CN105420163B - 一株二苯并蒽降解菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于环境有机污染物处理及生物修复技术领域，具体涉及一株二苯并蒽降解菌及其在污染水体、土壤的生物修复治理中的应用。本发明二苯并蒽降解菌于2015年10月20日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.11521，该菌株16S rDNA的Genbank登录号为KU179097。所述二苯并蒽降解菌经鉴定为拟无枝酸菌，其来自某焦化厂废水处理的剩余污泥，经人工富集驯化培养，分离纯化得到。本发明二苯并蒽降解菌应用于净化含有二苯并蒽的污染水体和土壤。

Description

一株二苯并蒽降解菌及其应用
技术领域
本发明属于环境有机污染物处理及生物修复技术领域，具体涉及一株二苯并蒽降解菌及其在污染水体、土壤的生物修复治理中的应用。
背景技术
多环芳香烃(Polycyclic aromatic hydrocarbons，简称PAHs)是指含有两个或者两个以上苯环的有机化合物。由于人类的生产活动如焦炭、沥青和精炼油的生产、化石燃料燃烧、垃圾焚烧等而使该类化合物广泛分布于环境中，因其结构稳定，疏水性强，很难降解，可在环境中长期稳定存在，属于持久性有机污染物，而且具有高毒性、高生物累积性、低流动性。随着这类物质在环境中的不断累积，不仅严重影响生态环境，还可以通过呼吸道、皮肤以及消化道进入人体而极大地威胁人类的健康。我国乃至全世界各地均有不同程度的PAHs污染，已引起各国政府及学者的高度重视。
污染环境中的PAHs可以通过光降解、化学氧化、颗粒吸附以及生物降解等多种途径去除，而微生物降解去除被认为是最经济有效的手段。目前微生物降解修复PAHs的研究普遍集中在低环PAHs的降解菌株的筛选、分离与纯化，只局限于低环PAHs的修复。由于四环以上的高环PAHs结构更复杂，水溶性更低，更易吸附于环境中的有机物上，生物可利用性也就更低，在环境中停留时间很长，尤其是对人体毒性之大，导致对于高效降解高环PAHs的微生物研究报道较少，因此，需要加大对高环PAHs降解的研究力度，从被污染的环境中筛选分离高效降解高环PAHs的微生物菌株，然后再应用于实际PAHs污染环境的生物治理，这对于治理和修复PAHs污染的水体和土壤具有重要的现实意义。
发明内容
本发明的目的是提供一株二苯并蒽降解菌及其应用。
本发明二苯并蒽降解菌于2015年10月20日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.11521，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，该菌株16S rDNA的Genbank登录号为KU179097。所述二苯并蒽降解菌经鉴定为拟无枝酸菌(Amycolatopsis sp.)Y1-2来自某焦化厂废水处理的剩余污泥，经人工富集驯化培养，分离纯化得到，命名为Y1-2。该菌革兰氏染色阳性，细胞为短杆状，无气生菌丝，菌落小，圆形，边缘整齐，后期有大量白色粉末，不透明，其最适生长条件为：pH值6.5～8.0，温度25～30℃。
本发明二苯并蒽降解菌的分离方法包括以下步骤：
(1)在150mL三角瓶中加入灭菌的无机盐培养基50mL和10mg/L的菲溶液1mL,混合均匀，再加入焦化厂废水处理后的剩余干污泥2.5g，置于恒温振荡培养箱中，于30℃和150r/min条件下振荡活化培养，其中无机盐培养基组成为：(NH4)2SO40.5g/L，NaNO30.5g/L，CaCl20.02g/L，NaCl 0.5g/L，MgSO40.1g/L，FeSO40.025g，MnSO439.8mg/L、ZnSO442.8mg/L和(NH4)6Mo7O24·4H2O34.8mg/L；
(2)在150mL三角瓶中加入50mL二苯并蒽溶液浓度为10mg/L的无机盐培养基混合液和0.5mL的微量元素溶液，混合均匀，再加入5mL培养5d的步骤(1)的悬浮液，置于恒温振荡培养箱中，于30℃和150r/min条件下进行以二苯并蒽为唯一碳源和能源的振荡富集培养，其中微量元素溶液的组成为：(NH4)6Mo7O24·4H2O34.8mg/L、MnSO439.8mg/L、ZnSO442.8mg/L；
(3)重复步骤(2)的过程，逐次提高唯一碳源和能源的二苯并蒽的浓度分别为3、4、5、6、7、8、9、10mg/L，进行富集驯化培养；
(4)从二苯并蒽的浓度升高为5mg/L开始，将5、6、7、8、9、10mg/L的培养液分别涂布于固体平板培养基上，进行耐受菌株检测，重复3次，随着二苯并蒽浓度的升高，平板上的耐受菌株逐渐减少，直到二苯并蒽的浓度为10mg/L时，平板上只分离到肉眼可辨的3种不同类型的菌落，其中固体平板培养基的组成为：蛋白胨5g/L，牛肉膏1.5g/L，葡萄糖5g/L，琼脂20g/L；
(5)将步骤(4)中得到的二苯并蒽耐受菌株的菌落进行多次重复平板划线分离，最后得到5株不同类型的纯菌株，将得到的纯菌种转接到试管中，4℃冰箱冷藏保存；
(6)分别将步骤(5)得到的5株不同类型的纯菌株接种到盛有50mL活化培养基的150mL三角瓶中，于恒温培养箱中30℃、150r/min条件下培养扩繁，制备成含菌量为1.69×107CFU/mL的菌悬液，进行二苯并蒽降解实验，最终选出一株高效降解菌，其中活化培养基的组成为：(NH4)SO40.5g/L，NaNO30.5g/L，CaCl20.02g/L，NaCl 0.5g/L，MgSO40.1g/L，FeSO40.025g；磷酸缓冲液2.5ml，微量元素溶液0.5ml，蛋白胨5g/L，牛肉膏1.5g/L，葡萄糖5g/L。
本发明二苯并蒽降解菌在净化含有二苯并蒽污染水体中的应用。将该菌株制成含菌量为1.69×107CFU/mL的菌悬液，对水体中初始浓度为10mg/L的二苯并蒽在15天后的降解率可达到41.03％。
本发明二苯并蒽降解菌在修复含有二苯并蒽污染土壤中的应用。将该菌株制成含菌量为1.69×107CFU/mL的菌悬液，对土壤中初始浓度为10mg/L的二苯并蒽在15天后的降解率可达到36.20％。
具体实施方式
实施例1：二苯并蒽降解菌降解水体中二苯并蒽的性能
将驯化得到的高效降解菌株拟无枝酸菌(Amycolatopsis sp.)在活化培养基中进行扩繁，制备成含菌量为1.69×107CFU/mL的菌悬液。取10mL菌悬液加入装有50mL二苯并蒽无机盐混合溶液的150mL三角瓶，于恒温培养箱中30℃、150r/min条件下培养，另外一瓶装有二苯并蒽无机盐混合溶液的150mL三角瓶中不接种拟无枝酸降解菌，作为非生物作用降解二苯并蒽的对照。设置3个平行样，所有操作均在无菌条件下进行。15天以后取样分析培养液中二苯并蒽的残留量。结果表明，拟无枝酸菌(Amycolatopsis sp.)对水环境中的二苯并蒽具有高效的降解性能，当二苯并蒽初始浓度为8mg/L、10mg/L和12mg/L时，15天的降解率分别达40.47％、41.03％及40.59％
实施例2：二苯并蒽降解菌降解土壤中二苯并蒽的性能
在远离焦化厂的普通农田进行5点取样，混合均匀，称取55g的土壤6份分别装入150mL三角瓶中，进行高压灭菌处理。每瓶加入适量二苯并蒽，充分振荡混匀，其中3份加入5mL拟无枝酸菌菌悬液，另外3份加入5mL无菌水，作为非生物降解对照。将上述6个三角瓶盖上封口膜并称重。在室温下避光培养。每隔5天称重并以无菌水补充缺失的水量。15天后取10g土样，测定二苯并蒽的残留量。结果表明，该拟无枝酸菌对土样中的二苯并蒽也具有明显的降解作用，当二苯并蒽初始浓度为8mg/L、10mg/L和12mg/L时，降解率分别达到36.93、36.20％及35.94％。
实施例3：各生长因子对二苯并蒽降解菌降解效果的影响
选取pH、温度、接种量以及接种时间作为影响因子，设置不同梯度的单因素实验。考查其对拟无枝酸菌(Amycolatopsis sp.)降解二苯并蒽性能的影响。各因子的梯度分别设为pH 5、6、7、8及9；温度20℃、30℃及40℃；接种量0.5g(湿重)、1.0g(湿重)、1.5g(湿重)、2.0g(湿重)以及2.5g(湿重)；接种时间1d、3d、5d、7d、12d及15d。具体降解实验过程同实施例1。结果表明，在实验范围内，拟无枝酸菌(Amycolatopsis sp.)降解二苯并蒽的适宜条件为pH值7，温度30℃，接种量1.5g，接种时间在15d。
实施例4：二苯并蒽降解菌降解混合高环多环芳烃的性能
将驯化得到的高效降解菌株拟无枝酸菌(Amycolatopsis sp.)在活化培养基中进行扩繁，制备成含菌量为1.69×107CFU/mL的菌悬液。取10mL菌悬液加入装有50mL二苯并蒽、苯并荧蒽和苯并芘的无机盐混合溶液的150mL三角瓶，于恒温培养箱中30℃、150r/min条件下培养，另外一瓶装有二苯并蒽、苯并荧蒽和苯并芘无机盐混合溶液的150mL三角瓶中不接种拟无枝酸降解菌，作为非生物作用降解的对照。设置3个平行样，所有操作均在无菌条件下进行。15天以后取样分析培养液中3种高环多环芳烃的残留量。结果表明，当二苯并蒽、苯并荧蒽和苯并芘初始浓度均为4mg/L时，15天后三者的降解率分别达到28.35％、25.27％及36.49％。本实施例说明拟无枝酸菌(Amycolatopsis sp.)对混合高环多环芳烃也具有很好的降解效果。

Claims (3)

1.一株二苯并蒽降解菌，其特征在于，所述的二苯并蒽降解菌的保藏编号为CGMCCNo.11521，所述菌株经鉴定为拟无枝酸菌(Amycolatopsis sp.)Y1-2。
2.权利要求1所述二苯并蒽降解菌在净化含有二苯并蒽污染水体中的应用。
3.权利要求1所述二苯并蒽降解菌在修复含有二苯并蒽污染土壤中的应用。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112899185B (zh) * 2021-01-29 2022-09-09 哈尔滨工业大学（深圳） 一株黑臭底泥中苯并[a]蒽降解菌的筛选及其应用
CN113897314B (zh) * 2021-10-15 2023-08-11 桂林理工大学 一种采用拟无枝酸菌降解磷酸三（2-氯丙基）酯的方法及其应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102899271A (zh) * 2012-09-29 2013-01-30 轻工业环境保护研究所 高效降解多环芳烃和苯系有机物的分枝杆菌16f及其应用
CN103555612A (zh) * 2013-10-14 2014-02-05 华南理工大学 一种微黄分支杆菌及其在降解石油组分多环芳烃中的应用
CN104004685A (zh) * 2014-06-06 2014-08-27 国家海洋局第三海洋研究所 一株多环芳烃降解菌1-25r09zxc-2及其应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102899271A (zh) * 2012-09-29 2013-01-30 轻工业环境保护研究所 高效降解多环芳烃和苯系有机物的分枝杆菌16f及其应用
CN103555612A (zh) * 2013-10-14 2014-02-05 华南理工大学 一种微黄分支杆菌及其在降解石油组分多环芳烃中的应用
CN104004685A (zh) * 2014-06-06 2014-08-27 国家海洋局第三海洋研究所 一株多环芳烃降解菌1-25r09zxc-2及其应用

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