CN110129205A - 一种白灵菇液体菌种培养基及白灵菇液体菌种制备方法 - Google Patents

一种白灵菇液体菌种培养基及白灵菇液体菌种制备方法 Download PDF

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程显好
杨树德
宋学超
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    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
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Abstract

本发明涉及一种白灵菇液体菌种培养基及白灵菇菌种制备方法,包括葡萄糖、蔗糖、麸皮、蛋白胨、硫酸铵、硫酸镁、磷酸氢二钾和维生素,其重量分数为:葡萄糖0‑1%、蔗糖0‑1%、麸皮2%‑4%、蛋白胨0.1%‑0.3%、硫酸镁0.1%‑0.3%、磷酸氢二钾0.1%‑0.3%、马铃薯15%‑25%、羧甲基纤维素钠0.1%‑1%和维生素0.01%。利用本发明可以获得白灵菇菌丝体,不仅缩短了生产周期,还扩大了产量,并且易于工厂化控制。

Description

一种白灵菇液体菌种培养基及白灵菇液体菌种制备方法
技术领域
本发明涉属于食用菌培养技术领域,具体涉及一种白灵菇液体菌种培养基及白灵菇液体菌种的制备方法。
背景技术
深层发酵技术应用在食用菌领域始于1948年美国科学家H.Humfeld等,他们成功地对蘑菇进行了深层发酵。十年后,即1958年J.Szuecs首次用发酵罐又培养出羊肚菌的菌丝体,1975-1977年日本杉恒武等,用1%有机酸或0.5%酵母膏等材料配成液体培养基,培养出了大量香菇菌丝体。我国最早是1960年上海植物生理研究所陈美聿等进行了香菇深层发酵研究。1979年上海师范学院杨庆尧开始研究香菇、金针菇等的深层发酵,并培养液体菌种进行栽培试验。20世纪80年代以后食用菌发酵技术有了迅速发展,食用菌深层发酵和中小型发酵设备研制的报道日益增多。该项技术引起人们越来越多的关注,是因为用深层发酵的方法有着明显优越性,在液体深层培养过程中,菌种细胞能在反应器内处于最适温度、酸碱度、氧气和碳氢比条件下生长,呼吸作用所产生的废气又能及时排出,故新陈代谢旺盛,菌种分裂迅速,在短短几天内就可获得大量的菌丝体。
白灵菇是一种食用和药用价值都很高的珍稀食用菌,深受人们喜爱,然而传统人工栽培白灵菇子实体生产周期长,生产条件不易控制,产量低,使其不能满足需求。发明内容
本发明为了克服现有技术的不足,提供了一种白灵菇液体菌种培养基及白灵菇液体菌种的制备方法,利用本方法可以获得白灵菇菌丝体,不仅缩短了生产周期,还扩大了产量,并且易于工厂化控制。
为了解决上述技术问题,本发明提供了如下的技术方案:其特征在于由下述重量份数的成分制成:葡萄糖0-1%、蔗糖0-1%、麸皮2%-4%、蛋白胨0.1%-0.3%、硫酸镁0.1%-0.3%、磷酸氢二钾0.1%-0.3%、马铃薯15%-25%、羧甲基纤维素钠0.1%-1%和维生素0.01%。
作为本发明的一种优选技术方案,所述葡萄糖、蔗糖、麸皮、蛋白胨、硫酸铵、硫酸镁和磷酸氢二钾各自成分分别为葡萄糖0.5%、蔗糖0.5%、麸皮4%、蛋白胨0.2%、硫酸镁0.1%、磷酸氢二钾0.2%、马铃薯20%和羧甲基纤维素钠0.5%。
白灵菇液体菌种的制备方法,包括如下步骤:
第一步,培养基配置:将原料中的葡萄糖、蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾溶于水中充分搅拌,直至溶解成半成品溶液,再将所述原料中的麸皮、蛋白胨、硫酸铵加入所述半成品溶液中搅拌溶解,并去泡,制成液体培养基;
第二步,培养基调整:用pH调节剂调整所述液体培养基的pH值;
第三步,培养基灭菌:将所述液体培养基倒入种子罐内,送入灭菌设备内进行至少30min的灭菌,在不损失营养的情况下,杀灭所述液体培养基中的细菌;
第四步,接种:灭菌完成后,500mL摇瓶装量150mL,接种3块0.5cm2等量菌块,置旋转式摇床,25℃振荡培养,转速180r/min,7天后,将长满白灵菇菌丝体的一级菌种接到各组培养基中,接种量10%,上摇床培养。
作为本发明的一种优选技术方案,所述第二步中,所述液体培养基的pH值调节为6。
作为本发明的一种优选技术方案,所述第三步中,在对所述液体培养基灭菌时,保持温度123℃,压力为1.2个标准大气压下灭菌。
本发明所达到的有益效果是:一种白灵菇液体培养基,利用本方法来获得白灵菇菌丝体,缩短生产周期,扩大产量,并且易于工厂化控制。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的优选实施例进行说明,应当理解,此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明,并不用于限定本发明。
实施例1:
葡萄糖、蔗糖、麸皮、蛋白胨、硫酸铵、硫酸镁和磷酸氢二钾各自成分分别为葡萄糖0.5%、蔗糖0.5%、麸皮4%、蛋白胨0.2%、硫酸镁0.1%、磷酸氢二钾0.2%、马铃薯20%和羧甲基纤维素钠0.5%。
将原料中的葡萄糖、蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾溶于水中充分搅拌,直至溶解成半成品溶液,再将所述原料中的麸皮、蛋白胨、硫酸铵加入所述半成品溶液中搅拌溶解,并去泡,制成液体培养基。调整液体培养基的pH值为6,将所述液体培养基倒入种子罐内,送入灭菌设备内进行至少30min的灭菌,在不损失营养的情况下,杀灭所述液体培养基中的细菌。灭菌完成后,500mL摇瓶装量150mL,接种3块0.5cm2等量菌块,置旋转式摇床,25℃振荡培养,转速180r/min,7天后,将长满白灵菇菌丝体的一级菌种接到各组培养基中(接种量约10%),上摇床培养。
实施例2:
葡萄糖、麸皮、蛋白胨、硫酸镁和磷酸氢二钾各自成分分别为葡萄糖1%、麸皮2%、蛋白胨0.1%、硫酸镁0.1%、磷酸氢二钾0.2%、马铃薯20%和羧甲基纤维素钠0.5%。
将原料中的葡萄糖、硫酸镁、磷酸二氢钾溶于水中充分搅拌,直至溶解成半成品溶液,再将所述原料中的麸皮、蛋白胨加入所述半成品溶液中搅拌溶解,并去泡,制成液体培养基。调整液体培养基的pH值为6,将所述液体培养基倒入种子罐内,送入灭菌设备内进行至少30min的灭菌,在不损失营养的情况下,杀灭所述液体培养基中的细菌。灭菌完成后,500mL摇瓶装量150mL,接种3块0.5cm2等量菌块,置旋转式摇床,25℃振荡培养,转速180r/min,7天后,将长满白灵菇菌丝体的一级菌种接到各组培养基中(接种量约10%),上摇床培养。
实施例3:
蔗糖、麸皮、蛋白胨、硫酸铵、硫酸镁和磷酸氢二钾各自成分分别为蔗糖1%、麸皮3%、蛋白胨0.2%、硫酸镁0.15%、磷酸氢二钾0.2%、马铃薯20%和羧甲基纤维素钠0.5%。
将原料中的蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾溶于水中充分搅拌,直至溶解成半成品溶液,再将所述原料中的麸皮、蛋白胨加入所述半成品溶液中搅拌溶解,并去泡,制成液体培养基。调整液体培养基的pH值为6,将所述液体培养基倒入种子罐内,送入灭菌设备内进行至少30min的灭菌,在不损失营养的情况下,杀灭所述液体培养基中的细菌。灭菌完成后,500mL摇瓶装量150mL,接种3块0.5cm2等量菌块,置旋转式摇床,25℃振荡培养,转速180r/min,7天后,将长满白灵菇菌丝体的一级菌种接到各组培养基中(接种量约10%),上摇床培养
需要说明的是,本发明为一种白灵菇液体培养基,麸皮是影响白灵菇菌丝体生长的主要因素,其次是葡萄糖+蔗糖和蛋白胨+硫酸铵,影响最小的是硫酸镁+磷酸二氢钾,其中四种因素的大小为麸皮>葡萄糖+蔗糖>硫酸镁+磷酸二氢钾>硫酸镁+磷酸二氢钾,最佳培养基为葡萄糖0.5%、蔗糖0.5%、麸皮4%、蛋白胨0.2%、硫酸镁0.1%、磷酸氢二钾0.2%、马铃薯20%、羧甲基纤维素钠0.5%和维生素0.01%。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种白灵菇液体菌种培养基,其特征在于由下述重量份数的成分制成:葡萄糖0-1%、蔗糖0-1%、麸皮2%-4%、蛋白胨0.1%-0.3%、硫酸镁0.1%-0.3%、磷酸氢二钾0.1%-0.3%、马铃薯15%-25%、羧甲基纤维素钠0.1%-1%和维生素0.01%。
2.根据权利要求1所述的一种白灵菇液体菌种培养基,其特征在于:所述葡萄糖、蔗糖、麸皮、蛋白胨、硫酸铵、硫酸镁和磷酸氢二钾各自成分分别为葡萄糖0.5%、蔗糖0.5%、麸皮4%、蛋白胨0.2%、硫酸镁0.1%、磷酸氢二钾0.2%、马铃薯20%和羧甲基纤维素钠0.5%。
3.白灵菇液体菌种制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
第一步,培养基配置:将原料中的葡萄糖、蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾溶于水中充分搅拌,直至溶解成半成品溶液,再将所述原料中的麸皮、蛋白胨、硫酸铵加入所述半成品溶液中搅拌溶解,并去泡,制成液体培养基;
第二步,培养基调整:用pH调节剂调整所述液体培养基的pH值;
第三步,培养基灭菌:将所述液体培养基倒入种子罐内,送入灭菌设备内进行至少30min的灭菌,在不损失营养的情况下,杀灭所述液体培养基中的细菌;
第四步,接种:灭菌完成后,500mL摇瓶装量150mL,接种3块0.5cm2等量菌块,置旋转式摇床,25℃振荡培养,转速180r/min,7天后,将长满白灵菇菌丝体的一级菌种接到各组培养基中,接种量10%,上摇床培养。
4.根据权利要求3所述的白灵菇液体菌种的制备方法,其特征在于:所述第二步中,液体培养基的 pH 值调节为6-6.5。
5.根据权利要求3所述的白灵菇液体菌种的制备方法,其特征在于:所述的第三步中,在对所述液体培养基灭菌时,保持温度123℃,压力为1.2个标准大气压下灭菌。
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