CN107619790A - 一种玉木耳的液体菌种培养基、液体菌种及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种玉木耳的液体菌种培养基、液体菌种及其制备方法，其中，液体菌种培养基包括以下按照质量份数的原料：梨渣40‑50份、鱼粉15‑25份、酵母粉10‑20份、蛋白胨5‑10份、磷酸二氢钾0.8‑1.3份、碳酸钙0.5‑1份、硫酸锌0.2‑0.4份、氯化镁0.3‑0.8份、维生素B1 0.05‑0.1份、氧化镧0.005‑0.01、氯化铈0.01‑0.05份和水1200‑1500份。通过铈离子和镧离子对钙离子、镁离子、锌离子等金属离子的置换与竞争影响一些生物酶或生物大分子的生理功能。因此，以该液体菌种培养基制备的液体菌种，可促进玉木耳菌种生长，提供菌种活力，改善菌种品质。

Description

一种玉木耳的液体菌种培养基、液体菌种及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物工程领域，尤其涉及一种玉木耳的液体菌种培养基、液体菌种及其制备方法。

背景技术

玉木耳是由人工选育的木耳新品种。其产量是黑木耳的两倍左右，是替代黑木耳的一种珍贵食用菌，在玉木耳的生产过程中所用的菌种有固体菌种和液体菌种。由于固体菌种从接种到菌丝长满瓶，一般需要35-40天，固体菌种往往是瓶底的菌丝刚萌动，其表层菌丝就已老化，因此长出的玉木耳参差不齐。而采用液体菌种具有生产周期短、流动性好、生命力旺盛等诸多优势，是食用菌产业发展技术革新的趋势。

由于液体菌种主要依靠吸收液体培养基的养分来进行生长，但是由于培养基配方不合理，存在着玉木耳生长不适应而导致的液体菌种制备成功率低的问题。因此，合理配置玉木耳液体菌种的培养基，是得到生长状况良好，产量较高的玉木耳的关键所在。

发明内容

针对上述问题，本发明提供一种玉木耳的液体菌种培养基、液体菌种及其制备方法。

第一方面，本发明提供了一种玉木耳的液体菌种培养基，包括以下按照质量份数的原料：梨渣40-50份、鱼粉15-25份、酵母粉10-20份、蛋白胨5-10份、磷酸二氢钾0.8-1.3份、碳酸钙0.5-1份、硫酸锌0.2-0.4份、氯化镁0.3-0.8份、维生素B1 0.05-0.1份、氧化镧0.005-0.01、氯化铈0.01-0.05份和水 1200-1500份。

优选地，还包括质量份数为0.001-0.005份的γ-聚谷氨酸，γ-聚谷氨酸的平均分子量为5 - 200KDa。

优选地，γ-聚谷氨酸与氯化铈的质量比为1:10。

可选地，各原料的重量份数为：梨渣45份、鱼粉20份、酵母粉15份、蛋白胨7份、磷酸二氢钾1份、碳酸钙0.8份、硫酸锌0.3份、氯化镁0.5份、维生素B1 0.07份、氧化镧0.008、氯化铈0.03份、γ-聚谷氨酸 0.003份和水 1400份。

第二方面，本发明提供了一种如第一方面的培养基的制备方法，将所有原料混合均匀，调节pH至5-6.5，得到培养基。

第三方面，本发明提供了一种玉木耳的液体菌种的制备方法，包括以下步骤：

（1）培养基制备，以权利要求5所述的制备方法制备得到培养基。

（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15Mpa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。

（3）菌种接种，将重量份数为2-4份的玉木耳菌种接入无菌培养基，得到接种培养基；

（4）液体菌种培养，将接种培养基置于22-32℃的摇床中培养8-15d，得到液体菌种。

第四方面，本发明提供了一种第三方面的制备方法制备得到的玉木耳的液体菌种。

本发明在玉木耳的液体菌种培养基中加入氧化镧和氯化铈，引入稀土元素，通过铈离子和镧离子对钙离子、镁离子、锌离子等金属离子的置换与竞争影响一些生物酶或生物大分子的生理功能。因此，通过该液体菌种培养基制备的液体菌种，可促进玉木耳菌种生长，提供菌种活力，改善菌种品质。以本发明制备的液体菌种培养得到的玉木耳，品质优良且成活率高。另外，本发明还提供了添加γ-聚谷氨酸的液体菌种培养基，γ-聚谷氨酸与稀土元素起到协同增效的作用，缓慢释放营养元素，防止营养流失，保持菌丝对营养的吸收。进一步提高液体菌种的品质和成活率。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受下述实施例的限制。

实施例1

一种玉木耳的液体菌种培养基，由以下制备方法制备而成：准确称取以下质量份数的原料：梨渣45份、鱼粉20份、酵母粉15份、蛋白胨7份、磷酸二氢钾1份、碳酸钙0.8份、硫酸锌0.3份、氯化镁0.5份、维生素B1 0.07份、氧化镧0.008、氯化铈0.03份和水 1400份。将所有原料混合均匀，调节pH至5-6.5，得到培养基。

实施例2

另一种玉木耳的液体菌种培养基，由以下制备方法制备而成：准确称取以下质量份数的原料：梨渣45份、鱼粉20份、酵母粉15份、蛋白胨7份、磷酸二氢钾1份、碳酸钙0.8份、硫酸锌0.3份、氯化镁0.5份、维生素B1 0.07份、氧化镧0.005、氯化铈0.03份、γ-聚谷氨酸0.003份和水 1400份。将所有原料混合均匀，调节pH至5-6.5，得到培养基。

其中，所选用的γ-聚谷氨酸的平均分子量为5 - 200KDa。

实施例3

又一种玉木耳的液体菌种培养基，由以下制备方法制备而成：准确称取以下质量份数的原料：梨渣40份、鱼粉15份、酵母粉10份、蛋白胨5份、磷酸二氢钾0.8份、碳酸钙0.5份、硫酸锌0.2份、氯化镁0.3份、维生素B1 0.05份、氧化镧0.005、氯化铈0.01份、γ-聚谷氨酸0.001份和水 1500份。将所有原料混合均匀，调节pH至5-6.5，得到培养基。

其中，所选用的γ-聚谷氨酸的平均分子量为5 - 200KDa。

实施例4

再一种玉木耳的液体菌种培养基，由以下制备方法制备而成：准确称取以下质量份数的原料：梨渣50份、鱼粉25份、酵母粉20份、蛋白胨10份、磷酸二氢钾1.3份、碳酸钙1份、硫酸锌0.4份、氯化镁0.8份、维生素B1 0.1份、氧化镧0.01、氯化铈0.05份、γ-聚谷氨酸 0.005份和水 1200份。将所有原料混合均匀，调节pH至5-6.5，得到培养基。

其中，所选用的γ-聚谷氨酸的平均分子量为5 - 200KDa。

实施例5

一种玉木耳的液体菌种，由以下制备方法制备而成：

（1）培养基制备，选用实施例1所提供的培养基。

（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15Mpa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。

（3）菌种接种，将重量份数为3份的玉木耳菌种接入无菌培养基，得到接种培养基。

（4）液体菌种培养，将接种培养基置于28℃左右的摇床中培养12d，待接种培养基中长满菌丝，即得到液体菌种，可进行下一步玉木耳的接种栽培。

实施例6

另一种玉木耳液体菌种，由以下制备方法制备而成：

（1）培养基制备，选用实施例2所提供的培养基。

（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15Mpa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。

（3）菌种接种，将重量份数为3份的玉木耳菌种接入无菌培养基，得到接种培养基。

（4）液体菌种培养，将接种培养基置于28℃左右的摇床中培养12d，待接种培养基中长满菌丝，即得到液体菌种，可进行下一步玉木耳的接种栽培。

实施例7

又一种玉木耳液体菌种，由以下制备方法制备而成：

（1）培养基制备，选用实施例3所提供的培养基。

（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15Mpa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。

（3）菌种接种，将重量份数为2份的玉木耳菌种接入无菌培养基，得到接种培养基。

（4）液体菌种培养，将接种培养基置于22℃左右的摇床中培养15d，待接种培养基中长满菌丝，即得到液体菌种，可进行下一步玉木耳的接种栽培。

实施例8

又一种玉木耳液体菌种，由以下制备方法制备而成：

（1）培养基制备，选用实施例4所提供的培养基。

（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15Mpa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。

（3）菌种接种，将重量份数为4份的玉木耳菌种接入无菌培养基，得到接种培养基。

（4）液体菌种培养，将接种培养基置于32℃左右的摇床中培养8d，待接种培养基中长满菌丝，即得到液体菌种，可进行下一步玉木耳的接种栽培。

对比例1

一种玉木耳的液体菌种，由以下制备方法制备而成：

（1）培养基制备，实施例1中培养基原料的基础上，去掉氧化镧和氯化铈，制备培养基。

（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15Mpa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。

（3）菌种接种，将重量份数为4份的玉木耳菌种接入无菌培养基，得到接种培养基。

（4）液体菌种培养，将接种培养基置于32℃左右的摇床中培养8d，待接种培养基中长满菌丝，即得到液体菌种，可进行下一步玉木耳的接种栽培。

对比例2

一种玉木耳的液体菌种，由以下制备方法制备而成：

（1）培养基制备，实施例1中培养基原料的基础上，去掉氧化镧，制备培养基。

（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15Mpa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。

（3）菌种接种，将重量份数为4份的玉木耳菌种接入无菌培养基，得到接种培养基。

（4）液体菌种培养，将接种培养基置于32℃左右的摇床中培养8d，待接种培养基中长满菌丝，即得到液体菌种，可进行下一步玉木耳的接种栽培。

本发明制备的液体菌种菌丝浓度适中，不易成球或成团，便于后续的接种栽培。将实施例5-8和对比例得到的玉木耳液体菌种接种于装有栽培培养基的生产瓶（500ml）中，进行栽培培养，其中，栽培培养基中包括以下质量份数的原料：木屑78份、麸皮20份、石膏1份、葡萄糖1份和尿素0.5份。其中，栽培培养基的含水量为55%-60%，pH为6.0-6.6。待菌丝长满生产瓶并且成熟后，采用搔菌刀搔菌，待玉木耳成熟后，采收。将以实施例5-8得到的玉木耳的液体菌种栽培得到的玉木耳进行检测，其砷、汞、铅等重金属含量均符合GB7096-2014中的规定（食品安全国家标准食用菌及其制品）。

表1 玉木耳栽培效果

通过表1中对比例和本发明实施例的对比可知，氧化镧和氯化铈的加入可促进玉木耳菌种的生长，缩短生长周期，提高成活率。通过表1中对比例2和本发明实施例的对比可知，氯化铈和氧化镧同时加入会起到协同增效的作用，提高玉木耳菌种的生长，缩短生长周期，提高成活率。通过实施例5和实施例6的对比可知，γ-聚谷氨酸的加入可在一定程度上进一步提高玉木耳菌种的生长，缩短生长周期，提高成活率。

Claims (7)

1.一种玉木耳的液体菌种培养基，其特征在于，包括以下按照质量份数的原料：梨渣40-50份、鱼粉15-25份、酵母粉10-20份、蛋白胨5-10份、磷酸二氢钾0.8-1.3份、碳酸钙0.5-1份、硫酸锌0.2-0.4份、氯化镁0.3-0.8份、维生素B1 0.05-0.1份、氧化镧0.005-0.01、氯化铈0.01-0.05份和水 1200-1500份。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，还包括质量份数为0.001-0.005份的γ-聚谷氨酸，γ-聚谷氨酸的平均分子量为5 - 200KDa。

3.根据权利要求2所述的培养基，其特征在于，γ-聚谷氨酸与氯化铈的质量比为1:10。

4.根据权利要求3所述的培养基，其特征在于，各原料的重量份数为：梨渣45份、鱼粉20份、酵母粉15份、蛋白胨7份、磷酸二氢钾1份、碳酸钙0.8份、硫酸锌0.3份、氯化镁0.5份、维生素B1 0.07份、氧化镧0.008、氯化铈0.03份、γ-聚谷氨酸 0.003份和水 1400份。

5.一种如权利要求1-4任一项所述的培养基的制备方法，其特征在于，将所有原料混合均匀，调节pH至5-6.5，得到培养基。

6.一种玉木耳的液体菌种的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）培养基制备，以权利要求5所述的制备方法制备得到培养基；

（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15Mpa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基；

（3）菌种接种，将重量份数为2-4份的玉木耳菌种接入无菌培养基，得到接种培养基；

（4）液体菌种培养，将接种培养基置于22-32℃的摇床中培养8-15d，得到液体菌种。

7.一种如权利要求6所述的制备方法制备得到的玉木耳的液体菌种。