CN107531680B - 一种毒素及其中间体的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种新毒素及其中间体的制备方法。具体而言，本发明涉及一种新毒素及其中间体通式(III)和(IV)的制备方法，以及一种用于合成通式(I)所示的制备方法，所述方法包含通式(III)所示的手性化合物经过一系列的上保护基、脱保护基和酰胺化反应得到通式(I)所示的化合物。该方法具有反应条件温和，操作简便，光学纯度高和合成收率高等优点，适于大规模生产。

Description

一种毒素及其中间体的制备方法
技术领域
本发明涉及一种新毒素及其中间体的制备方法。
背景技术
发明人在WO2016/127790中涉及一类全新结构的配体-细胞毒性药物偶联物，该配体-细胞毒性药物偶联物及含有其的药物组合物通过受体调节在制备治疗癌症的药物中的用途中具有良好的效果，在合成该类配体-细胞毒性药物偶联物时，本发明通式(I)所示化合物是重要的中间体。
Figure GPA0000248501080000031
该中间体与2004年美国西雅图基因公司在专利WO2005/038392中首次提到 Mc-MMAF结构相似，西雅图基因公司公开了Mc-MMAF的合成路线，但是在合成路线中，没有详述制备Fmoc-Dolaproine(Fmoc-Dap)的具体合成过程及其原始原料，Fmoc-Dolaproine(Fmoc-Dap)与合成本发明通式(I)的关键中间体通式(IV) 具有相似的化学结构。
Figure GPA0000248501080000032
因此，发明人在目前合成Fmoc-Dolaproine(Fmoc-Dap)的现有技术中，发现了相关的合成路线，例如George R.Pettit和Matthew P.Grealish在J.Org.Chem. 2001.66.8964-8642中提到直接上甲基的合成方法(如方案一)，以及在Synthesis. 1996.720中涉及的水解后上甲基的方法(如方案二)。
Figure GPA0000248501080000041
方案二
在合成本发明的并环底物通式(IV)时，发明人采用上述合成Fmoc-Dolaproine(Fmoc-Dap)的合成方法，在原有底物的前提下，都可以得到较高的收率，但是在得到本发明的并环底物通式(IV)时，目标产物的收率很低且有较多消旋物产生，因此利用现有的合成方法大量合成通式(I)所示的化合物还存在不少困难和不足，有必要开发高收率并适用于大规模合成通式(I)所示的化合物的方法。
发明内容
针对本发明的新毒素及其中间体的合成工艺存在的缺点，本发明提供了一条合成通式(I)所示化合物的新路线，所述方法包含通式(III)所示的手性化合物经过一系列的上保护基、脱保护基和酰胺化反应得到通式(I)所示的化合物。该方法克服现有技术对底物的限制，具有反应条件温和，操作简便，光学纯度高和合成收率高等优点，适于大规模生产。
本发明涉及一种通式(III)所示的化合物，
Figure GPA0000248501080000042
其中：
A为3-8元环，优选3元环；
R1为氢原子或氨基保护基，优选Boc、Fmoc、Alloc、Troc、Teoc、CBz、 Tosyl、Nosyl和t-Bu；
R2为氢原子或羧基保护基，优选DMB、Bn、Allyl、PfP、Me、PMB、MEM 和t-Bu。
本发明还涉及一种如所述的通式(III)所示化合物的制备方法，其特征在于，其由含手性辅基(R3)的通式(II)所示手性化合物在碱性条件下水解或任选进一步上羧基保护基得到通式(III)所示化合物的步骤，
Figure GPA0000248501080000051
其中：
手性辅基(R3)选自：
Figure GPA0000248501080000052
X为S或O；
碱性试剂优选氢氧化钠、氢氧化钾、氢化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯或氢氧化锂，更优选氢氧化锂；
R1～R2如通式(III)中定义。
本发明还涉及一种通式(IV)所示的化合物，
Figure GPA0000248501080000053
其中：
A为3-8元环，优选3元环；
R1为氢原子或氨基保护基，优选Boc、Fmoc、Alloc、Troc、CBz、Teoc、 Tosyl、Nosyl和t-Bu；
R2为羧基保护基，优选DMB、Bn、Allyl、PfP、Me、PMB、MEM和t-Bu；
Rx选自烷基和环烷基，其中所述的烷基和环烷基各自独立地任选被选自烷基、卤代烷基、卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；优选甲基。
本发明还涉及一种如所述的通式(IV)所示化合物的制备方法，其特征在于，其由通式(III)所示化合物与烷基化试剂反应，生成通式(IV)所示的化合物的步骤，
Figure GPA0000248501080000061
其中：
所述的烷基化试剂选自卤代烷、硫酸二甲酯、碳酸二甲酯、磺酸酯、磷酸三甲酯和Me3 +BF4 -；优选碘甲烷和Me3 +BF4 -；
A、R1、R2和Rx如通式(IV)中定义。
本发明还涉及一种如所述的通式(IV)所示化合物的制备通式(V)所示化合物的方法，其特征在于，其由通式(IV)所示化合物脱去羧基保护基，生成通式 (V)所示的化合物的步骤，
Figure GPA0000248501080000062
其中：
A、R1、R2和Rx如通式(IV)中定义。
本发明还涉及一种如所述的制备(V)所示化合物的方法，其特征在于，还进一步包含制备通式(IV)所示的化合物的步骤，
Figure GPA0000248501080000063
其中：
A、R1、R2和Rx如通式(IV)中定义。
本发明还涉及一种如所述的制备(V)所示化合物的方法，其特征在于，还进一步包含制备通式(III)所示化合物的制备方法步骤，
Figure GPA0000248501080000071
其中：
A、R1、R2和Rx如通式(IV)中定义。
本发明还涉及一种通式(I)所示的化合物的制备方法，
Figure GPA0000248501080000072
n为1、2、3、4或5；
其特征在于，所述方法包括由含手性辅基(R3)的通式(II)所示手性化合物在碱性条件下水解或任选进一步上羧基保护基得到通式(III)所示化合物的步骤；由通式(III)所示化合物与卤代烷发生烷基化反应，生成通式(IV)所示的化合物的步骤，通式(IV)化合物脱去羧基保护基得到通式(V)化合物；和由通式(V) 所示的化合物经过一系列反应生成通式(I)所示的化合物的步骤；
Figure GPA0000248501080000073
其中：
A为3-8元环，优选3元环；
R为卤素，优选氟、氯、溴或碘，最优选氟；
R1为氨基保护基，优选Boc、Fmoc、Alloc、Troc、CBz、Teoc、Tosyl、 Nosyl和t-Bu；
R2为羧基保护基，优选DMB、Bn、Allyl、PfP、Me、PMB、MEM和t-Bu；
Rx选自烷基和环烷基，其中所述的烷基和环烷基各自独立地任选被选自烷基、卤代烷基、卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；优选Rx为甲基；
n为1、2、3、4或5。
本发明还涉及一种如所述的通式(I)所示化合物的制备方法，其特征在于还进一步包括通式(V)所示的化合物脱氨基保护得到通式(VI)所示的化合物的步骤，
Figure GPA0000248501080000081
其中：
A、R1和Rx如通式(I)中定义。
本发明还涉及一种如所述的通式(I)所示化合物的制备方法，其特征在于还进一步包括通式(VI)所示的化合物上Fmoc保护基得到通式(VIII)所示的化合物的步骤，
Figure GPA0000248501080000082
其中：
A和Rx如通式(I)中定义。
本发明还涉及所述的式(I)所示化合物的制备方法，其特征在于还进一步包括下述步骤：通式(IX)所示的化合物进一步得到羧基保护基通式(X)所示的化合物，该通式(X)所示的化合物脱去Fmoc后得到通式(XI)所示的化合物，
Figure GPA0000248501080000083
其中，R4为羧基保护基，优选DMB；
R和n如通式(I)中定义。
本发明还涉及所述的通式(I)所示化合物的制备方法，其特征在于还进一步包括下述步骤：通式(VIII)所示的化合物进一步与通式(XI)所示的化合物在缩合剂的作用下发生酰胺化反应，得到通式(XII)所示的化合物，
Figure GPA0000248501080000084
其中，所述的缩合剂优选1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N，N′- 二环己基碳化二亚胺、N，N′-二异丙基碳二酰亚胺、O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑 -1-基-氧基三吡咯烷基磷，更优选2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯；
A、R、R4、Rx和n如通式(I)中定义。
本发明还涉及所述的通式(I)所示化合物的制备方法，其特征在于还进一步包括下述步骤：
Figure GPA0000248501080000091
其中：
1)通式(XII)所示的化合物在碱性条件下脱去Fmoc保护基得到通式(I-E) 所示的化合物；
2)通式化合物(I-E)与通式化合物(I-D)在缩合剂的作用下发生酰胺化反应得到通式(I-C)所示的手性中间体；
3)通式化合物(I-C)在碱性条件下脱去Fmoc保护基得到通式(I-B)所示的手性化合物；
4)通式化合物(I-B)与6-马来酰亚胺基己酸在缩合剂的作用下发生酰胺化反应得到通式(I-A)所示的化合物；
5)通式化合物(I-A)在酸性条件下脱去羧基保护基得到通式(I)所示的目标化合物；
R4为羧基保护基，优选DMB；
A、R、Rx和n如通式(I)中定义。
本发明还涉及所述的通式(I)所示化合物的制备方法，其中所述的步骤1) 或步骤3)中的碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类，所述的有机碱类优选三乙胺、二乙胺、N，N-二异丙基乙胺、吡啶、六甲基二硅基胺基钠，正丁基锂、叔丁醇钾或四丁基溴化铵，所述的无机碱类优选氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾或碳酸铯，更优选为二乙胺。
本发明还涉及所述的通式(I)所示化合物的制备方法，其中所述的步骤2) 或步骤4)中的缩合剂优选1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N，N′-二环己基碳化二亚胺、N，N′-二异丙基碳二酰亚胺、O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑 -N，N，N′，N′-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑 -1-基-氧基三吡咯烷基磷，更优选2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯。
本发明还涉及所述的通式(I)所示化合物的制备方法，其中所述的步骤5) 中的酸性条件的试剂优选氯化氢溶液、盐酸、硝酸、磷酸、对苯甲磺酸、 Me3SiCl、TMSOTf、三氟乙酸或硫酸，更优选三氟乙酸。
本发明还涉及所述的通式(I)所示化合物的制备方法，其特征在于还进一步包括通式(V)所示的化合物进一步与通式(XI)所示的化合物在缩合剂的作用下发生酰胺化反应，得到通式(VII)所示的化合物的步骤；
Figure GPA0000248501080000101
其中：
所述的缩合剂优选1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N，N′-二环己基碳化二亚胺、N，N′-二异丙基碳二酰亚胺、O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑 -N，N，N′，N′-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑 -1-基-氧基三吡咯烷基磷，更优选2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯；
A、R1、R、R4、Rx和n如通式(I)中定义。
本发明还涉及所述的通式(I)所示化合物的制备方法，其特征在于还进一步包括下述步骤：
Figure GPA0000248501080000111
1)通式(V)所示的化合物进一步与通式(XI)所示的化合物在缩合剂的作用下发生酰胺化反应，得到通式(VII)所示的化合物的步骤；
2)通式(VII)所示的化合物碱性条件下脱去氨基保护基得到通式(I-E)的化合物；
3)通式化合物(I-E)与通式化合物(I-D)在缩合剂的作用下发生酰胺化反应得到通式(I-C)所示的手性中间体；
4)通式化合物(I-C)在碱性条件下脱去Fmoc保护基得到通式(I-B)所示的手性化合物；
5)通式化合物(I-B)与6-马来酰亚胺基己酸在缩合剂的作用下发生酰胺化反应得到通式(I-A)所示的化合物；
6)通式化合物(I-A)在酸性条件下脱去羧基保护基得到通式(I)所示的目标化合物；
其中：
所述的步骤1)、步骤3)或步骤5)中的缩合剂优选1-(3-二甲氨基丙基)-3- 乙基碳二亚胺盐酸盐、N，N′-二环己基碳化二亚胺、N，N′-二异丙基碳二酰亚胺、 O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷，更优选2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯；
所述的步骤2)或步骤4)中的碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类，所述的有机碱类优选三乙胺、二乙胺、N，N-二异丙基乙胺、吡啶、六甲基二硅基胺基钠，正丁基锂、叔丁醇钾或四丁基溴化铵，所述的无机碱类优选氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾或碳酸铯，更优选为二乙胺；
所述的步骤6)中的酸性条件的试剂优选氯化氢溶液、盐酸、硝酸、磷酸、对苯甲磺酸、Me3SiCl、TMSOTf、三氟乙酸或硫酸，更优选三氟乙酸；
R4为羧基保护基，优选DMB；
A、R1、R、Rx和n如通式(I)中定义。
本发明中制备通式(VIII)所示的化合物的步骤可通过一锅法合成，包括通式(IV)所示的化合物通过脱去羧基和氨基保护基后在上Fmoc保护基得到通式(VIII) 所示的化合物的步骤；
Figure GPA0000248501080000121
其中：
A、R1、R2和Rx如通式(I)中定义。
本发明所述的通式(I)所示的新毒素的制备方法具有操作简单，反应条件温和，光学纯度高，合成效率高，合成收率高，适合工业化生产等特点，具有显著的社会效益和经济效益。
在本发明优选的实施方案中，在各个不同的通式化合物中，环A具有相同的结构，选自3-8元环，优选3元环；特别地，其中所述的环为环烷基环。
发明的详细说明
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个碳原子的烷基，更优选含有1至6个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2- 甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2，3-二甲基戊基、2，4-二甲基戊基、2，2-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2，3-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、2，2-二甲基己基、3，3-二甲基己基、4，4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2，2-二乙基戊基、正癸基、3，3-二乙基己基、2，2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2- 三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、 2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。
术语“螺环烷基”指5至20元的单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实例包括：
Figure GPA0000248501080000131
术语“稠环烷基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环烷基。稠环烷基的非限制性实例包括：
Figure GPA0000248501080000141
术语“桥环烷基”指5至20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：
Figure GPA0000248501080000142
所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实例包括茚基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。环烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包含3至 20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)m(其中m是整数0至2) 的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3 至12个环原子，其中1～4个是杂原子；最优选包含3至8个环原子，其中1～3 个是杂原子；最优选包含5至6个环原子，其中1～2或1～3个是杂原子。单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢咪唑基、二氢呋喃基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基、吡喃基、氮杂环丁烷基等，优选1、2、5-噁二唑基、吡喃基、哌啶基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基或吗啉基。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。
术语“螺杂环基”指5至20元的单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5 元/6元单螺杂环基。螺杂环基的非限制性实例包括：
Figure GPA0000248501080000151
术语“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7 至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实例包括：
Figure GPA0000248501080000152
术语“桥杂环基”指5至14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：
Figure GPA0000248501080000153
所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：
Figure GPA0000248501080000161
等。
杂环基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基。更优选苯基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，其非限制性实例包括：
Figure GPA0000248501080000162
芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
术语“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元，含1至3个杂原子；更优选为5元或6元，含1至2个杂原子；优选例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基、吡咯基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基等，优选为咪唑基、噻唑基、吡唑基或嘧啶基、噻唑基；更有选吡唑基或噻唑基。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：
Figure GPA0000248501080000163
杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
术语“羟基”指-OH基团。
术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。
术语“氨基”指-NH2。
术语“氧代基”指＝O。
所述的3-8元环选自碳环或杂环，所述的杂环包含若干个N、O、S等杂原子。
“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3 个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
本发明中“X选自A、B、或C”、“X选自A、B和C”、“X为A、B或C”、“X为A、B和C”等不同用语均表达了相同的意义，即表示X可以是A、B、C 中任意一种或几种。
缩写表：
Figure GPA0000248501080000171
Figure GPA0000248501080000181
具体实施方式
以下将结合具体实例详细地解释本发明，使得本专业技术人员更全面地理解本发明，具体实例仅用于说明本发明的技术方案，并不以任何方式限定本发明。
实施例
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ) 以10-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用BrukerAVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)，氘代氯仿(CDCl3)，氘代甲醇(CD3OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
MS的测定用FINNIGAN LCQAd(ESI)质谱仪(生产商：Thermo，型号：Finnigan LCQadvantage MAX)。
HPLC的测定使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪(Sunfire C18 150×4.6mm色谱柱)和Waters 2695-2996高压液相色谱仪(Gimini C18 150×4.6mm色谱柱)。
手性HPLC分析测定使用LC-10A vp(Shimadzu)或者SFC-analytical(BergerInstruments Inc.)；
薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法 (TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。
柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
手性制备柱层析使用Prep Star SD-1(Varian Instruments Inc.)或SFC-multigram (Berger Instruments Inc.)
激酶平均抑制率及IC50值的测定用NovoStar酶标仪(德国BMG公司)。
本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域己知的方法来合成，或可购买自ABCR GmbH&Co.KG，Acros Organics，Aldrich Chemical Company，韶远化学科技(AccelaChemBio Inc)、达瑞化学品等公司。
实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气氛或氮气氛下进行。
氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氩气或氮气气球。
氢气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球。
加压氢化反应使用Parr 3916EKX型氢化仪和清蓝QL-500型氢气发生器或 HC2-SS型氢化仪。
氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。
微波反应使用CEM Discover-S 908860型微波反应器。
实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。
实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)，反应所使用的展开剂的体系有：A：二氯甲烷和甲醇体系，B：正己烷和乙酸乙酯体系，C：石油醚和乙酸乙酯体系，D：丙酮，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节。
纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：A：二氯甲烷和甲醇体系，B：正己烷和乙酸乙酯体系，C：二氯甲烷和丙酮体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。
合成实施例1方法一
(S)-2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((3R，4S，5S)-4-((S)-2-((S)-2-(6-(2，5-二羰基-2，5-二氢 -1H-吡咯-1-基)-N-甲基己酰胺)-3-甲基丁酰胺)-N，3-二甲基丁酰胺)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸
Figure GPA0000248501080000191
Figure GPA0000248501080000201
第一步
(1S，3S，5S)-叔丁基3-((1R，2R)-1-羟基-2-甲基-3-((4R，5S)-4-甲基-2-氧代-5-苯基噁唑烷-3-基)-3-氧代丙基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸
将(4R，5S)-3-丙酰基-4-甲基-5-苯基-2-噁唑烷酮1b(14.7g，63.1mmol)溶解于120mL二氯甲烷中，冰浴冷却至0℃，滴加三乙胺(9.7mL，72.6mmol)和三氟甲磺酸二丁硼(65mL，65mmol)，加毕，搅拌反应1小时。反应液于干冰-丙酮浴中冷却至-78℃，将(1S，3S，5S)-叔丁基3-甲酰基-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸1a(12g， 56.8mmol，采用专利申请“WO2008081399”公开的方法制备而得)溶解于10mL二氯甲烷中，向反应液中滴加上述溶液，加毕，搅拌反应2小时。撤去干冰丙酮浴，反应液自然升温至0℃，在0℃下，反应1.5小时。向反应液中加入100mL磷酸盐缓冲液(pH＝7.0)和甲醇的混合溶液(V∶V＝1∶3)，再加入100mL甲醇和双氧水(30％) 的混合溶液(V∶V＝2∶1)，搅拌30分钟。反应液减压蒸除有机相，剩余水相用二氯甲烷(150mL×3)萃取，合并有机相，用水(100mL×2)洗涤，饱和氯化钠溶液(100mL ×2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系C纯化所得残余物，得到标题产物1c(15.6g，白色粉末)，产率：72.3％。
MS m/z(ESI)：445.4[M+1]
第二步
(2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-羟基-2-甲基丙酸
将1c(15.7g，35.3mmol)加入500mL四氢呋喃中，冰浴下，边缓慢滴加双氧水(15.3g，134mmol)边控制反应液温度在0℃，再加入一水氢氧化锂(2.5g，60 mmol)，加毕，撤去冰浴，反应液温度自然升至室温，搅拌反应16小时。冰浴下，向反应液中分批缓慢加入亚硫酸钠(17.8g，141.2mmol)，加毕，搅拌反应30分钟，再加入150mL水，撤去冰浴，反应液减压蒸除有机相，剩余水相用二氯甲烷(150 mL×3)洗涤，冰浴下，滴加2N的盐酸溶液至pH为2-3，用乙酸乙酯(100mL×3) 萃取，用水(500mL)洗涤，饱和氯化钠溶液(500mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到标题产物1d(9.3g，白色固体)，产率92％。
MS m/z(ESI)：284.3[M-1]
第三步
(1S，3S，5S)-叔丁基3-((1R，2R)-3-(苄氧基)-1-羟基-2-甲基-3-氧代丙基)-2-氮杂双环 [3.1.0]己烷-2-羧酸
将1d(9.3g，32.6mmol)溶解于120mL N，N-二甲基甲酰胺中，冰浴至0℃，加入碳酸氢钠(15.06g，179.3mmol)和溴化苄(27.9g，163.1mmol)，加毕，撤去冰浴，反应液于20℃搅拌16小时。冰浴下，向反应液中加入200mL饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯(150mL×3)萃取反应液，有机相依次用水(200mL)和饱和氯化钠溶液(150mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系C纯化所得残余物，得到标题产物1e(10.3g，油状物)，产率：84.2％。
MS m/z(ESI)：376.4[M+1]
第四步
(1S，3S，5S)-叔丁基3-((1R，2R)-3-(苄氧基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-2-氮杂双环 [3.1.0]己烷-2-羧酸
将1e(10.3g，27.4mmol)溶于90mL的N-甲基吡咯烷酮中，加入碘甲烷(18mL，234mmol)，分批加入60％的氢化钠(1.28g，32.1mmol)，搅拌反应30分钟。冰浴下，将200mL饱和氯化铵溶液降温至0℃，加入反应液，搅拌10分钟，用乙酸乙酯(300mL×3)萃取，有机相依次用水(200mL×2)和饱和氯化钠溶液(200mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系C纯化所得残余物，得到标题产物1f(9.3g，油状物)，产率：87.2％。
MS m/z(ESI)：390.4[M+1]
第五步
(2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸
将1f(9.3g，23.88mmol)溶于90mL四氢呋喃中，加入钯碳(10％，1.86g)，氢气置换三次，反应液加热至35℃，搅拌反应30分钟。反应液经硅藻土过滤，滤液浓缩干燥，得到粗品标题产物1g(8.2g，油状物)，粗产率约100％，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第六步
(2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸盐酸盐
将粗品1g(8.3g，27.7mmol)溶于氯化氢的1，4-二氧六环溶液(5.0M，50mL) 中，搅拌反应30分钟。反应液减压浓缩干燥，得到粗品标题产物1h(8.2g，浅黄色液体)，粗产率约100％，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第七步
(2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3- 甲氧基-2-甲基丙酸
将粗品1h(8.2g，41.2mmol)溶解于70mL水中，加入70mL的1，4-二氧六环，冰浴下冷却至0℃，加入N，N-二异丙基乙胺(31.9g，247.2mmol)。将9-芴甲基-N- 琥珀酰亚胺基羧酸酯(18.06g，53.56mmol)溶解于70mL的1，4-二氧六环中，将上述溶液加入到反应液中，加毕，撤去冰浴，反应液温度自然升至室温，搅拌反应 2.5小时。反应液减压蒸除有机相，加入100mL水，冰浴下滴加1N的盐酸至反应液pH为2，用二氯甲烷(300mL×3)萃取，有机相依次用水(300mL×2)和饱和氯化钠溶液(300mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化所得残余物，得到标题产物1i(8.7g，白色泡沫状固体)，产率：85％。
MS m/z(ESI)：422.4[M+1]
第八步
(S)-2，4-二甲氧基苄基2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-(2-氟苯基)丙酸
将(S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-(2-氟苯基)丙酸1j(13g，32.6mmol) 溶解于50mL二氯甲烷中，加入3，5-二甲氧基苯甲醇(5.93g，35.27mmol)，滴加N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(8.9mL，36.8mmol)，加毕，搅拌反应40小时。反应液依次用水(50mL)和饱和氯化钠溶液(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系C纯化所得残余物，得到标题产物 1k(34.2g，白色固体)，粗产率约100％，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI)：556.4[M+1]
第九步
(S)-2，4-二甲氧基苄基2-氨基-3-(2-氟苯基)丙酸
将1k(17g，30.6mmol)溶于40mL二氯甲烷中，加入二乙胺(80mL，0.78mmol)，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化所得残余物，得到标题产物1l(7.8g，白色粘稠物)，产率：76.4％。
MS m/z(ESI)：334.3[M+1]
第十步
(1S，3S，5S)-(9H-芴-9-基)甲基3-((1R，2R)-3-(((S)-1-((2，4-二甲氧基苄基)氧)-3-(2-氟苯基)-1-氧代丙基-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2- 羧酸
条件一：
将1i(2.5g，5.94mmol)和1l(2.04g，5.94mmol)溶于36mL二氯甲烷和N，N- 二甲基甲酰胺的混合溶液(V∶V＝5∶1)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(2.7g，7.13mmol)和N，N-二异丙基乙胺(3.1mL，17.8mmol)，加毕，20℃搅拌反应1小时。向反应液中加入100mL水，搅拌，分层，有机相依次用水(100mL×2)洗涤，饱和氯化钠溶液(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系C纯化所得残余物，得到标题产物 1m(3.9g，白色泡沫状固体)，产率：89.2％
条件二：
将化合物1i(9.1g，21.62mmol)，1l(7.5g，22.69mmol)和、HATU2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(9.9g，25.94mmol)溶于120mL二氯甲烷和N，N-二甲基甲酰胺的混合溶液(V∶V＝5∶1)中，加入N，N-二异丙基乙胺(8.4g， 64.89mmol)，20℃反应1小时。向反应液中加入80mL水，搅拌分层，水相用二氯甲烷(100mL×2)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系C纯化所得残余物，得到标题产物1m(15.7g，白色固体)，产率：98％。
MS m/z(ESI)：737.5[M+1]
第十一步
(S)-2，4-二甲氧基苄基2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸
条件一：
将1m(3.9g，5.29mmol)溶于20mL二氯甲烷中，加入二乙胺(40mL，0.39 mmol)，20℃搅拌反应2小时。反应液减压蒸馏除去大部分二乙胺，加入10mL甲苯，减压浓缩干燥。所得残余物用100mL二氯甲烷溶解，依次用水(100mL×2) 洗涤，饱和氯化钠溶液(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化残留物，得到标题产物1n(2.31g，桔红色固体)，产率：84.9％。
条件二：
将1m(15.7g，21.3mmol)溶于100mL二氯甲烷中，于10-15℃缓慢加入二乙胺(150mL，1.5mmol)，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化所得残余物，得到标题产物1n(10g，黄色油状物)，产率：91.7％。 MS m/z(ESI)：515.4[M+1]
第十二步
(S)-2，4-二甲氧基苄基2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((5S，8S，11S，12R)-11-((S)-仲丁基)-1-(9H-芴-9-基)-5，8-二异丙基-12-甲氧基-4，10-二甲基-3，6，9-三羰基-2-氧杂 -4，7，10-三氮杂十四烷基-14-酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸
条件一：
将1n(2.15g，4.18mmol)和(5S，8S，11S，12R)-11-((S)-仲丁基)-1-(9H-芴-9-基)-5，8- 二异丙基-12-甲氧基-4，10-二甲基-3，6，9-三羰基-2-氧杂-4，7，10-三氮杂十四烷-14-羧酸1o(2.66g，4.18mmol，采用专利申请“WO 2013072813”公开的方法制备而得) 溶于36mL二氯甲烷和N，N-二甲基甲酰胺的混合溶液(V∶V＝5∶1)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(1.9g，5.01mmol)和N，N-二异丙基乙胺(2.18mL，12.54mmol)，20℃搅拌反应1小时。加入100mL水，搅拌，分层，有机相依次用水(100mL×2)洗涤，饱和氯化钠溶液(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化残留物，得到标题产物1p(3.55g，白色泡沫状固体)，产率：75.8％。
条件二：
将1n(12.41g，19.46mmol)溶于100ml无水乙腈中，冰浴下加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(8.8g，23.35mmol)，N，N-二异丙基乙胺 (7.6g，58.38mmol)，于0-5℃搅拌反应10分钟，加入(5S，8S，11S，12R)-11-((S)-仲丁基)-1-(9H-芴-9-基)-5，8-二异丙基-12-甲氧基-4，10-二甲基-3，6，9-三羰基-2-氧杂-4，7，10-三氮杂十四烷-14-羧酸1o(10g，19.46mmol)，搅拌反应1小时。向反应液中加入100mL水，加入100mL乙酸乙酯，分液，有机相用50ml水洗涤，水相用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化残留物，得到粗品标题产物1p(21.7g，黄色油状物)，粗产率约100％，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI)：1151.6[M+18]
第十三步
(S)-2，4-二甲氧基苄基2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((3R，4S，5S)-4-((S)-N，3-二甲基 -2-((S)-3-甲基-2-(甲基胺基)丁酰胺)丁酰胺)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸
条件一：
将1p(3.86g，3.4mmol)溶于20mL二氯甲烷中，加入二乙胺(40mL，0.39mmol)， 20℃搅拌反应2小时。反应液减压蒸馏除大部分二乙胺，所得残余物中加入10mL 甲苯，继续减压浓缩干燥。向所得残余物种加入100mL水和100mL二氯甲烷，搅拌，分液，有机相依次用水(100mL×2)洗涤，饱和氯化钠溶液(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化残留物，得到标题产物1q(2.73g，黄色泡沫状固体)，产率：87％。
条件二：
将粗品1p(21.7g，19.1mmol)溶于100mL无水二氯甲烷中，加入二乙胺(150 mL，1.5mmol)，10-15℃搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化残留物，得到标题产物1q(15.4g，黄色粘稠物)，产率：89％。
MS m/z(ESI)：912.9[M+1]
第十四步
(S)-2，4-二甲氧基苄基2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((3R，4S，5S)-4-((S)-2-((S)-2-(6-(2，5- 二氧代-2，5-二氢-1H-吡咯-1-基)-N-甲基己酰胺)-3-甲基丁酰胺)-N，3-二甲基丁酰胺)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸
条件一：
将1q(1.22g，1.34mmol)溶于24mL二氯甲烷和N，N-二甲基甲酰胺的混合溶液(V∶V＝5∶1)中，依次加入6-马来酰亚胺基己酸(282mg，1.34mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(610mg，1.61mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.7mL，4.02mmol)，搅拌反应1小时。向反应液中加入50mL水，搅拌，分层，有机相依次用水(50mL×2)洗涤，饱和氯化钠溶液(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化残留物，得到标题产物1r(780mg，白色泡沫状固体)，产率：52.8％。
条件二：
将6-马来酰亚胺基己酸(3.8g，17.98mmol)溶于200mL无水乙腈中，冰盐浴下，控制反应液温度为-5-0℃，缓慢加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(7.8g，20.68mmol)，N，N-二异丙基乙胺(7.0g，53.34mmol)，搅拌反应15分钟，加入1q(15.4g，17.98mmol)，继续搅拌1小时。向反应液中加入100mL水和100mL乙酸乙酯，分液，有机相用50mL水洗涤，水相用乙酸乙酯(100mL× 2)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化残留物，得到粗品标题产物1r(12g，白色固体)，粗产率约60％，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI)：1122.7[M+18]
第十五步
(S)-2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((3R，4S，5S)-4-((S)-2-((S)-2-(6-(2，5-二羰基-2，5-二氢 -1H-吡咯-1-基)-N-甲基己酰胺)-3-甲基丁酰胺)-N，3-二甲基丁酰胺)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸
条件一：
将1r(1.56g，1.41mmol)溶于三氟乙酸的二氯甲烷溶液中(2.5％，40mL)，搅拌反应20分钟。冰浴下减压蒸除二氯甲烷，所得残余物减压干燥后用二氯甲烷溶解，湿法上样，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化，得到标题产物1(960mg，白色泡沫状固体)，产率：71.1％。
条件二：
将粗品1r(12g，10.86mmol)溶于50mL无水二氯甲烷中，冰浴下，加入三氟乙酸的二氯甲烷溶液(2.5％，150mL)，搅拌反应3小时。反应液低温减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化残留物，得到标题产物1(5.5g，白色固体)，产率：53.4％。
MS m/z(ESI)：956.0[M+1]
1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ7.36-7.30(m，1H)，7.29-7.21(m，1H)，7.17-7.02(m，2H)，6.83-6.79(m，2H)，4.81-4.71(m，2H)，4.69-4.55(m，2H)，4.25-4.15(m，1H)，4.13-4.04(m，1H)，3.96-3.85(m，2H)，3.70-3.61(m，1H)，3.55-3.46(m，3H)，3.40-3.21(m，4H)， 3.18-3.10(m，2H)，3.07-2.96(m，4H)，2.67-2.56(m，2H)，2.54-2.34(m，3H)，2.29-2.17(m， 2H)，2.10-1.99(m，1H)，1.89-1.57(m，7H)，1.52-1.28(m，6H)，1.21-1.11(m，4H)， 1.07-0.96(m，6H)，0.95-0.81(m，12H)，0.80-0.69(m，1H).
发明人的WO2016/127790中合成实施例1的方法
(S)-2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((3R，4S，5S)-4-((S)-2-((S)-2-(6-(2，5-二羰基-2，5-二氢 -1H-吡咯-1-基)-N-甲基己酰胺)-3-甲基丁酰胺)-N，3-二甲基丁酰胺)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸
Figure GPA0000248501080000261
Figure GPA0000248501080000271
第一步
(S)-叔丁酯2-氨基-3-(2-氟苯基)丙酸
将原料((S)-2-氨基-3-(2-氟苯基)丙酸1s(400mg，2.18mmol，采用公知的方法“Advanced Synthe.sis&Catalysis，2012，354(17)，3327-3332”制备而得)溶于10mL乙酸叔丁酯，加入高氯酸(300mg(70％)，3.3mmol)，于室温下搅拌16小时。反应完毕后加入6mL水，分液，有机相用饱和碳酸氢钠溶液(5mL)洗涤。水相用饱和碳酸氢钠溶液调节至pH＝8，二氯甲烷(5mL×3)萃取，合并有机相，依次用水(3mL)，饱和氯化钠溶液(5mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗品标题产物(S)-叔丁酯2-氨基-3-(2-氟苯基)丙酸1t(390mg，黄色油状物)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第二步
(1S，3S，5S)-叔丁酯3-((1R，2R)-3-(((S)-1-(叔丁氧基)-3-(2-氟苯基)-1-羰基丙基-2-基) 氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-羰基丙基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸
将原料(2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸1g(100mg，0.334mmol)溶于6mL二氯甲烷和二甲基甲酰胺 (V/V＝5∶1)混合溶剂中，加入反应物粗品(S)-叔丁酯2-氨基-3-(2-氟苯基)丙酸1t(80 mg，0.334mmol)。再加入N，N-二异丙基乙基胺(0.29mL，1.67mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(152.3mg，0.40mmol)。反应体系在氩气氛下，于室温搅拌1小时。反应结束后，加10mL水搅拌，分层，二氯甲烷层用饱和氯化钠溶液(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物(1S，3S，5S)-叔丁酯 3-((1R，2R)-3-(((S)-1-(叔丁氧基)-3-(2-氟苯基)-1-羰基丙基-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-羰基丙基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸1u(173mg，无色液体)，收率99.5％。MS m/z(ESI)：521.2[M+1]
第三步
(S)-叔丁酯2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸
将原料(1S，3S，5S)-叔丁酯3-((1R，2R)-3-(((S)-1-(叔丁氧基)-3-(2-氟苯基)-1-羰基丙基-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-羰基丙基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸1u (173mg，0.33mmol)溶于2mL二氧六环中，加入5.6M的氯化氢二氧六环溶液(0.21 mL，1.16mmol)，氩气氛下，于室温搅拌1小时，置于0℃冰箱内12小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入5mL二氯甲烷稀释，加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，搅拌10分钟。体系分层，水层用二氯甲烷萃取(5mL×3)。合并二氯甲烷层，用饱和氯化钠溶液(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，得到粗品标题产品(S)-叔丁酯2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸1v(77mg，黄色液体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
MS m/z(ESI)：421.2[M+1]
第四步
(S)-叔丁酯2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((5S，8S，11S，12R)-11-((S)-仲丁基)-1-(9H-芴 -9-基)-5，8-二异丙基-12-甲氧基-4，10-二甲基-3，6，9-三羰基-2-氧-4，7，10-三氮杂十四烷基-14-酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基) 丙酸
将粗品(S)-叔丁酯2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸1v(77mg，0.183mmol)，(5S，8S，11S，12R) -11-((S)-仲丁基)-1-(9H-芴-9-基)-5，8-二异丙基-12-甲氧基-4，10-二甲基-3，6，9-三羰基 -2-氧杂-4，7，10-三氮杂十四烷-14-羧酸1o(116.8mg，0.183mmol)溶于6mL二氯甲烷和二甲基甲酰胺(V/V＝5∶1)混合溶剂中，加入N，N-二异丙基乙基胺(0.16mL， 0.915mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(84mg，0.22 mmol)。反应体系在氩气氛下，于室温下搅拌1小时。反应结束后，加入10mL水搅拌，分层。二氯甲烷层用饱和氯化钠溶液(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化残留物，得到标题产品(S)- 叔丁酯2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((5S，8S，11S，12R)-11-((S)-仲丁基)-1-(9H-芴-9- 基)-5，8-二异丙基-12-甲氧基-4，10-二甲基-3，6，9-三羰基-2-氧杂-4，7，10-三氮杂十四烷基-14-酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸1w(190.5mg，黄色粘稠物)，收率100％。
MS m/z(ESI)：1040.6[M+1]
第五步
(S)-叔丁酯2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((3R，4S，5S)-4-((S)-N，3-二甲基-2-((S)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)丁酰胺)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3- 基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸
将原料(S)-叔丁酯2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((5S，8S，11S，12R)-11-((S)-仲丁基)-1-(9H-芴-9-基)-5，8-二异丙基-12-甲氧基-4，10-二甲基-3，6，9-三羰基-2-氧杂-4，7，10-三氮杂十四烷基-14-酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸1w(190.5mg，0.183mmol)溶于1.5mL二氯甲烷中，加入 2mL二乙胺。反应体系在氩气氛下，于室温搅拌3小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，得到粗品标题产品(S)-叔丁酯2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S) -2-((3R，4S，5S)-4-((S)-N，3-二甲基-2-((S)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)丁酰胺)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸1x(150mg，黄色粘稠物)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
MS m/z(ESI)：818.5[M+1]
第六步
(S)-2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((3R，4S，5S)-4-((S)-N，3-二甲基-2-((S)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)丁酰胺)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸
将粗品(S)-叔丁酯2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((3R，4S，5S)-4-((S)-N，3-二甲基 -2-((S)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)丁酰胺)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)-2-氮杂双环 [3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸1x(150mg，0.183mmol)溶于1mL二氧六环中，加入5.6M的氯化氢二氧六环溶液3mL，氩气氛下，于室温搅拌12小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，用乙醚带旋溶剂。所得残余物用高效液相色谱法纯化得标题产品(S)-2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2- ((3R，4S，5S)-4-((S)-N，3-二甲基-2-((S)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)丁酰胺)-3-甲氧基 -5-甲基庚酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基) 丙酸1y(28mg，白色粉末固体)，收率20％。
MS m/z(ESI)：762.7[M+1]
1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ7.38-7.18(m，2H)，7.13-7.01(m，2H)，4.80-4.67(m，2H)，4.30-4.15(m，1H)，4.13-4.01(m，1H)，3.96-3.83(m，2H)，3.75-3.60(m，2H)， 3.42-3.11(m，9H)，3.06-2.95(m，1H)，2.70-2.58(m，4H)，2.28-2.01(m，4H)，1.88-1.70(m，3H)，1.57-1.25(m，4H)，1.22-0.95(m，18H)，0.92-0.80(m，4H)，0.78-0.65(m，1H).
第七步
将原料(S)-2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((3R，4S，5S)-4-((S)-N，3-二甲基-2-((S)-3- 甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)丁酰胺)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸1y(25mg，0.033mmol)溶于3mL 二氯甲烷中，加入N，N-二异丙基乙基胺(0.029mL，0.164mmol)，反应体系在氩气氛下，冰浴下滴加预制的6-(2，5-二羰基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰氯(11.3mg，0.049mmol)的二氯甲烷溶液，于室温反应3小时。反应结束后，加入5mL水，搅拌20分钟，分液，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残留物用高效液相色谱法纯化得标题产物(S)-2-((2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-((3R，4S，5S)-4-((S)-2- ((S)-2-(6-(2，5-二羰基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-基)-N-甲基己酰胺)-3-甲基丁酰胺)-N，3-二甲基丁酰胺)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺)-3-(2-氟苯基)丙酸1(7mg，黄色粘稠物)，收率22.4％。
MS m/z(ESI)：955.4[M+1]
1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ7.36-7.30(m，1H)，7.29-7.21(m，1H)，7.17-7.02(m，2H)，6.83-6.79(m，2H)，4.81-4.71(m，2H)，4.69-4.55(m，2H)，4.25-4.15(m，1H)，4.13-4.04(m，1H)，3.96-3.85(m，2H)，3.70-3.61(m，1H)，3.55-3.46(m，3H)，3.40-3.21(m，4H)， 3.18-3.10(m，2H)，3.07-2.96(m，4H)，2.67-2.56(m，2H)，2.54-2.34(m，3H)，2.29-2.17(m， 2H)，2.10-1.99(m，1H)，1.89-1.57(m，7H)，1.52-1.28(m，6H)，1.21-1.11(m，4H)， 1.07-0.96(m，6H)，0.95-0.81(m，12H)，0.80-0.69(m，1H).
使用现有技术的制备方法制备本发明的底物化合物的具体步骤在本发明人的WO2016/127790中已经记载如下：
Figure GPA0000248501080000301
第一步
(1S，3S，5S)-叔丁酯3-((1R，2R)-1-羟基-2-甲基-3-((4R，5S)-4-甲基-2-羰基-5-苯基噁唑 -3-基)-3-羰基丙基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸
将原料(4R，5S)-4-甲基-5-苯基-3-丙酰基噁唑烷酮1b(1.96g，9.26mmol，采用公知的方法“Journal of the American Chemical Society，2003，125(50)，15512-15520”制备而得)溶于25mL二氯甲烷中，氩气氛下，降温至0℃。反应液于0℃下滴加三乙胺(1.49mL，10.93mmol)，再滴加三氟甲磺酸二丁硼(9.7mL，9.72mmol)，于 0℃下搅拌50分钟，干冰丙酮浴下将反应液降温至-75℃，加入(1S，3S，5S)-叔丁酯3- 甲酰基-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸1a(2.16g，9.26mmol，采用专利申请“US20100249190”公开的方法制备而得)溶于7mL二氯甲烷的溶液，于-75℃下搅拌1.5小时，于0℃搅拌2小时，于室温搅拌1小时。反应结束后，加入36mL磷酸盐缓冲液(pH＝7.0)和甲醇(V/V＝1∶3)的混合液。于0℃下加入36mL甲醇和双氧水(30％)(V/V＝2∶1)的混合液，于室温搅拌1小时。减压浓缩除去有机相，加入少量水，用乙醚(50mL×3)萃取，依次用5％碳酸氢钠溶液，饱和氯化钠溶液(150mL) 洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B 纯化残留物，得标题产物(1S，3S，5S)-叔丁酯3-((1R，2R)-1-羟基-2-甲基-3-((4R，5S)-4- 甲基-2-羰基-5-苯基噁唑-3-基)-3-羰基丙基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸1c(2.4g，白色泡沫状固体)，产率58.5％。
MS m/z(ESI)：345.1[M-100+1]
第二步
(1S，3S，5S)-叔丁酯3-((1R，2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-((4R，5S)-4-甲基-2-羰基-5-苯基噁唑-3-基)-3-羰基丙基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸
将原料(1S，3S，5S)-叔丁酯3-((1R，2R)-1-羟基-2-甲基-3-((4R，5S)-4-甲基-2-羰基-5- 苯基噁唑-3-基)-3-羰基丙基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸1c(1.4g，3.15mmol)溶于20mL二氯甲烷，加入1.4g碾碎的分子筛，氩气氛下，于0℃下加入1，8-双二甲氨基萘(1.75g，8.19mmol)，三甲基氧鎓四氟硼酸盐(1.16g，7.87mmol)，反应避光，于室温搅拌40小时。反应结束后，过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤，滤液用饱和氯化铵溶液(50mL×4)洗去过量1，8-双二甲氨基萘，再用饱和氯化钠溶液(120mL) 洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B 纯化所得残余物，得到标题产物(1S，3S，5S)-叔丁酯3-((1R，2R)-1-甲氧基-2-甲基 -3-((4R，5S)-4-甲基-2-羰基-5-苯基噁唑-3-基)-3-羰基丙基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2- 羧酸1d’(400mg，白色固体)，产率27.8％。
MS m/z(ESI)：459.4[M+1]
第三步
(2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸
将原料(1S，3S，5S)-叔丁酯3-((1R，2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-((4R，5S)-4-甲基-2-羰基-5-苯基噁唑-3-基)-3-羰基丙基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸1d’(400mg，0.87 mmol)溶于24mL四氢呋喃，氩气氛下，降温至0℃，缓慢滴加30％的双氧水(0.34 mL/0.38g，3.31mmol)，再加入一水合氢氧化锂(62mg，，1.48mmol)，反应体系于室温反应20小时。反应结束后，向反应液中加入亚硫酸钠固体(440mg，3.48mmol)，于室温搅拌1小时，加入10mL水，减压浓缩掉有机相，所得残余物用二氯甲烷萃取(40mL×2)。水相在冰浴下滴加2N盐酸至反应液pH为3～4，用乙酸乙酯萃取(25mL×3)，乙酸乙酯层依次用水(50mL)，饱和氯化钠溶液(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得标题产物(2R，3R)-3-((1S，3S，5S)-2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸1g(230mg，无色液体)，收率88.0％。
MS m/z(ESI)：200.1[M-100+1]
比较两种方法生成中间体1g的收率如下表：
Figure GPA0000248501080000321
从上表我们可以看到：
本发明采用先保护羧基在上甲基的方法在合成路线上虽然比使用现有技术的合成路线长，但是总收率大大提高，约提高3倍，具有适合工业化生产等特点，具有显著的社会效益和经济效益。
由于已根据其特殊的实施方案描述了本发明，某些修饰和等价变化对于精通此领域的技术人员是显而易见的且包括在本发明的范围内。

Claims (29)

1.一种通式(III)所示的化合物，
Figure FDA0002552363680000011
其中：
A为3元环；
R1为选自Boc、Fmoc、Alloc、Troc、Teoc、CBz、Tosyl、Nosyl和t-Bu的氨基保护基；
R2为选自DMB、Bn、Allyl、PfP、Me、PMB、MEM和t-Bu的羧基保护基。
2.一种如权利要求1所述的通式(III)所示化合物的制备方法，其特征在于，其由含手性辅基(R3)的通式(II)所示手性化合物在碱性条件下水解，并进一步上羧基保护基得到通式(III)所示化合物的步骤，
Figure FDA0002552363680000012
其中：
手性辅基(R3)选自：
Figure FDA0002552363680000013
X为S或O；
A和R1～R2如权利要求1中定义。
3.根据权利要求2所述的通式(III)所示化合物的制备方法，其中提供碱性条件的碱性试剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯或氢氧化锂。
4.根据权利要求3所述的通式(III)所示化合物的制备方法，其中提供碱性条件的碱性试剂为氢氧化锂。
5.一种通式(IV)所示的化合物，
Figure FDA0002552363680000021
其中：
A为3元环；
R1为选自Boc、Fmoc、Alloc、Troc、Teoc、CBz、Tosyl、Nosyl和t-Bu的氨基保护基；
R2为选自DMB、Bn、Allyl、PfP、Me、PMB、MEM和t-Bu的羧基保护基；
Rx选自C1-6烷基和C3-6环烷基，其中所述的C1-6烷基和C3-6环烷基各自独立地任选被选自C1-6烷基、卤代C1-6烷基、卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、C1-6烷氧基和C1-6羟烷基中的一个或多个取代基所取代。
6.一种根据权利要求5所述的通式(IV)所示化合物的制备方法，其特征在于，其由通式(III)所示化合物与烷基化试剂反应，生成通式(IV)所示的化合物的步骤，
Figure FDA0002552363680000022
其中：
所述的烷基化试剂选自卤代烷、硫酸二甲酯、碳酸二甲酯、磺酸酯、磷酸三甲酯和Me3 +BF4 -；
A、R1、R2和Rx如权利要求5中定义。
7.根据权利要求5所述的通式(IV)所示的化合物，其中Rx为甲基。
8.根所利要求6所述的通式(IV)所示化合物的制备方法，其中烷基化试剂选自碘甲烷和Me3 +BF4 -。
9.一种制备(V)所示化合物的方法，其特征在于，包含通过式(III)化合物制备通式(IV)所示的化合物的步骤，和由通式(IV)所示化合物脱去羧基保护基，生成通式(V)所示的化合物的步骤
Figure FDA0002552363680000031
其中：
A、R1、R2和Rx如权利要求5中定义。
10.根据权利要求9所述的制备(V)所示化合物的方法，其特征在于，还进一步包含通过式(II)化合物制备通式(III)所示化合物的制备方法步骤，
Figure FDA0002552363680000032
其中：
A、R1、R2和Rx如权利要求5中定义。
11.一种通式(I)所示的化合物的制备方法，
Figure FDA0002552363680000033
其特征在于，所述方法包括
1)由含手性辅基R3的通式(II)所示手性化合物在碱性条件下水解，并进一步上羧基保护基得到通式(III)所示化合物的步骤；
2)由通式(III)所示化合物与卤代烷发生烷基化反应，生成通式(IV)所示的化合物的步骤；
3)通式(IV)化合物脱去羧基保护基得到通式(V)化合物；
4)通式(V)所示的化合物进一步与通式(XI)所示的化合物在缩合剂的作用下发生酰胺化反应，得到通式(VII)所示的化合物的步骤；
5)通式(VII)所示的化合物碱性条件下脱去氨基保护基得到通式(I-E)的化合物；其中提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类；
6)通式化合物(I-E)与通式化合物(I-D)在缩合剂的作用下发生酰胺化反应得到通式(I-C)所示的手性中间体；
7)通式化合物(I-C)在碱性条件下脱去Fmoc保护基得到通式(I-B)所示的手性化合物；其中提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类；
8)通式化合物(I-B)与6-马来酰亚胺基己酸在缩合剂的作用下发生酰胺化反应得到通式(I-A)所示的化合物；
9)通式化合物(I-A)在酸性条件下脱去羧基保护基得到通式(I)所示的化合物的步骤；
Figure FDA0002552363680000041
其中：
A为3元环；
R为卤素；
R1为选自Boc、Fmoc、Alloc、Troc、Teoc、CBz、Tosyl、Nosyl和t-Bu的氨基保护基；
R2为选自DMB、Bn、Allyl、PfP、Me、PMB、MEM和t-Bu的羧基保护基；
R4为羧基保护基DMB；
Rx选自C1-6烷基和C3-6环烷基，其中所述的C1-6烷基和C3-6环烷基各自独立地任选被选自C1-6烷基、卤代C1-6烷基、卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、C1-6烷氧基和C1-6羟烷基中的一个或多个取代基所取代；
n为1、2、3、4或5。
12.根据权利要求11所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中Rx为甲基。
13.根据权利要求11所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中R选自氟、氯、溴或碘。
14.根据权利要求11所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中R为氟。
15.一种通式(I)所示化合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：1)由含手性辅基R3的通式(II)所示手性化合物在碱性条件下水解，并进一步上羧基保护基得到通式(III)所示化合物的步骤；
2)由通式(III)所示化合物与卤代烷发生烷基化反应，生成通式(IV)所示的化合物的步骤；
3)通式(IV)化合物脱去羧基保护基得到通式(V)化合物；
4)通式(V)所示的化合物脱氨基保护得到通式(VI)所示的化合物；
5)通式(VI)所示的化合物上Fmoc保护基得到通式(VIII)所示的化合物；
6)通式(VIII)所示的化合物进一步与通式(XI)所示的化合物在缩合剂的作用下发生酰胺化反应，得到通式(XII)所示的化合物；
7)通式(XII)所示的化合物在碱性条件下脱去Fmoc保护基得到式(I-E)的化合物，其中提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类；
8)通式化合物(I-E)与通式化合物(I-D)在缩合剂的作用下发生酰胺化反应得到通式(I-C)所示的手性中间体；
9)通式化合物(I-C)在碱性条件下脱去Fmoc保护基得到通式(I-B)所示的手性化合物，其中提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类；
10)通式化合物(I-B)与6-马来酰亚胺基己酸在缩合剂的作用下发生酰胺化反应得到通式(I-A)所示的化合物；
11)通式化合物(I-A)在酸性条件下脱去羧基保护基得到通式(I)所示的目标化合物；
Figure FDA0002552363680000061
其中：
A、R1、R2、R3、R4、R、Rx和n如权利要求11中定义。
16.根据权利要求15所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的步骤6)、步骤8)和步骤10)中的缩合剂选自1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N'-二环己基碳化二亚胺、N,N'-二异丙基碳二酰亚胺、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷。
17.根据权利要求15所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的步骤6)、步骤8)和步骤10)中的缩合剂为2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯。
18.根据权利要求15所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的步骤7)和步骤9)中的有机碱类选自三乙胺、二乙胺、N,N-二异丙基乙胺、吡啶、六甲基二硅基胺基钠，正丁基锂、叔丁醇钾或四丁基溴化铵。
19.根据权利要求15所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的步骤7)和步骤9)中无机碱类选自氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾或碳酸铯。
20.根据权利要求15所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的步骤7)和步骤9)中有机碱为二乙胺。
21.根据权利要求15所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的其中所述的步骤11)中的酸性条件的试剂选自盐酸、硝酸、磷酸、对苯甲磺酸、Me3SiCl、TMSOTf、三氟乙酸或硫酸。
22.根据权利要求15所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的其中所述的步骤11)中的酸性条件的试剂为三氟乙酸。
23.根据权利要求11所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的步骤4)、步骤6)或步骤8)中的缩合剂选自1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N'-二环己基碳化二亚胺、N,N'-二异丙基碳二酰亚胺、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷。
24.根据权利要求23所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的缩合剂为2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯。
25.根据权利要求11所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的其中所述的步骤9)中的酸性条件的试剂选自盐酸、硝酸、磷酸、对苯甲磺酸、Me3SiCl、TMSOTf、三氟乙酸或硫酸。
26.根据权利要求11所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的其中所述的步骤9)中的酸性条件的试剂为三氟乙酸。
27.根据权利要求11所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的步骤5)和步骤7)中的有机碱类选自三乙胺、二乙胺、N,N-二异丙基乙胺、吡啶、六甲基二硅基胺基钠，正丁基锂、叔丁醇钾或四丁基溴化铵。
28.根据权利要求11所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的步骤5)和步骤7)中的无机碱类选自氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾或碳酸铯。
29.根据权利要求27所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述的有机碱为二乙胺。
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