CN108125975A - 野漆树苷在制备抗微小隐孢子虫药物中的应用 - Google Patents

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吴彩艳
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胡俊菁
于林增
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Abstract

本发明公开了野漆树苷及其药学上可接受的衍生物在制备抗微小隐孢子虫药物中的应用。将野漆树苷与可接受的辅料，制成散剂，添加至饲料中，混匀，按日常饲料量喂食小鼠；或将野漆树苷制成野漆树苷水溶性粉剂，溶于水中，按日常饮水量喂食小鼠，使得小鼠中微小隐孢子虫感染后的卵囊数减少70％以上。该实验证实野漆树苷具有较好的抗微小隐孢子虫的作用。同时，野漆树苷易于制备，提取成本相对较低，易于开发为低成本的抗微小隐孢子虫药物或饲料添加剂。

Description

野漆树苷在制备抗微小隐孢子虫药物中的应用
技术领域
本发明涉及一类化合物的新应用，特别涉及野漆树苷在制备抗微小隐孢子虫药物中的应用。
背景技术
微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)可引起人和动物发生严重水样腹泻的隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)。呈世界性分布，主要通过粪-口途径经水源、空气、食物等传播，以胃肠黏膜上皮细胞损伤性腹泻为典型临床症状，引起低龄动物生产性能下降或死亡，对于婴幼儿和免疫缺陷患者可致慢性、致死性疾病。目前该病已被列为世界最常见的六种腹泻疾病之一，由隐孢子虫感染引起的儿童腹泻已经成为仅次于轮状病毒感染的第二大腹泻病因，也是引发1-2岁婴幼儿感染死亡的主要原因。同时，隐孢子虫感染对艾滋病患者的致死率高达61％左右，亦是诱发艾滋病病人死亡的重要因素之一。微小隐孢子虫感染性卵囊对于公共饮用水源常用的氯化物类消毒剂都具备很强的抵抗能力，在最严重的一次由于饮水污染隐孢子虫卵囊而爆发的病例中，40多万人受感染，100人死亡。在我国江苏、浙江、安徽、福建、内蒙古、云南、四川及山东等省均已证实有该病存在。尽管隐孢子虫病给人和动物的健康所带来的危害已经达成全球共识，但目前尚未发现对其完全有效的药物。文献报道大蒜素、巴龙霉素治疗，有一定疗效。
野漆树苷(英文名：Rhoifolin)，该化合物的分子式是C27H30O14，分子量578.5318，CAS登录号：17306-46-6。野漆树苷主要来源于芸香科植物，如化橘红、山香圆及凤尾草等植物中的一种黄酮类成分。具有抗炎、抗氧化、抗癌、降血压和心率以及神经氨酸酶抑制作用等生物活性，具有较好的开发前景。研究报道野漆树苷能显著提高雷公藤甲素损伤的人系L02肝细胞存活率，能有效降低雷公藤甲素肝损伤模型血清AST、ALT水平，显著提高SOD、GST、GSH-Px水平，降低MDA水平，并能明显改善肝组织的病理学损伤。SOD、GST、GSH-Px等指标表明野漆树苷保肝机制与抗过氧化清除自由基，促进肝细胞的再生和修复有关。目前为止尚未有野漆树苷具有抗微小隐孢子虫作用的报导。
发明内容
本发明的目的在于野漆树苷在制备抗微小隐孢子虫药物中的应用。
本发明所采取的技术方案是：
野漆树苷及其药学上可接受的衍生物在制备抗微小隐孢子虫药物中的应用。
野漆树苷及其药学上可接受的衍生物在制备抗微小隐孢子虫卵囊药物中的应用。
野漆树苷及其药学上可接受的衍生物在制备饲料添加剂中的应用。
一种抗微小隐孢子虫的药物，该药物中含有野漆树苷或其药学上可接受的衍生物。
本发明的有益效果是：通过将野漆树苷与可接受的辅料，制成散剂，添加至饲料中，混匀，按日常饲料量喂食小鼠；或将野漆树苷制成野漆树苷水溶性粉剂，溶于水中，按日常饮水量喂食小鼠。动物感染实验证实添加野漆树苷具有较好的抗隐孢子虫的作用。同时，野漆树苷易于制备，提取成本相对较低，易于开发为低成本的抗微小隐孢子虫药物或饲料添加剂。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本说明作进一步的说明，但并不局限如此。
实施例1
野漆树苷散剂的制备：取3.2g野漆树苷(含量不低于98％)和96.8g淀粉混匀，即可。野漆树苷购自上海源叶生物技术有限公司，货号：B21484。
散剂的用法用量：将上述100g散剂拌入100kg饲料中，按日常食量喂食。
实施例2
野漆树苷水溶性粉剂的制备：取1.7g野漆树苷(含量不低于98％)和98.3g葡萄糖混匀，即可。
水溶性粉剂的用法用量：将上述100g粉剂溶于100升水中，按正常饮水量喂食。
下面结合具体的实验说明野漆树苷的抗微小隐孢子虫实验。
实验材料：
对照药物：文献报道的具有抗微小隐孢子虫效果的巴龙霉素(98％，上海源叶生物技术有限公司，货号B25850)，使用量为5mg/kg体重。
野漆树苷：实施例1的野漆树苷散剂，实施例2的野漆树苷水溶性粉剂。
微小隐孢子虫卵囊：微小隐孢子虫(C.parvum)卵囊，由广东省农业科学院动物卫生研究所保存，使用前在免疫抑制的清洁级小鼠体内复壮(清洁级小鼠购于南方医科大学实验动物中心，品种：KM鼠)。
小鼠：清洁级小鼠，6周龄，雄性；由南方医科大学实验动物中心提供，饲养于已消毒的专用动物房内；鼠笼和所用器皿均严格消毒，自由采食和饮用纯净水。试验前观察小鼠有无临床症状及连续3d检查粪便有无隐孢子虫卵囊，备用。
饲料：由南方医科大学实验动物中心提供专用鼠料，不含任何抗隐孢子虫药物。
实验方法：
分组：按试验分组及处理将50只清洁级小鼠，随机分成5组，每组10只，并适当调整使每组小鼠总体重大致相等。
处理：除第I(空白对照)组外，其余各组小鼠均经口灌服微小隐孢子虫卵囊l×105个/只；除第I组和第Ⅱ(阳性对照)组外，其余各组小鼠均于感染后立即饲喂或饮用含抗隐孢子虫药物的饲料或水，第Ⅲ组饲喂含巴龙霉素的饲料，第Ⅳ组饲喂实施例1的野漆树苷散剂与饲料制成的野漆树苷拌料，第Ⅴ组饮用实施例2的野漆树苷水溶性粉剂与饮水制成的野漆树苷饮水，各组饮水和饲料的用量均相同。试验小鼠的分组情况见表1。
表1试验小鼠分组
每天观察并记录小鼠的精神状况、粪便情况等；对死亡小鼠称重，剖检。
药效判定方法主要依据感染后卵囊减少率；如下进行：感染后第3天开始每日收集粪便，连续监测15天。每日取粪便淘洗，分别用60目,80目,100目网筛过滤，滤液经3000r/min离心10min，弃上清加15mL饱和蔗糖溶液，摇匀，3000/min离心10min；离心后立即小心吸取上清液10uL于血细胞计数板上，显微镜(10×40倍)观察卵囊并计数。
实验结果：
临床症状观察：
接种微小隐孢子虫卵囊的对照组第3天，小鼠出现精神沉郁，被毛粗乱，第5天起腹泻症状明显，期间未见小鼠死亡。
分别计算各组的平均每只小鼠排卵囊数及卵囊减少率，结果见表2所示。由表2可知，第Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组的平均每只小鼠排卵囊数均低于第Ⅱ组，第Ⅳ、Ⅴ组的平均每只小鼠排卵囊数明显低于第Ⅲ组，故实验证实野漆树苷可使微小隐孢子虫感染后的卵囊数减70％以上，饮水组效果好于饲料添加组，具有较好的抗微小隐孢子虫作用，且明显优于巴龙霉素。
表2各组抗隐孢子虫效果

Claims (4)

1.野漆树苷及其药学上可接受的衍生物在制备抗微小隐孢子虫药物中的应用。
2.野漆树苷及其药学上可接受的衍生物在制备抗微小隐孢子虫卵囊药物中的应用。
3.野漆树苷及其药学上可接受的衍生物在制备饲料添加剂中的应用。
4.一种抗微小隐孢子虫的药物，其特征在于，所述药物中含有野漆树苷或其药学上可接受的衍生物。
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