进行对照并解析,鉴定为载脂蛋白B前体(Apolipoprotein B precursor)(氨基酸序列:序列号152、编码其的碱基序列:序列号151)。
因此,本申请中,斑点8的抗原为以下(7A-a)~(7A-e)和(7B)中的任一者。
(7A-a)含有在序列号152中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质。
(7A-b)含有与序列号152所示的氨基酸序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的氨基酸序列的蛋白质。
(7A-c)含有由在序列号151中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(7A-d)含有由与序列号151所示的碱基序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(7A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号151所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交。
(7B)含有选自由序列号152~235组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、83种序列或所有序列的蛋白质。进而优选为:含有选自由序列号152、154、157~160、163、164、167~172、174、175、177、178、180、182~185、187、189、190、192、194~196、198~200、203~207、209、211、212、214~216、220~229、231和232组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55种或所有序列的蛋白质。其中,序列号152~235中的任一者所示的氨基酸序列任选缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸。
上述(7A-a)~(7A-e)和(7B)的蛋白质还可以是:上述“抗原的限定”项目中记载的条件下进行二维电泳时的凝胶中,作为分子量160kDa~550kDa、优选为分子量180kDa~400kDa、更优选为分子量200kDa~300kDa附近、以及等电点3.0~8.0、优选为3.5~7.0、进而优选为4.0~6.0的斑点出现的蛋白质。
(8)斑点9的抗原
对于斑点9,利用质谱分析进行序列鉴定的结果,检测到了序列号238~249的氨基酸序列。
另外,对于斑点9,将由质谱分析装置得到的质谱数据(序列号238~249)与NCBI的蛋白质数据进行对照并解析,鉴定为载脂蛋白B前体(Apolipoprotein B precursor)(氨基酸序列:序列号237、编码其的碱基序列:序列号236)。
因此,本申请中,斑点9的抗原为以下(8A-a)~(8A-e)和(8B)中的任一者。
(8A-a)含有在序列号237中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质。
(8A-b)含有与序列号237所示的氨基酸序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的氨基酸序列的蛋白质。
(8A-c)含有由在序列号236中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(8A-d)含有由与序列号236所示的碱基序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(8A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号236所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交。
(8B)含有选自由序列号237~249组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12种或所有序列的蛋白质。进而优选:含有选自由序列号237~239、241、242、244和246~249组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9种或所有序列的蛋白质。其中,序列号237~249中的任一者所示的氨基酸序列任选缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸。
上述(8A-a)~(8A-e)和(8B)的蛋白质还可以是:上述“抗原的限定”项目中记载的条件下进行二维电泳时的凝胶中,作为分子量20kDa~50kDa、优选为分子量25kDa~45kDa、更优选为分子量30kDa~40kDa附近、以及等电点7.0~11.0、优选为8.0~10.0、进而优选为9.0~10.0的斑点出现的蛋白质。
(9)斑点10的抗原
对于斑点10,利用质谱分析进行序列鉴定的结果,检测到了序列号252~260的氨基酸序列。
另外,对于斑点10,将由质谱分析装置得到的质谱数据(序列号252~260)与NCBI的蛋白质数据进行对照并解析,鉴定为载脂蛋白B前体(Apolipoprotein B precursor)(氨基酸序列:序列号251、编码其的碱基序列:序列号250)。
因此,本申请中,斑点10的抗原为以下(9A-a)~(9A-e)和(9B)中的任一者。
(9A-a)含有在序列号251中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质。
(9A-b)含有与序列号251所示的氨基酸序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的氨基酸序列的蛋白质。
(9A-c)含有由在序列号250中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(9A-d)含有由与序列号250所示的碱基序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(9A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号250所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交。
(9B)含有选自由序列号251~260组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9种或所有序列的蛋白质。进而优选:含有选自由序列号251~254、256、257和260组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6种或所有序列的蛋白质。其中,序列号251~260中的任一者所示的氨基酸序列任选缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸。
上述(9A-a)~(9A-e)和(9B)的蛋白质还可以是:上述“抗原的限定”项目中记载的条件下进行二维电泳时的凝胶中,作为分子量20kDa~50kDa、优选为分子量25kDa~45kDa、更优选为分子量30kDa~40kDa附近、以及等电点7.0~11.0、优选为8.0~10.0、进而优选为9.0~10.0的斑点出现的蛋白质。
(10)斑点11的抗原
对于斑点11,利用质谱分析进行序列鉴定的结果,检测到了序列号263~271的氨基酸序列。
另外,对于斑点11,将由质谱分析装置得到的质谱数据(序列号263~271)与NCBI的蛋白质数据进行对照并解析,鉴定为卵黄原蛋白-2前体(Vitellogenin-2 precursor)(氨基酸序列:序列号262、编码其的碱基序列:序列号261)。
因此,本申请中,斑点11的抗原为以下(10A-a)~(10A-e)和(10B)中的任一者。
(10A-a)含有在序列号262中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质。
(10A-b)含有与序列号262所示的氨基酸序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的氨基酸序列的蛋白质。
(10A-c)含有由在序列号261中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(10A-d)含有由与序列号261所示的碱基序列的同一性为70%以上、优选为75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上、99%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质。
(10A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号261所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交。
(10B)含有选自由序列号262~271组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5、6、7、8、9种或所有序列的蛋白质。进而优选:含有选自由序列号262~265、268和269组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质、优选为包含该氨基酸序列的至少2、3、4、5种或所有序列的蛋白质。其中,序列号262~271中的任一者所示的氨基酸序列任选缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸。
上述(10A-a)~(10A-e)和(10B)的蛋白质还可以是:上述“抗原的限定”项目中记载的条件下进行二维电泳时的凝胶中,作为分子量15kDa~40kDa、优选为分子量17kDa~35kDa、更优选为分子量20kDa~30kDa附近、以及等电点6.0~11.0、优选为7.0~10.0、进而优选为8.0~10.0的斑点出现的蛋白质。
上述(1)~(3)、(4)~(10)的作为抗原的蛋白质中还包含有:该蛋白质的氨基酸残基通过磷酸化、糖链修饰、氨基酰化、开环、脱氨基化等被修饰而成的蛋白质。
优选的是,上述(1)~(3)、(4)~(10)的作为抗原的蛋白质是蛋变态反应的抗原。
本说明书中,氨基酸序列中,“缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸”这样的情况是指:在成为对象的氨基酸序列中,缺失有1个或多个氨基酸(例如,相对于氨基酸序列的全长为30%、优选为25%、20%、15%、10%、5%、3%、2%或1%的氨基酸)、或者置换为其他氨基酸、或者插入有其他氨基酸、和/或附加其他氨基酸而成的氨基酸序列。
上述中,置换优选为保守的置换。保守的置换是指将特定的氨基酸残基用具有類似物理化学特征的残基进行置换;只要是不使原序列结构相关的特征实质上变化就可以为任意的置换,例如,置换氨基酸只要不破坏原序列中存在的螺旋、或者不破坏作为原序列特征的其他种类的二次结构就可以为任意的置换。以下,关于氨基酸残基的保守的置换,根据能够置换的残基分类而例示,但作为能够置换的氨基酸残基不限定于以下记载的物质。
A组:亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、蛋氨酸
B组:天冬氨酸、谷氨酸
C组:天冬酰胺、谷氨酰胺
D组:赖氨酸、精氨酸
E组:丝氨酸、苏氨酸
F组:苯丙氨酸、酪氨酸
非保守的置换的情况下,也可以将上述种类中的、某一个成员替换为其他种类成员。例如,为了排除预料之外的糖链修饰,也可以将上述B、D、E组的氨基酸置换成除此以外组的氨基酸。或者,为了防止三维结构的蛋白质中被折叠,可以缺失半胱氨酸或者置换为其他氨基酸。或者,为了保持亲水性/疏水性平衡,或者为了容易地进行合成,为了提高亲水度而考虑与氨基酸相关的作为疏水性/亲水性指标的氨基酸的亲水指数(hydropathy index)(J.Kyte和R.Doolittle,J.Mol.Biol.,Vol.157,p.105-132,1982),也可以置换氨基酸。
本说明书中,2个氨基酸序列的同一性%可以通过视觉的检查和数学计算来确定。另外,也可以使用计算机程序确定同一性%。作为这样的计算机程序,可列举出例如:BLAST和ClustalW等。特别是,利用BLAST程序进行的同一性检索的各种条件(参数)可以按照Altschul等(Nucl.Acids.Res.,25,p.3389-3402,1997)记载的、从美国国立生物技术信息中心(NCBI)、DNA Data Bank of Japan(DDBJ)网站等公开得到(BLAST手册、Altschul等NCB/NLM/NIH Bethesda,MD 20894;Altschul等)。另外,也可以使用遗传信息处理软件GENETYX Ver.7(GENETYX)、DINASIS Pro(Hitachi Soft,Ltd.)、Vector NTI(Infomax)等程序来决定。
本说明书中,碱基序列中,“缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸”这样的情况是指:在成为对象的碱基序列中,缺失有1个或多个核苷酸(例如,相对于碱基序列的全长为30%、优选为25%、20%、15%、10%、5%、3%、2%或1%的氨基酸)、或者置换为其他核苷酸、或者插入有其他核苷酸、和/或附加其他核苷酸而成的碱基序列。通过上述核苷酸的缺失、置换、插入或附加,优选在编码氨基酸的序列中不产生移码。
本说明书中,2个碱基序列的同一性%可以通过视觉的检查和数学计算来确定。另外,也可以使用计算机程序确定同一性%。作为这样的序列比较计算机程序,可以使用例如:从美国国立医学图书馆的网站:https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi能够利用的BLASTN程序(Altschul et al.(1990)J.Mol.Biol.215:403-10),并使用默认参数(Default Parameter)来确定。
本说明书中“严格条件下”是指中等程度或高度严格的条件下进行杂交。具体而言,作为中等程度严格的条件,例如可以由具有一般技术的本领域技术人员基于DNA的长度容易地决定。基本的条件如Sambrook等,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,第3版,第6-7章,Cold Spring Harbor Laboratory Press,2001所示。优选的是,中等程度严格的条件作为杂交条件可列举出:1×SSC~6×SSC、42℃~55℃的条件;更优选为1×SSC~3×SSC、45℃~50℃的条件;最优选为2×SSC、50℃的条件。杂交溶液中包含例如约50%甲酰胺的情况下,可以采用比上述温度低5~15℃的温度。洗涤条件可列举出:0.5×SSC~6×SSC、40℃~60℃。在杂交和洗涤时,通常加入0.05%~0.2%、优选约0.1%SDS。作为高度严格的条件,还可以例如由本领域技术人员基于DNA的长度容易地决定。通常,作为高度严格(high stringent)的条件,包括比中等程度严格的条件温度更高和/或盐浓度更低的杂交和/或洗涤。例如,作为杂交条件,可列举出:0.1×SSC~2×SSC、55℃~65℃的条件;更优选为0.1×SSC~1×SSC、60℃~65℃的条件;最优选为0.2×SSC、63℃的条件。作为洗涤条件,可列举出:0.2×SSC~2×SSC、50℃~68℃、更优选为0.2×SSC、60~65℃。
抗原也可以通过组合本领域技术人员公知的蛋白质纯化方法由蛋(优选为鸡蛋)进行分离/纯化来得到。或者,抗原也可以通过本领域技术人员公知的基因重组技术表达抗原作为重组蛋白质,然后通过本领域技术人员公知的蛋白质纯化方法进行分离/纯化来得到。
作为蛋白质的纯化方法,可列举出例如:盐析、溶剂沉淀法等利用溶解度的方法;透析、超滤、凝胶过滤、SDS-PAGE等利用分子量的差的方法;离子交换色谱、羟磷灰石色谱等利用荷电的方法;亲和色谱等利用特异的亲和性的方法;反相高效液相色谱等利用疏水性的差的方法;等电点电泳等利用等电点的差的方法等。
利用基因重组技术制备蛋白质可以如下进行:制备包含编码抗原的核酸的表达载体,将该表达载体通过基因导入或转化导入至适宜的宿主细胞中,在适合于重组蛋白质表达的条件下培养该宿主细胞,然后对该宿主细胞中表达的重组蛋白质进行回收。
“载体”是能够用于将与之连接的核酸导入宿主细胞内的核酸;“表达载体”是能够引导被载体导入的核酸所编码的蛋白质表达的载体。作为载体包括质粒载体、病毒载体等。本领域技术人员可以根据使用的宿主细胞的种类选择适合于重组蛋白质表达的表达载体。
“宿主细胞”是通过载体进行了基因导入或接受了转化的细胞。宿主细胞可以由本领域技术人员根据使用的载体适宜选择。宿主细胞可以来自例如大肠杆菌(E.coli)等原核生物。使用大肠杆菌这样的原核细胞作为宿主时,为了使原核细胞内的重组蛋白质的表达变得容易,本发明的抗原优选包含N末端蛋氨酸残基。该N末端蛋氨酸也可以在表达后从重组蛋白质切离。或者,可以是酵母等单细胞真核生物;植物细胞、动物细胞(例如,人细胞、猿猴细胞、仓鼠细胞、大鼠细胞、小鼠细胞或昆虫细胞)等来自真核生物的细胞、蚕。
表达载体向宿主细胞的基因导入或转化可以通过本领域技术人员公知的方法适宜进行。另外,本领域技术人员会根据宿主细胞的种类适宜选择适合于表达重组蛋白质的条件来培养宿主细胞,从而能够表达重组蛋白质。然后,对表达重组蛋白质的宿主细胞进行均质化处理,对由得到的均质混合物纯化成上述蛋白质的方法进行适宜组合,由此能够分离/纯化作为重组蛋白质表达的抗原。
诊断试剂盒/诊断方法
本发明是提供用于诊断对象的蛋变态反应的指标的方法,其包括以下的工序:
(i)使由对象得到的试样与抗原接触,此处,该试样是包含有IgE抗体的溶液;
(ii)对由对象得到的试样中的IgE抗体与该抗原的结合进行检测;
(iii)检测到对象IgE抗体与该抗原结合时,提供对象为蛋变态反应的指标;
此处,该抗原为作为上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原而限定的蛋白质的至少一种。
由对象得到的试样是指包含有由对象采集的IgE抗体的溶液。这样的溶液中包含有例如血液、唾液、痰、鼻涕、尿、汗、泪。在与抗原接触之前,也可以对由对象得到的试样实施用于提高试样中IgE抗体浓度的前处理。作为试样的前处理,也可以包括例如由血液得到血清、血浆。另外,也可以进一步对作为与抗原结合部分的Fab部分进行纯化。在特别优选的方式中,上述工序(i)通过使由对象得到的血清中的IgE抗体与抗原接触来进行。
IgE抗体可以是IgE抗体自身,也可以是IgE抗体所结合的肥大细胞等。
由对象得到的试样与抗原的接触以及它们的结合的检测可以通过已知的方法来进行。作为这样的方法,可以使用利用例如:ELISA(酶联免疫吸附试验,Enzyme-LinkedImmunosorvent Assay)、夹层免疫测定法(sandwich immunoassays)、蛋白质免疫印迹法、免疫沉淀法、免疫层析法进行的检测。这些均是使抗原与对象IgE抗体接触而结合,使之作用于对于与抗原特异地结合的IgE抗体进行酶标记而成的二次抗体,加入酶的底物(通常为显色或发光试剂)而检测出酶反应的产物,由此能够检测抗原与对象IgE抗体结合的方法。或者为检测被荧光标记的二次抗体的方法。或者,也可以使用表面等离子共振(SPR)等能够评价抗原与IgE抗体结合的测定方法进行检测。也可以混合多种抗原特异的IgE抗体。
抗原也可以是分离的抗原被固定于载体的状态。该情况下,上述工序(i)和(ii)中可以利用ELISA、夹层免疫测定法、免疫层析法、表面等离子共振;另外,上述工序(i)中,由对象得到的试样与固定了抗原的面接触来进行。所分离的抗原可以通过组合本领域技术人员公知的蛋白质纯化方法由蛋(优选为鸡蛋)分离/纯化来得到,或者也可以通过基因重组技术来制备。另外,也可以是抗体被固定的状态。
抗原也可以是被固定于载体的状态。该情况下,在上述工序(i)和(ii)中,可以利用流式细胞仪等,可以通过激光确认结合有抗体的抗原的存在。可列举出例如嗜碱性粒细胞激活试验(BAT)等。另外,也可列举出通过使抗原与试样中的血细胞进一步接触来确认是否使组胺游离的组胺游离试验(HRT)。
另外,抗原也可以由通过二维电泳分离的状态转印、通过蛋白质免疫印迹进行检测。二维电泳通过第一维进行等电点电泳、第二维进行SDS-PAGE(SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳),由此分离蛋白质试样的方法。该情况下,二维电泳的条件只要是能够分离本发明抗原的条件就没有特别的限定。例如,可以利用上述“抗原的限定”项目中记载的二维电泳的条件。或者,也可以参考上述专利文献1~4的记载设定电泳条件,例如,满足选自由以下组成的组中的至少一个条件下进行二维电泳:
(A)作为第一维等电点电泳凝胶,在凝胶长度为5~10cm的范围内且凝胶的pH范围为3~10、将相对于泳动方向的凝胶的pH梯度直至pH5为止的凝胶长度设为a、pH5~7的凝胶长度设为b、pH7以上的凝胶长度设为c的情况下,满足“a<b”和“b>c”的关系;
(B)在(A)的情况下,将凝胶的全长设为1时,a为0.15~0.3的范围内、b为0.4~0.7的范围内、c为0.15~0.3的范围内;
(C)在第一维的等电点电泳中,对于每1根包含被检体的凝胶施加100V~600V范围内值的恒定电压进行恒定电压工序,在每泳动30分钟的泳动变化幅度为5μA范围内之后,开始由前述恒定电压使电压上升的电压上升工序;
(D)在(C)的情况下,将电压上升工序的最终电压设为3000V~6000V的范围内;
(E)第一维等电点电泳凝胶的长边方向的凝胶长度设为5~10cm、第二维电泳凝胶的泳动方向基端部的凝胶浓度设为3~6%;以及
(F)在(E)的情况下,将第二维电泳凝胶的泳动方向前端侧部分的凝胶浓度设定为高于泳动方向基端部的凝胶浓度。
上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原为与蛋变态反应患者的IgE抗体特异结合的抗原。因此,检测到对象的IgE抗体与该抗原结合的情况下,提供对象为蛋变态反应的指标。
本发明还提供包含上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种的蛋变态反应的诊断试剂盒。本发明的诊断试剂盒可以在上述提供用于诊断蛋变态反应指标的方法或下述诊断方法中应用。本发明的诊断试剂盒除了包含上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种之外,还可以包含被酶标记的抗IgE抗体以及成为该酶底物的显色底物或发光底物。另外,也可以使用被荧光标记的抗IgE抗体。本发明的诊断试剂盒中,也可以以抗原被固定化于载体的状态提供。本发明的诊断试剂盒还可以与关于用于诊断的步骤的说明书、包含该说明的方法包一起提供。
在另外的方式中,上述的診断试剂盒包含:蛋变态反应的伴侣诊断药物。伴侣诊断药物是指用于以下用途的物质:期待医药品效果的患者的特定或医药品的具有重度副作用风险的患者的特定、或者为了最优化使用了医药品的治疗而研究该医药品的反应性。此处,治疗的最优化包括例如:用法容量的确定、给药中止的判断、使用何种变应原成分来确认是否获得免疫耐受。
本发明还提供包含上述(1)~(3)、(4)~(10)抗原的至少一种的蛋变态反应的诊断用组合物。本发明的诊断用组合物可以用于下述的诊断方法中。本发明的诊断用组合物还可以根据需要包含通常与本发明的抗原一起使用的、药学上允许的载体、添加剂。
一方式中,本发明为诊断对象的蛋变态反应的方法,其包括以下工序:
(i)使由对象得到的试样与抗原接触;
(ii)对由对象得到的试样中的IgE抗体与该抗原的结合进行检测;
(iii)检测到对象的IgE抗体与该抗原结合的情况下,判断对象为蛋变态反应;
此处,该抗原为作为上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原而限定的蛋白质的至少一种。其中,(i)和(ii)的各工序按照对于提供用于诊断蛋变态反应指标的方法的各工序的说明来进行。
在另一个方式中,本发明提供诊断对象的蛋变态反应的方法,其包括对对象给予上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种。该方法也可以以特征在于对皮肤施用抗原的皮肤测试的形式进行。皮肤测试中包含如下形式:对皮肤上施用诊断用组合物之后、以不出血程度地轻微抓伤,使皮肤浸透抗原再观察皮肤反应的点刺试验(prick test);施用了诊断用组合物的基础上轻挠皮肤再观察反应的划痕试验(scratch test);对皮肤施用霜、软膏等形式的诊断用组合物再观察反应的肤斑试验(Patch test);对皮内给予抗原再观察反应的皮内测试;等。在施用了抗原部分的皮肤出现肿胀等皮肤反应的情况下,诊断为该对象具有蛋变态反应。此处,对皮肤施用的抗原的量也可以为例如每1次100μg以下的用量。
在变态反应的诊断中,经常进行的是以限定抗原为目的的负荷试验。上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种可以作为诊断蛋变态反应的负荷试验的有效成分来使用。此处,作为负荷试验中使用的抗原蛋白质,可以为表达纯化的蛋白质,也可以为例如在稻子中转化杉木花粉抗原的基因,并且在米内使该抗原蛋白质表达的花粉米那样的、在食品/食材中表达的蛋白质。
另外,在另一个方式中,本发明提供蛋变态反应的诊断中使用的上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种。此处,也包含将上述(1)~(3)、(4)~(10)抗原的至少一种与已知的抗原混合来提供。
进而在另一个实施方式中,本发明提供上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种在制备蛋变态反应的诊断药物中的应用。
药物组合物/治疗方法
本发明提供包含上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种的药物组合物。
一个方式中,上述的药物组合物用于治疗蛋变态反应。
本发明还提供治疗蛋变态反应的方法,其包括:对于需要治疗蛋变态反应的患者,给予上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一者。
在另一个方式中,本发明提供蛋变态反应的治疗中使用的上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种。进而在另一个实施方式中,本发明提供上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种在制备蛋变态反应的治疗药物中的应用。
在变态反应的治疗中,经常进行的是目的在于通过对患者给予抗原来诱导免疫耐受的、脱敏治疗法。上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种可以作为治疗蛋变态反应的脱敏治疗法的有效成分来使用。此处,作为脱敏治疗法中使用的抗原蛋白质,可以为表达纯化的蛋白质,也可以为例如在稻子中转化杉木花粉抗原的基因,并且在米内使该抗原蛋白质表达的花粉米那样的、在食品/食材中表达的蛋白质。
本发明的药物组合物可以通过通常的给药途径进行给药。通常的给药途径包括例如:经口、舌下、经皮、皮内、皮下、血液内、鼻腔内、肌肉内、腹腔内、直肠内的给药。
本发明的药物组合物可以使用根据需要与本发明的抗原一起通过常规方法添加了通常使用的药学上允许的佐剂、赋形剂、或者各种添加剂(例如稳定剂、助溶剂、乳浊化剂、缓冲剂、储存剂、着色剂等)而成的药物组合物。药物组合物的剂型可以由本领域技术人员根据给药途径而适宜选择。也可以是例如:片剂、胶囊剂、糖浆剂、舌下片、注射剂、鼻腔内喷雾剂、膏剂、溶液剂、霜剤、露剂等形式。本发明的药物组合物的给药量、给药次数和/或给药期间可以由医师根据给药途径、症状、年龄、体重等患者的特性等适宜选择。例如是成人的情况下,也可以以每1次100μg以下的用量给药。给药间隔可以是例如每天1次、每周1次、每月2次或者3个月1次左右。给药期间可以为例如数周~数年。在给药期间内,也可以是梯度地增加给药量的给药方法。
检测仪
本发明提供一种检测仪,其包含针对上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种的抗体。
该抗体可以通过常规方法来制作。例如,对兔子等哺乳动物用上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原进行免疫来制作。该抗体可以为IgE抗体、多克隆抗体、单克隆抗体、或者它们的抗原结合片段(例如、Fab、F(ab’)2、Fab’)。
另外,上述检测仪中,该抗体可以以与载体结合的形式提供。载体只要是在抗体与抗原结合的检测中能够利用的载体,就没有特别的限定。可以利用本领域技术人员公知的任意载体。
作为用于检查是否含有抗原的方法,可列举出例如以下的方法。
·使包含制作的IgE抗体的检测仪与由食品/食材等得到的试样接触,例如使用ELISA法等检测该IgE抗体与试样中的抗原的结合,在检测到该IgE抗体与抗原结合的情况下,判断为对象食品/食材等中残留有该抗原的方法等。
·使滤纸等包裹食品/食材,使之与抗体溶液反应来检测其中所包含的抗原的方法。
本发明另外的实施方式中包含用于判断对象物中有无蛋变态反应的抗原的检测仪,其特征在于,其包含具有与序列号1、12、17、46、58、105、151、236、250或261所示的碱基序列的至少一个部分互补的碱基序列的引物。非限定地,上述引物具有例如:与序列号1、12、17、46、58、105、151、236、250或261所示的碱基序列的至少一个序列的一部分3’末端或中央部分的序列的、优选12个碱基、15个碱基、20个碱基、25个碱基互补的碱基序列。特别是在将mRNA作为对象的情况下,具有Poly(A)tail(多腺嘌呤尾)的互补引物。在优选的方式中,包含上述引物的检测仪进一步包含含有序列号1、12、17、46、58、105、151、236、250或261所示的碱基序列的至少一个序列的5’末端部分的碱基序列、优选由12个碱基、15个碱基、20个碱基、25个碱基构成的碱基序列的引物。
例如,以由蛋或鸟得到的DNA或mRNA作为模板、使用所述互补的引物,用包含RT-PCR的PCR(聚合酶链式反应,Polymerase Chain Reaction)对cDNA进行扩增,将所扩增的cDNA的序列与序列号1、12、17、46、58、105、151、236、250或261进行比较,从而判断抗原的有无。用PCR进行扩增的方法可例示出RACE法等。此时,在扩增的cDNA与序列号1、12、17、46、58、105、151、236、250或261的比较中,编码相同氨基酸的点突变存在的情况下;或者、扩增的cDNA的碱基序列中即便存在有对于序列号1、12、17、46、58、105、151、236、250或261的碱基序列的碱基插入、缺失、置换或添加时,编码该cDNA的氨基酸序列相对于序列号2、13、18、47、59、106、152、237、251或262的氨基酸序列的同一性为70%以上、优选为80、90、95、98、99%以上时,判断为抗原存在。
一个方式中,上述检测仪可以用来检测在食材(蛋或鸟)中或食品生产线中等对象物中是否含有抗原。上述检测仪可以由制造业者用在生产线和出厂前产品的质量检查;也可以由品尝者自己用来检查对象食品/食材是否含有抗原。
去除抗原的食品等
本发明提供特征在于去除或降低了上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种的蛋、蛋加工品或者产生该蛋或由该蛋孵化的鸟。
对于蛋、蛋加工品或者产生该蛋或由该蛋孵化的鸟而言,对于本发明的去除或降低抗原的方法没有限定。抗原的去除或降低不限定于本发明抗原的去除或降低,可以使用任意的方法来进行。
例如,去除或降低了本发明抗原的蛋可以使用基因敲除技术来制备本发明的抗原的表达被敲除了的蛋。
基因敲除技术可以使用本领域技术人员公知的方法的任一项。例如,Oishi,etal.(Scientific Reports,Vol.6,Article number:23980,2016,doi:10.1038/srep23980)记载了作为基因组编辑技术的、将CRISPER/Cas9应用于鸡的原始生殖细胞,从而得到卵类黏蛋白(Ovomucoid)基因缺失个体。也可以利用同样的方法得到本发明的去除了抗原的蛋。另外,也可以与不含有抗原或抗原含量少的鸟或蛋通过人工授精进行交配,从而得到本发明的去除/降低了抗原的鸟或蛋。鸟或蛋的人工交配可以通过常规方法进行。
本发明的去除或降低了抗原的蛋加工品也可以是以去除或降低了本发明抗原的蛋作为原料的加工品。将通常的蛋作为原料的情况下,在蛋加工品的制备前或制备后进行本发明的去除或降低抗原的处理。在以通常的蛋作为原料的蛋加工品中,作为本发明的去除或降低抗原的方法,可列举出:高压处理和利用中性盐溶液的洗脱、高温蒸汽等去除食品/食材中的蛋白质成分的方法;通过热处理和酸处理进行水解、变性、氨基酸变性(侧链的化学修饰/脱离等)的方法。
本发明的去除或降低了抗原的鸟也可以是由去除或降低了本发明抗原的蛋孵化、成长的鸟。鸟包括雏鸟、幼鸟、少鸟、成鸟和老鸟的各成长阶段的鸟。本说明书中,鸟是指属于鸟类的动物、优选为鸡。
去除抗原的蛋加工品的制造方法
本发明为去除或降低了抗原的蛋加工品的制造方法,其具有如下步骤:在该加工品的制造过程中确认抗原被去除或降低了,
此处,该抗原是上述(1)~(3)、(4)~(10)的抗原的至少一种。
去除或降低了抗原的蛋加工品的制造过程中,确认去除或降低了抗原的步骤可以通过上述“检测仪”的项目中记载的方法确认是否含有抗原来进行。
另外,去除或降低了抗原的蛋加工品的制造可以通过上述“去除抗原的食品等”项目中记载的方法来进行。
实施例
以下,对于本发明的实施例进行说明。本发明的技术范围不限定于这些实施例。
实施例1:蛋白质图谱的确认
使用下述二维电泳方法,检测蛋所包含的蛋白质。
蛋白质的提取
将生的鸡蛋分为蛋白和蛋黄。
蛋白和蛋黄中所包含的蛋白质的提取和纯化如下进行。向蛋白中加入增溶剂而提取蛋白质之后,添加水或尿素缓冲液而得到蛋白质提取液。尿素缓冲液的组成如下。
30mM Tris
2M硫脲
7M尿素
4%(w/v)CHAPS:
3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐
适量的稀盐酸
加入蒸馏水将整体调节为100mL。pH为8.5。
之后,以蛋白质重量计各混合25μg来得到提取液。向蛋黄中添加表面活性剂缓冲液(Mammalian Lysis Buffer(MCLI),SIGMA公司)作为增溶剂来提取蛋白质。
之后,使用2D-CleanUP试剂盒(GE公司制)进行2次沉淀操作。第1次的沉淀操作向回收的上述蛋白质提取液中加入TCA(三氯乙酸)进行沉淀,对该操作所产生的沉淀(TCA沉淀)进行回收。第2次沉淀操作通过向回收的前述TCA沉淀中加入丙酮进行沉淀,对该操作得到的沉淀(被检体)进行回收。
被检体溶液的制备
将得到的被检体的一部分(以蛋白质重量计50μg)溶解于第一维等电点电泳用凝胶的溶胀用缓冲液DeStreak Rehydration Solution(GE公司制)150μl中,作为第一维等电点电泳用的被检体溶液(溶胀用被检体溶液)。DeStreak Rehydration Solution的组成如下。
7M硫脲
2M尿素
4%(w/v)CHAPS
0.5%(v/v)IPG缓冲液;GE公司制
适量的BPB(溴酚蓝)
被检体向第一维等电点电泳用凝胶的浸透
将第一维等电点电泳用凝胶(GE公司制:IPG凝胶Immobiline Drystrip(pH3-10NL))浸渍于前述的第一维等电点电泳用的被检体溶液(膨張用被检体溶液)140μl中,在室温下使之浸透一晚。
本实施例中,作为电泳仪使用GE公司制的IPGphor。
泳道中填满了硅油。在浸透了被检体的凝胶两端设置被水润湿的滤纸,以凝胶被硅油覆盖的方式设置于泳道,在与凝胶之间以夹着该滤纸的状态设置电极。
将等电点电泳仪电流值的上限设定为每1根凝胶75μA,将电压程序如下进行设置:(1)以300V恒定电压升压至750Vhr为止,从而进行恒定电压工序(该工序结束前的泳动30分钟的电流変化幅度为5μA);(2)缓缓地使电压从300Vhr升压至1000V为止;(3)进一步,缓缓地使电压从4500Vhr升压至5000V为止;(4)之后,以5000V恒定电压直至Vhr成为12000,进行第一维的等电点电泳。
等电点电泳凝胶的SDS平衡化
进行了上述第一维等电点电泳之后,从等电点电泳仪将凝胶卸下,在包含还原剂的平衡化缓冲液中浸渍该凝胶,在室温下振荡15分钟。上述包含还原剂的平衡化缓冲液的组成如下。
100mM Tris-HCl(pH8.0)
6M尿素
30%(v/v)甘油
2%(w/v)SDS
1%(w/v)DTT
接着,去除上述包含还原剂的平衡化缓冲液,使凝胶浸渍于包含烷基化剂的平衡化缓冲液中,在室温下振荡15分钟,得到进行了SDS平衡化的凝胶。上述包含烷基化剂的平衡化缓冲液的组成如下。
100mM Tris-HCl(pH8.0)
6M尿素
30%(v/v)甘油
2%(w/v)SDS
2.5%(w/v)碘乙酰胺
第二维的SDS-PAGE
本实施例中,作为电泳仪使用Life technologies公司制的XCell SureLockMini-Cell。第二维泳动用凝胶使用Life technologies公司制NuPAGE 4-12%Bis-TrisGels。另外,制备以下的组成的泳动用缓冲液并使用。
50mM MOPS
50mM Tris碱
0.1%(w/v)SDS
1mM EDTA
另外,本实施例中,使用在泳动用缓冲液中溶解0.5%(w/v)的琼脂糖S(NIPPONGENE CO.,LTD制)和适量的BPB(溴酚蓝)而成的粘接用琼脂糖溶液。
将SDS-PAGE的孔中充分地用上述泳动用缓冲液进行清洗之后,去除该洗涤中使用的缓冲液。接着,向孔中添加充分溶解的粘接用琼脂糖溶液。接着,使进行了SDS平衡化的凝胶浸渍于琼脂糖中,用镊子使进行了SDS平衡化的凝胶与第二维泳动用凝胶密合。在该两凝胶密合的状态下确认到琼脂糖充分地凝固,以200V恒定电压进行约45分钟泳动。
凝胶的荧光染色
使用SYPRO Ruby(Life technologies公司制)进行凝胶的荧光染色。
首先,将所使用的密闭容器事先用98%(v/v)的乙醇充分地进行清洗。进行2次如下处理:从SDS-PAGE仪器将泳动后的第二维泳动用凝胶卸下,放置于洗净的密闭容器中,在含有50%(v/v)甲醇和7%(v/v)乙酸的水溶液中浸渍30分钟的处理。之后,将该水溶液置换为水,浸渍10分钟。接着,将第二维泳动用凝胶浸渍于40ml的SYPRO Ruby中,在室温下振荡一晩。接着,去除SYPRO Ruby,将第二维泳动用凝胶用水洗涤之后,用含有10%(v/v)甲醇和7%(v/v)乙酸的水溶液振荡30分钟。进一步,将该水溶液置换为水,振荡30分以上。
解析
将实施了上述一系列处理的第二维泳动用凝胶供于使用了Typhoon9400(GE公司制)的荧光图像的扫描中。对于蛋黄所包含的蛋白质,将2维电泳的结果示于图1中(对于蛋白的结果没有显示)。凝胶的照片的左侧可见分子量标记物的带,带的位置表示特定的分子量(KDa)。
实施例2:用免疫印迹确认抗原(1)
用免疫印迹确认抗原是如下进行的:将实施例1中记载的步骤进行至“第二维的SDS-PAGE”为止,之后进行以下的“向膜的转印”、“免疫印迹”、“解析”的操作。
向膜的转印
向膜的转印使用以下的转印装置和转印用缓冲液进行。
转印装置:XCell SureLock Mini-Cell和XCell II blot module(Lifetechnologies公司制)
转印用缓冲液:将NuPAGE transfer缓冲液(×20)(Life technologies公司制)用milliQ水稀释20倍然后使用。
具体而言,按照以下的步骤,将二维电泳凝胶中的蛋白质转印到膜(PVDF膜)。
(1)将PVDF膜浸渍于100%甲醇中,然后浸渍于milliQ水中,然后转移至转印用缓冲液中,进行PVDF膜的亲水化处理。
(2)按照海绵、滤纸、第二维SDS-PAGE结束后的凝胶、亲水化处理后的PVDF膜、滤纸、海绵的顺序进行设置,在转印装置中、30V恒定电压下通电1小时。
免疫印迹
作为第一抗体使用具有蛋变态反应的患者(患者1)的血清或者非蛋变态反应被检者血清进行膜的免疫印迹。该蛋变态反应的患者是被诊断为由鸡蛋导致的食物依赖性运动引起的变态反应症(FDEIA)的患者。需要说明的是,对于该患者而言,在穿刺试验中,生的蛋、煮蛋和温泉蛋均显示为阴性;在特异的IgE抗体检查中,对于蛋白、蛋黄、卵类黏蛋白显示为阴性。
膜的免疫印迹按照以下的步骤进行。
(1)将转印的膜在5%脱脂奶/PBST溶液(包含0.1%非离子表面活性剂Tween 20的PBS缓冲液)中、室温下振荡1小时。
(2)作为第一抗体,在5%血清/5%脱脂奶/PBST溶液中、室温下静置1小时。
(3)用PBST溶液进行洗涤(5分钟×3次)。
(4)作为第二抗体将抗人IgE-HRP(西洋山葵过氧化酶)在用5%脱脂奶/PBST溶液稀释了5000倍的溶液中、室温下静置1小时。
(5)用PBST溶液进行洗涤(5分钟×3次)。
(6)在Pierce Western Blotting Substrate Plus(Thermo公司制)中静置5分钟。
解析
将实施了上述一系列处理的膜供于使用了Typhoon9500(GE公司制)的荧光图像的扫描中。
将使用了蛋变态反应患者血清的免疫印迹与作为对照的使用了非蛋变态反应被检者血清的免疫印迹进行比较。对于生的蛋黄所包含的蛋白质使用了蛋变态反应患者血清的免疫印迹(图2)中,与使用了非蛋变态反应被检者的血清的情况不同,并且检测到与公知的鸡蛋变应原蛋白质不同的3个斑点。
上述3个斑点的分子量和等电点分别如下(图3)。
斑点1:分子量20~40kDa、pI4.0~10.0
斑点2:分子量30~60kDa、pI5.0~10.0
斑点3:分子量35~60kDa、pI5.0~10.0
实施例3:质谱分析和抗原的鉴定(1)
对于实施例2的产生3个斑点的抗原,利用质谱分析进行氨基酸序列的鉴定。
具体而言,按照以下的步骤进行蛋白质的提取和质谱分析。
(1)对于生的鸡蛋的蛋黄,按照实施例1和2的步骤进行蛋白质提取、2维电泳和膜转印,用0.008%直接蓝(direct blue)/40%乙醇/10%乙酸进行振荡而染色。
(2)之后,用40%乙醇/10%乙酸进行5分钟的处理3次进行脱色,用水洗涤5分钟之后进行风干。
(3)将目标的斑点用干净的裁刀切取,加入至离心试管中。用50μL的甲醇进行膜亲水处理之后,用100μL的水洗涤2次之后离心除去,加入20μL的20mM NH4HCO3·50%乙腈。
(4)加入1pmol/μL赖氨酸-肽链内切酶(WAKO)1μL,在37℃下静置60分钟之后,将溶液回收至新的离心试管中。对膜加入20μL的20mM NH4HCO3·70%乙腈,在室温下浸渍10分钟,进一步进行回收。用0.1%甲酸、4%乙腈10μL溶解,转移至试管中。
(5)对回收的溶液进行减压干燥之后,用A液(0.1%甲酸、4%乙腈溶液)15μl进行溶解,进行质谱分析(ESI-TOF6600,AB Sciex公司制)。
(6)基于由质谱仪得到的质谱数据的蛋白质鉴定通过搜索NCBI或UniProt来进行。
结果
对于各斑点进行了质谱分析的结果,检测到以下的氨基酸序列。
斑点1:序列号3~11所示的氨基酸序列
斑点2:序列号9~11、14、16所示的氨基酸序列
斑点3:序列号19~45所示的氨基酸序列
进一步,对于各斑点,针对斑点1和斑点2,将由质谱仪得到的质谱数据用NCBI进行解析;针对斑点3,将由质谱仪得到的质谱数据用UniProt进行解析,结果鉴定出各斑点为以下的蛋白质。
斑点1:卵黄原蛋白-3(Vitellogenin-3)(氨基酸序列:NCBI登陆号XP_015146355、编码其的碱基序列:GenBank登陆号XM_015290869.1)的C末端部分(氨基酸序列:序列号2、编码其的碱基序列:序列号1)
斑点2:卵黄原蛋白-3(Vitellogenin-3)(氨基酸序列:NCBI登陆号XP_015146355、编码其的碱基序列:GenBank登陆号XM_015290869.1)的C末端部分(氨基酸序列:序列号13、编码其的碱基序列:序列号12)
斑点3:卵黄原蛋白-1(Vitellogenin-1)(氨基酸序列:UniProt登录号P87498、编码其的碱基序列:ENA(EMBL)登录号D89547.1)的中央部分、或者、卵黄脂磷蛋白-1(Lipovitellin-1)的C末端部分(氨基酸序列:序列号18、编码其的碱基序列:序列号17)
实施例4:用免疫印迹确认抗原(2)
与实施例2同样地,使用別的蛋变态反应患者3名(患者2、患者3、患者4)的血清,用免疫印迹进行抗原确认。对于生的蛋黄所包含的蛋白质使用了蛋变态反应患者血清的免疫印迹(对于患者2是图4、对于患者3是图5、对于患者4是图6)中,与使用了非蛋变态反应被检者的血清的情况不同,并且检测到与公知的鸡蛋变应原蛋白质不同的斑点。具体而言,对于患者2检测到斑点4~8;对于患者3检测到斑点9和10;对于患者4检测到斑点11。
上述斑点4~11的分子量和等电点分别如下(图4~6)。
斑点4:分子量20~50kDa、pI3.0~8.0
斑点5、6:分子量80~260kDa、pI1.0~8.0
斑点7:分子量110~300kDa、pI3.0~8.0
斑点8:分子量160~550kDa、pI3.0~8.0
斑点9:分子量20~50kDa、pI7.0~11.0
斑点10:分子量20~50kDa、pI7.0~11.0
斑点11:分子量15~40kDa、pI6.0~11.0
实施例5:质谱分析和抗原的鉴定(2)
与实施例3同样地,对于实施例4的产生斑点4~11的抗原,利用质谱分析进行氨基酸序列的鉴定。
对于各斑点进行了质谱分析的结果,检测到以下的氨基酸序列。
斑点4:序列号48~57所示的氨基酸序列
斑点5、6:序列号60~104所示的氨基酸序列
斑点7:序列号107~150所示的氨基酸序列
斑点8:序列号153~235所示的氨基酸序列
斑点9:序列号238~249所示的氨基酸序列
斑点10:序列号252~260所示的氨基酸序列
斑点11:序列号263~271所示的氨基酸序列
进一步,对于各斑点,将由质谱仪得到的质谱数据用NCBI进行解析的结果,鉴定出各斑点为以下的蛋白质。
斑点4:卵黄原蛋白-3(Vitellogenin-3)(氨基酸序列:NCBI登陆号XP_015146355、编码其的碱基序列:GenBank登陆号XM_015290869.1)(氨基酸序列:序列号47、编码其的碱基序列:序列号46)
斑点5、6:卵黄原蛋白-2前体(Vitellogenin-2 precursor)(氨基酸序列:NCBI登录号NP_001026447.1、编码其的碱基序列:GenBank登录号NM_001031276.1)(氨基酸序列:序列号59、编码其的碱基序列:序列号58)
斑点7:卵黄原蛋白-2前体(Vitellogenin-2 precursor)(氨基酸序列:NCBI登录号NP_001026447.1、编码其的碱基序列:GenBank登录号NM_001031276.1)(氨基酸序列:序列号106、编码其的碱基序列:序列号105)
斑点8:载脂蛋白B前体(Apolipoprotein B precursor)(氨基酸序列:NCBI登录号NP_001038098.1、编码其的碱基序列:GenBank登录号NM_001044633.1)(氨基酸序列:序列号152、编码其的碱基序列:序列号151)
斑点9:载脂蛋白B前体(Apolipoprotein B precursor)(氨基酸序列:NCBI登录号NP_001038098.1、编码其的碱基序列:GenBank登录号NM_001044633.1)(氨基酸序列:序列号237、编码其的碱基序列:序列号236)
斑点10:载脂蛋白B前体(Apolipoprotein B precursor)(氨基酸序列:NCBI登录号NP_001038098.1、编码其的碱基序列:GenBank登录号NM_001044633.1)(氨基酸序列:序列号251、编码其的碱基序列:序列号250)
斑点11:卵黄原蛋白-2前体(Vitellogenin-2 precursor)(氨基酸序列:NCBI登录号NP_001026447.1、编码其的碱基序列:GenBank登录号NM_001031276.1)(氨基酸序列:序列号262、编码其的碱基序列:序列号261)
产业上的可利用性
本发明提供蛋变态反应的新型抗原、蛋变态反应的诊断方法和诊断试剂盒、包含该抗原的药物组合物、去除或降低了该抗原的蛋或蛋加工品或者产生该蛋或由该蛋孵化的鸟、以及去除或降低了该抗原的蛋加工品的制造方法。本发明还能够提供用于判断对象物中有无蛋抗原的检测仪。
序列表
<110> 学校法人藤田学园((FUJITA ACADEMY)
朋友股份有限公司(Hoyu Co., Ltd.)
<120> 蛋变态反应的抗原
<130> FA1621-17012
<150> JP 2016-111308
<151> 2016-06-02
<160> 271
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 831
<212> DNA
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 1
tcaatcattg aaaaccttaa agctcgttgt tcagtttcac aaaatatgat aacaaccttc 60
aatggagttg agtttaacta ttcaatgcct gcaaattgct accacatctt ggcacaggat 120
tgtagtccag aactgaagtt cctggtaatg atgaaaagac ttggagaatc tgctgatctc 180
acagcaataa gtgtcagact tgccagccat gaggttgaca tgtatgtttc caatggacta 240
atccagctga agattaatgg tgttcaaacc ccaacagacg ttccatacac atctaagtct 300
ggtctgctga taagcagtga gaaggaaggt ttgtcattaa aagcccctga atatggtgta 360
gaaaaactat attacgatag acgtaaactt gagattcggg ttgctttctg gatggttgga 420
aaaacatgtg gtatttgtgg aaaatatgat gctgagaaga aaagggagta tcaaatgccc 480
agtggatatt tagctaaaga tgcagtgagt tttgctcagt cctgggtcat ctcagaagac 540
acgtgtactg gagcttgcaa gctgcagagg aaatttgtca aaattgagaa gccggttgca 600
tttaacaaaa aggcctcaaa atgcttttcc attgagccag ttttacgctg tgcagaaggc 660
tgttcagcaa ccaggactgt tcctgtctct gtgggtttcc actgtgtccc atctgactcc 720
acactcgagc tggaggaaga gcaggtgagg ttagaccaga agtctgagga cttggtgagc 780
agggtcgatg cccatacggc gtgttcctgc gcccagcagc tgtgctcagc g 831
<210> 2
<211> 277
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 2
Ser Ile Ile Glu Asn Leu Lys Ala Arg Cys Ser Val Ser Gln Asn Met
1 5 10 15
Ile Thr Thr Phe Asn Gly Val Glu Phe Asn Tyr Ser Met Pro Ala Asn
20 25 30
Cys Tyr His Ile Leu Ala Gln Asp Cys Ser Pro Glu Leu Lys Phe Leu
35 40 45
Val Met Met Lys Arg Leu Gly Glu Ser Ala Asp Leu Thr Ala Ile Ser
50 55 60
Val Arg Leu Ala Ser His Glu Val Asp Met Tyr Val Ser Asn Gly Leu
65 70 75 80
Ile Gln Leu Lys Ile Asn Gly Val Gln Thr Pro Thr Asp Val Pro Tyr
85 90 95
Thr Ser Lys Ser Gly Leu Leu Ile Ser Ser Glu Lys Glu Gly Leu Ser
100 105 110
Leu Lys Ala Pro Glu Tyr Gly Val Glu Lys Leu Tyr Tyr Asp Arg Arg
115 120 125
Lys Leu Glu Ile Arg Val Ala Phe Trp Met Val Gly Lys Thr Cys Gly
130 135 140
Ile Cys Gly Lys Tyr Asp Ala Glu Lys Lys Arg Glu Tyr Gln Met Pro
145 150 155 160
Ser Gly Tyr Leu Ala Lys Asp Ala Val Ser Phe Ala Gln Ser Trp Val
165 170 175
Ile Ser Glu Asp Thr Cys Thr Gly Ala Cys Lys Leu Gln Arg Lys Phe
180 185 190
Val Lys Ile Glu Lys Pro Val Ala Phe Asn Lys Lys Ala Ser Lys Cys
195 200 205
Phe Ser Ile Glu Pro Val Leu Arg Cys Ala Glu Gly Cys Ser Ala Thr
210 215 220
Arg Thr Val Pro Val Ser Val Gly Phe His Cys Val Pro Ser Asp Ser
225 230 235 240
Thr Leu Glu Leu Glu Glu Glu Gln Val Arg Leu Asp Gln Lys Ser Glu
245 250 255
Asp Leu Val Ser Arg Val Asp Ala His Thr Ala Cys Ser Cys Ala Gln
260 265 270
Gln Leu Cys Ser Ala
275
<210> 3
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 3
Ala Pro Glu Tyr Gly Val Glu Lys
1 5
<210> 4
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 4
Gly Val Gln Thr Pro Thr Asp Val Pro Tyr Thr Ser Lys
1 5 10
<210> 5
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 5
Ile Glu Lys Pro Val Ala Phe Asn
1 5
<210> 6
<211> 5
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 6
Pro Val Ala Phe Asn
1 5
<210> 7
<211> 6
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 7
Ser Ile Ile Glu Asn Leu
1 5
<210> 8
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 8
Ile Glu Lys Pro Val Ala Phe Asn Lys
1 5
<210> 9
<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 9
Ile Asn Gly Val Gln Thr Pro Thr Asp Val Pro Tyr Thr Ser Lys
1 5 10 15
<210> 10
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 10
Leu Gly Glu Ser Ala Asp Leu Thr Ala Ile Ser Val Arg
1 5 10
<210> 11
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 11
Arg Leu Gly Glu Ser Ala Asp Leu Thr Ala Ile Ser Val Arg
1 5 10
<210> 12
<211> 1314
<212> DNA
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 12
gtgcaggtgt ttgtttcaag catcacagaa tcagataggt ggaaactctg tgctgatgct 60
tcagtagtaa attcccataa agcatcgggt acccttaaat ggggtaaaga ttgccaggac 120
tatcaggttg ctactcagat tgcaacaggg caatttgctg cacacccggc tatacaggtg 180
aagctggagt ggtcagaagt gccttcaagt gtccgaaaaa ctgccagatg gttctacaca 240
tatcttccag gagctgcgta tatgcttggc tactcccaga agcagcagcg tggtccttct 300
caccaggcag ccatggtgat ggctctgacg tctccaagaa cctgcgatgt ggtcctgaag 360
ctacctgagc tcacagttta caacagagcc atcaggcttc ccctgccact cccttcaagt 420
tcagatacac caacctcaac actaccatcc tccaaatgga acgtctttta ccaagcagcc 480
ttttcaatca ttgaaaacct taaagctcgt tgttcagttt cacaaaatat gataacaacc 540
ttcaatggag ttgagtttaa ctattcaatg cctgcaaatt gctaccacat cttggcacag 600
gattgtagtc cagaactgaa gttcctggta atgatgaaaa gacttggaga atctgctgat 660
ctcacagcaa taagtgtcag acttgccagc catgaggttg acatgtatgt ttccaatgga 720
ctaatccagc tgaagattaa tggtgttcaa accccaacag acgttccata cacatctaag 780
tctggtctgc tgataagcag tgagaaggaa ggtttgtcat taaaagcccc tgaatatggt 840
gtagaaaaac tatattacga tagacgtaaa cttgagattc gggttgcttt ctggatggtt 900
ggaaaaacat gtggtatttg tggaaaatat gatgctgaga agaaaaggga gtatcaaatg 960
cccagtggat atttagctaa agatgcagtg agttttgctc agtcctgggt catctcagaa 1020
gacacgtgta ctggagcttg caagctgcag aggaaatttg tcaaaattga gaagccggtt 1080
gcatttaaca aaaaggcctc aaaatgcttt tccattgagc cagttttacg ctgtgcagaa 1140
ggctgttcag caaccaggac tgttcctgtc tctgtgggtt tccactgtgt cccatctgac 1200
tccacactcg agctggagga agagcaggtg aggttagacc agaagtctga ggacttggtg 1260
agcagggtcg atgcccatac ggcgtgttcc tgcgcccagc agctgtgctc agcg 1314
<210> 13
<211> 438
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 13
Val Gln Val Phe Val Ser Ser Ile Thr Glu Ser Asp Arg Trp Lys Leu
1 5 10 15
Cys Ala Asp Ala Ser Val Val Asn Ser His Lys Ala Ser Gly Thr Leu
20 25 30
Lys Trp Gly Lys Asp Cys Gln Asp Tyr Gln Val Ala Thr Gln Ile Ala
35 40 45
Thr Gly Gln Phe Ala Ala His Pro Ala Ile Gln Val Lys Leu Glu Trp
50 55 60
Ser Glu Val Pro Ser Ser Val Arg Lys Thr Ala Arg Trp Phe Tyr Thr
65 70 75 80
Tyr Leu Pro Gly Ala Ala Tyr Met Leu Gly Tyr Ser Gln Lys Gln Gln
85 90 95
Arg Gly Pro Ser His Gln Ala Ala Met Val Met Ala Leu Thr Ser Pro
100 105 110
Arg Thr Cys Asp Val Val Leu Lys Leu Pro Glu Leu Thr Val Tyr Asn
115 120 125
Arg Ala Ile Arg Leu Pro Leu Pro Leu Pro Ser Ser Ser Asp Thr Pro
130 135 140
Thr Ser Thr Leu Pro Ser Ser Lys Trp Asn Val Phe Tyr Gln Ala Ala
145 150 155 160
Phe Ser Ile Ile Glu Asn Leu Lys Ala Arg Cys Ser Val Ser Gln Asn
165 170 175
Met Ile Thr Thr Phe Asn Gly Val Glu Phe Asn Tyr Ser Met Pro Ala
180 185 190
Asn Cys Tyr His Ile Leu Ala Gln Asp Cys Ser Pro Glu Leu Lys Phe
195 200 205
Leu Val Met Met Lys Arg Leu Gly Glu Ser Ala Asp Leu Thr Ala Ile
210 215 220
Ser Val Arg Leu Ala Ser His Glu Val Asp Met Tyr Val Ser Asn Gly
225 230 235 240
Leu Ile Gln Leu Lys Ile Asn Gly Val Gln Thr Pro Thr Asp Val Pro
245 250 255
Tyr Thr Ser Lys Ser Gly Leu Leu Ile Ser Ser Glu Lys Glu Gly Leu
260 265 270
Ser Leu Lys Ala Pro Glu Tyr Gly Val Glu Lys Leu Tyr Tyr Asp Arg
275 280 285
Arg Lys Leu Glu Ile Arg Val Ala Phe Trp Met Val Gly Lys Thr Cys
290 295 300
Gly Ile Cys Gly Lys Tyr Asp Ala Glu Lys Lys Arg Glu Tyr Gln Met
305 310 315 320
Pro Ser Gly Tyr Leu Ala Lys Asp Ala Val Ser Phe Ala Gln Ser Trp
325 330 335
Val Ile Ser Glu Asp Thr Cys Thr Gly Ala Cys Lys Leu Gln Arg Lys
340 345 350
Phe Val Lys Ile Glu Lys Pro Val Ala Phe Asn Lys Lys Ala Ser Lys
355 360 365
Cys Phe Ser Ile Glu Pro Val Leu Arg Cys Ala Glu Gly Cys Ser Ala
370 375 380
Thr Arg Thr Val Pro Val Ser Val Gly Phe His Cys Val Pro Ser Asp
385 390 395 400
Ser Thr Leu Glu Leu Glu Glu Glu Gln Val Arg Leu Asp Gln Lys Ser
405 410 415
Glu Asp Leu Val Ser Arg Val Asp Ala His Thr Ala Cys Ser Cys Ala
420 425 430
Gln Gln Leu Cys Ser Ala
435
<210> 14
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 14
Leu Pro Glu Leu Thr Val Tyr Asn Arg
1 5
<210> 15
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 15
Leu Gly Glu Ser Ala Asp Leu Thr Ala Ile Ser Val Arg
1 5 10
<210> 16
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 16
Val Gln Val Phe Val Ser Ser Ile Thr Glu Ser Asp Arg
1 5 10
<210> 17
<211> 996
<212> DNA
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 17
gacaaacctt ttgcatcagg ttacttgaag atgtttggcc aggagttgct ctttggtaga 60
ctcgataaag acaccctcca aaatgtattg caggtatggt atggacctga tgaaaaaatc 120
ccttcaataa ggagattaat cagtagcctt caaactggca taggaagaca atggactaag 180
gctttactat tgtctgagat tcgttgtatt gtgcctacct gtgttgggtt cccgatggag 240
accagcttct attactcttc tgtcacaaaa gtggcaggaa acgttcaagc gcaaattaca 300
ccttcaccga ggtctgattt cagattgact gagttactaa attccaacgt taggctgcga 360
tccaaaatga gtctaagcat ggctaaacat atgacctttg taattgggat caacacaaac 420
atgatccagg cagggctgga agcacacacc aaagtaaatg ctcatgtacc tgtgaatgtt 480
gttgccacta ttcaaatgaa ggaaaaaagt atcaaagctg aaattccacc atgcaaagaa 540
gagactaact taattattgt aagctctaag acatttgctg ttacacgaaa tattgaagat 600
ttggctgcta gtaagatgac tccagttctt ctacctgaag cagtgcctga cataatgaag 660
atgtccttcg actcagattc tgcatcaggc gagactgata acatcaggga cagacagtct 720
gtagaagatg tttcgtctgg aaattccttc tcctttggac atccttcttc cgggaaggag 780
ccatttattc agtccatgtg ctccaacgca agtacatttg gggttcaagt gtgcattgag 840
aagaaaagtg tacatgcagc attcatcaga aatgtgcctc tttataacgc tattggagaa 900
catgccctta gaatgagctt caagccagtc tactcagatg tacctattga aaaaatacaa 960
gtcacaattc aagcaggaga tcaagctcct acaaaa 996
<210> 18
<211> 332
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 18
Asp Lys Pro Phe Ala Ser Gly Tyr Leu Lys Met Phe Gly Gln Glu Leu
1 5 10 15
Leu Phe Gly Arg Leu Asp Lys Asp Thr Leu Gln Asn Val Leu Gln Val
20 25 30
Trp Tyr Gly Pro Asp Glu Lys Ile Pro Ser Ile Arg Arg Leu Ile Ser
35 40 45
Ser Leu Gln Thr Gly Ile Gly Arg Gln Trp Thr Lys Ala Leu Leu Leu
50 55 60
Ser Glu Ile Arg Cys Ile Val Pro Thr Cys Val Gly Phe Pro Met Glu
65 70 75 80
Thr Ser Phe Tyr Tyr Ser Ser Val Thr Lys Val Ala Gly Asn Val Gln
85 90 95
Ala Gln Ile Thr Pro Ser Pro Arg Ser Asp Phe Arg Leu Thr Glu Leu
100 105 110
Leu Asn Ser Asn Val Arg Leu Arg Ser Lys Met Ser Leu Ser Met Ala
115 120 125
Lys His Met Thr Phe Val Ile Gly Ile Asn Thr Asn Met Ile Gln Ala
130 135 140
Gly Leu Glu Ala His Thr Lys Val Asn Ala His Val Pro Val Asn Val
145 150 155 160
Val Ala Thr Ile Gln Met Lys Glu Lys Ser Ile Lys Ala Glu Ile Pro
165 170 175
Pro Cys Lys Glu Glu Thr Asn Leu Ile Ile Val Ser Ser Lys Thr Phe
180 185 190
Ala Val Thr Arg Asn Ile Glu Asp Leu Ala Ala Ser Lys Met Thr Pro
195 200 205
Val Leu Leu Pro Glu Ala Val Pro Asp Ile Met Lys Met Ser Phe Asp
210 215 220
Ser Asp Ser Ala Ser Gly Glu Thr Asp Asn Ile Arg Asp Arg Gln Ser
225 230 235 240
Val Glu Asp Val Ser Ser Gly Asn Ser Phe Ser Phe Gly His Pro Ser
245 250 255
Ser Gly Lys Glu Pro Phe Ile Gln Ser Met Cys Ser Asn Ala Ser Thr
260 265 270
Phe Gly Val Gln Val Cys Ile Glu Lys Lys Ser Val His Ala Ala Phe
275 280 285
Ile Arg Asn Val Pro Leu Tyr Asn Ala Ile Gly Glu His Ala Leu Arg
290 295 300
Met Ser Phe Lys Pro Val Tyr Ser Asp Val Pro Ile Glu Lys Ile Gln
305 310 315 320
Val Thr Ile Gln Ala Gly Asp Gln Ala Pro Thr Lys
325 330
<210> 19
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 19
Ala Gly Asn Val Gln Ala Gln Ile Thr Pro Ser Pro Arg
1 5 10
<210> 20
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 20
Ala Leu Leu Leu Ser Glu Ile Arg
1 5
<210> 21
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 21
Asp Lys Pro Phe Ala Ser Gly Tyr
1 5
<210> 22
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 22
Asp Lys Pro Phe Ala Ser Gly Tyr Leu Lys
1 5 10
<210> 23
<211> 16
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 23
Asp Thr Leu Gln Asn Val Leu Gln Val Trp Tyr Gly Pro Asp Glu Lys
1 5 10 15
<210> 24
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 24
Glu Glu Thr Asn Leu Ile Ile Val Ser Ser Lys
1 5 10
<210> 25
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 25
Gly Asn Val Gln Ala Gln Ile Thr Pro Ser Pro Arg
1 5 10
<210> 26
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 26
Ile Gln Ala Gly Asp Gln Ala Pro Thr Lys
1 5 10
<210> 27
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 27
Ile Gln Val Thr Ile Gln Ala Gly Asp Gln Ala Pro Thr
1 5 10
<210> 28
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 28
Ile Gln Val Thr Ile Gln Ala Gly Asp Gln Ala Pro Thr Lys
1 5 10
<210> 29
<211> 20
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 29
Ile Thr Pro Ser Pro Arg Ser Asp Phe Arg Leu Thr Glu Leu Leu Asn
1 5 10 15
Ser Asn Val Arg
20
<210> 30
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 30
Lys Glu Glu Thr Asn Leu Ile Ile Val Ser Ser Lys
1 5 10
<210> 31
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 31
Lys Pro Val Tyr Ser Asp Val Pro Ile Glu Lys
1 5 10
<210> 32
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 32
Leu Asp Lys Asp Thr Leu Gln Asn
1 5
<210> 33
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 33
Leu Asp Lys Asp Thr Leu Gln Asn Val Leu Gln
1 5 10
<210> 34
<211> 19
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 34
Leu Asp Lys Asp Thr Leu Gln Asn Val Leu Gln Val Trp Tyr Gly Pro
1 5 10 15
Asp Glu Lys
<210> 35
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 35
Leu Ile Ser Ser Leu Gln Thr Gly Ile Gly Arg
1 5 10
<210> 36
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 36
Leu Thr Glu Leu Leu Asn Ser Asn
1 5
<210> 37
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 37
Leu Thr Glu Leu Leu Asn Ser Asn Val Arg
1 5 10
<210> 38
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 38
Asn Ile Glu Asp Leu Ala Ala Ser Lys
1 5
<210> 39
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 39
Asn Val Pro Leu Tyr Asn Ala Ile Gly Glu His Ala Leu Arg
1 5 10
<210> 40
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 40
Asn Val Gln Ala Gln Ile Thr Pro Ser Pro Arg
1 5 10
<210> 41
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 41
Pro Ser Ser Gly Lys Glu Pro Phe
1 5
<210> 42
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 42
Pro Val Tyr Ser Asp Val Pro Ile Glu Lys
1 5 10
<210> 43
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 43
Arg Leu Ile Ser Ser Leu Gln Thr Gly Ile Gly Arg
1 5 10
<210> 44
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 44
Ser Val His Ala Ala Phe Ile Arg
1 5
<210> 45
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 45
Val Gln Ala Gln Ile Thr Pro Ser Pro Arg
1 5 10
<210> 46
<211> 1023
<212> DNA
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 46
ggtccttctc accaggcagc catggtgatg gctctgacgt ctccaagaac ctgcgatgtg 60
gtcctgaagc tacctgagct cacagtttac aacagagcca tcaggcttcc cctgccactc 120
ccttcaagtt cagatacacc aacctcaaca ctaccatcct ccaaatggaa cgtcttttac 180
caagcagcct tttcaatcat tgaaaacctt aaagctcgtt gttcagtttc acaaaatatg 240
ataacaacct tcaatggagt tgagtttaac tattcaatgc ctgcaaattg ctaccacatc 300
ttggcacagg attgtagtcc agaactgaag ttcctggtaa tgatgaaaag acttggagaa 360
tctgctgatc tcacagcaat aagtgtcaga cttgccagcc atgaggttga catgtatgtt 420
tccaatggac taatccagct gaagattaat ggtgttcaaa ccccaacaga cgttccatac 480
acatctaagt ctggtctgct gataagcagt gagaaggaag gtttgtcatt aaaagcccct 540
gaatatggtg tagaaaaact atattacgat agacgtaaac ttgagattcg ggttgctttc 600
tggatggttg gaaaaacatg tggtatttgt ggaaaatatg atgctgagaa gaaaagggag 660
tatcaaatgc ccagtggata tttagctaaa gatgcagtga gttttgctca gtcctgggtc 720
atctcagaag acacgtgtac tggagcttgc aagctgcaga ggaaatttgt caaaattgag 780
aagccggttg catttaacaa aaaggcctca aaatgctttt ccattgagcc agttttacgc 840
tgtgcagaag gctgttcagc aaccaggact gttcctgtct ctgtgggttt ccactgtgtc 900
ccatctgact ccacactcga gctggaggaa gagcaggtga ggttagacca gaagtctgag 960
gacttggtga gcagggtcga tgcccatacg gcgtgttcct gcgcccagca gctgtgctca 1020
gcg 1023
<210> 47
<211> 341
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 47
Gly Pro Ser His Gln Ala Ala Met Val Met Ala Leu Thr Ser Pro Arg
1 5 10 15
Thr Cys Asp Val Val Leu Lys Leu Pro Glu Leu Thr Val Tyr Asn Arg
20 25 30
Ala Ile Arg Leu Pro Leu Pro Leu Pro Ser Ser Ser Asp Thr Pro Thr
35 40 45
Ser Thr Leu Pro Ser Ser Lys Trp Asn Val Phe Tyr Gln Ala Ala Phe
50 55 60
Ser Ile Ile Glu Asn Leu Lys Ala Arg Cys Ser Val Ser Gln Asn Met
65 70 75 80
Ile Thr Thr Phe Asn Gly Val Glu Phe Asn Tyr Ser Met Pro Ala Asn
85 90 95
Cys Tyr His Ile Leu Ala Gln Asp Cys Ser Pro Glu Leu Lys Phe Leu
100 105 110
Val Met Met Lys Arg Leu Gly Glu Ser Ala Asp Leu Thr Ala Ile Ser
115 120 125
Val Arg Leu Ala Ser His Glu Val Asp Met Tyr Val Ser Asn Gly Leu
130 135 140
Ile Gln Leu Lys Ile Asn Gly Val Gln Thr Pro Thr Asp Val Pro Tyr
145 150 155 160
Thr Ser Lys Ser Gly Leu Leu Ile Ser Ser Glu Lys Glu Gly Leu Ser
165 170 175
Leu Lys Ala Pro Glu Tyr Gly Val Glu Lys Leu Tyr Tyr Asp Arg Arg
180 185 190
Lys Leu Glu Ile Arg Val Ala Phe Trp Met Val Gly Lys Thr Cys Gly
195 200 205
Ile Cys Gly Lys Tyr Asp Ala Glu Lys Lys Arg Glu Tyr Gln Met Pro
210 215 220
Ser Gly Tyr Leu Ala Lys Asp Ala Val Ser Phe Ala Gln Ser Trp Val
225 230 235 240
Ile Ser Glu Asp Thr Cys Thr Gly Ala Cys Lys Leu Gln Arg Lys Phe
245 250 255
Val Lys Ile Glu Lys Pro Val Ala Phe Asn Lys Lys Ala Ser Lys Cys
260 265 270
Phe Ser Ile Glu Pro Val Leu Arg Cys Ala Glu Gly Cys Ser Ala Thr
275 280 285
Arg Thr Val Pro Val Ser Val Gly Phe His Cys Val Pro Ser Asp Ser
290 295 300
Thr Leu Glu Leu Glu Glu Glu Gln Val Arg Leu Asp Gln Lys Ser Glu
305 310 315 320
Asp Leu Val Ser Arg Val Asp Ala His Thr Ala Cys Ser Cys Ala Gln
325 330 335
Gln Leu Cys Ser Ala
340
<210> 48
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 48
Ala Pro Glu Tyr Gly Val Glu Lys
1 5
<210> 49
<211> 7
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 49
Ile Glu Lys Pro Val Ala Phe
1 5
<210> 50
<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 50
Ile Asn Gly Val Gln Thr Pro Thr Asp Val Pro Tyr Thr Ser Lys
1 5 10 15
<210> 51
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 51
Leu Gly Glu Ser Ala Asp Leu Thr Ala Ile Ser Val Arg
1 5 10
<210> 52
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 52
Leu Pro Glu Leu Thr Val Tyr Asn Arg
1 5
<210> 53
<211> 16
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 53
Leu Pro Leu Pro Leu Pro Ser Ser Ser Asp Thr Pro Thr Ser Thr Leu
1 5 10 15
<210> 54
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 54
Pro Ser Asp Ser Thr Leu Glu Leu Glu Glu Glu Gln
1 5 10
<210> 55
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 55
Ser Gly Leu Leu Ile Ser Ser Glu Lys
1 5
<210> 56
<211> 7
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 56
Ser Ile Glu Pro Val Leu Arg
1 5
<210> 57
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 57
Thr Val Pro Val Ser Val Gly Phe His
1 5
<210> 58
<211> 3363
<212> DNA
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 58
atgaggggga tcatactggc attagtgctc acccttgtag gcagccagaa gtttgacatt 60
gacccaggat tcaatagcag aaggagttac ctgtacaact atgaaggttc tatgttgaat 120
gggcttcaag acagaagttt gggcaaagct ggtgtgcgct tgagcagcaa gctagagatc 180
agtgggctac cagagaatgc ttacctcctc aaggtccgct ctccacaagt ggaggagtac 240
aatggggtct ggcccaggga tcccttcact cgatcttcca aaatcaccca agtgatctca 300
tcgtgtttca cccggctctt caaatttgaa tacagcagtg gacggatcgg aaacatttat 360
gccccagaag actgcccaga tctgtgtgtt aacatagtga gaggaatatt gaacatgttc 420
cagatgacca ttaaaaaatc acagaacgtc tacgaattac aagaggctgg aattggaggt 480
atttgtcatg caaggtatgt cattcaggaa gacaggaaga atagccgaat ctatgttacc 540
agaactgtgg acttgaataa ttgccaggaa aaggtgcaaa aaagcattgg aatggcttac 600
atctatccct gccctgtgga cgtgatgaaa gaaaggctca ccaaagggac caccgctttc 660
tcctacaagc tgaagcagtc agacagcggc acgctgatca cagatgtctc gtcgcggcag 720
gtgtatcaga tctccccatt caatgagccc actggggtgg ctgtcatgga agcaagacag 780
cagctcactt tggtcgaggt gagaagtgag cggggcagtg ccccagatgt ccccatgcag 840
aactatggca gccttcgcta ccgcttccca gccgtactgc cacagatgcc acttcagctg 900
atcaagacaa aaaaccctga gcaacggata gtagaaacgc tgcagcacat agtcctgaat 960
aaccaacaag atttccatga cgatgtttca tacagattct tagaggtggt ccagctttgc 1020
cggatagcaa atgctgacaa tcttgagtct atctggagac aagtttcaga taaacctcgt 1080
tacaggcgat ggctcctgag cgcagtttct gcgagtggca ccacagaaac actaaaattc 1140
cttaagaaca gaattcgcaa tgatgacctc aactacattc agacccttct aactgtttct 1200
ttgactcttc atttattgca agctgatgaa cacacacttc caatagcagc agatttaatg 1260
accagctctc gaattcagaa aaatcctgtg cttcagcaag tggcctgctt gggatatagc 1320
tctgtagtca acagatactg ctctcagacc tcagcatgtc ctaaggaagc tcttcagccc 1380
atccatgacc tggcagatga agcaatcagc aggggccgtg aagacaaaat gaaattagct 1440
ctaaagtgca ttggtaacat gggagaacca gccagcttaa agcgcatcct gaagttcctt 1500
ccaatatctt catccagtgc tgctgatatc ccagtccaca ttcagataga tgccataacg 1560
gccttgaaaa agatagcttg gaaggacccc aaaacagtgc agggctatct catccagatc 1620
cttgcagacc aatcacttcc ccctgaggtg cgaatgatgg cttgtgctgt tatctttgag 1680
acaaggcctg cccttgcttt gataacgact atagctaacg tggcaatgaa ggagagcaat 1740
atgcaagtgg ccagttttgt atattcccac atgaagtctt tgtcaaagag cagattgcca 1800
tttatgtaca acatatcttc cgcttgtaac attgccctta agctcctgtc ccccaaactg 1860
gacagtatga gctatcggta cagcaaggtc attcgagcag acacttactt tgataactat 1920
agagttggtg ctactggaga aatctttgtt gtgaacagcc caagaactat gttcccatca 1980
gcaataattt ccaaattgat ggcaaattct gcaggttcag tggctgatct ggtagaggtt 2040
ggcatccgag tggaaggcct cgcagatgtc ataatgaaaa gaaacatccc atttgctgaa 2100
tatcccacat acaagcagat aaaggagctt ggaaaagctc tgcagggatg gaaagagctg 2160
ccgacagaaa cccctttggt atcagcctac ttgaaaatac ttggccaaga agtggccttc 2220
atcaacatca acaaggaact cctgcaacag gtcatgaaga ctgtagtgga acctgctgat 2280
cgaaacgcag caataaagag aatcgccaac cagatccgca acagcattgc agggcagtgg 2340
acgcagccgg tgtggatggg agagctgcga tacgtggttc ccagctgtct cggcctgccg 2400
ctggagtacg ggtcctacac caccgccctg gcacgagctg cagtcagcgt tgagggaaag 2460
atgacgccgc ctttaaccgg agatttcaga ctttctcagt tgcttgaatc caccatgcag 2520
attcggtctg acttaaagcc cagtttatat gtgcatacag ttgcaacgat gggtgtcaac 2580
acagaatact ttcaacatgc tgttgaaatt caaggcgagg tccagacaag aatgccaatg 2640
aagtttgatg ccaagataga tgtgaaattg aaaaacctta agattgaaac gaacccatgc 2700
cgtgaggaaa ctgagatagt ggttggaaga cataaggctt ttgctgtatc aaggaacata 2760
ggagaactag gtgttgaaaa gaggacctca attctgccgg aagatgctcc attagatgtt 2820
acagaagaac ctttccaaac atcagagaga gcttccaggg aacacttcgc aatgcaaggg 2880
cctgacagca tgccaaggaa acagtcccat agttctcgag aagatcttcg ccgtagcaca 2940
ggaaaaagag cacataaacg agacatttgc ctcaaaatgc atcatattgg ttgccagctt 3000
tgcttttcca gaaggtcaag agatgccagt ttcatacaga atacgtattt gcacaaatta 3060
attggagaac atgaagctaa aatagttttg atgccagttc atacagatgc tgatattgac 3120
aaaattcagc tggagattca ggcaggatct agagcagctg ccagaataat tactgaggta 3180
aacccagagt ctgaggaaga ggatgaatca tctccatatg aggacattca agctaaactg 3240
aagaggattc taggcattga cagtatgttc aaggttgcaa acaaaacacg gcacccgaaa 3300
aatcgaccat ctaagaaagg aaacactgtg ctagcagagt ttgggacaga gcctgatgca 3360
aaa 3363
<210> 59
<211> 1121
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 59
Met Arg Gly Ile Ile Leu Ala Leu Val Leu Thr Leu Val Gly Ser Gln
1 5 10 15
Lys Phe Asp Ile Asp Pro Gly Phe Asn Ser Arg Arg Ser Tyr Leu Tyr
20 25 30
Asn Tyr Glu Gly Ser Met Leu Asn Gly Leu Gln Asp Arg Ser Leu Gly
35 40 45
Lys Ala Gly Val Arg Leu Ser Ser Lys Leu Glu Ile Ser Gly Leu Pro
50 55 60
Glu Asn Ala Tyr Leu Leu Lys Val Arg Ser Pro Gln Val Glu Glu Tyr
65 70 75 80
Asn Gly Val Trp Pro Arg Asp Pro Phe Thr Arg Ser Ser Lys Ile Thr
85 90 95
Gln Val Ile Ser Ser Cys Phe Thr Arg Leu Phe Lys Phe Glu Tyr Ser
100 105 110
Ser Gly Arg Ile Gly Asn Ile Tyr Ala Pro Glu Asp Cys Pro Asp Leu
115 120 125
Cys Val Asn Ile Val Arg Gly Ile Leu Asn Met Phe Gln Met Thr Ile
130 135 140
Lys Lys Ser Gln Asn Val Tyr Glu Leu Gln Glu Ala Gly Ile Gly Gly
145 150 155 160
Ile Cys His Ala Arg Tyr Val Ile Gln Glu Asp Arg Lys Asn Ser Arg
165 170 175
Ile Tyr Val Thr Arg Thr Val Asp Leu Asn Asn Cys Gln Glu Lys Val
180 185 190
Gln Lys Ser Ile Gly Met Ala Tyr Ile Tyr Pro Cys Pro Val Asp Val
195 200 205
Met Lys Glu Arg Leu Thr Lys Gly Thr Thr Ala Phe Ser Tyr Lys Leu
210 215 220
Lys Gln Ser Asp Ser Gly Thr Leu Ile Thr Asp Val Ser Ser Arg Gln
225 230 235 240
Val Tyr Gln Ile Ser Pro Phe Asn Glu Pro Thr Gly Val Ala Val Met
245 250 255
Glu Ala Arg Gln Gln Leu Thr Leu Val Glu Val Arg Ser Glu Arg Gly
260 265 270
Ser Ala Pro Asp Val Pro Met Gln Asn Tyr Gly Ser Leu Arg Tyr Arg
275 280 285
Phe Pro Ala Val Leu Pro Gln Met Pro Leu Gln Leu Ile Lys Thr Lys
290 295 300
Asn Pro Glu Gln Arg Ile Ile Glu Thr Leu Gln His Ile Val Leu Asn
305 310 315 320
Asn Gln Gln Asp Phe His Asp Asp Val Ser Tyr Arg Phe Leu Glu Val
325 330 335
Val Gln Leu Cys Arg Ile Ala Asn Ala Asp Asn Leu Glu Ser Ile Trp
340 345 350
Arg Gln Val Ser Asp Lys Pro Arg Tyr Arg Arg Trp Leu Leu Ser Ala
355 360 365
Val Ser Ala Ser Gly Thr Thr Glu Thr Leu Lys Phe Leu Lys Asn Arg
370 375 380
Ile Arg Asn Asp Asp Leu Asn Tyr Ile Gln Thr Leu Leu Thr Val Ser
385 390 395 400
Leu Thr Leu His Leu Leu Gln Ala Asp Glu His Thr Leu Pro Ile Ala
405 410 415
Ala Asp Leu Met Thr Ser Ser Arg Ile Gln Lys Asn Pro Val Leu Gln
420 425 430
Gln Val Ala Cys Leu Gly Tyr Ser Ser Val Val Asn Arg Tyr Cys Ser
435 440 445
Gln Thr Ser Ala Cys Pro Lys Glu Ala Leu Gln Pro Ile His Asp Leu
450 455 460
Ala Asp Glu Ala Ile Ser Arg Gly Arg Glu Asp Lys Met Lys Leu Ala
465 470 475 480
Leu Lys Cys Ile Gly Asn Met Gly Glu Pro Ala Ser Leu Lys Arg Ile
485 490 495
Leu Lys Phe Leu Pro Ile Ser Ser Ser Ser Ala Ala Asp Ile Pro Val
500 505 510
His Ile Gln Ile Asp Ala Ile Thr Ala Leu Lys Lys Ile Ala Trp Lys
515 520 525
Asp Pro Lys Thr Val Gln Gly Tyr Leu Ile Gln Ile Leu Ala Asp Gln
530 535 540
Ser Leu Pro Pro Glu Val Arg Met Met Ala Cys Ala Val Ile Phe Glu
545 550 555 560
Thr Arg Pro Ala Leu Ala Leu Ile Thr Thr Ile Ala Asn Val Ala Met
565 570 575
Lys Glu Ser Asn Met Gln Val Ala Ser Phe Val Tyr Ser His Met Lys
580 585 590
Ser Leu Ser Lys Ser Arg Leu Pro Phe Met Tyr Asn Ile Ser Ser Ala
595 600 605
Cys Asn Ile Ala Leu Lys Leu Leu Ser Pro Lys Leu Asp Ser Met Ser
610 615 620
Tyr Arg Tyr Ser Lys Val Ile Arg Ala Asp Thr Tyr Phe Asp Asn Tyr
625 630 635 640
Arg Val Gly Ala Thr Gly Glu Ile Phe Val Val Asn Ser Pro Arg Thr
645 650 655
Met Phe Pro Ser Ala Ile Ile Ser Lys Leu Met Ala Asn Ser Ala Gly
660 665 670
Ser Val Ala Asp Leu Val Glu Val Gly Ile Arg Val Glu Gly Leu Ala
675 680 685
Asp Val Ile Met Lys Arg Asn Ile Pro Phe Ala Glu Tyr Pro Thr Tyr
690 695 700
Lys Gln Ile Lys Glu Leu Gly Lys Ala Leu Gln Gly Trp Lys Glu Leu
705 710 715 720
Pro Thr Glu Thr Pro Leu Val Ser Ala Tyr Leu Lys Ile Leu Gly Gln
725 730 735
Glu Val Ala Phe Ile Asn Ile Asn Lys Glu Leu Leu Gln Gln Val Met
740 745 750
Lys Thr Val Val Glu Pro Ala Asp Arg Asn Ala Ala Ile Lys Arg Ile
755 760 765
Ala Asn Gln Ile Arg Asn Ser Ile Ala Gly Gln Trp Thr Gln Pro Val
770 775 780
Trp Met Gly Glu Leu Arg Tyr Val Val Pro Ser Cys Leu Gly Leu Pro
785 790 795 800
Leu Glu Tyr Gly Ser Tyr Thr Thr Ala Leu Ala Arg Ala Ala Val Ser
805 810 815
Val Glu Gly Lys Met Thr Pro Pro Leu Thr Gly Asp Phe Arg Leu Ser
820 825 830
Gln Leu Leu Glu Ser Thr Met Gln Ile Arg Ser Asp Leu Lys Pro Ser
835 840 845
Leu Tyr Val His Thr Val Ala Thr Met Gly Val Asn Thr Glu Tyr Phe
850 855 860
Gln His Ala Val Glu Ile Gln Gly Glu Val Gln Thr Arg Met Pro Met
865 870 875 880
Lys Phe Asp Ala Lys Ile Asp Val Lys Leu Lys Asn Leu Lys Ile Glu
885 890 895
Thr Asn Pro Cys Arg Glu Glu Thr Glu Ile Val Val Gly Arg His Lys
900 905 910
Ala Phe Ala Val Ser Arg Asn Ile Gly Glu Leu Gly Val Glu Lys Arg
915 920 925
Thr Ser Ile Leu Pro Glu Asp Ala Pro Leu Asp Val Thr Glu Glu Pro
930 935 940
Phe Gln Thr Ser Glu Arg Ala Ser Arg Glu His Phe Ala Met Gln Gly
945 950 955 960
Pro Asp Ser Met Pro Arg Lys Gln Ser His Ser Ser Arg Glu Asp Leu
965 970 975
Arg Arg Ser Thr Gly Lys Arg Ala His Lys Arg Asp Ile Cys Leu Lys
980 985 990
Met His His Ile Gly Cys Gln Leu Cys Phe Ser Arg Arg Ser Arg Asp
995 1000 1005
Ala Ser Phe Ile Gln Asn Thr Tyr Leu His Lys Leu Ile Gly Glu
1010 1015 1020
His Glu Ala Lys Ile Val Leu Met Pro Val His Thr Asp Ala Asp
1025 1030 1035
Ile Asp Lys Ile Gln Leu Glu Ile Gln Ala Gly Ser Arg Ala Ala
1040 1045 1050
Ala Arg Ile Ile Thr Glu Val Asn Pro Glu Ser Glu Glu Glu Asp
1055 1060 1065
Glu Ser Ser Pro Tyr Glu Asp Ile Gln Ala Lys Leu Lys Arg Ile
1070 1075 1080
Leu Gly Ile Asp Ser Met Phe Lys Val Ala Asn Lys Thr Arg His
1085 1090 1095
Pro Lys Asn Arg Pro Ser Lys Lys Gly Asn Thr Val Leu Ala Glu
1100 1105 1110
Phe Gly Thr Glu Pro Asp Ala Lys
1115 1120
<210> 60
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 60
Ala Asp Gln Ser Leu Pro Pro Glu Val Arg
1 5 10
<210> 61
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 61
Ala Asp Thr Tyr Phe Asp Asn Tyr Arg
1 5
<210> 62
<211> 7
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 62
Ala Val Ile Phe Glu Thr Arg
1 5
<210> 63
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 63
Asp Ala Ser Phe Ile Gln Asn Thr Tyr Leu His Lys
1 5 10
<210> 64
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 64
Asp Leu Ala Asp Glu Ala Ile Ser Arg
1 5
<210> 65
<211> 16
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 65
Glu Ala Leu Gln Pro Ile His Asp Leu Ala Asp Glu Ala Ile Ser Arg
1 5 10 15
<210> 66
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 66
Glu Glu Thr Glu Ile Val Val Gly Arg
1 5
<210> 67
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 67
Glu Ile Phe Val Val Asn Ser Pro Arg
1 5
<210> 68
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 68
Glu Leu Pro Thr Glu Thr Pro Leu Val Ser Ala Tyr Leu Lys
1 5 10
<210> 69
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 69
Phe Asp Ile Asp Pro Gly Phe Asn Ser Arg
1 5 10
<210> 70
<211> 7
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 70
Phe Glu Tyr Ser Ser Gly Arg
1 5
<210> 71
<211> 25
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 71
Phe Leu Pro Ile Ser Ser Ser Ser Ala Ala Asp Ile Pro Val His Ile
1 5 10 15
Gln Ile Asp Ala Ile Thr Ala Leu Lys
20 25
<210> 72
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 72
Gly Tyr Ser Ser Val Val Asn Arg
1 5
<210> 73
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 73
Ile Ala Asn Ala Asp Asn Leu Glu Ser Ile Trp Arg
1 5 10
<210> 74
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 74
Ile Asp Ala Ile Thr Ala Leu Lys
1 5
<210> 75
<211> 24
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 75
Ile Ile Thr Glu Val Asn Pro Glu Ser Glu Glu Glu Asp Glu Ser Ser
1 5 10 15
Pro Tyr Glu Asp Ile Gln Ala Lys
20
<210> 76
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 76
Ile Leu Ala Asp Gln Ser Leu Pro Pro Glu Val Arg
1 5 10
<210> 77
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 77
Ile Leu Gly Gln Glu Val Ala Phe Ile Asn Ile Asn Lys
1 5 10
<210> 78
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 78
Ile Gln Leu Glu Ile Gln Ala Gly Ser Arg
1 5 10
<210> 79
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 79
Ile Arg Asn Asp Asp Leu Asn Tyr Ile Gln Thr Leu Leu
1 5 10
<210> 80
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 80
Leu Ala Asp Glu Ala Ile Ser Arg
1 5
<210> 81
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 81
Leu Glu Ile Ser Gly Leu Pro Glu Asn Ala Tyr Leu Leu Lys
1 5 10
<210> 82
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 82
Leu Gly Tyr Ser Ser Val Val Asn Arg
1 5
<210> 83
<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 83
Leu Ile Gln Ile Leu Ala Asp Gln Ser Leu Pro Pro Glu Val Arg
1 5 10 15
<210> 84
<211> 16
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 84
Leu Lys Gln Ser Asp Ser Gly Thr Leu Ile Thr Asp Val Ser Ser Arg
1 5 10 15
<210> 85
<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 85
Leu Leu Ser Ala Val Ser Ala Ser Gly Thr Thr Glu Thr Leu Lys
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<210> 86
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 86
Leu Ser Ala Val Ser Ala Ser Gly Thr Thr Glu Thr Leu Lys
1 5 10
<210> 87
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 87
Asn Ile Pro Phe Ala Glu Tyr Pro Thr Tyr Lys
1 5 10
<210> 88
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 88
Pro Ala Leu Ala Leu Ile Thr Thr Ile Ala Asn
1 5 10
<210> 89
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 89
Pro Pro Leu Thr Gly Asp Phe Arg
1 5
<210> 90
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 90
Gln Gln Leu Thr Leu Val Glu Val Arg
1 5
<210> 91
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 91
Gln Ser Asp Ser Gly Thr Leu Ile Thr Asp Val Ser Ser Arg
1 5 10
<210> 92
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 92
Arg Asn Ile Pro Phe Ala Glu Tyr Pro Thr Tyr Lys
1 5 10
<210> 93
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 93
Ser Ala Gly Ser Val Ala Asp Leu Val Glu Val Gly Ile Arg
1 5 10
<210> 94
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 94
Ser Ala Val Ser Ala Ser Gly Thr Thr Glu Thr Leu Lys
1 5 10
<210> 95
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 95
Ser Asp Leu Lys Pro Ser Leu Tyr
1 5
<210> 96
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 96
Ser Gly Thr Leu Ile Thr Asp Val Ser Ser Arg
1 5 10
<210> 97
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 97
Ser Pro Gln Val Glu Glu Tyr Asn Gly Val Trp Pro Arg
1 5 10
<210> 98
<211> 22
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 98
Thr Ser Ile Leu Pro Glu Asp Ala Pro Leu Asp Val Thr Glu Glu Pro
1 5 10 15
Phe Gln Thr Ser Glu Arg
20
<210> 99
<211> 20
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 99
Thr Val Gln Gly Tyr Leu Ile Gln Ile Leu Ala Asp Gln Ser Leu Pro
1 5 10 15
Pro Glu Val Arg
20
<210> 100
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 100
Thr Val Val Glu Pro Ala Asp Arg
1 5
<210> 101
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 101
Val Gly Ala Thr Gly Glu Ile Phe Val Val Asn Ser Pro Arg
1 5 10
<210> 102
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 102
Val Ser Ala Ser Gly Thr Thr Glu Thr Leu Lys
1 5 10
<210> 103
<211> 16
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 103
Trp Leu Leu Ser Ala Val Ser Ala Ser Gly Thr Thr Glu Thr Leu Lys
1 5 10 15
<210> 104
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 104
Tyr Val Ile Gln Glu Asp Arg Lys
1 5
<210> 105
<211> 5550
<212> DNA
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 105
atgaggggga tcatactggc attagtgctc acccttgtag gcagccagaa gtttgacatt 60
gacccaggat tcaatagcag aaggagttac ctgtacaact atgaaggttc tatgttgaat 120
gggcttcaag acagaagttt gggcaaagct ggtgtgcgct tgagcagcaa gctagagatc 180
agtgggctac cagagaatgc ttacctcctc aaggtccgct ctccacaagt ggaggagtac 240
aatggggtct ggcccaggga tcccttcact cgatcttcca aaatcaccca agtgatctca 300
tcgtgtttca cccggctctt caaatttgaa tacagcagtg gacggatcgg aaacatttat 360
gccccagaag actgcccaga tctgtgtgtt aacatagtga gaggaatatt gaacatgttc 420
cagatgacca ttaaaaaatc acagaacgtc tacgaattac aagaggctgg aattggaggt 480
atttgtcatg caaggtatgt cattcaggaa gacaggaaga atagccgaat ctatgttacc 540
agaactgtgg acttgaataa ttgccaggaa aaggtgcaaa aaagcattgg aatggcttac 600
atctatccct gccctgtgga cgtgatgaaa gaaaggctca ccaaagggac caccgctttc 660
tcctacaagc tgaagcagtc agacagcggc acgctgatca cagatgtctc gtcgcggcag 720
gtgtatcaga tctccccatt caatgagccc actggggtgg ctgtcatgga agcaagacag 780
cagctcactt tggtcgaggt gagaagtgag cggggcagtg ccccagatgt ccccatgcag 840
aactatggca gccttcgcta ccgcttccca gccgtactgc cacagatgcc acttcagctg 900
atcaagacaa aaaaccctga gcaacggata gtagaaacgc tgcagcacat agtcctgaat 960
aaccaacaag atttccatga cgatgtttca tacagattct tagaggtggt ccagctttgc 1020
cggatagcaa atgctgacaa tcttgagtct atctggagac aagtttcaga taaacctcgt 1080
tacaggcgat ggctcctgag cgcagtttct gcgagtggca ccacagaaac actaaaattc 1140
cttaagaaca gaattcgcaa tgatgacctc aactacattc agacccttct aactgtttct 1200
ttgactcttc atttattgca agctgatgaa cacacacttc caatagcagc agatttaatg 1260
accagctctc gaattcagaa aaatcctgtg cttcagcaag tggcctgctt gggatatagc 1320
tctgtagtca acagatactg ctctcagacc tcagcatgtc ctaaggaagc tcttcagccc 1380
atccatgacc tggcagatga agcaatcagc aggggccgtg aagacaaaat gaaattagct 1440
ctaaagtgca ttggtaacat gggagaacca gccagcttaa agcgcatcct gaagttcctt 1500
ccaatatctt catccagtgc tgctgatatc ccagtccaca ttcagataga tgccataacg 1560
gccttgaaaa agatagcttg gaaggacccc aaaacagtgc agggctatct catccagatc 1620
cttgcagacc aatcacttcc ccctgaggtg cgaatgatgg cttgtgctgt tatctttgag 1680
acaaggcctg cccttgcttt gataacgact atagctaacg tggcaatgaa ggagagcaat 1740
atgcaagtgg ccagttttgt atattcccac atgaagtctt tgtcaaagag cagattgcca 1800
tttatgtaca acatatcttc cgcttgtaac attgccctta agctcctgtc ccccaaactg 1860
gacagtatga gctatcggta cagcaaggtc attcgagcag acacttactt tgataactat 1920
agagttggtg ctactggaga aatctttgtt gtgaacagcc caagaactat gttcccatca 1980
gcaataattt ccaaattgat ggcaaattct gcaggttcag tggctgatct ggtagaggtt 2040
ggcatccgag tggaaggcct cgcagatgtc ataatgaaaa gaaacatccc atttgctgaa 2100
tatcccacat acaagcagat aaaggagctt ggaaaagctc tgcagggatg gaaagagctg 2160
ccgacagaaa cccctttggt atcagcctac ttgaaaatac ttggccaaga agtggccttc 2220
atcaacatca acaaggaact cctgcaacag gtcatgaaga ctgtagtgga acctgctgat 2280
cgaaacgcag caataaagag aatcgccaac cagatccgca acagcattgc agggcagtgg 2340
acgcagccgg tgtggatggg agagctgcga tacgtggttc ccagctgtct cggcctgccg 2400
ctggagtacg ggtcctacac caccgccctg gcacgagctg cagtcagcgt tgagggaaag 2460
atgacgccgc ctttaaccgg agatttcaga ctttctcagt tgcttgaatc caccatgcag 2520
attcggtctg acttaaagcc cagtttatat gtgcatacag ttgcaacgat gggtgtcaac 2580
acagaatact ttcaacatgc tgttgaaatt caaggcgagg tccagacaag aatgccaatg 2640
aagtttgatg ccaagataga tgtgaaattg aaaaacctta agattgaaac gaacccatgc 2700
cgtgaggaaa ctgagatagt ggttggaaga cataaggctt ttgctgtatc aaggaacata 2760
ggagaactag gtgttgaaaa gaggacctca attctgccgg aagatgctcc attagatgtt 2820
acagaagaac ctttccaaac atcagagaga gcttccaggg aacacttcgc aatgcaaggg 2880
cctgacagca tgccaaggaa acagtcccat agttctcgag aagatcttcg ccgtagcaca 2940
ggaaaaagag cacataaacg agacatttgc ctcaaaatgc atcatattgg ttgccagctt 3000
tgcttttcca gaaggtcaag agatgccagt ttcatacaga atacgtattt gcacaaatta 3060
attggagaac atgaagctaa aatagttttg atgccagttc atacagatgc tgatattgac 3120
aaaattcagc tggagattca ggcaggatct agagcagctg ccagaataat tactgaggta 3180
aacccagagt ctgaggaaga ggatgaatca tctccatatg aggacattca agctaaactg 3240
aagaggattc taggcattga cagtatgttc aaggttgcaa acaaaacacg gcacccgaaa 3300
aatcgaccat ctaagaaagg aaacactgtg ctagcagagt ttgggacaga gcctgatgca 3360
aaaacttcct ccagctcatc ttctgcctcc tcaactgcca cctcttcttc ctcatcatct 3420
gcctcctctc ctaatcgtaa aaagcctatg gatgaagagg agaatgatca agtaaagcaa 3480
gcaagaaaca aagatgcaag cagcagcagc aggagcagca agagcagtaa cagcagcaag 3540
agaagcagca gcaagagcag taacagcagc aagagaagca gcagcagcag tagcagtagc 3600
agtagcagca gcaggagcag cagcagtagc agcagtagta gcagtaacag caagagcagc 3660
agtagcagca gcaagagcag cagtagcagc agcaggagca gaagcagcag caagagcagc 3720
agtagcagca gcagcagtag cagcagcagc agcagcaaaa gtagcagtag taggagcagt 3780
agcagcagca gcaagtcaag cagtcaccat agccatagcc atcattcagg gcatctaaat 3840
ggcagcagca gcagcagcag cagcagcagg tcagtgagtc accacagcca tgagcatcac 3900
tcaggacatc tggaagatga cagcagtagc agcagcagca gcagcgtgct ttccaaaata 3960
tgggggcgtc atgagattta tcagtatcgc tttagatcag cacacagaca agagttcccc 4020
aaaagaaaac tcccaggtga ccgcgctacc agcagatact cctctaccag atccagccat 4080
gacacatccc gagctgcttc ctggcctaag tttctgggtg acatcaaaac cccagtgtta 4140
gctgcttttc tccatggcat tagtaacaat aagaagacag gaggcctcca gcttgtggta 4200
tatgctgata ccgactcggt caggccgcgg gtgcaggtat ttgtgacaaa cctcacagat 4260
tcgagcaagt ggaagctctg cgcagatgct tcggtccgca atgctcacaa ggcagtggcc 4320
tacgtgaaat ggggctggga ctgccgggac tacaaggttt ctactgagct ggtaactggg 4380
cggtttgctg ggcaccctgc tgcacaagtg aagctggagt ggcccaaggt tccttcgaat 4440
gtcagatcag tggttgaatg gttttacgag tttgtccctg gggctgcatt tatgctgggt 4500
ttctctgaga gaatggacaa gaatccttct cgacaagcca ggatggttgt ggctctaact 4560
tctccgagga catgtgatgt tgttgtcaag ctgcctgata taatcctcta tcaaaaagcc 4620
gtgaggcttc ctctatcact ccctgtgggt ccaaggatcc cagcttcaga gctgcagcct 4680
ccaatctgga acgtctttgc tgaagccccc tctgccgtgc tcgagaattt gaaagctcgc 4740
tgctcagttt cgtacaacaa gatcaaaacc tttaatgaag tcaagttcaa ctactcgatg 4800
cccgcaaact gctatcacat cttggttcag gattgcagct ctgaacttaa gttcctggtg 4860
atgatgaaaa gtgctggaga agctacaaac cttaaagcca tcaacatcaa gattggcagt 4920
catgaaattg atatgcatcc tgtgaatgga caggtgaaac tgctggtaga tggggctgag 4980
agccccacag ccaacatttc cctcatatct gctggtgctt ctctgtggat tcacaatgaa 5040
aaccaagggt ttgcacttgc tgccccaggc catggtatcg ataaattgta cttcgatgga 5100
aaaacaatca cgattcaagt tcctttatgg atggcaggga aaacatgtgg aatctgtgga 5160
aaatatgatg cagaatgcga acaggagtat cggatgccca atggatatct agctaaaaat 5220
gccgtgagct ttggtcattc ttggatcttg gaagaagcgc cctgtagagg agcttgtaaa 5280
ctgcatcgtt cattcgtgaa gcttgagaag acggttcagc tggcgggtgt tgattccaag 5340
tgctactcta cagagcctgt gctgcgctgt gcaaagggat gctctgctac caagacaact 5400
ccagtaactg ttggcttcca ctgcctccca gctgattcag ctaacagcct aactgacaaa 5460
cagatgaagt acgaccagaa gtcagaagac atgcaggata ctgttgatgc acacacaacg 5520
tgttcatgtg agaatgagga atgcagtaca 5550
<210> 106
<211> 1850
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 106
Met Arg Gly Ile Ile Leu Ala Leu Val Leu Thr Leu Val Gly Ser Gln
1 5 10 15
Lys Phe Asp Ile Asp Pro Gly Phe Asn Ser Arg Arg Ser Tyr Leu Tyr
20 25 30
Asn Tyr Glu Gly Ser Met Leu Asn Gly Leu Gln Asp Arg Ser Leu Gly
35 40 45
Lys Ala Gly Val Arg Leu Ser Ser Lys Leu Glu Ile Ser Gly Leu Pro
50 55 60
Glu Asn Ala Tyr Leu Leu Lys Val Arg Ser Pro Gln Val Glu Glu Tyr
65 70 75 80
Asn Gly Val Trp Pro Arg Asp Pro Phe Thr Arg Ser Ser Lys Ile Thr
85 90 95
Gln Val Ile Ser Ser Cys Phe Thr Arg Leu Phe Lys Phe Glu Tyr Ser
100 105 110
Ser Gly Arg Ile Gly Asn Ile Tyr Ala Pro Glu Asp Cys Pro Asp Leu
115 120 125
Cys Val Asn Ile Val Arg Gly Ile Leu Asn Met Phe Gln Met Thr Ile
130 135 140
Lys Lys Ser Gln Asn Val Tyr Glu Leu Gln Glu Ala Gly Ile Gly Gly
145 150 155 160
Ile Cys His Ala Arg Tyr Val Ile Gln Glu Asp Arg Lys Asn Ser Arg
165 170 175
Ile Tyr Val Thr Arg Thr Val Asp Leu Asn Asn Cys Gln Glu Lys Val
180 185 190
Gln Lys Ser Ile Gly Met Ala Tyr Ile Tyr Pro Cys Pro Val Asp Val
195 200 205
Met Lys Glu Arg Leu Thr Lys Gly Thr Thr Ala Phe Ser Tyr Lys Leu
210 215 220
Lys Gln Ser Asp Ser Gly Thr Leu Ile Thr Asp Val Ser Ser Arg Gln
225 230 235 240
Val Tyr Gln Ile Ser Pro Phe Asn Glu Pro Thr Gly Val Ala Val Met
245 250 255
Glu Ala Arg Gln Gln Leu Thr Leu Val Glu Val Arg Ser Glu Arg Gly
260 265 270
Ser Ala Pro Asp Val Pro Met Gln Asn Tyr Gly Ser Leu Arg Tyr Arg
275 280 285
Phe Pro Ala Val Leu Pro Gln Met Pro Leu Gln Leu Ile Lys Thr Lys
290 295 300
Asn Pro Glu Gln Arg Ile Val Glu Thr Leu Gln His Ile Val Leu Asn
305 310 315 320
Asn Gln Gln Asp Phe His Asp Asp Val Ser Tyr Arg Phe Leu Glu Val
325 330 335
Val Gln Leu Cys Arg Ile Ala Asn Ala Asp Asn Leu Glu Ser Ile Trp
340 345 350
Arg Gln Val Ser Asp Lys Pro Arg Tyr Arg Arg Trp Leu Leu Ser Ala
355 360 365
Val Ser Ala Ser Gly Thr Thr Glu Thr Leu Lys Phe Leu Lys Asn Arg
370 375 380
Ile Arg Asn Asp Asp Leu Asn Tyr Ile Gln Thr Leu Leu Thr Val Ser
385 390 395 400
Leu Thr Leu His Leu Leu Gln Ala Asp Glu His Thr Leu Pro Ile Ala
405 410 415
Ala Asp Leu Met Thr Ser Ser Arg Ile Gln Lys Asn Pro Val Leu Gln
420 425 430
Gln Val Ala Cys Leu Gly Tyr Ser Ser Val Val Asn Arg Tyr Cys Ser
435 440 445
Gln Thr Ser Ala Cys Pro Lys Glu Ala Leu Gln Pro Ile His Asp Leu
450 455 460
Ala Asp Glu Ala Ile Ser Arg Gly Arg Glu Asp Lys Met Lys Leu Ala
465 470 475 480
Leu Lys Cys Ile Gly Asn Met Gly Glu Pro Ala Ser Leu Lys Arg Ile
485 490 495
Leu Lys Phe Leu Pro Ile Ser Ser Ser Ser Ala Ala Asp Ile Pro Val
500 505 510
His Ile Gln Ile Asp Ala Ile Thr Ala Leu Lys Lys Ile Ala Trp Lys
515 520 525
Asp Pro Lys Thr Val Gln Gly Tyr Leu Ile Gln Ile Leu Ala Asp Gln
530 535 540
Ser Leu Pro Pro Glu Val Arg Met Met Ala Cys Ala Val Ile Phe Glu
545 550 555 560
Thr Arg Pro Ala Leu Ala Leu Ile Thr Thr Ile Ala Asn Val Ala Met
565 570 575
Lys Glu Ser Asn Met Gln Val Ala Ser Phe Val Tyr Ser His Met Lys
580 585 590
Ser Leu Ser Lys Ser Arg Leu Pro Phe Met Tyr Asn Ile Ser Ser Ala
595 600 605
Cys Asn Ile Ala Leu Lys Leu Leu Ser Pro Lys Leu Asp Ser Met Ser
610 615 620
Tyr Arg Tyr Ser Lys Val Ile Arg Ala Asp Thr Tyr Phe Asp Asn Tyr
625 630 635 640
Arg Val Gly Ala Thr Gly Glu Ile Phe Val Val Asn Ser Pro Arg Thr
645 650 655
Met Phe Pro Ser Ala Ile Ile Ser Lys Leu Met Ala Asn Ser Ala Gly
660 665 670
Ser Val Ala Asp Leu Val Glu Val Gly Ile Arg Val Glu Gly Leu Ala
675 680 685
Asp Val Ile Met Lys Arg Asn Ile Pro Phe Ala Glu Tyr Pro Thr Tyr
690 695 700
Lys Gln Ile Lys Glu Leu Gly Lys Ala Leu Gln Gly Trp Lys Glu Leu
705 710 715 720
Pro Thr Glu Thr Pro Leu Val Ser Ala Tyr Leu Lys Ile Leu Gly Gln
725 730 735
Glu Val Ala Phe Ile Asn Ile Asn Lys Glu Leu Leu Gln Gln Val Met
740 745 750
Lys Thr Val Val Glu Pro Ala Asp Arg Asn Ala Ala Ile Lys Arg Ile
755 760 765
Ala Asn Gln Ile Arg Asn Ser Ile Ala Gly Gln Trp Thr Gln Pro Val
770 775 780
Trp Met Gly Glu Leu Arg Tyr Val Val Pro Ser Cys Leu Gly Leu Pro
785 790 795 800
Leu Glu Tyr Gly Ser Tyr Thr Thr Ala Leu Ala Arg Ala Ala Val Ser
805 810 815
Val Glu Gly Lys Met Thr Pro Pro Leu Thr Gly Asp Phe Arg Leu Ser
820 825 830
Gln Leu Leu Glu Ser Thr Met Gln Ile Arg Ser Asp Leu Lys Pro Ser
835 840 845
Leu Tyr Val His Thr Val Ala Thr Met Gly Val Asn Thr Glu Tyr Phe
850 855 860
Gln His Ala Val Glu Ile Gln Gly Glu Val Gln Thr Arg Met Pro Met
865 870 875 880
Lys Phe Asp Ala Lys Ile Asp Val Lys Leu Lys Asn Leu Lys Ile Glu
885 890 895
Thr Asn Pro Cys Arg Glu Glu Thr Glu Ile Val Val Gly Arg His Lys
900 905 910
Ala Phe Ala Val Ser Arg Asn Ile Gly Glu Leu Gly Val Glu Lys Arg
915 920 925
Thr Ser Ile Leu Pro Glu Asp Ala Pro Leu Asp Val Thr Glu Glu Pro
930 935 940
Phe Gln Thr Ser Glu Arg Ala Ser Arg Glu His Phe Ala Met Gln Gly
945 950 955 960
Pro Asp Ser Met Pro Arg Lys Gln Ser His Ser Ser Arg Glu Asp Leu
965 970 975
Arg Arg Ser Thr Gly Lys Arg Ala His Lys Arg Asp Ile Cys Leu Lys
980 985 990
Met His His Ile Gly Cys Gln Leu Cys Phe Ser Arg Arg Ser Arg Asp
995 1000 1005
Ala Ser Phe Ile Gln Asn Thr Tyr Leu His Lys Leu Ile Gly Glu
1010 1015 1020
His Glu Ala Lys Ile Val Leu Met Pro Val His Thr Asp Ala Asp
1025 1030 1035
Ile Asp Lys Ile Gln Leu Glu Ile Gln Ala Gly Ser Arg Ala Ala
1040 1045 1050
Ala Arg Ile Ile Thr Glu Val Asn Pro Glu Ser Glu Glu Glu Asp
1055 1060 1065
Glu Ser Ser Pro Tyr Glu Asp Ile Gln Ala Lys Leu Lys Arg Ile
1070 1075 1080
Leu Gly Ile Asp Ser Met Phe Lys Val Ala Asn Lys Thr Arg His
1085 1090 1095
Pro Lys Asn Arg Pro Ser Lys Lys Gly Asn Thr Val Leu Ala Glu
1100 1105 1110
Phe Gly Thr Glu Pro Asp Ala Lys Thr Ser Ser Ser Ser Ser Ser
1115 1120 1125
Ala Ser Ser Thr Ala Thr Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ala Ser Ser
1130 1135 1140
Pro Asn Arg Lys Lys Pro Met Asp Glu Glu Glu Asn Asp Gln Val
1145 1150 1155
Lys Gln Ala Arg Asn Lys Asp Ala Ser Ser Ser Ser Arg Ser Ser
1160 1165 1170
Lys Ser Ser Asn Ser Ser Lys Arg Ser Ser Ser Lys Ser Ser Asn
1175 1180 1185
Ser Ser Lys Arg Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser
1190 1195 1200
Ser Arg Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Asn Ser Lys
1205 1210 1215
Ser Ser Ser Ser Ser Ser Lys Ser Ser Ser Ser Ser Ser Arg Ser
1220 1225 1230
Arg Ser Ser Ser Lys Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser
1235 1240 1245
Ser Ser Ser Ser Lys Ser Ser Ser Ser Arg Ser Ser Ser Ser Ser
1250 1255 1260
Ser Lys Ser Ser Ser His His Ser His Ser His His Ser Gly His
1265 1270 1275
Leu Asn Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Arg Ser Val Ser
1280 1285 1290
His His Ser His Glu His His Ser Gly His Leu Glu Asp Asp Ser
1295 1300 1305
Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Val Leu Ser Lys Ile Trp Gly Arg
1310 1315 1320
His Glu Ile Tyr Gln Tyr Arg Phe Arg Ser Ala His Arg Gln Glu
1325 1330 1335
Phe Pro Lys Arg Lys Leu Pro Gly Asp Arg Ala Thr Ser Arg Tyr
1340 1345 1350
Ser Ser Thr Arg Ser Ser His Asp Thr Ser Arg Ala Ala Ser Trp
1355 1360 1365
Pro Lys Phe Leu Gly Asp Ile Lys Thr Pro Val Leu Ala Ala Phe
1370 1375 1380
Leu His Gly Ile Ser Asn Asn Lys Lys Thr Gly Gly Leu Gln Leu
1385 1390 1395
Val Val Tyr Ala Asp Thr Asp Ser Val Arg Pro Arg Val Gln Val
1400 1405 1410
Phe Val Thr Asn Leu Thr Asp Ser Ser Lys Trp Lys Leu Cys Ala
1415 1420 1425
Asp Ala Ser Val Arg Asn Ala His Lys Ala Val Ala Tyr Val Lys
1430 1435 1440
Trp Gly Trp Asp Cys Arg Asp Tyr Lys Val Ser Thr Glu Leu Val
1445 1450 1455
Thr Gly Arg Phe Ala Gly His Pro Ala Ala Gln Val Lys Leu Glu
1460 1465 1470
Trp Pro Lys Val Pro Ser Asn Val Arg Ser Val Val Glu Trp Phe
1475 1480 1485
Tyr Glu Phe Val Pro Gly Ala Ala Phe Met Leu Gly Phe Ser Glu
1490 1495 1500
Arg Met Asp Lys Asn Pro Ser Arg Gln Ala Arg Met Val Val Ala
1505 1510 1515
Leu Thr Ser Pro Arg Thr Cys Asp Val Val Val Lys Leu Pro Asp
1520 1525 1530
Ile Ile Leu Tyr Gln Lys Ala Val Arg Leu Pro Leu Ser Leu Pro
1535 1540 1545
Val Gly Pro Arg Ile Pro Ala Ser Glu Leu Gln Pro Pro Ile Trp
1550 1555 1560
Asn Val Phe Ala Glu Ala Pro Ser Ala Val Leu Glu Asn Leu Lys
1565 1570 1575
Ala Arg Cys Ser Val Ser Tyr Asn Lys Ile Lys Thr Phe Asn Glu
1580 1585 1590
Val Lys Phe Asn Tyr Ser Met Pro Ala Asn Cys Tyr His Ile Leu
1595 1600 1605
Val Gln Asp Cys Ser Ser Glu Leu Lys Phe Leu Val Met Met Lys
1610 1615 1620
Ser Ala Gly Glu Ala Thr Asn Leu Lys Ala Ile Asn Ile Lys Ile
1625 1630 1635
Gly Ser His Glu Ile Asp Met His Pro Val Asn Gly Gln Val Lys
1640 1645 1650
Leu Leu Val Asp Gly Ala Glu Ser Pro Thr Ala Asn Ile Ser Leu
1655 1660 1665
Ile Ser Ala Gly Ala Ser Leu Trp Ile His Asn Glu Asn Gln Gly
1670 1675 1680
Phe Ala Leu Ala Ala Pro Gly His Gly Ile Asp Lys Leu Tyr Phe
1685 1690 1695
Asp Gly Lys Thr Ile Thr Ile Gln Val Pro Leu Trp Met Ala Gly
1700 1705 1710
Lys Thr Cys Gly Ile Cys Gly Lys Tyr Asp Ala Glu Cys Glu Gln
1715 1720 1725
Glu Tyr Arg Met Pro Asn Gly Tyr Leu Ala Lys Asn Ala Val Ser
1730 1735 1740
Phe Gly His Ser Trp Ile Leu Glu Glu Ala Pro Cys Arg Gly Ala
1745 1750 1755
Cys Lys Leu His Arg Ser Phe Val Lys Leu Glu Lys Thr Val Gln
1760 1765 1770
Leu Ala Gly Val Asp Ser Lys Cys Tyr Ser Thr Glu Pro Val Leu
1775 1780 1785
Arg Cys Ala Lys Gly Cys Ser Ala Thr Lys Thr Thr Pro Val Thr
1790 1795 1800
Val Gly Phe His Cys Leu Pro Ala Asp Ser Ala Asn Ser Leu Thr
1805 1810 1815
Asp Lys Gln Met Lys Tyr Asp Gln Lys Ser Glu Asp Met Gln Asp
1820 1825 1830
Thr Val Asp Ala His Thr Thr Cys Ser Cys Glu Asn Glu Glu Cys
1835 1840 1845
Ser Thr
1850
<210> 107
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 107
Ala Asp Thr Tyr Phe Asp Asn Tyr Arg
1 5
<210> 108
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 108
Ala Glu Phe Gly Thr Glu Pro Asp Ala Lys
1 5 10
<210> 109
<211> 7
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 109
Ala Glu Tyr Pro Thr Tyr Lys
1 5
<210> 110
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 110
Ala Thr Gly Glu Ile Phe Val Val Asn Ser Pro Arg
1 5 10
<210> 111
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 111
Ala Val Glu Ile Gln Gly Glu Val Gln Thr Arg
1 5 10
<210> 112
<211> 7
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 112
Ala Val Ile Phe Glu Thr Arg
1 5
<210> 113
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 113
Ala Val Ser Ala Ser Gly Thr Thr Glu Thr Leu Lys
1 5 10
<210> 114
<211> 16
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 114
Glu Ala Leu Gln Pro Ile His Asp Leu Ala Asp Glu Ala Ile Ser Arg
1 5 10 15
<210> 115
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<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 115
Glu Glu Thr Glu Ile Val Val Gly Arg
1 5
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<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
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Glu Leu Pro Thr Glu Thr Pro Leu Val Ser Ala Tyr Leu Lys
1 5 10
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<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 117
Phe Asp Ile Asp Pro Gly Phe Asn Ser Arg
1 5 10
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<211> 7
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
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Phe Glu Tyr Ser Ser Gly Arg
1 5
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<212> PRT
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Gly Thr Thr Ala Phe Ser Tyr Lys
1 5
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<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
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Ile Ala Asn Ala Asp Asn Leu Glu Ser Ile
1 5 10
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<211> 12
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<213> 鸡(Gallus gallus)
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Ile Leu Ala Asp Gln Ser Leu Pro Pro Glu Val Arg
1 5 10
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<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 122
Ile Leu Gly Gln Glu Val Ala Phe Ile Asn Ile Asn Lys
1 5 10
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<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
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Ile Gln Leu Glu Ile Gln Ala Gly Ser Arg
1 5 10
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<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 124
Leu Glu Ile Ser Gly Leu Pro Glu Asn Ala Tyr Leu Leu Lys
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Asn Tyr Asp Gln Phe Asp Ile Asn Ala Leu Ile Ala Gln Leu Leu
2180 2185 2190
Asp Lys Ile Val Glu Lys Met Thr Ala Leu Asp Glu Lys Tyr Lys
2195 2200 2205
Ile Arg Val Thr Val Val Asp Thr Ile Gln Lys Leu Gln Phe Phe
2210 2215 2220
Leu Asn Gln Tyr Tyr Pro Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr Met Thr
2225 2230 2235
Trp Ile Lys Asn Ile Asp Asp Glu Tyr Arg Ile Thr Gly Arg Ile
2240 2245 2250
Lys Glu Asn Leu Glu Gln Leu Lys Ile Gln Ile Gln Asn Ile Asp
2255 2260 2265
Ile Arg Ser Phe Ala Glu Asn Leu Lys Arg Lys Ile Lys Ile Ile
2270 2275 2280
Asp Val Lys Gln Leu Leu Glu Lys Leu Lys Arg Ser Leu Pro Ile
2285 2290 2295
Lys Lys Met Lys Glu Val Leu Glu Gln Ile Lys Asp Phe Ile Leu
2300 2305 2310
Ser Trp Met Glu Glu Tyr Glu Val Ser Glu Lys Ile Ser Ala Phe
2315 2320 2325
Arg Gly His Met His Lys Leu Ile Val Lys Tyr Glu Ile Asp Lys
2330 2335 2340
His Val Tyr Phe Leu Leu Asp Arg Met Ile Glu Leu Leu Asn Gln
2345 2350 2355
Tyr Arg Ile Arg Glu Thr Val Arg Lys Met Thr Thr Tyr Leu Arg
2360 2365 2370
Lys Ile Asp Val Lys Thr Cys Phe Asp Lys Ile Val Ser Leu Ile
2375 2380 2385
Asp Asp Ala Val Lys Lys Val Gln Thr Phe Asp Tyr Glu Met Met
2390 2395 2400
Ile Lys Lys Leu Asn Lys Phe Leu Asp Met Ile Ile Lys Lys Leu
2405 2410 2415
Lys Ser Phe Asp Tyr Asn Gln Phe Val Asp Asp Thr Asn Asn Lys
2420 2425 2430
Ile Gln Glu Ile Ile Gln Lys Ile Asn Glu Glu Leu Arg Asn Leu
2435 2440 2445
Glu Leu Pro Gln Lys Ala Glu Ala Leu Lys Gln Tyr Met Arg Asp
2450 2455 2460
Phe Asn Ala Val Val Ser Lys Tyr Val Glu Gln Leu Arg Asp Thr
2465 2470 2475
Lys Leu Val Ala Ile Ile Asn Trp Leu Lys Glu Leu Ile Asp Ser
2480 2485 2490
Thr Thr Phe Thr Asn Leu Lys Ala Lys Val Asn Glu His Leu Glu
2495 2500 2505
Gly Leu Arg Glu Arg Ile Ser Asp Met Asp Ile Ala Lys Glu Phe
2510 2515 2520
Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Ile Ser Gln Phe Tyr Asn Ser Val Val
2525 2530 2535
Ile Tyr Ile Ser Glu Gln Trp Asn Ile Ala Phe Lys Lys Ile Val
2540 2545 2550
Thr Leu Ala Glu Lys Tyr Asp Leu Lys Asn Trp Ala Glu Asn Leu
2555 2560 2565
Asn Gln Phe Ile Glu Thr Gly Phe Lys Val Pro Glu Ile Arg Thr
2570 2575 2580
Val Ile Val Thr Ile Pro Ala Phe Glu Phe Ser Leu Arg Ser Leu
2585 2590 2595
Arg Glu Ala Thr Phe Arg Thr Pro Asp Phe Ile Val Pro Leu Thr
2600 2605 2610
Asp Leu Lys Ile Pro Ser Tyr Glu Ile Asn Ile Arg
2615 2620 2625
<210> 153
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 153
Ala Ala Tyr Gly Thr Asp Glu Val Arg
1 5
<210> 154
<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 154
Ala Glu Leu Glu Trp Asn Ser Gly Ala Thr Ala Ala Val Gly Arg
1 5 10 15
<210> 155
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 155
Ala Glu Leu Leu Leu Glu Pro Leu Lys
1 5
<210> 156
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 156
Ala Glu Pro Leu Ala Phe Thr Phe
1 5
<210> 157
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 157
Ala Ile Thr Tyr Ala Asp Leu Thr Ala Asn Phe Lys
1 5 10
<210> 158
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 158
Ala Leu Ala Asp Leu Ser Val Val Asp Thr Ala Ile Arg
1 5 10
<210> 159
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 159
Ala Leu Ser Gly Ile Val Thr Pro Gly Ala Lys
1 5 10
<210> 160
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 160
Ala Ser Phe Tyr Gly Leu Ser His Ala Val Thr Lys
1 5 10
<210> 161
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 161
Ala Thr Leu Asp Glu Phe Pro Gln
1 5
<210> 162
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 162
Ala Val Ile Leu Asn Leu Glu Lys
1 5
<210> 163
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 163
Ala Tyr Thr Phe Val Ile Asp Phe Asn Asn Lys
1 5 10
<210> 164
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 164
Asp Glu Pro Leu Asn Val Leu Asn Leu Lys
1 5 10
<210> 165
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 165
Asp Phe Asn Ala Val Val Ser Lys
1 5
<210> 166
<211> 7
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 166
Asp Leu Gln Leu Gln Pro Arg
1 5
<210> 167
<211> 16
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 167
Asp Ser Val Ser Glu Pro Gln Glu Phe Ser Ile Ser Gly Ser Val Lys
1 5 10 15
<210> 168
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 168
Asp Val Pro Tyr Ala Gln Thr Leu Gln Ala Lys
1 5 10
<210> 169
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 169
Asp Tyr Val Ser Pro Val Ala Ile Val Lys
1 5 10
<210> 170
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 170
Glu Phe Gln Glu Gly Asp Ala Pro Thr Asp Lys
1 5 10
<210> 171
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 171
Glu Gly Thr Asp Leu Val Asp Thr Leu Lys
1 5 10
<210> 172
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 172
Glu Leu Glu Trp Asn Ser Gly Ala Thr Ala Ala Val Gly Arg
1 5 10
<210> 173
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 173
Glu Thr Phe Gly Val Asp Ser Glu Arg
1 5
<210> 174
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 174
Glu Tyr Ser Ala Ser Ala Asn Tyr Asp Leu Gln Arg
1 5 10
<210> 175
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 175
Phe Ala Leu Ser Gly Ile Val Thr Pro Gly Ala Lys
1 5 10
<210> 176
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 176
Phe Ala Val Gln Ala Glu Gly Val Lys
1 5
<210> 177
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 177
Phe Glu Val Glu Ile Val Ser Thr Gly Glu Val Lys
1 5 10
<210> 178
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 178
Phe Ser Asn Asn Leu Gln Gly Ser Leu Lys
1 5 10
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<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 179
Phe Ser Gln Asn Tyr Gln Val Ser Lys
1 5
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<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 180
Gly Phe Glu Pro Thr Leu Glu Ala Leu Phe Gly Glu Lys
1 5 10
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<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 181
Gly Phe Phe Pro Asp Thr Ala Ser Lys
1 5
<210> 182
<211> 17
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 182
Gly Ile Ile Ser Ala Leu Leu Ala Pro Thr Glu Thr Glu Glu Asn Ile
1 5 10 15
Lys
<210> 183
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 183
Gly Leu Ala Leu Glu Ser Thr Asp Ala Lys
1 5 10
<210> 184
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 184
Gly Ser Val Ala Glu Asp Ile Ser Ile Asn Arg
1 5 10
<210> 185
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 185
Ile Glu Gly Gln Leu Glu Val Ala Ser Val Phe Ala Arg
1 5 10
<210> 186
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 186
Ile Gly Val Glu Leu Ser Gly Arg
1 5
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<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 187
Ile Lys Leu Pro Val Ile Thr Ile Pro Glu Glu Leu Phe Leu Lys
1 5 10 15
<210> 188
<211> 7
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 188
Ile Leu Gln Glu Leu Gln Lys
1 5
<210> 189
<211> 20
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 189
Ile Leu Thr Ser Asp Val Ser Ile Pro Asp Val Asp Val Asp Phe Gly
1 5 10 15
Thr Asn Phe Arg
20
<210> 190
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 190
Ile Pro Glu Ile Ile Ala Gln Ala Ile Ser Lys
1 5 10
<210> 191
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 191
Ile Pro Ser Tyr Glu Ile Asn Ile Arg
1 5
<210> 192
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 192
Ile Ser Glu Val Thr Leu Thr Gly Gln Ile Arg
1 5 10
<210> 193
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 193
Ile Thr Asp Glu Ser Val Ser Gly Lys
1 5
<210> 194
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 194
Lys Phe Ser Gln Asn Tyr Gln Val Ser Lys
1 5 10
<210> 195
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 195
Lys Ile Ser Glu Val Thr Leu Thr Gly Gln Ile Arg
1 5 10
<210> 196
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 196
Leu Ala Pro Thr Glu Thr Glu Glu Asn Ile Lys
1 5 10
<210> 197
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 197
Leu Asp Asn Ser Phe Ser Phe Asp Lys
1 5
<210> 198
<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 198
Leu Asp Ser Ser Tyr Leu Gln Ala Thr Asn His Leu Ser Gly Arg
1 5 10 15
<210> 199
<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 199
Leu Asp Thr Ser Gly Gly Ser Val Ser Leu Ser Ser Ser Gly Arg
1 5 10 15
<210> 200
<211> 19
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 200
Leu Glu Tyr Thr Asn Asp Leu Asn Ile Pro Gly Leu Ser Leu Thr Phe
1 5 10 15
Val Ser Lys
<210> 201
<211> 7
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 201
Leu Leu Thr Ser Asp Phe Lys
1 5
<210> 202
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 202
Leu Asn Leu Gly Gly Asn Val Arg
1 5
<210> 203
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 203
Leu Pro Val Ile Thr Ile Pro Glu Glu Leu Phe Leu Lys
1 5 10
<210> 204
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 204
Leu Ser Phe Ser Ser Asp Val Val Ser Glu Lys
1 5 10
<210> 205
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 205
Leu Ser Gly Leu Gln Glu Leu Asn Ile Gln Lys
1 5 10
<210> 206
<211> 17
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 206
Leu Tyr Gly Phe Gly Pro Ser Asp Ile Phe Glu Leu Gly Leu Asp Gly
1 5 10 15
Lys
<210> 207
<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 207
Leu Tyr Pro Glu Lys Asp Glu Pro Leu Asn Val Leu Asn Leu Lys
1 5 10 15
<210> 208
<211> 7
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 208
Asn Ile Asp Asp Glu Tyr Arg
1 5
<210> 209
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 209
Asn Pro Asp Gly Asp Glu Leu Glu Glu Lys
1 5 10
<210> 210
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 210
Asn Pro Ser Pro Ala Asp Leu Ala Lys
1 5
<210> 211
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 211
Asn Gln Ala Ala Ser Leu Ser Val Gln Lys
1 5 10
<210> 212
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 212
Asn Ser Phe Leu Ile Asn Ile Pro Leu Pro Phe Gly Gly Arg
1 5 10
<210> 213
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 213
Gln Val Asp Phe Ser Asp Tyr Ser Lys
1 5
<210> 214
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 214
Arg Gly Ser Val Ala Glu Asp Ile Ser Ile Asn Arg
1 5 10
<210> 215
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 215
Arg Val Ser Val Pro Gly Leu Asn Pro Ile Ser Ala Lys
1 5 10
<210> 216
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 216
Ser Ala Ser Ala Asn Tyr Asp Leu Gln Arg
1 5 10
<210> 217
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 217
Ser Glu Tyr Gln Ala Thr Tyr Lys
1 5
<210> 218
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 218
Ser Phe Val Ala Ser His Ile Ala Asn
1 5
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<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 219
Ser Gly Ile Val Thr Pro Gly Ala Lys
1 5
<210> 220
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 220
Ser Gln Asp Ile Asn Ala Tyr Asn Asp Ala Glu Lys
1 5 10
<210> 221
<211> 20
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 221
Ser Gln Leu Asn Asn Asn Ile Tyr Ser Gln Asp Ile Asn Ala Tyr Asn
1 5 10 15
Asp Ala Glu Lys
20
<210> 222
<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 222
Thr Asp Thr Val Ala Asn Val Gln Gly Ala Ala Val Ser His Arg
1 5 10 15
<210> 223
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 223
Thr Glu Ala Leu Val Asn Tyr Ser Pro Thr Lys
1 5 10
<210> 224
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 224
Thr Glu Glu Ile Pro Pro Leu Ile Glu Asn Arg
1 5 10
<210> 225
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 225
Thr Gly Asn Val Asn Pro Leu Val Val Asp Leu Val Thr Tyr
1 5 10
<210> 226
<211> 25
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 226
Thr Gly Asn Val Asn Pro Leu Val Val Asp Leu Val Thr Tyr Thr Leu
1 5 10 15
Gly Leu Leu Pro Ser Pro Thr Pro Lys
20 25
<210> 227
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 227
Thr Pro Asp Phe Ile Val Pro Leu Thr Asp Leu Lys
1 5 10
<210> 228
<211> 21
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 228
Thr Thr Leu Asn Leu Tyr Gly Phe Gly Pro Ser Asp Ile Phe Glu Leu
1 5 10 15
Gly Leu Asp Gly Lys
20
<210> 229
<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 229
Val Glu Gly Asn Val Ile Phe Asp Pro Ser Ser Tyr Val Pro Lys
1 5 10 15
<210> 230
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 230
Val Phe Asp Leu Gln Leu Gln Pro Arg
1 5
<210> 231
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 231
Val Asn Leu Asn Val Ala Gly Leu Ala Ser
1 5 10
<210> 232
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 232
Val Ser Val Pro Gly Leu Asn Pro Ile Ser Ala Lys
1 5 10
<210> 233
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 233
Val Thr Val Val Asp Thr Ile Gln Lys
1 5
<210> 234
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 234
Tyr Ala Asn Glu Leu Leu Asp Arg
1 5
<210> 235
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 235
Tyr Ser Thr Gln Leu Asp Asn Lys
1 5
<210> 236
<211> 927
<212> DNA
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 236
atgggccctg tgcggctctt gctgctcttg ctgctgctca gcagtggtgt tctcacacag 60
gaaggaacac ctgaaaatgg aaacccagga tgttcaaaag atgcggcccg atttaaaagc 120
cttagaaaat atgtttactt atatgaagca gaaacatcaa gtgggatcac gggaacagca 180
gattctcgaa gcggttcaaa gatcacctgt aaagttgagt tggaggtacc acagctgtgc 240
cagttcatcc tgaggacaat gcattgctcc ctaagggaga catttggtgt tgacagtgag 300
agaagagcca tgctgaggaa gtcaaagaac tctgatgact ttgcaaatgc catgtccaaa 360
catgagctaa gattcagcac tcaggatgga acaaaagtta aactatatcc agagaaggat 420
gaacctctga atgtcctcaa tctcaagaga ggaattatct cagctctcct tgcaccaaca 480
gaaacagagg aaaacataaa aacaatttcc atggatactg tatatggaaa gtgtgacagt 540
gaggttgagt tcaaatccag aagaggaagt gttgcagaag atatttcaat taacaggaac 600
ctgaaagcct gtgacaactt cagtccaatc agagattatg tcagccctgt tgccattgta 660
aaaggactaa acatcccact atctaccctt ctgagtagca ctcaatcctg tcactacagt 720
attgatgcaa agaaaaagca tatcagagat gttgtctgca gtgaaaaaca cctgtttctg 780
ccttcctcat acaaaaatca gtatggtatg atgacagaag tcaaccagac actgaagctt 840
gaagataatc agaggatgaa taacagaaat cctgatggag atgaactgga agagaaagga 900
cttgcactgg aaagcacaga tgctaaa 927
<210> 237
<211> 309
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 237
Met Gly Pro Val Arg Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Ser Ser Gly
1 5 10 15
Val Leu Thr Gln Glu Gly Thr Pro Glu Asn Gly Asn Pro Gly Cys Ser
20 25 30
Lys Asp Ala Ala Arg Phe Lys Ser Leu Arg Lys Tyr Val Tyr Leu Tyr
35 40 45
Glu Ala Glu Thr Ser Ser Gly Ile Thr Gly Thr Ala Asp Ser Arg Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ile Thr Cys Lys Val Glu Leu Glu Val Pro Gln Leu Cys
65 70 75 80
Gln Phe Ile Leu Arg Thr Met His Cys Ser Leu Arg Glu Thr Phe Gly
85 90 95
Val Asp Ser Glu Arg Arg Ala Met Leu Arg Lys Ser Lys Asn Ser Asp
100 105 110
Asp Phe Ala Asn Ala Met Ser Lys His Glu Leu Arg Phe Ser Thr Gln
115 120 125
Asp Gly Thr Lys Val Lys Leu Tyr Pro Glu Lys Asp Glu Pro Leu Asn
130 135 140
Val Leu Asn Leu Lys Arg Gly Ile Ile Ser Ala Leu Leu Ala Pro Thr
145 150 155 160
Glu Thr Glu Glu Asn Ile Lys Thr Ile Ser Met Asp Thr Val Tyr Gly
165 170 175
Lys Cys Asp Ser Glu Val Glu Phe Lys Ser Arg Arg Gly Ser Val Ala
180 185 190
Glu Asp Ile Ser Ile Asn Arg Asn Leu Lys Ala Cys Asp Asn Phe Ser
195 200 205
Pro Ile Arg Asp Tyr Val Ser Pro Val Ala Ile Val Lys Gly Leu Asn
210 215 220
Ile Pro Leu Ser Thr Leu Leu Ser Ser Thr Gln Ser Cys His Tyr Ser
225 230 235 240
Ile Asp Ala Lys Lys Lys His Ile Arg Asp Val Val Cys Ser Glu Lys
245 250 255
His Leu Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Lys Asn Gln Tyr Gly Met Met Thr
260 265 270
Glu Val Asn Gln Thr Leu Lys Leu Glu Asp Asn Gln Arg Met Asn Asn
275 280 285
Arg Asn Pro Asp Gly Asp Glu Leu Glu Glu Lys Gly Leu Ala Leu Glu
290 295 300
Ser Thr Asp Ala Lys
305
<210> 238
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 238
Ala Leu Leu Ala Pro Thr Glu Thr Glu Glu Asn Ile Lys
1 5 10
<210> 239
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 239
Asp Tyr Val Ser Pro Val Ala Ile Val Lys
1 5 10
<210> 240
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 240
Glu Thr Phe Gly Val Asp Ser Glu Arg
1 5
<210> 241
<211> 17
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 241
Gly Ile Ile Ser Ala Leu Leu Ala Pro Thr Glu Thr Glu Glu Asn Ile
1 5 10 15
Lys
<210> 242
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 242
Gly Ser Val Ala Glu Asp Ile Ser Ile Asn Arg
1 5 10
<210> 243
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 243
His Leu Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Lys
1 5
<210> 244
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 244
Leu Ala Pro Thr Glu Thr Glu Glu Asn Ile Lys
1 5 10
<210> 245
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 245
Leu Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Lys
1 5
<210> 246
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 246
Leu Leu Ala Pro Thr Glu Thr Glu Glu Asn Ile Lys
1 5 10
<210> 247
<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 247
Leu Tyr Pro Glu Lys Asp Glu Pro Leu Asn Val Leu Asn Leu Lys
1 5 10 15
<210> 248
<211> 18
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 248
Arg Gly Ile Ile Ser Ala Leu Leu Ala Pro Thr Glu Thr Glu Glu Asn
1 5 10 15
Ile Lys
<210> 249
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 249
Ser Val Ala Glu Asp Ile Ser Ile Asn Arg
1 5 10
<210> 250
<211> 1041
<212> DNA
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 250
ctggatggct caaccagttt gacaagaaaa agaggactga agctggccac agcactgtct 60
ctgaataata acaaatttct aggaggaagt catgacaaca gtattagtct cacaaagaag 120
aacctggaag cttcaatgat aacaaatgca aaaatcaaca caccagtttt taaaatgaat 180
ttcagccaag agctttctgg aaatactaaa tctaaaccca ctatttcttc agggctaaaa 240
gtaacatatg actttactac tcctaagcat ggcatcagtg ctaagggagg agttgctcac 300
aaacttgctt tagagactct tacatcttac ctgtcagtag aaacatcaac aaaggggaat 360
atcgatggag caatttacac tggaaattca ttttctggag ctctagacca tgaagcaaac 420
acctatctgc atgctaatgg agttcggtca tctctcaagc ttgaggccaa ctccaaagta 480
gatggactct ggaacagtga aatgaaagaa atacttgcag ttgaagcatc taccagtcgt 540
gtttatgcag tctgggagca caatgggaaa aactttgcac gatacacacc tctcttcaca 600
acgacaggat ctcagaaatg caaagcaacc ttcgagctgg ctccttggac agtgtcagca 660
gatcttcaga ttcaggtcac tcagccaaat tccttcctgg acacagcatc agttaatcaa 720
gttgtcttaa tgaaagtcag tcctacagac cagaaagttg gctggaaggg tgaaggccaa 780
attcagtcat tatctctgag acatgacatg caattatcaa atgaaaaatc aaatgcaaag 840
tttgatattt ctggatcttt ggaagggtac atggacttcc tgaaaagaat taattgtgct 900
atttctaaga agagcttgtg ggatatcttg aagttggatg tcactactgt tgctgacaga 960
aagcactact taaatgcttc agcatccttc atatacagga agagtgatga tggttacttt 1020
ttccctatgc ctgtgattag g 1041
<210> 251
<211> 347
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 251
Leu Asp Gly Ser Thr Ser Leu Thr Arg Lys Arg Gly Leu Lys Leu Ala
1 5 10 15
Thr Ala Leu Ser Leu Asn Asn Asn Lys Phe Leu Gly Gly Ser His Asp
20 25 30
Asn Ser Ile Ser Leu Thr Lys Lys Asn Leu Glu Ala Ser Met Ile Thr
35 40 45
Asn Ala Lys Ile Asn Thr Pro Val Phe Lys Met Asn Phe Ser Gln Glu
50 55 60
Leu Ser Gly Asn Thr Lys Ser Lys Pro Thr Ile Ser Ser Gly Leu Lys
65 70 75 80
Val Thr Tyr Asp Phe Thr Thr Pro Lys His Gly Ile Ser Ala Lys Gly
85 90 95
Gly Val Ala His Lys Leu Ala Leu Glu Thr Leu Thr Ser Tyr Leu Ser
100 105 110
Val Glu Thr Ser Thr Lys Gly Asn Ile Asp Gly Ala Ile Tyr Thr Gly
115 120 125
Asn Ser Phe Ser Gly Ala Leu Asp His Glu Ala Asn Thr Tyr Leu His
130 135 140
Ala Asn Gly Val Arg Ser Ser Leu Lys Leu Glu Ala Asn Ser Lys Val
145 150 155 160
Asp Gly Leu Trp Asn Ser Glu Met Lys Glu Ile Leu Ala Val Glu Ala
165 170 175
Ser Thr Ser Arg Val Tyr Ala Val Trp Glu His Asn Gly Lys Asn Phe
180 185 190
Ala Arg Tyr Thr Pro Leu Phe Thr Thr Thr Gly Ser Gln Lys Cys Lys
195 200 205
Ala Thr Phe Glu Leu Ala Pro Trp Thr Val Ser Ala Asp Leu Gln Ile
210 215 220
Gln Val Thr Gln Pro Asn Ser Phe Leu Asp Thr Ala Ser Val Asn Gln
225 230 235 240
Val Val Leu Met Lys Val Ser Pro Thr Asp Gln Lys Val Gly Trp Lys
245 250 255
Gly Glu Gly Gln Ile Gln Ser Leu Ser Leu Arg His Asp Met Gln Leu
260 265 270
Ser Asn Glu Lys Ser Asn Ala Lys Phe Asp Ile Ser Gly Ser Leu Glu
275 280 285
Gly Tyr Met Asp Phe Leu Lys Arg Ile Asn Cys Ala Ile Ser Lys Lys
290 295 300
Ser Leu Trp Asp Ile Leu Lys Leu Asp Val Thr Thr Val Ala Asp Arg
305 310 315 320
Lys His Tyr Leu Asn Ala Ser Ala Ser Phe Ile Tyr Arg Lys Ser Asp
325 330 335
Asp Gly Tyr Phe Phe Pro Met Pro Val Ile Arg
340 345
<210> 252
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 252
Glu Ile Leu Ala Val Glu Ala Ser Thr Ser Arg
1 5 10
<210> 253
<211> 14
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 253
Phe Leu Gly Gly Ser His Asp Asn Ser Ile Ser Leu Thr Lys
1 5 10
<210> 254
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 254
Gly Glu Gly Gln Ile Gln Ser Leu Ser Leu Arg
1 5 10
<210> 255
<211> 7
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 255
Ile Asn Thr Pro Val Phe Lys
1 5
<210> 256
<211> 17
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 256
Leu Ala Leu Glu Thr Leu Thr Ser Tyr Leu Ser Val Glu Thr Ser Thr
1 5 10 15
Lys
<210> 257
<211> 11
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 257
Leu Ala Thr Ala Leu Ser Leu Asn Asn Asn Lys
1 5 10
<210> 258
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 258
Leu Asp Gly Ser Thr Ser Leu Thr Arg
1 5
<210> 259
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 259
Pro Thr Ile Ser Ser Gly Leu Lys
1 5
<210> 260
<211> 12
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 260
Tyr Thr Pro Leu Phe Thr Thr Thr Gly Ser Gln Lys
1 5 10
<210> 261
<211> 741
<212> DNA
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 261
accccagtgt tagctgcttt tctccatggc attagtaaca ataagaagac aggaggcctc 60
cagcttgtgg tatatgctga taccgactcg gtcaggccgc gggtgcaggt atttgtgaca 120
aacctcacag attcgagcaa gtggaagctc tgcgcagatg cttcggtccg caatgctcac 180
aaggcagtgg cctacgtgaa atggggctgg gactgccggg actacaaggt ttctactgag 240
ctggtaactg ggcggtttgc tgggcaccct gctgcacaag tgaagctgga gtggcccaag 300
gttccttcga atgtcagatc agtggttgaa tggttttacg agtttgtccc tggggctgca 360
tttatgctgg gtttctctga gagaatggac aagaatcctt ctcgacaagc caggatggtt 420
gtggctctaa cttctccgag gacatgtgat gttgttgtca agctgcctga tataatcctc 480
tatcaaaaag ccgtgaggct tcctctatca ctccctgtgg gtccaaggat cccagcttca 540
gagctgcagc ctccaatctg gaacgtcttt gctgaagccc cctctgccgt gctcgagaat 600
ttgaaagctc gctgctcagt ttcgtacaac aagatcaaaa cctttaatga agtcaagttc 660
aactactcga tgcccgcaaa ctgctatcac atcttggttc aggattgcag ctctgaactt 720
aagttcctgg tgatgatgaa a 741
<210> 262
<211> 247
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 262
Thr Pro Val Leu Ala Ala Phe Leu His Gly Ile Ser Asn Asn Lys Lys
1 5 10 15
Thr Gly Gly Leu Gln Leu Val Val Tyr Ala Asp Thr Asp Ser Val Arg
20 25 30
Pro Arg Val Gln Val Phe Val Thr Asn Leu Thr Asp Ser Ser Lys Trp
35 40 45
Lys Leu Cys Ala Asp Ala Ser Val Arg Asn Ala His Lys Ala Val Ala
50 55 60
Tyr Val Lys Trp Gly Trp Asp Cys Arg Asp Tyr Lys Val Ser Thr Glu
65 70 75 80
Leu Val Thr Gly Arg Phe Ala Gly His Pro Ala Ala Gln Val Lys Leu
85 90 95
Glu Trp Pro Lys Val Pro Ser Asn Val Arg Ser Val Val Glu Trp Phe
100 105 110
Tyr Glu Phe Val Pro Gly Ala Ala Phe Met Leu Gly Phe Ser Glu Arg
115 120 125
Met Asp Lys Asn Pro Ser Arg Gln Ala Arg Met Val Val Ala Leu Thr
130 135 140
Ser Pro Arg Thr Cys Asp Val Val Val Lys Leu Pro Asp Ile Ile Leu
145 150 155 160
Tyr Gln Lys Ala Val Arg Leu Pro Leu Ser Leu Pro Val Gly Pro Arg
165 170 175
Ile Pro Ala Ser Glu Leu Gln Pro Pro Ile Trp Asn Val Phe Ala Glu
180 185 190
Ala Pro Ser Ala Val Leu Glu Asn Leu Lys Ala Arg Cys Ser Val Ser
195 200 205
Tyr Asn Lys Ile Lys Thr Phe Asn Glu Val Lys Phe Asn Tyr Ser Met
210 215 220
Pro Ala Asn Cys Tyr His Ile Leu Val Gln Asp Cys Ser Ser Glu Leu
225 230 235 240
Lys Phe Leu Val Met Met Lys
245
<210> 263
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 263
Phe Ala Gly His Pro Ala Ala Gln Val Lys
1 5 10
<210> 264
<211> 19
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 264
Lys Thr Gly Gly Leu Gln Leu Val Val Tyr Ala Asp Thr Asp Ser Val
1 5 10 15
Arg Pro Arg
<210> 265
<211> 10
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 265
Leu Pro Leu Ser Leu Pro Val Gly Pro Arg
1 5 10
<210> 266
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 266
Thr Gly Gly Leu Gln Leu Val Val Tyr
1 5
<210> 267
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 267
Ala Asp Thr Asp Ser Val Arg Pro Arg
1 5
<210> 268
<211> 15
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 268
Thr Pro Val Leu Ala Ala Phe Leu His Gly Ile Ser Asn Asn Lys
1 5 10 15
<210> 269
<211> 13
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 269
Val Gln Val Phe Val Thr Asn Leu Thr Asp Ser Ser Lys
1 5 10
<210> 270
<211> 9
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 270
Val Ser Thr Glu Leu Val Thr Gly Arg
1 5
<210> 271
<211> 8
<212> PRT
<213> 鸡(Gallus gallus)
<400> 271
Val Val Ala Leu Thr Ser Pro Arg
1 5

Claims (11)

1.一种蛋变态反应的诊断试剂盒,其包含以下(1)~(3)的蛋白质中的至少一种作为抗原:
(1)(1A)包含卵黄原蛋白-3(Vitellogenin-3)的C末端部分的蛋白质或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(1A-a)~(1A-e)中的任一蛋白质:
(1A-a)含有在序列号2中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(1A-b)含有与序列号2所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(1A-c)含有由在序列号1中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(1A-d)含有由与序列号1所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(1A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号1所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(1B)含有选自由序列号2~11组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(2)(2A)包含卵黄原蛋白-3(Vitellogenin-3)的C末端部分的蛋白质或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(2A-a)~(2A-e)中的任一蛋白质:
(2A-a)含有在序列号13中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(2A-b)含有与序列号13所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(2A-c)含有由在序列号12中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(2A-d)含有由与序列号12所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(2A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号12所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(2B)含有选自由序列号9~11、13、14和16组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(3)(3A)包含卵黄原蛋白-1(Vitellogenin-1)的中央部分或卵黄脂磷蛋白-1(Lipovitellin-1)的C末端部分的蛋白质、或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(3A-a)~(3A-e)中的任一蛋白质:
(3A-a)含有在序列号18中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(3A-b)含有与序列号18所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(3A-c)含有由在序列号17中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(3A-d)含有由与序列号17所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(3A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号17所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(3B)含有选自由序列号18~45组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质。
2.一种蛋变态反应的诊断试剂盒,其包含以下(4)~(10)的蛋白质中的至少一种作为抗原:
(4)(4A)包含卵黄原蛋白-3(Vitellogenin-3)的蛋白质或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(4A-a)~(4A-e)中的任一蛋白质:
(4A-a)含有在序列号47中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(4A-b)含有与序列号47所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(4A-c)含有由在序列号46中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(4A-d)含有由与序列号46所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(4A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号46所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(4B)含有选自由序列号47~57组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(5)(5A)包含卵黄原蛋白-2前体(Vitellogenin-2precursor)的蛋白质或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(5A-a)~(5A-e)中的任一蛋白质:
(5A-a)含有在序列号59中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(5A-b)含有与序列号59所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(5A-c)含有由在序列号58中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(5A-d)含有由与序列号58所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(5A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号58所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(5B)含有选自由序列号59~104组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(6)(6A)卵黄原蛋白-2前体(Vitellogenin-2precursor)或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(6A-a)~(6A-e)中的任一蛋白质:
(6A-a)含有在序列号106中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(6A-b)含有与序列号106所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(6A-c)含有由在序列号105中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(6A-d)含有由与序列号105所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(6A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号105所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(6B)含有选自由序列号106~150组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(7)(7A)载脂蛋白B前体(Apolipoprotein B precursor)或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(7A-a)~(7A-e)中的任一蛋白质:
(7A-a)含有在序列号152中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(7A-b)含有与序列号152所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(7A-c)含有由在序列号151中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(7A-d)含有由与序列号151所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(7A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号151所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(7B)含有选自由序列号152~235组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(8)(8A)载脂蛋白B前体(Apolipoprotein B precursor)或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(8A-a)~(8A-e)中的任一蛋白质:
(8A-a)含有在序列号237中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(8A-b)含有与序列号237所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(8A-c)含有由在序列号236中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(8A-d)含有由与序列号236所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(8A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号236所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(8B)含有选自由序列号237~249组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(9)(9A)载脂蛋白B前体(Apolipoprotein B precursor)或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(9A-a)~(9A-e)中的任一蛋白质:
(9A-a)含有在序列号251中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(9A-b)含有与序列号251所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(9A-c)含有由在序列号250中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(9A-d)含有由与序列号250所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(9A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号250所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(9B)含有选自由序列号251~260组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质;
(10)(10A)卵黄原蛋白-2前体(Vitellogenin-2precursor)或其突变体,其是作为蛋变态反应的抗原的、以下(10A-a)~(10A-e)中的任一蛋白质:
(10A-a)含有在序列号262中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质;
(10A-b)含有与序列号262所示的氨基酸序列的同一性为70%以上的氨基酸序列的蛋白质;
(10A-c)含有由在序列号261中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;
(10A-d)含有由与序列号261所示的碱基序列的同一性为70%以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质;或
(10A-e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质,所述核酸和由与序列号261所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交;或者
(10B)含有选自由序列号262~271组成的组中的氨基酸序列中的至少一种的蛋白质。
3.一种蛋变态反应的诊断用组合物,其包含:权利要求1中作为(1)~(3)或权利要求2中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种作为抗原。
4.一种提供用于诊断对象的蛋变态反应的指标的方法,其包括以下工序:
(i)使由对象得到的试样与抗原接触,此处,该试样是包含有IgE抗体的溶液;
(ii)对由对象得到的试样中的IgE抗体与该抗原的结合进行检测;
(iii)检测到对象的IgE抗体与该抗原结合时,提供对象为蛋变态反应的指标;
此处,该抗原是权利要求1中作为(1)~(3)或权利要求2中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种。
5.一种药物组合物,其包含:权利要求1中作为(1)~(3)或权利要求2中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种。
6.根据权利要求5所述的药物组合物,其用于治疗蛋变态反应。
7.一种蛋、蛋加工品或鸟,其特征在于,其为去除或降低了抗原的蛋、蛋加工品或者产生该蛋或由该蛋孵化的鸟,该抗原是权利要求1中作为(1)~(3)或权利要求2中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种。
8.一种用于判断对象物中有无蛋抗原的检测仪,其特征在于,其包含与权利要求1中作为(1)~(3)或权利要求2中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种结合的抗体。
9.一种用于判断对象物中有无蛋变态反应的抗原的检测仪,其特征在于,其包含具有与序列号1、12、17、46、58、105、151、236、250或261所示的碱基序列的至少一个互补的碱基序列的引物。
10.一种去除或降低了抗原的蛋加工品的制造方法,其具有如下步骤:在该加工品的制造过程中确认抗原被去除或降低了,
此处,该抗原是权利要求1中作为(1)~(3)限定的蛋白质的至少一种、或者权利要求2中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种。
11.一种源自蛋的抗原,其是权利要求1中作为(1)~(3)限定的蛋白质的至少一种、或者权利要求2中作为(4)~(10)限定的蛋白质的至少一种,并且成为蛋变态反应的原因。
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