CN107619791A - 一种白灵菇的液体菌种培养基、液体菌种及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种白灵菇的液体菌种培养基、液体菌种及其制备方法，其中，液体菌种培养基包括以下按照质量份数的原料：麦麸30‑40份、蔗糖30‑40份、酵母粉20‑30份、蛋白胨10‑20份、磷酸二氢钾1.5‑2份、碳酸钙1‑1.5份、硫酸锌0.5‑1份、氯化镁0.2‑0.5份、维生素B1 0.05‑0.1份、氯化铈0.02‑0.05、氧化镧0.05‑0.08份和水1000‑1200份。通过镧离子对钙离子、镁离子、锌离子等金属离子的置换与竞争影响一些生物酶或生物大分子的生理功能。因此，以该液体菌种培养基制备的液体菌种，可促进白灵菇菌种生长，提供菌种活力，改善菌种品质。
Description
技术领域
本发明涉及生物工程领域，尤其涉及一种白灵菇的液体菌种培养基、液体菌种及其制备方法。
背景技术
白灵菇肉质细嫩，味美可口，含有丰富的蛋白质、脂肪、碳水化合物等多种营养成分，具有较高的食用价值，长期食用能增强人体的免疫功能，被誉为“草原上的牛肝菌”，颇受消费者的青睐。在白灵菇的生产过程中所用的菌种有固体菌种和液体菌种。由于固体菌种从接种到菌丝长满瓶，一般需要40-50天，固体菌种往往是瓶底的菌丝刚萌动，其表层菌丝就已老化，因此长出的白灵菇参差不齐。而采用液体菌种具有生产周期短、流动性好、生命力旺盛等诸多优势，是食用菌产业发展技术革新的趋势。
由于液体菌种主要依靠吸收液体培养基的养分来进行生长，但是由于培养基配方不合理，存在着白灵菇生长不适应而导致的液体菌种制备成功率低的问题。因此，合理配置白灵菇液体菌种的培养基，是得到生长状况良好，产量较高的白灵菇的关键所在。
发明内容
针对上述问题，本发明提供一种白灵菇的液体菌种培养基、液体菌种及其制备方法。
第一方面，本发明提供了一种白灵菇的液体菌种培养基，包括以下按照质量份数的原料：麦麸30-40份、蔗糖30-40份、酵母粉20-30份、蛋白胨10-20份、磷酸二氢钾1.5-2份、碳酸钙1-1.5份、硫酸锌0.5-1份、氯化镁0.2-0.5份、维生素B1 0.05-0.1份、氯化铈0.02-0.05、氧化镧0.05-0.08份和水 1000-1200份。
可选地，还包括质量份数为0.005-0.008份的γ-聚谷氨酸，γ-聚谷氨酸的平均分子量为5 - 200KDa。
可选地，γ-聚谷氨酸与氧化镧的质量比为1:10。
可选地，各原料的重量份数为：麦麸35份、蔗糖35份、酵母粉25份、蛋白胨15份、磷酸二氢钾1.8份、碳酸钙1.2份、硫酸锌0.8份、氯化镁0.3份、维生素B1 0.07份、氯化铈0.03、氧化镧0.06份、γ-聚谷氨酸 0.006份和水 1100份。
第二方面，本发明提供了一种如第一方面的培养基的制备方法，将所有原料混合均匀，调节pH至6-7，得到培养基。
第三方面，本发明提供了一种白灵菇的液体菌种的制备方法，包括以下步骤：
（1）培养基制备，以权利要求5所述的制备方法制备得到培养基；
（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15MPa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基；
（3）菌种接种，将重量份数为4-6份的白灵菇菌种接入无菌培养基，得到接种培养基；
（4）液体菌种培养，将接种培养基置于22-32℃的摇床中培养8-15d，得到液体菌种。
第四方面，本发明提供了一种第三方面的制备方法制备得到的白灵菇的液体菌种。
本发明在白灵菇的液体菌种培养基中加入氯化铈和氧化镧，引入稀土元素，通过铈离子和镧离子对钙离子、镁离子、锌离子等金属离子的置换与竞争影响一些生物酶或生物大分子的生理功能。因此，通过该液体菌种培养基制备的液体菌种，可促进白灵菇菌种生长，提供菌种活力，改善菌种品质。以本发明制备的液体菌种培养得到的白灵菇，品质优良且成活率高。另外，本发明还提供了添加γ-聚谷氨酸的液体菌种培养基，γ-聚谷氨酸与稀土元素起到协同增效的作用，缓慢释放营养元素，防止营养流失，保持菌丝对营养的吸收。进一步提高液体菌种的品质和成活率。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受下述实施例的限制。
实施例1
一种白灵菇的液体菌种培养基，由以下制备方法制备而成：准确称取以下质量份数的原料：麦麸35份、蔗糖35份、酵母粉25份、蛋白胨15份、磷酸二氢钾1.8份、碳酸钙1.2份、硫酸锌0.8份、氯化镁0.3份、维生素B1 0.07份、氯化铈0.03、氧化镧0.06份和水 1100份。将所有原料混合均匀，调节pH至6-7，得到培养基。
实施例2
另一种白灵菇的液体菌种培养基，由以下制备方法制备而成：准确称取以下质量份数的原料：麦麸35份、蔗糖35份、酵母粉25份、蛋白胨15份、磷酸二氢钾1.8份、碳酸钙1.2份、硫酸锌0.8份、氯化镁0.3份、维生素B1 0.07份、氯化铈0.03、氧化镧0.06份、γ-聚谷氨酸0.006份和水 1100份。将所有原料混合均匀，调节pH至6-7，得到培养基。
其中，所选用的γ-聚谷氨酸的平均分子量为5 - 200KDa。
实施例3
又一种白灵菇的液体菌种培养基，由以下制备方法制备而成：准确称取以下质量份数的原料：麦麸30份、蔗糖30份、酵母粉20份、蛋白胨10份、磷酸二氢钾1.5份、碳酸钙1份、硫酸锌0.5份、氯化镁0.2份、维生素B1 0.05份、氯化铈0.02、氧化镧0.05份、γ-聚谷氨酸 0.005份和水 1200份。将所有原料混合均匀，调节pH至6-7，得到培养基。
其中，所选用的γ-聚谷氨酸的平均分子量为5 - 200KDa。
实施例4
再一种白灵菇的液体菌种培养基，由以下制备方法制备而成：准确称取以下质量份数的原料：麦麸40份、蔗糖40份、酵母粉30份、蛋白胨20份、磷酸二氢钾2份、碳酸钙1.5份、硫酸锌1份、氯化镁0.5份、维生素B1 0.1份、氯化铈0.05、氧化镧0.08份、γ-聚谷氨酸 0.008份和水 1000份。将所有原料混合均匀，调节pH至6-7，得到培养基。
其中，所选用的γ-聚谷氨酸的平均分子量为5 - 200KDa。
实施例5
一种白灵菇的液体菌种，由以下制备方法制备而成：
（1）培养基制备，选用实施例1所提供的培养基。
（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15MPa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。
（3）菌种接种，将重量份数为5份的白灵菇菌种接入无菌培养基，得到接种培养基。
（4）液体菌种培养，将接种培养基置于28℃左右的摇床中培养12d，待接种培养基中长满菌丝，即得到液体菌种，可进行下一步白灵菇的接种栽培。
实施例6
另一种白灵菇液体菌种，由以下制备方法制备而成：
（1）培养基制备，选用实施例2所提供的培养基。
（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15MPa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。
（3）菌种接种，将重量份数为5份的白灵菇菌种接入无菌培养基，得到接种培养基。
（4）液体菌种培养，将接种培养基置于28℃左右的摇床中培养12d，待接种培养基中长满菌丝，即得到液体菌种，可进行下一步白灵菇的接种栽培。
实施例7
又一种白灵菇液体菌种，由以下制备方法制备而成：
（1）培养基制备，选用实施例3所提供的培养基。
（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15MPa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。
（3）菌种接种，将重量份数为4份的白灵菇菌种接入无菌培养基，得到接种培养基。
（4）液体菌种培养，将接种培养基置于22℃左右的摇床中培养15d，待接种培养基中长满菌丝，即得到液体菌种，可进行下一步白灵菇的接种栽培。
实施例8
又一种白灵菇液体菌种，由以下制备方法制备而成：
（1）培养基制备，选用实施例4所提供的培养基。
（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15MPa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。
（3）菌种接种，将重量份数为6份的白灵菇菌种接入无菌培养基，得到接种培养基。
（4）液体菌种培养，将接种培养基置于32℃左右的摇床中培养8d，待接种培养基中长满菌丝，即得到液体菌种，可进行下一步白灵菇的接种栽培。
对比例1
一种白灵菇的液体菌种，由以下制备方法制备而成：
（1）培养基制备，实施例1中培养基原料的基础上，去掉氯化铈和氧化镧，制备培养基。
（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15MPa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。
（3）菌种接种，将重量份数为5份的白灵菇菌种接入无菌培养基，得到接种培养基。
（4）液体菌种培养，将接种培养基置于32℃左右的摇床中培养8d，待接种培养基中长满菌丝，即得到液体菌种，可进行下一步白灵菇的接种栽培。
对比例2
（1）培养基制备，实施例1中培养基原料的基础上，去掉氯化铈，制备培养基。
（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15MPa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基。
（3）菌种接种，将重量份数为5份的白灵菇菌种接入无菌培养基，得到接种培养基。
（4）液体菌种培养，将接种培养基置于32℃左右的摇床中培养8d，待接种培养基中长满菌丝，即得到液体菌种，可进行下一步白灵菇的接种栽培。
本发明制备的液体菌种菌丝浓度适中，不易成球或成团，便于后续的接种栽培。将实施例5-8和对比例得到的白灵菇液体菌种接种于装有栽培培养基的生产瓶（500ml）中，进行栽培培养，其中，栽培培养基中包括以下质量份数的原料：木屑78份、麸皮20份、石膏1份、葡萄糖1份和尿素0.5份。其中，栽培培养基的含水量为55%-60%，pH为7-8。待菌丝长满生产瓶并且成熟后，采用搔菌刀搔菌，待白灵菇成熟后，采收。将以实施例5-8得到的白灵菇的液体菌种栽培得到的白灵菇进行检测，其砷、汞、铅等重金属含量均符合GB7096-2014中的规定（食品安全国家标准食用菌及其制品）。
表1 白灵菇栽培效果
通过表1中对比例1和本发明实施例的对比可知，氯化铈和氧化镧的加入可促进白灵菇菌种的生长，缩短生长周期，提高成活率。通过表1中对比例2和本发明实施例的对比可知，氯化铈和氧化镧同时加入会起到协同增效的作用，提高白灵菇菌种的生长，缩短生长周期，提高成活率。通过实施例5和实施例6的对比可知，γ-聚谷氨酸的加入可在一定程度上进一步提高白灵菇菌种的生长，缩短生长周期，提高成活率。
Claims (7)
1. 一种白灵菇的液体菌种培养基，其特征在于，包括以下按照质量份数的原料：麦麸30-40份、蔗糖30-40份、酵母粉20-30份、蛋白胨10-20份、磷酸二氢钾1.5-2份、碳酸钙1-1.5份、硫酸锌0.5-1份、氯化镁0.2-0.5份、维生素B1 0.05-0.1份、氯化铈0.02-0.05、氧化镧0.05-0.08份和水 1000-1200份。
2. 根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，还包括质量份数为0.005-0.008份的γ-聚谷氨酸，γ-聚谷氨酸的平均分子量为5 - 200KDa。
3.根据权利要求2所述的培养基，其特征在于，γ-聚谷氨酸与氧化镧的质量比为1:10。
4. 根据权利要求3所述的培养基，其特征在于，各原料的重量份数为：麦麸35份、蔗糖35份、酵母粉25份、蛋白胨15份、磷酸二氢钾1.8份、碳酸钙1.2份、硫酸锌0.8份、氯化镁0.3份、维生素B1 0.07份、氯化铈0.03、氧化镧0.06份、γ-聚谷氨酸 0.006份和水 1100份。
5.一种如权利要求1-4任一项所述的培养基的制备方法，其特征在于，将所有原料混合均匀，调节pH至6-7，得到培养基。
6.一种白灵菇的液体菌种的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）培养基制备，以权利要求5所述的制备方法制备得到培养基；
（2）培养基灭菌，将培养基分装于三角瓶内，每瓶250ml，用棉塞盖上，在120℃下用压力为0.1-0.15MPa 的高压蒸汽灭菌30min，然后置于30℃恒温培养箱培养24h，得到无菌培养基；
（3）菌种接种，将重量份数为4-6份的白灵菇菌种接入无菌培养基，得到接种培养基；
（4）液体菌种培养，将接种培养基置于22-32℃的摇床中培养8-15d，得到液体菌种。
7.一种如权利要求6所述的制备方法制备得到的白灵菇的液体菌种。
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| CN201710773558.7A CN107619791A (zh) | 2017-08-31 | 2017-08-31 | 一种白灵菇的液体菌种培养基、液体菌种及其制备方法 |
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| CN110129205A (zh) * | 2018-02-09 | 2019-08-16 | 鲁东大学 | 一种白灵菇液体菌种培养基及白灵菇液体菌种制备方法 |
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2017
- 2017-08-31 CN CN201710773558.7A patent/CN107619791A/zh not_active Withdrawn
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| CN110129205A (zh) * | 2018-02-09 | 2019-08-16 | 鲁东大学 | 一种白灵菇液体菌种培养基及白灵菇液体菌种制备方法 |
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