CN108310050A - 青钱柳提取物及其制备和降血糖的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提出了一种青钱柳提取物及其制备方法和降血糖的应用，一种青钱柳提取物的制备方法，包括(1)将青钱柳叶晒干、粉碎，过筛，得到青钱柳粉末；(2)青钱柳粉末和水混合，回流提取，冷却后过滤，弃去滤渣，滤液蒸去水分，待用；(3)将步骤(2)的馏分与乙酸乙酯‑乙酸丁酯混合，微波萃取，分液，旋蒸除去溶剂，即得青钱柳乙酸乙酯‑乙酸丁酯提取物。取青钱柳乙酸乙酯‑乙酸丁酯提取物、黄芪、桑叶、金银花、丹参、地骨皮、五味子制得降血糖组合物。本发明所述青钱柳乙酸乙酯‑乙酸丁酯提取物能显著降低血糖，将其作为主要组分的降血糖组合物降血糖效果更优，为进一步开发青钱柳的药用价值指出方向。

Description

青钱柳提取物及其制备和降血糖的应用
技术领域
本发明涉及一种青钱柳提取物及其制备和应用，尤其涉及该提取物在降血糖中的应用，属于中医药领域。
背景技术
当空腹(8小时内无糖及任何含糖食物摄入)血糖高于正常范围，称为高血糖。正常情况下，人体能够通过激素调节和神经调节这两大调节系统确保血糖的来源与去路保持平衡，使血糖维持在一定水平。但是在遗传因素(如糖尿病家族史)与环境因素(如不合理的膳食、肥胖等)的共同作用下，两大调节功能发生紊乱，就会出现血糖水平的升高。长期的高血糖会使全身各个组织器官发生病变，导致急慢性并发症的发生。如胰腺功能衰竭、失水、电解质紊乱、营养缺乏、抵抗力下降、肾功能受损、神经病变、眼底病变等。
目前在临床上用于治疗高血糖引起的糖尿病的药物主要包括注射胰岛素等。高剂量胰岛素迫使外周组织(如脂肪和肌肉)摄取糖以达到降低血糖的目的。其优点是降糖作用快而明显；其缺点是机体不可避免会产生胰岛素依赖，低血糖休克等副作用，以及最终由于胰岛素依赖而导致的胰腺萎缩及胰岛功能的完全丧失。同时，胰岛素注射液价格高昂，给糖尿病患者带来了沉重的经济负担。
研究发现，青钱柳含有多种无机和有机成分，其含有的无机元素包括微量元素锰、铁、铜、锌、铬、硒、钒、锗等，这些元素对人体的保健有重要的作用，其中，镍、铬、钒与糖代谢和胰岛素作用密切相关，在青钱柳中的含量大约是茶叶中的12倍。另外，青钱柳中含有的大量有机物，如黄酮类、三萜类、皂苷类和有机酸类化合物，此外还有一些小分子化合物，证明有很好的降糖效果。
发明内容
为了解决上述的技术问题，本发明提供一种青钱柳提取物及其制备和降血糖的应用，并提供一种降血糖的中药组合物，能够有效起到明显的降血糖作用。
为实现上述技术问题，本发明提供如下技术方案：
一种青钱柳提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将青钱柳叶晒干、粉碎，过60-120目筛，得到青钱柳粉末；
(2)按照青钱柳粉末和水的质量比为1:10-1:30的比例混合，于100-105℃温度下回流提取60-300min，冷却后过滤，弃去滤渣，滤液蒸去水分，待用；
(3)将步骤(2)的滤液与乙酸乙酯-乙酸丁酯按照体积比1:0.8-1.2混合，微波萃取，萃取条件为微波频率2000-3000MHz，微波功率400-600W，萃取时间3-5min，然后将液体移置分液漏斗中分液，旋蒸除去溶剂乙酸乙酯-乙酸丁酯，即得青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物。
作为本发明进一步的改进，一种青钱柳提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将青钱柳晒干、粉碎，过100目筛，得到青钱柳粉末；
(2)按照青钱柳粉末和水的质量比为1:20的比例混合，于105℃温度下回流提取180min，冷却后过滤，弃去滤渣，滤液蒸去水分，待用；
(3)将步骤(2)的滤液与乙酸乙酯-乙酸丁酯按照体积比1:1混合，微波萃取，萃取条件为微波频率2570MHz，微波功率500W，萃取时间4min，然后将液体移置分液漏斗中分液，旋蒸除去溶剂乙酸乙酯-乙酸丁酯，即得青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物。
作为本发明进一步的改进，青钱柳叶为新叶、老叶或落叶。
本发明还包括上述制备方法得到的青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物。
作为本发明进一步的改进，青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物密度为0.8-1.3。
本发明还包括一种降血糖的组合物，由以下重量份的原料制备而成：青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物5-10份、黄芪5-10份、桑叶3-7份、金银花2-5份、丹参2-5份、地骨皮2-5份、五味子1-3份。
作为本发明进一步的改进，组合物由以下重量份的原料制备而成：青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物7份、黄芪7份、桑叶5份、金银花3份、丹参3份、地骨皮2份、五味子1份。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、青钱柳的有机成分很多，主要成分为黄酮类、三萜类、皂苷类和有机酸类化合物，此外还有一些小分子化合物。实验证明青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物具有的生物活性物质具备多种药理学功能，有明显的降血糖作用。
2、青钱柳种植简单，产量大，其青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物以及制成的固体制剂或者液体制剂操作简单，成本低廉，无毒副作用。
附图说明
图1为青钱柳提取物制备工艺图
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所述的实施例只是本发明的部分具有代表性的实施例，而不是全部实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的其他所有实施例都属于本发明的保护范围。
实施例1青钱柳提取物的制备
如图1所示，按照以下步骤进行：
(1)以青钱柳新叶为原料，将青钱柳叶晒干、粉碎，过60目筛，得到青钱柳粉末；
(2)按照青钱柳粉末和水的质量比为1:10的比例混合，于100℃温度下回流提取60min，冷却后过滤，弃去滤渣，滤液蒸去水分，待用；
(3)将步骤(2)的滤液与乙酸乙酯-乙酸丁酯按照体积比1:0.8混合，微波萃取，萃取条件为微波频率2000MHz，微波功率400W，萃取时间3min，然后将液体移置分液漏斗中分液，旋蒸除去溶剂乙酸乙酯-乙酸丁酯，即得青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物，所测提取物密度为0.8。
实施例2青钱柳提取物的制备
按照以下步骤进行：
(1)以青钱柳老叶为原料，将青钱柳叶晒干、粉碎，过100目筛，得到青钱柳粉末；
(2)按照青钱柳粉末和水的质量比为1:20的比例混合，于105℃温度下回流提取180min，冷却后过滤，弃去滤渣，滤液蒸去水分，待用；
(3)将步骤(2)的滤液与乙酸乙酯-乙酸丁酯按照体积比1:1混合，微波萃取，萃取条件为微波频率2570MHz，微波功率500W，萃取时间4min，然后将液体移置分液漏斗中分液，旋蒸除去溶剂乙酸乙酯-乙酸丁酯，即得青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物，所测提取物密度为1.15。
实施例3青钱柳提取物的制备
按照以下步骤进行：
(1)以青钱柳落叶为原料，将青钱柳叶晒干、粉碎，过120目筛，得到青钱柳粉末；
(2)按照青钱柳粉末和水的质量比为1:30的比例混合，于105℃温度下回流提取300min，冷却后过滤，弃去滤渣，滤液蒸去水分，待用；
(3)将步骤(2)的滤液与乙酸乙酯-乙酸丁酯按照体积比1:1.2混合，微波萃取，萃取条件为微波频率3000MHz，微波功率600W，萃取时间5min，然后将液体移置分液漏斗中分液，旋蒸除去溶剂乙酸乙酯-乙酸丁酯，即得青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物，所测提取物密度为1.3。
实施例4一种降血糖的组合物
组合物由以下重量份的原料制备而成：青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物5份、黄芪5份、桑叶3份、金银花2份、丹参2份、地骨皮2份、五味子1份。加水浸泡30min，煎煮120min，过滤，浓缩至密度为0.8-1.3，得到降血糖的组合物。
实施例5一种降血糖的组合物
组合物由以下重量份的原料制备而成：青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物7份、黄芪7份、桑叶5份、金银花3份、丹参3份、地骨皮2份、五味子1份。加水浸泡30min，煎煮120min，过滤，浓缩至密度为0.8-1.3降血糖的组合物。
实施例6一种降血糖的组合物
组合物由以下重量份的原料制备而成：青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物10份、黄芪10份、桑叶7份、金银花5份、丹参5份、地骨皮5份、五味子3份。加水浸泡30min，煎煮120min，过滤，浓缩至密度为0.8-1.3降血糖的组合物。
试验例1小鼠试验
1、高血糖小鼠模型建立及处理。取30只大小相近的小鼠，分为6组，分别为1组、2组、3组、4组、对照1组和对照2组，每组5只，全部给予尾静脉注射10mg/m L四氧嘧啶，剂量为50mg/kg。3d后，尾静脉采血测血糖。血糖值在10mmol/L以上的小鼠为成功造模的高血糖小鼠。1组和2组的小鼠给与灌胃实施例2中的青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物，剂量为200mg，3组和4组的小鼠给与灌胃实施例5中的降血糖组合物，剂量为200mg，对照1组和对照2组的小鼠灌胃生理盐水，剂量为200mg。12h后测血糖。
2、GOD-POD法测血糖。饱和草酸钾溶液(抗凝剂)润洗枪头和0.5m LDorf管，采血，3000r/min离心30min，取上清用葡萄糖试剂盒进行血糖测定。
实验结果参见表1.
表1对多糖处理的小鼠降血糖作用的影响
由以上结果可知，实施例2中的青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物和实施例5中的降血糖组合物能明显的降低多糖处理后小鼠的血糖，使之回到正常值的范围之内，其中，实施例5中的降血糖组合物的效果更显著。
试验例2人体试验
1、实验组别。共10组，其中，实验组1～6分别是实施例1～6所提供的组合物，对照组分别为降血糖常用的中药金银花、桑叶、黄芪以及降血糖中药复方养阴降糖片。
2、实验方法。
(1)病例选择：参加实验人员均为志愿者，由3名内科门诊科医师同时诊断为血糖较高患者。所有患者均于实验开始前2周停用降血糖药物或保健品，共筛选病例300例，其中男性175例，女性125例，年龄39-59岁，平均年龄(45.7岁±5.0)岁。
入选标准：持续一周测得空腹血糖均高于8mmol/l，低于10mmol/l。
(2)实验方法：全部受试志愿者随机分为10组，每组30人，第一组服用金银花，第二组服用桑叶，第三组服用黄芪，第四组服用养阴降糖片，第五到十组分别服用实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5、实施例6，每天两次，每次2mL，温水送服，30天为一个疗程，每周随访一次，记录每位患者的空腹血糖指数，以及询问服用后患者的体感。
(3)评价标准：血糖降至3.9-6.1mmol/l为痊愈，血糖降至6.1-7mmol/l为显效，血糖降至7-8mmol/l为好转，血糖仍在8-10mmol/l为无效。总有效率＝痊愈+显效+好转。
实验结果参见表2。
表2降血糖效果表
组别 n 痊愈 显效 好转 无效 总有效率％
金银花 30 0 1 3 26 13.3
桑叶 30 0 3 5 22 26.7
黄芪 30 1 2 7 20 33.3
养阴降糖片 30 2 2 7 19 36.7
实施例1 30 3 4 6 17 43.3
实施例2 30 5 5 7 13 56.7
实施例3 30 2 6 4 18 40.0
实施例4 30 4 7 7 12 60.0
实施例5 30 7 10 8 5 83.3
实施例6 30 5 8 7 10 66.7
由以上结果可知，本发明提供的青钱柳提取物的降血糖效果均好于降血糖中药金银花、桑叶、黄芪以及复方中药养阴降糖片，将青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物作为组方组成的降血糖组合物，其降血糖的效果更优。
本领域的技术人员在不脱离权利要求书确定的本发明的精神和范围的条件下，还可以对以上内容进行各种各样的修改。因此本发明的范围并不仅限于以上的说明，而是由权利要求书的范围来确定的。

Claims (7)

1.一种青钱柳提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将青钱柳叶晒干、粉碎，过60-120目筛，得到青钱柳粉末；
(2)按照青钱柳粉末和水的质量比为1:10-1:30的比例混合，于100-105℃温度下回流提取60-300min，冷却后过滤，弃去滤渣，滤液蒸去水分，待用；
(3)将步骤(2)的滤液与乙酸乙酯-乙酸丁酯按照体积比1:0.8-1.2混合，微波萃取，萃取条件为微波频率2000-3000MHz，微波功率400-600W，萃取时间3-5min，然后将液体移置分液漏斗中分液，旋蒸除去溶剂乙酸乙酯-乙酸丁酯，即得青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物。
2.根据权利1所述青钱柳提取物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(1)将青钱柳晒干、粉碎，过100目筛，得到青钱柳粉末；
(2)按照青钱柳粉末和水的质量比为1:20的比例混合，于105℃温度下回流提取180min，冷却后过滤，弃去滤渣，滤液蒸去水分，待用；
(3)将步骤(2)的滤液与乙酸乙酯-乙酸丁酯按照体积比1:1混合，微波萃取，萃取条件为微波频率2570MHz，微波功率500W，萃取时间4min，然后将液体移置分液漏斗中分液，旋蒸除去溶剂乙酸乙酯-乙酸丁酯即得青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物。
3.根据权利要求1或2所述青钱柳提取物的制备方法，其特征在于，所述青钱柳叶为新叶、老叶或落叶。
4.根据权利要求1-3任一权利要求所述制备方法得到的青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物。
5.根据权利要求4所述青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物，其特征在于，所述提取物密度为0.8-1.3。
6.一种降血糖的组合物，其特征在于，组合物由以下重量份的原料制备而成：青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物5-10份、黄芪5-10份、桑叶3-7份、金银花2-5份、丹参2-5份、地骨皮2-5份、五味子1-3份。
7.如权利要求6所述组合物，其特征在于，所述组合物由以下重量份的原料制备而成：青钱柳乙酸乙酯-乙酸丁酯提取物7份、黄芪7份、桑叶5份、金银花3份、丹参3份、地骨皮2份、五味子1份。
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