CN116034813A - 一种大球盖菇代料培养基及菌袋制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种大球盖菇代料培养基及菌袋制备方法，代料培养基配方及各组分重量比为：甘草渣、玉米粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氢氧化钙等。并结合特定的菌袋制备方法：按照培养基配方将各原料混合均匀，同时加水搅拌充分混合，料水比为1:1.5‑2.4，装袋时将培养料装到不超过菌袋容积的2/3，压实培养料，紧实度适中，然后套环、扣盖，菌袋上半部分留较大空间，将料袋于121℃条件下高压蒸汽灭菌2.5‑3小时。本发明的代料培养基和菌袋制备方法，能为大球盖菇菌丝生长提供适宜的营养条件和透气空间环境，能够显著提升大球盖菇菌丝的生长速度、浓密度和长势，提高菌种质量，为大球盖菇安全高效制种提供了有利技术支撑。
Description
技术领域
本发明涉及食用菌菌种繁育技术领域，具体的涉及大球盖菇菌种繁育相关技术领域，更具体的涉及大球盖菇菌种代料培养基及菌袋制备方法的技术领域。
背景技术
大球盖菇(Strophariarugosoannulata)学名邹环球盖菇，又名酒红大球盖菇，裴氏球盖菇，赤松茸等，是食用菌后起之秀。大球盖菇肉质细嫩，柄脆，味道鲜美，清香可口，干菇浓香，营养丰富，子实体中含有丰富的蛋白质、多糖、维生素和矿物质，氨基酸种类齐全，享有“山林珍品”的美誉。大球盖菇多糖具有助消化、预防冠心病、疏解人体精神疲劳等功效，还具有降血压、胆固醇、提高人体免疫力，和抗肿瘤活性。
但大球盖菇菌种的制作却是产业发展中的一大难题，前期调研和研究发现，大球盖菇原种和栽培种培养时间普遍长达60天以上，最快也要40天，同时也常常因为培养基配方不合适和制备方法不合理造成菌丝长势弱、培养中后期生长缓慢甚至停滞等问题，菌丝无法长满菌袋的情况时常发生。即便借鉴现有技术中关于鸡枞菌、金针菇、秀珍菇、姬菇、平菇等相关代料培养基及制备方法，仍不能获得较好的培养效果。“大球盖菇”是不同于“鸡枞菌、金针菇、秀珍菇、姬菇、平菇”的食用菌种类，其生活习性、栽培方式，及菌丝生长对营养和环境条件的要求等均不同。与其他种类相比，大球盖菇菌丝生长对氧气的需求要更大，对氧气不足环境的敏感度更高，培养菌丝时，通风透气稍微不足，菌丝就生长缓慢甚至停滞生长，且菌丝纤弱。另外，与其他种类相比，利用容器(如菌袋或菌瓶)培养大球盖菇菌丝时，大球盖菇对培养基配方的要求要更苛刻，目前适宜其生长的原料和配方均很有限，已开发的培养基配方也不是很理想，主要是培养时间过长。
因此，亟需开发新的大球盖菇代料培养基的原料及配方，探寻能够增强菌丝长势和生长速度的菌袋制备方法，对于为大球盖菇安全高效制种提供保障。
发明内容
针对现有技术中对于大球盖菇种植过程中代料培养基配方仍不适宜大球盖菇菌丝体生长，无法满足菌丝体又好又快生长的营养需求；以及大球盖菇菌袋制备方法仍不合理，尤其是菌袋内透气性差，无法满足菌丝体生长对氧气的需求的技术现状，本申请旨在提供一种大球盖菇代料培养基及菌袋制备方法，代料培养基配方及各组分重量，并结合特定的菌袋制备方法。本发明的代料培养基和菌袋制备方法，能为大球盖菇菌丝生长提供适宜的营养条件和透气空间环境，能够显著提升大球盖菇菌丝的生长速度、浓密度和长势，提高菌种质量，为大球盖菇安全高效制种提供了有利技术支撑。
本发明通过以下技术方案实现的：
本申请提供一种大球盖菇代料培养基，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣10％-94.6％，玉米芯0％-84.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
优选的，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣30％-94.6％，玉米芯0％-64.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
更优选的，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣94.6％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
更进一步的，本申请还提供了一种大球盖菇菌袋制备方法，所述大球盖菇菌袋采用如下步骤制备获得：
(1)将新鲜无霉变的甘草渣和玉米芯提前用自来水充分预湿12小时以上，使其完全浸透，然后按配方比例将玉米粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氢氧化钙所有成分混合均匀；
(2)将步骤(1)中的混合组份用自来水调节培养料含水量至60～70％，检测培养基酸碱度，使pH值在9～11间为宜，培养料配置好后及时装袋，不可过夜；
(3)将步骤(2)中的培养料进行分装，选用菌袋规格为13-18cm×23-38cm×0.0025-0.004cm的耐高温高压折角袋，装袋时将培养料装到菌袋中，压实培养料，紧实度适中，然后套环、扣盖，菌袋上半部分留较大空间，将装好的料袋于121℃条件下高压蒸汽灭菌2.5-3小时，灭菌结束后待菌袋温度降至30℃以下及时接种。
优选的，所述混合组份用自来水调节培养料含水量料水比为1:1.5-2.4。
更优选的，所述混合组份用自来水调节培养料含水量料水比为1:2.2。
优选的，所述装袋时将培养料装到菌袋中不超过菌袋体积的2/3。
更进一步的，本申请还提供所述的一种大球盖菇代料培养基在大球盖菇种植中的应用。
更进一步的，本申请还提供所述的一种大球盖菇菌袋制备方法在大球盖菇种植中的应用。
通过实施本发明的技术方案，可以达到以下有益效果:
本发明提供的一种大球盖菇代料培养基及菌袋制备方法，，通过开发新的代料培养基原料和配方，优化菌袋制备方法，增加菌袋透气性，从而筛选到一种十分利于大球盖菇菌丝生长的代料培养基配方及菌袋制备方法，利用本发明的培养基配方及菌袋制备方法，大球盖菇菌种培养时间仅为20-30天，较常规菌种培养时间可缩短10-20天，菌丝生长速度明显提高，菌丝浓密度和长势也显著增加，为大球盖菇安全高效制种提供了有力技术支撑。
附图说明
图1所示为大球盖菇菌丝在不同料水比培养基上生长速度趋势图。
图2所示为大球盖菇菌丝在不同料水比培养基上的生长状态图。
图3所示为大球盖菇新型菌袋制备方法图。
具体实施例
以下实施例用于进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作地修改或替换，均属于本发明的范围。
本申请所采用的的试剂：甘草渣、玉米芯、玉米粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氢氧化钙、PD液体培养基，常用试剂为国产分析纯试剂。
本申请中所采用的仪器：恒温水浴锅、高压灭菌锅、恒温培养箱、恒温摇床。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例一：一种大球盖菇代料培养基
一种大球盖菇代料培养基，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣10％-94.6％，玉米芯0％-84.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
实施例二：一种大球盖菇代料培养基
一种大球盖菇代料培养基，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣10％，玉米芯84.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
实施例三：一种大球盖菇代料培养基
一种大球盖菇代料培养基，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣20％，玉米芯74.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
实施例四：一种大球盖菇代料培养基
一种大球盖菇代料培养基，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣30％，玉米芯64.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
实施例五：一种大球盖菇代料培养基
一种大球盖菇代料培养基，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣40％，玉米芯54.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
实施例六：一种大球盖菇代料培养基
一种大球盖菇代料培养基，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣50％，玉米芯44.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
实施例七：一种大球盖菇代料培养基
一种大球盖菇代料培养基，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣60％，玉米芯34.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
实施例八：一种大球盖菇代料培养基
一种大球盖菇代料培养基，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣70％，玉米芯24.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
实施例九：一种大球盖菇代料培养基
一种大球盖菇代料培养基，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣80％，玉米芯14.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
实施例十：一种大球盖菇代料培养基
一种大球盖菇代料培养基，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣94.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
实施例十一：一种大球盖菇菌袋制备方法
将新鲜无霉变的甘草渣和玉米芯提前用自来水充分预湿12小时以上，使其完全浸透，然后按配方比例将玉米粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氢氧化钙所有成分混合均匀；用自来水调节培养料，料水比为1:1.5-2.4，含水量至60～70％，检测培养基酸碱度，使pH值在9～11间为宜，培养料配置好后及时装袋，不可过夜；将培养料进行分装，选用菌袋规格为13-18cm×23-38cm×0.0025-0.004cm的耐高温高压折角袋，装袋时将培养料装到菌袋中，压实培养料，紧实度适中，然后套环、扣盖，菌袋上半部分留较大空间，将装好的料袋于121℃条件下高压蒸汽灭菌2.5-3小时，灭菌结束后待菌袋温度降至30℃以下及时接种。
实施例十二：一种大球盖菇菌袋制备方法
将新鲜无霉变的甘草渣和玉米芯提前用自来水充分预湿12小时以上，使其完全浸透，然后按配方比例将玉米粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氢氧化钙所有成分混合均匀；用自来水调节培养料，料水比为1:1.8，含水量至60～70％，检测培养基酸碱度，使pH值在9～11间为宜，培养料配置好后及时装袋，不可过夜；将培养料进行分装，选用菌袋规格为13-18cm×23-38cm×0.0025-0.004cm的耐高温高压折角袋，装袋时将培养料装到菌袋中，压实培养料，紧实度适中，然后套环、扣盖，菌袋上半部分留较大空间，将装好的料袋于121℃条件下高压蒸汽灭菌2.5-3小时，灭菌结束后待菌袋温度降至30℃以下及时接种。
实施例十三：一种大球盖菇菌袋制备方法
将新鲜无霉变的甘草渣和玉米芯提前用自来水充分预湿12小时以上，使其完全浸透，然后按配方比例将玉米粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氢氧化钙所有成分混合均匀；用自来水调节培养料，料水比为1:2.0，含水量至60～70％，检测培养基酸碱度，使pH值在9～11间为宜，培养料配置好后及时装袋，不可过夜；将培养料进行分装，选用菌袋规格为13-18cm×23-38cm×0.0025-0.004cm的耐高温高压折角袋，装袋时将培养料装到菌袋中，压实培养料，紧实度适中，然后套环、扣盖，菌袋上半部分留较大空间，将装好的料袋于121℃条件下高压蒸汽灭菌2.5-3小时，灭菌结束后待菌袋温度降至30℃以下及时接种。
实施例十四：一种大球盖菇菌袋制备方法
将新鲜无霉变的甘草渣和玉米芯提前用自来水充分预湿12小时以上，使其完全浸透，然后按配方比例将玉米粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氢氧化钙所有成分混合均匀；用自来水调节培养料，料水比为1:2.2，含水量至60～70％，检测培养基酸碱度，使pH值在9～11间为宜，培养料配置好后及时装袋，不可过夜；将培养料进行分装，选用菌袋规格为13-18cm×23-38cm×0.0025-0.004cm的耐高温高压折角袋，装袋时将培养料装到菌袋中，压实培养料，紧实度适中，然后套环、扣盖，菌袋上半部分留较大空间，将装好的料袋于121℃条件下高压蒸汽灭菌2.5-3小时，灭菌结束后待菌袋温度降至30℃以下及时接种。
实施例十五：一种大球盖菇菌袋制备方法
将新鲜无霉变的甘草渣和玉米芯提前用自来水充分预湿12小时以上，使其完全浸透，然后按配方比例将玉米粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氢氧化钙所有成分混合均匀；用自来水调节培养料，料水比为1:2.4，含水量至60～70％，检测培养基酸碱度，使pH值在9～11间为宜，培养料配置好后及时装袋，不可过夜；将培养料进行分装，选用菌袋规格为13-18cm×23-38cm×0.0025-0.004cm的耐高温高压折角袋，装袋时将培养料装到菌袋中，压实培养料，紧实度适中，然后套环、扣盖，菌袋上半部分留较大空间，将装好的料袋于121℃条件下高压蒸汽灭菌2.5-3小时，灭菌结束后待菌袋温度降至30℃以下及时接种。
实施例十六：大球盖菇代料培养基配方及菌袋制备方法优化
1、大球盖菇代料培养基配方
甘草渣10-94.6％，玉米芯0-84.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％，含水量60-70％，pH7～8。
注：所选用的玉米芯颗粒大小为0.5-1cm×0.5-1cm，需提前12小时预湿透。
2、大球盖菇原种培养基制备方法
(1)培养基配置及灭菌
将新鲜无霉变的甘草渣和玉米芯提前用自来水充分预湿12小时以上，使其完全浸透，然后按配方比例将所有成分混合均匀，用自来水调节培养料含水量至60～70％，检测培养基酸碱度，使pH值在9～11间为宜，培养料配置好后及时装袋，不可过夜。
选用菌袋规格为13-18cm×23-38cm×0.0025-0.004cm的耐高温高压折角袋，装袋时将培养料装到菌袋容积的1/3至2/3，压实培养料，紧实度适中，然后套环、扣盖，菌袋上半部分留较大空间，将装好的料袋于121℃条件下高压蒸汽灭菌2.5-3小时，灭菌结束后待菌袋温度降至30℃以下及时接种。
(2)接种及培养
采用液体种接种方式，首先在无菌条件下，将大球盖菇菌丝块(即7～8cm直径大小的菌落分3～4块)接种至PD液体培养基中，加入抗生素，然后用搅拌器打碎制成液体菌种；摇匀菌种，接种至已灭菌好的料袋内培养基上，每袋接种量10～20ml；然后于23℃恒温箱黑暗培养，每天观察和记录菌丝生长情况。
3、代料培养基配方筛选实验
(1)培养基配方设计：以甘草渣、玉米芯为主料，设置不同重量比例为实验处理，共设计9个培养基配方；以玉米芯和稻壳为主料的配方为对照(CK)，该配方为目前使用的效果较好的常规配方；各组分名称及配比详见表1。
表1：大球盖菇代料培养基配方
(2)结果分析：
结果显示表2：(1)在菌丝体生长速度方面，所有配方菌丝生长速度在1.27-5.01mm/d范围，其中对照(CK)组配方的菌丝体生长速度为2.66mm/d，显著高于配方1和配方2，而显著低于配方3-配方9；(2)在菌丝浓密度方面，CK和配方1、2均处于较浓水平，配方3-9均为浓密水平。
综上所述，在大球盖菇常规代料培养基配方中引入甘草渣，能够明显促进大球盖菇菌丝的生长速度，并有促进大球盖菇菌丝浓密度和长势的作用，效果十分显著。同时，甘草渣可以完全替代稻壳，为稻壳匮乏地区提供更多选择。
表2：大球盖菇代料培养基不同配方下菌丝生长情况
注：(1)菌丝生长速度后面的字母代表在p＝0.05下的显著性差异；(2)菌丝浓密度分级，“+”稀疏，“++”较浓，“+++”浓密；
4、培养料含水量优化实验
(1)培养料含水量实验设计：共设置5个料水比的梯度，由低到高分别为1/1.5(CK)、1/1.8、1/2.0、1/2.2、1/2.4，其中CK为食用菌代料培养基常规料水比；用于实验的培养基配方为：甘草渣60％，玉米芯34.6％，玉米粉2％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％；根据培养基配方和料水比分别配置培养料，充分搅拌混匀，调节pH为9-10，装瓶时，保证每瓶的培养料干料量和体积一致，装料量为瓶子容积的2/3，于121℃高压蒸汽灭菌2.5小时。
(2)结果与分析
结果显示，随着培养料含水量的增加，菌丝生长速度呈现上升趋势，参见附图1、附图2，菌丝生长速度在3.96-7.51mm/d间，见表3，其中在常规料水比1/1.5(CK)培养基上长速最慢，为3.96mm/d，显著低于其他料水比。因此，代料培养基含水量适当提高有利于大球盖菇菌丝体生长。
表3：大球盖菇菌丝在不同料水比培养基上生长情况
| 序号 | 料水比 | 菌丝生长速度(mm/d) | 菌丝浓密度 | 备注 |
| 1 | 1/1.5(CK) | 3.96a | +++ | |
| 2 | 1/1.8 | 4.26ab | +++ | |
| 3 | 1/2.0 | 4.53b | +++ | |
| 4 | 1/2.2 | 7.32c | +++ | |
| 5 | 1/2.4 | 7.51c | +++ |
基于上述实验结果显示，当代料培养基配方及各组分重量百分比为：甘草渣94.6％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。并结合特定的菌袋制备方法：按照培养基配方将各原料混合均匀，同时加水搅拌充分混合，料水比为1:2.2，装袋时将培养料装到不超过菌袋容积的2/3，压实培养料，紧实度适中，然后套环、扣盖，菌袋上半部分留较大空间，将料袋于121℃条件下高压蒸汽灭菌2.5-3小时。相关代料培养基及菌袋制备方法条件下，能为大球盖菇菌丝生长提供适宜的营养条件和透气空间环境，能够显著提升大球盖菇菌丝的生长速度、浓密度和长势，提高菌种质量，为大球盖菇安全高效制种提供了有利技术支撑
实施例十七：大球盖菇代料培养基配方及菌袋制备方法优化
基于上述实施例一至实施例十六中的清楚记载，采用常规大球盖菇菌培养基基菌袋制备方法进行培养为对照组，采用本申请中实施例十中的代料培养基配方结合实施例十四中的菌袋制备方法，将装好的料袋于121℃条件下高压蒸汽灭菌2.5-3小时，灭菌结束后待菌袋温度降至30℃以下及时接种；采用液体菌种接种，接种量为15mL，于25℃培养箱暗培养。作为试验组，进行二者培养满袋时间对比。结果显示：利用该方法菌袋满袋时间为25-30天，与将培养料装满菌袋而不留空间的相比，满袋时间缩短了15天左右。
如上所述，即可较好地实现本发明，上述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种改变和改进，均应落入本发明确定的保护范围内。
Claims (7)
1.一种大球盖菇代料培养基，其特征在于，所述代料培养基配方中包含按照重量百分比计：甘草渣94.6％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.1％，氢氧化钙1％。
2.一种大球盖菇菌袋制备方法，其特征在于，所述大球盖菇菌袋采用如下步骤制备获得：
(1)将新鲜无霉变的甘草渣和玉米芯提前用自来水充分预湿12小时以上，使其完全浸透，然后按配方比例将玉米粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氢氧化钙所有成分混合均匀；
(2)将步骤(1)中的混合组份用自来水调节培养料含水量至60～70％，检测培养基酸碱度，使pH值在9～11间为宜，培养料配置好后及时装袋，不可过夜；
(3)将步骤(2)中的培养料进行分装，选用菌袋规格为13-18cm×23-38cm×0.0025-0.004cm的耐高温高压折角袋，装袋时将培养料装到菌袋中，压实培养料，紧实度适中，然后套环、扣盖，菌袋上半部分留较大空间，将装好的料袋于121℃条件下高压蒸汽灭菌2.5-3小时，灭菌结束后待菌袋温度降至30℃以下及时接种。
3.如权利要求2所述的一种大球盖菇菌袋制备方法，其特征在于，所述混合组份用自来水调节培养料含水量料水比为1:1.5-2.4。
4.如权利要求3所述的一种大球盖菇菌袋制备方法，其特征在于，所述混合组份用自来水调节培养料含水量料水比为1:2.2。
5.如权利要求2所述的一种大球盖菇菌袋制备方法，其特征在于，所述装袋时将培养料装到菌袋中不超过菌袋体积的2/3。
6.如权利要求1所述的一种大球盖菇代料培养基在大球盖菇种植中的应用。
7.如权利要求2至权利要求5任意一项所述的一种大球盖菇菌袋制备方法在大球盖菇种植中的应用。
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