CN107105712A - 预防家禽肥胖和心血管问题的方法 - Google Patents
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Abstract
提供了用于减轻家禽体重增加的饲料,该饲料包含25‑羟基维生素D、角黄素、维生素E和维生素C。饲喂该组合物的动物体重增加,但是它们既不变得肥胖,又不经历与摄食过量相关肥胖有关的不良反应。这种饲料还提供许多心血管益处。
Description
发明内容
本发明涉及通过为随意取食的家禽提供下述饮食(diet)来保护这些鸟类免于变得肥胖的方法,该饮食包含25-羟基维生素D(“25-OH D3”和/或“25-OH D2”)和抗氧化剂/抗炎剂(抗坏血酸、维生素E和角黄素)的组合。这种营养补充剂组合保护家禽免受与摄食过量(hyperphagia)和相关肥胖有关的各种不良反应,包括心血管疾病。本发明还涉及用于此目的的含有25-羟基维生素D和抗氧化剂/抗炎剂的组合的饲料和饲料预混料。
背景技术
家禽可以表现出摄食过量,即它们不会自我调节取食,并且有变得肥胖的风险。肥胖的家禽可能患有许多不利病症,包括卵巢和心血管相关疾病,并且因此令人希望的是预防或至少最小化肥胖在群中的发生。在生产条件下,这通常是通过限制群可用的饲料量来完成的。然而,个体可能会变得具有攻击性并且与其他群成员争抢食物,因而变得肥胖并对其他鸟类造成伤害。
与饲料限制性母鸡相比,随意饲喂还诱导代谢紊乱,包括脂肪过多增加;肝三酰甘油积累;以及血浆葡萄糖、非酯化脂肪酸、极低密度脂蛋白、三酰甘油、磷脂、神经酰胺和鞘磷脂的浓度升高。此外,肝和循环神经酰胺和鞘磷脂积累以及肝脏和脂肪组织中促炎性IL-1β表达的上调在饲料饱食母鸡中系统地表现出脂毒性的发展。神经酰胺是将某些营养物质(即饱和脂肪)和炎性细胞因子(例如肿瘤坏死因子-α,TNFα)与细胞功能及拮抗胰岛素信号转导和线粒体功能的调节联系起来的关键中间物。此外,由于其对特别敏感细胞类型的毒性作用,神经酰胺具有损害心脏、胰腺和脉管系统的能力。导致饲料饱食母鸡的受损的卵巢功能障碍(包括卵泡闭锁、卵巢退化和循环雌二醇水平下降)的脂毒性通过分层卵泡内神经酰胺积累及IL-1β、丝氨酸棕榈酰转移酶和鞘磷脂转录物丰度的上调但蛋白激酶Akt激活的抑制而得到进一步例证。体内证据因此描绘了神经酰胺和IL-1β在介导肉用型母鸡的摄食过多诱导的卵泡闭锁和卵巢退化进展中的作用。
尽管在商业肉用型种鸡群中严格执行限制性饲喂方案,但育种母鸡由于其内在的摄食过量,还是很容易摄食过多。此外,种鸡场管理者面对在产蛋开始之前和过程中以及临近产蛋高峰、产蛋高峰过程中和之后何时以及如何饲喂。基本的要问的根本问题在于,种鸡场管理者可以应用和实施哪些管理和营养工具以及如何应用和实施这些工具来减轻与超重母鸡的肥胖相关的繁殖效率的不利和有害影响。
(25-OH-D3的注册商标;可购自瑞士的帝斯曼营养产品公司(DSMNutritional Products))已被用于促进家禽的骨健康。
25-OH D3和角黄素的组合也已经用于家禽中。WO 2010/057811(帝斯曼知识产权资产管理有限公司(DSM IP ASSETS,BV))描述了用于改善家禽的孵化率、生育力和降低胚胎死亡率的这种组合。该组合可在注册商标MAXICHICK下商购。在该专利公开案中既没有提及包括抗坏血酸,也没有提及用于减轻摄食过量相关肥胖的不良反应的用途。
维生素C(抗坏血酸)通常不被包括在家禽饮食中作为补充剂,因为鸡可以在正常饲养条件下产生足够的维生素C。然而,它已经在一些特定条件下使用,如在热应激情况下。
维生素E通常被添加到家禽饲料中。取决于动物的年龄,肉用型鸡的推荐剂量往往在约50-100IU/kg饲料的范围内。
WO 14/191153(帝斯曼知识产权资产管理有限公司)教导,角黄素及维生素C、维生素E、硒中的至少一种,以及任选地百里香酚、丁子香酚、香草醛和γ-萜品烯中的至少一种的组合可以改善免疫状态、骨健康、骨骼发育和生长及饲料转化,特别是在鸡群受到与疫苗接种相关的压力时。
WO 14/202433(帝斯曼知识产权资产管理有限公司)教导了角黄素和25-OH D3的组合用以改善内部蛋品质,即通过防止在平坦的表面上打碎时蛋白变成水样且铺开而保持鸡蛋的新鲜度,并且保留鸡蛋的Haught单位值(白蛋白的高度)。既没有教导将抗坏血酸添加到该组合中,也没有教导其在减轻摄食过量相关肥胖的不良反应中的用途。
需要调节饲喂随意饮食的家禽的体重增加。
具体实施方式
根据本发明,已经发现25-羟基维生素D(25-OH D3和/或25-OH D2)和抗氧化剂/抗炎剂的组合调节体重增加。随意饲喂含有本发明组合的饮食的家禽增加适量的体重,并且不会变得肥胖或经历与摄食过量相关肥胖有关的其他有害影响,包括心血管问题。
由于25-OH D2和25-OH D3可以在给药后以类似的方式起作用,所以设想任一者可以单独地与抗氧化剂/抗炎剂组合使用,或者25-OH D3和25-OH D2两者的混合物可以与抗氧化剂/抗炎剂组合使用。如果一起使用,25-OH D3:25-OH D2的比率不是本发明的关键部分。单独使用的25-OH D3是优选的。
本发明的抗氧化剂/抗炎剂包含抗坏血酸、维生素E和角黄素的组合。因此,本发明的一个方面是用于调节家禽体重增加的25-OH D3、角黄素、维生素E和抗坏血酸的组合。另一个实施方案是用于调节家禽体重增加的25-OH D2、角黄素、维生素E和抗坏血酸的组合。另一个实施方案是用于调节家禽体重增加的25-OH D3、25-OH D2、角黄素、维生素E和抗坏血酸的组合。
根据本发明,还已经发现25-OH D和抗氧化剂/抗炎剂的组合也可以改善家禽的心血管健康。因此,本发明的另一个方面是该组合用以改善(特别是随意饲喂的)家禽的心血管健康和/或减轻心血管问题的用途。另外,本发明的另一个方面是改善家禽群的心血管健康的方法,该方法包括向该群给予25-OH D和抗氧化剂/抗炎剂的组合,除基础饮食之外还给予所述组合。
本发明的另一个方面是25-OH D、角黄素、维生素E和抗坏血酸的组合,该组合任选地进一步包含至少一种另外的选自下组的生物活性成分,该组由以下各项组成:
维生素D、维生素B2、维生素B6、烟酸、锌、铜、锰和硒,用以调节家禽的体重增加和/或减轻心血管问题。优选地,该25-OH D是25-OH D3。优选地,至少维生素D是另外的生物活性成分。有时,另外的生物活性成分至少包括维生素D和硒。在一些情况下,添加所有另外的生物活性成分。
另外的方面是25-OH D、角黄素、维生素E和抗坏血酸的组合,该组合任选地进一步包含至少一种另外的选自下组的生物活性成分,该组由以下各项组成:维生素D、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、叶酸、生物素、锌、铜、锰、硒、及其组合,用以调节家禽的体重增加和/或减轻心血管问题。优选地,该25-OH D是25-OH D3。有时,另外的生物活性成分包括生物素。有时,另外的生物活性成分包括维生素D和生物素。有时,另外的生物活性成分包括所有任选地上文提及的生物活性成分。
本发明的另一个方面是家禽饲料,该家禽饲料包含25-OH D2或25-OH D3或其混合物、抗坏血酸、维生素E和角黄素的组合,用以调节家禽的体重增加和/或减轻心血管问题。
又另一个实施方案是家禽饲料,该家禽饲料包含25-OH D、角黄素、维生素E和抗坏血酸的组合,该组合任选地进一步包含至少一种另外的选自下组的生物活性成分,该组由以下各项组成:维生素D、维生素B2、维生素B6、烟酸、锌、铜、锰、硒及其组合,用以调节家禽的体重增加和/或减轻心血管问题。优选地,该25-OH D是25-OH D3。有时,另外的生物活性成分至少包括维生素D和硒。在一些情况下,添加所有另外的生物活性成分。
另一个实施方案是家禽饲料,该家禽饲料包含25-OH D、角黄素、维生素E和抗坏血酸的组合,该组合任选地进一步包含至少一种另外的选自下组的生物活性成分,该组由以下各项组成:维生素D、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、叶酸、生物素、锌、铜、锰、硒及其组合,用以调节家禽的体重增加和/或减轻心血管问题。有时,另外的生物活性成分包括生物素。优选地,该25-OH D是25-OH D3。有时,另外的生物活性成分包括维生素D和生物素。有时,另外的生物活性成分包括所有任选地上文提及的生物活性成分。
又另一个实施方案是家禽饲料,该家禽饲料包含25-OH D、角黄素、维生素E和抗坏血酸的组合,该组合任选地进一步包含至少一种另外的选自下组的生物活性成分,该组由以下各项组成:维生素D、维生素B2、维生素B6、烟酸、锌、铜、锰、硒及其组合,用以提供心血管保护益处。优选地,该25-OH D是25-OH D3。有时,另外的生物活性成分至少包括维生素D和硒。在一些情况下,添加所有另外的生物活性成分。
另一个实施方案是家禽饲料,该家禽饲料包含25-OH D、角黄素、维生素E和抗坏血酸的组合,该组合任选地进一步包含至少一种另外的选自下组的生物活性成分,该组由以下各项组成:维生素D、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、叶酸、生物素、锌、铜、锰、硒及其组合,用以改善心血管健康。有时,另外的生物活性成分包括生物素。优选地,该25-OH D是25-OH D3。有时,另外的生物活性成分包括维生素D和生物素。有时,另外的生物活性成分包括所有任选地上文提及的生物活性成分。
当使用本发明的家禽饲料时,可以随意饲喂动物,并且通常经历的可归因于摄食过量的副作用将在较小程度上经历或根本不经历。这使得群管理更容易,并且消除了当给群饲喂限制性饮食时所遇到的问题,但是某些个别鸟类仍然表现出摄食过量,并且可能对其他鸟类表现出攻击行为。因此,本发明的另一个方面是调节家禽的体重增加和或改善群的心血管健康的方法,该方法包括向该家禽饲喂包含上述饲料或组合的饮食。
附图说明
图1示出了响应于与25-OH D3+抗氧化剂/抗炎剂组合的随意饲料摄入,肉用型育种母鸡的葡萄糖清除和胰岛素分泌。饲喂3周后,为母鸡通过翼静脉注射单剂量葡萄糖(0.5g/kg BW)。在葡萄糖输注后的指定时间点,通过翼静脉套管插入术收集血液样品,n=3。
图2示出了响应于与25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂组合的随意饲料摄入,肉用型育种母鸡的组织白介素-1β含量和血浆IL-6水平。在饲喂试验10周后收集组织和血液样品。具有不同上标字母的平均值显著不同(P<0.05),n=3。
图3示出了响应于与25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂内容物组合的随意饲料摄入,肉用型育种母鸡的组织STAT-3激活。在饲喂试验10周后收集组织和血液样品。具有不同上标字母的平均值显著不同(P<0.05),n=3。
图4-6示出了响应于与25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂内容物组合的随意饲料摄入,在肉用型母鸡的尸检过程中拍摄的照片。在饲喂试验10周后对母鸡进行尸检。
图7示出了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡产蛋率(egg production)的影响。
图8示出了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡存活率的影响。
图9示出了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡体重的影响。
图10是一系列示出了在限制性或随意饲料摄入下饮食补充25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的死亡母鸡的心脏的总体形态的照片。
图11是一系列示出了在限制性或随意饲料摄入下饮食补充25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的死亡母鸡的心脏的总体形态的照片。
图12是一系列显示出25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡EGC的影响的心电图(EGC)。箭头指向模式中的不规则处。
图13是一系列示出了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡心律失常ECG模式的影响的EGS。
图14示出了显示出25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡心肌纤维化的影响的照片和图。(在35周龄时)
图15是示出了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡血浆IL-6和IL-1β浓度的影响的图。
图16是示出了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡心肌细胞凋亡的影响的照片。(在35周龄时)
如贯穿本说明书和权利要求书所使用的,适用以下定义:
“25-OH D”是指任何形式的25-羟基维生素D(即25-OH D2或25-OH D3或其混合物)。25-OH D3具体是指25-羟基维生素D3;25-OH D2具体是指25-羟基维生素D2。
“维生素D”意指维生素D2、维生素D3或组合。维生素D3是优选的。
“家禽”意指任何驯养的家禽,包括产肉、产食用蛋和产受精蛋的鸡、鸭、鹅、火鸡、鹌鹑和鸵鸟。
“摄食过量”是过度进食;动物不会主动限制其摄食。
“减轻体重增加”意指与取食不含25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂的相同饮食的家禽相比,家禽在随意饲喂与摄入本文描述的25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂的组合时增加的体重量要少。摄入该组合的鸟类可能比饲喂限制性饮食的鸟类体重增加得多。
“抗坏血酸”和“维生素C”贯穿本说明书和权利要求书可互换使用。
“基础饮食”意指所使用的饲料为家禽提供足够的维生素和矿物质,使得家禽被充分供应维生素和矿物质。
“25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂”意指在如本说明书中所规定的剂量范围下在饲料中作为基础饮食的添加剂给予的25-OH D3、维生素E、角黄素和抗坏血酸的组合。任选地并且优选地,向25-OH D3、维生素E、角黄素和抗坏血酸组合中添加选自下组的额外的生物活性成分,该组由以下各项组成:维生素D、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、叶酸、生物素、锌、铜、锰、硒及其组合。
“猝死”意指个别鸟类在先前没有显示出迹象或疾病或创伤的情况下死亡。鸟类看起来健康,但是在短时间扑扇翅膀和运动腿部并迅速死亡,在此期间它们频繁地跳起以背部着地。它们也可能在死亡时被发现侧面或胸部着地。没有具体的肉眼病变。最近的研究表明,死亡鸟类在心肌细胞和心内膜下浦肯野细胞(Purkinje cell)中有病变,并且这可能有助于诊断。
在本发明的一个方面中,将25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂的组合给予充分供应维生素的而非维生素缺乏的家禽。充分供应维生素的状态优选地是由于使用基础饲料,该基础饲料为家禽供应至少最低量的维生素和矿物质。本发明的组合因此优选地用于添加到基础饮食中。
代谢问题减少
与摄食过量相关的并且可以通过使用本发明的饲料/预混料减小、减少或消除的代谢问题包括:
a)清除非酯化脂肪酸
b)减轻血浆血脂异常(甘油三酸酯、鞘磷脂和神经酰胺)
c)减轻甘油三酸酯和神经酰胺在肝脏、腿部、胸部肌肉和心脏中积累
d)抑制组织促炎性IL-1β产生和血浆IL-6浓度
e)通过上调心脏中STAT-3(信号转导和转录激活因子3)的磷酸化实现心肌保护和增强的心功能。
f)抑制免疫细胞浸润心脏
g)降低腹水的发病率。
这些上述观察到的改善的状况使得死亡率降低,胰岛素信号转导改善,脂毒性发展和全身性炎症减少以及针对燃料过载诱导的心脏发病机制的心脏保护机构的激活。
2.心血管问题,包括猝死
群中的鸟类可能经历猝死,即死因并不是显而易见的。对此进行了进一步调查,如在实施例4中所详述的,并且在本文中概述了结果。我们在有或没有25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂的组合下,在随意饲喂和饲喂限制性饮食的群中调查了这一现象。我们的一些结果阐述如下。
根据本发明,已经发现25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂的组合,在随意饲喂的鸟类中,已经饲喂了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的猝死鸟类(即,经历了猝死的鸟类)具有更高的体重,但较低的相对肝脏、腹部脂肪和心脏重量。
在猝死的鸟类中,随意饲喂导致心脏适应性肥大,并且一些肥大生长可能在病理上发展成心室扩张。其结果是,心脏需要更高的收缩力以维持泵送功能,以便满足到外周组织输送氧气的供血需要。这种情况可能导致心力衰竭。
重要的是,我们发现25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂降低了随意饲喂的鸟类的心脏病原性进展并且由此降低了心力衰竭发病率。因此,本发明的另一个方面是25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂用以减少导致家禽特别是随意饲喂的家禽的猝死的心脏问题量的用途。
在限制性和随意饲喂两种鸟类中,饲喂25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的鸟类表现出较少的适应性肥大生长,从而支持以下假说,即大多数过量燃料可能被分配到肌肉,因此用以增加的泵送功能的心脏肥大生长不能满足用于更高的生长速度(肌肉)的氧气供应的需要,并且因此可能引起心律失常和心力衰竭。
25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂被认为具有以下效果:
·降低在死亡鸟类尸检中观察到的心脏发病(扩张、心包积液、破裂)的发病率;
·降低ECG模式的不规则发生率的量;
·降低随意饲喂的肉用型母鸡的心律失常;
·减轻由心脏发病诱发的猝死;
·减轻随意饲喂的母鸡的心肌纤维化;
·减轻随意饲喂的母鸡的慢性全身性炎症。
·减轻限制性或随意饲料摄入的母鸡的心肌细胞凋亡。
因此,25OH D3+抗氧化剂可以保护心血管系统。因此,本发明的另一个方面是25-OH D3+抗氧化剂-抗炎剂用以保护心血管系统的用途,其中该保护包括至少一种选自下组的作用,该组由以下各项组成:降低心脏发病(扩张、心包积液、破裂)的发病率;降低ECG模式的不规则发生率的量;减少心律失常;减少由心脏发病诱导的群中的猝死数量;减轻心肌纤维化;减轻慢性全身性炎症;以及减轻心肌细胞凋亡。
剂量
在本发明的一个方面中,将25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂的组合给予充分供应维生素的而非维生素缺乏的家禽。充分供应维生素的状态优选地是由于使用基础饲料,该基础饲料为家禽供应至少最低量的维生素和矿物质。本发明的组合因此优选地用于添加到基础饮食中。
25-OH D3:25-OH D3的量的范围可以是15-200μg/kg饲料。优选地,25-OH D3的量是35-150μg/kg饲料。对于具有低剂量的本发明的组合的饲料,35μg/kg 25-OH D3/饲料是优选的;对于具有中等剂量的组合的食物,69μg/kg饲料是优选的;并且对于具有高剂量的组合的食物,150μg饲料是优选的。
维生素E:维生素E的量的范围可以是40-400mg/kg饲料。优选地,该量是80-300mg/kg饲料。对于具有低剂量的本发明的组合的饲料,80mg/kg维生素E是优选的。对于具有中等剂量的饲料,150mg维生素E是优选的;对于具有高剂量的饲料,300mg/kg维生素E是优选的。
角黄素:角黄素的量的范围可以是1-15mg/kg饲料。优选地,该量是3-12mg/kg饲料。对于具有低剂量的本发明的组合的饲料,3mg/kg角黄素是优选的。对于具有中等剂量的饲料,6mg角黄素是优选的;对于具有高剂量的饲料,12mg/kg角黄素是优选的。
抗坏血酸:抗坏血酸的量的范围可以是40-400mg/kg饲料。优选地,该量是100-300mg饲料。对于具有低剂量的本发明的组合的饲料,100mg/kg抗坏血酸是优选的。对于具有中等剂量的饲料,150mg抗坏血酸是优选的;对于具有高剂量的饲料,300mg/kg抗坏血酸是优选的。
因此,本发明的具体的优选饲料包含以下剂量(所有量都是/kg/饲料):
优选饲料#1:
25-OH D3:15-200μg,
维生素E:40-400mg,
角黄素:1-15mg;和
抗坏血酸:40-400mg。
优选饲料#2:
25-OH D3:35-150μg,
维生素E:80-300mg,
角黄素:3-12mg,和
抗坏血酸:80-300mg
优选饲料#3:(低剂量饲料)这种饲料优选的用于轻度肥胖的家禽。
25-OH D3:35μg
维生素E:80mg
角黄素:3mg
抗坏血酸:80mg。
优选饲料#4(中等剂量饲料)这种饲料优选的用于中度至重度肥胖的家禽:
25-OH D3:69μg
维生素E:150mg
角黄素:6mg
抗坏血酸:150mg。
优选饲料#5(高剂量饲料)这种饲料优选的用于重度肥胖的家禽:
25-OH D3:150μg
维生素E:300mg
角黄素:12mg
抗坏血酸:300mg。
以上抗氧化剂/抗炎剂相对于彼此的比率的范围可以如下:
维生素E比维生素C的范围可以是1-10:10-1;优选1-5:5-1;并且更优选1.5:1至1:1.5,并且最优选1:1。
维生素E或维生素C比角黄素的范围可以是从40:1至1:1;优选从20:1至1:1;并且更优选从10:1至1:1
优选比率包括以下项
Vit E | Vit C | 角黄素 |
40 | 40 | 1 |
20 | 20 | 1 |
10 | 10 | 1 |
任选的额外成分
向上文列出的饲料中的每一种中都可以添加额外成分中的至少一种。添加优选至少一种,并且更优选多于一种的以下成分。在其他实施方案中,添加所有以下成分:
维生素D3—通常,它以大约2500IU/kg饲料存在于家禽饮食中。根据本发明,如果需要的话,维生素D的量增加到至少3000IU/kg。
维生素B2:它能以3-25mg/kg来添加;优选6-20mg/kg。对于低剂量饲料,6mg/kg是优选的。对于中等剂量饲料,14mg/kg是优选的;并且对于高剂量饲料,20mg/kg是优选的。
烟酸:它能以25-300mg/kg饲料来添加。优选地,它的范围是60-200mg/kg。对于低剂量饲料,60mg/kg是优选的。对于中等剂量饲料,120mg/kg是优选的;并且对于高剂量饲料,200mg/kg是优选的。
泛酸:它能以10-120mg/kg饲料来添加。优选地,它的范围是15-80mg/kg。对于低剂量饲料,15mg/kg是优选的。对于中等剂量饲料,30mg/kg是优选的;并且对于高剂量饲料,80mg/kg是优选的。
叶酸:它能以1-8mg/kg饲料来添加。优选地,它的范围是2-6mg/kg。对于低剂量饲料,2mg/kg是优选的。对于中等剂量饲料,4mg/kg是优选的;并且对于高剂量饲料,6mg/kg是优选的。
生物素:它能以0.05-1.0mg/kg饲料来添加。优选地,它的范围是0.2-0.8mg/kg。对于低剂量饲料,0.2mg/kg是优选的。对于中等剂量饲料,0.4mg/kg是优选的;并且对于高剂量饲料,0.8mg/kg是优选的。
锌:它能以50-300mg/kg饲料来添加。优选地,它的范围是70-250mg/kg。对于低剂量饲料,70mg/kg是优选的。对于中等剂量饲料,125mg/kg是优选的;并且对于高剂量饲料,250mg/kg是优选的。
铜:它能以5-50mg/kg饲料来添加。优选地,它的范围是10-30mg/kg。对于低剂量饲料,10mg/kg是优选的。对于中等剂量饲料,20mg/kg是优选的;并且对于高剂量饲料,30mg/kg是优选的。
锰:它能以50-300mg/kg饲料来添加。优选地,它的范围是80-270mg/kg。对于低剂量饲料,80mg/kg是优选的。对于中等剂量饲料,150mg/kg是优选的;并且对于高剂量饲料,270mg/kg是优选的。
硒:它能以0.05-0.6mg/kg饲料来添加。优选地,它的范围是0.1-0.4mg/kg。对于低剂量饲料,0.1mg/kg是优选的。对于中等剂量饲料,0.3mg/kg是优选的;并且对于高剂量饲料,0.5mg/kg是优选的。
可以制备预混料以给出上述剂量和优选剂量。配制构成本发明一部分的一种预混料,使得1克预混料被添加到1千克饲料中,并且所得饲料含有在上文给定的剂量中的任一项中所描述的剂量。当然,各成分的量可以变化,使得1千克预混料被添加到1公吨饲料中,并且所得饲料含有在上文给定的剂量中的任一项中所描述的剂量。这在下文的实施例中有具体的说明。
另外,可以设想本文所述的组合可以被添加到任何可商购的家禽食物中,并且因此存在的25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂的总量可以等于原来存在于食物中的量加上如本文所述的加入量。还可以设想,如本文所述的25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂是基础饮食的唯一添加物,该基础饮食至少含有家禽营养所需的最少营养物质。
介绍以下非限制性实施例以更好地说明本发明。
实施例
实施例1
材料与方法
从商业鸡群获得总共三十只45周龄的肉用型育种母鸡(ROSS 308)用于研究。如表1所示配制基础肉用型种鸡产蛋饮食。所计算的营养物质组成示于表2中。
表1.基础肉用型种鸡产蛋饮食的成分组成。
组成 | %,w/w |
玉米 | 66.9 |
大豆粉 | 22.2 |
油脂 | 1.67 |
碳酸钙(磨碎的牡蛎壳) | 6.36 |
磷酸二钙 | 1.8 |
氯化胆碱(70%) | 0.1 |
矿物质预混料1 | 0.1 |
硫酸铜 | 0.05 |
维生素预混料2 | 0.1 |
1所提供的矿物质预混料(/kg饮食,针对处理组1、2和3):
Cu 18mg;I 1.1mg;Fe 80mg;Mn 150mg;Zn 125mg;和Se 0.25mg。
2有关另外的细节,参见表2。
表2.维生素预混料组成(以每kg饮食提供)
表3.所计算的基础肉用型种鸡产蛋饮食的营养物质组成(%)。
组成 | %w/w |
粗蛋白 | 16 |
粗脂肪 | 4.2 |
钙 | 3.1 |
钠 | 0.16 |
总磷 | 0.64 |
总ME | 2910千卡/kg |
饮食补充有或未补充有69mcg/kg饮食的25-OH D3与抗氧化剂/抗炎剂(维生素E、抗坏血酸、角黄素)和富集水平的所选维生素的组合。根据如下饲喂方案(限制性和随意),将母鸡随机分配到3个处理组中:
1.基础饮食–限制性饲喂(140g/天)
2.基础饮食–随意饲喂
3.基础饮食–随意饲喂+69mcg/kg饮食的25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂
将它们单独地放在置于14h:10h光:暗周期和25±3℃的温度的受控室中的金属丝笼中。可随意饮水。实验周期持续10周。饲喂试验3周后,一些鸟类用于相关的血浆参数分析。在实验结束时,将母鸡安乐死并处死以便进行组织样品收集用于进一步研究:
组织形态的尸检
测定脂质和鞘脂分布-血清和组织
测定组织促炎性细胞因子
测定胰岛素抗性
收集用于骨强度分析的胫骨
收获心脏(心肌病)和骨骼肌(胸部和大腿)用于肌病分析。
实施例2
结果与讨论
25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂抑制摄食过多的肉用型母鸡的脂肪过多和腹部脂肪
育种母鸡能够在肝脏、脂肪组织和发育中的卵母细胞的卵黄中存储大量的过量能量(以甘油三酸酯的形式)。脂肪生成(即,葡萄糖转化为甘油三酸酯)主要发生在鸟类的肝脏中,并且涉及一系列连接的酶催化反应,包括糖酵解、三羧酸循环和脂肪酸合成。肝脂肪生成受营养控制和激素控制两者的影响,并且高度响应于饮食的变化。脂肪组织主要用作具有很少脂肪生成活性的脂质的存储部位。鸟类的肝脏与脂肪组织的差异脂肪生成能力是关键转录因子固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)的表达的功能。SREBP-1的基因在肝脏中高度表达,但在脂肪组织中程度低得多。此外,许多脂肪生成酶基因(如脂肪酸合酶、苹果酸酶、乙酰辅酶A羧化酶、ATP柠檬酸裂解酶和硬脂酰辅酶A去饱和酶1)的表达直接受SREBP-1的影响。
随意饲喂的育种母鸡比限制性饲喂的那些增积更多的腹部脂肪。25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充减轻了随意饲喂对体重和组织重量的有害影响,特别是相对脂肪组织重量(脂肪过多)(表4)。随意饲喂的母鸡的胫骨强度通过25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂得到了增强。
表4. 25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂对随意饲喂的肉用型育种母鸡的体重、肝脏重量、腹部脂肪重量和胫骨强度的影响
25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂降低死亡率并且改善产蛋、卵巢形态和血浆176雌二醇水平
雌二醇的分泌是成功排卵卵泡的标志。除了其在触发促性腺激素排卵前激增的作用之外,雌二醇还是重要的卵巢内生长、分化和生存因子。25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂的内容物降低鸟类在随意饲料摄入下的死亡率及卵巢退化和卵巢肿瘤样形态的发生率,增加产蛋和持续的血浆雌二醇水平。
25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂减轻葡萄糖清除和胰岛素敏感性受损
25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂的饮食内容物改善胰岛素抗性,如通过改善摄食过多持续10周的母鸡的空腹血浆葡萄糖和非酯化脂肪酸水平所证明的(表6)。在葡萄糖清除测试中,瘦的母鸡在葡萄糖输注后30-60min之间显示出非常急剧的清除率,相反肥胖的母鸡在30-90min之间具有非常缓慢的清除率(图1)。在胰岛素分泌中,当与瘦的母鸡相比时,肥胖的母鸡在空腹状态下和在葡萄糖输注后显示出更高的血浆胰岛素水平(图1)。摄食过多持续3周的母鸡的葡萄糖清除和葡萄糖诱导的胰岛素分泌两者都通过25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂内容物进行修正(图1)。
表5. 25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂对随意饲喂的肉用型育种母鸡的血浆葡萄糖、非酯化脂肪酸(NEFA)和胰岛素的影响
25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂减轻血脂异常
随意饲喂的母鸡的血浆甘油三酸酯、神经酰胺和鞘磷脂水平是升高的。然而,组合的25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂的补充降低了随意饲喂的母鸡的血浆中这些脂质代谢物的水平(表6)。
表6. 25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂对随意饲喂的肉用型育种母鸡的血浆三酰甘油、神经酰胺和鞘磷脂的影响
25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂减少组织甘油三酸酯的积累和神经酰胺含量
甘油三酸酯和神经酰胺在肝脏、心脏和腿部肌肉中的积累在饲喂补充性25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂的母鸡中比在随意饲喂的那些中要低(表7)。
表7 25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂对随意饲喂的肉用型育种母鸡的组织三酰甘油和神经酰胺含量的影响
25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂抑制摄食过多的肉用型母鸡的组织促炎性IL-1β的产生和血浆IL-6浓度
肥胖相关的炎症通过饮食25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂补充得到减轻,如通过脂肪组织、肝脏、腿部和胸部肌肉以及心脏中的循环IL-6水平和IL-1β产生受抑制所证明的(图2)。
25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂减轻随意饲喂的肉用型育种母鸡的脂毒性
肥胖的中心并发症是胰岛素抗性的发展,胰岛素抗性是胰岛素不能在其主要靶组织、骨骼肌和肝脏中引起餐后营养物质存储。不希望受理论束缚,似乎两种可能的机制可以解释提高的脂肪储备如何影响整个身体的总体胰岛素敏感性,从而有助于外周组织中胰岛素信号转导的下调。首先,将营养物质递送到细胞或组织中超过其存储容量,并且因此这导致产生抑制胰岛素作用的代谢物。特别重要的是,已经显示脂质衍生物(如三酰甘油和神经酰胺)可抑制特异性胰岛素信号转导中间物,从而阻断餐后葡萄糖摄取和/或糖原合成。在随意饲喂肉用型种用雌性的情况下,这些代谢物在外周组织中的持续积累可能有助于整个母鸡体内胰岛素抗性的持续状态和脂毒性发展的持续状态。其次,增加的脂肪过多诱导慢性炎症状态,其特征在于从脂肪细胞或从浸润脂肪垫的巨噬细胞产生的促炎性细胞因子的循环水平升高。已经显示这些炎性介质直接拮抗胰岛素信号转导,并且还诱导分解代谢过程,从而进一步增加营养代谢物向胰岛素响应性器官的递送。
总之,导致形成过量饱和脂肪酸并且因此在非脂肪组织中积累脂质的葡萄糖过度供应升高了活性脂质(鞘脂)的细胞水平,该活性脂质抑制牵涉在代谢调节连同激活的炎症应答和脂毒性发展中的信号转导通路。特别地,神经酰胺是将过量的营养物质(即,饱和脂肪酸)和炎性细胞因子两者与胰岛素抗性的诱导联系起来的推定中间物。此外,神经酰胺在多种不同的细胞类型中是有毒的,并且能够损害心脏、胰腺和脉管系统。此外,25-羟基D3和抗氧化剂/抗炎剂有效地减轻了由于饲喂至饱的肉用型育种母鸡中发生的增加的脂肪过多而引起的代谢和内分泌失调和促炎症应答的有害影响。
25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂减轻摄食过多的肉用型母鸡的心脏发病、腹水和炎症
由于脂质积累过量,心脏可能会变得有功能障碍。随意饲喂促进甘油三酸酯在心脏中的积累表明增加的心脏脂肪酸可用性被适应性地酯化成甘油三酸酯。此外,由于随意饲喂,心脏的神经酰胺含量也是增加的。神经酰胺是脂毒性心肌病中的心脏毒素,其引起炎症应答,如通过免疫细胞的更多心脏浸润所证明的。(表9)。
表8. 25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂对随意饲喂的肉用型育种母鸡的心脏反应的影响
心脏肥大在临床上代表对增加的心脏工作负荷的适应性应答。然而,心脏对神经和激素因子的应答也可以独立于后负荷或血管阻力的增加而引起肥大变化。燃料过载诱导的心脏代偿性生长发生在肉用型育种母鸡中(表8)。心脏肥大可能变得适应不良,并且最终发展成病理状态,从而导致心力衰竭。这些结果支持以下事实,即心脏中的脂毒性发展和肥大生长倾向于引起炎症应答。
磷酸化STAT3(信号转导和转录激活因子3)的心脏保护作用近年来变得越来越清楚。有趣的是,与限制性饲喂的育种母鸡相比,组合的25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂诱导心脏中更大的STAT-3激活(即,STAT-3磷酸化)(图3),并且在随意饲喂的肉用型育种母鸡中观察到最低的激活。当补充有组合的25-羟基D3和抗氧化剂/抗炎剂时,心包内渗出液、心脏心室扩张和腹水的发生率在随意饲喂的育种母鸡中得到缓解。
实施例3
预混料
下表9呈现了待被添加到饲料中的本发明组合物的一些最终剂量范围。
下表10呈现了每1kg饲料中加入的预混物的量:
表11可以用以下成分制备1克预混料:
实施例4
心肌病试验
材料与方法
从商业鸡群获得总共三十只45周龄的肉用型育种母鸡(ROSS 308)用于研究。如表12所示配制基础肉用型种鸡产蛋饮食。所计算的营养物质组成示于表13中。
表12.基础肉用型种鸡产蛋饮食的成分组成。
1所提供的矿物质预混料(/kg饮食,针对处理组1、2和3):Cu,18mg;I,1.1mg;Fe,80mg;Mn,150mg;Zn,125mg;和Se,0.25mg。
2有关另外的细节,参见下表13。
表13.维生素预混料组成(以每kg饮食提供)
表14.所计算的基础肉用型种鸡产蛋饮食的营养物质组成(%)。
饮食补充有或未补充有69mcg 25-OH-D3/kg饮食的与抗氧化剂(抗坏血酸、角黄素)和富集水平的所选维生素组合。根据如下饲喂方案(限制性和随意),将母鸡随机分配到处理组中:
1.基础饮食–限制性饲喂(140g/天)
2.基础饮食–限制性饲喂+(69mcg的25-OH-D3/kg饮食)+抗氧化剂/抗炎剂
3.基础饮食–随意饲喂
4.基础饮食–随意饲喂+(69mcg的25-OH-D3/kg饮食)+
抗氧化剂/抗炎剂
结果:
表15. 25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡产蛋的影响。
PROD=产蛋率(个蛋/天/只母鸡,%);YIELD=蛋产量(个蛋/只母鸡)
结果用平均值±SEM表示。
具有不同上标字母的平均值在同一群内显著不同
(P<0.05)。
图7示出了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡产蛋的影响。从表15和图7可以得出以下结论:
1. 25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂通过促进存活改善总蛋产量。
2.在死亡鸟类中,25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂对随意饲喂的鸟类的蛋产量和产蛋率没有影响,但是降低限制性鸟类的蛋产量和产蛋率。然而,在整个群里,25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂增加蛋产量,但不增加产蛋率。
3.这些结果表明,25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂加速了对猝死敏感的限制性鸟类的死亡进程,并且因此充当群挑选工来阻止对猝死敏感的鸟类更长地存活并且由此降低群维护成本。
表16. 25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡死亡率和死亡母鸡的身体特征的影响
结果用平均值±SEM表示。
具有不同上标字母的平均值显著不同(P<0.05)。
图8示出了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡存活率的影响。
来自表16和图8的结论和注释:
1. 25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂改善鸟类存活率。
2.在随意饲喂的鸟类中,饲喂25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的死亡鸟类具有较高的体重,但较低的相对肝脏、腹部脂肪和心脏重量,从而表明大多数过量燃料可能被分配到肌肉,并且由此用以增加的泵送功能的适应性心脏肥大生长不能满足用于更高的生长速度(肌肉)的氧气供应的需要,并且因此可能引起心律失常和心力衰竭。
表17. 25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡35周龄和50周龄时的胴体特征的影响
结果用平均值±SEM表示。
具有不同上标字母的平均值显著不同(P<0.05);
*;与35周龄相比有显著差异。
随意鸟类在50周龄时的较低的相对肝脏重量似乎是由发展的卵巢退化及因此减少的雌激素分泌导致肝脏中用于卵黄沉积的脂质合成减少而导致。
图9示出了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡体重的影响。
表18. 25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的死亡母鸡心脏发病的影响
结果表示为比率。
图10-11说明了在限制性或随意饲料摄入下饮食补充25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的死亡母鸡的心脏的总体形态。
来自表17和18以及图9-11的结论和注释:
1.随意饲喂导致心脏适应性肥大,并且一些肥大生长可能在病理上发展成心室扩张。其结果是,心脏需要更高的收缩力以维持泵送功能,以便满足供血到外周组织输送氧气的需要,并且这可能已经引起心力衰竭。
2. 25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂降低死亡鸟类的心脏发病(扩张、心包积液、破裂)的发病率。
3.在限制性和随意饲喂两种鸟类中,饲喂25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的鸟类表现出较少的适应性肥大生长。这支持以下假说,即大多数过量燃料可能被分配到肌肉,因此用以增加的泵送功能的心脏肥大生长不能满足用于更高的生长速度(肌肉)的氧气供应的需要,并且因此可能引起心律失常和心力衰竭。
表19. 25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡心电图(ECG)模式和心律失常的影响。关于EGC模式的实例,参见图12和图13。
来自表19以及图12和13的结论和注释:
25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂降低随意饲喂的肉用型母鸡的ECG模式(模式D至G)和心律失常的不规则发生率并且减轻由心脏发病诱发的猝死。
图14示出了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡心肌纤维化的影响。(在35周龄时)
具有不同上标字母的平均值显著不同(P<0.05)。
来自图14的结论和注释
1. 25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂减轻随意饲喂的母鸡的心肌纤维化。
图15示出了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡血浆IL-6和IL-1β浓度的影响。结果用平均值±SEM表示(n=6)。具有不同上标字母的平均值显著不同(P<0.05)。
来自图15的结论和注释:
25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂减轻随意饲喂的母鸡的慢性全身性炎症。
图15示出了25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂的饮食补充对限制性或随意饲料摄入的肉用型母鸡心肌细胞凋亡的影响。(在35周龄时)。结果用平均值±SEM表示(n=3)。具有不同上标字母的平均值显著不同(P<0.05)。
来自图16的结论和注释
25-OH-D3+抗氧化剂/抗炎剂减轻限制性或随意饲料摄入的母鸡的心肌细胞凋亡。
结论:
使用补充性25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂减轻相关的有害影响并具有多种心血管益处。因此,本发明包括25-OH D3和抗氧化剂/抗炎剂用于至少一种选自下组的心血管益处的用途,该组由以下各项组成:
a)清除非酯化脂肪酸;
b)减轻血浆血脂异常(甘油三酸酯、鞘磷脂和神经酰胺);
c)减轻甘油三酸酯和神经酰胺在肝脏、腿部、胸部肌肉和心脏中的积累;
d)抑制组织促炎性IL-1β产生和血浆IL-6浓度;
e)通过上调心脏中STAT-3(信号转导和转录激活因子3)的磷酸化实现心肌保护和增强的心功能;
f)抑制免疫细胞浸润心脏;
g)降低腹水的发病率;
h)降低由于心血管问题造成的猝死在群中的发生率;
i)降低心脏发病(扩张、心包积液、破裂)的发病率;
j)降低ECG模式的不规则发生率的量;
k)减少心律失常的发生;
l)减轻心肌纤维化;
m)减轻慢性全身性炎症;以及
n)减轻限制性或随意饲料摄入的母鸡的心肌细胞凋亡。
Claims (8)
1.25-羟基维生素D、角黄素、维生素E和维生素C的组合用以控制家禽肥胖和/或提供心血管益处的用途。
2.根据权利要求1所述的组合的用途,另外包含至少一种另外的选自下组的生物活性成分,该组由以下各项组成:维生素D、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、叶酸、生物素、锌、铜、锰、硒、及其组合。
3.根据权利要求1所述的用途,其中随意饲喂该家禽。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途,其中该心血管益处是至少一种选自下组的益处,该组由以下各项组成:
a)清除非酯化脂肪酸;
b)减轻血浆血脂异常(甘油三酸酯、鞘磷脂和神经酰胺);
c)减轻甘油三酸酯和神经酰胺在肝脏、腿部、胸部肌肉和心脏中的积累;
d)抑制组织促炎性IL-1β产生和血浆IL-6浓度;
e)通过上调心脏中STAT-3(信号转导和转录激活因子3)的磷酸化实现心肌保护和增强的心功能;
f)抑制免疫细胞浸润心脏;
g)降低腹水的发病率;
h)降低由于心血管问题造成的猝死在群中的发生率;
i)降低心脏发病(扩张、心包积液、破裂)的发病率;
j)降低ECG模式的不规则发生率的量;
k)减少心律失常的发生;
l)减轻心肌纤维化;
m)减轻慢性全身性炎症;以及
n)减轻限制性或随意饲料摄入的母鸡的心肌细胞凋亡。
5.控制家禽肥胖和/或提供心血管益处的方法,该方法包括向该家禽给予25-羟基维生素D、角黄素、维生素E和维生素C的组合。
6.根据权利要求5所述的方法,另外包括给予至少一种另外的选自下组的生物活性成分,该组由以下各项组成:维生素D、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、叶酸、生物素、锌、铜、锰、硒、及其组合。
7.根据权利要求5所述的方法,其中随意饲喂该家禽。
8.根据权利要求5所述的用途,其中该心血管益处是至少一种选自下组的益处,该组由以下各项组成:
a)清除非酯化脂肪酸;
b)减轻血浆血脂异常(甘油三酸酯、鞘磷脂和神经酰胺);
c)减轻甘油三酸酯和神经酰胺在肝脏、腿部、胸部肌肉和心脏中的积累;
d)抑制组织促炎性IL-1β产生和血浆IL-6浓度;
e)通过上调心脏中STAT-3(信号转导和转录激活因子3)的磷酸化实现心肌保护和增强的心功能;
f)抑制免疫细胞浸润心脏;
g)降低腹水的发病率;
h)降低由于心血管问题造成的猝死在群中的发生率;
i)降低心脏发病(扩张、心包积液、破裂)的发病率;
j)降低ECG模式的不规则发生率的量;
k)减少心律失常的发生;
l)减轻心肌纤维化;
m)减轻慢性全身性炎症;以及
n)减轻限制性或随意饲料摄入的母鸡的心肌细胞凋亡。
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