CN113317131A - 一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法 - Google Patents

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文庭池
孟娟
别平
康冀川
徐彦军
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Guizhou Fengyuan Modern Agriculture Co ltd
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Abstract

本发明涉及一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法。包括以下具体步骤：（1）二级种液体菌种培养基的制备；（2）二级种液体菌种灭菌与接种；（3）二级种液体菌种培养；（4）三级种固体菌棒培养基制备；（5）三级种固体菌棒灭菌与接种；（6）三级种固体菌棒培养。本发明采用全新配方用于冬荪鬼笔二级液体菌种培养，培养时间短、纯度高、活力强、发菌快速。由本发明全新配方制成的三级种菌棒不需要堆料发酵，可节约时间，减少人工成本，有助于冬荪鬼笔产量与品质的提高。

Description

一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法
技术领域
本发明涉及食用菌栽培领域，特别涉及一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法。
背景技术
冬荪鬼笔（Phallus dongsun ）隶属于鬼笔目(Phallales)鬼笔科(Phallaceae)鬼笔属(Phallus)，是一种大型的食药用珍稀真菌。冬荪鬼笔幼时菌蕾球形，白色，成熟时菌蕾长开形成上部钟形菌盖，墨绿色，网格；菌柄白色，中空，近圆筒形，海绵状；基部有苞状菌托，白色。冬荪鬼笔富含营养，美味可口，深得消费者喜爱，还具有一定的药用价值。目前对冬荪鬼笔的研究不够深入，人工栽培技术不成熟，栽培现状呈现周期长，产量低，农民高投入，低收入。基于目前冬荪鬼笔栽培面临的难题，该发明着手于获得高产优质的液体菌种及生产菌棒的配套方法，以期推动冬荪鬼笔的产业发展。
发明内容
本发明的目的在于筛选及优化二级种与三级种菌棒的碳源、氮源、无机盐等，为冬荪鬼笔种植技术提供一种液体菌种配方与一种优质菌棒配方，宗旨在于生产优质高产的冬荪鬼笔菌棒，提高冬荪鬼笔发菌效率，缩短发菌时间。
本发明的技术方案是：一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，包括以下步骤：
（1）二级种液体菌种培养基的制备：按质量比称取25% 蔗糖，1% 黄豆粉，1.5% 磷酸二氢钾，1.5% 七水硫酸镁，1% 硫酸铵，VB1 50mg，用蒸馏水混合定溶至1000mL，液体培养基；
（2）二级种液体菌种灭菌与接种：121 ℃ 高温灭菌大于30 min，冷却至20-30℃后，接入冬荪鬼笔菌母种；
（3）二级种液体菌培养：冬荪鬼笔菌种接种后在20 ℃，110r/min的恒温摇床中暗培养8d得到菌球大小均匀、培养基清澈的二级液体菌种；
（4）三级种固体菌棒培养基制备：按重量比称取原料制作三级菌种培养基：70% 主料（构树木屑）、10 % 辅料（黄豆茎秆碎屑）、3 % 玉米芯碎屑，2 % 硫酸镁，2 %磷酸二氢钾，1 % 碳酸钙，1% 白糖，1 % VB1；
（5）三级种固体菌棒灭菌与接种：将步骤（4）中得到的培养基在121℃、101kpa环境下进行3小时高温高压灭菌；待菌袋冷却至30℃ 以下；在超净工作台上打开菌袋透气盖，将步骤（3）中获得的二级种液体菌种用5 mL无菌注射器接种5 mL到菌袋中间部位，盖好透气盖；
（6）三级种固体菌棒培养：将步骤（5）接菌完成后的菌袋避光通风培养，待菌丝发满菌后，得到可移入林下覆土栽培的菌棒。
上述步骤（1）中所述二级种液体菌种培养基浓度为30.05g/L。
上述步骤（1）中所述二级种液体菌种培养基pH 6.0。
上述步骤（2）中，121 ℃ 高温灭菌30 min，冷却至25℃后，接入冬荪鬼笔母种。
上述步骤（4）中，按重量比称取三级菌种培养基的原料后进行均匀搅拌，配制成湿度55%-65%，pH 6.0，之后装入规格15*18*0.005cm的聚丙烯菌袋中，盖好透气盖。
上述步骤（5）中：将步骤（4）中得到的培养基在121℃、101kpa环境下进行3小时高温高压灭菌；待菌袋冷却至20-30℃；打开菌袋透气盖，将步骤（3）中获得的二级液体菌种接种5 mL到菌袋中间部位。
上述步骤（6）是将步骤（5）接菌完成后的菌袋于室温 18-25 ℃，湿度保持在40%-60%避光通风培养。
采用上述技术工艺，本发明与现有技术相比具有的优点：冬荪鬼笔二级种液体菌种培养时间短、纯度高、发菌齐、菌丝强壮更有利于三级种的接种，种植出的菇质优且产量高。由此方法制成的三级种菌棒不需要堆料发酵，可节约时间，减少人工成本，经过筛选优化碳源、氮源、无机盐等有助于冬荪鬼笔产量与品质的提高。
说明书附图
图1为本发明的冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法示意图。图中：a:木屑, b-d:装袋, e:灭菌, f:冷却, g:接液体菌种, h:培养, i:菌棒成品。
具体实施方式
一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法包括以下步骤：
（1）二级种液体菌种培养基的制备：按质量比称取25% 蔗糖，1% 黄豆粉，1.5% 磷酸二氢钾，1.5% 七水硫酸镁，1% 硫酸铵，VB1 50mg。 pH 6.0， 用蒸馏水混合定溶至1000mL，液体培养基。
（2）二级种液体菌种灭菌与接种：121 ℃ 高温灭菌30 min，冷却至25℃后，接入冬荪鬼笔母种。
（3）二级种液体菌种培养：冬荪鬼笔菌种接种后在20 ℃，110r/min的恒温摇床中暗培养8d得到菌球大小均匀、培养基清澈的二级液体菌种。液体菌种培养时间仅需要8d，而固体菌种培养的时间至少两个月才能长满菌袋，液体菌种培养污染率低、纯度高、发菌齐、菌丝强壮更便于三级种的接种，二级种液体种在接种过程直接注射到三级种中，污染率小；而二级种固体菌种还需要把菌棒掰成小碎块，再放入三级种中，操作过程复杂时间长，污染率大。
（4）三级种固体菌棒培养基制备：按重量比称取三级菌种培养基：70%主料（构树）、10 % 辅料（黄豆茎秆碎屑）、3 % 玉米芯碎屑，2 % 硫酸镁，2 %磷酸二氢钾，1 % 碳酸钙，1%白糖，1 % VB1。进行均匀搅拌后配制成湿度55%-65%，pH 6.0，之后装入规格15*18*0.005的聚丙烯菌袋中，盖好透气盖。三级种菌棒不需要堆料发酵，可节约堆料发酵所需要的至少半个月的时间，减少堆料时翻堆所需要的人工成本。
（5）三级种固体菌棒灭菌与接种：将步骤（4）中得到的培养基在121℃、101kpa环境下进行3小时高温高压灭菌。待菌袋冷却至30℃以下。打开菌袋透气盖，将步骤（3）中获得的二级液体菌种用5 mL无菌注射器接种5 mL到菌袋中间部位，盖好透气盖。
（6）三级种固体菌棒培养：将步骤（5）接菌完成后于室温 18-25 ℃，湿度保持在40%-60% 避光通风培养，待菌丝发满菌后，得到可移入林下覆土栽培的菌棒。
（7）菌棒成品的营养成分测定结果显示，其蛋白质含量为4.17 g/100g；含有20种氨基酸，其中含量最高的是谷氨酰胺，达3.36 g/100g，含量最低的为蛋氨酸0.01 g/100g；水份为66.20 g/100g；灰分为2.40 g/100g；重金属含量中铅（Pb）为0.477 mg/kg、砷（As）为0.105 mg/kg、镉（Cd）为0.186 mg/kg、汞（Hg）为0.00282 mg/kg；微量元素中，铁（Fe）的含量最高达137.00 mg/kg，最低的是钴（Co）仅0.084 mg/kg。
以上所述仅为本发明的技术特点,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征包括以下步骤：
（1）二级种液体菌种培养基的制备：按质量比称取25% 蔗糖，1% 黄豆粉，1.5% 磷酸二氢钾，1.5% 七水硫酸镁，1% 硫酸铵，VB1 50mg， 用蒸馏水混合定溶至1000mL，液体培养基；
（2）二级种液体菌种灭菌与接种：121 ℃ 高温灭菌大于30 min，冷却至20-30℃ 后，接入冬荪鬼笔菌母种；
（3）二级种液体菌种培养：冬荪鬼笔斜面种接种后在20 ℃，110r/min的恒温摇床中暗培养，8d内得到菌球大小均匀、培养基清澈的二级液体菌种；
（4）三级种固体菌棒培养基制备：按重量比称取原料制作三级菌种培养基：70% 主料（构树木屑）、10 % 辅料（黄豆茎秆碎屑）、3 % 玉米芯碎屑，2 % 硫酸镁，2 %磷酸二氢钾，1% 碳酸钙，1% 白糖，1 % VB1；
（5）三级种固体菌棒灭菌与接种：将步骤（4）中得到的培养基在121℃、101kpa环境下进行3小时高温高压灭菌；待菌袋冷却至30℃以下；在超净工作台上打开菌袋透气盖，将步骤（3）中获得的二级种液体菌种用5 mL无菌注射器接入5 mL到菌袋中间部位，盖好透气盖；
（6）三级种固体菌棒培养：将步骤（5）接菌完成后的菌袋避光通风培养，待菌丝发满菌后，得到可移入林下覆土栽培的菌棒。
2.根据权利要求1所述一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征在于步骤（1）中所述二级种液体菌种培养基浓度为30.05g/L。
3.根据权利要求1所述一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征在于步骤（1）中所述二级种液体菌种培养基pH 6.0。
4.根据权利要求1所述一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征在于所述步骤（2）中，121 ℃ 高温灭菌30 min，冷却至25℃后，接入冬荪鬼笔母种。
5.根据权利要求1所述一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征在于所述步骤（4）是按重量比称取三级菌种培养基的原料后进行均匀搅拌后配置成湿度55%-65%，pH 6.0，之后装入规格15*18*0.005cm的聚丙烯菌袋中，盖好透气盖。
6.根据权利要求1所述一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征在于所述步骤（5）中：将步骤（4）中得到的培养基在121℃、101kpa环境下进行3小时高温高压灭菌；待菌袋冷却至20-30℃；打开菌袋透气盖，将步骤（3）中获得的二级种液体菌种接入5mL到菌袋中间部位。
7.根据权利要求1所述一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征在于所述步骤（6）是将步骤（5）接菌完成后的菌袋于室温 18-25 ℃，湿度保持在40%-60%避光通风培养。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113940233A (zh) * 2021-10-11 2022-01-18 贵州省生物研究所 一种工厂化冬荪液体菌种及其制备方法
CN116076305A (zh) * 2023-03-14 2023-05-09 贵州省生物研究所 一种冬荪及竹荪原种的培养基及培养方法

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