CN109021124A - 一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,涉及植物活性成分提取技术领域。所述提取方法为:将新鲜铁皮石斛洗净,冷冻干燥,粉碎,加入石油醚提取至无色,过滤,挥干溶剂,得药渣,向药渣中加入0.05‑0.08mol/L的HCl溶液,微波提取15‑25min,冷却,过滤,将滤液减压浓缩至原体积的1/3,得多糖原液,向多糖原液中加入0.05‑0.1%的蛋白质水解酶,水浴酶解,得酶解液,将酶解液、氯仿、正丁醇按25:4:1混匀,振摇20‑30min,离心,去除凝胶物后,加入壳聚糖,过滤,将滤液浓缩、干燥,即得。本发明通过优化提取方法,有效提高了铁皮石斛多糖的提取率和纯度,并增强了生物活性。
Description
【技术领域】
本发明涉及植物活性成分提取技术领域,具体涉及一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法。
【背景技术】
铁皮石斛是我国传统名贵中草药,已有2000多年的药用历史,其主要化学成分包括生物碱类、多糖类、多酚类等,其中多糖是铁皮石斛中最有效的成分之一,药理研究表面,铁皮石斛多糖具有较强的抗衰老、抗氧化、抗肿瘤和增强机体免疫力等药理活性。随着近年来人们保健意识的增强,铁皮石斛多糖的需求量在不断增加,市场需求量旺盛,供不应求,需进一步改进铁皮石斛多糖提取技术,增加提取量。目前铁皮石斛多糖提取存在含蛋白质、色素等杂质较多,纯度低的问题,过多杂质会影响其生物活性,使品质降低。且现阶段去除色素主要使用活性炭进行,活性炭虽然吸附效果好,但活性炭在吸附色素的同时也会吸附部分多糖,导致多糖成分受损,提取率变低。
【发明内容】
针对上述问题,本发明要解决的技术问题是提供一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,该方法通过优化提取方法,有效提高了铁皮石斛多糖的提取率和纯度,并增强了生物活性。
为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案如下:
一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,包括以下步骤:
(1)将新鲜铁皮石斛洗净,冷冻干燥,粉碎,过40-60目筛,加入石油醚,于60℃-90℃下提取至无色,过滤,挥干溶剂,得药渣,备用;
(2)向上述药渣中加入6-8体积倍的0.05-0.08mol/L的HCl溶液,微波提取15-25min,冷却,过滤,将滤液减压浓缩至原体积的1/3,得多糖原液,备用;
(3)向上述多糖原液中加入0.05-0.1%的蛋白质水解酶,于35℃-40℃下水浴酶解1-2h,得酶解液,将酶解液、氯仿、正丁醇按25:4:1混匀,振摇20-30min,离心,去除凝胶物后,加入壳聚糖,过滤,将滤液浓缩、干燥,即得。
进一步地,步骤(1)中,所述冷冻干燥的温度为-30℃~-20℃。
进一步地,步骤(1)中,所述石油醚的加入量为所述粉碎后铁皮石斛重量的3-6倍。
进一步地,步骤(2)中,所述微波功率为280W,微波采用中低火档进行。
进一步地,步骤(3)中,所述蛋白质水解酶为木瓜蛋白酶或链霉蛋白酶。
进一步地,步骤(3)中,所述壳聚糖加入量为去除凝胶物后滤液重量的0.5-1.5%。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
本发明通过优化提取方法,有效提高了铁皮石斛多糖的提取率和纯度,并增强了生物活性。经试验,使用本发明方法提取率高达31.96%-33.96%,多糖含量为79.9%-82.6%,2mg/mL浓度下的吸光度为1.87-1.96。采用酶解法结合壳聚糖吸附来去除杂质,酶解可去除多糖中的蛋白质,而壳聚糖可结合并去除色素和其它酶解后的杂质,进而提高了纯度,同时,壳聚糖不会吸附多糖,可防止纯化中多糖的损失,提高了提取率。
【具体实施方式】
以下结合实施例对本发明的具体实施方式做进一步说明。
实施例1
本实施例一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,包括以下步骤:
(1)将新鲜铁皮石斛洗净,于-30℃下冷冻干燥,粉碎,过40目筛,加入3重量倍的石油醚,于60℃下提取至无色,过滤,挥干溶剂,得药渣,备用。
(2)向上述药渣中加入6体积倍的0.05mol/L的HCl溶液,微波提取15min,所述微波功率为280W,微波采用中低火档进行,冷却,过滤,将滤液减压浓缩至原体积的1/3,得多糖原液,备用。
(3)向上述多糖原液中加入0.05%的木瓜蛋白酶,于35℃下水浴酶解1h,得酶解液,将酶解液、氯仿、正丁醇按25:4:1混匀,振摇20min,离心,去除凝胶物后,加入壳聚糖,过滤,将滤液浓缩、干燥,即得。所述壳聚糖加入量为去除凝胶物后滤液重量的0.5%。
实施例2
本实施例一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,包括以下步骤:
(1)将新鲜铁皮石斛洗净,于-20℃下冷冻干燥,粉碎,过60目筛,加入6重量倍的石油醚,于90℃下提取至无色,过滤,挥干溶剂,得药渣,备用。
(2)向上述药渣中加入8体积倍的0.08mol/L的HCl溶液,微波提取25min,所述微波功率为280W,微波采用中低火档进行,冷却,过滤,将滤液减压浓缩至原体积的1/3,得多糖原液,备用。
(3)向上述多糖原液中加入0.1%的链霉蛋白酶,于40℃下水浴酶解2h,得酶解液,将酶解液、氯仿、正丁醇按25:4:1混匀,振摇30min,离心,去除凝胶物后,加入壳聚糖,过滤,将滤液浓缩、干燥,即得。所述壳聚糖加入量为去除凝胶物后滤液重量的1.5%。
实施例3
本实施例一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,包括以下步骤:
(1)将新鲜铁皮石斛洗净,于-25℃下冷冻干燥,粉碎,过50目筛,加入4重量倍的石油醚,于70℃下提取至无色,过滤,挥干溶剂,得药渣,备用。
(2)向上述药渣中加入7体积倍的0.06mol/L的HCl溶液,微波提取20min,所述微波功率为280W,微波采用中低火档进行,冷却,过滤,将滤液减压浓缩至原体积的1/3,得多糖原液,备用。
(3)向上述多糖原液中加入0.06%的链霉蛋白酶,于38℃下水浴酶解1.5h,得酶解液,将酶解液、氯仿、正丁醇按25:4:1混匀,振摇25min,离心,去除凝胶物后,加入壳聚糖,过滤,将滤液浓缩、干燥,即得。所述壳聚糖加入量为去除凝胶物后滤液重量的1%。
实施例4
本实施例一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,包括以下步骤:
(1)将新鲜铁皮石斛洗净,于-24℃下冷冻干燥,粉碎,过50目筛,加入4重量倍的石油醚,于85℃下提取至无色,过滤,挥干溶剂,得药渣,备用。
(2)向上述药渣中加入6.5体积倍的0.07mol/L的HCl溶液,微波提取22min,所述微波功率为280W,微波采用中低火档进行,冷却,过滤,将滤液减压浓缩至原体积的1/3,得多糖原液,备用。
(3)向上述多糖原液中加入0.07%的木瓜蛋白酶,于36℃下水浴酶解1.5h,得酶解液,将酶解液、氯仿、正丁醇按25:4:1混匀,振摇26min,离心,去除凝胶物后,加入壳聚糖,过滤,将滤液浓缩、干燥,即得。所述壳聚糖加入量为去除凝胶物后滤液重量的0.9%。
对比实验:
组1、组2、组3、组4分别用实施例1、实施例2、实施例3、实施例4的方法提取多糖;
对比组1:步骤(3)未用酶处理,而是直接加入氯仿、正丁醇振摇,其他步骤均与实施例3相同;
对比组2:步骤(3)只用酶处理,未加入氯仿、正丁醇振摇,其他步骤均与实施例3相同;
对比组3:步骤(3)用去除凝胶物后滤液重量的0.1-0.5%活性炭代替壳聚糖,其他步骤均与实施例3相同。
统计各组多糖提取率,并采用高效凝胶渗透色谱法分别对各组石斛多糖的均一性进行鉴定;通过测定吸光度判断还原力来判定各组的生物活性。结果为:
(1)组1、组2、组3、组4中多糖提取率分别为31.96%、32.80%、33.96%、32.14%,对比组1提取率为24.5%,对比组2提取率为26.9%,对比组3提取率为22.8%,因此,本发明提取方法提高了多糖提取率。
(2)色谱法结果为:组1、组2、组3、组4多糖含量分别为79.9%、81.4%、82.6%、80.6%,对比组1多糖含量为51.6%,对比组2多糖含量为49.3%,对比组3多糖含量为44.7%,因此,本发明提取方法多糖损失少,纯度较高。
(3)吸光度测定结果为:在多糖浓度均为2mg/mL时,组1、组2、组3、组4的吸光度分别为1.88、1.89、1.96、1.87,对比组1的吸光度为0.90,对比组2的吸光度为1.11,对比组3的吸光度为0.74,因此,本发明提取方法可提高多糖生物活性(吸光度越高,还原力越强,抗氧化能力越强,生物活性越强)。
上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明,但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围,凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更,均应属于本发明所涵盖专利范围。
Claims (6)
1.一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)将新鲜铁皮石斛洗净,冷冻干燥,粉碎,过40-60目筛,加入石油醚,于60℃-90℃下提取至无色,过滤,挥干溶剂,得药渣,备用;
(2)向上述药渣中加入6-8体积倍的0.05-0.08mol/L的HCl溶液,微波提取15-25min,冷却,过滤,将滤液减压浓缩至原体积的1/3,得多糖原液,备用;
(3)向上述多糖原液中加入0.05-0.1%的蛋白质水解酶,于35℃-40℃下水浴酶解1-2h,得酶解液,将酶解液、氯仿、正丁醇按25:4:1混匀,振摇20-30min,离心,去除凝胶物后,加入壳聚糖,过滤,将滤液浓缩、干燥,即得。
2.根据权利要求1所述的一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述冷冻干燥的温度为-30℃~-20℃。
3.根据权利要求1所述的一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述石油醚的加入量为所述粉碎后铁皮石斛重量的3-6倍。
4.根据权利要求1所述的一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述微波功率为280W,微波采用中低火档进行。
5.根据权利要求1所述的一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述蛋白质水解酶为木瓜蛋白酶或链霉蛋白酶。
6.根据权利要求1所述的一种稀酸提取铁皮石斛多糖的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述壳聚糖加入量为去除凝胶物后滤液重量的0.5-1.5%。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110423286A (zh) * | 2019-08-30 | 2019-11-08 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 一种中药药渣多糖的提取方法及其用途 |
CN111743974A (zh) * | 2020-07-20 | 2020-10-09 | 安徽神禾堂中药保健品开发有限公司 | 提高人体免疫力的霍山石斛中药组合物及其制备方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102504041A (zh) * | 2011-11-17 | 2012-06-20 | 云南金九地生物科技有限公司 | 一种石斛多糖的分离纯化方法 |
CN104892783A (zh) * | 2015-05-11 | 2015-09-09 | 南昌大学 | 一种铁皮石斛多糖的纯化方法 |
CN107936131A (zh) * | 2017-12-29 | 2018-04-20 | 贺州市星辉科技有限公司 | 一种酸碱法提取铁皮石斛多糖的工艺 |
CN107955083A (zh) * | 2017-12-29 | 2018-04-24 | 贺州市星辉科技有限公司 | 微波提纯铁皮石斛多糖的方法 |
-
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Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102504041A (zh) * | 2011-11-17 | 2012-06-20 | 云南金九地生物科技有限公司 | 一种石斛多糖的分离纯化方法 |
CN104892783A (zh) * | 2015-05-11 | 2015-09-09 | 南昌大学 | 一种铁皮石斛多糖的纯化方法 |
CN107936131A (zh) * | 2017-12-29 | 2018-04-20 | 贺州市星辉科技有限公司 | 一种酸碱法提取铁皮石斛多糖的工艺 |
CN107955083A (zh) * | 2017-12-29 | 2018-04-24 | 贺州市星辉科技有限公司 | 微波提纯铁皮石斛多糖的方法 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
Z. YUAN等: "Effects of exogenous salicylic acid on polysaccharides production of Dendrobium officinale", 《SOUTH AFRICAN JOURNAL OF BOTANY》 * |
张文清等: "絮凝技术", 《分离分析化学(第二版)》 * |
张文等: "提取分离方法", 《海洋药物导论(第2版)》 * |
王振宇等: "多糖的纯化", 《生物活性成分分离技术(第1版)》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110423286A (zh) * | 2019-08-30 | 2019-11-08 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 一种中药药渣多糖的提取方法及其用途 |
CN111743974A (zh) * | 2020-07-20 | 2020-10-09 | 安徽神禾堂中药保健品开发有限公司 | 提高人体免疫力的霍山石斛中药组合物及其制备方法 |
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