CN110452823A - 一种大球盖菇菌种的液体培养基及其制备方法 - Google Patents

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李维焕
刘克芳
李�杰
程显好
盖宇鹏
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor

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Abstract

本发明公开了一种大球盖菇菌种的液体培养基及其制备方法。该培养基包括下述重量份的原料：稻壳干料10～20份，马铃薯10～20份，葡萄糖10～20份，酵母浸膏10～20份，磷酸二氢钾10～20份，硫酸镁10～20份，玉米面1～4份。本发明配伍科学、使用安全且效果良好。

Description

一种大球盖菇菌种的液体培养基及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种大球盖菇菌种的液体培养基，属于菌种培养领域。
背景技术
大球盖菇（Stropharia rugosoannulata）别称酒红球盖菇、皱环球盖菇、赤松茸，属担子菌门（Basidomycota）层菌纲（Hymenomy-cetes）伞菌目（Agaricales）球盖菇（Strophariaceae）球 盖 菇 属（Stropharia），是国际菇类交易市场上十大菇类之一，也是联合国粮农组织（FAO）向发展中国家推荐栽培的特色食用菌之一。菇体色泽艳丽，腿粗盖肥，食味清香，肉质滑嫩、柄爽脆，营养丰富，口感极好。大球盖菇富含蛋白质、多糖、矿质元素、维生素等生物活性物质，氨基酸含量达 17 种，人体必需氨基酸齐全。大球盖菇含胆碱、菜碱、组胺、鸟嘌呤、胍和乙醇胺等多种生物胺，其中组胺、乙醇胺和胆碱含量较高。大球盖菇具有预防冠心病、助消化、疏解人体精神疲劳之功效，能治疗或改善人体多种疾病堪称是色鲜味美，具有“素中之荤”的全价营养保健食品。
但大球盖菇的制种却是一大难题。常规PSA培养基(马铃薯蔗糖培养基)，菌丝生长速度慢，菌丝稀疏、细弱。制作原种或栽培种时菌丝生长速度更慢，菌丝需要2～3个月甚至更长时间才能长满瓶或袋。
发明内容
为解决上述现有技术的不足，本发明提供一种配伍科学、使用安全且效果良好的大球盖菇菌种的液体培养基及其制备方法。
本发明一种大球盖菇菌种的液体培养基，所述培养基包括下述重量份的原料：稻壳干料10～20 份，马铃薯10～20份，玉米面1～4份。
进一步的，所述培养基还包括下述重量份的原料：葡萄糖10～20份，酵母浸膏10～20份，磷酸二氢钾10～20份，硫酸镁10～20份。
本发明还提供一种大球盖菇菌种的液体培养基的制备方法，所述方法步骤包括：
（1）按比例称取稻壳干料，用纯水浸水过夜，取稻壳浸出汁；
（2）按比例称取马铃薯去皮切块，加入步骤（1）所述稻壳浸出汁，煮沸15～20分钟，煮至马铃薯熟而不烂，用4～6层纱布过滤，取滤液；
（3）向步骤（2）所述滤液中加热至沸，再依次按比例加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、酵母浸膏、以及玉米面，煮沸即得所述液体培养基。
进一步的，步骤（1）所述稻壳干料和纯水的比例为100g:（1～2）L。
进一步的，步骤（2）所述马铃薯和所述稻壳浸出汁的比例为100g:（0.5～1）L。
有益效果：本申请培养基可有效降低生产成本、缩短生长周期、提高菌种质量，本申请为工业化生产大球盖菇菌丝体提供经济、适用、高效的培养基配方。
具体实施方式
实施例1
一种大球盖菇菌种的液体培养基，该培养基原料组成包括：稻壳干料200g，马铃薯200g，葡萄糖20g，酵母浸膏3g，硫酸镁1g，磷酸二氢钾1g，玉米面20g。
一种大球盖菇菌种的液体培养基的制备方法，该方法步骤包括：以1L液体培养基为例，称量200g的稻壳，提前一天用2L纯水浸水过夜，取稻壳浸出汁；将马铃薯去皮，称取200克切成小丁或者条状放入锅中，加稻壳浸出汁1000毫升，煮沸15～20分钟，煮至马铃薯熟而不烂，用4～6层纱布过滤，取滤液；向上述滤液依次加入葡萄糖20g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁1g，酵母浸膏3g，玉米面20g，保持煮成液体培养基容量为 1升，得培养基。
液体培养基制备好后，之后的栽培工艺采用标准的大球盖菇液体菌种工厂化栽培工艺。具体可如下：
用直径为5mm的无菌打孔器取4块生长最旺盛的平板菌落边缘菌丝块，在无菌条件下接入500m L三角瓶中，瓶中装液量为200m L，150r/min、23℃、避光条件下，培养8d，得液体菌种。
实施例2
一种大球盖菇菌种的液体培养基，该培养基原料组成同实施例1。不同之处仅在于，稻壳干料为100g，玉米面为10g。
上述培养基的制备方法同实施例1。
实施例3
一种大球盖菇菌种的液体培养基，该培养基原料组成同实施例1。不同之处仅在于，稻壳干料为100g。
上述培养基的制备方法同实施例1。
对比例1
一种大球盖菇菌种的液体培养基，该培养基原料组成同实施例1。不同之处仅在于，对比例1中不含稻壳干料和玉米面。
上述培养基的制备方法同实施例1。
对比例2
一种大球盖菇菌种的液体培养基，该培养基原料组成同实施例2。不同之处仅在于，对比例2中不含玉米面。
上述培养基的制备方法同实施例1。
对比例3
一种大球盖菇菌种的液体培养基，该培养基原料组成同实施例1。不同之处仅在于，对比例3中不含玉米面。
上述培养基的制备方法同实施例1。
对比例4
一种大球盖菇菌种的液体培养基，该培养基原料组成同实施例1。不同之处仅在于，实施例1中为玉米面20g，实施例4中为黄豆面20g。
上述培养基的制备方法同实施例1。
表1：不同实施例及对比例的大球盖菇液体菌种生长情况
大球盖菇液体菌丝球大小越均匀，越光滑，越好；菌球直径越小越好；菌球干重越大越好。
表1的结果可以看出，培养基原料配方对大球盖菇液体菌丝球的生长影响很大。实施例1-3菌丝球大小均匀且表面光滑、菌球直径小菌球干重大；对比例中，有的菌球大小不均且表面由刺状突起，有的菌丝球干重小。
按如下方法制备培养大球盖菇二级菌种，以比较不同实施例和对比例中配方培养获得的大球盖菇液体菌种对二级菌种生长的影响。
二级种制作培养：制作麦粒培养基，新鲜麦粒筛选干净，浸泡24-48小时，放入锅中煮至无硬心，捞出冷却拌入麦粒干重0.1%的碳酸钙，装瓶，灭菌2.5-3小时，出锅冷却至20℃以下接种，每瓶麦粒培养基接种10ml上述大球盖菇菌种，24-28℃黑暗条件下培养。
表2：不同实施例以及对比例大球盖菇液体菌种对二级菌种生长情况影响
实施例 菌丝颜色 菌丝长势 平均生长速度 （mm/d）
实施例1 纯白 ++ 3.22
实施例2 纯白 ++ 3.79
实施例3 纯白 ++ 3.93
对比例1 灰白 - - 2.03
对比例2 灰白 - - 1.33
对比例3 纯白 + 2.56
对比例4 灰白 - 2.84
注:菌丝长势记为:极浓密++,浓密+,稀疏-,极稀疏- -。
不同配方培养获得的大球盖菇液体菌种对二级菌种生长的影响很大。表2的结果表明：实施例1-3中大球盖菇菌丝均呈纯白色；从长势来看，实施例菌丝长势好,菌丝极浓密，对比例菌丝长势弱，菌丝稀疏；从生长速度看, 实施例菌丝生长较快，对比例菌丝生长较慢。
本发明培养料中添加的玉米面可增加大球盖菇液体菌丝球的密度及减小菌丝球直径，在菌丝摇床培养过程中，固体不溶物吸附菌丝片段，导致菌丝球直径变小，形状更均匀，菌球直径大小差异较小，更有利于生产。此外，培养基中添加稻壳浸出汁会增加二级种菌丝的生长速度。
本发明可用其他的不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概述。因此，无论从哪一点来看，本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不能限制本发明，权利要求书指出了本发明的范围，而上述的说明并未指出本发明的范围，因此，在与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应认为是包括在本发明的权利要求书的范围内。

Claims (5)

1.一种大球盖菇菌种的液体培养基，其特征在于，所述培养基包括下述重量份的原料：稻壳干料10～20 份，马铃薯10～20份，玉米面1～4份。
2.如权利要求1所述的液体培养基，其特征在于，所述培养基还包括下述重量份的原料：葡萄糖10～20份，酵母浸膏10～20份，磷酸二氢钾10～20份，硫酸镁10～20份。
3.一种如权利要求2所述的大球盖菇菌种的液体培养基的制备方法，其特征在于，所述方法步骤包括：
（1）按比例称取稻壳干料，用纯水浸水过夜，取稻壳浸出汁；
（2）按比例称取马铃薯去皮切块，加入步骤（1）所述稻壳浸出汁，煮沸15～20分钟，煮至马铃薯熟而不烂，用4～6层纱布过滤，取滤液；
（3）向步骤（2）所述滤液中加热至沸，再依次按比例加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、酵母浸膏、以及玉米面，煮沸即得所述液体培养基。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述稻壳干料和纯水的比例为100g:（1～2）L。
5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述马铃薯和所述稻壳浸出汁的比例为100g:（0.5～1）L。
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