CN109234191A - 一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用 - Google Patents

一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN109234191A
CN109234191A CN201811011210.5A CN201811011210A CN109234191A CN 109234191 A CN109234191 A CN 109234191A CN 201811011210 A CN201811011210 A CN 201811011210A CN 109234191 A CN109234191 A CN 109234191A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ethyl mercaptan
dimethyl disulfide
bacillus
spindle lysine
spindle
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201811011210.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109234191B (zh
Inventor
李桂英
王集军
安太成
熊举坤
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangdong University of Technology
Original Assignee
Guangdong University of Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangdong University of Technology filed Critical Guangdong University of Technology
Priority to CN201811011210.5A priority Critical patent/CN109234191B/zh
Publication of CN109234191A publication Critical patent/CN109234191A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109234191B publication Critical patent/CN109234191B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D53/00—Separation of gases or vapours; Recovering vapours of volatile solvents from gases; Chemical or biological purification of waste gases, e.g. engine exhaust gases, smoke, fumes, flue gases, aerosols
    • B01D53/34—Chemical or biological purification of waste gases
    • B01D53/46—Removing components of defined structure
    • B01D53/72—Organic compounds not provided for in groups B01D53/48 - B01D53/70, e.g. hydrocarbons
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D53/00—Separation of gases or vapours; Recovering vapours of volatile solvents from gases; Chemical or biological purification of waste gases, e.g. engine exhaust gases, smoke, fumes, flue gases, aerosols
    • B01D53/34—Chemical or biological purification of waste gases
    • B01D53/74—General processes for purification of waste gases; Apparatus or devices specially adapted therefor
    • B01D53/84—Biological processes
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
    • B09C1/10—Reclamation of contaminated soil microbiologically, biologically or by using enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00—Nature of the contaminant
    • C02F2101/30—Organic compounds
    • C02F2101/34—Organic compounds containing oxygen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00—Nature of the contaminant
    • C02F2101/30—Organic compounds
    • C02F2101/40—Organic compounds containing sulfur
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/20—Air quality improvement or preservation, e.g. vehicle emission control or emission reduction by using catalytic converters

Landscapes

  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用。该菌株的名称为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)GDUTAN6，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M 2018416，保藏日期为2018年7月2日。该纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6呈革兰氏阳性，杆状，菌落形态为圆形，白色，透明，菌落直径为1～2mm。该纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6可应用于环境修复，降解环境中乙硫醇和二甲基二硫醚，降解率高，对乙硫醇和二甲基二硫醚的降解率分别可达93.17％和100％。

Description

一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽 孢杆菌及其应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域，更具体地，涉及一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用。
背景技术
众所周知，有机恶臭污染是全世界目前存在的一种很严重的空气污染，给人们的生活造成了很大的困扰，严重影响人们身心健康，而其中含硫恶臭污染物是非常重要的一类恶臭污染物。由于这类恶臭污染物具有挥发性的特点，因此恶臭污染主要是通过大气传播和扩散，作用于人的嗅觉器官而被感知的一种嗅觉污染。这一类污染物通常都包括挥发性无机物(Volatile Inorganic Compounds,VIC)和挥发性有机物(Volatile OrganicCompounds,VOCs)。而其中的乙硫醇(ethanethiol，CH3CH2SH)和二甲基二硫醚(dimethyldisulfide，C2H6S2)为常见的硫醚类有机恶臭污染物。具有强烈、持久且具刺激性的蒜臭味，当人体大量吸入时，会引起呼吸困难、血压降低，并会出现呕吐、喉咙不适等症状。因此对乙硫醇和二甲基二硫醚的去除势在必行。
恶臭污染治理方法的选择，主要依据恶臭污染物的物理化学性质及处理要求来确定。目前，治理恶臭污染物的主要有物理法、化学法和生物法三类。传统处理恶臭气体污染物通常采用物理、化学方法，主要包括活性炭吸附、气体洗涤吸收、稀释扩散法、氧化/焚烧等方法。虽然物理法和化学法可以净化含恶臭污染物的气体，而且具有各自的优点，如活性炭的无选择性吸附以及氧化/焚烧降解有机污染物效果较好等优点。但是这些方法也都有其各自的缺点，如能耗和运行费用成本比较高，所用设备繁多且工艺复杂，降解不彻底，容易造成二次污染，并且二次污染后吸附剂的再生和后处理过程复杂等。而采用生物法降解恶臭气体具有降解彻底、成本低、无二次污染等优点，因此，近几十年来，微生物在环境污染物降解领域不断发展和成功应用，生物法降解恶臭污染物越来越受到人们的青睐。虽然目前已有一部分研究者筛选出了能够分别降解乙硫醇或二甲基二硫醚的降解菌株，但是有关采用同一株细菌能够同时降解多种混合废气的微生物数量较少，而目前环境中的污染物大多是以混合物的形式存在的。因此，筛选出高效的能够同时降解乙硫醇和二甲基二硫醚降解菌对混合恶臭有机含硫废气的净化方面具有非常重要的意义。该纺锤形赖氨酸芽孢杆菌是一种革兰氏阳性菌、杆状，在固体培养基表面，菌落形态为圆形，白色，透明，菌落直径为1～2mm。迄今为止，还没有见到有关使用纺锤形赖氨酸芽孢杆菌同时降解乙硫醇和二甲基二硫醚的相关报道及专利。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术的缺陷，提供一株具有同时降解乙硫醇和二甲基二硫醚的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌。该纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6属于纺锤形赖氨酸芽孢杆菌属的一个新变种，具有优异地降解乙硫醇和二甲基二硫醚的能力，能同时降解环境中的乙硫醇和二甲基二硫醚，且降解率均很高。
本发明的另一目的在于提供上述具有同时降解乙硫醇和二甲基二硫醚降的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌在环境修复中的应用。
本发明上述目的通过以下技术方案予以实现：
本发明的第一方面，提供一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌，该菌株名称为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)GDUTAN6，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武汉大学；保藏编号为CCTCC NO：M 2018416，保藏日期为2018年7月2日。
本发明的所述具有降解乙硫醇和二甲基二硫醚能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌的形态特性如下：
(a)采用常规的细菌生理生化鉴定方法和电子显微镜观察，所筛选的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌的细胞染色为革兰氏阳性，杆状。
(b)菌落的形态特性为：在LB固体培养基培养24h后，菌落形态为圆形，白色，透明，菌落直径为1～2mm。
本发明的所述具有同时降解乙硫醇和二甲基二硫醚能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌的主要的生理生化特征如下表1所示。
表1纺锤形赖氨酸芽孢杆菌的主要的生理生化特征
注：+：阳性反应；-：阴性反应
本发明的具有同时降解乙硫醇和二甲基二硫醚能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌的16S rDNA序列如SEQ ID NO：1所示。
通过16S rDNA序列比对分析，发现本发明的菌株与Lysinibacillus fusiformisNBRC 15717的同源性达到100％。通过结合菌体形态特征、生长条件、生理生化鉴定结果确定纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)GDUTAN6属于纺锤形赖氨酸芽孢杆菌属的一个新变种，命名为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)GDUTAN6。
本发明的第二个方面，提供所述的具有同时降解乙硫醇和二甲基二硫醚能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌在环境修复中的应用。
本发明的具有同时降解乙硫醇和二甲基二硫醚能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌在环境修复的应用中，能够同时降解环境中的乙硫醇和二甲基二硫醚。
进一步地，所述环境包括大气、水体或者土壤。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1.本发明的菌株是首次从广东省广州市某垃圾填埋场的垃圾渗滤液中筛选得到具有同时降解乙硫醇和二甲基二硫醚能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6。
2.本发明的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6具有同时高效降解乙硫醇和二甲基二硫醚的能力，在乙硫醇底物浓度为5～100ppm条件下降解110h，降解率可达93.17％；在二甲基二硫醚底物浓度为5～100ppm条件下降解40h，降解率可高达100％。
附图说明
图1是本发明的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6在电子显微镜下的形态图。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
实施例1
一株具有同时降解乙硫醇和二甲基二硫醚能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌，该菌株的名称为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)GDUTAN6，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内；保藏编号为CCTCC NO：M 2018416，保藏日期为2018年7月2日。
本实施例的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6分离筛选自广东省广州市某垃圾填埋场渗滤液，其分离纯化方法如下：
所用的驯化培养基为无机盐培养基(每1000mL无机盐培养基含K2HPO4·3H2O1.2g，KH2PO41.2g，NH4Cl 0.4g，MgSO4·7H2O 0.2g，FeSO4·7H2O 0.01g，1mL微量元素液(g/L)：CaCl2·2H2O 0.2g，MnSO4·4H2O 0.2g，CuSO4·2H2O 0.01g，ZnSO4·7H2O 0.2g，CoCl2·6H2O 0.09g，Na2MoO4·2H2O 0.12g，H3BO30.006g)。液体培养基A：牛肉膏：2.0g；蛋白胨：10g；NaCl：5.0g；纯化水：1000mL。高温灭菌20min，冷却后加入1mL/L乙硫醇。固体培养基B：牛肉膏：2.0g；蛋白胨：10g；NaCl：5.0g；琼脂18％；硫代硫酸钠：10g；纯化水：1000mL。高温灭菌20min。
降解菌的分离筛选步骤为取1mL渗滤液五份，分别稀释至10、20、30、40、50倍，接种到液体培养基A中，液体培养基装瓶量为100mL/250mL，在摇床温度为37℃，转速为150r/min的条件下缺氧培养1天。然后取经驯化的增菌液100μL，分别稀释到10-1，10-2，10-3，10-4，10-5倍，涂布到固体培养基B中，在恒温培养箱中37℃条件下培养3天后观察菌落形态。
经第一次平板分离后，挑取长势良好、形态均匀的菌液再次放入液体培养基A中进行增菌培养，然后再接种至固体培养基B中，经5次以上液相培养和固体分离纯化循环后，选取固体培养基上的菌株进行保存并进行降解特性的研究。
降解率的测定：取4℃保存的菌液接种入营养肉汤中，于摇床温度37℃，转速150rpm下增菌培养24h后，菌液离心并用灭菌的去离子水洗涤三次后，悬浮于无机盐培养基中制成悬菌液。在250mL的血清瓶中加入45mL的无机盐培养基，高压灭菌15min后加入5mL悬菌液，并使得液相中初始乙硫醇浓度为分别1和2mg/L。用丁基胶塞密封后外面缠上封口膜放入摇床于37℃，转速150rpm下培养，定期从血清瓶顶空取样检测气相中乙硫醇的浓度变化。
气相中乙硫醇浓度的分析采用科创GC9800气相色谱-氢火焰(GC-FID)检测，色谱柱为HP-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)。以超纯氮气(广东华特气体股份有限公司)为流动相，进样器设定温度为180℃，柱炉温度为110℃，检测器温度FID温度为250℃，保护温度为设定温度加270℃。每次进样使用500μL气密进样针，进样体积为300μL，以不分流模式进样。
将纯化得到的菌落进行鉴定，鉴定结果如下：
(1)菌体的形态特性：
a.采用常规的细菌生理生化鉴定方法和电子显微镜观察，所筛选的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌的细胞染色为革兰氏阳性；在电子显微镜下观察，其形态为杆状，菌体大小为0.3μm×(6.5～8.5)μm，周生鞭毛，如图1所示；
b.菌落的形态特性：在LB固体培养基培养24h后，菌落边缘整齐，圆形，白色，透明，菌落直径为1～2mm；
c.主要的生理生化特征如表2和表3所示。
表2纺锤形赖氨酸芽孢杆菌的生理生化特性—酶活、碳源氧化
注：+：阳性反应；-：阴性反应；
表3菌株生理生化特性—利用碳源产酸
注：+：阳性反应；-：阴性反应；
上述结果表明本发明所筛选的细菌与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌属的生理生化特性很相似。
(2)提取细菌基因组DNA，采用细菌的16S rDNA通用引物：
上游引物：F27(5'-AGTTTGATCMTGGCTCAG-3')
下游引物：R1492(5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3')
扩增其16S rDNA全部基因，测序结果如如SEQ ID NO：1所示。
将SEQ ID NO：1中所示的长为1435bp的16S rDNA基因序列与Genbank中已登录的基因序列进行比对分析发现菌株与Lysinibacillus fusiformis NBRC 15717的同源性达到100％。
综合上述的生理生化特性、16S rDNA基因序列结果，本发明所筛选的细菌应归属纺锤形赖氨酸芽孢杆菌属的一个新变种，命名为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillusfusiformis)GDUTAN6。
该纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)GDUTAN6于2018年7月2日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内，保藏编号为CCTCC NO：M 2018416。
实施例2
本实施例为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)GDUTAN6在环境修复中的应用，可降解环境中的乙硫醇。其中环境包括大气、水体或者土壤。
下面对本发明筛选得到的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)GDUTAN6的乙硫醇降解能力进行试验验证的方法如下：
根据降解实验需要配置无机盐培养基，往250mL的血清瓶中加入无机盐溶液45mL(每45mL无机盐溶液含：K2HPO4·3H2O 0.054g，KH2PO40.054g，NH4Cl 0.018g，MgSO4·7H2O0.009g，FeSO4·7H2O 0.00045g，CaCl2·2H2O 0.009g，MnSO4·4H2O 0.009g，CuSO4·2H2O0.00045g，ZnSO4·7H2O 0.009g，CoCl2·6H2O 0.00405g，Na2MoO4·2H2O 0.054g，H3BO30.00027g，双蒸水45mL)，于121℃高压灭菌30min。
将筛选所得的具有乙硫醇降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6在营养肉汤培养基中(牛肉膏3.0g/L、蛋白胨10.0g/L、NaCl 5.0g/L)37℃，155rpm的摇床中活化菌体24h，菌液离心，收集菌体，并用灭菌的去离子水洗涤三次，并用10mL无机盐溶液重悬，并向含有不同浓度乙硫醇的45mL无机盐溶液中接种5mL菌悬液，其中乙硫醇初始浓度为分别5ppm，25ppm，35ppm，50ppm，75ppm和100ppm。其中无机盐的pH值为7。血清瓶用丁基胶塞密封后外面缠上封口膜放入摇床，在37℃，150rpm的条件下反应110h，定时从血清瓶顶空取样检测气相中乙硫醇的浓度。降解率＝(初始浓度-终浓度)/初始浓度，结果如表4所示。
表4纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6对不同初始浓度乙硫醇的降解率
乙硫醇浓度(ppm) 降解率
5 93.17％
25 83.15％
35 76.50％
50 72.28％
75 72.03％
100 45.57％
从表4中可以看出，本发明筛选得到的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6在该条件下对乙硫醇的降解能力最高可达到93.17％。
实施例3
本实施例为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)GDUTAN6在环境修复中的应用，也可降解环境中的二甲基二硫醚。其中环境包括大气、水体或者土壤。
下面对本发明筛选得到的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)GDUTAN6的二甲基二硫醚降解能力进行试验验证的方法如下：
根据降解实验需要配置无机盐培养基，往250mL的血清瓶中加入无机盐溶液45mL(每45mL无机盐溶液含：K2HPO4·3H2O 0.054g，KH2PO40.054g，NH4Cl 0.018g，MgSO4·7H2O0.009g，FeSO4·7H2O 0.00045g，CaCl2·2H2O 0.009g，MnSO4·4H2O 0.009g，CuSO4·2H2O0.00045g，ZnSO4·7H2O 0.009g，CoCl2·6H2O 0.00405g，Na2MoO4·2H2O 0.054g，H3BO30.00027g，双蒸水45mL)，于121℃高压灭菌30min。
将筛选所得的具有乙硫醇降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6在营养肉汤培养基中(牛肉膏3.0g/L、蛋白胨10.0g/L、NaCl 5.0g/L)37℃，155rpm的摇床中活化菌体24h，菌液离心，收集菌体，并用灭菌的去离子水洗涤三次，并用10mL无机盐溶液重悬，并向含有不同浓度二甲基二硫醚的45mL无机盐溶液中接种5mL菌悬液，其中二甲基二硫醚初始浓度为分别5ppm，25ppm，35ppm，50ppm，75ppm和100ppm。其中无机盐的pH值为7。血清瓶用丁基胶塞密封后外面缠上封口膜放入摇床，在37℃，150rpm的条件下反应40h，定时从血清瓶顶空取样检测气相中二甲基二硫醚的浓度。
气相中二甲基二硫醚浓度的分析采用科创GC9800气相色谱-氢火焰(GC-FID)检测，色谱柱为HP-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)。以超纯氮气(广东华特气体股份有限公司)为流动相，进样器设定温度为150℃，柱炉温度为80℃，检测器温度FID温度为150℃，保护温度为设定温度加170℃。每次进样使用500μL气密进样针，进样体积为300μL，以不分流模式进样。降解率的测定同实施例2，结果如表5所示。
表5纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6对不同初始浓度二甲基二硫醚的降解率
二甲基二硫醚浓度(ppm) 降解率
5 100％
25 100％
50 100％
75 100％
100 82.40％
从表5中可以看出，本发明筛选得到纺锤形赖氨酸芽孢杆菌GDUTAN6在该条件下对二甲基二硫醚降解能力达到100％。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合和简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 广东工业大学
<120> 一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用
<130> 1
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1435
<212> DNA
<213> 纺锤形赖氨酸芽孢杆菌 (Lysinibacillus fusiformis) GDUTAN6
<400> 1
gagctataca tgcaagtcga gcgaacagag aaggagcttg ctccttcgac gttagcggcg 60
gacgggtgag taacacgtgg gcaacctacc ttatatttgg gataactccg ggaaaccggg 120
gctaataccg aataatctgt ttcacctcat ggtgaaacac tgaaagacgg tttcggctgt 180
cgctatagga tgggcccgcg gcgcattagc tagttggtga ggtaacggct caccaaggcg 240
acgatgcgta gccgacctga gagggtgatc ggccacactg ggactgagac acggcccaga 300
ctcctacggg aggcagcagt agggaatctt ccacaatggg cgaaagcctg atggagcaac 360
gccgcgtgag tgaagaagga tttcggttcg taaaactctg ttgtaaggga agaacaagta 420
cagtagtaac tggctgtacc ttgacggtac cttattagaa agccacggct aactacgtgc 480
cagcagccgc ggtaatacgt aggtggcaag cgttgtccgg aattattggg cgtaaagcgc 540
gcgcaggtgg tttcttaagt ctgatgtgaa agcccacggc tcaaccgtgg agggtcattg 600
gaaactggga gacttgagtg cagaagagga tagtggaatt ccaagtgtag cggtgaaatg 660
cgtagagatt tggaggaaca ccagtggcga aggcgactat ctggtctgta actgacactg 720
aggcgcgaaa gcgtggggag caaacaggat tagataccct ggtagtccac gccgtaaacg 780
atgagtgcta agtgttaggg ggtttccgcc ccttagtgct gcagctaacg cattaagcac 840
tccgcctggg gagtacggtc gcaagactga aactcaaagg aattgacggg ggcccgcaca 900
agcggtggag catgtggttt aattcgaagc aacgcgaaga accttaccag gtcttgacat 960
cccgttgacc actgtagaga tatagtttcc ccttcggggg caacggtgac aggtggtgca 1020
tggttgtcgt cagctcgtgt cgtgagatgt tgggttaagt cccgcaacga gcgcaaccct 1080
tgatcttagt tgccatcatt tagttgggca ctctaaggtg actgccggtg acaaaccgga 1140
ggaaggtggg gatgacgtca aatcatcatg ccccttatga cctgggctac acacgtgcta 1200
caatggacga tacaaacggt tgccaactcg cgagagggag ctaatccgat aaagtcgttc 1260
tcagttcgga ttgtaggctg caactcgcct acatgaagcc ggaatcgcta gtaatcgcgg 1320
atcagcatgc cgcggtgaat acgttcccgg gccttgtaca caccgcccgt cacaccacga 1380
gagtttgtaa cacccgaagt cggtgaggta accttttgag ccagccgccg aagtg 1435

Claims (5)

1.一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌，其特征在于，该菌株名称为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillusfusiformis)GDUTAN6，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武汉大学；保藏编号为CCTCC NO：2M2018416，保藏日期为2018年7月2日。
2.根据权利要求1所述的一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌，其特征在于，所述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)GDUTAN6的16S rDNA序列如SEQ ID NO：1所示。
3.如权利要求1所述的一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌在环境修复中的应用。
4.根据权利要求3所述的一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌在环境修复中的应用，其特征在于，所述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillusfusiformis)GDUTAN6能够降解环境中的乙硫醇和二甲基二硫醚。
5.根据权利要求3或4所述的一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌在环境修复中的应用，其特征在于，所述环境为大气、水体或者土壤。
CN201811011210.5A 2018-08-31 2018-08-31 一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用 Active CN109234191B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811011210.5A CN109234191B (zh) 2018-08-31 2018-08-31 一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811011210.5A CN109234191B (zh) 2018-08-31 2018-08-31 一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109234191A true CN109234191A (zh) 2019-01-18
CN109234191B CN109234191B (zh) 2020-09-29

Family

ID=65068070

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811011210.5A Active CN109234191B (zh) 2018-08-31 2018-08-31 一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109234191B (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111893074A (zh) * 2020-08-14 2020-11-06 贵州大学 一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌菌株及其用途
CN113817651A (zh) * 2021-10-26 2021-12-21 广东中微环保生物科技有限公司 除臭复合菌剂及其除臭剂和除臭生物液
CN113980869A (zh) * 2021-12-02 2022-01-28 广东工业大学 一株枯草芽孢杆菌gdutan13菌株及其应用
CN114015601A (zh) * 2021-11-09 2022-02-08 杭州师范大学 赖氨酸芽孢杆菌qb30及其在含乙硫醇恶臭废气降解中的应用
CN114085799A (zh) * 2022-01-12 2022-02-25 北京科技大学 降解聚苯乙烯塑料的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌制剂及其制备
CN114507617A (zh) * 2021-12-17 2022-05-17 广东工业大学 一种耐盐赖氨酸芽胞杆菌gdutan17及其应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101497869A (zh) * 2009-01-22 2009-08-05 河北科技大学 一种脱除乙硫醇的优势菌及其引种驯化方法
CN102363756A (zh) * 2011-10-08 2012-02-29 广东省微生物研究所 一种赖氨酸芽孢杆菌（Lysinibacillus sp.）GY32及其应用
CN103667104A (zh) * 2013-10-09 2014-03-26 中国科学院广州地球化学研究所 一种具有乙硫醇降解能力的芽孢杆菌及其应用
CN103667105A (zh) * 2013-10-09 2014-03-26 中国科学院广州地球化学研究所 一种具有二甲基二硫醚降解能力的蜡状芽孢杆菌及其应用
CN109576171A (zh) * 2018-11-16 2019-04-05 广东植物龙生物技术股份有限公司 纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101497869A (zh) * 2009-01-22 2009-08-05 河北科技大学 一种脱除乙硫醇的优势菌及其引种驯化方法
CN102363756A (zh) * 2011-10-08 2012-02-29 广东省微生物研究所 一种赖氨酸芽孢杆菌（Lysinibacillus sp.）GY32及其应用
CN103667104A (zh) * 2013-10-09 2014-03-26 中国科学院广州地球化学研究所 一种具有乙硫醇降解能力的芽孢杆菌及其应用
CN103667105A (zh) * 2013-10-09 2014-03-26 中国科学院广州地球化学研究所 一种具有二甲基二硫醚降解能力的蜡状芽孢杆菌及其应用
CN109576171A (zh) * 2018-11-16 2019-04-05 广东植物龙生物技术股份有限公司 纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
-: "GenBank登录号：MH561862.1", 《GENBANK》 *

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111893074A (zh) * 2020-08-14 2020-11-06 贵州大学 一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌菌株及其用途
CN113817651A (zh) * 2021-10-26 2021-12-21 广东中微环保生物科技有限公司 除臭复合菌剂及其除臭剂和除臭生物液
CN114015601A (zh) * 2021-11-09 2022-02-08 杭州师范大学 赖氨酸芽孢杆菌qb30及其在含乙硫醇恶臭废气降解中的应用
CN114015601B (zh) * 2021-11-09 2024-03-29 杭州师范大学 赖氨酸芽孢杆菌qb30及其在含乙硫醇恶臭废气降解中的应用
CN113980869A (zh) * 2021-12-02 2022-01-28 广东工业大学 一株枯草芽孢杆菌gdutan13菌株及其应用
CN113980869B (zh) * 2021-12-02 2023-08-22 广东工业大学 一株枯草芽孢杆菌gdutan13菌株及其应用
CN114507617A (zh) * 2021-12-17 2022-05-17 广东工业大学 一种耐盐赖氨酸芽胞杆菌gdutan17及其应用
CN114507617B (zh) * 2021-12-17 2023-09-26 广东工业大学 一种耐盐赖氨酸芽胞杆菌gdutan17及其应用
CN114085799A (zh) * 2022-01-12 2022-02-25 北京科技大学 降解聚苯乙烯塑料的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌制剂及其制备
CN114085799B (zh) * 2022-01-12 2023-06-06 北京科技大学 降解聚苯乙烯塑料的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌制剂及其制备

Also Published As

Publication number Publication date
CN109234191B (zh) 2020-09-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109234191A (zh) 一株具有乙硫醇和二甲基二硫醚降解能力的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用
CN107815427B (zh) 一株具有甲胺降解能力的梭状芽孢杆菌及其应用
CN103667105B (zh) 一种具有二甲基二硫醚降解能力的蜡状芽孢杆菌及其应用
CN107446846B (zh) 一株具有甲胺降解能力的铜绿假单胞菌及其应用
CN106434470B (zh) 一种多环芳烃降解菌及其应用
CN113930365B (zh) 一株降解多环芳烃的铜绿假单胞菌及应用
CN113549565B (zh) 一种具有降解苯系物能力的阴沟肠杆菌及其应用
CN108018250A (zh) 一株嗜酸氧化亚铁硫杆菌及其在环境治理中的应用
CN110452900A (zh) 一种包埋降解微生物的pva-sa复合固定化载体的制备方法
CN101514329B (zh) 具有降解苯系化合物能力的解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN103667104B (zh) 一种具有乙硫醇降解能力的芽孢杆菌及其应用
CN101294140B (zh) 一种具有高效降解吡啶能力的广州苍白杆菌
CN113186130B (zh) 一株鲍氏不动杆菌gdutan8及其在降解苯系物中的应用
CN107586751A (zh) 一株二恶烷降解菌d2及其应用
CN105420163B (zh) 一株二苯并蒽降解菌及其应用
CN104726363B (zh) 产碱杆菌菌株及其应用
CN110317756B (zh) 一种嗜线虫沙雷氏菌及其获取方法和应用
CN103613203B (zh) 利用邻苯二甲酸二丁酯降解菌降低炼油废水中cod的方法
CN109097296B (zh) 一种具有降解一甲胺能力的蜡状芽孢杆菌及其应用
CN114507617B (zh) 一种耐盐赖氨酸芽胞杆菌gdutan17及其应用
CN110669716A (zh) 一种耐高浓度苯酚、重金属和耐低温红球菌分离方法
CN109055254A (zh) 一株具有一甲胺降解能力的微小杆菌及其应用
CN103103146B (zh) 一株降解溴酸盐的鞘氨醇单胞菌菌株及其应用
CN114181851B (zh) 一种具有二甲基二硫醚降解能力的假单胞菌gdutan12菌株及其应用
CN113980869B (zh) 一株枯草芽孢杆菌gdutan13菌株及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant