CN108244407A - 一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料及其制备方法 - Google Patents

一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料及其制备方法，通过改进的饲料配方，前处理、膨化处理、发酵处理、冷制粒处理、包装一套系统的制备方法制备而成，具有以下优点：(1)柔软、弹性好，口感好，投入水体后稳定性强，不溃散；增加被水产动物采食概率；(2)含有大量有益微生物，将饲料原料中的大分子物质分解为小分子的氨基酸、糖类、活性肽、维生素、细菌素等，促进消化吸收；(3)减少动物粪便中氮的排放，促进底质有机物的分解，保持水质净化的环境；(4)冷制粒技术解决了传统饲料的中高温制粒过程中杀死有益微生物的问题；单向透气阀袋子包装保证菌种在贮藏过程中产生的气体能够及时排除，增加饲料的保存寿命。

Description

一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料及其制备方法
技术领域
本发明涉及微生物发酵饲料领域，尤其涉及一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料及其制备方法。
背景技术
近年来随着微生物发酵工艺的发展，微生物发酵饲料引起水产养殖业界广泛的兴趣，微生物发酵饲料是指在人工控制条件下，通过微生物的代谢活动，将饲料中的大分子物质和抗营养因子分解或转化，产生更有利于动物采食和利用的富含高活性益生菌及其代谢产物的饲料或原料。微生物发酵饲料具有天然的发酵香味，含有大量的有益菌。发酵成品的pH值较低，在4.5左右，含有较多的乳酸和乙酸。这种同时具有酸化剂、微生态制剂特性以及类似抗生素生长因子功能的发酵料，具有无毒、无残留、无污染的优势。
微生物发酵饲料与传统饲料相比具有其自身独特的优越性；1、利用廉价的农业和轻工副产物生产高质量的饲料蛋白原料，2、获得高活性的有益微生物。3、新型无抗发酵饲料很好地解决了促进动物生长和无残留、无污染之间的矛盾。4、符合当前健康环保型渔业发展的要求。
市场上大部分发酵饲料都是把农业或轻工业副产品单个原料或者几个原料进行简单的复配后采用厌氧或者有氧的固体发酵技术进行发酵，部分发酵后烘干应用到饲料中去，譬如发酵豆粕、发酵棉粕等。部分产品经过简单的复配后发酵，应用到现场，譬如：蛋白型发酵料主要是以豆粕为主要原料+麸皮+葡萄糖+菌种；碳源型的发酵料主要是以麸皮为主要原料+少量蛋白原料+葡萄糖+菌种。
而目前水产养殖中使用的发酵饲料通常是采用农作物副产品为原料，粉碎为粉状后简单复配进行发酵成为水产用粉状发酵料，其投喂方式有两种：一种通过搅拌到粉料中，应用到终端养殖场。而水产养殖动物大部分都采食从0.3mm到3.5mm不等的膨化或硬颗粒饲料，所以粉状发酵饲料很难被水产养殖动物采食到肠道内。另外一种投喂方式是将粉状发酵料和常规颗粒饲料搅拌在一起投入到水体中让水产动物进行采食，而粉状饲料很难和常规颗粒饲料有效粘合，尤其投入水体后，粉状发酵料很快和常规颗粒饲料分散开，水产动物采食到胃肠道内的发酵料非常有限，不能够起到发酵饲料正真的改善肠道，提高饲料消化吸收率的作用。实际上在水产养殖过程中添加的粉状发酵饲料，通常仅仅只是作为一个调水、改水产品来调节池塘养殖水体，并没有真正的被鱼、虾、蟹等水产动物吃进去，改善肠道，达到内外兼顾的效果；反而给养殖水体造成了更大的负担，从而给水产养殖后期的水环境造成氨氮、亚硝酸盐含量高。让水质调节工作在养殖后期变得很难，所以目前大部分养殖者已经认识到粉状发酵饲料存在的弊端，只是在养殖前期少量的使用一些。而在中后期的养殖过程中为了调节水质。而大部分的养殖者会使用单一的或复配的有益菌如：枯草芽孢杆菌、粪链球菌等。而对于粉状发酵饲料基本不用，这就形成了发酵饲料在水产养殖过程中不能够被大面积使用的尴尬局面。
也有一些厂家或养殖公司用饲料原料如玉米、黄豆等经过简单粗粉碎为大颗粒发酵后投入水体；这种发酵颗粒饲料对于水产动物来说，营养单一，粒径大小不一致，浸水后耐水性差，也没有根据水产动物的营养需求和采食习惯进行配制，采食效果差。
如何制备一种从剂型、饲料的配方、以及制备的工艺方法上相结合起来，研制出一种适用于水产动物摄食、营养丰富，最大程度上促进消化吸收的湿性颗粒微生物发酵饲值得研究。
发明内容
发明目的：为了克服现有技术中存在的缺陷，本发明提出了一种投入水体后能保持较长时间内形状不变，保存时间长，容易被水产养殖动物及时采食，有利于肠道养护，增加有益菌群、促进消化吸收，健康养殖的目的湿性颗粒微生物发酵饲料及其制备方法。
技术方案：为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料，具体为颗粒状，其粒径为0.3mm-6.0mm，以质量计算包括5-7份的饲料组分一、3-5份的饲料组分二以及0.02-0.05份的饲料组分三；
其中所述饲料组分一中各原料质量百分比如下：花生粕20％-40％，豆粕30％-50％，菜粕5％-10％，猪肉粉0-7％，血粉2％-6％，米糠6％-10％；具体根据不同的水产动物对于蛋白质和能量的需求不同，进行配制；
所述饲料组分二中各原料质量百分比如下：磷虾粉2％-6％，乌贼膏6％-10％，高筋面粉60％-80％，磷酸二氢钙1％-2％，食盐0.5-1％，沸石粉5％-14％；主要为水产动物提供所需的矿物质和具有诱食效果的饲料原料，高筋面粉的添加保证了发酵饲料在水中的耐水性；
所述饲料组分三中各原料质量百分比如下：葡萄糖氧化酶20％-50％、中性蛋白酶30％-60％、植酸酶20％-40％；合理的酶制剂的添加能够提高饲料在肠道内的消化吸收，提高饲料利用率。饲料配方中添加植酸酶，降低了饲料中磷的添加比例，从而间接降低了水体中磷的含量，预防水体中由于磷含量过高爆发蓝藻。
所述高筋面粉以质量计算占所述发酵饲料总质量的比例超过30％；高筋面粉经过膨化处理提高了淀粉的糊化度，提高后续制粒后的饲料的耐水性。
更为优选的，所述发酵饲料的水分含量为25％-45％。
本发明还公开了上述一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料的制备方法，包括如下步骤：
1)称量：按配方规定份数称量洁净的各发酵饲料组分中的制备原料；
2)前处理：
2-A)混合：将三种发酵饲料组分进行分开混合处理；
其中饲料组分一采用单轴浆叶式混合机在室温下进行混合，在前处理时，对饲料组分一的混合均匀度要求不高；要求混合程度为物料的变异系数小于5％；然后用输送绞龙输送至水滴式粉碎机进行粉碎，粉碎粒径为50-60目备用；
其中水滴式粉碎机的粉碎室由普通锤片粉碎机的圆形改为水滴型，这样能够增大粉碎室筛板的有效面积，又能破坏物料在粉碎室形成环流，有利于粉碎后物料排出粉碎室；此外，水滴型粉碎机的粉碎室采用二次打击粉碎设计，同时可改变锤片在转子上的位置，能形成粗、细、微细三种形成的粉碎，粉碎产量较普通锤片粉碎机提高15％以上，粉碎粒径达到50目，能适应对饲料组分一的初级粉碎细度的要求；
饲料组分二采用卧式双轴浆叶式混合机进行混合备用；
饲料组分二的混合主要是针对以高筋面粉为载体对核心小料进行预混合，因为核心小料在饲料中的添加量相对比较小，必须要保证其在饲料中均匀分布，对其进行预混合后再添加到饲料中去，所以在饲料组分二必须采用混合均匀度更高的卧式双轴浆叶式混合机进行混合，卧式双轴浆叶式混合机是一种高效短周期的混合机，由两个旋转方向相反的转子组成，转子上焊有多个不同角度的浆叶，浆叶一方面带动物料沿内壁旋转，一方面带动物料左右翻动，在两个转子的交叉处重叠，形成一个失重区，在此区域内，不管物料的形状、大小和密度如何，都能上浮，处于瞬间失重状态，以使物料形成全方位连续循环翻动，相互交错剪切，从而达到快速柔和及混合均匀的效果；
饲料组分三采用鼓式混合机进行混合备用；
饲料组成三的成分主要为酶制剂，其混合均匀度要求较高，必须先在鼓式混合机中混合后再进行添加。
2-B)超微粉碎：按比例称取粉碎后的饲料组分一和饲料组分二投入卧式双轴浆叶式混合机在室温下进行混合；混合均匀后投入超微粉料仓用立轴式超微粉碎机粉碎，粉碎粒度达到100目以上，得到由饲料组分一和饲料组分二组成的混合原料A；
3)膨化处理：将步骤2)得到的混合原料A投入膨化处理设备双螺杆式挤压膨胀机进行膨化处理：采用湿法膨胀法，控制膨化温度为125-138℃,压力为34-37个大气压，水分控制在20％-25％；膨化后的饲料水分由于水分蒸发，水分含量为16％-20％，温度在75-85℃，冷却至35-40℃备用；
饲料组分一和饲料组分二混合后膨化主要是将蛋白质与淀粉基质结合在一起，饲喂时不易流失，只有当动物体内消化酶分解淀粉时才将蛋白质释放出来，提高了蛋白质的效价。另外，膨化过程也使蛋白质发生变性，钝化了许多抗营养因子，同时改变了蛋白质的三级结构，缩短了蛋白质在肠道中的水解时间，能够使水生动物更易消化吸收，提高饲料消化吸收率。同时本发明中的淀粉含量达到整个饲料配方的30％以上，通过膨化作用很好的提高了淀粉的糊化度，让直链淀粉生成改性淀粉，具有很强的吸水性和粘接功能，高的吸水性使得可在后续工艺中向产品中添加多达30％-45％之多的发酵菌液，强的粘接功能，提高了发酵饲料在水体中的耐水性。
4)发酵处理：
4-A)接种发酵菌液的配制：分别配制枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、植物乳杆菌三种发酵菌液；按照菌液体积的比例；其中以体积计将30％-50％的枯草芽孢杆菌菌液，20％-30％的产朊假丝酵母菌液；30％-50％的植物乳杆菌菌液在发酵罐中混合均匀得混合发酵菌液；将步骤2)中混合备用的饲料组分三按照所需比例加入混合发酵菌液中，搅拌均匀得到接种发酵菌液；
常规水产饲料在加工中一般都要经过强化调质、制粒(或膨化)、后熟化等工艺，而目前，饲料中应用较多的微生物制剂主要有乳酸杆菌、链球菌、酵母、芽抱杆菌等，这些微生物制剂对温度尤为敏感，当膨化制粒温度超过85℃时其活性将全部丧失；酶的最适温度在35-40℃，但膨化制粒过程中的温度达到120-150℃，并伴有高湿(引起饲料中较高的水分活度)、高压(改变酶蛋白的空间多维结构而变性)，在这样的条件下，大多数酶制剂的活性都将损失殆尽；所以本发明采用后添加的工艺把这些热敏组分也就是饲料组成成分三种的酶制剂，按照比例添加到菌液中混合均匀后，在饲料原料组成一和饲料原料组成二混合膨化后再喷入其中。
4-B)混合接种：将步骤3)膨化后冷却备用的混合原料A投入到犁式混合机，步骤4-A)制得的接种发酵菌液按照混合原料A质量的5％-15％的比例，通过计量泵和喷液装置喷雾接种至犁式混合机中的混合物料A上得饲料半成品；其中犁式混合机的工作原理适用于粘性或胶状添加物的混合，对于固液混合以及造湿性颗粒是最佳的选择；
5)冷制粒：将步骤4)发酵处理后的饲料半成品，投入制粒机中制粒；室温处理；压缩比为21-25；
6)包装：制粒后的湿性颗粒采用单向透气阀包装袋进行包装，保证了菌种在后续的发酵过程中，产生的气体能够通过单向阀及时的排出，而外面的带有杂菌的气体不能够进入袋中；
制粒后的饲料的水分含量在25％-45％，是微生物和酶制剂最适宜的生长湿度；包装后置于28-32℃的恒温发酵车间内发酵三天即得。
为了获得最佳的发酵效果，步骤4-A)中的枯草芽孢杆菌菌液配制的培养基成分及以质量计算的配比为：玉米浆5％、糖蜜2％、葡萄糖1.5％、余量的水；pH为7.14-7.34；枯草芽孢杆菌菌种培养基总质量的2％。
更进一步的，步骤4-A)中的产朊假丝酵母菌液配制的培养基成分及以质量计算的配比为：玉米浆0.5％、糖蜜0.5％、葡萄糖2.0％、KH2P04 0.1％、(NH4)2SO41％、余量的水，pH为6.0-6.5；产朊假丝酵母菌种接种量为培养基总质量的2％。
更为优选的，步骤4-A)中的植物乳杆菌菌液配制的培养基成分及配比为：牛肉膏0.6％、糖蜜0.8％、磷酸二氢钾0.2％、柠檬酸三铵0.2％、吐温80 0.1％、余量的水；pH为6.1-6.3；植物乳杆菌菌种接种量为培养基总质量的2％，其中除吐温80的百分比以体积计算，其他成分的百分比以质量计算。
步骤5)中所述制粒设备采用不锈钢环模制粒设备，压辊为细齿，增大了环模宽度以提高产量；电机功率主电机为六级，降低了颗粒机齿轮箱内的齿数比；降低喂料速度慢；保证湿制粒后的产品成型率高。
有益效果：本发明提供的一种湿性颗粒微生物发酵饲料及其制备方法，具有以下优点：
(1)饲料配方中含有植酸酶，降低了饲料中磷的添加量，有效的预防了由于投喂过剩，造成水体中有机质和磷的含量过高，导致水体富营养化，造成蓝藻爆发。
(2)饲料成品柔软、弹性适宜，水分含量适宜，含有大量的有益微生物，投入水体后能够在水体中保持较长时间内形状不变、不溃散；且口感适宜，具有更加的适口性和诱食性，不仅保持了水产养殖常规饲料的特性，而且很好的解决了发酵湿性颗粒料的水分、微生物活性以及保存期的问题。
(3)颗粒性增大了大量有益菌被水产动物采食进入胃肠道的概率，且其特有的配方进一步提高了水产动物对饲料的消化吸收率，减少了粪便中氮的排放；且粪便中含有大量的有益菌，促进底质有机物的分解；保持水质净化的环境；达到了良性促进动物生长和无残留、无污染之间的双赢。
(4)将饲料进行膨化后，使各组份之间精密结合，然后添加发酵液制粒后在发酵袋内进行有氧和厌氧发酵，让有益菌将饲料原料中的大分子物质分解为小分子的氨基酸、糖类、活性肽、维生素、细菌素等。
(5)冷制粒技术将发酵完成的饲料制成含有活性微生物的微生物发酵湿型软颗粒饲料，用单向透气阀袋子包装保证发酵料中的菌种在贮藏过程中产生的气体能够及时排除，增加饲料的保存寿命；并且解决了传统饲料的在高温制粒过程中杀死有益微生物和酶制剂等活性成份的问题。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明：
实施例1：
一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料，具体为颗粒状，其粒径为0.3mm-6.0mm，水分含量为30％；
以质量计算包括5份的饲料组分一、4.95份的饲料组分二以及0.05份的饲料组分三；
其中所述饲料组分一中各原料质量百分比如下：花生粕40％，豆粕40％，菜粕10％，猪肉粉2％，血粉2％，米糠6％；具体根据不同的水产动物对于蛋白质和能量的需求不同，进行配制；
所述饲料组分二中各原料质量百分比如下：磷虾粉5％，乌贼膏10％，高筋面粉70％，磷酸二氢钙2％，食盐1％，沸石粉12％；主要为水产动物提供所需的矿物质和具有诱食效果的饲料原料，高筋面粉的添加保证了发酵饲料在水中的耐水性；
所述饲料组分三中各原料质量百分比如下：葡萄糖氧化酶30％、中性蛋白酶50％、植酸酶20％；合理的酶制剂的添加能够提高饲料在肠道内的消化吸收，提高饲料利用率。饲料配方中添加植酸酶，降低了饲料中磷的添加比例，从而间接降低了水体中磷的含量，预防水体中由于磷含量过高爆发蓝藻。
实施例2：
一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料，具体为颗粒状，其粒径为0.3mm-6.0mm，水分含量为35％；
以质量计算包括6.5份的饲料组分一、3.98份的饲料组分二以及0.02份的饲料组分三；
其中所述饲料组分一中各原料质量百分比如下：花生粕30％，豆粕50％，菜粕5％，猪肉粉3％，血粉2％，米糠10％；具体根据不同的水产动物对于蛋白质和能量的需求不同，进行配制；
所述饲料组分二中各原料质量百分比如下：磷虾粉6％，乌贼膏10％，高筋面粉67％，磷酸二氢钙2％，食盐1％，沸石粉14％；主要为水产动物提供所需的矿物质和具有诱食效果的饲料原料，高筋面粉的添加保证了发酵饲料在水中的耐水性；
所述饲料组分三中各原料质量百分比如下：葡萄糖氧化酶20％、中性蛋白酶60％、植酸酶20％；合理的酶制剂的添加能够提高饲料在肠道内的消化吸收，提高饲料利用率。饲料配方中添加植酸酶，降低了饲料中磷的添加比例，从而间接降低了水体中磷的含量，预防水体中由于磷含量过高爆发蓝藻。
实施例3：
一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料，具体为颗粒状，其粒径为0.3mm-6.0mm，水分含量为40％；
以质量计算包括6份的饲料组分一、4.95份的饲料组分二以及0.05份的饲料组分三；
其中所述饲料组分一中各原料质量百分比如下：花生粕38％，豆粕45％，菜粕5％，猪肉粉5％，米糠7％；具体根据不同的水产动物对于蛋白质和能量的需求不同，进行配制；
所述饲料组分二中各原料质量百分比如下：磷虾粉4％，乌贼膏8％，高筋面粉80％，磷酸二氢钙2％，食盐1％，沸石粉8％；主要为水产动物提供所需的矿物质和具有诱食效果的饲料原料，高筋面粉的添加保证了发酵饲料在水中的耐水性；
所述饲料组分三中各原料质量百分比如下：葡萄糖氧化酶35％、中性蛋白酶45％、植酸酶20％；合理的酶制剂的添加能够提高饲料在肠道内的消化吸收，提高饲料利用率。饲料配方中添加植酸酶，降低了饲料中磷的添加比例，从而间接降低了水体中磷的含量，预防水体中由于磷含量过高爆发蓝藻。
实施例4：
一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料，具体为颗粒状，其粒径为0.3mm-6.0mm，水分含量为38％；
以质量计算包括6份的饲料组分一、3.97份的饲料组分二以及0.03份的饲料组分三；
其中所述饲料组分一中各原料质量百分比如下：花生粕38％，豆粕30％，菜粕10％，猪肉粉7％，血粉5％，米糠10％；具体根据不同的水产动物对于蛋白质和能量的需求不同，进行配制；
所述饲料组分二中各原料质量百分比如下：磷虾粉6％，乌贼膏8％，高筋面粉70％，磷酸二氢钙2％，食盐1％，沸石粉13％；主要为水产动物提供所需的矿物质和具有诱食效果的饲料原料，高筋面粉的添加保证了发酵饲料在水中的耐水性；
所述饲料组分三中各原料质量百分比如下：葡萄糖氧化酶25％、中性蛋白酶50％、植酸酶25％；合理的酶制剂的添加能够提高饲料在肠道内的消化吸收，提高饲料利用率。饲料配方中添加植酸酶，降低了饲料中磷的添加比例，从而间接降低了水体中磷的含量，预防水体中由于磷含量过高爆发蓝藻。
实施例5：
以上述实施例1的配方为制备原料，一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料的制备方法，包括如下步骤：
1)称量：按配方规定份数称量洁净的各发酵饲料组分中的制备原料；
2)前处理：
2-A)混合：将三种发酵饲料组分进行分开混合处理；
其中饲料组分一采用单轴浆叶式混合机在室温下进行混合，在前处理时，对饲料组分一的混合均匀度要求不高；要求混合程度为物料的变异系数小于5％；然后用输送绞龙输送至水滴式粉碎机进行粉碎，粉碎粒径为50目备用；
其中水滴式粉碎机的粉碎室由普通锤片粉碎机的圆形改为水滴型，这样能够增大粉碎室筛板的有效面积，又能破坏物料在粉碎室形成环流，有利于粉碎后物料排出粉碎室；此外，水滴型粉碎机的粉碎室采用二次打击粉碎设计，同时可改变锤片在转子上的位置，能形成粗、细、微细三种形成的粉碎，粉碎产量较普通锤片粉碎机提高15％以上，粉碎粒径达到50目，能适应对饲料组分一的初级粉碎细度的要求；
饲料组分二采用卧式双轴浆叶式混合机进行混合备用；
饲料组分二的混合主要是针对以高筋面粉为载体对核心小料进行预混合，因为核心小料在饲料中的添加量相对比较小，必须要保证其在饲料中均匀分布，对其进行预混合后再添加到饲料中去，所以在饲料组分二必须采用混合均匀度更高的卧式双轴浆叶式混合机进行混合，卧式双轴浆叶式混合机是一种高效短周期的混合机，由两个旋转方向相反的转子组成，转子上焊有多个不同角度的浆叶，浆叶一方面带动物料沿内壁旋转，一方面带动物料左右翻动，在两个转子的交叉处重叠，形成一个失重区，在此区域内，不管物料的形状、大小和密度如何，都能上浮，处于瞬间失重状态，以使物料形成全方位连续循环翻动，相互交错剪切，从而达到快速柔和及混合均匀的效果；
饲料组分三采用鼓式混合机进行混合备用；
饲料组成三的成分主要为酶制剂，其混合均匀度要求较高，必须先在鼓式混合机中混合后再进行添加。
2-B)超微粉碎：按比例称取粉碎后的饲料组分一和饲料组分二投入卧式双轴浆叶式混合机在室温下进行混合；混合均匀后投入超微粉料仓用立轴式超微粉碎机粉碎，粉碎粒度达到100目以上，得到由饲料组分一和饲料组分二组成的混合原料A；
3)膨化处理：将步骤2)得到的混合原料A投入膨化处理设备双螺杆式挤压膨胀机进行膨化处理：采用湿法膨胀法，控制膨化温度为125-138℃,压力为34-37个大气压，水分控制在20％-25％；膨化后的饲料水分由于水分蒸发，水分含量为16％-20％，温度在75-85℃，冷却至35-40℃备用；
饲料组分一和饲料组分二混合后膨化主要是将蛋白质与淀粉基质结合在一起，饲喂时不易流失，只有当动物体内消化酶分解淀粉时才将蛋白质释放出来，提高了蛋白质的效价。另外，膨化过程也使蛋白质发生变性，钝化了许多抗营养因子，同时改变了蛋白质的三级结构，缩短了蛋白质在肠道中的水解时间，能够使水生动物更易消化吸收，提高饲料消化吸收率。同时本发明中的淀粉含量达到整个饲料配方的30％以上，通过膨化作用很好的提高了淀粉的糊化度，让直链淀粉生成改性淀粉，具有很强的吸水性和粘接功能，高的吸水性使得可在后续工艺中向产品中添加多达30％-45％之多的发酵菌液，强的粘接功能，提高了发酵饲料在水体中的耐水性。
4)发酵处理：
4-A)接种发酵菌液的配制：分别配制枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、植物乳杆菌三种发酵菌液；三种菌种种子均采购自湖北绿天地生物科技有限公司；按照菌液体积的比例；其中以体积计将30％的枯草芽孢杆菌菌液，30％的产朊假丝酵母菌液；40％的植物乳杆菌菌液在发酵罐中混合均匀得混合发酵菌液；将步骤2)中混合备用的饲料组分三按照所需比例加入混合发酵菌液中，搅拌均匀得到接种发酵菌液；
常规水产饲料在加工中一般都要经过强化调质、制粒(或膨化)、后熟化等工艺，而目前，饲料中应用较多的微生物制剂主要有乳酸杆菌、链球菌、酵母、芽抱杆菌等，这些微生物制剂对温度尤为敏感，当膨化制粒温度超过85℃时其活性将全部丧失；酶的最适温度在35-40℃，但膨化制粒过程中的温度达到120-150℃，并伴有高湿(引起饲料中较高的水分活度)、高压(改变酶蛋白的空间多维结构而变性)，在这样的条件下，大多数酶制剂的活性都将损失殆尽；所以本发明采用后添加的工艺把这些热敏组分也就是饲料组成成分三种的酶制剂，按照比例添加到菌液中混合均匀后，在饲料原料组成一和饲料原料组成二混合膨化后再喷入其中。
4-B)混合接种：将步骤3)膨化后冷却备用的混合原料A投入到犁式混合机，步骤4-A)制得的接种发酵菌液按照混合原料A质量的5％-15％的比例，通过计量泵和喷液装置喷雾接种至犁式混合机中的混合物料A上得饲料半成品；其中犁式混合机的工作原理适用于粘性或胶状添加物的混合，对于固液混合以及造湿性颗粒是最佳的选择；
其中，步骤4-A)中的枯草芽孢杆菌菌液配制方法如下：培养基成分及以质量计算的配比为：玉米浆5％、糖蜜2％、葡萄糖1.5％、水91.5％。按比例将培养基投入100L的发酵罐中调节培养基的pH值为7.14-7.34；通入蒸汽保持温度在121℃消毒灭菌20min，然后冷却到30℃接入枯草芽孢杆菌菌种，接种量为2％，保持恒温进行好氧培养，搅拌器初始转速为100rpm/min，随着溶氧的降低适当提高转速。培养8h后检测pH值如果达到5，将菌液稀释26倍后用分光光度计检测菌液的OD值达到0.17±0.001时，表示发酵液发酵稳定，得到枯草芽孢杆菌的发酵液。
产朊假丝酵母菌液配制方法如下：配制的培养基成分及以质量计算的配比为：玉米浆0.5％、糖蜜0.5％、葡萄糖2.0％、KH2P04 0.1％、(NH4)2SO4 1％、水95.9％。按比例将培养基投入100L的发酵罐中，通入蒸汽保持温度在121℃消毒灭菌20min，冷却到30℃接入枯草芽孢杆菌菌种，接种量为2％，保持恒温进行好氧培养，搅拌器初始转速为200rpm/min。培养18h后检测pH值如果达到3.6-3.8，将菌液稀释26倍后用分光光度计检测菌液的OD值达到0.50±0.01时，表示发酵液发酵稳定，得到产朊假丝酵母的发酵液。
植物乳杆菌菌液配制方法如下：培养基成分及配比为：牛肉膏0.6％、糖蜜0.8％、磷酸二氢钾0.2％、柠檬酸三铵0.2％、吐温80 0.1％、水98.1％；其中除吐温80的百分比以体积计算，其他成分的百分比以质量计算。按比例将培养基投入100L的发酵罐中，用稀硫酸调节pH值为6.1-6.3；通入蒸汽保持温度在121℃消毒灭菌20min，然后冷却到37℃接入植物乳杆菌菌种，接种量为2％，保持恒温厌氧培养，搅拌器转速为50rpm/min。培养8h后检测pH值如果达到3.6-3.8，将菌液稀释26倍后用分光光度计检测菌液的OD值达到0.12±0.01时，表示发酵液发酵稳定，得到植物乳杆菌的发酵液。
5)制粒：将步骤4)发酵处理后的饲料半成品，投入制粒机中制粒；室温处理；压缩比为21-25；制粒设备采用不锈钢环模制粒设备，压辊为细齿，增大了环模宽度以提高产量；电机功率主电机为六级，降低了颗粒机齿轮箱内的齿数比；降低喂料速度慢；保证湿制粒后的产品成型率高；
6)包装：制粒后的湿性颗粒采用单向透气阀包装袋进行包装，保证了菌种在后续的发酵过程中，产生的气体能够通过单向阀及时的排出，而外面的带有杂菌的气体不能够进入袋中；制粒后的饲料的水分含量在25％-45％，是微生物和酶制剂最适宜的生长湿度；包装后置于28-32℃的恒温发酵车间内发酵三天即得。
实施例6：
制备方法基本相同，不同之处在于采用实施例2的饲料配方，且4-A)接种发酵菌液的配制过程中：以体积计将30％的枯草芽孢杆菌菌液，30％的产朊假丝酵母菌液；40％的植物乳杆菌菌液在发酵罐中混合均匀得混合发酵菌液。
实施例7：
制备方法基本相同，不同之处在于采用实施例3的饲料配方，且4-A)接种发酵菌液的配制过程中：以体积计将35％的枯草芽孢杆菌菌液，25％的产朊假丝酵母菌液；40％的植物乳杆菌菌液在发酵罐中混合均匀得混合发酵菌液。
实施例8：
制备方法基本相同，不同之处在于采用实施例2的饲料配方，且4-A)接种发酵菌液的配制过程中：以体积计将50％的枯草芽孢杆菌菌液，20％的产朊假丝酵母菌液；30％的植物乳杆菌菌液在发酵罐中混合均匀得混合发酵菌液。
测试试验：
A)水中浸泡测试：
将实施例5-8制备而成的饲料成品，进行水中浸泡试验，同时设置市售普通颗粒型饲料(南通巴大公司(通威控股))进行对照试验；测试方法具体为，将实施例5-8制备而得饲料以及市售普通颗粒型饲料同时分别投入相应的水盆内，记录初始投入量为500g,投入水后浸湿后捞出，沥干水分，称量重量A0，并记录初始重量，再投回水中，分别于2h、4h、6h、8h、10h取出沥干水分，称量重量得A2、A4、A6、A8、A10；以A2/A0、A4/A0、A6/A0、A8/A0、A10/A0来分别计算经过相应时间的饲料保持百分比；具体数据如表1所示：
表1：实施例5-8以及对比例饲料投水后稳定性对比
百分比 实施例5 实施例6 实施例7 实施例8 市售对比例
2h 1 1 1 1 1
4h 1 1 1 1 0.97
6h 0.99 0.98 0.98 0.99 0.90
8h 0.90 0.92 0.91 0.90 0.80
10h 0.87 0.87 0.87 0.87 0.70
经测试，实施例1-4制备的饲料在水中的稳定性达到10h以上，而市售普通颗粒型饲料的稳定性明显处于劣势，在8h时已经体现较差的稳定性。
B)水中保鲜测试：
将实施例5-8制备而成的饲料成品，进行水中保鲜测试，同时设置市售普通颗粒型饲料(南通巴大(通威控股)生物科技有限公司的南美白对虾颗粒饲料虾肝强)进行对照试验；测试方法具体为，将实施例5-8的饲料以及市售普通颗粒型饲料同时分别投入相应的烧杯内，记录投入量为100g,然后各加入池塘养殖水500mL，放置于恒温箱内设置温度为30℃培养。分别于0h、24h、48h、72h、取出闻试验样品的气味。
表2：实施例5-8以及对比例饲料水中保鲜测试
从表2可以看出，发酵饲料在适合水生动物生长的水体中，能够让有益菌占据优势，快速繁殖抑制有害菌的生长，即使水生动物采食不完全，在水体中有剩余的发酵料也不会对水体造成富营养化，使有害菌大量繁殖。而常规饲料因其中没有有活性有益菌和酶制剂，投入水体后成为细菌很好的培养基，在短时间内，有害菌快速繁殖，造成水体有害菌超标，给水生动物造成危害。
C)饲料指标测试：
将实施例5-8制备而成的饲料成品，进行饲料指标测试，同时设置市售普通粉状发酵饲料(南通巴大(通威控股)生物科技有限公司的虾多宝)和颗粒型饲料(南通巴大(通威控股)生物科技有限公司的南美白对虾颗粒饲料虾肝强)进行对照试验。
检测指标：总菌数含量、乳酸、pH值、可溶蛋白和小肽含量：
检测方法和计算方法：
I)总菌数含量的测定：采用平板计数法进行。
II)乳酸含量测定：
(1)取发酵后鲜样品15g置于150mL烧杯中加入溶于100mL去离子水，在磁力搅拌器上浸提30min；
(2)取部分浸提样离心10min(3000r/min)；
(3)取上清液15mL,加30mL去离子水稀释(以消除底色的影响)，加酚酞指示剂四滴，用0.1molNaOH标准溶液滴定，并记录到终点消耗NaOH体积。(终点到溶液呈现粉红)
(4)计算：乳酸(％)＝N(NaOH)×V(NaOH)×0.09008/15×115/15g N(NaOH):NaOH标准溶液的浓度；V(NaOH)：消耗NaOH标准溶液体积；0.09008：乳酸的毫克当量。
III)pH值的测定：称取样品10g于50mL的烧杯中，移取15mL去离子水，搅拌30min，用pHS-3C型pH计测定溶液的pH值或者用精密pH试纸测试。
IV)可溶蛋白含量测定：根据AOCSBa11-65测定蛋白质溶解指数的方法：称取20g样品于300mL的匀浆杯中、量取50mL 37+1℃的去离子水于匀浆杯中，将匀浆杯放在37℃的水浴中，浸泡搅拌5min，在内切式组织匀浆机上匀浆10min，从匀浆杯中取出浆液移入600mL烧杯中，待浆液分层后，移出40mL上清液注入50mL离心管中，并在2700r/min的转速下离心10min，移取15mL上清液于凯氏烧瓶中，测定上清液中蛋白质含量和样品总蛋白含量，计算溶解可溶性蛋白质的数量。
V)小肽含量的测定：采用三氯乙酸(TCA)法，利用大分子的蛋白质在TCA溶液中沉淀，除去酸不溶蛋白质，然后测定酸溶蛋白含量。国外大量资料表明在蛋白质酶水解的研究中测定水解度，通常在酶解液中加入TCA溶液，是为水解的大分子蛋白质沉淀，而与小分子的酸溶蛋白成分，即肽类和FAA离开，测定酸溶蛋白占总蛋白的含量，求得水解度，即酸溶蛋白占总蛋白的百分比。
测试结果：请参加表3所示。
表3：实施例5-8以及对比例饲料指标测试对比
从表3可以看出，本发明制备的湿性颗粒微生物发酵饲料与常规颗粒料以及发酵粉料相比，含有大量的有益菌，有益菌被水生动物采食后进入消化系统占据优势，抑制有害菌的生长让水生动物的肠道更健康，湿性颗粒微生物发酵饲料通过前期的发酵处理，饲料中的部分蛋白质被分解为小肽，有益菌在繁殖过程中产生大量的乳酸，降低肠道酸碱度，提高了饲料的消化利用率。湿性颗粒微生物发酵饲料与发酵粉料相比，能够很快被水生生物采食，进入肠道，改善水生动物的肠道，提高饲料的消化吸收率，降低氨氮的排放。排泄物中含有大量的有益菌，可以很好的改善水体。而发酵粉料，在水体中只能作为一种水质改良剂使用。而湿性颗粒微生物发酵饲料，既可以吃也可以改善水质。
D)养殖指标测试：
本测试目的在于研究采用本发明的湿性微生物发酵颗粒饲料对水生动物养殖过程中生长指标的影响和对养殖水质的影响。
试验对象：实施例5-8制备而成的饲料成品，同时设置对比例1：市售普通粉状发酵饲料(南通巴大(通威控股)生物科技有限公司的虾多宝)
对比例2：颗粒型饲料(南通巴大(通威控股)生物科技有限公司的南美白对虾颗粒饲料虾肝强)进行对照试验；
试验地点：南通如东环农南美白对虾小棚养殖场进行养殖试验，每个养殖水体450立方水体，共计10个水体，分为5组，每组2个水体，放养情况以及投喂比例见表4：
表4虾苗放养情况及发酵饲料投喂比例
试验结果：对虾生长情况如表5所示：
表5凡纳滨对虾体长、体重增长情况
整个实施过程中，可以观察到，实施例5-8组虾体色透明，肝胰脏轮廓清晰,颜色红褐色，肠道饱满且粪便长度基本一致。而市售对比例1虾体颜色较深,部分体色微红,黑色斑点较多,肝胰脏轮廓清晰,体积偏大,颜色偏红,肠道较细且粪便长度不一致且颜色深。市售对比例2虾体颜色较透明,部分体色微红,甲壳上黑色斑点较多,肠道较细且粪便长度不一致且颜色深。
另外从表5可以看出，本发明实施例对虾生长速度要明显高于市售对比例1和市售对比例2。特别是养殖实验的后半段(30-56d),本发明实施例组虾苗平均体长、体重增长达到0.16cm/d、0.26g/d，至时实验结束时,实施例组虾平均体重达到9.1-9.6g/尾(52-54尾/斤,而市售对比例1、2虾体重为8.0-8.3g/尾(60-62尾/斤)。
饵料效率请参照表6数据：
表6饵料系数
组别 对虾收获量(Kg) 总投喂量(Kg) 饵料效率
实施例5 751 653 115
实施例6 740 635 116
实施例7 728 635 114
实施例8 747 650 115
市售对比例1 637 640 99
市售对比例2 650 625 104
从表6可以看出,实施例组饵料效率达到114—116％；而市售对比例1、2饵料效率为99—104％。
此外还进行了池塘水质测试，数据如表7所示：
表7池塘水质变化情况
从表7可以看出，实施例组池塘在整个养殖过程中水质相对比较稳定，尤其对对虾养殖危害较大的蓝藻没有爆发，主要原因是饲料中添加了植酸酶，降低了饲料中无机磷的含量，继而减少了粪便中磷的含量，并且饲料中含有的大量有益菌，进入水体消耗大量的有机质，使养殖水体达到菌藻平衡。市售对比例1和市售对比例2，都在养殖后期爆发了蓝藻，市售对比例1爆发的更厉害一些，在调节水质过程中，市售对比例1和市售对比例2使用了更多的水质改良产品维持水环境的稳定。
应当指出，以上具体实施方式仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。

Claims (8)

1.一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料，其特征在于发酵饲料为颗粒状，其粒径为0.3mm-6.0mm，以质量计算包括5-7份的饲料组分一、3-5份的饲料组分二以及0.02-0.05份的饲料组分三；
其中所述饲料组分一中各原料质量百分比如下：花生粕20％-40％，豆粕30％-50％，菜粕5％-10％，猪肉粉0-7％，血粉2％-6％，米糠6％-10％；
所述饲料组分二中各原料质量百分比如下：磷虾粉2％-6％，乌贼膏6％-10％，高筋面粉60％-80％，磷酸二氢钙1％-2％，食盐0.5-1％，沸石粉5％-14％；
所述饲料组分三中各原料质量百分比如下：葡萄糖氧化酶20％-50％、中性蛋白酶30％-60％、植酸酶20％-40％。
2.根据权利要求1所述的用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料，其特征在于：所述高筋面粉以质量计算占所述发酵饲料总质量的比例超过30％。
3.根据权利要求1所述的用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料，其特征在于：所述发酵饲料的水分含量为25％-45％。
4.如权利要求1所述的一种用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
1)称量：按配方规定份数称量洁净的各发酵饲料组分中的制备原料；
2)前处理：
2-A)混合：将三种发酵饲料组分进行分开混合处理；
其中饲料组分一采用单轴浆叶式混合机在室温下进行混合，混合程度为物料的变异系数小于5％；然后输送至水滴式粉碎机进行粉碎，粉碎粒径为50-60目备用；
饲料组分二采用卧式双轴浆叶式混合机进行混合备用；
饲料组分三采用鼓式混合机进行混合备用；
2-B)超微粉碎：按比例称取粉碎后的饲料组分一和饲料组分二投入卧式双轴浆叶式混合机在室温下进行混合；混合均匀后投入超微粉料仓用立轴式超微粉碎机粉碎，粉碎粒度达到100目以上，得到由饲料组分一和饲料组分二组成的混合原料A；
3)膨化处理：将步骤2)得到的混合原料A投入膨化处理设备进行膨化处理：采用湿法膨胀法，控制膨化温度为125-138℃,压力为34-37个大气压，水分控制在20％-25％；膨化后的饲料水分为16％-20％，温度在75-85℃，冷却至35-40℃备用；
4)发酵处理：
4-A)接种发酵菌液的配制：分别配制枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、植物乳杆菌三种发酵菌液；按照菌液体积的比例；其中以体积计将30％-50％的枯草芽孢杆菌菌液，20％-30％的产朊假丝酵母菌液；30％-50％的植物乳杆菌菌液在发酵罐中混合均匀得混合发酵菌液；将步骤2)中混合备用的饲料组分三按照所需比例加入混合发酵菌液中，搅拌均匀得到接种发酵菌液；
4-B)混合接种：将步骤3)膨化后冷却备用的混合原料A投入到犁式混合机，步骤4-A)制得的接种发酵菌液按照混合原料A质量的5％-15％的比例喷雾接种至犁式混合机中的混合物料A上得饲料半成品；
5)冷制粒：将步骤4)发酵处理后的饲料半成品，投入制粒设备中制粒；室温处理；压缩比为21-25；
6)包装：制粒后的湿性颗粒采用单向透气阀包装袋进行包装，制粒后的饲料的水分含量在25％-45％之间，包装后置于28-32℃的恒温发酵车间内发酵三天即得。
5.根据权利要求1所述的用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于：步骤4-A)中的枯草芽孢杆菌菌液配制的培养基成分及以质量计算的配比为：玉米浆5％、糖蜜2％、葡萄糖1.5％、余量的水；pH为7.14-7.34；枯草芽孢杆菌菌种培养基总质量的2％。
6.根据权利要求1所述的用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于：步骤4-A)中的产朊假丝酵母菌液配制的培养基成分及以质量计算的配比为：玉米浆0.5％、糖蜜0.5％、葡萄糖2.0％、KH2P04 0.1％、(NH4)2SO4 1％、余量的水，pH为6.0-6.5；产朊假丝酵母菌种接种量为培养基总质量的2％。
7.根据权利要求1所述的用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于：步骤4-A)中的植物乳杆菌菌液配制的培养基成分及配比为：牛肉膏0.6％、糖蜜0.8％、磷酸二氢钾0.2％、柠檬酸三铵0.2％、吐温80 0.1％、余量的水；pH为6.1-6.3；植物乳杆菌菌种接种量为培养基总质量的2％，其中除吐温80的百分比以体积计算，其他成分的百分比以质量计算。
8.根据权利要求1所述的用于水产动物的湿性颗粒微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于：步骤5)中所述制粒设备采用不锈钢环模制粒设备，压辊为细齿；电机功率主电机为六级。
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