CN107530388B - 橄榄叶萃取物及其制造方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种含有高浓度的橄榄苦苷的橄榄叶萃取物的制造方法及橄榄叶萃取物。本发明的橄榄叶萃取物的制造方法包括：第1步骤，将已干燥的橄榄叶进行粉碎；及第2步骤，在经粉碎的橄榄叶中混合葡萄后，使用萃取溶剂萃取橄榄叶萃取物；在第2步骤中，萃取溶剂为水、醇或这些的组合，且在70℃以上进行萃取。

Description

橄榄叶萃取物及其制造方法
技术领域
本发明涉及一种以橄榄叶作为主原料、含有高浓度的橄榄苦苷而功能性优异的橄榄叶萃取物及其制造方法。
背景技术
以往，已知橄榄叶以远远高于橄榄果的含有率含有维生素A，另外，含有丰富的作为抗氧化剂的维生素E以及具有消炎作用、消臭及抗菌作用的叶绿素等。
也已知橄榄叶中所含的维生素A、维生素E及叶绿素等优异成分是通过将橄榄果与橄榄叶一起进行粉碎、萃取而有效率地提取至所获得的萃取油中，因此与仅由橄榄果获得的橄榄萃取油相比，能够制成以天然形态大量地含有维生素A、维生素E及叶绿素等优异成分的萃取油。
而且，橄榄的果或叶含有多酚，近来也注意到其健康促进作用等。尤其是橄榄叶中所含的作为一种多酚的橄榄苦苷具有非常高的抗氧化能力，确认到预防及改善各种疾病的效果。
而且，作为使用这种橄榄叶的方法，例如在专利文献1中公开了一种方法，其通过将橄榄叶干燥并进行粉碎后，以水、含有柠檬酸的水、或含有肽的水作为萃取溶剂进行萃取来制造含有橄榄苦苷的橄榄叶萃取物。
背景技术文献
专利文献
专利文献1：日本专利特开2011-125301号公报
发明内容
[发明要解决的问题]
然而，专利文献1所公开的方法注重于减少涩味或苦味，并未公开就如何萃取出高浓度的橄榄苦苷的观点来说最合适的萃取条件等。
本发明是鉴于这种课题而完成的，其目的在于提供一种含有高浓度的橄榄苦苷的橄榄叶萃取物的制造方法。
[解决问题的技术手段]
为了解决所述问题，本发明的橄榄叶萃取物的制造方法包括：第1步骤，将已干燥的橄榄叶进行粉碎；及第2步骤，在经粉碎的橄榄叶中混合葡萄后，使用萃取溶剂萃取橄榄叶萃取物；在第2步骤中，萃取溶剂为水、醇或这些的组合，且在70℃以上进行萃取。
另外，本发明的橄榄叶萃取物的制造方法中，橄榄叶相对于萃取溶剂的添加叶量可以为15重量％以上且35重量％以下。
另外，本发明的橄榄叶萃取物的制造方法中，橄榄叶的品种可以为选自由卢卡(Lucca)、米申(Mission)、白内瓦迪友(Nevadillo Blanco)及曼萨尼约(Manzanillo)所组成的群中的至少一种。
另外，本发明也提供一种利用所述橄榄叶萃取物的制造方法制造的橄榄叶萃取物。
[发明的效果]
根据本发明，能够提供一种含有高浓度的橄榄苦苷的橄榄叶萃取物及其制造方法。
具体实施方式
本发明提供一种橄榄叶萃取物的制造方法。橄榄叶萃取物是由橄榄叶萃取的萃取物，含有橄榄苦苷及羟基酪醇等多酚。橄榄苦苷及羟基酪醇作为具有抗氧化能力的酚化合物而为人所知，确认到由抗氧化能力所带来的预防或改善各种疾病的效果。
本发明的橄榄叶萃取物的制造方法包括：第1步骤，将已干燥的橄榄叶进行粉碎；及第2步骤，使用萃取溶剂从经粉碎的橄榄叶萃取橄榄叶萃取物。
第1步骤是将已干燥的橄榄叶进行粉碎的步骤。本说明书中，所谓“粉碎”是指通过物理性地进行破碎而使对象物的尺寸变小，例如物理性地破碎至微小的粒、小片或粉末等。使橄榄叶干燥的方法及粉碎的方法并没有特别限定，能够使用任意方法。
本发明能够使用的橄榄叶的品种例如包含卢卡(Lucca)、米申(Mission)、白内瓦迪友(Nevadillo Blanco)、曼萨尼约(Manzanillo)、Amellenque、阿尔贝吉纳(Arbequina)、软阿斯(Ascolana Terena)、阿斯(Ascolano)、阿扎巴(Azapa)、巴尼亚(Barnea)、巴罗尼(Barouni)、Biancolilla、Bidh El Hamman、布兰卡(Blanqueta)、Caillet Blane、卡罗(Carolea)、Cayonne、Chemilali、Chitoni、切风龙(Cipressino)、寇拉缇娜(Coratina)、山羊角(Cornicabra)、科雷乔(Correggiola)、Cucco、Gigante di Cerignola、佛奥(Frantoio)、Glappolo、戈达尔(Gordal)、Hardy's Mammoth、霍希布莱卡(Hojiblanca)、Itrana、大粒卡拉玛塔(Jumbo Kalamata)、卡拉玛塔(Kalamata)、科拉喜(Koroneiki)、雷奇诺(Leccino)、Leecio del Corno、Liani、卢卡(Lucques)、曼萨妮亚(Manzanilla)、毛里尼奥(Maurino)、Michellenque、莫拉约(Moraiolo)、Nabali Mohassan、Nab Tamri、尼格来尔(Negral)、Nocellara del Belice、Obliza、Oblonga、Paragon、配多灵(Pendolino)、皮夸尔(Picual)、瑞丁皮肖利(Redding picholine)、Redounan、Saurin大叶、Saurin中叶、Saurin小叶、塞维利亚诺(Sevillano)、Sorani、南澳大利亚维尔达勒(South AustralianVerdale)、圣凯瑟琳(St.Catherin)、塔加斯卡(Taggiasca)、坦彩(Tanche)、少油卡拉玛塔(Tiny Oil Kalamata)、Tsunati、维尔达勒(Verdale)、沃加维尔达勒(Wagga Verdale)、Zarza、奥利维尔及FS17等。本发明中，橄榄叶可以单独使用一种，也可以混合两种以上使用。
橄榄叶的采集时期并没有特别限定，例如在像日本那样的处于北半球的地区，优选橄榄果含有大量油分的12月左右，另外，优选橄榄果熟透并完成收获以后。
第2步骤是使用萃取溶剂从经粉碎的橄榄叶萃取橄榄叶萃取物的步骤。
萃取溶剂为水、醇或这些的组合。也就是说，萃取溶剂为水、醇或含有醇的水。本发明中，醇例如包含甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇、甘油、乙二醇、丙二醇、1,3-丁二醇及聚乙二醇等。另外，醇也可以为例如日本清酒及烧酒等酒精饮料。醇可以单独使用一种，也可以混合两种以上使用。萃取溶剂例如也可以为水、乙醇或1,3-丁二醇或这些的组合。
在第2步骤中，萃取温度为70℃以上。通过在70℃以上进行萃取，如后述实施例所示，能够获得橄榄苦苷含量高的橄榄叶萃取物。另外，萃取温度的上限并没有特别限定，例如可以为100℃以下。
橄榄叶相对于萃取溶剂的添加叶量并没有特别限定，如果为15重量％以上且35重量％以下，那么如后述实施例所示，能够获得橄榄苦苷含量及抗糖化能力高的橄榄叶萃取物。
在第2步骤中，也可以在粉碎的橄榄叶中混合果实后，使用萃取溶剂进行萃取。作为果实，可以使用果实本身，也可以使用果实的果皮、果肉、果汁、破碎物、榨汁或残渣或者这些的组合。
本发明中，果实例如包含葡萄、橙子、蜜橘、红橘、葡萄柚、柠檬、莱姆、苹果、桃子、草莓、蓝莓、蔓越莓、接骨木果、欧洲越橘、黑莓、树莓、香蕉、芒果、猕猴桃、石榴、柿子、番茄、梨子、樱桃、李子、凤梨、枇杷及木瓜等。果实优选葡萄。葡萄例如包含红葡萄、白葡萄及黑葡萄等。本发明中，果实可以单独使用一种，也可以混合两种以上使用。
通过在橄榄叶中混合果实，能够萃取出如下橄榄叶萃取物，其含有超过单纯从橄榄叶萃取的多酚的理论值与从果实萃取的多酚的理论值的和的多酚。认为通过将果实混入到橄榄叶中，在萃取过程中作为萃取溶剂的水等变成酸性，因此会提高所萃取的萃取物中的多酚浓度。
本发明也提供一种利用所述橄榄叶萃取物的制造方法制造的橄榄叶萃取物。本发明的橄榄叶萃取物通过利用本发明的橄榄叶萃取物的制造方法进行制造，而含有比以往更高浓度的橄榄苦苷。因此，本发明的橄榄叶萃取物具有高抗氧化能力，因此能够用于利用该抗氧化能力的各种医药、食品及化妆品等。另外，本发明的橄榄叶萃取物具有高抗糖化能力，因此也能够用作抗糖化剂。
实施例
(测定方法)
在测定总多酚含量时，使用福林-西奥卡特(Folin-Ciocalteu)法。这是利用福林试剂(酚试剂)经酚性羟基还原而显色的方法。另外，在测定橄榄苦苷含量时，进行HPLC(High Performance Liquid Chromatography，高效液相色谱法)分析。这是所谓的高效液相色谱法，是在包含固定相与流动相的体系中分离特定物质的方法。
而且，在测定抗糖化能力时，使各样品与BSA(Bovine Serum Albumin，牛血清白蛋白)-果糖溶液进行反应而制成非酶糖加成反应-后期反应产物(AGEs：Advanced GlycationEnd Products，晚期糖基化终产物)液，利用竞争法测定AGEs液中的AGEs量。
而且，在测定抗氧化能力时，调查ORAC(Oxygen Radical Absorbance Capacity，活性氧吸收能力)(参考文献：Wu,X.et al.,J.Agric.Food Chem.,m 2004,52,4026-4037，将1μmol的Trolox所表现的活性作为单位)。
(橄榄叶及萃取溶剂)
表1～3中表示将橄榄的青叶、蒸煮叶及干燥叶利用水、1,3-丁二醇溶液、乙醇溶液进行萃取而制造的橄榄叶萃取物的多酚浓度等。干燥叶是使用干燥后经粉碎的叶。这里，将使用的橄榄叶品种设为米申(Mission)，将萃取温度设为50-60℃，将萃取时间设为5小时，将添加叶量设为相对于萃取溶剂为10重量％。然后，测定分别使用水、30％BG(BG为丁二醇)、50％BG、80％BG、50％EtOH(EtOH为乙醇)、100％EtOH进行萃取而制造的橄榄叶萃取物的总多酚含量(mg/100g)、橄榄苦苷含量(mg/100g)、抗糖化能力(IC50)。
[表1]
Figure BDA0001375116190000051
[表2]
Figure BDA0001375116190000052
[表3]
Figure BDA0001375116190000053
如表1～3所示，将青叶与蒸煮叶进行比较，可知在由干燥叶获得橄榄叶萃取物的情况下，总多酚含量、橄榄苦苷含量及抗糖化能力都高。另外，通过比较将水、含有1,3-丁二醇的水、含有乙醇的水或100％乙醇作为萃取溶剂而从干燥后经粉碎的橄榄叶进行萃取的情况，可知即便是使用水作为萃取溶剂的情况下，也能够获得充分的总多酚含量、橄榄苦苷含量、抗糖化能力。
(橄榄叶的品种)
表4中表示将干燥后经粉碎的各品种的橄榄叶利用水进行萃取而制造的橄榄叶萃取物的多酚浓度等。这里，作为橄榄叶的品种，使用米申(Mission)、卢卡(Lucca)、白内瓦迪友(Nevadillo Blanco)、曼萨尼约(Manzanillo)。然后，作为基本萃取条件，将萃取温度设为50-60℃，将萃取时间设为5小时，将添加叶量设为相对于萃取溶剂为10重量％，测定由各品种所制造的橄榄叶萃取物的总多酚含量(mg/100g)、橄榄苦苷含量(mg/100g)、抗糖化能力(IC50)。
[表4]
Figure BDA0001375116190000061
像这样，测定各品种的多酚浓度等，结果卢卡(Lucca)、米申(Mission)、白内瓦迪友(Nevadillo Blanco)、或曼萨尼约(Manzanillo)都能够获得良好的结果。尤其是卢卡(Lucca)获得最良好的值。就与成本的成本效益的观点来说，应该也可以选择橄榄叶。
(萃取温度)
表5中表示将干燥后经粉碎的橄榄叶利用各温度的水进行萃取而制造的橄榄叶萃取物的多酚浓度等。这里，将使用的橄榄叶品种设为米申(Mission)，将萃取溶剂设为水，萃取温度在30℃至100℃的范围内阶梯性地变化，将萃取时间设为5小时，将添加叶量设为相对于萃取溶剂为10重量％。然后，测定在各萃取温度下进行萃取而制造的橄榄叶萃取物的总多酚含量(mg/100g)、橄榄苦苷含量(mg/100g)、抗糖化能力(IC50)。
[表5]
Figure BDA0001375116190000062
像这样，比较在各温度下萃取的橄榄叶萃取物的多酚浓度，结果可知，当超过70℃时，橄榄苦苷含量大幅地增大。因此，作为萃取温度，70℃以上可谓最合适的条件。
(萃取时间)
表6中表示将干燥后经粉碎的橄榄叶在各萃取时间之间利用水进行萃取而制造的橄榄叶萃取物的多酚浓度等。这里，将使用的橄榄叶品种设为米申(Mission)，将萃取溶剂设为水，将萃取温度设为50℃至60℃，使萃取时间在0.5小时至12小时之间阶梯性地变更，将添加叶量设为相对于萃取溶剂为10重量％。然后，测定以各萃取时间进行萃取而制造的橄榄叶萃取物的总多酚含量(mg/100g)、橄榄苦苷含量(mg/100g)、抗糖化能力(IC50)。
[表6]
Figure BDA0001375116190000071
像这样，比较以0.5小时、1小时、2小时、3小时、5小时、7小时、及12小时阶梯性地变更萃取时间而萃取的橄榄叶萃取物的多酚浓度等，结果可知，只要为1小时以上，那么无论哪一种萃取时间，都能使总多酚、橄榄苦苷含量及抗糖化能力获得良好的结果。
(橄榄叶的添加叶量)
表7中表示将干燥后经粉碎的各添加叶量(％)的橄榄叶利用水进行萃取而制造的橄榄叶萃取物的多酚浓度等。这里，将使用的橄榄叶品种设为米申(Mission)，将萃取溶剂设为水，将萃取温度设为50℃至60℃，将萃取时间设为5小时，使添加叶量相对于萃取溶剂阶梯性地变更。然后，测定以各添加叶量进行萃取而制造的橄榄叶萃取物的总多酚含量(mg/100g)、橄榄苦苷含量(mg/100g)、抗糖化能力(IC50)。此外，关于青叶换算，鉴于通过干燥处理而重量成为50％至55％，干燥叶重量＝青叶×0.5～0.55。
[表7]
Figure BDA0001375116190000072
像这样，能够确认到所添加的橄榄叶的量多，总多酚量就会大幅地增加。而且，可知尤其是添加叶量为20重量％时，与添加叶量为10重量％时相比，橄榄苦苷含量的增加率非常高。另外，可知添加叶量为20重量％～30重量％时，橄榄苦苷含量及抗糖化能力成为良好的结果。因此，作为添加叶量，15重量％以上且35重量％以下可谓最合适的条件。
根据以上，在本发明的橄榄叶萃取物的制造方法中，用于获得含有高浓度的多酚且抗糖化能力也获得充分效果的萃取物的最合的适条件如下所述。
·第1条件：萃取溶剂
作为萃取溶剂，能够使用水、醇及这些的组合，例如能够使用水、1,3-丁二醇、乙醇及这些的任意组合。即便在使用水的情况下，也能够获得充分的总多酚含量、橄榄苦苷含量、抗糖化能力。
·第2条件：橄榄叶的品种
作为橄榄叶的品种，并没有特别限定，能够至少使用卢卡(Lucca)、米申(Mission)、白内瓦迪友(Nevadillo Blanco)、或曼萨尼约(Manzanillo)，尤其是卢卡(Lucca)就含有高浓度的多酚的观点来说最合适。
·第3条件：萃取温度
可知当萃取温度超过70℃时，橄榄苦苷含量会大幅地增大，最合适为70℃以上。
·第4条件：萃取时间
萃取时间并没有特别限定，只要为1小时以上，那么就能够获得充分的总多酚含量、橄榄苦苷含量及抗糖化能力。
·第5条件：添加叶量
添加叶量并没有特别限定，当为15重量％～35重量％时，橄榄苦苷含量及抗糖化能力能够获得良好的结果。
通过满足所述第1条件至第5条件中的至少一个或两个以上的任意组合、或这些全部，能够制造总多酚含量、橄榄苦苷含量及抗糖化能力充分高的橄榄叶萃取物。
(第1实施例)
表8中表示在所述第1至第5条件下萃取的橄榄叶萃取物中的总多酚含量、橄榄苦苷含量及抗糖化能力。也就是说，以使用干燥后经粉碎的橄榄叶作为前提，将使用的橄榄叶品种设为卢卡(Lucca)、米申(Mission)、白内瓦迪友(Nevadillo Blanco)、或曼萨尼约(Manzanillo)，将萃取溶剂设为水，将萃取温度设为70℃至80℃，将萃取时间设为3小时，将添加叶量设为相对于萃取溶剂为20重量％。测定在该条件下进行萃取而制造的橄榄叶萃取物的总多酚含量(mg/100g)、橄榄苦苷含量(mg/100g)、抗糖化能力(IC50)。
[表8]
Figure BDA0001375116190000091
像这样，在所述条件下，4种品种的总多酚含量均显示出高值，关于橄榄苦苷含量，尤其是卢卡(Lucca)显示出高值。关于抗糖化能力，4种均显示出良好的值。与表示在基本萃取条件下测定的结果的表4相比，总多酚含量、橄榄苦苷含量、抗糖化能力均增加，因此可知基于所述萃取条件的萃取效果极高。
(第2实施例)
在第2实施例中，将所述第1至第5条件作为萃取条件，在干燥后经粉碎的橄榄叶中混入红葡萄皮，利用水进行萃取。将使用品种设为米申(Mission)，将萃取温度设为70℃至80℃，将萃取时间设为3小时，将添加叶量设为相对于萃取溶剂为20重量％，将添加葡萄皮量设为相对于萃取溶剂为10重量％。将其结果示于表9。
[表9]
Figure BDA0001375116190000092
像这样，确认到萃取出如下橄榄叶萃取物，其含有超过单纯从橄榄叶萃取的多酚的理论值与从作为果实的葡萄的皮萃取的多酚的理论值的和的多酚。
(第3实施例)
在第3实施例中，将所述第1至第5条件作为萃取条件，将使用品种变更为卢卡(Lucca)，在干燥后经粉碎的橄榄叶中混入红葡萄皮，利用水进行萃取。将萃取温度设为70℃至80℃，将萃取时间设为3小时，将添加叶量设为相对于萃取溶剂为20重量％，将添加葡萄皮量设为相对于萃取溶剂为10重量％。将其结果示于表10。
[表10]
Figure BDA0001375116190000093
在该情况下，也确认到萃取出如下橄榄叶萃取物，其含有超过单纯从橄榄叶萃取的多酚的理论值与从作为果实的葡萄的皮萃取的多酚的理论值的和的多酚。
(第4实施例)
在第4实施例中，将所述第1至第5条件作为萃取条件，将使用品种变更为卢卡(Lucca)，在干燥后经粉碎的橄榄叶中混入红葡萄皮，利用30％1,3-丁二醇进行萃取。将萃取温度设为70℃至80℃，将萃取时间设为3小时，将添加叶量设为相对于萃取溶剂为20重量％，将添加葡萄皮量设为相对于萃取溶剂为10重量％。将其结果示于表11。
[表11]
Figure BDA0001375116190000101
在该情况下，也确认到萃取出如下橄榄叶萃取物，其含有超过单纯从橄榄叶萃取的多酚的理论值与从作为果实的葡萄的皮萃取的多酚的理论值的和的多酚。
(第5实施例)
在第5实施例中，测定仅由橄榄叶获得的橄榄叶萃取物与由橄榄叶及红葡萄皮的混合物获得的橄榄叶萃取物(混合萃取物)的抗氧化能力。将测定结果即所获得的ORAC值(μmol TE/g)示于表12。
[表12]
ORAC值(μmol TE/g)
橄榄叶萃取物 98
红葡萄皮与橄榄叶的混合萃取物 140
像这样，确认到与橄榄叶萃取物相比，红葡萄皮与橄榄叶的混合萃取物的抗氧化能力明显高。
以上，对本发明的实施方式进行了说明，但本发明并不限定于此，当然，能够在不脱离其主旨的范围内进行各种改良、变更。
[工业上的可利用性]
本发明能够用于制造含有高浓度的橄榄苦苷的橄榄叶萃取物及含有其的医药、食品及化妆品。

Claims (2)

1.一种橄榄叶萃取物的制造方法，其包括：第1步骤，将已干燥的橄榄叶进行粉碎；及
第2步骤，在所述经粉碎的橄榄叶中混合葡萄后，使用萃取溶剂萃取橄榄叶萃取物；
在所述第2步骤中，所述萃取溶剂为水、1,3-丁二醇、乙醇或这些的组合，且在70℃以上进行萃取，
所述橄榄叶的品种为选自由卢卡(Lucca)、白内瓦迪友(Nevadillo Blanco)及曼萨尼约(Manzanillo)所组成的群中的至少一种，
橄榄叶相对于所述萃取溶剂的添加叶量为15重量％以上且35重量％以下。
2.一种橄榄叶萃取物，其特征在于：其是利用根据权利要求1所述的橄榄叶萃取物的制造方法制造的。
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