CN109142598B

CN109142598B - 一组驴源性特征肽和一种鉴定阿胶或阿胶制品的方法

Info

Publication number: CN109142598B
Application number: CN201811053172.XA
Authority: CN
Inventors: 季申; 胡青; 张静娴; 孙健; 冯睿; 于泓; 张甦; 毛秀红; 董洪霜
Original assignee: SHANGHAI INSTITUTE FOR FOOD AND DRUG CONTROL
Current assignee: SHANGHAI INSTITUTE FOR FOOD AND DRUG CONTROL
Priority date: 2018-09-10
Filing date: 2018-09-10
Publication date: 2021-07-30
Anticipated expiration: 2038-09-10
Also published as: CN109142598A

Abstract

本发明涉及中药分析检测技术领域，具体涉及一组驴源性特征肽和一种鉴定阿胶或阿胶制品的方法。所述一组驴源性特征肽由特征肽D、特征肽DH1、特征肽DH2、特征肽DH3、特征肽DH4、特征肽DH5、特征肽DH6、特征肽DH7、特征肽DH8、特征肽DH9组成；其中有5条特征肽尚未见报道，即D、DH4、DH7、DH8和DH9。所述一组驴源性特征肽具有很强的专属性，因此可以其为基础用于鉴定阿胶或阿胶制品。该鉴定阿胶或阿胶制品的方法，操作简单，判断准确，能够清楚地区分阿胶、骡皮胶以及马皮胶。因此，本发明所提供的技术方案有利于阿胶的质量控制，适用于鉴定市场上的各种阿胶或阿胶制品，从而提高广大人民群众的饮食和用药安全。

Description

一组驴源性特征肽和一种鉴定阿胶或阿胶制品的方法

技术领域

本发明涉及中药分析检测技术领域，具体涉及一组驴源性特征肽和一种鉴定阿胶或阿胶制品的方法。

背景技术

随着人民生活水平的提高，阿胶及相关的食品、保健食品的市场日益扩大，驴皮供应告急，为追求巨大的经济利益，不法企业会使用牛皮、马皮、骡皮、羊皮、猪皮等做原料制胶，俗称“杂皮胶”，这严重影响了广大人民群众的饮食和用药安全。

阿胶的主要成分为胶原蛋白，目前其质量控制主要技术是选择阿胶中的一个或者几个特征肽作为检测指标，并采用液质联用对阿胶进行鉴别。例如，《中国药典》2015年版第一部中记载的阿胶质量标准鉴别项采用液相色谱-三重四级杆质谱联用仪，并采用MRM采集模式，以m/z539.8(双电荷)→612.4和m/z539.8(双电荷)→923.8两组离子对用于定性鉴定。然而，后期研究和使用中发现，药典中记录的该特征肽在马皮胶和骡皮胶中也有检出，因此缺乏专属性。

此外，现有技术还提供了一些鉴定阿胶的相关方法。例如，CN106589063A披露了一组驴源性特征肽及其在阿胶定性检测中的应用流程，该专利申请所披露的技术方案选择了5条特征肽，其中1条为驴相对于马、牛、羊、猪所特有，其中1条为驴相对于马和猪所特有，其中2条为驴相对于牛、羊、猪所特有，其中1条为驴相对于牛、羊特有；但事实上，其中介绍的驴皮专属特征肽在骡皮胶中也有检出。又如，中国专利CN105842375A公开了一组鉴别阿胶及其制品中驴源性成分的多肽，共包括35条，但是并未说明其专属性。

可见，现有技术中所提供的阿胶定性鉴别方法往往存在以下技术缺陷：①特征肽的专属性差，例如，《中国药典》2015年版所记载的阿胶鉴别特征离子实际上为驴马共有，所以尚未发现阿胶专属特征肽；②目前阿胶造假原料主要为马皮和骡皮，由于物种亲缘关系近，胶原蛋白同源性极高，因此难以找到阿胶专属特征肽；③仅仅以若干个特征肽为检测指标，可能存在以加入特征肽进行造假的风险。

因此，为实现阿胶的有效鉴别而研究出一种专属性强的鉴定方法，这对于遏制马皮胶和/或骡皮胶的掺假、造假行为以及以直接加入特征肽进行造假具有重要意义。

发明内容

为了克服现有技术中存在的上述技术缺陷，本发明提供了10条特征肽，包括1条阿胶和骡皮胶共有特征肽，9条阿胶、马皮胶和骡皮胶共有特征肽，其中的5条未见报道。并且，本发明采用统计学方法对这10条特征肽在阿胶、马皮胶和骡皮胶中的分布进行了分析，发现了主要的差异性肽段，并对其含量比例在不同样品中的分布进行了统计；据此，本发明提出了一种鉴定阿胶或阿胶制品的方法，该方法对于阿胶的定性鉴定具有很强的专属性，其所采用的多种特征肽结合含量比例的方法用于阿胶鉴别，大大提升了以加入特征肽进行造假的难度，从而有利于识别各种阿胶造假产品。

具体地，本发明第一方面提供了一组驴源性特征肽，由以下多肽序列组成：

如SEQ ID NO.1所示的特征肽D；

如SEQ ID NO.2所示的特征肽DH1；

如SEQ ID NO.3所示的特征肽DH2；

如SEQ ID NO.4所示的特征肽DH3；

如SEQ ID NO.5所示的特征肽DH4；

如SEQ ID NO.6所示的特征肽DH5；

如SEQ ID NO.7所示的特征肽DH6；

如SEQ ID NO.8所示的特征肽DH7；

如SEQ ID NO.9所示的特征肽DH8；

如SEQ ID NO.10所示的特征肽DH9。

以上所提供的多肽序列具体如下表1所示：

表1

^※注：多肽序列中小写字母p代表相应位置的脯氨酸羟基化。

优选地，在上述的一组驴源性特征肽中，各特征肽对应的母离子与子离子分别为：

特征肽D：m/z 578.3→714.4，900.4；

特征肽DH1：m/z 539.8→924.5，612.3；

特征肽DH2：m/z 591.8→910.5，455.8；

特征肽DH3：m/z 469.3→783.4，655.3；

特征肽DH4：m/z 600.9→958.5，772.4；

特征肽DH5：m/z 649.7→955.4，556.3；

特征肽DH6：m/z 765.9→1048.6，991.6；

特征肽DH7：m/z 751.4→849.4，608.3；

特征肽DH8：m/z 535.6→809.5，556.3；

特征肽DH9：m/z 716→641.3，570.3。

同时，本发明第二方面提供了一种鉴定阿胶或阿胶制品的方法，其包括以下步骤：

S1：对待测样品进行前处理，以获得酶解后的多肽溶液；

S2：实施UHPLC-MS检测，以确定所述多肽溶液中是否含有根据权利要求1所述的一组驴源性特征肽中的若干个特征肽，并获得若干个特征肽的含量；

S3：分析检测结果并作出判断：

如果未检测到特征肽D，且仅检测到特征肽DH1～DH9，则判断所述待测样品为马皮胶；

如果检测到特征肽D和特征肽DH1～DH9，则进一步依据特征肽D与特征肽DH8的峰面积比值α进行判断：

情况1：α＞0.04，则判断所述待测样品为阿胶；

情况2：α＜0.03，则判断所述待测样品为骡皮胶。

优选地，在上述鉴定阿胶或阿胶制品的方法中，S1中所述前处理包括：

取待测样品的粉末0.1g，置于50ml容量瓶中，并加入1％碳酸氢铵溶液40ml，超声处理20～30分钟，使待测样品完全溶解；补加1％碳酸氢铵溶液定容，摇匀，用0.22μm微孔滤膜过滤，取续滤液100μl，然后加入1mg/ml的胰蛋白酶溶液10μl，摇匀，在37℃下恒温酶解12h，即得所述多肽溶液。

优选地，在上述鉴定阿胶或阿胶制品的方法中，S2中所述UHPLC-MS的条件包括：

采用超高效液相色谱仪Agilent 1290-三重四级杆质谱仪Agilent 6495；

其中，色谱条件包括：

CORTECS C18色谱柱：2.7μm，2.1×100mm；

进样量：1μl；

流速：0.3ml/min；

流动相A：0.1％甲酸-水溶液，流动相B：乙腈；

梯度洗脱：0～10min，5～25％流动相B；10～13min，25～90％流动相B；

其中，质谱条件包括：

喷雾电压：4000V；

气体温度：270℃；

流速：16L/min；

雾化器压力：45psi；

动态多重反应检测模式。

优选地，在上述鉴定阿胶或阿胶制品的方法中，所述阿胶制品选自以下任一种：阿胶膏，阿胶糕，阿胶口服液，阿胶浆，阿胶颗粒。

综上所述，本发明提供的一组驴源性特征肽具有很强的专属性，因此可以其为基础用于鉴定阿胶或阿胶制品。同时，本发明所提供的鉴定阿胶或阿胶制品的方法，操作简单，判断准确，能够清楚地区分阿胶、骡皮胶以及马皮胶。因此，本发明所提供的技术方案有利于阿胶的质量控制，适用于鉴定市场上的各种阿胶或阿胶制品，从而提高广大人民群众的饮食和用药安全。

附图说明

图1为特征肽D的Blast检索结果图；

图2为特征肽DH1的Blast检索结果图；

图3为特征肽DH2的Blast检索结果图；

图4为特征肽DH3的Blast检索结果图；

图5为特征肽DH4的Blast检索结果图；

图6为特征肽DH5的Blast检索结果图；

图7为特征肽DH6的Blast检索结果图；

图8为特征肽DH7的Blast检索结果图；

图9为特征肽DH8的Blast检索结果图；

图10为特征肽DH9的Blast检索结果图；

图11为与表3相对应的多肽的DMRM色谱图；

图12为偏最小二乘法判别分析图；其中A示出了得分图，B示出了Splot图；

图13示出了特征肽D与DH8归一化峰面积以及二者的峰面积比值在不同样品分布的箱线图；其中，1-阿胶，2-骡皮胶；

图14为实施例1中检测得到的色谱图；

图15为实施例2中检测得到的色谱图；

图16为实施例3中检测得到的色谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明并不限于以下实施方式。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规操作；下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从公开商业途径获得。

发明人采用鸟枪法蛋白质组研究策略，将分别提取的阿胶、马皮胶、骡皮胶蛋白质进行酶解，得到多肽混合物，经色谱柱分离后，采用串联质谱进行分析，通过搜索相关数据库完成蛋白质鉴定，以确定蛋白信息、肽段序列、来源蛋白等信息，并最终完成了特征肽的筛选，具体操作如下：

蛋白的提取与含量测定

采用《中国药典》2015年版第一部记载的阿胶鉴别项中蛋白提取方法，即取本品粉末0.1g，加1％碳酸氢铵溶液50ml，超声处理30分钟，用微孔滤膜过滤，得蛋白提取液。采用BCA法测定蛋白浓度，按照BCA试剂A与试剂B 50:1的比例配置BCA工作液，充分摇匀，梯度稀释牛血清白蛋白标准品浓度为0、25、125、250、500、750、1000、1500、2000μg/ml。配好的标准品溶液于37℃放置30min，冷却至室温，然后在562nm处测定吸光度值，绘制标准曲线。分别取阿胶、马皮胶、骡皮胶蛋白提取液100μl加入工作液200μl，37℃放置30min，于562nm处测定样品的吸光度值，并计算蛋白的含量。分别以一批样品为代表，结果显示不同样品蛋白含量相近，约为1μg/μl。

还原烷基化

取100～200μg蛋白，加50mMDTT(用50mM碳酸氢铵溶解，现用现配，DTT终浓度为2mM)30℃放置1.5h(1M DTT＝0.154g/ml，稀释20倍后使用)IAA：加50mMIAA(用50mM碳酸氢铵溶解，现用现配，IAA终浓度为10mM)暗处放置40min(500mM IAA＝0.0925g/ml，稀释10倍后使用)。

胰蛋白酶酶解、除盐和富集

Trypsin(胰蛋白酶)用1ml醋酸溶解，浓度100μg/ml，取各样品加入Trypsin(约1:50，w/w)37℃酶解过夜(12小时)；然后，用5％TFA酸化至pH 2-3终止反应。C18除盐：缓冲液A：H₂O 38.4ml，5％TFA 1.6ml；缓冲液B：H₂O 6.4ml，ACN 32ml，5％TFA 1.6ml；50％ACN活化C18小柱，缓冲液A吹打，吸取样品上样，缓冲液A除盐，缓冲液B 200μl反复吹打提取肽段，重复一次。接着，于真空离心浓缩仪中常温旋干，再加入0.1％FA100μl复溶，离心去上清装于塑料液相小瓶中，即得。

色谱与质谱条件

采用UltiMate 3000 Nano RSLC-Orbitrap Fusion Lumos高分辨质谱仪(美国Thermo Fisher公司)，分析柱Thermo Acclaim PepMap RSLC C18 2μm(50μm×15cm)，预柱Thermo Acclaim PepMap C18 3μm(75μm×2cm)，进样量1μl，流速300nl/min，流动相A(0.1％甲酸-水溶液)，流动相B(乙腈/0.1％甲酸-水溶液＝80/20)，梯度洗脱：0～5min，5％流动相B；5～90min，5～80％流动相B；91～100min，80％流动相B；100～105min，80％～5％流动相B；105～120min，5％流动相B。质谱条件：喷雾电压为2.0kV，离子传输毛细管温度320℃，裂解模式为高能诱导解离(HCD)，归一化碰撞能量30％，分辨率设置：一级120K，二级30K，母离子扫描范围(m/z)：350-1500，二级质谱使用动态数据依赖扫描(data dependentacquisition,DDA)，采用“Top Speed”算法选取一级离子进行HCD碎片扫描。数据采集和处理使用Xcalibur 4.0软件。

蛋白质的鉴定与特征肽的初步筛选

Proteome Discoverer 2.2软件分析参数：将Nano LC-Orbirap Fusion Lumos质谱数据导入PD2.2软件，采用Seuqest HT算法对MS²质谱图处理，以驴(NCBI Equus asinus)NCBI库为主检索库，同时导入马(UniProt Equus caba)的数据库，Seuqest HT参数设置：胰蛋白酶，允许两处漏切，最小肽长度为6，母离子的质量偏差：5ppm，碎片离子的质量偏差：0.02Daltons。固定修饰：脲甲基化(carbamidomethyl)，57.02Da(C)，可变修饰(肽末端)：pro-hydroxypro，15.99Da(P)；氧化(oxidation)，15.99Da(M)；lyshydroxy-lys 15.99Da(K)。可变修饰(蛋白末端)：乙酰化(acetyl)42.01Da(N-末端)。多肽匹配误差率使用target-decoy策略与正确和错误匹配的Percolator建模相结合来确定。使用由Percolator测定的0.01的q值卡值来在肽段匹配水平上过滤数据以控制错误的发现。

通过以上分析，初步从阿胶中筛选出了驴专属特征肽19条，它们的来源蛋白包括collagen alpha-1(I)、collagen alpha-2(I)、collagen alpha-1(III)、collagen alpha-3(VI)、collagen alpha-1(VI)，驴马共有特征肽18条。

特征肽专属性实验验证

PD软件初步筛选出了一组特征肽，由于目前驴的蛋白数据库不全，这些特征肽的专属性尚不确定，因此采用三重四级杆质谱对其进行验证。采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱仪(Agilent 1290/Agilent 6495)，分析柱CORTECS C18色谱柱(2.7μm，2.1×50mm)，进样量1μl，流速0.3ml/min，流动相A(0.1％甲酸-水溶液)，流动相B(乙腈)，梯度洗脱：0～10min，5～25％流动相B；10～13min，25～90％流动相B。质谱条件：喷雾电压为4000V，气体温度270℃，流速16L/min，Nebulizer 45psi，采用多重反应检测模式(MRM)，数据采集和处理使用Mass Hunter软件。对初步筛选的特征肽的专属性进行验证，结果显示，驴专属特征肽中有1条特征肽在阿胶和骡皮胶中检出，驴马共有特征肽中有9条在阿胶、马皮胶和骡皮胶中均有检出，具体地，特征肽名称与归属蛋白及质谱信息如下表2所示。其中有5条特征肽尚未见报道，即D、DH4、DH7、DH8和DH9。

表2

注：D-阿胶和骡皮胶共有特征肽，DH-阿胶、马皮胶和骡皮胶共有特征肽

进一步地，发明人合成了这些特征肽，通过对比保留时间和二级质谱图进行了准确验证。

Blast检索进一步验证特征肽的专属性，结果如图1～10所示，这些特征肽除了在驴和马中检出外，在其它物种中也可能有检出，但是考虑到这些其它物种用于阿胶掺假的可能性很小，因此暂时不予考虑。

阿胶多肽特征图谱的建立

阿胶对照药材溶液的制备步骤：取阿胶对照药材的粉末0.1g，置于50ml容量瓶中，并加入1％碳酸氢铵溶液40ml，超声处理30分钟，使该粉末完全溶解，补加1％碳酸氢铵溶液定容，摇匀，用0.22μm微孔滤膜过滤，取续滤液100μl，然后加入1mg/ml的胰蛋白酶溶液10μl(取胰蛋白酶，加1％碳酸氢铵溶液溶解，现配现用)，摇匀，在37℃下恒温酶解12h，即得多肽溶液。

供试品制备步骤：分别取阿胶、马皮胶、骡皮胶样品粉末0.1g，按照“阿胶对照药材溶液的制备步骤”进行操作。

采用超高效液相色谱仪Agilent 1290-三重四级杆质谱仪Agilent 6495；色谱条件包括：CORTECS C18色谱柱：2.7μm，2.1×100mm；进样量：1μl；流速：0.3ml/min；流动相A：0.1％甲酸-水溶液，流动相B：乙腈；梯度洗脱：0～10min，5～25％流动相B；10～13min，25～90％流动相B；质谱条件包括：喷雾电压：4000V；气体温度：270℃；流速：16L/min；雾化器压力：45psi；动态多重反应检测模式(DMRM)；数据采集和处理使用MassHunter软件。上述多肽特征图谱的质谱条件如下表3所示，相应的DMRM色谱图如图11所示。

表3

自制样品分析

采用建立好的方法对8批自制阿胶、7批自制马皮胶和8批自制骡皮胶样品进行分析，结果显示阿胶和骡皮胶中均具有10个特征峰，马皮胶中除了D峰外显示有9个特征峰。为了进一步区分阿胶与骡皮胶，发明人以10个特征峰的峰面积值的归一化值为观察值，采用SIMCA-P进行正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)，结果如图12所示，从得分图(图12A)中可以看出，阿胶与骡皮胶完全分开；从Splot(图12B)中可以看出，对分类影响最大的特征肽为D和DH8，这两个特征肽的峰面积比值在阿胶与骡皮胶中的分布如图13所示：特征肽D在阿胶中的含量高于骡皮胶，而特征肽DH8在两种胶中的含量分布呈相反趋势，阿胶中D/DH8值(即特征肽D与特征肽DH8的峰面积比值α)均高于0.04，而骡皮胶中的D/DH8值均低于0.03。

据此，发明人建立了完整的方法以鉴定阿胶或阿胶制品。

实施例1

发明人购买了某品牌阿胶颗粒，取少量样品，按照本发明所提供的分析方法进行鉴别；所得到的色谱图如图14所示，其中同时检测到了10个特征峰，说明检测到特征肽D和特征肽DH1～DH9；经计算，特征肽D与特征肽DH8的峰面积比值α为0.044，可知α＞0.04，从而判断该样品为阿胶。

实施例2

发明人购买了某品牌阿胶膏，取少量样品，按照本发明所提供的分析方法进行鉴别；所得到的色谱图如图15所示，其中仅仅检测到了9个特征峰，说明没有检测到特征肽D，而只检测到特征肽DH1～DH9；从而判断该样品为马皮胶。

实施例3

发明人购买了某品牌阿胶浆，取少量样品，按照本发明所提供的分析方法进行鉴别；所得到的色谱图如图16所示，其中同时检测到了10个特征峰，说明检测到特征肽D和特征肽DH1～DH9；经计算，特征肽D与特征肽DH8的峰面积比值α为0.01，可知α＜0.03，从而判断该样品为骡皮胶。

以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。

序列表

<110> 上海市食品药品检验所

<120> 一组驴源性特征肽和一种鉴定阿胶或阿胶制品的方法

<160> 10

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

Gly Pro Thr Gly Glu Pro Gly Lys Pro Gly Asp Lys

1 5 10

<210> 2

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

Gly Pro Pro Gly Ala Ala Gly Pro Pro Gly Leu Arg

1 5 10

<210> 3

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

Ser Gly Gln Pro Gly Thr Val Gly Pro Ala Gly Val Arg

1 5 10

<210> 4

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

Gly Pro Ala Gly Pro Thr Gly Pro Val Gly Lys

1 5 10

<210> 5

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 5

Gly Pro Pro Gly Pro Val Gly Pro Pro Gly Leu Ala Gly Pro Pro Gly

1 5 10 15

Glu Ser Gly Arg

20

<210> 6

<211> 22

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 6

Ser Gly Asp Arg Gly Glu Ala Gly Pro Ala Gly Pro Ala Gly Pro Ile

1 5 10 15

Gly Pro Val Gly Ala Arg

20

<210> 7

<211> 18

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 7

Gly Glu Ala Gly Pro Ala Gly Pro Ala Gly Pro Ile Gly Pro Val Gly

1 5 10 15

Ala Arg

<210> 8

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 8

Gly Asp Gly Gly Pro Pro Gly Val Thr Gly Phe Pro Gly Ala Ala Gly

1 5 10 15

Arg

<210> 9

<211> 18

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 9

Gly Glu Pro Gly Pro Val Gly Ser Val Gly Pro Val Gly Ala Val Gly

1 5 10 15

Pro Arg

<210> 10

<211> 24

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 10

Gly Leu Pro Gly Val Ala Gly Ser Leu Gly Glu Pro Gly Pro Leu Gly

1 5 10 15

Ile Ala Gly Pro Pro Gly Ala Arg

20

Claims

1.一种鉴定阿胶或阿胶制品的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：对待测样品进行前处理，以获得酶解后的多肽溶液；

S2：实施UHPLC-MS检测，以确定所述多肽溶液中是否含有一组驴源性特征肽中的若干个特征肽，并获得若干个特征肽的含量；

其中，所述一组驴源性特征肽由以下多肽序列组成：如SEQ ID NO.1所示的特征肽D；如SEQ ID NO.2所示的特征肽DH1；如SEQ ID NO.3所示的特征肽DH2；如SEQ ID NO.4所示的特征肽DH3；如SEQ ID NO.5所示的特征肽DH4；如SEQ ID NO.6所示的特征肽DH5；如SEQ IDNO.7所示的特征肽DH6；如SEQ ID NO.8所示的特征肽DH7；如SEQ ID NO.9所示的特征肽DH8；如SEQ ID NO.10所示的特征肽DH9；

S3：分析检测结果并作出判断：

情况1：α＞0.04，则判断所述待测样品为阿胶；

情况2：α＜0.03，则判断所述待测样品为骡皮胶。

2.根据权利要求1所述的鉴定阿胶或阿胶制品的方法，其特征在于，所述一组驴源性特征肽中各特征肽对应的母离子与子离子分别为：特征肽D：m/z 578.3→714.4，900.4；特征肽DH1：m/z 539.8→924.5，612.3；特征肽DH2：m/z 591.8→910.5，455.8；特征肽DH3：m/z469.3→783.4，655.3；特征肽DH4：m/z 600.9→958.5，772.4；特征肽DH5：m/z 649.7→955.4，556.3；特征肽DH6：m/z 765.9→1048.6，991.6；特征肽DH7：m/z 751.4→849.4，608.3；特征肽DH8：m/z535.6→809.5，556.3；特征肽DH9：m/z 716→641.3，570.3。

3.根据权利要求1所述的鉴定阿胶或阿胶制品的方法，其特征在于，S1中所述前处理包括：

4.根据权利要求1所述的鉴定阿胶或阿胶制品的方法，其特征在于，S2中所述UHPLC-MS的条件包括：

其中，色谱条件包括：

CORTECS C18色谱柱：2.7μm，2.1×100mm；

进样量：1μl；

流速：0.3ml/min；

流动相A：0.1％甲酸-水溶液，流动相B：乙腈；

梯度洗脱：0～10min，5～25％流动相B；10～13min，25～90％流动相B；其中，质谱条件包括：

喷雾电压：4000V；

气体温度：270℃；

流速：16L/min；

雾化器压力：45psi；

动态多重反应检测模式。

5.根据权利要求1所述的鉴定阿胶或阿胶制品的方法，其特征在于，所述阿胶制品选自以下任一种：阿胶膏，阿胶糕，阿胶口服液，阿胶浆，阿胶颗粒。