CN109198073A - 一株塔宾曲霉菌株及其促进普洱茶品质的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于普洱茶生产技术及产品品质改善领域,具体涉及一株塔宾曲霉菌株及其促进普洱茶品质的应用。本发明所述的塔宾曲霉,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号为CGMCC No.15885。本发明所述的塔宾曲霉菌株应用于普洱茶加工工艺中,使普洱茶新茶具有老茶陈香,并消除不良的堆味,香气组成丰富,发酵后的茶叶叶底红润,品质极佳。
Description
技术领域
本发明属于普洱茶生产技术及产品品质改善领域,涉及一株塔宾曲霉 0072-AT及其在优化提高普洱茶品质上的工艺应用。
背景技术
普洱茶以云南大叶种晒青茶为原料制成,被认为是变化最丰富、最有 故事的中国茶。普洱熟茶属于后发酵茶,是以晒青毛茶为原料经过一个月 以上的渥堆发酵制得。普洱茶中的发酵微生物众多,包括塔宾曲霉、米曲 霉、酵母等,通过发酵作用使普洱茶具有愉快的木香、陈香等特征香气。 刚刚生产出来的普洱茶,往往带有“堆味”,是一种不愉快的腐霉气味,经 过一段时间的存放,可以消除这种气味,而进一步强化普洱的特征香气。
发明内容
为此,本发明主要解决的技术问题是提供了一株具有强烈陈香的塔宾 曲霉,并提供了一种制备丰富陈香普洱茶的方法,该工艺能使普洱茶叶底 红润,品质与老茶接近。
为解决上述技术问题,本发明所述的一株塔宾曲霉0072-AT,已保藏于 中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号为CGMCC No.15885。上述的微生物菌株,由昆明中茶普洱茶存储仓中分离纯化得到, 遗传稳定,符合普洱茶高温汽蒸等生产要求的菌株,包括如下步骤:
1、在昆明中茶普洱茶储存仓选取几个地点,利用空气沉降法和表面涂 抹取样法进行取样;
2、取样后于PDA固体培养基进行培养,于28-30℃条件下培养10天 进行倒置培养,同时进行空白对照组培养,记录菌落生长情况;
3、记录菌落生长情况,进行菌落识别;选取代表性菌落,菌落形态相 互区别的菌落进行下一步纯化;
4、挑取筛选菌落划线接种至PDA固体培养基上,于28-30℃条件下培 养5-10天,直至得到各个菌株的单菌落;
5、将获得的菌株进行菌株鉴定,挑选能够在20-45℃生长,在20-75℃ 生存,可应用于普洱茶生产,抑制杂菌能力强,且遗传稳定的菌株。
将上述塔宾曲霉菌株制备用于接种工艺的液体种子,所述的是在液体 种子发酵工序前接入菌株经培养后得到的液体种子,通过如下方法制备:
1、取活化后的塔宾曲霉(CGMCC No.15885)菌株接种至液体培养基。 所述的液体培养基包括PDB液体培养基以及利用茶叶、茶粉制备茶汁的液 体培养基。
2、于28-30℃条件下,在无菌条件下于摇床中进行培养。所述液体种 子的密度为(1-5)*105cfu/mL以上。
将本发明的塔宾曲霉(CGMCC No.15885)菌株应用于普洱茶生产加 工中,对普洱茶的品质有很大的提升作用,能使普洱茶新茶具有老茶陈香, 并消除不良的堆味,香气组成丰富,发酵后的茶叶叶底红润,品质极佳。 所述普洱工艺包括毛茶拼配、混料、喷洒接种、渥堆发酵、翻堆、开沟干 燥,按如下方法进行:
1、将不同原料按要求进行拼配、混匀后,要求混料后茶叶无花杂;
2、将制备的液体种子接种到茶叶原料中,将菌液均匀喷洒到茶叶上, 接种量为28-35%,菌液喷洒均匀、茶叶不结块;
3、将接种后的茶叶堆放成高1米、长宽为(3-5)*(3-5)米的茶堆, 进行渥堆发酵,堆芯温度在35-45度左右,堆表面温度为25-30度,水分含 量在40%-50%左右;
4、每隔5天翻堆一次,让堆芯茶叶与堆表茶叶混合均匀,并保持堆芯 温度以及水分含量;
5、发酵20-27天后,在茶堆上开沟,进行通风干燥。
具体实施方式
本发明下述实施例中所述的PDA培养基按照现有技术中常规方法制 备。本专利菌株0072-AT在PDA培养基上,菌落褐黑色,平坦,质地丝 绒。通过菌体微观形态、菌落宏观形态,结合分子测序的ITS基因序列、 钙调蛋白基因序列和β微管蛋白基因序列,确认该菌株为塔宾曲霉。该菌 株遗传稳定性稳定,有良好的耐热性,符合生产要求,送样编号为0072-AT, 菌株于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号为 CGMCCNo.15885,Aspergillus tubingensis。保藏地址为北京市朝阳区北辰 西路1号院3号,保藏日期为2018年6月19日,目前状态为存活。。
将该菌株用于普洱茶发酵生产,在常规工艺中增加制备液体种子和接 种步骤,增加后的工艺包括毛茶拼配、混料、喷洒接种、渥堆发酵、翻堆、 开沟干燥、压制成型。
所述的液体种子是利用塔宾曲霉(CGMCC No.15885)按照如下方法 制备:取活化后的菌株划线接种至PDB液体培养基中,于28-30℃条件下, 避光无菌条件下培养3-5天。所述的液体培养基包括PDB液体培养基以及 利用茶叶、茶粉制备茶汁的液体培养基。所述液体种子的密度为(1-5)*105 cfu/mL。
所述接种是在茶叶中接种上述液体种子菌种,接种量为28%-35%。
所述渥堆是将接种后的茶叶于控温控湿的洁净环境进行发酵,温度为 25-30℃,时间为20-27天。
实施例1高品质普洱茶
按照本发明的方法进行单菌株发酵,制备普洱熟茶。
1、将2种不同原料按要求进行拼配、混匀后,要求混料后茶叶无花杂;
2、取活化后的塔宾曲霉(CGMCC No.15885)菌株接种至液体培养基。 所述的液体培养基包括PDB液体培养基以及利用茶叶、茶粉制备茶汁的液 体培养基。
3、于28-30℃条件下,在无菌条件下于摇床中进行培养。所述液体种 子的密度为(1-5)*105cfu/mL以上。
4、将制备的液体种子接种到茶叶原料中,将菌液均匀喷洒到茶叶上, 接种量为28-35%,菌液喷洒均匀、茶叶不结块;
5、将接种后的茶叶堆放成高1米、长宽为(3-5)*(3-5)米的茶堆, 进行渥堆发酵,堆芯温度在35-45度左右,堆表面温度为25-30度,水分含 量在40%-50%左右;
6、每隔5天翻堆一次,让堆芯茶叶与堆表茶叶混合均匀,并保持堆芯 温度以及水分含量;
7、发酵20-27天后,在茶堆上开沟,进行通风干燥。
本实施例制备的普洱熟茶,能使普洱茶新茶具有老茶陈香,并消除不 良的堆味,香气组成丰富,发酵后的茶叶叶底红润,富含茶褐素物质,品 质极佳。
对比例1普洱茶常规制备
按照《地理标志产品-普洱茶》(GB/T 22111)中记载,将茶叶原料制备 为普洱熟茶。
对比例2其他株塔宾曲霉制备的普洱茶
按照本发明的方法进行单菌株发酵,制备普洱熟茶。
1、将2种不同原料按要求进行拼配、混匀后,要求混料后茶叶无花杂;
2、取活化后的塔宾曲霉菌株接种至液体培养基。所述的液体培养基包 括PDB液体培养基以及利用茶叶、茶粉制备茶汁的液体培养基。
3、于28-30℃条件下,在无菌条件下于摇床中进行培养。所述液体种 子的密度为(1-5)*105cfu/mL以上。
4、将制备的液体种子接种到茶叶原料中,将菌液均匀喷洒到茶叶上, 接种量为28-35%,菌液喷洒均匀、茶叶不结块;
5、将接种后的茶叶堆放成高1米、长宽为(3-5)*(3-5)米的茶堆, 进行渥堆发酵,堆芯温度在35-45度左右,堆表面温度为25-30度,水分含 量在40%-50%左右;
6、每隔5天翻堆一次,让堆芯茶叶与堆表茶叶混合均匀,并保持堆芯 温度以及水分含量;
7、发酵20-27天后,在茶堆上开沟,进行通风干燥。
上述实施例的普洱熟茶成分和品质进行检测和评审。以茶多酚、茶褐 素和可溶性糖为普洱茶叶成分的评价指标;普洱茶的促消化功能是评价品 质的一个重要方面,将促淀粉消化能力作为普洱茶发酵效果评价的指标; 同时对茶叶品质进行评价。每个实施例取三份样品,检测结果分别记录于 下表1。
表1普洱熟茶品质的检测结果
由表1的普洱熟茶数据可知,实施例1的茶褐素含量高于对比例,茶 叶的香气和滋味更优。在活性上,实施例1的活性能力(促淀粉消化能力) 明显高于对比例。总体而言,利用塔宾曲霉制备的实施例1的香气和滋味 整体优于对比例,陈香浓郁,无堆味霉味,结束发酵即可制成产品,无需 经过陈化散去堆味。
显然,上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例,而并非对实施方 式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可 以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予 以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保 护范围之中。
Claims (4)
1.一种塔宾曲霉0072-AT,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号为CGMCC No.15885。
2.根据权利要求1所述的微生物菌株,其特征在于,由昆明中茶普洱茶存储仓中分离纯化得到,遗传稳定,符合普洱茶生产要求的菌株,包括如下步骤:
S11、在昆明中茶普洱茶储存仓选取几个地点,利用空气沉降法和表面涂抹取样法进行取样;
S12、取样后于PDA固体培养基进行培养,于28-30℃条件下培养10天进行倒置培养,同时进行空白对照组培养,记录菌落生长情况;
S13、记录菌落生长情况,进行菌落识别;选取菌落形态相互区别的菌落进行下一步纯化;
S14、挑取S13筛选菌落划线接种至PDA固体培养基上,于28-30℃条件下培养5-10天,直至得到各个菌株的单菌落;
S15、将S14获得的菌株进行菌株鉴定,挑选能够在20-45℃生长,在20-75℃生存,可应用于普洱茶生产,抑制杂菌能力强,且遗传稳定的菌株,其保藏编号为CGMCC No.15885。
3.根据权利要求1或2所述的塔宾曲霉菌株制备用于接种工艺的液体种子,其特征在于,所述的液体种子普洱发酵工艺是在渥堆发酵工序前接入菌株经培养后得到的液体种子,通过如下方法制备:
S21、取活化后的塔宾曲霉(CGMCC No.15885)菌株接种至液体培养基。所述的液体培养基包括PDB液体培养基以及利用茶叶、茶粉制备茶汁的液体培养基;
S22、于28-30℃条件下,在无菌条件下于摇床中进行培养。所述液体种子的密度为(1-5)*105cfu/mL以上。
4.根据权利要求1或2所述的含有塔宾曲霉菌株的制备高品质普洱茶产品,其特征在于,利用塔宾曲霉(CGMCC No.15885)菌株接种制备普洱茶产品,普洱茶新茶具有老茶陈香,并消除不良的堆味和霉味,香气组成丰富,发酵后的茶叶叶底红润,品质极佳。所述普洱工艺包括毛茶拼配、混料、喷洒接种、渥堆发酵、翻堆、开沟干燥,按如下方法进行:
S31、将不同原料按要求进行拼配、混匀后,要求混料后茶叶无花杂;
S32、将权利要求3制备的液体种子接种到茶叶原料中,将菌液均匀喷洒到茶叶上,接种量为28-35%,菌液喷洒均匀、茶叶不结块;
S33、将接种后的茶叶堆放成高1米、长宽为(3-5)*(3-5)米的茶堆,进行渥堆发酵,堆芯温度在35-45度左右,堆表面温度为25-30度,水分含量在40%-50%左右;
S34、每隔5天翻堆一次,让堆芯茶叶与堆表茶叶混合均匀,并保持堆芯温度以及水分含量;
S35、发酵20-27天后,在茶堆上开沟,进行通风干燥。
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