CN109280632A - 一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，该方法的工艺步骤包括：步骤1、杏鲍菇菌种的活化；步骤2、杏鲍菇种子液的制备；步骤3、杏鲍菇种子液超声波电场组合处理；步骤4、杏鲍菇的液体初级发酵；步骤5、杏鲍菇的液体富硒发酵。本发明对杏鲍菇液态发酵工艺流程进行了优化，同时在发酵过程中加入硒源，得到了菌丝活性强、生长快、萌发点多、生物量大，同时有机硒含量高的杏鲍菇液体菌种，该菌种接种后发菌快、出菇整齐，生产效率高，产出的富硒杏鲍菇营养价值更高，因此本发明的方法具有很好的商业前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，属于食用菌发酵领域。
背景技术
杏鲍菇（Pleurotus eryngii）又叫刺芹侧耳，属于真菌门、担子菌亚门、真担子菌纲、层菌亚纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属。杏鲍菇菌肉肥厚，营养丰富，具有杏仁香味和鲍鱼味，故称杏仁鲍鱼菇。其子实体色泽雪白，质地脆嫩，也称“雪茸”，又有“平菇王”、“干贝菇”、“草原上的美味牛肝菌”之美誉。野生杏鲍菇主要分布于南欧、北非、中亚等地区，在我国主要分布在新疆、青海、四川北部。我国自20世纪90年代开始引种栽培杏鲍菇，经过多年的人工驯化栽培技术研究，目前我国的许多地区已经开始产业化生产。
杏鲍菇是药食两用的珍稀食用菌，其主要营养成分包括蛋白质、多糖、脂肪、维生素和微量矿质元素等。与香菇、银耳和黑木耳干品相比，杏鲍菇蛋白质和微量矿质元素含量较高，而脂肪含量较低。杏鲍菇含有18种氨基酸，其中8种是人体必需氨基酸，占氨基酸总量的 42%。杏鲍菇多糖是杏鲍菇的主要活性成分，具有降血压、降血脂、降低胆固醇、刺激抗体形成、增强人体免疫力的功能。此外杏鲍菇多糖还具有抑制肿瘤细胞生长、抗衰老、抗突变、抗氧化等作用。
硒是人体必需的一种微量营养元素，在机体中与一些酶相结合，生成有生物特性的大分子化合物，这些化合物能够保护机体免受氧化损害，增强免疫力。例如，硒元素是谷胱甘肽过氧化物酶家族和硫氧还蛋白还原酶家族的活性中心，由谷胱甘肽过氧化物酶家族和硫氧还蛋白还原酶家族与硒元素结合之后，具有较强的清除氧自由基、防止脂膜过氧化的功能，是机体抗氧化体系的重要组成部分。此外，硒元素对于机体的细胞免疫和体液免疫能力的维持具有一定的支撑作用，从而实现了增强机体免疫能力的功能。由于人体无法自身合成硒，所以需要从外界摄取，因此目前关于富硒产品的开发也是一大热门。然而，硒在地表土壤中分布零散，普遍含量较低，并且大多以矿物晶格形态存在，很难被作物吸收利用。如果在土壤中施加大量硒，使作物富集更多的硒成为富硒粮食，很容易污染环境。实践证实，食用菌富硒能力较强，可以通过制造局部高浓度的硒环境，使菌体在生长过程中能够吸收环境中的硒元素，硒元素进入细胞内，细胞内的物质代谢可以将其结合到大分子活性物质（如多糖和蛋白质）上，转化为多糖硒和蛋白硒等有机形态的硒，从而提高了食用菌自身的硒含量。目前，食用菌作为富集硒元素的载体，因其栽培面积广，操作简便，富集效果显著，在我国正被广泛应用。
众所周知，要发展食用菌产业，关键前提是优良菌种（或品种）先行，只有优良的菌种才能达到优质高产。长期以来杏鲍菇栽培大多利用固体菌种，固体菌种存在着生产较为繁琐、杂菌污染率高、生长周期长、菌龄不一致等问题，大大制约了杏鲍菇的产业化发展。而液体菌种具有制种周期短、产量高、品质好、定殖封面快、发菌周期短、菌龄一致、污染率低和生产成本低等诸多优点，适合食用菌规模化栽培，已成为食用菌制种产业的发展趋势。采用液态发酵的方法生产杏鲍菇液体菌种，不仅生产周期短，可以在短期内获得大量菌丝体，而且生产能力大，发酵液特性也稳定，便于大规模化生产，因此具有极大的开发潜力。
传统上，杏鲍菇富硒培养主要是在杏鲍菇栽培过程中，在固体基料中加入硒源，常用的硒源为市售亚硒酸钠盐，杏鲍菇通过自身的生理生化反应，将硒源吸收入体内转化为有机硒富集在子实体中。但此种方法存在着菌体对硒的吸收率不高，有机硒含量较低的缺点。而结合液态发酵的方法，在杏鲍菇液体菌种的发酵过程中添加硒源，能大大提高硒的吸收率和有机硒的转化率，从而生产出有机硒含量高的液体菌种，用于栽培即可得到富硒杏鲍菇，因此是本发明的研究重点。
发明内容
为了解决目前杏鲍菇菌种生产上存在的问题以及传统富硒杏鲍菇栽培中有机硒含量较低的缺点，本发明提供了的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法。
为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，其特征在于，该方法的工艺步骤包括：
步骤1、杏鲍菇菌种的活化
将保藏的杏鲍菇菌种接种到PDA培养基斜面上，置于25℃培养箱中恒温培养3~4d，再转接到新鲜的PDA培养基斜面上，置于25℃培养箱中恒温培养，菌丝长满斜面后待用；
步骤2、杏鲍菇种子液的制备
将活化的杏鲍菇菌丝块切割成0.5~1cm2小块，无菌条件下接种到装有100mL种子液培养基的250mL锥形瓶中，每瓶放入3块，先置于25℃培养箱中恒温培养2d，再置于摇床上振荡培养4~6d，得到杏鲍菇种子液；
步骤3、杏鲍菇种子液超声波电场组合处理
将种子液先进行超声波辐照处理，超声频率为28kHz，功率为30W，超声30s间歇10s，一共处理45min；然后将种子液放置于60KV/m的均匀电场中处理2min；
步骤4、杏鲍菇的液体初级发酵
按照9%~11%的接种量将上述种子液接种到装有200mL初级发酵培养基的500mL锥形瓶中，置于摇床上振荡培养4~6d，得到杏鲍菇初级发酵液；
步骤5、杏鲍菇的液体富硒发酵
采用气升式发酵罐，将富硒发酵培养基配制好后装入发酵罐内，装料系数为65%~75%，通入空气搅拌1~2 min，混合均匀，然后密封盖口，高压蒸汽灭菌1h，灭菌完成后，等到发酵罐内培养基温度降至30℃以下时，按照9%~11%的接种量将杏鲍菇初级发酵液从接种口接入发酵罐内，发酵培养5~7d，获得富硒杏鲍菇液体菌种。
所述步骤2中，种子液培养基的配方为：马铃薯180~220g/L，葡萄糖10~14g/L，麦芽糖6~8g/L， 番茄汁20~30mL/L，牛肉膏1~2g/L，KH2PO4 0.9~1.1g/L，MgSO4 0.4~0.6g/L，CaCl20.3~0.5g/L，pH自然。
所述步骤3中，超声波辐照处理采用的设备为CY-5D超声波生物促进生长仪。
所述步骤4中，初级发酵培养基的配方为：葡萄糖30~34g/L，玉米粉21~25g/L，胡萝卜7~10g/L，花生粕3~4g/L，米糠2.1~2.3g/L，茶籽粕2.5~3.1g/L，海藻粉1.7~2.5g/L，大豆油0.5~0.7mL/L，生育酚4~5 mg/L，ZnSO4 300~350mg/L，KNO3 0.8~1.2g/L，三十烷醇1.4~1.8mg/L，KH2PO4 1.8~2.2g/L，MgSO4 0.9~1.1g/L，pH值为6.0~6.4。
所述步骤2和步骤4中摇床振荡培养的温度为24~26℃，转速为145~155r/min。
所述步骤5中富硒发酵培养基的配方为：可溶性淀粉20~26g/L，燕麦麸皮18~24g/L，红糖6~10g/L，平菇菌糠6.6~8.0g/L，玉米芯2.2~3.0g/L，豆粕粉5.5~6.5g/L，富硒酵母粉2.6~3.0g/L，苦荞皮壳5.9~6.5g/L，胡麻茎杆粉3.3~3.9g/L，KH2PO4 1.8~2.2g/L，MgSO4 0.9~1.1g/L，醋酸钠 0.5~0.7g/L，Na2SeO3 28~32mg/L，氰钴胺50~60mg/L，棕榈酸1.8~2.4g/L，初始pH值为6.4~6.6。
所述步骤5中发酵培养参数为：培养温度24~26℃，搅拌机转速155~165r/min，前2d通气量为1:1（V/V/min），后3~5d通气量为1:0.5（V/V/min）。
本发明具有以下有益效果：
1、本发明优化了杏鲍菇液态发酵培养流程，对杏鲍菇种子液进行超声波电场组合处理，大大促进了杏鲍菇菌丝生物量的积累和代谢产物的合成，进而提高了发酵过程中菌丝富集和转化硒的能力；本发明提供的富硒发酵培养基营养丰富，不仅添加了无机硒源，还添加了有机硒源，与培养基中的其他营养成分复配使用，既能促进杏鲍菇菌丝对硒的吸收和转化，还能促进菌丝的生长，达到更高的效果。
2、本发明采用液态发酵技术生产的杏鲍菇菌种，不仅具有液体菌种的生产周期短、菌丝生长快、菌丝分散性好、生物量大等特点，而且菌丝体有机硒含量平均高达1.43mg/g，可以直接应用于富硒杏鲍菇的大规模栽培，也可以利用其菌丝体生产保健品和提取有效成分，是发展杏鲍菇生产的一条崭新途径。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
以下实施例中一些指标的测定方法：
菌丝生物量测定：取100ml的发酵液过滤收集菌丝体，经蒸馏水洗涤3~4次后5000r/min离心10min，将沉淀与上清液分开。取沉淀放入烘箱，80℃下烘干至恒重，电子天平称量其干重。
菌球直径测定：取1ml发酵液用水稀释10倍，随机取20个菌球在培养皿中沿固定的直线排成一行，用卡尺测定总长度，重复3次，取其平均值。
菌球密度测定：取1ml发酵液用水稀释10倍，在培养皿下垫置黑色方格纸，统计数量。
总硒含量测定：将烘干至恒重的菌丝磨成均匀粉末进行消化处理。精确称取该粉末1g，加入10ml硝酸放置24h以上，然后低温加热使其全部溶解，稍冷却后加入3ml高氯酸继续加热，冷却后定容到50ml。取10ml消化处理后的样品，加水稀释到40mL，将pH调节至2~3，加入质量分数为5%的EDTA溶液2ml，然后加入质量分数为0.5%的3，3-二氨基联苯胺溶液2mL，摇匀。避光反应30min后取出，将pH调节至7，加入10ml甲苯振荡萃取2min，静置分层，甲苯层放入比色皿，于430nm处测定吸光度，依据硒标准曲线得相应的浓度，计算出菌丝中的总硒含量。
有机硒含量测定：精确称取上述菌丝粉末1g，不经消化处理，加蒸馏水定容到50ml，按上述测定总硒含量的方法测定无机硒含量。有机硒含量=总硒含量-无机硒含量。
实施例1
按照本发明的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，进行以下试验：
步骤1、杏鲍菇菌种的活化
将保藏的杏鲍菇菌种“杏鲍菇1号”接种到PDA培养基斜面上，置于25℃培养箱中恒温培养3~4d，再转接到新鲜的PDA培养基斜面上，置于25℃培养箱中恒温培养，菌丝长满斜面后待用；
步骤2、杏鲍菇种子液的制备
将活化的杏鲍菇菌丝块切割成0.5~1cm2小块，无菌条件下接种到装有100ml种子液培养基（该培养基的配方为：马铃薯200g/L，葡萄糖12g/L，麦芽糖7g/L，番茄汁25ml/L，牛肉膏1.5g/L，KH2PO4 1.0g/L，MgSO4 0.5g/L，CaCl2 0.4g/L，pH自然）的250ml锥形瓶中，每瓶放入3块，先置于25℃培养箱中恒温培养2d，再置于摇床上振荡培养5d，培养温度为25℃，转速为150r/min，得到杏鲍菇种子液；
步骤3、杏鲍菇种子液超声波电场组合处理
采用CY-5D超声波生物促进生长仪对种子液进行超声波辐照处理，超声频率为28kHz，功率为30W，超声30s间歇10s，一共处理45min；然后将种子液放置于60KV/m的均匀电场中处理2min；
步骤4、杏鲍菇的液体初级发酵
按照10%的接种量将上述种子液接种到装有200ml初级发酵培养基（该培养基配方为：葡萄糖32g/L，玉米23g/L，胡萝卜8.5g/L，花生粕3.5g/L，米糠2.2g/L，茶籽粕2.8g/L，海藻粉2.1g/L，大豆油0.6ml/L，生育酚4.5mg/L，ZnSO4 325mg/L，KNO3 1.0g/L，三十烷醇1.6mg/L，KH2PO4 2.0g/L，MgSO4 1.0g/L，pH值为6.2）的500ml锥形瓶中，置于摇床上振荡培养5d，培养温度为25℃，转速为150r/min，得到杏鲍菇初级发酵液；
步骤5、杏鲍菇的液体富硒发酵
采用气升式发酵罐，将富硒发酵培养基（该培养基配方为：可溶性淀粉23g/L，燕麦麸皮22g/L，红糖8g/L，平菇菌糠7.3g/L，玉米芯2.6g/L，豆粕粉6.0g/L，富硒酵母粉2.8g/L，苦荞皮壳6.2g/L，胡麻茎杆粉3.6g/L，KH2PO4 2.0g/L，MgSO4 1.0g/L，棕榈酸2.2g/L，醋酸钠0.6g/L，Na2SeO3 30mg/L，氰钴胺55mg/L，初始pH值为6.5）配制好后装入发酵罐内，装料系数为70%，通入空气搅拌1~2 min，混合均匀，然后密封盖口，高压蒸汽灭菌1h，灭菌完成后，等到发酵罐内培养基温度降至30℃以下时，按照10%的接种量将杏鲍菇初级发酵液从接种口接入发酵罐内，发酵培养参数为：培养温度25℃，搅拌机转速160r/min，前2d通气量为1:1（V/V/min），后4d通气量为1:0.5（V/V/min），发酵培养6d，获得富硒杏鲍菇液体菌种。
实施例2
为了验证本发明的超声波电场组合处理对后续的杏鲍菇液体初级发酵和富硒发酵产生的正向影响，本实施例进行以下试验：1、将实施例1步骤3改为单独超声波处理；2、将实施例1步骤3改为单独电场处理；3、取消实施例1步骤3，测定杏鲍菇初级发酵液的菌丝生物量、菌球直径和菌球密度，结果如下表1；测定杏鲍菇液体菌种的菌丝生物量、总硒含量和有机硒含量，结果如下表2。
分析表1与表2的结果，与不处理（CK）相比，单独超声波或单独电场处理，已经能够对杏鲍菇液体初级发酵和富硒发酵产生正向影响，菌丝生物量、总硒含量以及有机硒含量均得到了提高；而采用本发明的超声波电场组合处理时，对杏鲍菇液体初级发酵的影响是能够显著提高杏鲍菇初级发酵液的菌丝生物量、菌球直径和菌球密度，对杏鲍菇液体富硒发酵的影响是能够显著提高杏鲍菇液体菌种的菌丝生物量、总硒含量和有机硒含量，并且相比于单独用某一种处理方法，组合处理的方法更能激发菌丝活力，促进其生长代谢，提高硒的吸收率和转化率，获得更好的效果。
实施例3
为了验证本发明的初级发酵培养基对杏鲍菇液体初级发酵的影响，本实施例进行以下试验：将实施例1步骤4中采用的初级发酵培养基替换为以下常规杏鲍菇发酵培养基，测定杏鲍菇初级发酵液的菌丝生物量、菌球直径和菌球密度，结果如下表3。
培养基A：葡萄糖22g/L、蛋白胨3g/L、KH2PO4 0.8g/L、MgSO4 1.2g/L、VB1 10mg/L；培养基B：玉米粉30g/L、蔗糖20g/L、酵母粉3g/L、KH2PO4 2.0g/L、MgSO4 1.0g/L；培养基C：蔗糖20g/L、玉米粉20g/L、黄豆粉20g/L、酵母膏0.8g/L、KH2PO4 0.5g/L、MgSO4 0.5g/L。
分析表3的结果，采用本发明的初级发酵培养基，杏鲍菇初级发酵液的菌丝生物量和菌球密度都达到最大值，而菌球直径在1mm 左右，大小适中。作为液体菌种，菌丝生物量越大、菌丝球数量越多，在接种时菌丝萌发点就越多，菌丝生长速度也越快，发酵效果就更好。本发明的初级发酵培养基采用多种碳源、氮源相结合，并合理调整配比，还额外添加了生长促进剂、微量元素和营养物质，更适合于杏鲍菇菌丝的生长。
实施例4
为了验证本发明的富硒发酵培养基对杏鲍菇液体富硒发酵的影响，本实施例进行以下试验：将实施例1步骤5中采用的富硒发酵培养基替换为以下常规杏鲍菇发酵培养基，并添加相同浓度的Na2SeO3，测定杏鲍菇液体菌种的菌丝生物量、总硒含量和有机硒含量，结果如下表4。
培养基A：玉米粉30g/L、麸皮粉30g/L、土豆粉25 g/L、KH2PO4 1.0g/L、MgSO4 0.5g/L、Na2SeO3 30mg/L；培养基B：麦芽糖25g/L、葡萄糖30g/L、蛋白胨5g/L、KH2PO4 3.0g/L、MgSO4 1.5g/L、Na2SeO3 30mg/L；培养基C：玉米粉20g/L、大豆淀粉10g/L、酵母膏3g/L、KH2PO41.0g/L、MgSO4 1.0g/L、Na2SeO3 30mg/L。
分析表4的结果，采用本发明的富硒发酵培养基，菌丝生物量、总硒含量和有机硒含量均达到最高值，说明本发明的富硒发酵培养基不仅有利于菌丝生物量的积累，还有利于硒的富集。本发明的富硒发酵培养基营养丰富，碳源、氮源配比合理，不仅添加了Na2SeO3作为无机硒源，还添加了燕麦麸皮、富硒酵母粉、苦荞皮壳、胡麻茎杆粉等硒含量较高的原料作为有机硒源，与培养基中的其他营养成分复配使用，既能促进杏鲍菇菌丝对硒的吸收和转化，还能促进菌丝的生长，达到更高的效果。
实施例5
本实施例对杏鲍菇的液体富硒发酵过程中培养温度、发酵培养基初始pH值、搅拌机转速、接种量分别进行优化试验，比较不同条件对杏鲍菇液体富硒发酵的影响。
1、培养温度对杏鲍菇液体富硒发酵的影响：将实施例1步骤5中培养温度设置为21、23、25、27℃，测定杏鲍菇液体菌种的菌丝生物量、总硒含量和有机硒含量，结果如下表5。
分析表5的结果，培养温度在25℃时，菌丝生物量、总硒含量以及有机硒含量都达到最大，随着温度的升高，生物量和硒含量都有逐渐下降的趋势，因此选择25℃为最佳培养温度。
2、发酵培养基初始pH值对杏鲍菇液体富硒发酵的影响：将实施例1步骤5中发酵培养基的初始pH值调节为4.5、5.5、6.5、7.5，测定杏鲍菇液体菌种的菌丝生物量、总硒含量和有机硒含量，结果如下表6。
分析表6的结果，初始pH值为6.5时，菌丝生物量、总硒含量以及有机硒含量都达到最大值，与其他组差异显著，说明在这个pH条件下杏鲍菇菌丝体能够较好地对营养物质进行利用，并大量富集硒。
3、搅拌机转速对杏鲍菇液体富硒发酵的影响：将实施例1步骤5搅拌机转速设置为120、140、160、180r/min，测定杏鲍菇液体菌种的菌丝生物量、总硒含量和有机硒含量，结果如下表7。
分析表7的结果，当转速为160r/min时，菌丝生物量、总硒含量以及有机硒含量都达到最大值。菌丝在生长过程中需要消耗氧气，随着搅拌机转速的提高，液面接触空气的面积增大，利于溶氧水平的提高；但转速过快会导致菌丝缠绕过密，形成块状，反而不利于菌丝生物量的积累和对硒的富集。
4、接种量对杏鲍菇液体富硒发酵的影响：将实施例1步骤5接种量设置为5%、10%、15%、20%，测定杏鲍菇液体菌种的菌丝生物量、总硒含量和有机硒含量，结果如下表8。
分析表8的结果，当接种量为10%时，菌丝生物量、总硒含量以及有机硒含量都达到最大值。在一定范围内，接种量大可以加快菌丝的生长，从而缩短培养期，但接种量过大会导致前期菌丝生长过于旺盛，培养基营养成分消耗迅速，不利于后面菌丝生物量的积累和硒的富集。
实施例6
采用实施例1获得的富硒杏鲍菇液体菌种按照以下步骤进行栽培生产：1、按照以下质量配比制备培养料：棉籽壳75%，玉米混合粉12%，麸皮10%，石膏粉1%，石灰粉1%，白糖1%，PH值为6.5~7.5；2、将培养料搅拌混匀后堆置发酵，然后将培养料装袋后常压灭菌，100℃保持10~12小时，等到袋内温度降至30℃以下时，接种接入富硒杏鲍菇液体菌种，于温度20~26℃、空气相对湿度60%~70%、空气中二氧化碳的含量0.3%~1%、避光的培养室中发菌培养，至袋中菌丝长满；3、将长满菌丝的菌袋直立排放在菇房地面形成菌床，打开袋口，调整室内温度为15~20℃，保持室内空气流通，保持料面光照500~600lx，喷水使室内空气相对湿度为85%~95%，促进出菇；4、当杏鲍菇子实体的菌盖平展，中间下凹，表面稍有绒毛，孢子尚未弹射时进行采收。
将本发明栽培收获的富硒杏鲍菇与传统固体栽培富硒杏鲍菇一起进行总硒含量和有机硒含量的测定，结果如下表9。
由表8结果可知，采用本发明的富硒杏鲍菇液体菌种进行栽培生产，收获的杏鲍菇子实体中总硒含量为81.25mg/kg，比传统富硒杏鲍菇提高了46.53mg/kg，并且本发明的富硒杏鲍菇中有机硒含量为77.67mg/kg，有机硒率为95.6%，说明硒主要以有机态存在，更有利于人体吸收，对人体更加有益。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何不经过创造性劳动想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书所限定的保护范围为准。
Claims (7)
1.一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，其特征在于，该方法的工艺步骤包括：
步骤1、杏鲍菇菌种的活化
将保藏的杏鲍菇菌种接种到PDA培养基斜面上，置于25℃培养箱中恒温培养3~4d，再转接到新鲜的PDA培养基斜面上，置于25℃培养箱中恒温培养，菌丝长满斜面后待用；
步骤2、杏鲍菇种子液的制备
将活化的杏鲍菇菌丝块切割成0.5~1cm2小块，无菌条件下接种到装有100mL种子液培养基的250mL锥形瓶中，每瓶放入3块，先置于25℃培养箱中恒温培养2d，再置于摇床上振荡培养4~6d，得到杏鲍菇种子液；
步骤3、杏鲍菇种子液超声波电场组合处理
将种子液先进行超声波辐照处理，超声频率为28kHz，功率为30W，超声30s间歇10s，一共处理45min；然后将种子液放置于60KV/m的均匀电场中处理2min；
步骤4、杏鲍菇的液体初级发酵
按照9%~11%的接种量将上述种子液接种到装有200mL初级发酵培养基的500mL锥形瓶中，置于摇床上振荡培养4~6d，得到杏鲍菇初级发酵液；
步骤5、杏鲍菇的液体富硒发酵
采用气升式发酵罐，将富硒发酵培养基配制好后装入发酵罐内，装料系数为65%~75%，通入空气搅拌1~2 min，混合均匀，然后密封盖口，高压蒸汽灭菌1h，灭菌完成后，等到发酵罐内培养基温度降至30℃以下时，按照9%~11%的接种量将杏鲍菇初级发酵液从接种口接入发酵罐内，发酵培养5~7d，获得富硒杏鲍菇液体菌种。
2.按照权利要求1所述的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，其特征在于，所述步骤2中，种子液培养基的配方为：马铃薯180~220g/L，葡萄糖10~14g/L，麦芽糖6~8g/L， 番茄汁20~30mL/L，牛肉膏1~2g/L，KH2PO4 0.9~1.1g/L，MgSO4 0.4~0.6g/L，CaCl2 0.3~0.5g/L，pH自然。
3.按照权利要求1所述的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，其特征在于，所述步骤3中，超声波辐照处理采用的设备为CY-5D超声波生物促进生长仪。
4.按照权利要求1所述的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，其特征在于，所述步骤4中，初级发酵培养基的配方为：葡萄糖30~34g/L，玉米粉21~25g/L，胡萝卜7~10g/L，花生粕3~4g/L，米糠2.1~2.3g/L，茶籽粕2.5~3.1g/L，海藻粉1.7~2.5g/L，大豆油0.5~0.7mL/L，生育酚4~5 mg/L，ZnSO4 300~350mg/L，KNO3 0.8~1.2g/L，三十烷醇1.4~1.8mg/L，KH2PO41.8~2.2g/L，MgSO4 0.9~1.1g/L，pH值为6.0~6.4。
5.按照权利要求1所述的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，其特征在于，所述步骤2和步骤4中摇床振荡培养的温度为24~26℃，转速为145~155r/min。
6.按照权利要求1所述的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，其特征在于，所述步骤5中富硒发酵培养基的配方为：可溶性淀粉20~26g/L，燕麦麸皮18~24g/L，红糖6~10g/L，平菇菌糠6.6~8.0g/L，玉米芯2.2~3.0g/L，豆粕粉5.5~6.5g/L，富硒酵母粉2.6~3.0g/L，苦荞皮壳5.9~6.5g/L，胡麻茎杆粉3.3~3.9g/L，KH2PO4 1.8~2.2g/L，MgSO4 0.9~1.1g/L，醋酸钠 0.5~0.7g/L，Na2SeO3 28~32mg/L，氰钴胺50~60mg/L，棕榈酸1.8~2.4g/L，初始pH值为6.4~6.6。
7.按照权利要求1所述的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，其特征在于，所述步骤5中发酵培养参数为：培养温度24~26℃，搅拌机转速155~165r/min，前2d通气量为1:1（V/V/min），后3~5d通气量为1:0.5（V/V/min）。
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