CN1084177A

CN1084177A - 具抗病毒和抗癌活性的2′-脱氧-2′，2′-二氟(4-取代嘧啶)核苷以及中间体

Info

Publication number: CN1084177A
Application number: CN93107739A
Authority: CN
Inventors: L·W·赫特尔; J·S·克罗伊恩
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1992-06-22
Filing date: 1993-06-21
Publication date: 1994-03-23
Also published as: HU9301824D0; FI932870A0; KR940005657A; AU664096B2; US5430026A; NO932289L; CA2098875A1; JPH0656876A; PL299414A1; IL106079A0; YU43193A; FI932870A; ES2087657T3; HUT64769A; EP0576230A1; GR3020064T3; MX9303711A; BR9302430A; DK0576230T3; DE69302330D1

Abstract

具抗癌和抗病毒活性的2-脱氧-2，2-二氟(4- 取代的)嘧啶核苷及中间体。

Description

本发明涉及具抗肿瘤和抗病毒活性的取代的嘧啶核苷及其使用方法。

尽管癌症的治疗曾被认为是不可能的，但在控制这种常常致命的疾病所产生的严重后果方面已取得了很大的进展。有助于增加存活率的一些药物现已在临床上常规使用。最常用的抗肿瘤药剂包括氨甲喋呤、阿霉素和长春花生物碱类如长春新碱以及嘧啶核苷，显示出抗肿瘤活性的脱氧二氟嘧啶核苷已在欧洲专利说明书第329348;339161;184365和211354中给出了描述。

在普通的核苷类中发现的抗病毒剂也已公知。例如1-（2-脱氧-2-氟-β-D-呋喃阿糖基）胸腺嘧啶（FMAU）和1-（2-脱氧-2-氟-β-D-呋喃阿糖基）-5-碘胞嘧啶（FIAC）被Watanabe，K.A.等人在下述文献中描述为有效的抗疱疹药剂：“活性抗AIDS核苷3′-叠氮基-3′-脱氧胸苷（AZT）和2′，3′-二脱氧胞苷（DDC）的2′-“上”一氟类似物的合成及抗HIV-1活性“，J.Med.Chem.，33，2145-50页（1990）。2′-脱氧-2′-氟阿糖-5-碘尿苷（FIAU）也被Sterzycki，R.Z.等人在“某些含嘧啶核苷的2′-氟化合物的合成和抗HIV-1活性”，J.Med.Chem.，33，2150-2157页（1990）中描述为抗人类免疫缺陷病毒（HIV）有效的药物。显示出抗病毒活性的脱氧二氟嘧啶核苷在欧洲专利说明书第345751;122207;和339161;以及美国专利第4526988;4965374;和4692434中给出了描述。

然而人们仍在继续研究开发对病人更安全有效的化合物。

本发明提供式（Ⅰ）化合物及共药学上可接受的盐。式（Ⅰ）化合物结构如下：

式中Z选自以下基团，包括：

式中R₁选自下组基团：包括甘氨酸、硫代、氢、肼基、甲氨基、2-甲肼基、肼基羧酸乙酯、羟氨基、羟甲氨基、羧酸、羧基醛、异氰基、氰酸酯、乙氧羰基氨基、氨基磺酰基、甘氨酸乙酯、丙氨酸乙酯、腈、硝基、甲酰胺基、氨基硫代、氨基甲基和磺酰氨基;以及R₂选自下组基团：包括氢、甲基、溴代、氟代、氯代、碘代、溴乙烯基和氨基。

“取代的”一词，不论独立或结合，均指被至少一个或一个以上基团在嘧啶环的4-位取代。“囟代”一词，不论独立或结合，均指氯代、氟代、溴代或碘代。词组“药理有效量”，不论独立或结合，均指能给哺乳动物提供化学治疗的式（Ⅰ）化合物的合适量。词组“抗病毒有效量”，不论独立或结合，均指能够预防或抑制哺乳动物中存在的病毒感染的式（Ⅰ）化合物的合适量。词组“敏感瘤”，不论独立或结合，均指能用式（Ⅰ）化合物治疗的哺乳动物中异常生长的组织。词组“惰性溶剂”，不论独立或结合，均指使反应能在其中进行而实质上却对反应不产生影响的媒介物质。词组“活性成分”，不论独立或结合，均指式（Ⅰ）化合物或其药学上可接受的盐。词组“药学上可接受的”，不论独立或结合，均指与制剂中其它成分相容且对其受者无害的载体、稀释剂或赋形剂。词组“单位剂量形式”，不论独立或结合，均指适宜作单剂用于病人或其它哺乳动物的实际上独立的单位，每单位含预计能产生需要的治疗效果的预定量的活性物质以及适宜的药用载体。

一方面，本发明提供可作于生产式（Ⅰ）化合物的中间体式（Ⅱ）化合物。

中间体式（Ⅱ）化合物可按“2-脱氧-2，2-二氟-D-核糖和2-脱氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基核苷的合成”，J.Org.Chem.53，2406-2409页（1988）中所述方法制备。该方法一般需要选通过用1，2，4-三唑和二氯磷酸对氯苯酯在吡啶中处理β-1-（2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖来制备β-1-（2-氧代-4-（1，2，4-三唑-1-基）-1，2-二氢嘧啶-1-基-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体。

然后将得到的β-1-（2-氧代-4-（1，2，4-三唑-1-基）-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体与在溶剂如对二噁烷中的适宜的亲核试剂如盐酸羟胺一起加到三乙胺中，去除溶剂而将残留物溶于乙酸乙酯并用水洗涤。有机层真空条件下用硫酸钠干燥并真空浓缩，得封端的中间体式（Ⅱ）化合物。

若亲核试剂是游离碱如甲胺，则三乙胺可被消去。当氨基甲酸乙酯为亲核试剂时，需要1-3当量氢化钠或其它适宜的碱和溶剂如四氢呋喃使该采核试剂活化。当肼基甲酸乙酯为亲核试剂时，最好将反应混合物加热至约70℃3-15小时以使反应进行完全。当亲核取代包括酯部分如甘氨酸乙酯时，酯水解成羧酸的反应可以用标准的水解条件如氢氧化钠、醇和水来完成。当亲核试剂为叠氮化物部分时，可按C.Wentrup在“杂芳基氮烯Ⅱ”，Tetrahedron，26，4969-4980页（1970）中所述的方法生成式（Ⅰ）二环化合物，该文被引入本文做参考。例如4-叠氮基取代基可以在嘧啶环上环化到3位。若是4-肼基甲酸酯取代基，则在没有溶剂存在下通过加热促进环化。

一般有必要将游离羟基基团转化成被保护的羟基基团（Ⅹ）。保护基团为通常用在合成有机化学中的保护基团。化学家们习惯选择能高效地接上并在反应完成后易于除去的保护基团。本领域公知的合适的羟基保护基团已在由McOmie编辑，Plenum Press出版，纽约（1973）的Protective Groups in Organic Chemistry中的第3章和Gren，John，J.Wiley and Sons，纽约（1981）中的第2章中作了描述，优选乙酰基和叔丁基二甲基甲硅烷基。

在连接羟基保护基团时，根据所选的保护基团的性质使用典型的反应条件，这在美国专利第4526988中有详述，该文被引入本文做参考。

要获得式（Ⅰ）化合物需要用下述（A）、（B）或（C）解封步骤除去保护基团。

在解封步骤（A）中，将式（Ⅱ）中间体在无水条件下溶于二氯甲烷中并于0℃-5℃用无水溴化氢饱和。然后将反应混合物加热至室温，随后将反应混合物真空浓缩成油状物，将其溶于水中并用乙酸乙酯洗涤。将水层真空蒸发，得式（Ⅰ）化合物。

在解封步骤（B）中，将式（Ⅱ）中间体溶于四氢呋喃中并于室温用氟化四丁基铵处理。1小时后除去溶剂。将产物溶于水中并用乙酸乙酯洗涤。然后真空除水，得式（Ⅰ）化合物。

最后，解封步骤（C）需要将式（Ⅱ）中间体溶于甲醇中，冷却至冰浴温度并用无水氨饱和。然后将反应混合物于室温搅拌数小时，然后除去溶剂，得式（Ⅰ）化合物。

以上改性工艺可能需要调节具体取代基的反应官能度，这样的改性是本领域普通技术人员所显而易见的，或者是公知的。

下面举例说明经仔细研究的在本发明范围内的式（Ⅰ）化合物及其药学上可接受的盐：

（a）β-1-（2-氧代-4-羟氨基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（b）6-（2-脱氧-2，2-二氟-β-D-呋喃核糖基）-1，2，3，4-四唑[1，5-C]嘧啶-5-（6H）-酮;

（c）6-（2-脱氧-2，2-二氟-β-D-呋喃核糖基）-1，2，4-三唑[4，3-c]嘧啶-3，5（2H，6H）-二酮;

（d）β-1-（2-氧代-4-肼基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（e）β-1-（2-氧代-4-氨基乙氧羰基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（f）β-1-（2-氧代-4-羟甲氨基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（g）β-1-（2-氧代-4-N-甘氨酰基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（h）β-1-[2-氧代-4-（2-甲肼基）-1，2-二氢嘧啶-1-基]-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（i）β-1-（2-氧代-4-N-甘氨酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（j）β-1-（2-氧代-4-N-丙氨酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（k）β-1-（2-氧代-4-甲氨基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（l）β-1-（2-氧代-4-肼基甲酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（m）6-（2-脱氧-2，2-二氟-β-D-呋喃核糖基）-1，2，3，4-四唑[1，5-C]-8-甲基嘧啶-5（6H）-酮;

（n）β-1-（2-氧代-4-巯基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖。

优选的式（Ⅰ）化合物是化合物（a）-（j）及其药学上可接受的盐。

尽管一般说来为中性，但个别的式（Ⅰ）化合物可以有足够的酸性或碱性功能基与任何数量的无机碱和无机酸和有机酸反应生成药学上可接受的盐。常用于生成酸加成盐的酸是无机酸例如盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硫酸，磷酸，钠、钾、锂或铵加成盐等;以及有机酸例如对甲苯磺酸，甲磺酸，草酸，对溴苯磺酸，碳酸，琥珀酸，柠檬酸，苯甲酸，乙酸等。因而，这样的药学上可接受的盐的例子是硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、一氢磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯基乙酸盐、苯基丙酸盐苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、羟基丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、扁桃酸盐等。优选的药学上可接受的酸加成盐是与无机酸如盐酸和氢溴酸形成的盐以及与有机酸如马来酸和甲磺酸形成的盐。

碱加成盐包括衍生自无机碱如铵或碱金属或碱土金属氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等的盐。因而可用于制备本发明的盐的这样的碱包括氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钙、碳酸钙等。钾盐和钠盐形式是特别优选的。

式（Ⅰ）和式（Ⅱ）化合物可以有不同的端基异构形式。本发明没限定任何特定的端基异构体而是包括所有可能的单一的端基异构体以及它们的混合物;优选β-端基异构体。

式（Ⅰ）化合物及其药学上可接受的盐也能以例如水、甲醇、乙醇、二甲基甲酰胺等的各种溶剂化物形式存在。这样的溶剂化物的混合物;优选β-端基异构体。

式（Ⅰ）化合物及其药学上可接受的盐也能以例如水、甲醇、乙醇、二甲基甲酰胺等的各种溶剂化物形式存在。这样的溶剂化物的混合物也可以优先选用。这样的溶剂化物的来源可以是来自结晶溶剂，制备或结晶的溶剂中固有的或附着于这样的溶剂上。这些溶剂化物也在本发明的范围之内。

本发明的式（Ⅰ）包括的药学上可接受的盐按下述方法制备：等摩尔或过量的酸或碱在适宜的相互间不作用或基本不作用的溶剂或溶剂的混合物中与式（Ⅰ）化合物反应。溶剂的具体选择要根据原料和产物盐的相对溶解度，并且可用某些试剂的浆液而不是溶液来获得盐。成盐反应在约-10℃～100℃、最好在室温条件下进行，溶剂用常规方法去除。

以下实施例举例说明本发明的具体内容而对本发明的范围决无限制之意，而且也不该这样认为。

实施例1

β-1-（2-氧代-4-羟氨基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖

将三乙胺（0.093g，0.92mmol）加到β-1-（2-氧代-4-（1，2，4-三唑-1-基）-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖（0.1g，0.1mmol）和盐酸羟胺（0.064g，0.92mmol）的对二噁烷（2.7ml）溶液中。将该溶液于室温搅拌2天。真空除去溶剂并将残留物溶于乙酸乙酯（10ml）中，并用水（5ml）洗涤两次。有机层用硫酸钠干燥并真空浓缩，得β-1-（2-氧代-4-羟氨基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体。将该中间体用解封步骤（A）解封，得0.08g标题产物。

（CD₃OD，300 MHz）δ3.7-4.0（系列 m，3H）;4.27（m，1H）;5.99（d，J＝8Hz，1H，H-5）;6.14（dd，1H，H-1′）;8.04（d，J＝8Hz，1H，H-6）;质谱 m/e＝279＝母体

实施例2

6-（2-脱氧-2，2-二氟-β-D-呋喃核糖基）-1，2，3，4-四唑[1，5-C]嘧啶-5-（6H）-酮

将二氯磷酸氯苯酯（0.16g，0.65mmol）加到β-1-（2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-乙酰基-2-脱氧-2，2-二氟核糖（0.15g，0.43mmol）吡啶（4.0ml）溶液中。将该溶液于室温搅拌过夜。加入叠氮化锂（0.032g，0.66mmol）并将该反应混合物再次搅拌过夜。真空除去溶剂，并将残留物用甲苯（5ml）蒸发两次。将残留物溶于乙酸乙酯中并用水、1N盐酸、碳酸氢钠饱和溶液洗涤，并用水洗涤两次，有机层用硫酸钠干燥，真空除去溶剂，得6-（2-脱氧-2，2-二氟-3，5-二-0-乙酰基-β-D呋喃核糖基）-1，2，3，4-四唑[1，5-C]嘧啶-5-（6H）-酮中间体。将该中间体用解封步骤（C）解封。真空除去溶剂，残留物经反相C18层析柱用水作洗脱剂纯化并真空蒸发，得0.016g标题产物。

（CD₃OD，300 MHz）δ3.57-4.05（系列：m，3H）;4.38（m，1H）;6.38（m，1H，H-1′）;7.02（d，J＝8Hz，1H，H-5）;8.18（d，J＝8Hz，1H，H-6）;质谱 m/e＝289＝母体

基本上按在实施例1中所述的步骤并用适当的解封步骤将制得的中间体化合物解封，制得实施例3-12的化合物。

实施例3

β-1-（2-氧代-4-肼基甲酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖

β-1-（2-氧代-4-肼基甲酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体用解封步骤（B）解封。

（Neat，300 MHz）δ1.25（m，3-H，-CH₃）;3.7-4.32（系列：m，6H）;5.72（d，J＝8Hz，1H，H-5）;6.19（m，1H，H-1′）7.3（d，J＝8Hz，1H，H-6）;质谱 m/e＝350＝母体

实施例4

6-（2-脱氧-2，2-二氟-β-D-呋喃核糖基）-1，2，4-三唑[4，3-C]嘧啶-3，5-（2H，6H）-二酮

将在实施例3中制得的β-1-（2-氧代-4-肼基甲酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖（0.05g）加热至近210℃15分钟，将该残留物冷却，得6-（3′，5′-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟-β-D-呋喃核糖基）-1，2，4-三唑[4，3-C]嘧啶-3，5-（2H，6H）-二酮中间体，该中间体用解封步骤（A）解封。真空除去溶剂并将残留物溶于水（5ml）中，并用乙醚（3ml）洗涤两次。将水层真空蒸发，得0.021g标题产物。

3 （D₂O，300 MHz）δ3.77-4.07（系列 m，3H）;4.37（m，1H）;6.25（t，1H，H-1′）;6.34（d，J＝8Hz，1H，H-5）;7.3（d，J＝8Hz，1H，H-6）;质谱 m/e＝304＝母体

实施例5

β-1-（2-氧代-4-肼基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖

β-1-（2-氧代-4-肼基-1，2-二氟嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体用解封步骤（A）解封。

（CD₃OD，300 MHz）δ3.67-4.0（two m，3H）;4.28（m，1H）;5.97-6.23（两个m，2H，H-5，H-1′）;8.13（d，J＝8Hz，1H，H-6）;质谱 m/e＝279＝母体

实施例6

β-1-（2-氧代-4-氨基乙氧羰基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖

β-1-（2-氧代-4-氨基乙氧羰基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体用解封步骤（A）解封。

（CD₃OD，300 MHz）δ1.28（m，3-H，-CH₃）;3.7-4.0（两个m，3H）;4.2（m，3H）6.22（dd，1H，H-1′）;7.3（t，J＝8Hz，1H，H-5）;8.27（d，J＝8Hz，1H，H-6）;质谱 m/e＝336M⁺.

实施例7

β-1-（2-氧代-4-羟甲氨基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖

β-1-（2-氧代-4-羟甲氨基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体用解封步骤（A）解封。

（CD₃OD 300 MHz）δ3.6（s，3H，-CH₃）3.73-4.0（两个m，3H）;4.28（m，1H）6.13（dd，1H，H-1′）;6.36（d J＝8Hz，1H，H-5）;8.24（d，J＝8Hz，1H，H-6）;质谱 m/e＝294＝母体

实施例8

β-1-（2-氧代-4-N-甘氨酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖

β-1-（2-氧代-4-甘氨酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体用解封步骤（A）解封。

（CD₃OD，300 MHz）δ1.28（t，3H，-CH₃）;3.7-4.38（系列 m，8-H）;6.18（m，1H，H-1′）;6.27（d，J＝8Hz，1H，H-5）;8.27（d，J＝8Hz，1H，H-6）;质谱 m/e＝350＝母体

实施例9

β-1-（2-氧代-4-N-甘氨酰-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖

β-1-（2-氧代-4-N-甘氨酰-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体用解封步骤（A）解封。

（CD₃OD，300 MHz）δ3.78（m，1H）3.94（m，2H）;4.2-4.4（m，3H）;6.15（m，1H，H-1′）;6.3（d，J＝8Hz，1H，H-5）;8.24（d，J＝8Hz，1H，H-6）;质谱 m/e＝321＝母体

实施例10

β-1-（2-氧代-4-（2-甲肼基）-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖

β-1-（2-氧代-4-（2-甲肼基）-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体用解封步骤（B）解封。

（CD₃OD，300 MHz）δ3.33（s，3H，-CH₃）;3.7-4.0（m，3H）;4.21（m，1H）;6.2（t，1H，H-1′）;6.73（d，J＝8Hz，1H，H-5）;7.78（d，J＝8Hz，1H，H-6）;质谱 m/e＝292＝母体

实施例11

β-1-（2-氧代-4-N-丙氨酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖

β-1-（2-氧代-4-N-丙氨酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体用解封步骤（A）解封。

（CD₃OD，300 MHz）δ1.21（t，3H，-CH₃）;2.6（t，2H，-CH₂）（3.6-4.3（系列 m，8H）;5.84（d，J＝8Hz，1H，H-5）;6.19（m，1H，H-1′）;7.74（d，J＝8Hz，1H，H-6）;质谱 m/e＝363＝母体

实施例12

β-1-（2-氧代-4-甲氨基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖

β-1-（2-氧代-4-甲氨基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体用解封步骤（B）解封。

（CD₃OD，300 MHz）δ2.86（s，3H，-CH₃）3.7-3.95（系列 m，3H）;4.22（m，1H，H-3′）;5.83（d，J＝8Hz，1H，H-5）;6.19（m，1H，H-1′）;7.72（d，J＝8Hz，1H，H-6）;质谱 m/e＝277＝母体

实施例13化合物按实施例2所述方法制备。

实施例13

6-（2-脱氧-2，2-二氟-β-D-呋喃核糖基）-1，2，3，4-四唑[1，5-C]-8-甲基嘧啶-5（6H）-酮

6-（2-脱氧-2，2-二氟-3，5-二-0-乙酰基-β-D-呋喃核糖基）-1，2，3，4-四唑[1，5-C]-8-甲基吡啶-5（6H）-酮中间体用解封步骤（C）解封。

（CD₃OD，300 MHz）δ2.37（s，3-H，-CH₃）;3.78-4.2（系列 m，3H）;4.4（m，1H，H-3′）;6.37（m，1H，H-1′）;7.98（s，1H，H-6）;质谱 m/e＝303＝母体

实施例14

β-1-（2-氧代-4-巯基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖

将五硫化二磷（0.24g，0.53mmol）加到β-1-（2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-乙酰基-2-脱氧-2，2-二氟核糖（0.174g，0.5mmol）的二噁烷（7.0ml）溶液中并将该悬浮液回流5小时。将反应混合物冷至室温，滤除不溶物，将滤液真空深缩并将残留物用硅胶柱层析（己烷/乙酸乙酯3∶2洗脱）纯化。得到的β-1-（2-氧代-4-巯基-1，2-二氢嘧啶-1-基）3，5-二-0-乙酰基-2-脱氧-2，2-二氟核糖中间体于室温在乙醇中用氢氧化钠（2N，5.0mol当量）解封并经正相柱层析用乙酸乙酯纯化，得0.14g标题产物。

（CD₃OD，300 MHz）δ3.67-3.96（系列 m，3H）;4.18-4.34（m，1H，H-3′）;6.08（m，1H，H-1′）;6.15（d，J＝8Hz，1H，H-5）;7.64（d，J＝8Hz，1H，H-6）质谱 m/e＝280＝母体

另一方面，本发明提供含式（Ⅰ）化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药用制剂。式（Ⅰ）化合物最好制成制剂使用。

在这样的制剂中，活性成发的含量为制剂重量的0.1-99.9%。

药用制剂按熟知的方法并用易得的成分来制备，在制该组合物时，最好将活性成分与载体混合，或用载体稀释，或封装在可以是胶囊、小药囊、纸或其它容器形式的载体内。当载体充当稀释剂时，它可以是固体、半固体或用作活性成分的溶媒、赋形剂或介质的液体物质。因此，该组合物可以是下述形式：例如含重量多达10%的活性化合物的片剂、丸剂、粉剂、锭剂、小药囊、扁囊剂、酏剂、悬浮剂、乳剂、溶液、糖浆、气雾剂（作为固体或在液体介质中）、软膏，软和硬明胶胶囊，栓剂，灭菌注射液，灭菌包装粉剂等。

适当的载体、赋形剂和稀释剂的例子是乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、藻酸盐黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、糖浆、甲基纤维素、甲基羟基苯甲酸酯类、丙基羟基苯甲酸酯类、滑石粉、硬脂酸镁和矿物油。此外制剂可以包括润滑剂、润湿剂、增甜剂、矫味剂、乳化剂和助悬剂、防腐剂等。可利用本领域熟知的方法配制本发明组合物以便给病人使用后即能决速、持续即缓释出活性成分。

组合物最好按单位剂量配制，即每剂一般含约0.1mg-3000mg且最好为1mg-500mg活性成分。然而，当然实际服用的化合物的量应该由医生根据有关情况而定;所述有关情况包括治疗条件，服用的具体化合物，所选择的给药途径，个体病人的年令、体重和反应，以及病人的症状的严重程度;因此上述剂量范围决不应构成对本发明范围的限制。

制剂1

用以下成分制备硬胶囊：

含量

（mg/胶囊）

活性成分 250

干淀粉 200

镁盐 10

总计 460mg

将以上成分混合并按460mg重量装入硬胶囊。

制剂2

用以下成分制备片剂：

含量

（mg/片）

活性成分 250

微晶纤维素 400

烘制的二氧化硅 10

硬脂酸 5

总计 665mg

将成分混合并压制成每片重665mg的片剂。

制剂3

制备含以下成分的气雾剂溶液：

重量百分数

活性成分 0.25

乙醇 29.75

气雾剂基质22 70.00

（氯二氟甲烷）

将活性成分与乙醇混合并将混合物加到一部分气雾剂基质22中，于-30℃收集并将其输至灌装机，然后按所需量灌至不锈钢容器内并用剩余的气雾剂基质稀释。然后给该容器装上阀门。

制剂4

含60mg活性成分的片剂制备如下：

活性成分 60mg

淀粉 45mg

微晶纤维素 35mg

聚乙烯吡咯烷酮 4mg

（为10%水溶液）

羧甲基淀粉钠 4.5mg

硬脂酸镁淀粉 0.5mg

滑石粉 1mg

总计 150mg

将活性成分、淀粉和纤维素通过美国45号筛并充分混合。将含聚乙烯吡咯烷酮的水溶液与得到的粉末混合，然后通过美国14号筛。将如此制得的颗粒于50℃干燥并通过美国18号筛。先将羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石粉通过美国60号筛，然后加到颗粒中，混合后在压片机上压成每片重150mg的片剂。

制剂5

每个含80mg活性成分的胶囊制备如下：

活性成分 80mg

淀粉 59mg

微晶纤维素 59mg

硬酯酸镁 2mg

总计 200mg

将活性成分、纤维素、淀粉和硬脂酸镁混合并通过美国45号筛，然后按200mg的重量装入硬胶囊。

制剂6

每个含225mg活性成分的柱剂制备如下：

活性成分 225mg

饱和脂肪酸甘油酯 2000mg

总计 2225mg

将活性成分通过美国60号筛并悬浮干预先用必要的极低热熔化的饱和脂肪酸甘油酯中，然后将混合物倒入额定容量为2g的栓模中并使其自然冷却。

制剂7

每5ml为一剂、每剂含50mg活性成分的悬浮剂制备如下：

活性成分 50mg

羧甲基纤维素钠 50mg

糖浆 1.25ml

苯甲酸溶液 0.10ml

矫味剂适量

着色剂适量

净化水 5ml

将活性成分通过美国45号筛并与羧甲基纤维素钠和糖浆混合成均匀的糊。将苯甲酸溶液、矫味剂和着色剂用部分水稀释并在搅拌下加到糊中，然后加水至需要的体积。

制剂8

静脉内制剂可制备如下：

活性成分 100mg

藻酸钠 500mg

等渗盐水 1000ml

以上成分的溶液一般以每分钟1ml的速度静脉内注射使用。

另一方面，本发明提供治疗哺乳动物敏感瘤的方法，它包括给需要治疗的哺乳动物服用药理有效量的式（Ⅰ）化合物。

式（Ⅰ）化合物及其药学上可接受的盐治疗哺乳动物由肿瘤产生的病态有效，效果惊人。本发明方法计划的治疗包括医学治疗和适当地预防治疗。当然按照本发明使用的化合物的具体剂量水平应由该病例的情况而定，所述情况包括例如服用的具体化合物、给药途径以及治疗的情况。典型的片剂量含约1mg/M²-1000mg/M²式（Ⅰ）化合物。式（Ⅰ）化合物可经多种途径使用，所述途径包括口、直肠、透皮、皮下、静脉内、肌内和鼻内。用在本发明中的代表性化合物的活性已在标准的筛选中得到证实，所述筛选为本领域普通技术人员通常用来试验这些作为固体和非固体抗肿瘤药物的化合物的效用的筛选。例如这些筛选已用来证实市售抗癌药物如长春花生物碱的抗肿瘤活性;见Miller等人，J.Med.Chem.，20卷，第3期，409页（1977）;Sweeney等人，Cancer Research，38，2886页（1978）。用在本发明中的式（Ⅰ）的代表化合物是细胞毒性的，能够抑制迅速分化的人类白血病细胞（CCRE-CEM细胞系）的生长。下表1给出了一些式（Ⅰ）的代表化合物的试验结果。在表1中，第1栏列出了代表化合物，第2栏按μg/ml列出了IC₅₀（生长抑制达50%时的浓度）。IC₅₀小于20μg/ml的化合物被认为是活性化合物。

表1

化合物 IC₅₀(μg/ml)

β-1-(2-氧代-4-肼基-1,2-二氢嘧啶-1-基) 0.077

-2-脱氧-2,2-二氟核糖(实施例5)

β-1-[2-氧代-4-(2-甲肼基)-1,2-二氢嘧 4.1

啶-1-基]-2-脱氧-2,2-二氟核糖(实施例10)

β-1-(2-氧代-4-羟氨基-1,2-二氢嘧啶-1-基)

-2-脱氧-2,2-二氟核糖(实施例1) 0.086

β-1-(2-氧代-4-羟甲氨基-1,2-二氢嘧啶-1-

基)-2-脱氧-2,2-二氟核糖(实施例7) 0.3

β-1-(2-氧代-4-氨基乙氧羰基-1,2-二氢嘧啶-1

-基)-2-脱氧-2,2-二氟核糖(实施例6)

0.051β-1-(2-氧代-4-N-甘氨酸乙酯-1,2-二氢嘧啶-1

-基)-2-脱氧-2,2-二氟核糖(实施例8) 18.4

β-1-(2-氧代-4-N-丙氨酸乙酯-1,2-二氢嘧啶

-1-基)-2-脱氧-2,2-二氟核糖(实施例11) 6.3

β-1-(2-氧代-4-N-甘氨酰基-1,2-二氢嘧啶-

1-基)-2-脱氧-2,2-二氟核糖(实施例9) 0.4

6-(2-脱氧-2,2-二氟-β-D-呋喃核糖基)-1,2

,4-三唑[4,3-C]嘧啶-3,5(2H,6H)-二酮(实施例4) 0.2

6-(2-脱氧-2,2-二氟-β-D-呋喃核糖基)-1,2,

4,4-四唑[1,5-C]嘧啶-5(6H)-酮(实施例2) 0.5

此外，本发明还提供哺乳动物病毒染的治疗方法，它包括给需要治疗的哺乳动物服用抗病毒有效的式（Ⅰ）化合物。

式（Ⅰ）化合物及共药学上可接受的盐用常用于这样的病状治疗的方法能有效治疗病毒感染并可用于治疗或预防由各种病毒所致的感染，特别是由疱疹属病毒所致的感染。能用式（Ⅰ）化合物抵抗的典型病毒包括流感，副流感，呼吸合胞病毒的所有A和B株，各种疱疹Ⅰ和疱疹Ⅱ株、埃柯和痘苗病毒，麻疹、Semkki Forest和还原病毒如弗云德白血病病毒以及造成获得性免疫缺陷综合症（AIDS）的病毒。

式（Ⅰ）化合物按治疗这样的病状的常规方法用于治疗病毒感染。用式（Ⅰ）的代表化合物进行的下述体外试验，证实了式（Ⅰ）化合物的抗病毒作用。

将非洲绿猴肾细胞（BSC-1）置于25cm³Falcon瓶中于37℃在含5%灭活的胎牛血清（FBS）、青霉素（150单位/ml）和链霉素（150μg/ml）的199培养基中培养。当会合的单层形成时，将生长培养基的上清液除去并将0.3ml经适当稀释的假狂犬病病毒或单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型（HSV-1和HSV-2）加到每个瓶中。于室温吸附1小时后，将病毒感染的细胞层用培养基覆盖，所述培养基由1份1% Ionagar2号和1份含FCS（胎小牛血清）、青霉素和链霉素的浓度加倍的199培养基组成，还含有浓度范围为100μg/ml-0.39μg/ml的代表化合物。用不含代表化合物的瓶作对照。将代表化合物溶于二甲亚砜制成浓度为10⁴μg/ml的代表化合物原液。将瓶于37℃培养72小时。在病毒感染如繁殖的细胞中见到蚀斑。将含10%甲醛水溶液和2%乙酸钠的溶液加到每个瓶中使病毒失活并将该细胞层固化在瓶表面。在用结晶紫将周围的细胞区域染色后对病毒蚀斑不论大小进行计数。将蚀斑计数结果与在每个药物浓度下的对照计数结果相比较。化合物的活性用蚀斑抑制百分数表示。表2列出了几种式（Ⅰ）代表化合物的试验结果。在表2中，第1栏列出了代表化合物和第2栏列出了IC₅₀（生长抑制为50%时的浓度），单位为μg/ml。IC₅₀小于20μg/ml的化合物被认为是活性化合物。

表2

化合物 HSV-1 HSV-2

(μg/ml) (μg/ml)

β-1-(2-氧代-4-肼基-1,2-二氢嘧啶-1

-基)-2-脱氧-2,2-二氟核糖(实施例5) 3.12 4.35

β-1-(2-氧代-4-羟氨基-1,2-二氢嘧啶

-1-基)-2-脱氧-2,2-二氟核糖(实施例1) 0.7 1.07

β-1-(2-氧代-4-羟甲氨基-1,2-二氢嘧啶

-1-基)-2-脱氧-2,2-二氟核糖(实施例7) 18.0 11.1

β-1-(2-氧代-4-氨基乙氧羰基-1,2-二氢

嘧啶-1-基)-2脱氧-2,2-二氟核糖(实施例6) 0.53 0.58

6-(2-脱氧-2,2-二氟-β-D-呋喃核糖基)

-1,2,4-三唑[4,3-C]嘧啶-3,5(2H,6H) 6.0 4.9

-二酮(实施例4)

6-(2-脱氧-2,2-二氟-β-D-呋喃核糖基)

-1,2,4,4-四唑[1,5-C]嘧啶-5(6H)-酮 8.0 9.25

(实施例2)

Claims

1、下式(Ⅰ)化合物及其药学上可接受的盐：

式中Z选自以下基团：

式中R₁选自下组基团：包括甘氨酸、硫代、氢、肼基、甲氨基、2-甲肼基、肼基羧酸乙酯、羟氨基、羟甲氨基、羧酸、羧基醛、异氰基、氰酸酯、乙氧羰基氨基、氨基磺酰基、甘氨酸乙酯、丙氨酸乙酯、腈、硝基、甲酰胺基、氨基硫代、氨基甲基和磺酰氨基；以及R₂选自下组基团：包括氢、甲基、溴代、氟代、氯代、碘代、溴乙烯基和氨基。

2、按照权利要求1的化合物，它们选自下组的化合物及其药学上可接受的盐：

3、可用于治疗哺乳动物敏感留和病毒感染的药用组合物，该组合物包括适宜的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂以及权利要求1的化合物。

4、按照权利要求3的药用组合物，其中权利要求1的化合物选自下组化合物：

5、哺乳动物病毒感染患者的病毒感染的治疗方法，它包括给需要治疗的哺乳动物服用药理有效量的权利要求1的化合物。

6、按照权利要求5的方法，其中权利要求1的化合物选自下组化合物及其药学上可接受的盐：

7、哺乳动物敏感瘤患者的敏感瘤的治疗方法，它包括给需要治疗哺乳动物服用药理有效量的权利要求1的化合物。

8、按照权利要求7的方法，其中权利要求1的化合物选自下组化合物及其药学上可接受的盐：

9、下式中间体及其药学上可接受的盐：

式中X是羟基保护基团，Z选自下组基团：

10、按照权利要求9选自下组的中间体及其药学上可接受的盐，包括：

（a）β-1-（2-氧代-4-羟氨基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（b）6-（2-脱氧-2，2-二氟-3，5-二-0-乙酰基-β-D-呋喃核糖基）-1，2，3，4-四唑[1，5-C]嘧啶-5-（6H）-酮;

（c）6-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-（2-脱氧-2，2-二氟-β-D-呋喃核糖基）-1，2，4-三唑[4，3-c]嘧啶-3，5（2H，6H）-二酮;

（d）β-1-（2-氧代-4-肼基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（e）β-1-（2-氧代-4-氨基乙氧羰基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（f）β-1-（2-氧代-4-羟甲氨基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（g）β-1-（2-氧代-4-N-甘氨酰基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（h）β-1-[2-氧代-4-（2-甲肼基）-1，2-二氢嘧啶-1-基]-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（i）β-1-（2-氧代-4-N-甘氨酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（j）β-1-（2-氧代-4-N-丙氨酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（k）β-1-（2-氧代-4-甲氨基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（l）β-1-（2-氧代-4-肼基甲酸乙酯-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖;

（m）6-（2-脱氧-2，2-二氟-3，5-二-0-乙酰基-β-D-呋喃核糖基）-1，2，3，4-四唑[1，5-C]-8-甲基嘧啶-5（6H）-酮;

（n）β-1-（2-氧代-4-巯基-1，2-二氢嘧啶-1-基）-3，5-二-0-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-2-脱氧-2，2-二氟核糖。