CN107080747A - 葡萄糖基神经酰胺合酶抑制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及葡萄糖基神经酰胺合酶(GCS)的抑制剂，所述抑制剂可单独或与酶代替疗法一起用于治疗代谢性疾病例如溶酶体贮积病并可用于治疗癌症。

Description

葡萄糖基神经酰胺合酶抑制剂
本申请是申请日为2012年3月16日、申请号为201280024127.6(国际申请号为PCT/US2012/029417)、名称为“葡萄糖基神经酰胺合酶抑制剂”的发明专利申请的分案申请。
技术领域
本发明大体涉及治疗癌症和代谢性疾病的领域。更具体地，本发明涉及葡萄糖基神经酰胺合酶(glucosylceramide synthase,GCS)的抑制剂，所述抑制剂可单独或与酶代替疗法一起用于治疗代谢性疾病例如溶酶体贮积病(lysosomal storage disease)并可用于治疗癌症。
背景技术
葡萄糖基神经酰胺合酶(GCS)是在以葡萄糖基神经酰胺为基础的糖鞘脂(GSL)的生物合成中催化初始糖基化步骤的关键酶，所述初始糖基化步骤即由UDP-葡萄糖(UDP-Glc)将葡萄糖转移至神经酰胺以形成葡萄糖基神经酰胺的关键转移(参见图1)。GCS是位于高尔基体顺面膜囊/中间膜囊中的跨膜III型整合蛋白。拒信糖鞘脂(GSL)是多种细胞膜事件的动力学所需要的，所述细胞膜事件包括细胞相互作用、信号传导和运输。已显示GSL结构的合成(参见Yamashita等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1999,96(16),9142-9147)是胚胎发育和一些组织的分化所需要的。神经酰胺在鞘脂代谢中发挥重要作用且已显示GCS活性的下调对鞘脂模式具有显著影响，其中糖鞘脂的表达是减少的。鞘脂(SL)在生理学及病理学心血管状态中具有生物调节作用。具体地，鞘脂及其调节酶就在新生大鼠心脏中对慢性缺氧的适应性响应而言似乎发挥作用(参见El Alwanit等人,Prostaglandins&OtherLipid Mediators 2005,78(1-4),249-263)。
已提出将GCS抑制剂用于治疗多种疾病(参见例如WO2005068426)。所述治疗包括治疗糖脂贮积病(例如泰-萨克斯病、桑德霍夫病、GM2活化因子缺乏症、GM1神经节苷脂贮积病和法布里病)、与糖脂蓄积相关的疾病(例如戈谢病；美格鲁特(Zavesca)作为GCS抑制剂已被批准用于治疗1型戈谢病患者，参见Treiber等人,Xenobiotica 2007,37(3),298-314)、引起肾脏肥大或增生的疾病例如糖尿病性肾病、引起高血糖症或高胰岛素血症的疾病、其中糖脂合成异常的癌症、由使用细胞表面糖脂作为受体的生物体引起的感染性疾病、其中葡萄糖基神经酰胺的合成是必要或重要的感染性疾病、其中葡萄糖基神经酰胺的合成是必要或重要的疾病、其中发生过度糖脂合成的疾病(例如动脉粥样硬化、多囊性肾病和肾脏肥大)、神经元障碍、神经元损伤、与巨噬细胞募集和活化相关的炎性疾病或障碍(例如类风湿性关节炎、克罗恩病、哮喘和脓毒症)及糖尿病和肥胖症(参见WO2006053043)。
具体地，已显示GCS的过度表达参与多重抗药性并破坏由神经酰胺诱导的凋亡。例如，Turzanski等人,Experimental Hematology 2005,33(1),62-72已显示神经酰胺在急性骨髓性白血病(AML)细胞中诱导凋亡且P-糖蛋白
(p-gp)对由神经酰胺诱导的凋亡具有抗性，其中对神经酰胺-葡萄糖基神经酰胺途径的调节对TF-1细胞中的该抗药性具有显著贡献。因此，GCS抑制剂可通过在患病细胞中诱导凋亡来用于治疗增殖性障碍。
发明内容
本发明涉及由以下结构式表示的化合物或其药用盐或前药：
其中
n为1、2或3；
m为0或1；
p为0或1；
t为0、1或2；
y为1或2；
z为0、1或2；
E为S、O、NH、NOH、NNO2、NCN、NR、NOR或NSO2R；
当m为1时，X1为CR1，或当m为0时，X1为N；
X2为O、-NH、-CH2-、SO2、NH-SO2；CH(C1-C6)烷基或-NR2；
X3为O、-NH、-CH2-、CO、-CH(C1-C6)烷基、SO2NH、-CO-NH-或-NR3；
X4为CR4R5、CH2CR4R5或CH2-(C1-C6)烷基-CR4R5；
X5为直接键、O、S、SO2、CR4R5、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)烯基氧基；
R为(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C1-C6)烷基、(C2-C9)杂芳基(C1-C6)烷基；
R1为H、CN、(C1-C6)烷基羰基或(C1-C6)烷基；
R2和R3各自独立为-H、任选被一个或多个取代基所取代的(C1-C6)烷基，所述取代基选自卤素、(C1-C6)烷基、(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C1-C6)烷基(C6-C12)芳基、卤代(C6-C12)芳基和卤代(C2-C9)杂芳基，或任选地，当X2为-NR2且X3为-NR3时，R2和R3可与它们所连接的氮原子一起形成任选取代有一个或多个取代基的非芳族杂环，所述取代基选自卤素、(C1-C6)烷基、(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C1-C6)烷基(C6-C12)芳基、卤代(C6-C12)芳基和卤代(C2-C9)杂芳基；
R4和R5独立选自H、(C1-C6)烷基，或与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；
R6为-H、卤素、-CN、(C6-C12)芳基、(C6-C12)芳基氧基、(C1-C6)烷氧基；任选被一个至四个卤素或(C1-C6)烷基所取代的(C1-C6)烷基；
A1为(C2-C6)炔基；(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C2-C9)杂环烷基或苯并(C2-C9)杂环烷基，所述基团任选取代有一个或多个选自以下的取代基：卤素、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷基；(C1-C6)烯基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)二烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、硝基、CN、-OH、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷氧基；(C1-C6)烷氧基羰基及(C1-C6)烷基羰基；
A2为H、(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C2-C9)杂环烷基或苯并(C2-C9)杂环烷基，所述基团任选取代有一个或多个选自以下的取代基：卤素、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷基；(C1-C6)烯基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)二烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、O(C3-C6环烷基)、(C3-C6)环烷氧基、硝基、CN、OH、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷氧基；(C3-C6)环烷基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基羰基、(C1-C6)卤代烷基；
条件是n+t+y+z的总和不大于6；
条件是当p为0时，X2为NH-SO2且X3为NH；
条件是当n为1；t为0；y为1；z为1；X2为NH；E为O；X3为NH；A2为H且X5为直接键时，A1不为未取代的苯基、卤代苯基或异丙烯基苯基；
条件是当n为1；t为0；y为1；z为1；X2为O；E为O；X3为NH；A1为(C6-C12)芳基且X5为直接键；A2为H且R4为H时，R5不为环己基；及
条件是当n为1；t为0；y为1；z为1；X2为NH；E为O；X3为CH2；R4和R5都为氢；A2为H且X5为直接键时，A1不为未取代的苯基。本发明某些方面包括向患者给药上述化合物作为联合疗法的一部分，所述联合疗法包括酶代替疗法(ERT)和小分子疗法(SMT)，从而在被诊断患有溶酶体贮积病的患者中减少底物蓄积量和/或抑制底物蓄积。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1；t为0；y为1且z为1。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1；t为1；y为1且z为1。
本发明还涉及式I化合物，其中n为2；t为0；y为1且z为1。
本发明还涉及式I化合物，其中n为2；t为1；y为1且z为1。
本发明还涉及式I化合物，其中n为3；t为0；y为1且z为1。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1；t为2；y为1且z为1。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1；t为0；y为1且z为0。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1；t为1；y为1且z为0。
本发明还涉及式I化合物，其中n为2；t为0；y为1且z为0。
本发明还涉及式I化合物，其中n为2；t为1；y为1且z为0。
本发明还涉及式I化合物，其中n为3；t为0；y为1且z为0。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1；t为2；y为1且z为0。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1；t为1；y为2且z为0。
本发明还涉及式I化合物，其中n为2；t为0；y为2且z为0。
本发明还涉及式I化合物，其中m为1且X1为CR1。
本发明还涉及式I化合物，其中m为0且X1为N。
本发明还涉及式I化合物，其中m为1；E为O；X2为O且X3为NH。
本发明还涉及式I化合物，其中m为1；E为O；X2为NH且X3为NH。
本发明还涉及式I化合物，其中m为1；E为O；X2为CH2且X3为NH。
本发明还涉及式I化合物，其中m为1；E为O；X2为NH且X3为CH2。
本发明还涉及式I化合物，其中m为1；E为S；X2为NH且X3为NH。
本发明还涉及式I化合物，其中m为0；E为O；X1为NH且X3为NH。
本发明还涉及式I化合物，其中m为1；E为O；X2为NH且X3为CO-NH。
本发明还涉及式I化合物，其中m为1；p为0；X2为NH-SO2且X3为NH。
本发明还涉及式I化合物，其中R4和R5各自为(C1-C6)烷基或与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环。
本发明还涉及式I化合物，其中R4和R5各自为甲基。
本发明还涉及式I化合物，其中R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环。
本发明还涉及式I化合物，其中R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺环丙基环。
本发明还涉及式I化合物，其中R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷氧基环。
本发明还涉及式I化合物，其中A1为(C2-C6)炔基或(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中A1为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中A1为噻吩、噻唑、异噻唑、呋喃、噁唑、异噁唑、吡咯、咪唑、吡唑、三唑、吡啶、嘧啶、哒嗪、吲哚、苯并三唑、苯并异噁唑、苯并吡唑、苯并咪唑、苯并呋喃、苯并噁唑或苯并异噁唑。
本发明还涉及式I化合物，其中A1为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中A1为吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢吡喃基、吡喃基、噻喃基、氮杂环丙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丙烷基、亚甲基二氧基、色烯基、巴比妥基(barbituryl)、异噁唑烷基、1,3-噁唑烷-3-基、异噻唑烷基、1,3-噻唑烷-3-基、1,2-吡唑烷-2-基、1,3-吡唑烷-1-基、哌啶基、硫吗啉基、1,2-四氢噻嗪-2-基、1,3-四氢噻嗪-3-基、四氢噻二嗪基、吗啉基、1,2-四氢二嗪-2-基、1,3-四氢二嗪-1-基、四氢氮杂基、哌嗪基、哌嗪-2-酮基、哌嗪-3-酮基、色满基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、咪唑烷基、2-咪唑烷基、1,4-二噁烷基、8-氮杂二环[3.2.1]辛基、3-氮杂二环[3.2.1]辛基、3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛基、2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚基、2,5-二氮杂二环[2.2.2]辛基、八氢-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪基、3-氮杂二环[4.1.0]庚基、3-氮杂二环[3.1.0]己基、2-氮杂螺[4.4]壬基、7-氧杂-1-氮杂-螺[4.4]壬基、7-氮杂二环[2.2.2]庚基或八氢-1H-吲哚基。
本发明还涉及式I化合物，其中A1为苯并(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中A1为2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己二烯或2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯。
本发明还涉及式I化合物，其中R6为H。
本发明还涉及式I化合物，其中X5为直接键。
本发明还涉及式I化合物，其中X5为CR4R5。
本发明还涉及式I化合物，其中R4和R5各自为甲基。
本发明还涉及式I化合物，其中R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环。
本发明还涉及式I化合物，其中R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺环丙基环。
本发明还涉及式I化合物，其中R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷氧基环。
本发明还涉及式I化合物，其中A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中A2为吡啶。
本发明还涉及式I化合物，其中A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中A2为吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢吡喃基、吡喃基、噻喃基、氮杂环丙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丙烷基、亚甲基二氧基、色烯基、巴比妥基、异噁唑烷基、1,3-噁唑烷-3-基、异噻唑烷基、1,3-噻唑烷-3-基、1,2-吡唑烷-2-基、1,3-吡唑烷-1-基、哌啶基、硫吗啉基、1,2-四氢噻嗪-2-基、1,3-四氢噻嗪-3-基、四氢噻二嗪基、吗啉基、1,2-四氢二嗪-2-基、1,3-四氢二嗪-1-基、四氢氮杂基、哌嗪基、哌嗪-2-酮基、哌嗪-3-酮基、色满基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、咪唑烷基、2-咪唑烷基、1,4-二噁烷基、8-氮杂二环[3.2.1]辛基、3-氮杂二环[3.2.1]辛基、3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛基、2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚基、2,5-二氮杂二环[2.2.2]辛基、八氢-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪基、3-氮杂二环[4.1.0]庚基、3-氮杂二环[3.1.0]己基、2-氮杂螺[4.4]壬基、7-氧杂-1-氮杂-螺[4.4]壬基、7-氮杂二环[2.2.2]庚基或八氢-1H-吲哚基。
本发明还涉及式I化合物，其中A2为苯并(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中R1为氢或甲基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C6-C12)芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C6-C12)芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；p为1；E为O；X2为O；X3为NH；R1为H；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CH2；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为CH2；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为S；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为SO2；X2为NH；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为N；m为0；E为O；X3为NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C2-C9)杂芳基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中n为1、2或3；t为0、1或2；y为0或1；z为0、1或2；X1为CR1；m为1；E为O；X2为NH；X3为CO-NH；R4和R5各自独立为甲基；R6为氢或甲基；A1为(C3-C10)环烷基；X5为直接键、O或CR4R5且A2为(C2-C9)杂芳基。
本发明还涉及式I化合物，其中A1为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物，其中A2为(C3-C10)环烷基。
本发明还涉及式I化合物或其药用盐或前药，所述化合物选自：
[2-(2,4’-二氟联苯-4-基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯；
{2-[4-(1,3-苯并噻唑-6-基)苯基]丙-2-基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯；
{1-[5-(4-氟苯基)吡啶-2-基]环丙基}氨基甲酸1-氮杂二环[3.2.2]壬-4-基酯；
{1-[3-(4-氟苯氧基)苯基]环丙基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯；
{1-[4-(1,3-苯并噻唑-5-基)苯基]环丙基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯；
[1-(4’-氟-3’-甲氧基联苯-4-基)环丙基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯；
[3-(4’-氟联苯-4-基)氧杂环丁烷-3-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯；
{1-[6-(4-氟苯氧基)吡啶-2-基]环丙基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯；
[3-(4’-氟联苯-4-基)戊-3-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯；
{2-[2-(4-氟苯基)-2H-吲唑-6-基]丙-2-基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯；
{2-[2-(1H-吡咯-1-基)吡啶-4-基]丙-2-基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯；
1-(3-乙基-1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)-3-[1-(4’-氟联苯-4-基)环丙基]脲；
N-(1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)-N’-[1-(4’-氟联苯-4-基)环丙基]乙二胺；
(1-{4-[(4,4-二氟环己基)氧基]苯基}环丙基)氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯；
1-(4-甲基-1-氮杂二环[3.2.2]壬-4-基)-3-[1-(5-苯基吡啶-2-基)环丙基]脲；
1-[1-(4’-氟联苯-4-基)环丙基]-1-甲基-3-(3-甲基-1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)脲；
1-[1-(4’-氟联苯-4-基)环丙基]-1-甲基-3-(3-甲基-1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)脲；
1-{2-[4’-(2-甲氧基乙氧基)联苯-4-基]丙-2-基}-3-(3-甲基-1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)脲；
2-(1-氮杂二环[3.2.2]壬-4-基)-N-[1-(5-苯基吡啶-2-基)环丙基]乙酰胺；
3-(4’-氟联苯-4-基)-3-甲基-N-(4-甲基-1-氮杂二环[3.2.2]壬-4-基)丁酰胺；
N-[2-(联苯-4-基)丙-2-基]-N’-(3-甲基-1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)硫酸二酰胺；
N-[2-(4’-氟联苯-4-基)丙-2-基]-N’-(3-甲基-1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)硫酸二酰胺；
1-(3-丁基-1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)-3-{2-[1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基]丙-2-基}脲；
[4-(4-氟苯基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯；
1-(3-丁基-1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)-3-[4-(4-氟苯基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]脲；
N-[1-(4’-氟联苯-4-基)环丙基]-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺；
1-(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-4-基)丙-2-基)-3-(3-甲基-1-氮杂二环[3.2.2]壬-3-基)脲；
1-(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-4-基)丙-2-基)-3-(4-甲基-1-氮杂二环[4.2.2]癸-4-基)脲；
1-(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-4-基)丙-2-基)-3-(3-甲基-1-氮杂二环[4.2.2]癸-3-基)脲；及
1-(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-4-基)丙-2-基)-3-(5-甲基-1-氮杂二环[4.2.2]癸-5-基)脲。
本发明还涉及药物组合物，其用于在需要所述治疗的受试者中治疗由葡萄糖基神经酰胺合酶(GCS)介导的疾病或病症或治疗其中涉及GCS的疾病或病症，所述治疗包括向所述受试者给药有效量的式I化合物。
本发明还涉及用于在需要所述治疗的受试者中治疗由葡萄糖基神经酰胺合酶(GCS)介导的疾病或病症或治疗其中涉及GCS的疾病或病症的方法，所述治疗包括向所述受试者给药有效量的式I化合物。
本发明还涉及治疗疾病或病症例如癌症的方法。
本发明还涉及治疗疾病或病症例如代谢障碍的方法。
本发明还涉及治疗疾病或病症例如神经性疾病的方法。
本发明还涉及方法，其中所述神经性疾病为阿尔茨海默病(Alzheimer)。
本发明还涉及方法，其中所述神经性疾病为帕金森病(Parkinson)。
本发明还涉及在体外使细胞葡萄糖基神经酰胺合酶催化活性降低的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的式I化合物接触。
本发明还涉及由以下结构式表示的式I化合物或其药用盐或前药：
本发明还涉及由以下结构式表示的式I化合物或其药用盐或前药：
本发明还涉及对被诊断患有溶酶体贮积病的受试者进行治疗的方法，所述方法包括向所述受试者给药有效量的式I化合物且在某些实施方案中，所述化合物为由以下结构式表示的化合物或其药用盐或前药：
在本发明某些实施方案中，所述溶酶体贮积病是由糖鞘脂途径缺陷引起的。
在本发明某些实施方案中，所述溶酶体贮积病为戈谢病(Gaucher)、法布里病(Fabry)、GM1神经节苷脂贮积病(GM1-gangliosidosis)、GM2活化因子缺乏症(GM2Activatordeficiency)、泰-萨克斯病(Tay-Sachs)或桑德霍夫病(Sandhoff)。
本发明还涉及对被诊断患有溶酶体贮积病的受试者进行治疗的方法，所述方法包括向所述受试者给药有效量的式I化合物及向所述受试者给药治疗有效量的溶酶体酶。
在本发明某些实施方案中，所述溶酶体酶为葡萄糖脑苷脂酶(glucocerebrosidase)、α-半乳糖苷酶A(alpha-galactosidase A)、己糖胺酶A(hexosaminidase A)、己糖胺酶B(hexosaminidase B)或GM1神经节苷脂-β-半乳糖苷酶(GM1-ganglioside-β-galactosidase)。
在本发明某些实施方案中，所述受试者在治疗前具有升高的溶酶体底物水平且所述受试者在接受治疗后与单独用所述溶酶体酶或单独用所述化合物治疗的受试者相比具有尿和血浆中的较低的溶酶体底物组合量。
在本发明某些实施方案中，所述底物为神经酰胺三己糖苷(globotriaosylceramide)或溶血神经酰胺三己糖苷(lyso-globotriaosylceramide)及其组合。
本发明还涉及在被诊断患有溶酶体贮积病的受试者中降低葡萄糖基神经酰胺合酶(GCS)活性的方法，所述方法包括单独或以与酶代替疗法的联合疗法形式向所述患者给药有效量的式I化合物。
本发明还涉及在被诊断患有溶酶体贮积病的受试者中减少GCS衍生物质蓄积的方法，所述方法包括单独或以与酶代替疗法的联合疗法形式向所述患者给药有效量的式I化合物。
本发明提供对被诊断患有溶酶体贮积病的受试者进行治疗的联合疗法，其包括交替给药酶代替疗法和小分子疗法。
本发明提供对被诊断患有溶酶体贮积病的受试者进行治疗的联合疗法，其包括同时给药酶代替疗法和小分子疗法。
在本发明各种联合疗法中，应该理解的是，可在给药酶代替疗法前、与给药酶代替疗法同时或在给药酶代替疗法后给药小分子疗法。类似地，可在给药小分子疗法前、与给药小分子疗法同时或在给药小分子疗法后给药酶代替疗法。
定义
本申请使用的术语“药用盐”是指本申请化合物的药用酸加成盐或药用碱加成盐，所述盐可与含有其的药物组合物中的任意其它组分一起给药而不产生任意一种或多种不良生物作用或不产生任意一种或多种有害相互作用。
本申请使用的术语“前药”是指母体药物分子的药理学衍生物，其在生物体内需要自发的或酶催化的生物转化以释放活性药物。例如，前药为式I化合物的变体或衍生物，其具有可在某些代谢条件下发生裂解的基团，所述基团当裂解时形成式I化合物。然后所述前药当在生理学条件下经历溶剂分解或经历酶催化降解时是具有体内药物活性的。本申请前药化合物可称为单一前药、双重前药、三重前药等，这取决于在生物体内释放活性药物所需要的生物转化步骤的数目和存在于前体形式中的官能团的数目。前药形式通常提供以下优点：溶解性、组织相容性或哺乳动物体内的延迟释放(参见Bundgard,Design of Prodrugs,pp.7-9,21-24,Elsevier,Amsterdam 1985和Silverman,The Organic Chemistry of DrugDesign and Drug Action,pp.352-401,Academic Press,San Diego,Calif.,1992)。本领域公知的前药包括公知的酸衍生物例如通过使母体酸与适当的醇反应来制备的酯、通过使母体酸化合物与胺反应来制备的酰胺、通过使碱性基团发生反应而形成的酰基化碱衍生物等。当然，其它前药衍生物可与本申请公开的其它特征组合以提高生物利用度。因此，本领域技术人员将认识到的是，可将本申请公开的某些具有游离氨基、酰氨基、羟基或羧基的化合物转化成前药。前药包括以下化合物，所述化合物具有通过肽键与本申请化合物中的游离氨基、羟基或羧基共价连接的氨基酸残基或多肽链，所述多肽链由两个或更多个(例如两个、三个或四个)氨基酸残基组成。所述氨基酸残基包括20种天然存在的通常经由三个字母符号来指定的氨基酸且还包括4-羟基脯氨酸、羟基赖氨酸、锁链赖氨酸、异锁链赖氨酸、3-甲基组氨酸、正缬氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸、高半胱氨酸、高丝氨酸、鸟氨酸和蛋氨酸砜。前药还包括以下化合物，所述化合物具有与本申请公开的任意上述取代基共价键合的碳酸酯、氨基甲酸酯、酰胺或烷基酯部分。
本申请使用的术语“(C1-C6)烷基”是指饱和的直链或支链的自由基，其基本由1至6个碳原子和相应数目的氢原子组成。示例性的(C1-C6)烷基包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基等。当然，考虑到本申请权益，其它(C1-C6)烷基对于本领域技术人员将是显而易见的。
本申请使用的术语“(C3-C10)环烷基”是指非芳族的饱和的形成至少一个环的自由基，其基本由3至10个碳原子和相应数目的氢原子组成。因此，(C3-C10)环烷基可为单环或多环的。所述多环环烷基中的各个环可具有不同的连接方式例如除共价键代替外的稠合、桥接、螺环等。示例性的(C3-C10)环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、降冰片基、二环[3.2.1]辛基、八氢-并环戊二烯基、螺[4.5]癸基、取代有环丁基的环丙基、取代有环戊基的环丁基、取代有环丙基的环己基等。当然，考虑到本申请权益，其它(C3-C10)环烷基对于本领域技术人员将是显而易见的。
本申请使用的术语“(C2-C9)杂环烷基”是指非芳族的自由基，其具有形成至少一个环的3至10个原子(即环原子)，其中2至9个环原子为碳且其余一个或多个环原子(即一个或多个杂环原子)选自氮、硫和氧。因此，(C2-C9)杂环烷基可为单环或多环的。所述多环杂环烷基中的各个环可具有不同的连接方式例如除共价键代替外的稠合、桥接、螺环等。示例性的(C2-C9)杂环烷基包括吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢吡喃基、吡喃基、噻喃基、氮杂环丙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丙烷基、亚甲基二氧基、色烯基、巴比妥基、异噁唑烷基、1,3-噁唑烷-3-基、异噻唑烷基、1,3-噻唑烷-3-基、1,2-吡唑烷-2-基、1,3-吡唑烷-1-基、哌啶基、硫吗啉基、1,2-四氢噻嗪-2-基、1,3-四氢噻嗪-3-基、四氢噻二嗪基、吗啉基、1,2-四氢二嗪-2-基、1,3-四氢二嗪-1-基、四氢氮杂基、哌嗪基、哌嗪-2-酮基、哌嗪-3-酮基、色满基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、咪唑烷基、2-咪唑烷基、1,4-二噁烷基、8-氮杂二环[3.2.1]辛基、3-氮杂二环[3.2.1]辛基、3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛基、2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚基、2,5-二氮杂二环[2.2.2]辛基、八氢-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪基、3-氮杂二环[4.1.0]庚基、3-氮杂二环[3.1.0]己基、2-氮杂螺[4.4]壬基、7-氧杂-1-氮杂-螺[4.4]壬基、7-氮杂二环[2.2.2]庚基、八氢-1H-吲哚基等。(C2-C9)杂环烷基通常经由碳原子或氮原子与主结构连接。当然，考虑到本申请权益，其它(C2-C9)杂环烷基对于本领域技术人员将是显而易见的。
本申请使用的术语“(C2-C9)杂芳基”是指芳族的自由基，其具有形成至少一个环的5至10个原子(即环原子)，其中2至9个环原子为碳且其余一个或多个环原子(即一个或多个杂环原子)选自氮、硫和氧。因此，(C2-C9)杂芳基可为单环或多环的。所述多环杂芳基中的各个环可具有不同的连接方式例如除共价键代替外的稠合等。示例性的(C2-C9)杂芳基包括呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、吡咯基、三唑基、四唑基、咪唑基、1,3,5-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,3,5-噻二唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、1,2,4-三嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、吡唑并[3,4-b]吡啶基、噌啉基、蝶啶基、嘌呤基、6,7-二氢-5H-[1]氮杂茚基、苯并[b]噻吩基、5,6,7,8-四氢-喹啉-3-基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并异噁唑基、苯并咪唑基、硫杂茚基、异硫杂茚基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、异吲哚基、吲哚基、吲嗪基、吲唑基、异喹啉基、喹啉基、酞嗪基、喹喔啉基、喹唑啉基和苯并噁嗪基等。(C2-C9)杂芳基通常经由碳原子与主结构连接，然而本领域技术人员将认识到的是，某些其它原子例如杂环原子可与主结构连接。当然，考虑到本申请权益，其它(C2-C9)杂芳基对于本领域技术人员将是显而易见的。
本申请使用的术语“(C6-C10)芳基”是指苯基或萘基。
本申请使用的术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
本申请使用的术语“氨基”是指具有氮原子和1至2个氢原子的自由基。因此，术语“氨基”通常是指伯氨基和仲氨基。就此而言，本申请及所附权利要求书使用的叔氨基由通式RR’N-表示，其中R和R’为可相同或不同的碳基。然而，术语“氨基”在本申请中通常用于描述伯氨基、仲氨基或叔氨基且本领域技术人员将能够根据本申请使用该术语的上下文而容易地确定所述氨基。
本申请使用的术语“联合疗法”是指用两种或更多种治疗平台(例如酶代替疗法和小分子疗法)以轮换、交替和/或同时的治疗安排对患者进行治疗。治疗安排的实例可包括但不限于：(1)进行酶代替疗法，然后进行小分子疗法；(2)进行小分子疗法，然后进行酶代替疗法；(3)同时进行酶代替疗法与小分子疗法；及(4)上述治疗安排的任意组合。联合疗法可按需提供治疗平台的暂时重叠，这取决于给定的贮积病在给定的受试者中的临床病程。
本申请使用的术语“酶代替疗法”或“ERT”是指向有此需要的患者给药外源产生的天然酶或重组酶。例如，在溶酶体贮积病的情况下，患者由于负责代谢底物的酶的缺乏或缺陷或由于适当的酶功能所需要的酶活化因子的缺乏而在溶酶体中蓄积有害水平的底物(即所贮积的物质)。向患者提供酶代替疗法以降低(即缩减)受害组织中蓄积底物的水平。表1提供了溶酶体贮积病的列表并针对每种疾病鉴定了相应的酶缺乏和蓄积的底物。治疗溶酶体贮积病的酶代替疗法是本领域已知的。根据本发明联合疗法，表1中鉴定的溶酶体酶可用于酶代替疗法以在被诊断患有各种溶酶体贮积病的患者中降低相应底物的水平。
本申请使用的“有效量”的酶或小分子当在本发明联合疗法中给药至受试者时为以下量，所述量足以改善溶酶体贮积病的临床病程，其中临床改善通过本领域技术人员熟知的多种定义参数中的任意一种来测量。
缩写
ACN是指乙腈。
DMF是指N,N-二甲基甲酰胺。
DMSO是指二甲基亚砜。
EtOAc是指乙酸乙酯。
EtOH是指乙醇。
许尼希碱是指二异丙基乙基胺(“DIPEA”)。
MeOH是指甲醇。
NaOH是指氢氧化钠。
THF是指四氢呋喃。
TFA是指三氟乙酸。
本申请所述化合物的其它特征和优点基于以下对某些实施方案的详细描述而将是显而易见的。
附图说明
图1显示了Gb3和lyso-Gb3的可能合成的代谢途径。文献记载的合成途径用黑色箭头表示且尚未记载的(可能的)途径用灰色箭头表示。
图2A显示了(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯的化学结构。
图2B显示了(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯的化学结构。
图3显示了来自用300mg/kg/天(1R,2R)-辛酸[2-(2’,3’-二氢-苯并[1,4]二氧杂环己二烯-6’-基)-2-羟基-1-(吡咯烷-1-基)甲基-乙基]-酰胺-L-酒石酸盐(“GZ638”)或60mg/kg/天(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯(S)-2-羟基琥珀酸盐(“GZ452”)治疗的12月龄法布里病小鼠的肾(A)和心(B)中的Gb3浓度。
图4A所示的研究时间线显示法布里病小鼠在3、8和12月龄时开始用60mg/kg/天GZ452治疗。如所示那样进行定期抽血、尿收集、加热板和活动室测定。
图4B显示了来自在3或8月龄时开始用60mg/kg/天GZ452治疗的法布里病小鼠的尿(A)和血浆(B)中的Gb3浓度。药物治疗(Rx)进行2或4个月。
图5显示了来自12月龄法布里病小鼠的肾组织中的Gb3(A)和lyso-Gb3(B)浓度，所述小鼠未接受治疗(UNT)或用60mg/kg/天GZ452治疗4个月(SRT)。
图6A所示的研究时间线显示法布里病小鼠在3月龄时开始用α-半乳糖苷酶A(1mg/kg每2个月)或60mg/kg/天GZ452或所述2种治疗的组合进行治疗。如所示那样进行定期抽血、尿收集和加热板测定。
图6B显示了来自5月龄法布里病小鼠的血浆(A和C)和尿(B和D)中的Gb3(A和C)和lyso-Gb3(C和D)浓度，所述小鼠用单独的α-半乳糖苷酶A(ERT)、单独的GZ452(SRT)或所述两者的组合(E+S)治疗2个月。
图7显示了对由法布里病小鼠血浆、尿和肾分离的Gb3进行的N联酰基链同工型分析。
图8显示了10月龄法布里病小鼠与未接受治疗的小鼠(UNT)和野生型小鼠(WT)相比在用α-半乳糖苷酶A(ERT)、GZ452(SRT)或所述两者的组合(E+S)治疗7个月后对热刺激(55℃加热板)的潜伏期(响应时间)。
图9显示葡萄糖基神经酰胺(GluCer)和葡萄糖基鞘氨醇(GluSph)在新生K14小鼠的脑中是显著增加的。对葡萄糖基神经酰胺和半乳糖基神经酰胺进行的质谱分析显示：(A)K14小鼠(新生儿戈谢病(也称为2型戈谢病)的动物模型)中的GluCer在生命的最初2周内比WT小鼠高10倍；(B)GalCer的水平就K14和WT小鼠而言是随时间类似的；(C)K14小鼠中的GluSph水平在生命的最初2周内比月龄匹配的WT小鼠高≥10倍；WT动物中的GluSph水平低于检测水平(<0.3ng/mg)；(D)在生命的最初2周内在K14和WT小鼠之间脑重量没有显著差异。数据点表示针对n＝4的平均值和误差棒SEM。
图10显示(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯(“GZ161”)的全身性给药降低K14小鼠脑中的GluCer和GluSph水平。K14和WT小鼠在P4开始每天用媒介物或5mg/kg GZ161治疗(IP)并在P10对脑中的GluCer和GluSph进行分析。用GZ161治疗的动物在此时是无症状的。用GZ161进行的治疗在K14中(A)使GluCer的水平降低～70％且(B)使GluSph的水平降低～60％。这两种糖鞘脂的治疗后水平与它们的WT同窝幼仔相比仍然是显著升高的且基因型通过死后DNA分析来确认。*p<0.05。n＝4/组。
图11显示GZ161的全身性给药减少K14小鼠的整个脑中的CD68染色。在出生后第4天(P4)开始每天用媒介物或GZ161治疗(IP)的K14小鼠及WT小鼠的海马体、丘脑、脑干和小脑在P10的代表性免疫组织化学CD68染色(上部系列)。对上述各组中的染色进行的定量显示用GZ161进行的全身性治疗使所有脑区域中的CD68+细胞显著减少(下部系列)。在其它结构例如嗅球和额皮质中观察到类似的减少(数据未显示)。**p<0.01。n＝4/组。
图12显示GZ161的全身性给药减少K14小鼠的一些脑区域中的F4/80染色。在P4开始每天用媒介物或GZ161治疗(IP)的K14小鼠及WT小鼠的海马体、丘脑、脑干和小脑在P10的代表性免疫组织化学F4/80染色(上部系列)。对上述各组中的染色进行的定量显示用GZ161进行的全身性治疗使丘脑和脑干中的F4/80+细胞显著减少(下部系列)。在其它结构例如嗅球和额皮质中观察到类似的减少；在这两种结构中都观察到统计学差异(数据未显示)。*p<0.05。n＝4/组。
图13显示GZ161的全身性给药减少K14小鼠中的神经胶质增生。在P4开始每天用媒介物或GZ161治疗(IP)的K14小鼠及WT小鼠的海马体、丘脑、脑干和小脑在P10的代表性免疫组织化学GFAP染色(上部系列)。对上述各组中的染色进行的定量显示用GZ161进行的全身性治疗使海马体和小脑中的GFAP+细胞显著减少(下部系列)；在这两种结构中都观察到统计学差异(数据未显示)。
图14显示GZ161的全身性给药增加K14小鼠的中位寿命。K14小鼠在P4开始每天注射(IP)媒介物或GZ161或给药以下组合治疗，所述组合治疗包括在P1、2和3的三次脑室内(ICV)注射rhGC及在P4开始每天注射(IP)GZ161。用媒介物治疗的小鼠具有15天中位寿命(n＝25)；用GZ161治疗的小鼠具有18天中位寿命(n＝12；与媒介物治疗组相比p<0.0001)；用GZ161和rhGC组合给药的小鼠具有26天中位寿命(n＝13)。
图15显示GZ161似乎可穿过血液/胎盘屏障。GZ161向妊娠WT小鼠的全身性给药(20mg/kg/天,在食物中)降低小鼠在出生时(P0)整个脑匀浆中的GluCer负载(n＝7；p<0.0001)。
图16显示用GZ161对K14小鼠进行的子宫内治疗对存活具有很小的影响。在P4开始每天用媒介物治疗(IP)的K14小鼠具有14天的中位寿命(n＝13)。向妊娠K14小鼠全身性给药GZ161(20mg/kg/天,在食物中)，然后在P0开始每天向幼仔全身性给药(IP)GZ161(5mg/kg)，这使寿命延长至19天(n＝13)，该结果与在P4开始每天用GZ161以5mg/kg对幼仔进行的全身性治疗(IP)(n＝12)类似。
图17显示了来自用GZ452、GZ161和GZ638治疗的12月龄雄性和雌性法布里病小鼠的肾组织中的Gb3水平。小鼠在～8月龄时开始治疗且如下治疗4个月：60mg/kg/天GZ452、120mg/kg/天GZ452、20mg/kg/天GZ161、300mg/kg/天GZ638及WT和UNT对照。
具体实施方式
尽管现将参考制备和方案来描述本申请公开的具体实施方案，但是应该理解的是，这些实施方案仅为示例性的且仅用于说明多种可能的具体实施方案中的一小部分，其可代表本申请主旨的实施。考虑到本申请权益，各种变化和修改对于本领域技术人员将是显而易见的且被认为在所附权利要求书所进一步定义的本申请主旨和范围内。
除非另有说明，本申请使用的所有科技术语都具有与本领域技术人员所通常理解相同的含义。尽管其它化合物或方法可用于实施或测试，但是某些优选的方法现描述在以下制备和方案中。
制备A
制备B
制备C
制备D
制备E
方案1
方案2
方案3
在制备A的反应1中，通过在非质子性溶剂(例如四氢呋喃)中用还原剂(优选氢化锂铝)对A-7进行还原，将式A-7的化合物转化成相应的式A-1的化合物，其中X为OH。将反应混合物在0℃至室温搅拌约15分钟至约2小时(优选约30分钟)。可选择地，通过在压力为约1大气压的氢气下在催化剂(优选氧化钯)和极性溶剂(例如甲醇或乙醇)存在下历时2小时至6小时(优选4小时)对A-7进行还原，将式A-7的化合物转化成相应的式A-1的化合物，其中X为OH。可选择地，通过在极性溶剂(例如乙醇、甲醇或异丙醇且优选异丙醇)中使A-7与盐酸羟胺和乙酸钠反应，将式A-7的化合物转化成相应的式A-1的化合物，其中X为NH。将反应混合物在50-80℃搅拌2小时至7小时(优选3小时)。然后在极性质子性溶剂(例如乙醇、甲醇或丙醇且优选正丙醇)中用还原剂(优选金属钠)将以上形成的化合物转化成式A-1的化合物。将反应混合物在50-80℃(优选溶剂回流温度)搅拌过夜。
在制备A的反应2中，通过历时约1小时至约4小时(优选约2小时)在约-60℃至约-90℃(优选约-78℃)向A-7在非质子性溶剂(例如醚)中的溶液中加入R1-溴化镁在醚中的溶液，将式A-7的化合物转化成相应的式A-5的化合物，其中R1、n和z如上定义。可选择地，可使式A-7的化合物与R1-锂反应，得到式A-5的化合物。
在制备A的反应3中，通过在乙腈存在下用强酸(优选硫酸)处理A-5，将式A-5的化合物转化成相应的式A-4的化合物，其中R1、n和z如上定义。将反应混合物在室温搅拌过夜。
在制备A的反应4中，通过用酸(优选盐酸)处理A-4，将式A-4的化合物转化成相应的式A-3的化合物，其中R1、n和z如上定义。将反应混合物回流搅拌18小时至72小时(优选24小时)且通过用无机碱(优选氢氧化钠)的水溶液进行处理而碱化至pH＝8。
在制备A的反应5中，通过使A-7与三苯基鏻内鎓盐反应以得到相应的式A-6的烯化合物，将式A-7的化合物转化成相应的式A-6的化合物，其中R1、n和z如上定义。将反应混合物在室温搅拌过夜。
在制备A的反应6中，通过在压力为约1大气压的氢气下在催化剂(优选钯/碳)和极性溶剂(例如甲醇、乙醇或乙酸乙酯)存在下对A-6进行还原，将式A-6的化合物转化成相应的式A-3的化合物，其中R1、n和z如上定义。将反应混合物在室温搅拌约2小时至约24小时(优选约18小时)。然后在溶剂(例如四氢呋喃或甲醇)和水的混合物中用碱(优选氢氧化锂)对所形成的化合物进行处理，得到式A-3的化合物。将反应混合物在室温搅拌过夜。
在制备B的反应1中，通过在非质子性溶剂(例如四氢呋喃)中用还原剂(优选氢化锂铝)对B-2进行还原，将式B-2的化合物转化成相应的式B-1的化合物。将反应混合物在0℃至室温搅拌约15分钟至约2小时(优选约30分钟)。
在制备C的反应1中，通过在催化剂(优选1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II))和碳酸钾存在下使C-4与硼酸反应，将式C-4的化合物转化成相应的式C-3的化合物，其中X为溴或氯。反应混合物在二甲氧基乙烷和水的混合物中在约130℃至约170℃(优选约150℃)用微波处理约15分钟至约1小时(优选约30分钟)。可选择地，反应使用溶剂(例如二噁烷)来进行并在常规加热下在100℃搅拌过夜。
在制备C的反应2中，通过向C-3和异丙醇钛在醚中的混合物中加入乙基溴化镁，将式C-3的化合物转化成相应的式C-1的化合物，其中f为1至8且A1、X5和A2如上定义。将反应混合物在约-50℃至约-90℃(优选约-70℃)搅拌。将所得反应混合物温热至约20℃至约30℃(优选约25℃)并再搅拌约30分钟至约2小时(优选约1小时)。然后在约20℃至约30℃(优选约25℃)向混合物中滴加三氟化硼乙醚合物。
在制备C的反应3中，通过首先在室温将三氯化铈(III)在非质子性溶剂(例如四氢呋喃)中的混悬液搅拌约30分钟至约2小时(优选约1小时)，将式C-3的化合物转化成相应的式C-2的化合物，其中A1、X5和A2如上定义。将所得混悬液冷却至约-60℃至约-90℃(优选约-78℃)并加入有机锂试剂(优选甲基锂的醚溶液)。历时约30分钟至约2小时(优选约1小时)形成所得有机铈复合物，然后加入在非质子性溶剂(例如四氢呋喃)中的C-3。然后将所得反应混合物温热至室温并搅拌约16小时至约20小时(优选约18小时)。
在制备D的反应1中，通过使D-5与烷基二卤化物(例如1,2-二溴乙烷)反应，将其中R为CO2Et或CN且X为溴或氯的式D-5的化合物转化成相应的式D-3的化合物。然后在溶剂(例如四氢呋喃、甲醇或甘油)和水的混合物中用无机碱(例如氢氧化锂或氢氧化钾)对所形成的化合物进行处理，得到式D-3的化合物，其中f为1至8。将反应混合物在25℃至130℃搅拌过夜。可选择地，为了形成相应的其中X为X5-A2的式D-3的化合物，必须首先按照以上在制备C的反应1中描述的操作使D-5反应。
在制备D的反应2中，通过使D-3与碱(例如三乙胺)和二苯基磷酰基叠氮在非质子性溶剂(例如甲苯)中反应，将式D-3的化合物转化成相应的式D-1的化合物。将反应混合物加热至80℃-110℃(优选110℃)且保持15分钟至1小时(优选30分钟)。然后所形成的中间体在60-110℃(优选90℃)用叔丁醇处理过夜。然后通过在酸性介质(优选使用在二氯甲烷中的三氟乙酸)中在室温处理30分钟至5小时(优选2小时)，将所形成的氨基甲酸酯转化成相应的式D-1的化合物，其中f为1至8。
在制备D的反应3中，通过使D-5与烷基卤化物(例如MeI)反应，将其中R为CO2Et或CN且X为溴或氯的式D-5的化合物转化成相应的式D-4的化合物。然后所形成的化合物在溶剂(例如四氢呋喃、甲醇或甘油)和水的混合物中用无机碱(例如氢氧化锂或氢氧化钾)处理，得到式D-4的化合物。将反应混合物在25℃至130℃搅拌过夜。可选择地，为了形成相应的其中X为X5-A2的式D-4的化合物，必须首先按照以上在制备C的反应1中描述的操作使D-5反应。
在制备D的反应4中，通过使D-4与碱(例如三乙胺)和二苯基磷酰基叠氮在非质子性溶剂(例如甲苯)中反应，将式D-4的化合物转化成相应的式D-2的化合物。将反应混合物加热至80℃-110℃(优选110℃)且保持15分钟至1小时(优选30分钟)。然后所形成的中间体在60-110℃(优选90℃)用叔丁醇处理过夜。然后通过在酸性介质(优选使用在二氯甲烷中的三氟乙酸)中在室温处理30分钟至5小时(优选2小时)，将所形成的氨基甲酸酯转化成相应的式D-1的化合物。
在制备E的反应1中，通过使E-2与甲基溴化镁在醚中在约-60℃至约-90℃(优选约-78℃)反应约30分钟至约3小时(优选约2小时)，将其中X为溴或氯的式E-2的化合物转化成相应的式E-1的化合物。可选择地，为了形成相应的其中X为X5-A2的式E-1的化合物，必须首先按照以上在制备C的反应1中描述的操作使E-2反应。
在制备E的反应2中，通过在氯乙腈存在下用强酸(优选硫酸)处理，将式E-1的化合物转化成相应的式D-2的化合物。将反应混合物在室温搅拌过夜。然后所形成的化合物在极性质子性溶剂(例如乙醇)中在80℃用硫脲处理过夜，得到相应的式D-2的化合物。可选择地，E-1在非质子性溶剂(例如二氯甲烷)中在-10℃至室温(优选0℃)用叠氮化钠和三氟乙酸处理。在四氢呋喃和水的溶液中在三苯基膦存在下对所形成的化合物进行还原，得到相应的式D-2的化合物。将反应混合物在25-80℃(优选在室温)搅拌2小时至24小时(优选18小时)。
在方案1的反应1中，通过向C-1或C-2和三乙胺在非质子性溶剂(例如四氢呋喃)中的混悬液中加入三光气，将式A-1或A-2的化合物分别转化成相应的其中f为1至8的式II的化合物或式III的化合物。将反应混合物在室温搅拌约5分钟至约20分钟(优选约15分钟)并加入少量醚。滤出所形成的三乙铵盐。在0℃或室温分别向其中X为OH或NH的A-1或A-2在非质子性溶剂(例如四氢呋喃)中的混悬液中加入氢化钠。将反应混合物在室温搅拌约5分钟至约20分钟(优选约15分钟)并滴加以上形成的异氰酸酯四氢呋喃/醚溶液。可选择地，如以上在制备D的反应4中所述，式II和III的化合物可如下形成：在非质子性溶剂(例如甲醇)中在碱(例如三乙胺)和二苯基磷酰基叠氮存在下使式D3或D4的化合物与式A-1和A-2的化合物反应。
在方案2的反应1中，通过向C-1、C-2、D-1或D-2和三乙胺在非质子性溶剂(例如四氢呋喃或甲苯)中的混悬液中加入三光气，分别将式A-1、A-2或B-1的化合物转化成相应的式IV、V、VI和VII的化合物，其中f为1至8。将反应混合物在室温搅拌约5分钟至约20分钟(优选约15分钟)并加入少量醚。然后向以上形成的异氰酸酯溶液中加入其中X为NH的A-1或A-2并将反应混合物在25-100℃(优选在室温)搅拌约2小时至约24小时(优选18小时)。
在方案3的反应1中，使用碳二亚胺偶联剂(例如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺和1-羟基-苯并三唑或2-(1H-7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐)，通过A3与C1、C-2、D-1或D-2在溶剂(例如四氢呋喃或二甲基甲酰胺)中经肽偶联反应，将式A-3的化合物分别转化成相应的其中f为1至8的式VIII的化合物和式IX的化合物。将反应混合物在室温搅拌过夜。☆
尽管现将参考制备和方案来描述本申请公开的具体实施方案，但是应该理解的是，这些实施方案仅为示例性的且仅用于说明多种可能的具体实施方案中的一小部分，其可代表本申请主旨的实施。考虑到本申请权益，各种变化和修改对于本领域技术人员将是显而易见的且被认为在所附权利要求书所进一步定义的本申请主旨和范围内。
除非另有说明，本申请使用的所有科技术语都具有与本领域技术人员所通常理解相同的含义。尽管其它化合物或方法可用于实施或测试，但是某些优选的方法现描述在以下制备和方案中。
本申请化合物的所有药用盐、前药、互变异构体、水合物和溶剂化物也在本申请公开的范围内。
性质为碱性的本申请化合物通常能够与各种无机酸和/或有机酸形成很多种不同的盐。尽管所述盐通常就给药于动物和人类而言是药学上可接受的，但是实际上经常需要的是，首先从反应混合物中分离出呈非药用盐形式的化合物，然后简单地通过用碱性试剂处理将其转化回游离碱化合物，然后将游离碱转化成药用酸加成盐。碱化合物的酸加成盐可使用常规技术如下容易地制备：例如在水性溶剂介质或适当的有机溶剂例如甲醇或乙醇中用基本等量的所选矿物酸或有机酸对所述碱化合物进行处理。将溶剂小心蒸发后，得到所需要的固体盐。
可用于制备碱化合物的药用酸加成盐的酸是可形成无毒酸加成盐的那些酸，所述无毒酸加成盐即含有药理学上可接受的阴离子的盐例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫酸盐或硫酸氢盐、磷酸盐或酸式磷酸盐、乙酸盐、乳酸盐、枸橼酸盐或酸式枸橼酸盐、酒石酸盐或酒石酸氢盐、琥珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、蔗糖盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐和扑酸盐[即1,1’-亚甲基-二(2-羟基-3-萘甲酸盐)]。
性质为酸性例如含有COOH或四唑部分的本申请化合物通常能够与各种无机碱和/或有机碱形成很多种不同的盐。尽管所述盐通常就给药于动物和人类而言是药学上可接受的，但是实际上经常需要的是，首先从反应混合物中分离出呈非药用盐形式的化合物，然后简单地通过用酸性试剂处理将其转化回游离酸化合物，然后将游离酸转化成药用碱加成盐。这些碱加成盐可使用常规技术如下容易地制备：例如用含有药理学上可接受的所需阳离子的水溶液对相应的酸性化合物进行处理，然后将所得溶液蒸发至干，优选在减压下蒸发至干。可选择地，它们还可如下制备：将酸性化合物的低级烷醇溶液和所需要的碱金属烷氧化物混合，然后以与上述相同的方式将所得溶液蒸发至干。在每种情况下，优选使用化学计量的试剂以确保反应的完全和所需固体盐的最大产率。
可用于制备酸化合物的药用碱加成盐的碱是可形成无毒碱加成盐的那些碱，所述无毒碱加成盐即含有药理学上可接受的阳离子的盐例如碱金属阳离子盐(例如钾盐和钠盐)、碱土金属阳离子盐(例如钙盐和镁盐)、铵盐或其它水溶性胺(例如N-甲基葡糖胺(葡甲胺))加成盐、低级烷醇铵盐及其它有机胺的盐。
经同位素标记的化合物也在本申请公开的范围内。本申请使用的“经同位素标记的化合物”是指本申请公开的以下化合物(包括其各自如本申请所述的药用盐和前药)，其中一个或多个原子被原子量或质量数与自然界常见原子量或质量数不同的原子所代替。可引入到本申请化合物中的同位素实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，分别为例如2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。
通过经同位素标记的本申请化合物，所述化合物可用于药物和/或底物组织分布测定。经氚(3H)和碳-14(14C)标记的化合物是特别优选的，这是因为它们易于制备和检测。另外，用较重的同位素例如氘(2H)进行的替换可提供由于较大的代谢稳定性而带来的某些治疗益处，例如增加的体内半衰期或减小的剂量需要且因此在一些情况下可能是优选的。经同位素标记的本申请化合物(包括其药用盐和前药)可通过本领域已知的任意方法来制备。
本申请化合物的立体异构体(例如顺式异构体和反式异构体)和所有光学异构体(例如R异构体和S对映异构体)及外消旋混合物、非对映异构体混合物和所述异构体的其它混合物在本申请公开的范围内。
本申请公开的化合物、盐、前药、水合物和溶剂化物可按几种互变异构体形式(包括烯醇和亚胺形式及酮和烯胺形式)和几何异构体形式及其混合物形式存在。互变异构体以一组互变异构体的混合物形式存在于溶液中。在固体形式中通常一种互变异构体占优势。尽管可能描述了一种互变异构体，但是所有互变异构体都在本申请公开的范围内。
阻转异构体也在本申请公开的范围内。阻转异构体是指以下化合物，其可被分离成旋转受限制的异构体。
本申请还提供药物组合物，其包含至少一种本申请公开的化合物和至少一种药用载体。药用载体可为本领域已知的任意这种载体，其包括例如在Remington’sPharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co.,(A.R.Gennaro edit.1985)中描述的那些载体。本申请化合物的药物组合物可通过本领域已知的常规方法来制备，例如将至少一种本申请公开的化合物与药用载体混合。
本申请公开的药物组合物可用于动物或人类。因此，可将本申请公开的化合物配制成用于口服给药、含服给药、胃肠外给药(例如静脉内给药、肌内给药或皮下给药)、局部给药、直肠给药或鼻内给药或适于通过吸入或吹入来给药的形式。
还可按照本领域技术人员熟知的方法将本申请公开的化合物配制成用于持续递送。上述制剂的实例可参见美国专利3,119,742、3,492,397、3,538,214、4,060,598和4,173,626。
对于口服给药，所述药物组合物可呈例如通过常规方法用一种或多种药用辅料制备的片剂或胶囊剂形式，所述药用辅料为例如粘合剂(例如预胶化的玉米淀粉、聚乙烯基吡咯烷酮或羟基丙基甲基纤维素)；充填剂(例如乳糖、微晶纤维素或磷酸钙)；润滑剂(例如硬脂酸镁、滑石粉或硅石)；崩解剂(例如马铃薯淀粉或羟基乙酸淀粉钠)；和/或润湿剂(例如月桂基硫酸钠)。片剂可通过本领域公知的方法来包衣。用于口服给药的液体制剂可呈例如溶液剂、糖浆剂或混悬剂形式或它们可按干燥产品形式来提供，所述干燥产品在使用前用水或其它适当的媒介物复溶。所述液体制剂可通过常规方法用一种或多种药用添加剂制备，所述药用添加剂为例如助悬剂(例如山梨醇糖浆、甲基纤维素或氢化食用脂)；乳化剂(例如卵磷脂或阿拉伯胶)；非水性媒介物(例如杏仁油、油性酯或乙醇)；和/或防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸)。
对于含服给药，所述组合物可呈以常规方法来配制的片剂或锭剂形式。
可将本申请公开的化合物配制成用于通过注射来胃肠外给药，所述注射包括使用常规导管插入技术或输注。注射剂可按例如在安瓿或多剂量容器中添加有防腐剂的单位剂量形式来提供。所述组合物可呈例如在油性或水性媒介物中的混悬剂、溶液剂或乳剂形式并可含有本领域技术人员公认的制剂物质例如助悬剂、稳定剂和/或分散剂。可选择地，活性成分可呈粉末形式，其在使用前用适当的媒介物例如无菌无热原的水复溶。
对于局部给药，可将本申请公开的化合物配制成软膏剂或乳膏剂。
还可将本申请公开的化合物配制成直肠组合物，所述直肠组合物为例如栓剂或保留性灌肠剂，其例如含有常规栓剂基质例如可可脂或其它甘油酯。
对于鼻内给药或吸入给药，本申请公开的化合物可方便地以溶液或混悬液形式由被患者所挤压或泵送的泵喷雾容器递送或以气雾喷雾提供形式通过使用合适的抛射剂由加压容器或雾化器递送，所述抛射剂为例如二氯二氟甲烷、三氯一氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它合适的气体。在加压气雾剂的情况下，计量单位可通过提供阀门来确定以递送所计量的量。加压容器或雾化器可含有本申请化合物的溶液或混悬液。可将用在吸入器或吹入器中的胶囊或药筒(例如由明胶制成)配制成含有本申请化合物和适当粉末基质例如乳糖或淀粉的粉末混合物。
本申请化合物用于向普通成人口服、胃肠外或含服给药以治疗或预防与TPO相关的病症的建议剂量为约0.1mg至约2000mg。在某些实施方案中，所述建议剂量为约0.1mg至约200mg活性成分/单位剂量。不考虑所建议的剂量，所述化合物可例如每天给药1-4次。
用于在普通成人中治疗或预防上述病症的气雾剂优选被设置成使气雾剂的每个计量剂量或“喷出量”含有约20mg至约10,000mg且优选约20mg至约1000mg的本申请化合物。气雾剂的每日总剂量将为约100mg至约100mg。在某些实施方案中，气雾剂的每日总剂量通常将为约100mg至约10mg。每天可给药几次例如2、3、4或8次且每次给药例如1、2或3个剂量。
用于在普通成人中治疗或预防上述病症的组合气雾剂优选被设置成使气雾剂的每个计量剂量或“喷出量”含有约0.01mg至约1000mg的包含本申请化合物的组合。在某些实施方案中，气雾剂的每个计量剂量或“喷出量”含有约0.01mg至约100mg的包含本申请化合物的组合。在某些实施方案中，气雾剂的每个计量剂量或“喷出量”含有约1mg至约10mg的包含本申请化合物的组合。每天可给药几次例如2、3、4或8次且每次给药例如1、2或3个剂量。
用于治疗或预防的以下药物组合物和方法也在本申请公开的范围内，所述药物组合物和方法包括给药至少一种本申请化合物的前药。
葡萄糖基神经酰胺合酶测定
酶测定使用微粒体作为葡萄糖基神经酰胺合酶活性的来源。以与白蛋白的复合物形式将荧光性神经酰胺底物递送至与膜结合的酶。反应后，分离神经酰胺和葡萄糖基神经酰胺且通过具有荧光检测的反相HPLC来定量。
操作
由A375人黑素瘤细胞制备微粒体
细胞混悬液在冰上用超声波处理以使细胞溶解完全，然后在4℃以10,000g向下旋转离心10分钟。
通过在4℃以10,000g再离心1小时使上清液澄清。
将团块重新混悬在溶胞缓冲液中，等分并贮存在-80℃。
葡萄糖基神经酰胺合酶测定
以1:1将底物和微粒体合并，在板振荡器上充分混合，将板密封并在室温避光孵育1小时。
反应混合物用终止液终止且转移到分析板中。
RP-HPLC分析
柱：MercuryMSTM(Phenomenex)可替换柱(Luna C8,3μm,20×4mm)。
系统：具有Agilent 1200系列荧光检测器的Agilent 1100。
流动相：1％甲酸在81％甲醇和19％水中的溶液，流速为0.5mL/min，等度运行4分钟。
样品稀释液：0.1mM C8神经酰胺(吸附阻断剂)在50％异丙醇和50％水(v/v)中的溶液。
荧光检测：λex＝470nm和λem＝530nm。
在这些条件下，NBD C6 GluCer的保留时间为约1.7分钟且NBD C6 Cer在约2.1分钟洗出；峰与基线清楚分开且通过HPLC软件来自动积分。
底物向产物的转化百分比(％)用作抑制剂测试的读出结果以避免由于稀释误差或样品蒸发而导致的变异性。
所有实施例化合物在测定报告中都具有小于5μM的IC50值。
实验
通用操作A：用三光气形成氨基甲酸酯/脲
在室温向胺盐酸盐(1当量)和三乙胺(3-4当量)在THF中的混悬液(浓度为约0.2M)中加入三光气(0.35当量)。将反应混合物搅拌10分钟并加入少量醚(1-2mL)。滤出三乙铵盐，得到异氰酸酯在THF/醚中的澄清溶液。
在室温向醇(1.5当量)在THF中的溶液(浓度为约0.2M)中加入NaH[60％,油](1.5当量)。将反应混合物搅拌15分钟并滴加上述溶液(异氰酸酯的THF/醚溶液)。
在标准后处理中，反应用盐水淬灭。溶液用EtOAc萃取且有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。粗品用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到相应的氨基甲酸酯。
可选择地，在室温向胺盐酸盐A(1当量)和三乙胺(3-4当量)在THF中的混悬液(浓度为约0.2M)中加入三光气(0.35当量)。将反应混合物搅拌10分钟并加入少量醚(1-2mL)。滤出三乙铵盐、得到异氰酸酯在THF/醚中的澄清溶液。
在室温向胺B(1当量)在THF中的溶液(浓度为约1.0M)中滴加上述溶液(异氰酸酯的THF/醚溶液)。将反应混合物搅拌18小时并浓缩。粗品用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2NNH3的MeOH溶液)纯化，得到相应的脲。
通用操作B：用有机铈进行烷基化
将CeCl3(4当量)在THF中的混悬液(浓度为约0.2M)在室温搅拌1小时。将混悬液冷却至-78℃并滴加MeLi/醚[1.6M](4当量)。历时1小时形成有机铈复合物并滴加腈(1当量)在THF中的溶液(浓度为2.0M)。将反应混合物温热至室温并搅拌18小时。将溶液冷却至0℃且用水(～1mL)淬灭，然后加入50％氢氧化铵水溶液(～3mL)直到形成析出物并沉降至烧瓶底部。混合物用硅藻土垫过滤并浓缩。粗品用HCl/二噁烷溶液[4.0M]处理。将中间体芳基丙-2-胺盐酸盐在醚中研磨且用于下一步。可选择地，粗游离碱胺用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到相应的芳基丙基胺。
通用操作C：用碳基二咪唑(CDI)形成脲
将胺A(1当量)和CDI(1.3当量)在THF中的溶液(浓度为约0.15M)回流搅拌1小时。加入胺B(1.3当量)在THF中的溶液且将反应混合物再搅拌1.5小时。将反应混合物冷却至室温且用醚稀释。所需化合物析出且滤出。粗品用Combiflash(碱性Al2O3柱,CHCl3和MeOH)或(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到相应的脲。
通用操作D：用三光气形成脲
在室温向胺A(1当量)和三乙胺(4当量)在THF中的混悬液(浓度为约0.15M)中加入三光气(0.35当量)。将反应混合物搅拌15分钟并加入胺B(1.1当量)。将反应混合物在室温搅拌18小时，然后用EtOAc稀释。有机层用NaOH水溶液[1.0M]洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。粗品用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到相应的脲。
通用操作E：苏楚基(Suzuki)偶联
向芳基卤化物(1当量)在DME/水的混合物[4:1]中的溶液(浓度为约0.2M)中加入硼酸(2当量)、钯催化剂(0.1-0.25当量)和碳酸钠(2当量)。反应混合物在150℃用微波处理25分钟。用硅藻土塞过滤并浓缩后，粗产物用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到相应的偶联加合物。
可选择地，向芳基卤化物(1当量)在甲苯/水的混合物[20:1]中的溶液(浓度为约0.2M)中加入硼酸(1.3-2.5当量)、钯催化剂(0.05-0.15当量)、三环己基膦(0.15-0.45当量)和磷酸钾(5当量)。反应混合物在150℃用微波处理25分钟。用硅藻土塞过滤并浓缩后，粗产物用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到相应的偶联加合物。
通用操作F：氢化
向底物在甲醇、乙醇或EtOAc中的溶液(浓度为约0.2M)中加入钯催化剂(为底物的20％w/w)。将反应混合物在1atm H2下在室温搅拌直到反应完成。反应混合物用硅藻土塞过滤，然后用氯仿冲洗两次。将粗产物浓缩且用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到氢化产物。可选择地，最终物质通过析出或重结晶来纯化。
通用操作G：环丙烷化
向在-70℃搅拌的芳基腈(1当量)和Ti(Oi-Pr)4(1.7当量)的混合物中滴加EtMgBr[3.0M的醚溶液](1.1当量)。将反应混合物温热至25℃并搅拌1小时。在25℃向上述混合物中滴加BF3·Et2O(3当量)。加完后，将混合物再搅拌2小时，然后用HCl水溶液[2M]淬灭。然后通过加入NaOH水溶液[2M]将所得溶液碱化。有机物用乙醚萃取。将有机层合并，用Na2SO4干燥、过滤并浓缩。粗品通过硅胶柱色谱(用石油醚/EtOAc 10/1至1/1洗脱)来纯化，得到相应的1-芳基-环丙胺。
通用操作H：通过原位库尔修斯(Curtius)重排来偶联
将酸(1当量)、三乙胺(2.5当量)和DPPA(1.0当量)在甲苯中的混合物(浓度为约0.3M)回流30分钟。将混合物冷却至室温并加入醇(1当量)。加完后，将混合物在90℃加热18小时。将反应混合物冷却至室温，用EtOAc稀释且用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。有机相用Na2SO4干燥，浓缩且通过制备性TLC(EtOAc/MeOH 5:1,含有1％TEA)来纯化，得到相应的氨基甲酸酯。
通用操作I：使用EDCI来形成酰胺
向胺(1当量)在DMF或THF中的溶液(浓度为约0.3M)中加入EDCI(1.2-2.5当量)、HOBT(1.2-2.5当量)、DIPEA(1.2-2.5当量)和三乙胺(几滴)。将反应混合物搅拌并加入酸(1.2当量)。将反应混合物在室温搅拌18小时，然后浓缩。将残留物溶于EtOAc且用盐水洗涤。有机层用Na2SO4干燥并浓缩。粗品通过制备性HPLCMS或Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2NNH3的MeOH溶液)来纯化。
制备A
中间体1
2-(3-溴苯基)丙-2-胺盐酸盐
在-78℃向3-溴苯甲酸甲酯(15.0g,69.8mmol)在THF(140mL)中的溶液中滴加MeMgBr/乙醚溶液[3.0M](58mL)。将反应混合物温热至室温并搅拌2小时。将溶液倒入氯化铵饱和水溶液中且有机物用EtOAc萃取。有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到相应的醇(14.9g)，其无需进一步纯化即使用。
向2-(3-溴苯基)丙-2-醇(17.2g,79.8mmol)在氯乙腈(160mL)中的溶液中加入乙酸(14mL)。将反应混合物冷却至0℃并滴加H2SO4(14mL)。将反应混合物温热至室温并搅拌18小时。然后将反应混合物倒入冰中且用EtOAc萃取。有机层用NaOH水溶液[1.0M]和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到相应的氯乙酰胺(21.4g)，其无需进一步纯化即使用。
向N-(2-(3-溴苯基)丙-2-基)-2-氯乙酰胺(20.3g)在乙醇(120mL)中的溶液中加入乙酸(20mL)。将反应混合物回流搅拌18小时。将溶液冷却至室温且析出物用硅藻土垫滤出。浓缩滤液且将残留物溶于EtOAc。有机层用NaOH水溶液[1.0M]处理，用Na2SO4干燥并浓缩。粗品用HCl/二噁烷溶液[4M]处理。在乙醚中研磨中间体2-(3-溴苯基)丙-2-胺盐酸盐且用于下一步(7.50g,43％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.69(q,J＝1.8Hz,1H),7.55(ddd,J＝1.0,1.8,7.9Hz,1H),7.49(ddd,J＝1.0,2.0,8.0Hz,1H),7.38(t,J＝8.0Hz,1H),1.71(s,6H)ppm。
制备B
中间体2
2-(5-溴-2-氟苯基)丙-2-胺盐酸盐
向5-溴-2-氟苯甲酸(4.85g,22.8mmol)在甲醇(45mL)中的溶液中加入H2SO4(4.5mL)。将反应混合物在室温搅拌18小时且将溶液浓缩。残留物用NaOH水溶液[10％w/v]处理且有机物用CHCl3萃取。有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到相应的酯(4.69g,91％)，其无需进一步纯化即使用。
使用与在实施例中间体1中所报道相同的操作，将酯中间体(4.69g,20.1mmol)转化成中间体2，得到相应的铵盐(3.94g,67％总收率)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.67-7.57(m,2H),7.21(dd,J＝8.7,12.3Hz,1H),1.77(s,6H)ppm。
中间体3
2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-胺盐酸盐
使用与在实施例中间体2中所报道相同的操作，将5-溴-2-氟苯甲酸转化成中间体3，得到相应的铵盐(2.79g,49％总收率)，其为白色固体。
中间体4
2-(3-溴-2-氟苯基)丙-2-胺
使用与在实施例中间体2中所报道相同的操作，将3-溴-2-氟苯甲酸转化成中间体4，得到相应的胺，其为浅黄色油状物。
中间体5
2-(4-溴苯基)丙-2-胺盐酸盐
使用通用操作B，将溴苯甲腈(2.00g,11.0mmol)转化成相应的2-(4-溴苯基)丙-2-胺，其以棕色油状物(1.20g,51％)形式得到。
制备C
中间体6
1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷
在室温向搅拌的1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-3-酮(1.0g,7.2mmol)在1,4-二噁烷(7.2mL)中的溶液中加入氢化锂铝[2.0M/THF](4.1mL,8.2mmol)。然后将反应混合物加热回流6小时，然后冷却至室温。通过滴加200μL H2O、200μL15％NaOH水溶液和600μL H2O将反应淬灭。混合物用硅藻土过滤，然后所述硅藻土用EtOAc洗涤。将合并的滤液真空浓缩，得到产物(0.82g,90％)，其无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.28-3.25(m,1H),2.99-2.95(m,8H),1.86-1.80(m,3H),1.69-1.64(m,2H)ppm。
制备D
中间体7
2-甲基奎宁环-3-醇
将碳酸钾(11.4g,82.8mmol)和奎宁环水合物(5.00g,20.4mmol)溶于H2O(15.6mL)。当完全溶解时，加入二氯甲烷(20.4mL)且将反应混合物在室温搅拌过夜。分离有机相且水相用氯仿(3×50mL)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。产物无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)2.79(s,1H),5.19(s,1H),3.14-3.06(m,2H),2.99-2.91(m,2H),2.57-2.55(m,1H),1.98-1.93(m,4H)ppm。
在H2气氛下用10％Pd/C(50wt％)对在乙醇(30mL)中的2-亚甲基奎宁环-3-酮(3.50g)进行还原。当通过TLC判断反应完成(～3天)时，滤出催化剂且滤饼用乙酸乙酯洗涤。真空除去溶剂，得到所需要的产物(2.80g,80％)，其无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)3.37-3.31(m,1H),3.21-3.13(m,2H),3.09-3.00(m,1H),2.97-2.89(m,1H),2.46-2.43(m,1H),2.05-1.91(m,4H),1.34(d,J＝7.6Hz,3H)ppm。
在室温向2-甲基奎宁环-3-酮(0.50g,3.60mmol)的1,4-二噁烷(18mL)溶液中加入氢化锂铝[1.0M/THF](4.1,4.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌15分钟。通过滴加116μLH2O、116μL 15％NaOH水溶液和348μL H2O将反应淬灭。混合物用硅藻土过滤，然后所述硅藻土用EtOAc洗涤。真空除去溶剂，得到产物(0.48g,95％)，其为非对映异构体的2:1混合物且无需进一步纯化即使用。
制备E
中间体8
1-氮杂二环[3.2.2]壬-4-醇
在0℃向1-氮杂二环[3.2.2]壬-4-酮(0.20g,1.4mmol)的1,4-二噁烷(2.8mL)溶液中加入氢化锂铝[1.0M/THF](1.7mL,1.7mmol)。将反应混合物在0℃保持15分钟。通过滴加46μL H2O,46μL 15％NaOH水溶液和138μL H2O将反应淬灭。混合物用硅藻土过滤，然后所述硅藻土用EtOAc洗涤。真空除去溶剂，得到产物(0.19g,96％)，其无需进一步纯化即使用。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ3.90-3.86(m,1H),3.09-3.03(m,1H),2.96-2.91(dd,J＝9.2,6.8Hz,1H),2.86-2.75(m,3H),2.71-2.64(m,1H),2.34-2.27(bs s,1H),1.98-1.86(m,3H),1.71-1.59(m,3H),1.51-1.35(m,1H)ppm。
制备F
中间体9
1-氮杂二环[2.2.1]庚-3-醇
在0℃向甲醇钠(2.00g,37.9mmol)在甲醇(9mL)中的混合物中加入甘氨酸甲酯盐酸盐(4.76g,37.9mmol)和衣康酸二甲酯(5.00g,31.6mmol)。将反应混合物加热回流16小时，然后冷却至室温。滤出固体且用二氯甲烷洗涤。浓缩滤液且残留物用5N HCl(50mL)稀释。水层用二氯甲烷(4×50mL)萃取，用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。产物无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.04(dd,J＝82.0,17.6Hz),3.74-3.64(m,8H),3.32-3.24(m,1H),2.77-2.63(m,2H)ppm。
在0℃向1-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-5-氧代吡咯烷-3-甲酸甲酯(3.40g,16.0mmol)的THF(20mL)溶液中加入硼烷-THF[1.0M/THF](32.0mL,32.0mmol)。将反应混合物回流搅拌1小时，然后冷却至室温，其中将其再搅拌12小时。通过加入碳酸钾饱和溶液(5.52g溶于20mL H2O)将反应淬灭并再加热回流1小时，然后冷却至室温。真空除去溶剂且通过加入5N HCl(25mL)使残留物呈酸性。水层用二氯甲烷(2×30mL)萃取。然后通过加入固体碳酸钾使水层的pH呈碱性。水层再用二氯甲烷(5×30mL)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。产物无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.66(s,3H),3.63(s,3H),3.29(ABq,2H,J＝24.0,16.8Hz),3.06-3.02(m,2H),2.87-2.81(m,1H),2.71-2.65(m,1H),2.56-2.50(m,1H),2.09-2.04(m,2H)ppm。
历时1小时向回流的叔丁醇钾(2.46g,22.0mmol)在甲苯(32mL)中的溶液中滴加1-(2-甲氧基-2-氧代乙基)吡咯烷-3-甲酸甲酯(2.00g,10.0mmol)在甲苯(10mL)中的溶液。将反应混合物再回流搅拌3小时，然后首先冷却至室温，然后冷却至-10℃。然后在搅拌下加入乙酸(1.3mL)。甲苯层用5N HCl(4×50mL)萃取。将合并的水层在110℃加热8小时。然后将反应混合物冷却至室温且将体积真空减少一半。通过加入固体碳酸钾使反应混合物的pH呈碱性。水层用二氯甲烷(5×50mL)萃取并真空浓缩合并的有机层。向粗产物中加入乙醚。滤出固体，得到所需要的产物(0.30g,27％)，其无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.05-2.96(m,3H),2.76(s,2H),2.72-2.66(m,2H),2.09-2.01(m,1H),1.78-1.71(m,1H)ppm。
在H2气氛下用PtO2(50wt％)对在乙醇(2-3mL)中的1-氮杂二环[2.2.1]庚-3-酮(0.30g,2.7mmol)进行还原。搅拌4小时后，滤出催化剂且滤饼用乙醇洗涤。真空除去乙醇，得到所需要的产物(0.29g,95％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.36-4.35(m,1H),3.10-3.05(m,1H),2.95-2.88(m,1H),2.72-2.66(m,1H),2.63-2.57(m,2H),2.48-2.44(dd,J＝10.0,3.2Hz,1H),2.11-2.05(m,2H),1.51-1.44(m,1H)ppm。
制备G
中间体10
(R)-3-甲基奎宁环-3-胺和(S)-3-甲基奎宁环-3-胺
在-78℃向充分搅拌的MeLi[3.0M/乙醚](67.0mL,201mmol)在无水乙醚(150mL)中的溶液中滴加奎宁环-3-酮(12.5g,100mmol)在乙醚(100mL)中的溶液。将所得溶液在-78℃保持1小时，然后在室温保持18小时。在0℃滴加水(60mL)且将混合物真空浓缩，得到残留物，所述残留物通过中性氧化铝柱色谱(0-20％MeOH的CHCl3溶液)来纯化，得到3-甲基奎宁环-3-醇(10.0g,71％)，其为亮黄色固体。在0℃向搅拌的乙腈(250mL)中缓慢加入浓硫酸(100mL)。在0℃将所得溶液滴加到3-甲基奎宁环-3-醇(9.10g,64.5mmol)在乙腈(250mL)中的混合物中。将反应混合物在室温搅拌60小时，然后用冰浴冷却且用氢氧化钠水溶液碱化至pH 10。混合物用5:1(v/v)CHCl3/i-PrOH萃取。浓缩有机层，得到残留物，所述残留物用2NHCl水溶液稀释且用5:1(v/v)CHCl3/i-PrOH洗涤。然后剩余的水层用2N NaOH碱化且用5:1(v/v)CHCl3/i-PrOH萃取。合并的有机层用水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，得到9.5g(82％)所需化合物，其为亮黄色油状物。通过在超临界流体色谱(SFC)系统上使用手性柱将上述中间体的2种对映异构体彼此分开。
将上述手性乙酰胺中间体(9.50g,52.0mmol)在浓HCl(100mL)中的溶液回流3天，用冰浴冷却且用氢氧化钠水溶液中和至pH 1。混合物用5:1(v/v)CHCl3/i-PrOH洗涤。然后水层用2N NaOH碱化且用5:1(v/v)CHCl3/i-PrOH)萃取。合并的萃取物用水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，得到5.00g(69％)所需要的手性化合物，其为亮黄色半固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ2.72-2.39(m,6H),2.01-1.96(m,1H),1.67-1.61(m,1H),1.43-1.36(m,2H),1.23-1.17(m,1H),1.09(s,3H)ppm。13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ65.3,48.3,46.6,46.4,34.2,30.0,24.8,22.8ppm。纯度>99％(GC-MS)；保留时间6.63分钟；(M)140.1。
制备H
中间体11
2-(3-(4-氟苯基)异噻唑-5-基)丙-2-胺
向搅拌的4-氟苯甲酰胺(70.00g,503.1mmol)在甲苯(900mL)中的混悬液中加入氯羰基亚磺酰氯(83.0mL,1.00mol)。将混合物在60℃加热过夜并浓缩。所得褐色固体用二氯甲烷(200mL)研磨，通过抽滤来收集且再用二氯甲烷(4×70mL)冲洗。将粗产物加载到硅胶(100g)上并在用硅胶以干法装填的大过滤漏斗中使用己烷/乙酸乙酯梯度进行色谱分离。得到产物5-(4-氟苯基)-1,3,4-噁噻唑-2-酮，其为灰白色固体(55.98g,56％)。
向搅拌的5-(4-氟苯基)-1,3,4-噁噻唑-2-酮(42.80g,217.1mmol)在邻二氯苯(600mL)中的溶液中加入丙炔酸乙酯(66.0mL,651mmol)。将混合物在135℃加热过夜并浓缩。残留的油状物通过快速色谱(使用己烷/乙酸乙酯梯度)来纯化，得到3-(4-氟苯基)异噻唑-5-甲酸乙酯，其为浅金色固体(17.35g,32％)。弃去较大极性的3-(4-氟苯基)异噻唑-4-甲酸乙酯异构体(与所需产物的比例为～57/43)。
历时20分钟向搅拌并冷却的(0℃)3-(4-氟苯基)异噻唑-5-甲酸乙酯(38.50g,153.2mmol)在THF(400mL)中的溶液中滴加甲基溴化镁在乙醚中的溶液(3.0M,128mL,384mmol)。在0℃再保持1.5小时后，通过缓慢加入乙酸乙酯(20mL)将反应淬灭并浓缩。将残留物吸收在NH4Cl水溶液(400mL)中且用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。将合并的萃取物干燥(Na2SO4)并浓缩。所得琥珀色糖浆状物通过快速色谱(使用己烷/乙酸乙酯梯度)来纯化，得到2-(3-(4-氟苯基)异噻唑-5-基)丙-2-醇，其为柔软金色固体(29.02g,80％)。
将2-(3-(4-氟苯基)异噻唑-5-基)丙-2-醇(29.00g,122.2mmol)吸收在亚硫酰氯(75mL)中。将混合物短暂冷却(冰浴)并搅拌。4小时后，将反应混合物浓缩且将残留物在乙酸乙酯(200mL)和NaHCO3水溶液(300mL)之间分配。将有机层与水层的反萃取物(乙酸乙酯,1×100mL)合并，干燥(Na2SO4)并浓缩，得到5-(2-氯丙-2-基)-3-(4-氟苯基)异噻唑产物和3-(4-氟苯基)-5-(丙-1-烯-2-基)异噻唑消除副产物的混合物(比例为～63/39)，其为深琥珀色油状物(29.37g)。该物质无需纯化即用于下一步反应。
向搅拌的先前步骤的产物在DMSO(80mL)中的溶液中加入叠氮化钠(14.89g,229.0mmol)。将混合物在50℃加热过夜，用乙酸乙酯(250mL)稀释且用水(6×400mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩，得到5-(2-叠氮基丙-2-基)-3-(4-氟苯基)异噻唑和3-(4-氟苯基)-5-(丙-1-烯-2-基)异噻唑的混合物(比例为～56/44)，其为深琥珀色油状物(29.10g)。该物质无需纯化即用于下一步反应。
将先前步骤的产物与10％钯/碳(50％水；7.50g)合并并吸收在甲醇(350mL)中。将搅拌的混悬液在真空和氮气清洗之间循环三次。再次抽空后，反应混合物用氢气(气囊贮器)回充并搅拌过夜。反应混合物用硅藻土过滤。将滤液与硅藻土的甲醇冲洗液合并并浓缩。所得深琥珀色油状物通过快速色谱(使用二氯甲烷/甲醇梯度)来纯化，得到2-(3-(4-氟苯基)异噻唑-5-基)丙-2-胺，其为粘性琥珀色油状物(14.23g,3步收率为49％)。
几种措施正被使用或实施以治疗LSD，所述措施中的大多数集中于在疾病控制中单独使用的酶代替疗法。所批准的多种酶代替疗法是可商购的以治疗LSD(例如针对蓬佩病的针对I型粘多糖贮积病的针对戈谢病的和针对法布里病的)。另外，发明人已鉴定用于在LSD控制中单独使用的多种小分子。如以下所详细描述的那样，本申请治疗方法为面对各种溶酶体贮积病的医生提供了治疗选择。
在本发明某些方面，本发明化合物可单独或以与酶代替疗法的联合疗法形式用于治疗代谢性疾病例如溶酶体贮积病(LSD)。在本发明其它方面，本发明化合物可单独或以与酶代替疗法的联合疗法形式用于在被诊断患有代谢性疾病例如LSD的受试者中抑制或降低GCS活性。在本发明其它方面，本发明化合物可用于在被诊断患有代谢性疾病例如LSD的受试者中减少和/或抑制贮存物质(例如溶酶体底物)的蓄积。在上述方面的某些实施方案中，所述LSD为戈谢病(1型、2型或3型)、法布里病、GM1神经节苷脂贮积病或GM2神经节苷脂贮积病(例如GM2活化因子缺乏、泰-萨克斯病和桑德霍夫病)。表1列举了多种LSD并鉴定了所缺乏的相应酶，所述酶可在本发明上述方面用于ERT。
在其它方案中，可能需要向以下患者提供SMT，所述患者的病症需要减少脑中的底物且因此不能通过全身性给药ERT来治疗。尽管直接的脑室内或鞘内给药可降低脑中的底物水平，但是全身性给药的ERT由于ERT不能穿过血脑屏障(BBB)而不适于涉及中枢神经系统(CNS)的LSD且在具有CNS残留酶活性的患者中可证实SMT是有益的。
根据本发明，向患者提供SMT以治疗癌症和/或代谢性疾病例如溶酶体贮积病。所述SMT可包括一种或多种小分子。所述SMT包括向患者给药本发明化合物。在具体实施方案中，所述化合物为(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯或(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯或其组合。
在某些实施方案中，本发明化合物例如(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯和(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯可用于治疗实际上由于糖鞘脂途径缺陷而引起的任意贮积病(例如戈谢病(即1型、2型或3型)、法布里病、GM1神经节苷脂贮积病或GM2神经节苷脂贮积病(例如GM2活化因子缺乏、泰-萨克斯病和桑德霍夫病))。在特别优选的实施方案中，(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯或其药用盐或前药单独或以与酶代替疗法的联合疗法形式用于在患有法布里病的患者中抑制和/或减少Gb3和/或lyso-Gb3的蓄积(参见实施例)。在优选的实施方案中，所述酶代替疗法包括向法布里病患者给药α-半乳糖苷酶A。实际上，以下实施例表明本发明GCS抑制剂可在法布里病小鼠模型中有效减少Gb3和lyso-Gb3的贮存，因此支持了其可用作治疗法布里病的可行措施。另外，实施例提供的体内联合疗法数据强烈提示联合疗法措施可为累加和互补的。
在某些实施方案中，本发明化合物例如(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯和(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯可单独或以与ERT(例如给药葡萄糖脑苷脂酶)的组合形式用于在被诊断患有神经病性戈谢病的受试者的脑中降低GluCer和GluSph的水平。
本发明联合疗法中小分子疗法组分的剂量方案通常由专业医生来确定且预期随所治疗的具体贮积病和具体患病个体的临床情况而显著变化。确定所给定的本发明SMT用于治疗任意贮积病的剂量方案的一般原则是本领域技术人员熟知的。关于剂量方案的指导可由任意本领域公知的多种参考文献得到。其它指导可尤其由本申请引用的一系列具体参考文献得到。在某些实施方案中，所述剂量可为约0.5mg/kg至约300mg/kg，优选约5mg/kg至约60mg/kg(例如5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、55mg/kg和60mg/kg)，其中每天一次至五次腹膜内、口服或等效给药。所述剂量可为约5mg/kg至约5g/kg，优选约10mg/kg至约1g/kg，其中每天一次至五次口服、腹膜内或等效给药。在一个实施方案中，剂量范围为约10mg/天至约500mg/天(例如10mg/天、20mg/天、30mg/天、40mg/天、50mg/天、60mg/天、70mg/天、80mg/天、90mg/天、100mg/天、110mg/天、120mg/天、130mg/天、140mg/天、150mg/天、160mg/天、170mg/天、180mg/天、190mg/天、200mg/天、210mg/天、220mg/天、230mg/天、240mg/天、250mg/天、260mg/天、270mg/天、280mg/天、290mg/天和300mg/天)。特别优选的口服剂量范围为约50mg至约100mg，其中所述剂量每天给药两次。本发明化合物的具体口服剂量范围为约5mg/kg/天至约600mg/kg/天。本发明化合物的具体口服剂量范围为约1mg/kg/天至约120mg/kg/天例如1mg/kg/天、5mg/kg/天、10mg/kg/天、15mg/kg/天、20mg/kg/天、25mg/kg/天、30mg/kg/天、35mg/kg/天、40mg/kg/天、45mg/kg/天、50mg/kg/天、55mg/kg/天、60mg/kg/天、65mg/kg/天、70mg/kg/天、75mg/kg/天、80mg/kg/天、85mg/kg/天、90mg/kg/天、95mg/kg/天、100mg/kg/天、105mg/kg/天、110mg/kg/天、115mg/kg/天或120mg/kg/天。
在某些实施方案中，本发明涉及使用本发明化合物的SMT和ERT疗法的联合疗法以治疗溶酶体贮积病。可根据本发明来治疗的已知溶酶体贮积病的部分列表参见表1，其包括常见疾病名称、所贮存的物质和相应的酶缺乏(改编自上述Kolodny等人,1998中的表38-4)。
本领域技术人员已知的任意方法可用于监测疾病状态和本发明联合疗法的有效性。对疾病状态的临床监测可包括但不限于器官体积(例如肝、脾)、血红蛋白、红细胞计数、血细胞比容、血小板减少、恶病质(消瘦)和血浆壳多糖酶水平(例如壳三糖苷酶)。已知壳三糖苷酶(壳多糖酶家族中的一种酶)在患有溶酶体贮积病的受试者中由巨噬细胞以高水平产生(参见Guo等人,1995,J.Inherit.Metab.Dis.18,717-722；den Tandt等人,1996,J.Inherit.Metab.Dis.19,344-350；Dodelson de Kremer等人,1997,Medicina(BuenosAires)57,677-684；Czartoryska等人,2000,Clin.Biochem.33,147-149；Czartoryska等人,1998,Clin.Biochem.31,417-420；Mistry等人,1997,Baillieres Clin.Haematol.10,817-838；Young等人,1997,J.Inherit.Metab.Dis.20,595-602；Hollak等人,1994,J.Clin.Invest.93,1288-1292)。壳三糖苷酶优选与血管紧张素转化酶和非耐酒石酸的酸性磷酸酶一起测量以监测戈谢病患者对治疗的响应。
给药本发明联合疗法的方法和制剂包括本领域公知的所有方法和制剂(参见例如Remington’s Pharmaceutical Sciences,1980及随后几年,第16版及随后版本,A.Osloeditor,Easton Pa.；Controlled Drug Delivery,1987,2nd rev.,Joseph R.Robinson&Vincent H.L.Lee编辑,Marcel Dekker,ISBN:0824775880；Encyclopedia of ControlledDrug Delivery,1999,Edith Mathiowitz,John Wiley&Sons,ISBN:0471148288；美国专利6,066,626及其中引用的参考文献；还参见以下章节引用的参考文献)。
根据本发明，为治疗溶酶体贮积病的联合疗法提供以下通用措施。每种通用措施涉及按以下方式将酶代替疗法与小分子疗法组合，所述方式使临床益处最优化同时使与单独使用每种疗法相关的缺点最小化。
在本发明一个实施方案中，给药酶代替疗法(单独或与小分子疗法组合)以开始治疗(即将受试者减积)并在减积期后给药小分子疗法以实现并保持稳定的长期的治疗作用而不需要频繁的静脉内注射ERT。例如，可每周一次、每两周一次或每两个月一次静脉内给药(例如历时一至两小时)酶代替疗法且持续数周或数月或更长时间(例如直到所涉及的指标器官例如脾或肝显示出体积减小)。另外，初始减积治疗的ERT期可单独进行或与小分子疗法组合进行。其中小分子适于口服的小分子疗法组分是特别优选的，这由此不再需要频繁的静脉内介入。
按需在ERT和SMT之间交替或用ERT补充SMT，这提供了以下策略：利用强度的优点同时解决与单独使用每种疗法相关的缺点。无论是用于减积和/或还是用于较长期的护理，ERT的优点都可作为从业人员作出决定所广泛需要的临床经验。另外，在减积期可例如通过对尿或其它身体样品中的生物化学代谢物进行监测或通过对受影响的器官体积进行测量而用ERT对受试者进行有效滴定。然而，ERT的缺点是所需要的给药频率，其由于底物的不断重新蓄积而通常涉及每周一次或每两周一次的静脉内注射。使用小分子疗法以在患者中减少底物蓄积量或抑制底物蓄积，这可随后降低ERT的给药频率。例如，每两周一次的酶代替疗法给药方案可提供“ERT假日”(例如使用SMT)，从而使频繁的酶注射不是所需要的疗法。另外，用联合疗法对溶酶体贮积病进行的治疗可提供互补的治疗措施。实际上，如以下实施例所示，与任一单独治疗平台相比，SMT和ERT的联合疗法可提供显著的改善。这些数据提示使用SMT和ERT的联合疗法可为累加和互补的。在一个实施方案中，ERT可用作减积策略(即开始治疗)，然后或同时用使用本发明化合物的SMT进行补充。在另一个实施方案中，患者首先用使用本发明化合物的SMT进行治疗，然后或同时用ERT进行补充。在其它实施方案中，SMT用于在患有溶酶体贮积病的患者中抑制或减少底物的进一步蓄积(或底物的重新蓄积(若在用ERT减积后使用))且按需任选提供的ERT用于减少底物的任意进一步蓄积。在一个实施方案中，本发明提供对被诊断患有溶酶体贮积病的受试者进行治疗的联合疗法，其包括在给药酶代替疗法和给药小分子疗法之间交替。在另一个实施方案中，本发明提供对被诊断患有溶酶体贮积病的受试者进行治疗的联合疗法，其包括同时给药酶代替疗法和小分子疗法。在本发明各种联合疗法中，应该理解的是，小分子疗法的给药可在给药酶代替疗法前、与给药酶代替疗法同时或在给药酶代替疗法后进行。类似地，酶代替疗法的给药可在给药小分子疗法前、与给药小分子疗法同时或在给药小分子疗法后进行。
在本发明任意一个实施方案中，所述溶酶体贮积病选自戈谢病(1型、2型和3型)、尼-皮病、法伯病、GM1神经节苷脂贮积病、GM2神经节苷脂贮积病(例如GM2活化因子缺乏、泰-萨克斯病和桑德霍夫病)、克拉伯病、胡-沙综合征(MPS I)、亨特病(MPS II)、A型桑菲列普病(MPS III)、B型桑菲列普病(MPS III)、C型桑菲列普病(MPS III)、D型桑菲列普病(MPSIII)、A型Marquio综合征(MPS IV)、B型Marquio综合征(MPS IV)、马-拉病(MPS VI)、Sly综合征(MPS VII)、粘硫脂病、唾液酸贮积病、粘脂贮积病II、粘脂贮积病III、粘脂贮积病IV、法布里病、欣德勒病、蓬佩病、唾液酸贮积病、岩藻糖苷贮积病、甘露糖苷贮积病、天冬氨酰葡糖胺尿症、沃尔曼病和神经元蜡样脂褐质贮积病。
另外，所述ERT提供有效量的至少一种以下酶：葡萄糖脑苷脂酶、鞘磷脂酶、神经酰胺酶、GM1神经节苷脂-β-半乳糖苷酶、己糖胺酶A、己糖胺酶B、β-半乳糖脑苷脂酶、α-L-艾杜糖醛酸酶、艾杜糖醛酸硫酸酯酶、乙酰肝素-N-硫酸酯酶、N-乙酰基-α-氨基葡萄糖苷酶、乙酰辅酶A:α-氨基葡萄糖苷乙酰基转移酶、N-乙酰基-α-葡糖胺-6-硫酸酯酶、半乳糖胺-6-硫酸酯酶、β-半乳糖苷酶、半乳糖胺-4-硫酸酯酶(芳基硫酸酯酶B)、β-葡萄糖醛酸苷酶、芳基硫酸酯酶A、芳基硫酸酯酶C、α-神经氨酸酶、N-乙酰基-葡糖胺-1-磷酸转移酶、α-半乳糖苷酶A、α-N-乙酰基氨基半乳糖苷酶、α-葡萄糖苷酶、α-岩藻糖苷酶、α-甘露糖苷酶、天冬氨酰基氨基葡萄糖酰胺酶、酸性脂肪酶、棕榈酰基蛋白硫酯酶(CLN-1)、PPT1、TPP1、CLN3、CLN5、CLN6、CLN8、NPC1或NPC2。
根据本发明，所述SMT和/或ERT使以下所贮存的物质中的至少一种减少：葡萄糖脑苷脂、鞘磷脂、神经酰胺、GM1神经节苷脂、GM2神经节苷脂、红细胞糖苷脂、半乳糖基神经酰胺、硫酸皮肤素、硫酸乙酰肝素、硫酸角质素、硫苷脂、粘多糖、唾液酸寡糖、糖蛋白、唾液酸寡糖、糖脂、神经酰胺三己糖苷、经O连接的糖肽、糖原、游离唾液酸、岩藻糖脂、岩藻糖基寡糖、甘露糖基寡糖、天冬氨酰基氨基葡萄糖、胆固醇酯、甘油三酯、颗粒状嗜渗性沉积物、蛋白脂质微粒体A和D、ATP合酶亚基c、NPC1或NPC2。
在本发明某些实施方案中，所述小分子疗法包括向受试者给药有效量的(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯(参见图2A)。在其它实施方案中，所述小分子疗法包括向受试者给药有效量的(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯(参见图2B)。所述小分子疗法可包括向受试者给药一种或多种化合物。在某些实施方案中，至少一种所述化合物为本发明化合物例如图2A和/或2B所示的化合物。
酶代替疗法可刺激不需要的免疫响应。因此，免疫抑制剂可与本发明联合疗法中的酶代替疗法组分一起使用。所述药物还可与小分子疗法组分一起使用，但是通常不大可能需要介入。本领域技术人员已知的任意免疫抑制剂可与本发明联合疗法一起使用。所述免疫抑制剂包括但不限于环孢菌素、FK506、雷帕霉素、CTLA4-Ig和抗TNF药物例如伊那西普(参见例如Moder,2000,Ann.Allergy Asthma Immunol.84,280-284；Nevins,2000,Curr.Opin.Pediatr.12,146-150；Kurlberg等人,2000,Scand.J.Immunol.51,224-230；Ideguchi等人,2000,Neuroscience 95,217-226；Potter等人,1999,Ann.N.Y.Acad.Sci.875,159-174；Slavik等人,1999,Immunol.Res.19,1-24；Gaziev等人,1999,Bone Marrow Transplant.25,689-696；Henry,1999,Clin.Transplant.13,209-220；Gummert等人,1999,J.Am.Soc.Nephrol.10,1366-1380；Qi等人,2000,Transplantation69,1275-1283)。已在移植患者中证实有效的抗IL2受体(α-亚基)抗体达克珠单抗(例如ZenapaxTM)也可用作免疫抑制剂(参见例如Wiseman等人,1999,Drugs 58,1029-1042；Beniaminovitz等人,2000,N.Engl J.Med.342,613-619；Ponticelli等人,1999,DrugsR.D.1,55-60；Berard等人,1999,Pharmacotherapy 19,1127-1137；Eckhoff等人,2000,Transplantation 69,1867-1872；Ekberg等人,2000,Transpl.Int.13,151-159)。其它免疫抑制剂包括但不限于抗CD2(Branco等人,1999,Transplantation 68,1588-1596；Przepiorka等人,1998,Blood 92,4066-4071)、抗CD4(Marinova-Mutafchieva等人,2000,Arthritis Rheum.43,638-644；Fishwild等人,1999,Clin.Immunol.92,138-152)和抗CD40配体(Hong等人,2000,Semin.Nephrol.20,108-125；Chirmule等人,2000,J.Virol.74,3345-3352；Ito等人,2000,J.Immunol.164,1230-1235)。
本领域技术人员已知的免疫抑制剂的任意组合可与本发明联合疗法一起使用。一种特别有用的免疫抑制剂组合是他克莫司(FK506)+西罗莫司(雷帕霉素)+达克珠单抗(抗IL2受体α-亚基抗体)。该组合被证实可有效代替类固醇和环孢菌素且是特异性靶向于肝的。另外，最近已显示该组合使胰岛细胞移植得以成功。参见Denise Grady,The New YorkTimes,Saturday,May 27,2000,第A1和A11页。还参见A.M.Shapiro等人,Jul.27,2000,“Islet Transplantation In Seven Patients With Type 1Diabetes Mellitus Using AGlucocorticoid-Free Immunosuppressive Regimen”,N.Engl.J.Med.343,230-238；Ryan等人,2001,Diabetes 50,710-719。通过本领域已知的任意方法进行的血浆去除术也可用于除去或排除以下抗体，所述抗体可发展成对抗联合疗法中的各个组分。
与本发明一起使用的免疫状态指示物包括但不限于本领域技术人员已知的抗体和任意细胞因子例如白介素、CSF和干扰素(参见Leonard等人,2000,J.AllergyClin.Immunol.105,877-888；Oberholzer等人,2000,Crit.Care Med.28(4Suppl.),N3-N12；Rubinstein等人,1998,Cytokine Growth Factor Rev.9,175-181)。例如，可监测对代替酶具有特异性免疫反应的抗体以确定受试者的免疫状态。在约24种已知的白介素中，特别优选的免疫状态指示物为IL-1α、IL-2、IL-4、IL-8和IL-10。在集落刺激因子(CSF)中，特别优选的免疫状态指示物为G-CSF、GM-CSF和M-CSF。在干扰素中，α-、β-或γ-干扰素中的一种或多种优选作为免疫状态指示物。
以下章节提供的各种组分可用于8种具体的溶酶体贮积病(即戈谢病(包括1型、2型和3型)、法布里病、B型尼-皮病、亨特病、莫尔基奥综合征、马-拉病、蓬佩病和胡-沙综合征)。以下章节进一步公开了本发明联合疗法中的酶代替疗法组分和小分子疗法组分。
戈谢病
如上所述，戈谢病由于葡萄糖脑苷脂酶(β-D-葡萄糖基-N-酰基鞘氨醇葡萄糖水解酶,EC 3.2.1.45)的缺乏和葡萄糖脑苷脂(葡萄糖基神经酰胺)的蓄积而引起。对于本发明治疗戈谢病的联合疗法中的酶代替疗法组分，可参见多份参考文献，其公开了令人满意的剂量方案和与治疗相关的其它有用信息(参见Morales,1996,Gaucher’s Disease:AReview,The Annals of Pharmacotherapy 30,381-388；Rosenthal等人,1995,EnzymeReplacement Therapy for Gaucher Disease:Skeletal Responses to Macrophage-targeted Glucocerebrosidase,Pediatrics 96,629-637；Barton等人,1991,ReplacementTherapy for Inherited Enzyme Deficiency-Macrophage-targetedGlucocerebrosidase for Gaucher’s Disease,New England Journal of Medicine 324,1464-1470；Grabowski等人,1995,Enzyme Therapy in Type 1 Gaucher Disease:Comparative Efficacy of Mannose-terminated Glucocerebrosidase from Naturaland Recombinant Sources,Annals of Internal Medicine 122,33-39；Pastores等人,1993,Enzyme Therapy in Gaucher Disease Type 1:Dosage Efficacy and AdverseEffects in 33Patients treated for 6to 24Months,Blood 82,408-416；和Weinreb等人,Am.J.Med.,113(2):112-9(2002)。
一个实施方案提供了每周三次2.5单位/千克(U/kg)至每两周一次60U/kg的ERT剂量方案，其中酶通过历时1-2小时静脉内输注来给药。葡萄糖脑苷脂酶的单位被定义为在37℃每分钟催化1微摩尔合成底物对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷发生水解的酶量。另一个实施方案提供了每周三次1U/kg至每两周一次120U/kg的剂量方案。另一个实施方案提供了每天一次或每周三次0.25U/kg至每二至六周一次600U/kg的剂量方案。
阿糖脑苷酶自1991年以来可由Genzyme Corporation得到。阿糖脑苷酶为由胎盘衍生的葡萄糖脑苷脂酶的改良形式。在1994年，伊米苷酶也可由Genzyme Corporation得到。伊米苷酶为葡萄糖脑苷脂酶的改良形式，其衍生自重组DNA在哺乳动物细胞培养系统(中华仓鼠卵巢细胞)中的表达。伊米苷酶为由497个氨基酸组成且含有四个N联糖基化位点的单体糖蛋白。伊米苷酶具有以下优点：与由胎盘衍生的阿糖脑苷酶相比理论上无限的供应和降低生物污染物的可能性。这些酶在其糖基化位点被修饰以暴露甘露糖残基，该策略经由甘露糖-6-磷酸受体而改善了对溶酶体的靶向性。伊米苷酶与胎盘葡萄糖脑苷脂酶的不同在于495位的一个氨基酸，其中组氨酸代替精氨酸。已知这些产品的几种剂量方案是有效的(参见上述Morales,1996；上述Rosenthal等人,1995；上述Barton等人,1991；上述Grabowski等人,1995；上述Pastores等人,1993)。例如，每两周一次60U/kg的剂量方案在患有中度至重度疾病的受试者中具有临床益处。对于其它剂量方案和给药信息，从业人员应该查询以上引用的参考文献和上述产品的包装说明书。还参见授予GenzymeCorporation的美国专利5,236,838和5,549,892。
如上所述，戈谢病由于溶酶体酶葡萄糖脑苷脂酶(GC)的缺乏而引起。在戈谢病的最常见表型(1型)中，病理学限于网状内皮组织系统和骨骼系统且没有神经病症状。参见Barranger,Glucosylceramide lipidosis:Gaucher disease.In:Scriver CR BA,Sly WS,Valle D,editor.The Metabolic Basis of Inherited Disease.New York:McGraw-Hill.pp.3635-3668(2001)。在神经病性戈谢病(nGD)(细分为2型和3型戈谢病)中，葡萄糖脑苷脂酶(GC)的缺乏引起葡萄糖基神经酰胺(GluCer；GL-1)和葡萄糖基鞘氨醇(GluSph)在脑中的蓄积，这导致神经损伤。2型戈谢病的特征在于发病早、进展快、内脏和中枢神经系统中的广泛病理学及通常在2岁前死亡。3型戈谢病(也称为亚急性nGD)是一种中间表型，其具有各种发病年龄及不同的严重度和进展速率。Goker-Alpan等人,The Journal ofPediatrics 143:273-276(2003)。最近已繁育出2型戈谢病的K14lnl/lnl小鼠模型(以下称为“K14小鼠”)；该小鼠模型非常接近地再现了所述人类疾病，其表现出共济失调、癫痫发作、痉挛状态和减少的中位寿命(仅14天)。Enquist等人,PNAS 104:17483-17488(2007)。
如在患有nGD的患者中那样，所述疾病的几种小鼠模型由于GC活性的缺乏而在脑中具有提高的GluCer和GluSph水平。Liu等人,PNAS 95:2503-2508(1998)和Nilsson,J.Neurochem 39:709-718(1982)。“K14”小鼠显示出神经病表型，其与2型戈谢病共有多种病理学特征例如神经变性、星形胶质细胞增生、小神经胶质细胞增殖及特定脑区域中提高的GluCer和GluSph水平。Enquist等人(2007)。
由于2型戈谢病的严重度及当前疗法不能穿过血脑屏障(BBB)，因此医生面临对受nGD影响的患者进行临床控制的挑战。对非nGD的当前治疗基于重组人葡萄糖脑苷脂酶(Imiglucerase；CerezymeTM)的静脉内给药以代替缺失的酶或基于葡萄糖基神经酰胺合酶抑制剂的给药以减少底物(GL-1)的产生。然而，这些药物不能穿过血脑屏障且因此预期不能为nGD患者提供治疗益处。当前临床使用的小分子葡萄糖基神经酰胺合酶抑制剂不可能解决nGD的神经病表型。在2型戈谢病的K14小鼠模型中对本发明化合物(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯(以下称为“GZ161”)进行的评价表明其确实减少脑GluCer和GluSph(参见实施例122-125)。其还减少脑神经病并延长该模型的寿命。另外，使用酶代替疗法和小分子底物减少的组合措施可代表对2型戈谢病的优秀疗法。
法布里病
如上所述，法布里病由于溶酶体酶α-半乳糖苷酶A的缺乏而引起。所述酶的缺乏导致具有末端α-半乳糖基的糖鞘脂的全身性沉积，所述具有末端α-半乳糖基的糖鞘脂主要为神经酰胺三己糖苷(GL3或Gb3)且在较小程度上为半乳糖二糖基神经酰胺和B血型糖鞘脂。
几种测定可用于监测疾病进展和确定何时由一种治疗模式转换至另一种治疗模式。在一个实施方案中，可使用以下测定，其确定组织样品中α-半乳糖苷酶A的特异性活性。在另一个实施方案中，可使用以下测定，其确定Gb3的蓄积。在另一个实施方案中，从业人员可测定糖鞘脂底物在体液中及在血管内皮细胞、周皮细胞和平滑肌细胞的溶酶体中的沉积。可作为有用的疾病控制指示物的其它临床表现包括蛋白尿或肾损伤的其它指征例如尿中的红细胞和脂质小球及升高的红细胞沉降率。从业人员还可监测贫血、降低的血清铁浓度、高浓度的β-血小板球蛋白及升高的网织红细胞计数或血小板聚集。实际上，可使用本领域技术人员已知用于监测疾病进展的任意措施(参见Desnick RJ等人,1995,alpha-Galactosidase A Deficiency:Fabry Disease,In:The Metabolic and Molecular Basesof Inherited Disease,Scriver等人编辑,McGraw-Hill,N.Y.,7.sup.th ed.,第2741-2784页)。优选的代替标志物为用于对法布里病控制进行监测的疼痛。其它优选的方法包括对来自体液或活检标本的酶和/或底物的总清除率进行测量。法布里病酶代替疗法的优选剂量方案为每隔一天一次1-10mg/kg i.v.。可使用每隔一天一次至每周一次或每两周一次0.1-100mg/kg i.v.的剂量方案。
B型尼-皮病
如上所述，B型尼-皮病由于溶酶体酶酸性鞘磷脂酶的活性降低和膜脂质(主要为鞘磷脂)的蓄积而引起。待给药的代替用酸性鞘磷脂酶的有效剂量可为约0.01mg/kg体重至约10mg/kg体重，其频率为每隔一天一次至每周一次、每两周一次或每两个月一次。在其它实施方案中，有效剂量可为约0.03mg/kg至约1mg/kg、约0.03mg/kg至约0.1mg/kg和/或约0.3mg/kg至约0.6mg/kg。在具体实施方案中，在递增的剂量方案中按以下先后剂量向患者给药酸性鞘磷脂酶：0.1mg/kg、0.3mg/kg、0.6mg/kg和1.0mg/kg，其中每种剂量的酸性鞘磷脂酶至少给药两次且每种剂量的给药间隔两周且其中在将剂量提高至下一个水平前监测患者中的毒副作用(参见美国专利申请公开文本2011/0052559)。
胡-沙综合征(MPS I)
胡尔勒病、沙伊病和胡-沙病(也称为MPS I)由于α-艾杜糖醛酸酶的失活及硫酸皮肤素和硫酸乙酰肝素的蓄积而引起。几种测定可用于监测MPS I疾病进展。例如，可监测组织活检标本或由外周血得到的培养细胞中α-艾杜糖醛酸酶的酶活性。另外，MPS I及其它粘多糖贮积病中疾病进展的方便测量指标是糖胺聚糖硫酸皮肤素和硫酸乙酰肝素的尿排泄(参见上述Neufeld等人,1995)。在具体实施方案中，以0.58mg/kg体重的剂量每周一次静脉内输注给药α-艾杜糖醛酸酶。
亨特病(MPS II)
亨特病(也称为MPS II)由于艾杜糖醛酸硫酸酯酶的失活及硫酸皮肤素和硫酸乙酰肝素的蓄积而引起。亨特病在临床上呈现为重度和中度形式。治疗用酶的剂量方案为每两周1.5mg/kg至每周50mg/kg是优选的。
莫尔基奥综合征(MPS IV)
莫尔基奥综合征(也称为MPS IV)由于硫酸角质素的蓄积而引起，而硫酸角质素的蓄积是由于两种酶中的任意一种的失活。MPS IVA中失活的酶为半乳糖胺-6-硫酸酯酶且MPS IVB中失活的酶为β-半乳糖苷酶。治疗用酶的剂量方案为每两周1.5mg/kg至每周50mg/kg是优选的。
马-拉病(MPS VI)
马-拉病(也称为MPS VI)由于半乳糖胺-4-硫酸酯酶(芳基硫酸酯酶B)的失活和硫酸皮肤素的蓄积而引起。每两周1.5mg/kg至每周50mg/kg的剂量方案为ERT所提供的有效治疗用酶的优选范围。最优化地，所使用的剂量小于或等于每周10mg/kg。MPS VI疾病进展的优选代替标志物为蛋白聚糖的水平。
蓬佩病
蓬佩病由于酸性α-葡萄糖苷酶的失活和糖原的蓄积而引起。酸性α-葡萄糖苷酶的基因位于人染色体17上并被命名为GAA。H.G.Hers基于他对该疾病的研究而首次提出了先天性溶酶体疾病的概念，所述先天性溶酶体疾病被他称为II型糖原贮积病(GSD II)且现也称为酸性麦芽糖酶缺乏症(AMD)(参见Hers,1965,Gastroenterology 48,625)。在具体实施方案中，以20mg/kg体重的剂量每两周静脉内输注给药GAA。
几种测定可用于监测蓬佩病进展。可使用本领域技术人员已知的任意测定。例如，本领域技术人员可测定糖原颗粒在溶酶体中的蓄积，特别是在用于活检的心肌膜、肝和骨骼肌纤维中。还可监测活检标本或由外周血得到的培养细胞中α-葡萄糖苷酶的酶活性。可监测肌酸激酶(CK)的血清升高作为疾病进展的指征。血清CK在婴儿发病患者中可升高十倍且在成人发病患者中通常升高较小的程度。参见Hirschhorn R,1995,Glycogen StorageDisease Type II:Acid alpha-Gluocosidase(Acid Maltase)Deficiency,In:TheMetabolic and Molecular Bases of Inherited Disease,Scriver等人编辑,McGraw-Hill,N.Y.,7.sup.th ed.,第2443-2464页。
酶代替疗法
以下章节提供了关于本发明联合疗法中酶代替疗法组分的具体公开和可选实施方案。本发明联合疗法中酶代替疗法组分的剂量方案通常由专业医生确定。以上提供了用葡萄糖脑苷脂酶治疗戈谢病的剂量方案的几个实例。基于公众可得到的信息例如在相关章节中就每种具体LSD所引用的具体参考文献，本发明联合疗法中的任意给定ERT组分在治疗任意LSD中的剂量方案的一般确定原则对于本领域技术人员将是显而易见的。可通过静脉内输注向患者给药ERT。脑室内和/或鞘内输注(例如除静脉内输注外)可用于向被诊断患有具有CNS表现的溶酶体贮积病的患者给药ERT。
本领域已知的任意方法可用于制备在本发明联合疗法的酶代替疗法组分中使用的酶。多种这样的方法是已知的且包括但不限于由Shire plc开发的基因活化技术(参见美国专利5,968,502和5,272,071)。
小分子疗法
以下章节提供了关于本发明联合疗法中小分子疗法组分的具体公开和可选实施方案。本发明联合疗法中小分子疗法组分的剂量方案通常由专业医生确定且预期随所治疗的具体贮积病和具体患病个体的临床情况而显著变化。本发明任意联合疗法中给定的SMT组分在治疗任意贮积病中的剂量方案的一般确定原则是本领域技术人员熟知的。关于剂量方案的指导可由就此而言任意本领域公知的多种参考文献得到。其它指导可尤其由本申请引用的一系列具体参考文献得到。
通常，本发明化合物例如(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯和(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯可用于本发明联合疗法以治疗实际上由于糖鞘脂途径损害而引起的任意贮积病(例如戈谢病、法布里病、GM1神经节苷脂贮积病和GM2神经节苷脂贮积病(例如GM2活化因子缺乏症、泰-萨克斯病和桑德霍夫病))。类似地，氨基糖苷(例如庆大霉素、G418)可用于本发明联合疗法以治疗具有早熟终止密码子突变(即无意义突变)的任意贮积病个体。上述突变在胡尔勒综合征中是特别普遍的。当与其它疗法相比时，本发明联合疗法中的小分子疗法组分在所治疗的贮积病具有中枢神经系统表现的情况下(例如桑德霍夫病、泰-萨克斯病、A型尼-皮病及2型和3型戈谢病)是特别优选的，这是因为小分子通常可容易地穿过血脑屏障。
本领域技术人员可容易地确定本发明联合疗法所使用的底物抑制剂的优选剂量。在某些实施方案中，所述剂量可为约0.5mg/kg至约300mg/kg，优选约5mg/kg至约60mg/kg(例如5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、55mg/kg和60mg/kg)，其中每天一次至五次腹膜内、口服或等效给药。所述剂量可为约5mg/kg至约5g/kg，优选约10mg/kg至约1g/kg，其中每天一次至五次口服、腹膜内或等效给药。在一个实施方案中，剂量范围为约10mg/天至约500mg/天(例如10mg/天、20mg/天、30mg/天、40mg/天、50mg/天、60mg/天、70mg/天、80mg/天、90mg/天、100mg/天、110mg/天、120mg/天、130mg/天、140mg/天、150mg/天、160mg/天、170mg/天、180mg/天、190mg/天、200mg/天、210mg/天、220mg/天、230mg/天、240mg/天、250mg/天、260mg/天、270mg/天、280mg/天、290mg/天和300mg/天)。特别优选的口服剂量范围为约50mg至约100mg，其中所述剂量每天给药两次。本发明化合物的具体口服剂量范围为约5mg/kg/天至约600mg/kg/天。本发明化合物的具体口服剂量范围为约1mg/kg/天至约100mg/kg/天例如1mg/kg/天、5mg/kg/天、10mg/kg/天、15mg/kg/天、20mg/kg/天、25mg/kg/天、30mg/kg/天、35mg/kg/天、40mg/kg/天、45mg/kg/天、50mg/kg/天、55mg/kg/天、60mg/kg/天、65mg/kg/天、70mg/kg/天、75mg/kg/天、80mg/kg/天、85mg/kg/天、90mg/kg/天、95mg/kg/天或100mg/kg/天。
治疗平台(即酶代替疗法和小分子疗法)的轮换组合是优选的。然而，受试者还可按需通过这两种措施的重叠来治疗，这由本领域技术人员确定。治疗安排的实例可包括但不限于：(1)进行SMT，然后进行ERT；(2)进行ERT，然后进行SMT；及(3)在大约相同的时间提供ERT和SMT。如上所述，还可按需进行治疗平台的暂时重叠，这取决于给定的贮积病在给定的受试者中的临床病程。
各种联合疗法的治疗间隔可变化很大且在不同的贮积病和不同的个体之间通常可为不同的，这取决于贮存产物的蓄积严重程度。例如，与蓬佩病中贮存产物的快速蓄积相比，法布里病中贮存产物的蓄积可为缓慢的。本领域技术人员通过监测疾病进展和治疗成功的临床指征而对具体个体中的具体贮积病进行滴定。
在溶酶体贮积病中蓄积的各种大分子不是均匀分布的，而是沉积在就每种疾病而言某些优选的解剖学位点。然而，外源性提供的酶通常被网状内皮系统中的细胞所吸收并被分类到溶酶体隔室中，其中它的作用是水解所蓄积的底物。另外，治疗用酶的细胞摄取可通过某些措施来增加以提高对溶酶体的靶向性(参见例如Friedman等人转让给GenzymeCorporation的美国专利5,549,892，所述专利描述了以下重组葡萄糖脑苷脂酶，其借助被细胞表面的甘露糖受体所识别并被胞吞和运输至溶酶体的改造寡糖侧链而具有改善的药物代谢动力学)。
与其它器官相比，一些治疗模式较好地靶向于一些受影响的器官。在法布里病中，例如若ERT到达肾的充分程度不足以产生令人满意的临床效果，则SMT可用于降低肾中的底物水平。如实施例112和图6B所示，与ERT相比，SMT较有效地降低法布里病小鼠模型的尿中的Gb3水平(即法布里病患者中蓄积的底物)。拒信肾为尿Gb3的主要来源。相反地，图6B显示与SMT相比，ERT较有效地降低血浆中的Gb3水平。这些结果表明ERT和SMT的联合疗法提供互补的治疗策略，其利用强度的优点且解决与单独使用每种疗法相关的缺点。SMT能够穿过BBB，当与ERT组合时这提供了有力的措施来治疗具有CNS表现的LSD例如A型尼-皮病和神经病性戈谢病(nGD)。另外，SMT与酶代替疗法的组合所实现的底物减少在单独和不同的介入点解决贮存问题，这可加强临床效果。
应该理解的是，所提及的两种或更多种疗法的同时或并行给药不需要它们在同一时间给药，而仅需要它们在受试者中在同一时间发挥作用。
实施例1
1-苯基环丁基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作A，由1-苯基环丁胺盐酸盐(100mg,0.540mmol)和奎宁环-3-醇(103mg,0.810mmol)得到1-苯基环丁基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(76mg,47％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.43(d,J＝7.9Hz,2H),7.34(t,J＝7.7Hz,2H),7.23(t,J＝7.3Hz,1H),5.75-5.25(m,1H),4.60(br s,1H),3.25-2.22(m,9H),2.16-2.03(m,1H),2.02-0.94(m,6H),0.88(t,J＝6.8Hz,1H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ158.1,128.5,126.9,125.6,71.4,59.4,55.7,47.5,46.6,34.0,31.8,29.9,25.5,24.7,22.9,19.7,15.3,14.4ppm。纯度>99.9％UPLCMS(210nm)；保留时间0.62分钟；(M+1)331。
实施例2
2-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作B，将苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-甲腈(1.00g,6.81mmol)转化成2-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)丙-2-胺盐酸盐(692mg,47％)。
使用通用操作A，由上述胺盐酸盐中间体(150mg,0.695mmol)和奎宁环-3-醇得到2-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(125mg,54％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.91(dd,J＝1.9Hz,1H),6.87(dd,J＝1.9,8.2Hz,1H),6.75(d,J＝8.2Hz,1H),5.93(s,2H),5.12(s,1H),4.69-4.66(m,1H),3.26-2.11(m,7H),2.03-1.07(m,4H),1.63(s,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ156.7,147.9,118.0,108.1,106.1,101.2,71.2,55.9,55.3,47.6,46.7,29.9,29.7,25.6,24.8,19.8ppm。纯度97.5％UPLCMS(210nm)；保留时间0.65分钟；(M+1)333。
实施例3
2-(萘-1-基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作A，由2-(萘-1-基)丙-2-胺盐酸盐(100mg,0.450mmol)和奎宁环-3-醇得到2-(萘-1-基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(115mg,59％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.79-8.46(m,1H),7.99-7.72(m,2H),7.69-7.36(m,4H),5.86-5.37(m,1H),4.72-4.34(m,1H),3.25-2.20(m,6H),2.16-0.41(m,5H),1.93(s,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ154.6,135.2,130.7,129.7,128.8,125.9,125.3,123.9,72.2,71.1,56.5,55.7,47.6,46.6,31.8,31.2,25.5,24.8,22.9,19.7,14.4ppm。纯度100％UPLCMS(210nm)；保留时间0.80分钟；(M+1)339。
制备I
实施例4
2-(3-(丙-1-烯-2-基)苯基)丙-2-基氨基甲酸(R)-奎宁环-3-基酯
在室温向(R)-奎宁环-3-醇(194mg,1.52mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入NaH[60％,油](64mg,1.6mmol)。将反应混合物搅拌15分钟并滴加1-(2-异氰酸基丙-2-基)-3-(丙-1-烯-2-基)苯(302μL,1.53mmol)。将反应混合物搅拌30分钟且用盐水淬灭。溶液用EtOAc萃取且有机层用Na2SO4干燥并浓缩。粗品用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到相应的氨基甲酸酯(475mg,95％)，其为澄清油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.49(s,1H),7.31(br s,3H),5.33(s,1H),5.17(s,1H),5.08(s,1H),4.77-4.61(m,1H),3.33-2.27(m,5H),2.14(s,3H),2.25-0.75(m,6H),1.68(br s,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ154.7,147.2,143.7,141.6,128.5,124.2,122.1,112.8,70.9,55.7,55.5,47.5,46.6,32.2,31.5,29.9,29.6,25.5,24.6,22.9,22.2,19.6ppm。纯度100％UPLCMS(210nm)；保留时间0.84分钟；(M+1)329.2。C20H28N2O2·0.06(CHCl3)分析计算值:C,71.59；H,8.40；N,8.58；实测值:C,71.51；H,9.05；N,8.60。
制备J
实施例5
2-(3-异丙氧基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
将3-氰基苯酚(1.00g,8.39mmol)、2-碘丙烷(839μL,8.39mmol)和碳酸铯(2.73g,8.39mmol)在1:1CH2Cl2/CH3CN(16mL)中的溶液回流搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温且用硅藻土过滤。浓缩滤液且粗品用Combiflash(SiO2柱,CH2Cl2)纯化，得到相应的醚(763mg,57％)，其为白色固体。
使用通用操作B，将3-异丙氧基苯甲腈(763mg,4.24mmol)转化成相应的2-(3-异丙氧基苯基)丙-2-胺(362mg,45％)，其为澄清油状物。
使用通用操作A，由上述胺(100mg,0.520mmol)和奎宁环-3-醇得到2-(3-异丙氧基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(110mg,61％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.17(t,J＝7.9Hz,1H),6.92(d,J＝7.8Hz,1H),6.89(t,J＝2.1Hz,1H),6.70(d,J＝8.1Hz,1H),5.38-5.13(m,1H),4.58(br s,1H),4.49(七重峰,J＝6.1Hz,1H),3.31-2.04(m,6H),2.00-0.79(m,5H),1.60(br s,6H),1.28(d,J＝6.1Hz,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ158.1,129.5,117.2,113.6,71.1,69.9,55.8,55.4,47.6,46.6,29.4,25.6,24.8,22.3,19.7ppm。纯度>99.9％UPLCMS(210nm)；保留时间0.83分钟；(M+1)347。
实施例6
2-(3-溴-2-氟苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作A，由2-(3-溴-2-氟苯基)丙-2-胺(1.0g,4.3mmol)和奎宁环-3-醇得到2-(3-溴-2-氟苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(957mg,58％)，其为白色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.45(ddd,J＝1.6,6.3,7.9Hz,1H),7.31(td,J＝1.6,7.7Hz,1H),6.99(td,J＝1.0,8.0Hz,1H),5.31-5.15(br s,1H),4.59(br s,1H),3.25-2.19(m,6H),2.06-0.81(m,5H),1.73(s,3H),1.71(s,3H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ158.1,155.6,132.5,127.1,127.0,124.8,124.8,110.6,110.4,71.5,55.7,54.2,47.5,46.7,29.9,28.4,25.5,24.8,19.7ppm。纯度>99.9％UPLCMS(210nm)；保留时间0.79分钟；(M+1)385。
实施例7
(+/-)(1R,2S)-2-苯基环丙基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作A，由(+/-)((1S,2R)-2-异氰酸基环丙基)苯(117μL,0.780mmol)和奎宁环-3-醇得到(+/-)(1R,2S)-2-苯基环丙基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(63mg,28％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.30-7.05(m,5H),5.43(br s,1H),4.77(br s,1H),3.23(dd,J＝9.0,14.0Hz,1H),2.97-2.65(m,6H),2.15-1.12(m,8H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ157.1,140.7,140.2,128.5,126.8,126.3,71.5,55.7,47.5,46.6,32.7,25.6,25.2,24.5,19.5,16.2ppm。纯度>99.9％UPLCMS(210nm)；保留时间0.67分钟；(M+1)287。
实施例8
1-苯基环己基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作A，由1-苯基环己胺(36mg,0.21mmol)和奎宁环-3-醇得到1-苯基环己基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(40mg,58％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.41(d,J＝7.4Hz,2H),7.32(t,J＝7.7Hz,2H),7.21(t,J＝7.3Hz,1H),5.19-4.98(br s,1H),4.70-4.56(s,1H),3.34-0.83(m,21H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ158.4,128.3,126.5,124.9,57.2,46.3,36.1,25.4,24.2,22.0,19.2,15.2ppm。纯度>99.9％UPLCMS(210nm)；保留时间0.84分钟；(M+1)329。
制备K
实施例9
(R)-1-(2-(3-(丙-1-烯-2-基)苯基)丙-2-基)-3-(奎宁环-3-基)脲
向(R)-奎宁环-3-胺二盐酸盐(120mg,0.603mmol)和1-(2-异氰酸基丙-2-基)-3-(丙-1-烯-2-基)苯(119mg,0.597mmol)在THF(3mL)中的溶液中加入三乙胺(168μL,1.21mmol)。将反应混合物在室温搅拌18小时，然后用盐水淬灭。混合物用CHCl3萃取且将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩。粗品用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到相应的脲(163mg,50％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.62(t,J＝1.6Hz,1H),7.44(dt,J＝1.9,7.0Hz,1H),7.41-7.33(m,2H),5.35(br s,1H),5.11(p,J＝1.4Hz,1H),4.84(s,1H),4.21(d,J＝7.5Hz,1H),3.70-3.61(m,1H),3.13(ddd,J＝2.3,9.3,14.2Hz,1H),2.71-2.54(m,3H),2.30-2.22(m,1H),2.15(dd,J＝0.8,1.4,3H),2.05-1.96(m,1H),1.65(s,3H),1.64(s,3H),1.65-1.60(m,1H),1.54-1.45(m,2H),1.22-1.12(m,1H),0.95-0.80(m,1H)ppm。13C NMR(400MHz,CDCl3)δ157.4,148.5,143.8,141.3,128.4,124.4,123.8,122.2,112.6,55.2,53.4,46.2,46.1,44.5,30.5,30.4,25.0,22.2,17.7,8.9ppm。纯度97.5％UPLCMS(210nm)；保留时间0.83分钟；(M+1)328。
实施例10
1-(2-(萘-2-基)丙-2-基)-3-(奎宁环-3-基)脲
使用通用操作B，将萘-2-甲腈(1.00g,6.53mmol)转化成相应的2-(萘-2-基)丙-2-胺(294mg,25％)，其为澄清油状物。
使用通用操作C，由奎宁环-3-胺(102mg,0.808mmol)、CDI(131mg,0.808mmol)和2-(萘-2-基)丙-2-胺(150mg,0.819mmol)得到1-(2-(萘-2-基)丙-2-基)-3-(奎宁环-3-基)脲(132mg,49％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.94-7.78(m,4H),7.69(dd,J＝2.0,8.7Hz,1H),7.53-7.46(m,2H),4.84(s,1H),4.23(d,J＝8.0Hz,1H),3.68-3.54(m,1H),3.07(ddd,J＝2.3,9.3,14.1Hz,1H),2.61-2.51(m,2H),2.42-2.32(m,1H),1.95-1.83(m,2H),1.75(s,3H),1.74(s,3H),1.58-1.54(m,1H),1.46-1.40(m,2H),1.03-0.91(m,1H),0.72-0.60(m,1H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ157.5,143.7,133.4,132.8,129.3,128.1,127.8,126.9,126.7,124.4,124.0,57.0,55.0,47.1,47.1,46.6,30.5,30.3,26.0,25.9,20.0ppm。纯度>99.9％UPLCMS(210nm)；保留时间0.71分钟；(M+1)338。
实施例11
1-(2-甲基-2-(间甲苯基)丙基)-3-(3-甲基奎宁环-3-基)脲
使用通用操作D，由2-甲基-2-(间甲苯基)丙-1-胺盐酸盐(100mg,0.501mmol)、三乙胺(279μL,2.00mmol)、三光气(47mg,0.18mmol)和3-甲基奎宁环-3-胺2,2,2-三氟乙酸盐(140mg,0.550mmol)得到1-(2-甲基-2-(间甲苯基)丙基)-3-(3-甲基奎宁环-3-基)脲(41mg,25％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.23(t,J＝7.7Hz,1H),7.18-7.12(m,2H),7.04(d,J＝7.5Hz,1H),4.12(s,1H),4.08(t,J＝6.0Hz,1H),3.39-3.22(m,2H),2.81-2.62(m,6H),2.34(s,3H),1.98-1.89(m,1H),1.80-1.63(m,2H),1.51-1.23(m,J＝26.9Hz,2H),1.37(s,3H),1.30(s,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ157.9,147.1,138.2,128.6,127.1,127.1,123.3,64.0,52.2,52.1,46.9,46.7,39.2,31.2,27.1,26.8,25.4,23.5,22.7,21.9。纯度>99.9％UPLCMS(210nm)；保留时间0.79分钟；(M+1)330。
实施例12
1-(2-(3-甲氧基苯基)丙-2-基)-3-(奎宁环-3-基)脲
使用通用操作C，由奎宁环-3-胺(380mg,3.01mmol)、CDI(489mg,3.01mmol)和2-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺(506mg,3.07mmol)得到1-(2-(3-甲氧基苯基)丙-2-基)-3-(奎宁环-3-基)脲(560mg,59％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35-7.29(m,1H),7.14-7.07(m,2H),6.87-6.81(ddd,1H),4.76(s,1H),4.19(d,1H),3.81(s,3H),3.70-3.62(m,1H),3.19-3.10(m,1H),2.74-2.59(m,3H),2.37-2.26(m,1H),2.07-1.98(dd,1H),1.80(brs,1H),1.69-1.63(m,1H),1.63(s,3H),1.62(s,3H),1.58-1.44(m,2H),1.28-1.14(m,1H),1.02-0.90(m,1H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ160.0,157.5,148.4,129.9,117.7,112.0,111.9,56.7,55.3,54.6,47.2,46.8,46.4,30.1,25.8,20.0ppm。纯度>99.4％UPLCMS(210nm)；保留时间1.73分钟；(M+1)318。
实施例13
2-(3-甲氧基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作A，由1-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺(327mg,1.98mmol)和奎宁环-3-醇得到2-(3-甲氧基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(370mg,59％)，其为白色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.30-7.20(m,1H),7.03-6.97(m,1H),6.97-6.93(m,1H),6.80-6.74(dd,1H),5.18-5.00(br s,1H),4.67-4.57(m,1H),3.80(s,3H),3.30-2.12(br m,7H),2.02-1.00(m,10H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ159.7,154.5,149.0,129.3,117.2,111.4,111.0,70.9,55.7,55.1,47.4,46.5,29.4,25.4,24.6,19.6ppm。纯度>99.9％UPLCMS(210nm)；保留时间1.85分钟；(M+1)319。
实施例14
2-(3-甲氧基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作A，由1-(4-甲氧基苯基)丙-2-胺盐酸盐(316mg,1.57mmol)和奎宁环-3-醇得到2-(3-甲氧基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(370mg,59％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.33(d,2H),6.86(d,2H),5.15-5.01(br s,1H),4.66-4.57(m,1H),3.79(s,3H),3.33-2.12(m,7H),2.10-0.96(m,10H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ158.1,154.5,139.2,125.8,113.5,70.7,55.7,55.2,54.6,47.2,46.3,31.2,29.4,25.3,24.5,19.4ppm。纯度>94.1％UPLCMS(210nm)；保留时间1.81分钟；(M+1)319。
实施例15
2-(4-叔丁基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作A，由1-(4-叔丁基苯基)丙-2-胺(348mg,1.82mmol)和奎宁环-3-醇得到2-(4-叔丁基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(427mg,68％)，其为白色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.34(s,4H),5.09(br s,1H),4.69-4.52(m,1H),3.47-2.05(m,7H),3.33-2.12(m,7H),2.00-0.80(m,20H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ156.2,149.4,144.5,125.3,124.5,70.9,55.8,55.1,47.5,46.6,34.4,31.4,29.8,29.3,25.5,24.6,19.6ppm。纯度>98.2％UPLCMS(210nm)；保留时间2.29分钟；(M+1)345。
实施例16
2-(4-异丙基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作A，由1-(4-异丙基苯基)丙-2-胺(158mg,0.891mmol)和奎宁环-3-醇得到2-(4-异丙基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(205mg,70％)，其为白色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.33(d,J＝7.3Hz,2H),7.19(s,1H),7.17(s,1H),5.09(s,1H),4.69-4.51(br s,1H),3.30-1.30(m,17H),1.24(s,3H),1.22(s,3H),1.06-0.77(m,1H)ppm。13CNMR(100MHz,CDCl3)δ156.2,147.1,144.4,126.4,124.7,70.9,55.7,55.0,47.4,46.5,33.6,29.8,29.4,25.4,24.6,24.0,19.5ppm。纯度>98.3％UPLCMS(210nm)；保留时间2.19分钟；(M+1)331。
实施例17
2-(4-乙基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作A，由1-(4-乙基苯基)丙-2-胺(230mg,1.41mmol)和奎宁环-3-醇得到2-(4-乙基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(248mg,56％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.33(d,J＝7.3Hz,2H),7.19(s,1H),7.17(s,1H),5.09(s,1H),4.69-4.51(br s,1H),3.34-0.73(m,22H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ154.5,144.3,142.4,127.8,124.7,71.0,55.6,55.1,47.4,46.5,29.6,28.3,25.4,24.6,19.5,15.8,15.4ppm。纯度>99.5％UPLCMS(210nm)；保留时间2.07分钟；(M+1)317。
实施例18
2-邻甲苯基丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作A，由2-邻甲苯基丙-2-胺(230mg,1.52mmol)和奎宁环-3-醇得到2-邻甲苯基丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(200mg,44％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)(旋转异构体)δ7.33(br s,1H),7.15-7.10(m,3H),5.35-5.20(m,1H),4.60(br s,1H),3.20-2.60(m,5H),2.5(s,3H),2.15(br s,1H),1.80-1.30(m,10H)。13C NMR(100MHz,CDCl3)(旋转异构体)δ154.2,144.5,140.2,133.0,127.1,126.2,126.1,72.2,71,56.0,46.6,46.7,31.0,29.0,26.0,24.7,22.3,19.7。纯度>95％UPLCMS(210nm)；(M+1)303。
实施例19
2-(2-甲氧基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作A，由2-(2-甲氧基苯基)丙-2-胺(150mg,0.908mmol)和奎宁环-3-醇得到2-(2-甲氧基苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(60mg,21％)，其为白色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)(旋转异构体)δ7.3(m,1H),7.2(m,1H),6.9(m,2H),5.4(br s,1H),4.6(m,1H),3.8(s,1H),3.1(m,1H),2.4-2.8(m,5H),1.9(s,1H),1.3-1.7(m,10H)。13C NMR(100MHz,CDCl3)(旋转异构体)δ157,155,140,134,129,127,121,111,70,56,55,48,47,29,26,25,20。纯度>99％UPLCMS(210nm)；(M+1)319。
制备L
实施例20
1-(3-氰基奎宁环-3-基)-3-(2-(3-(丙-1-烯-2-基)苯基)丙-2-基)脲
如文献所述那样来制备3-氨基-3-氰基奎宁环(Fernandez,M.A.；Gonzalez,G.；Martinez,M.；Galvez,E.Anales de la Real Academia de Farmacia 1988,54,502)。
向3-氨基-3-氰基奎宁环(100mg,0.661mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液中滴加异氰酸3-异丙烯基-α,α-二甲基苄基酯(0.13mL,0.66mmol)。将反应混合物在室温搅拌18小时，浓缩并进行硅胶快速色谱(19:1CH2Cl2/7M NH3(CH3OH))。得到标题产物，其为白色固体(155mg,67％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.52(s,1H),7.35-7.25(m,3H),5.34(s,1H),5.05(s,1H),2.60-3.41(m,6H),2.25-2.32(m,1H),2.13(s,3H),1.42-2.10(m,4H),1.64(s,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CD3OD)δ157.0,147.9,144.0,141.4,128.1,124.0,123.4,121.9,121.7,111.5,61.0,55.1,50.4,30.9,23.3,22.5,21.0,19.0ppm。纯度>99.9％UPLCMS(210nm)；保留时间0.82分钟；(M+1)353。
制备M
实施例21
1-[(3S)-1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基]-3-{2-[3-(丙-1-烯-2-基)苯基]丙-2-基}脲
在室温向(S)-(-)-3-氨基奎宁环二盐酸盐(120mg,0.603mmol)和三乙胺(168μL,1.21mmol)在THF(2mL)中的混悬液中加入异氰酸3-异丙烯基-α,α-二甲基苄基酯(121mg,0.601mmol)。将反应混合物搅拌18小时，然后用饱和NaHCO3水溶液洗涤。有机相用Na2SO4干燥并浓缩。粗品用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到标题化合物(29mg,47％)，其为灰白色固体。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.51(dt,J＝2.5,1.2Hz,1H),7.41-7.14(m,3H),5.32(dd,J＝1.6,0.8Hz,1H),5.06(s,1H),3.74-3.60(m,1H),3.31-3.29(m,2H),3.19(ddd,J＝13.7,9.5,1.6Hz,1H),2.88-2.50(m,4H),2.37(ddd,J＝14.0,4.9,2.2Hz,1H),2.14(ddd,J＝2.3,1.8,1.0Hz,3H),1.81-1.63(m,4H),1.62(d,J＝6.2Hz,6H),1.55-1.38(m,1H)ppm。13C NMR(100MHz,CD3OD)δ158.4,148.4,144.0,141.3,128.0,124.1,123.3,121.9,111.4,55.7,54.7,46.7,46.4,46.0,29.6,29.4,28.4,26.1,25.1,21.0,19.4ppm。纯度>96％UPLCMS(210nm)；保留时间0.81分钟；(M+1)329.5。
制备N
实施例22
1-(1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)-3-{2-[3-(丙-2-基)苯基]丙-2-基}脲
向3-氨基奎宁环(150mg,1.19mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入异氰酸3-异丙烯基-α,α-二甲基苄基酯。将溶液在室温搅拌30分钟，然后浓缩到硅胶上且用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到灰白色固体(299mg,77％)。
使用通用操作F，由上述异丙烯基脲(150mg,1.19mmol)和氢氧化钯(30mg,20wt.％/碳)得到1-(1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)-3-{2-[3-(丙-2-基)苯基]丙-2-基}脲(116mg,77％)，其为灰白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.28(m,3H),7.16(dt,J＝6.9,1.6Hz,1H),4.93(s,1H),4.26(d,J＝7.5Hz,1H),3.70-3.58(m,1H),3.11(ddd,J＝14.1,9.4,2.3Hz,1H),2.90(七重峰,J＝6.9Hz,1H),2.71-2.52(m,4H),2.31-2.19(m,1H),1.98(dd,J＝14.2,2.9Hz,1H),1.61(d,J＝2.0Hz,6H),1.52-1.43(m,2H),1.23(d,J＝6.9Hz,6H),1.19-1.09(m,1H),0.92-0.79(m,1H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ157.6,150.1,146.1,129.2,125.8,124.1,123.3,57.1,54.9,47.4,47.0,46.6,34.5,30.7,30.5,26.1,26.0,24.3,24.2,20.3ppm。纯度94％UPLCMS(210nm)；保留时间0.87分钟；(M+1)329.3。
实施例23
1-(1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)-3-[1-(萘-1-基)乙基]脲
将3-氨基奎宁环二盐酸盐(150mg,0.753mmol)与THF(3mL)和三乙胺(152mg,1.50mmol)混合，然后加入异氰酸1-(萘-1-基)乙基酯(149mg,0.752mmol)。将混合物在室温搅拌48小时。浓缩反应溶液且用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到标题化合物，其为灰白色固体(46mg,19％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.20-8.05(m,1H),7.85(dd,J＝7.9,1.5Hz,1H),7.75(d,J＝8.1Hz,1H),7.59-7.34(m,4H),5.55(七重峰,1H),5.35-5.19(m,1H),4.84(dd,1H),3.70-3.53(m,1H),3.09(ddd,1H),2.74-2.28(m,4H),2.17(ddd,J＝1.8,4.5,14.1Hz,1H),1.75-1.62(m,1H),1.55(dd,J＝1.8,6.8Hz,3H),1.52-1.06(m,4H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ157.7,140.0,134.1,130.9,129.2,128.3,126.8,126.7,126.7,126.0,125.6,123.2,123.1,122.8,122.7,56.9,56.7,47.4,47.3,46.7,46.4,26.1,25.9,22.7,22.6,20.1,20.0ppm。纯度97％UPLCMS(210nm)；保留时间0.68分钟；(M+1)324.2
实施例24
1-(1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)-3-[2-(3-溴苯基)丙-2-基]脲
使用通用操作C，由奎宁环-3-胺(100mg,0.792mmol)、CDI(128mg,0.789mmol)和2-(3-溴苯基)丙-2-胺(170mg,0.791mmol)得到标题化合物，其为白色固体(166mg,75％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.50(s,1H),7.30(t,J＝7.2Hz,2H),7.15(t,J＝7.9Hz,1H),5.54(d,J＝22.7Hz,1H),5.16(d,J＝29.7Hz,1H),3.60(s,1H),3.14(ddd,J＝13.3,9.4,1.6Hz,1H),2.61(d,J＝52.6Hz,4H),2.18(dd,J＝14.1,2.8Hz,1H),1.66(d,J＝3.0Hz,2H),1.51(d,J＝7.6Hz,6H),1.28(s,3H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ157.1,150.4,130.3,130.0,128.6,124.0,123.0,57.0,54.6,47.6,47.2,46.8,30.5,30.3,26.3,26.2,20.2ppm。纯度100％UPLCMS(210nm)；保留时间0.66分钟；(M+1)367.8。
实施例25
1-(1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)-3-[2-(联苯-3-基)丙-2-基]脲
使用通用操作E，由1-(1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)-3-[2-(3-溴苯基)丙-2-基]脲(111mg,0.301mmol)、苯基硼酸(78.8mg,0.606mmol)和四(三苯基膦)钯(0)得到标题化合物，其为灰白色固体(21mg,11％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.74(s,1H),7.52-7.40(m,8H),4.89(s,1H),4.28(d,J＝7.3Hz,1H),3.75-3.59(m,1H),3.15(ddd,J＝1.9,9.3,13.9Hz,1H),2.46(m,4H),2.05(dd,J＝3.5,14.0Hz,1H),1.68(d,J＝4.7Hz,6H),1.66-0.76(m,5H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ157.4,146.9,142.5,141.1,129.7,129.1,127.8,127.4,126.7,124.8,124.7,57.1,55.1,30.7,30.1,26.1,26.0,20.2ppm。纯度100％UPLCMS(210nm)；保留时间0.78分钟；(M+1)364.0。
实施例26
{2-[3-(丙-2-基)苯基]丙-2-基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作F，由{2-[3-(丙-1-烯-2-基)苯基]丙-2-基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(48.8mg,0.146mmol)和氢氧化钯(30mg,20wt.％/碳)得到标题化合物，其为灰白色固体(16mg,33％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.24(d,J＝5.1Hz,3H),7.10(d,1H),5.12(s,1H),4.63(s,1H),3.54-2.96(m,1H),2.89(s,1H),2.68(s,5H),2.17-1.75(m,2H),1.67(s,6H),1.62-1.30(m,2H),1.24(d,J＝6.9Hz,6H),1.15-0.85(m,1H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ149.1,128.5,124.9,123.1,122.5,55.8,55.6,46.6,34.5,25.6,24.6,24.3,19.7ppm。纯度94％UPLCMS(210nm)；保留时间0.89分钟；(M+1)331.1。
实施例27
[2-(3-溴苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作A，由2-(3-溴苯基)丙-2-胺盐酸盐(2.00g,7.89mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为白色固体(2.23g,76％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.54(s,1H),7.41-7.30(m,2H),7.19(t,J＝7.9Hz,1H),5.11(s,1H),4.68-4.54(m,1H),3.51-2.11(m,6H),2.04-1.68(m,2H),1.63(d,J＝10.2Hz,6H),1.51-0.67(m,3H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ156.0,154.7,150.6,149.7,130.2,130.0,128.4,123.7,72.5,71.6,71.5,55.8,55.1,47.6,46.7,31.2,29.9,29.8,29.5,25.6,24.8,19.7ppm。纯度100％UPLCMS(210nm)；保留时间0.69分钟；(M+1)368.8。
实施例28
[2-(3-环丙基苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(3-溴苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(44.3mg,0.121mmol)、环丙基硼酸(14mg,0.16mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为灰白色固体(21mg,11％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.54(s,1H),7.41-7.30(m,2H),7.19(t,J＝7.9Hz,1H),5.11(s,1H),4.68-4.54(m,1H),3.51-2.11(m,6H),2.04-1.68(m,2H),1.63(d,J＝10.2Hz,6H),1.36(d,J＝9.5Hz,3H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ147.2,144.2,128.6,128.4,125.0,123.7,122.8,122.1,110.0,72.2,71.4,55.9,55.4,47.7,47.3,46.7,33.1,31.6,30.0,29.6,25.6,24.8,19.8,19.3,15.8,9.5ppm。纯度91％UPLCMS(210nm)；保留时间0.75分钟；(M+1)329.0。
实施例29
[2-(联苯-3-基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(3-溴苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(600mg,1.63mmol)、苯基硼酸(398mg,3.27mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为白色固体(379mg,64％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.61(s,1H),7.56(d,J＝7.4Hz,2H),7.50-7.38(m,4H),7.34(m,2H),5.16(s,1H),4.63(s,1H),3.39-2.09(m,6H),1.72(s,6H),2.02-0.73(m,5H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ154.8,147.8,141.6,129.0,129.0,128.6,127.5,125.8,125.0,124.0,71.6,71.3,55.9,55.5,47.6,46.8,31.5,30.2,30.0,29.5,25.6,24.8,19.8ppm。纯度99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.84分钟；(M+1)365.0。
C23H28N2O2·0.29(CHCl3)分析计算值:C,70.02；H,7.14；N,7.01；实测值:C,70.02；H,7.37；N,6.84。
实施例30
{2-[3-(2-甲基丙基)苯基]丙-2-基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯使用通用操作E，由[2-(3-溴苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(75mg,0.20mmol)、2-甲基丙基硼酸(28.1mg,0.276mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为白色固体(50mg,71％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.21(d,J＝4.9Hz,2H),7.16(s,1H),7.00(s,1H),5.17(s,1H),4.60(s,1H),3.35-2.10(m,6H),2.45(d,J＝7.1Hz,2H),1.82(dt,J＝6.8,13.5Hz,1H),2.03-0.94(m,5H),1.65(s,6H),0.89(d,J＝6.6Hz,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ172.6,172.1,170.8,170.2,160.1,160.0,157.8,157.7,140.4,139.8,130.5,130.4,130.0,129.8,129.5,129.3,127.9,127.7,120.8,120.7,120.3,113.9,113.6,113.2,113.0,110.5,110.4,66.6,66.5,56.8,56.3,55.4,55.4,54.0,53.7,51.1,46.6,43.8,43.7,42.0,38.4,37.8,37.7,33.8,33.2,27.4,27.0,25.7,25.5,20.9,20.9ppm。纯度90％UPLCMS(210nm)；保留时间0.89分钟；(M+1)345。
实施例31
[2-(5-溴-2-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作A，由2-(5-溴-2-氟苯基)丙-2-胺盐酸盐(100mg,0.372mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为白色固体(90.3mg,98％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.45(dd,J＝2.3,7.3Hz,1H),7.31(ddd,J＝2.5,4.2,8.6Hz,1H),6.88(dd,J＝8.6,11.9Hz,1H),5.38(s,1H),4.82-4.33(m,1H),3.28-2.28(m,6H),1.68(d,J＝9.0Hz,6H),1.98-1.27(m,5H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ161.1,158.6,131.7,131.6,131.0,131.0,118.6.118.3,116.8,55.8,54.0,47.6,46.7,28.5,25.6,24.8,19.7ppm。纯度100％UPLCMS(210nm)；保留时间0.81分钟；(M+1)386.7。C17H22BrFN2O2·0.37(CHCl3)分析计算值:C,52.20；H,5.66；N,7.14；实测值:C,52.21；H,5.57；N,7.13。
实施例32
[2-(4’-氟联苯-3-基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(3-溴苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(600mg,1.63mmol)、4-氟苯基硼酸(457mg,3.27mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为白色固体(373mg,60％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.56(s,1H),7.52(dd,J＝5.4,8.4Hz,2H),7.42-7.38(m,3H),7.12(m,2H),5.18(s,1H),4.62(s,1H),2.66(m,6H),1.72(s,6H),2.01-0.83(m,5H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ125.0,124.0,123.8,116.0,116.0,71.3,55.9,55.5,47.6,46.7,29.6,25.6,24.8,19.8ppm。纯度98.0％UPLCMS(210nm)；保留时间0.95分钟；(M+1)382.9。C23H27FN2O2·0.37(CHCl3)分析计算值:C,65.86；H,6.47；N,6.57；实测值:C,65.85；H,6.69；N,6.49。
实施例33
[2-(4-氟联苯-3-基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(5-溴-2-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(990mg,2.57mmol)、苯基硼酸(209mg,1.71mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为白色固体(257mg,26％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.58-7.49(m,3H),7.44-7.38(m,3H),7.35-7.29(m,1H),7.08(dd,J＝8.4,12.1Hz,1H),5.30(s,1H),4.75-4.42(m,1H),2.89(d,J＝10.2Hz,6H),1.81-1.66(m,6H),2.04-1.18(m,5H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ161.7,159.3,140.7,137.3,137.3,131.7,131.7,131.0,129.0,127.5,127.3,126.7,117.1,116.9,71.4,55.8,54.3,47.6,46.7,28.6,25.6,24.8,19.8ppm。纯度92.0％UPLCMS(210nm)；保留时间0.95分钟；(M+1)382.9。C23H27FN2O2·0.4(CHCl3)分析计算值:C,65.39；H,6.43；N,6.52；实测值:C,65.39；H,6.51；N,6.42。
实施例34
{2-[2-氟-5-(2-甲基丙基)苯基]丙-2-基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(5-溴-2-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(120mg,0.312mmol)、2-甲基丙基硼酸(79.4mg,0.779mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为白色固体(37mg,33％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.08(dd,J＝2.0,8.2Hz,1H),6.95(d,J＝4.9Hz,1H),6.93-6.85(m,1H),5.23(s,1H),4.72-4.52(m,1H),3.20-2.47(m,6H),2.41(d,J＝7.1Hz,2H),1.89-1.76(m,1H),2.02-1.26(m,5H),1.70(d,J＝7.6Hz,6H),0.88(d,J＝6.6Hz,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ160.4,158.0,137.1,137.1,129.2,129.1,128.1,116.2,116.0,71.2,55.8,54.2,47.6,46.7,45.1,30.5,29.9,28.6,27.0,25.6,24.8,22.5,19.8,19.5ppm。纯度95.0％UPLCMS(210nm)；保留时间1.02分钟；(M+1)363。
实施例35
[2-(5-环丙基-2-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(5-溴-2-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(750mg,0.649mmol)、环丙基硼酸(139mg,1.62mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为白色固体(727mg,86％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.08(d,J＝6.4Hz,1H),6.97-6.78(m,2H),5.19(s,1H),4.65-4.57(m,1H),2.66(s,6H),1.85(tt,J＝5.1,8.4Hz,1H),2.00-1.17(m,5H),1.71(d,J＝8.7Hz,6H),0.92(ddd,J＝4.6,6.3,8.4Hz,2H),0.62(dt,J＝4.7,6.4Hz,2H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ160.2,157.8,139.2,139.2,125.6,125.5,125.4,116.5,116.3,71.3,55.8,54.2,47.6,46.7,29.9,29.6,28.6,25.6,24.8,19.6,15.2,9.1ppm。纯度100％UPLCMS(210nm)；保留时间0.87分钟；(M+1)347.2。C20H27FN2O2·0.07(CHCl3)分析计算值:C,68.00；H,7.70；N,7.90；实测值:C,67.99；H,7.86；N,7.81。
实施例36
[2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作A，由2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-胺盐酸盐(1.00g,3.72mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为白色固体(434mg,30％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.57(s,1H),7.38-7.25(m,1H),7.06(t,J＝8.5Hz,1H),5.62(s,1H),4.86-4.32(m,1H),3.33-2.12(m,6H),1.73(t,J＝7.2Hz,5H),1.61(d,J＝9.6Hz,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ159.1,156.7,154.6,130.4,125.8,125.7,116.4,116.2,109.1,108.9,71.3,55.7,54.7,47.4,46.5,29.9,29.6,25.5,24.6,22.9,19.6ppm。纯度100％UPLCMS(210nm)；保留时间0.79分钟；(M+1)387.8。C17H22BrFN2O2·0.27(CHCl3)分析计算值:C,49.68；H,5.38；N,6.71；实测值:C,49.67；H,5.39；N,6.74。
实施例37
[2-(6-氟联苯-3-基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(750mg,1.95mmol)、苯基硼酸(418mg,4.87mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为白色固体(195mg,29％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.49(s,2H),7.46-7.38(m,3H),7.35(dd,J＝4.3,11.7Hz,2H),7.08(dd,J＝8.6,10.1Hz,1H),5.10(s,1H),4.60(s,1H),3.33-2.10(m,6H),1.67(d,J＝7.9Hz,6H),1.67(m,5H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ159.9,157.4,136.2,129.3,129.0,128.7,127.9,127.6,125.7,125.6,71.0,66.1,55.7,55.1,47.5,46.6,29.9,29.6,25.5,24.5,19.5,15.5ppm。纯度98％UPLCMS(210nm)；保留时间0.95分钟；(M+1)382.9。C23H27FN2O2·0.29(CHCl3)分析计算值:C,67.08；H,6.60；N,6.72；实测值:C,67.09；H,6.95；N,6.37。
实施例38
{2-[4-氟-3-(2-甲基丙基)苯基]丙-2-基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(125mg,0.324mmol)、2-甲基丙基硼酸(66mg,0.65mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为白色固体(27mg,23％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.23-7.11(m,2H),7.04-6.82(m,1H),5.11(s,1H),4.59(s,1H),3.32-2.12(m,6H),2.48(d,J＝7.2Hz,2H),1.86(d,J＝6.7,Hz,1H),2.05-0.96(m,5H),1.62(d,J＝5.8Hz,6H),0.90(d,J＝6.6Hz,6H)ppm。13CNMR(100MHz,CDCl3)δ161.4,159.0,154.7,142.5,128.3,124.0,115.1,114.9,71.2,66.1,55.8,55.0,47.6,46.7,38.7,29.9,29.6,25.6,24.8,22.6,19.7ppm。纯度85％UPLCMS(210nm)；保留时间1.0分钟；(M+1)362.9。
实施例39
[2-(4’,6-二氟联苯-3-基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(125mg,0.324mmol)、4-氟硼酸(64mg,0.46mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为白色固体(76mg,56％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.48(t,2H),7.44-7.29(m,2H),7.21-7.00(m,3H),5.27(s,1H),4.68-4.55(m,1H),3.29-2.10(m,6H),1.67(d,J＝9.4Hz,6H),2.01-0.69(m,5H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ163.9,161.4,159.8,157.3,154.8,143.5,132.2,130.9,127.9,127.8,127.4,125.9,125.8,116.2,116.0,115.7,115.5,71.4,66.1,55.9,47.6,46.7,30.0,39.7,25.6,24.8,19.8ppm。纯度98％UPLCMS(210nm)；保留时间0.96分钟；(M+1)400.9。
实施例40
{2-[4-氟-3-(嘧啶-5-基)苯基]丙-2-基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(150mg,0.389mmol)、嘧啶-5-硼酸(75.9mg,0.613mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(0)得到标题化合物，其为白色固体(49mg,31％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.22(s,1H),8.92(s,2H),7.55-7.41(m,2H),7.19(dd,J＝8.7,9.9Hz,1H),5.37(s,1H),4.72-4.49(m,1H),3.34-2.04(m,6H),2.04-0.98(m,5H),1.66(t,J＝10.9Hz,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ159.9,157.9,157.4,156.6,154.7,130.2,127.85,127.77,126.9,122.0,121.8,116.7,116.5,116.2,71.6,55.9,54.9,47.6,46.7,30.3,29.6,25.6,24.8,19.8ppm。纯度93％UPLCMS(210nm)；保留时间0.63分钟；(M+1)384.9。
实施例41
{2-[4-氟-3-(吡啶-3-基)苯基]丙-2-基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(110mg,0.286mmol)、吡啶-3-硼酸(53mg,0.43mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(0)得到标题化合物，其为白色固体(42mg,39％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.78(s,1H),8.62(d,J＝3.5Hz,1H),7.86(s,1H),7.46(d,J＝7.2Hz,2H),7.38(dd,J＝4.9,7.9Hz,1H),7.15(dd,J＝8.7,9.9Hz,1H),5.32(s,1H),4.69-4.57(m,1H),2.68(s,6H),1.70(d,J＝11.3Hz,6H),2.08-0.94(m,5H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ160.0,157.5,149.9,149.0,136.6,132.1,127.3,126.8,126.7,125.5,125.3,123.5,116.4,116.2,71.5,55.9,55.0,47.6,46.7,30.1,29.66,25.6,24.8,19.7ppm。纯度100％UPLCMS(210nm)；保留时间0.54分钟；(M+1)367.8。
实施例42
{2-[4-氟-3-(呋喃-3-基)苯基]丙-2-基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(110mg,0.296mmol)、呋喃-3-硼酸(47.9mg,0.428mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(0)得到标题化合物，其为白色固体(47mg,44％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.88(ddd,J＝0.9,1.5,2.5Hz,1H),7.53(dd,J＝2.5,7.1Hz,1H),7.50(t,J＝1.7Hz,1H),7.31-7.23(m,1H),7.08(dd,J＝8.6,10.6Hz,1H),6.76(dt,J＝0.8,1.7Hz,1H),5.22(s,1H),4.62(s,1H),3.40-2.11(m,6H),2.02-0.87(m,5H),1.59(dd,J＝11.6,70.3Hz,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ160.0,157.5,150.2,143.9,127.44,127.36,127.0,126.1,123.8,116.6,116.4,71.5,55.9,55.0,47.6,46.7,30.1,29.9,25.6,24.8,19.8ppm。纯度96％UPLCMS(210nm)；保留时间0.85分钟；(M+1)372.9。
实施例43
{2-[4-氟-3-(吡啶-4-基)苯基]丙-2-基}氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由[2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯(130mg,0.291mmol)、吡啶-4-硼酸(54mg,0.43mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(0)得到标题化合物，其为白色固体(46mg,41％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.68(dd,J＝1.6,4.5Hz,2H),7.61-7.39(m,4H),7.15(dd,J＝8.6,10.2Hz,1H),5.31(s,1H),4.69-4.57(m,1H),3.40-2.07(m,6H),1.69(d,J＝10.8Hz,6H),2.06-0.74(m,5H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ160.0,157.6,143.3,141.6,141.5,126.7,126.6,124.9,124.8,120.1,119.9,116.1,115.9,115.4,115.1,109.2,71.4,55.9,55.0,47.6,46.7,29.9,25.6,24.8,19.8ppm。纯度97％UPLCMS(210nm)；保留时间0.82分钟；(M+1)384.6。
实施例44
1-(1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基)-3-(2-苯基丙-2-基)脲
使用通用操作C，由奎宁环-3-胺(102mg,0.6mmol)、CDI(131mg,0.789mmol)和枯基胺(95mg,0.70mmol)得到标题化合物，其为白色固体(21mg,10％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.61-7.47(m,2H),7.44-7.37(m,2H),7.34-7.28(m,1H),4.86(s,1H),4.20(d,J＝7.3Hz,1H),3.71-3.60(m,1H),3.14(ddd,J＝2.3,9.4,14.2Hz,1H),2.79-1.89(m,6H),1.64(d,J＝3.3Hz,6H),1.58-1.10(m,5H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ157.4,146.2,129.3,127.8,125.8,57.1,54.9,47.7,47.1,46.7,30.6,30.5,26.0,20.3ppm。纯度79％UPLCMS(210nm)；保留时间0.61分钟；(M+1)288.2。
制备O
实施例45
{2-[3-(丙-1-烯-2-基)苯基]丙-2-基}氨基甲酸3-氰基-1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
在室温向3-羟基奎宁环-3-甲腈(38mg,0.25mmol)在乙腈/二噁烷(3mL)中的溶液中加入三乙胺(7.0μL,0.05mmol)。将反应混合物搅拌15分钟并滴加1-(2-异氰酸基丙-2-基)-3-(丙-1-烯-2-基)苯(49.0μL,0.248mmol)。将反应混合物在65℃搅拌18小时并浓缩。粗品用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到相应的氨基甲酸酯，其为澄清油状物(57mg,65％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.42-7.20(s,5H),6.61(s,1H),5.11(s,1H),3.29(d,J＝12.0Hz,1H),3.09(d,J＝12.0Hz,1H),2.93(d,J＝4.0Hz,2H),2.79-2.68(m,2H),2.13(s,6H),2.05-2.00(m,2H),1.91(s,3H),1.87(s,2H),1.50-1.37(m,2H)ppm。13CNMR(100MHz,CDCl3)δ135.4,128.7,125.2,124.5,124.0,122.0,112.9,61.2,47.0,46.2,32.4,31.8,29.9,29.4,29.2,26.6,25.7,23.7,22.8,22.2,19.2ppm。纯度>99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.81分钟；(M+1)354。
制备P
实施例46
N-(2-(3-(丙-1-烯-2-基)苯基)丙-2-基)-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
向1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷(350mg,2.77mmol)和1-(2-异氰酸基丙-2-基)-3-(丙-1-烯-2-基)苯(1.09mL,5.55mmol)在氯仿(2mL)中的溶液中加入3-4份分子筛。将反应混合物在室温搅拌18小时，然后浓缩。粗品用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到相应的脲，其为灰白色固体(650mg,36％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.48(s,1H),7.31-7.26(m,3H),5.34(s,1H),5.07(s,1H),4.73(br s,1H),4.03(BR s,1H),3.64(m,2H),3.14-3.03(m,6H),2.15(s,3H),2.06(m,2H),1.72(m,8H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ155.7,148.3,143.8,141.3,128.5,124.1,123.9,122.0,112.5,57.8,55.8,48.1,46.4(2×),41.2,30.2(2×),27.3(2×),22.1ppm。纯度>98％UPLCMS(210nm)；保留时间0.71分钟；(M+1)328。
实施例47
1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酸联苯-2-基酯
使用与实施例46中所述相同的操作，用1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷(113mg,0.896mmol)对氯甲酸联苯-2-基酯(83.0mg,0.358mmol)进行处理，得到标题化合物，其为灰白色固体(17mg,15％)。纯度>99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.75分钟；(M+1)323。
实施例48
N-{2-[3-(丙-2-基)苯基]丙-2-基}-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
使用通用操作F，由N-(2-(3-(丙-1-烯-2-基)苯基)丙-2-基)-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺(100mg,0.305mmol)和钯(20mg,20wt.％/碳)得到标题化合物，其为灰白色固体(60mg,57％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.28-7.21(m,3H),7.11(d,J＝8.0Hz,1H),4.71(s,1H),4.02(s,1H),3.66(t,J＝8.0Hz,2H),3.15(m,7H),2.06(br s,2H),1.77(s,7H),1.26(d,J＝4.0Hz,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ155.8,148.9,148.5,128.5.1,124.7,123.1,122.4,57.8,56.0,48.1,46.4,41.2,34.5,32.2,30.4,30.0,29.9,27.3,24.3,22.9ppm。纯度>91％UPLCMS(210nm)；保留时间0.74分钟；(M+1)330。
制备Q
实施例49
2-(3-(丙-1-烯-2-基)苯基)丙-2-基氨基甲酸-(+/-)-(3S,4S)-1-氮杂二环[2.2.1]庚-3-基酯
在室温向(+/-)-(3S,4S)-1-氮杂二环[2.2.1]庚-3-醇(294mg,2.6mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入NaH[60％,油](107mg,2.67mmol)。将反应混合物搅拌15分钟并滴加1-(2-异氰酸基丙-2-基)-3-(丙-1-烯-2-基)苯(344μL,1.73mmol)。将反应混合物搅拌30分钟且用盐水淬灭。溶液用EtOAc萃取且有机层用Na2SO4干燥并浓缩。粗品用Combiflash(SiO2柱,CHCl3和2N NH3的MeOH溶液)纯化，得到相应的氨基甲酸酯，其为澄清油状物(140mg,26％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.26-7.20(m,3H),7.11(m,1H),5.18(s,1H),5.19(br s,1H),5.01(s,1H),4.81(br s,1H),2.99(br s,1H),2.82(br s,1H),2.70(br s,1H),2.53(br s,2H),2.33(br s,1H),2.02(s,3H),1.76(br s,1H),1.61(br s,6H),1.52(br s,1H),1.37(br s,1H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ147.1,143.7,141.5,128.5,124.1,122.1,112.7,75.6,60.6,59.4,55.4,54.3,53.9,41.5,29.9,29.8,29.4,22.2,21.6ppm。纯度>98％UPLCMS(210nm)；保留时间0.83分钟；(M+1)315。
实施例50
{2-[3-(丙-2-基)苯基]丙-2-基}氨基甲酸(+/-)-(3S,4S)-1-氮杂二环[2.2.1]庚-3-基酯
使用通用操作F，由2-(3-(丙-1-烯-2-基)苯基)丙-2-基氨基甲酸(+/-)-(3S,4S)-1-氮杂二环[2.2.1]庚-3-基酯(110mg,0.350mmol)和钯(20mg,20wt.％/碳)得到标题化合物，其为灰白色固体(36mg,46％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.25-7.19(m,3H),7.11(d,J＝8.0Hz,1H),5.19(s,1H),4.91(s,1H),3.44(t,J＝4.0Hz,2H),3.19(br s,1H),3.02(br s,1H),2.89(m,2H),2.69(br s,1H),2.39(br s,1H),1.91(br s,1H),1.66(br s,7H),1.26(d,J＝4.0Hz,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ128.5(2×),124.8,123.1(2×),122.4(2×),77.4,60.6,59.4,55.5,41.5,34.5,29.9,29.9,29.5,24.3(2×),21.6ppm。纯度>95％UPLCMS(210nm)；保留时间0.88分钟；(M+1)317。
实施例51
N-[2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-基]-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
使用通用操作A，由2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-胺盐酸盐(1.00g,3.72mmol)和1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷得到标题化合物，其为白色固体(265mg,18％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.54-7.52(m,1H),7.31-7.25(m,1H),7.04(t,J＝8.0Hz,1H),4.71(s,1H),3.99(brs,1H),3.59(t,J＝8.0Hz,2H),3.13-2.95(m,6H),2.04-1.97(m,2H),1.77-1.67(m,2H),1.65(s,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ158.9,156.4,155.4,145.9,130.2,125.6,116.2,57.8,54.9,48.3,46.6,46.6,41.6,30.5,30.5,27.6,27.6ppm。纯度>99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.73分钟；(M+1)384。
实施例52
N-[2-(6-氟联苯-3-基)丙-2-基]-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
使用通用操作E，由N-[2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-基]-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺(100mg,0.261mmol)、苯基硼酸(79mg,0.65mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为灰白色固体(66mg,66％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.54(m,2H),7.44-7.40(m,5H),7.08(m,1H),4.78(br s,1H),4.00(br s,1H),3.60(m,2H),3.11-2.92(m,6H),2.00(m,2H),1.67(m,7H),1.26(s,1H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ159.6,155.6,144.6,136.5,129.3,128.6,128.5,127.8,127.5,125.7,125.6,116.1,115.9,57.9,55.3,48.2,46.4,46.4,41.6,30.6,30.5,29.9,27.6ppm。纯度>99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.88分钟；(M+1)382。
实施例53
N-[2-(4’,6-二氟联苯-3-基)丙-2-基]-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
使用通用操作E，由N-[2-(3-溴-4-氟苯基)丙-2-基]-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺(100mg,0.261mmol)、4-氟苯基硼酸(91mg,0.65mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为灰白色固体(64mg,62％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.48(m,2H),7.37-7.30(m,2H),7.10-7.03(m,3H),4.77(s,1H),3.99(br s,1H),3.58(m,2H),3.10-2.90(m,6H),1.98(m,2H),1.71(m,8H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ163.7,161.3,159.5,157.1,155.6,144.6,131.0,130.9,127.4,127.2,125.7,116.1,115.6,57.9,55.2,48.2,46.4,46.4,41.5,30.6,30.6,27.6,27.6ppm。纯度>99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.90分钟；(M+1)400。
实施例54
N-[2-(萘-1-基)丙-2-基]-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
使用通用操作A，由2-(萘-1-基)丙-2-胺盐酸盐(227mg,1.23mmol)和1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷得到标题化合物，其为白色固体(206mg,50％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.63-8.60(m,1H),7.90-7.87(m,1H),7.78(d,J＝8.0Hz,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),),7.47-7.42(m,3H),4.86(s,1H),3.94(br s,1H),3.61(m,2H),3.11-2.88(m,7H),2.01-1.91(m,7H),1.68-1.62(m,2H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ176.2,155.5,142.6,135.3,130.6,129.9,128.8,126.3,125.4,125.2,123.9,57.3,57.1,47.7,45.8,45.8,40.7,29.4,29.4,26.9,26.9ppm。纯度>99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.72分钟；(M+1)338。
实施例55
N-(2-(5-溴-2-氟苯基)丙-2-基)-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
使用通用操作A，由2-(5-溴-2-氟苯基)丙-2-胺盐酸盐(100mg,0.372mmol)和1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷得到标题化合物，其为白色固体(70mg,49％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.48(m,1H),7.28(m,1H),6.86(m,1H),4.85(s,1H),3.98(br s,1H),3.56(m,2H),3.14-2.91(m,7H),1.99(m,2H),1.71(m,7H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ161.1,158.6,155.7,131.3,113.1,118.3,118.0 57.8,54.0,48.1,46.4,46.4,41.5,29.1,29.1,27.5,27.5ppm。纯度>99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.73分钟；(M+1)384。
实施例56
N-[2-(4-氟联苯-3-基)丙-2-基]-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
使用通用操作E，由N-(2-(5-溴-2-氟苯基)丙-2-基)-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺(100mg,0.261mmol)、苯基硼酸(30mg,0.25mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为灰白色固体(27mg,39％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.56-7.51(m,3H),7.41-7.37(m,3H),7.32-7.30(m,1H),7.03(m,1H),4.90(s,1H),4.00(br s,1H),3.59(m,2H),3.11-2.92(m,6H),2.04-1.98(m,2H),1.78(s,6H),1.73-1.67(m,2H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ161.8,159.4,155.9,140.9,137.2,134.6,128.9,127.4,127.3,127.2,127.1,127.0,116.9,57.9,54.4,48.1,46.5,46.5,41.4,29.9,29.3,27.5,27.5ppm。纯度>99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.90分钟；(M+1)400。
实施例57
N-(2-(3-异丙氧基苯基)丙-2-基)-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
使用通用操作A，由2-(3-异丙氧基苯基)丙-2-胺盐酸盐(60mg,0.31mmol)和1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷得到标题化合物，其为白色固体(70mg,57％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.17(t,J＝8.0Hz,1H),6.92-6.87(m,2H),6.69(d,J＝8.0Hz,1H),4.66(br s,1H),4.48(m,1H),3.94(br s,1H),3.56(m,2H),3.08-2.90(m,5H),1.96(m,2H),1.69-1.60(m,7H),1.27(d,J＝8.0Hz,6H),1.17(br s,2H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ158.0,155.7,150.3,129.4,117.1,113.4,113.1,77.5,69.8,55.7,48.2,46.4,46.4,46.3,41.5,30.3,30.0,29.9,27.6,22.3ppm。纯度>99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.75分钟；(M+1)346。
实施例58
N-(联苯-3-基)-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
使用通用操作A，由联苯-3-胺(100mg,0.592mmol)和1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷得到标题化合物，其为灰白色固体(93mg,49％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.60(m,1H),7.56-53(m,2H),7.39-7.21(m,6H),6.67(br s,1H),4.85(s,1H),4.16(br s,1H),3.66-3.61(m,2H),3.07-2.86(m,6H),1.97(m,2H),1.68(m,2H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ154.7,142.0,141.1,139.9,129.3,128.8.128.8,127.5,127.3,127.3,122.0,119.4,119.2,57.5,48.4,46.3,46.3,42.1,27.5,27.5ppm。纯度>96％UPLCMS(210nm)；保留时间0.75分钟；(M+1)333。
实施例59
N-{2-[2-氟-5-(2-甲基丙基)苯基]丙-2-基}-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
使用通用操作E，由N-(2-(5-溴-2-氟苯基)丙-2-基)-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺(100mg,0.261mmol)、异丙基硼酸(66mg,0.65mmol)和二乙酸钯(II)得到标题化合物，其为灰白色固体(27mg,39％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.08(d,J＝8.0Hz,1H),6.93-6.81(m,2H),4.85(s,1H),3.96(br s,1H),3.65(q,J＝8.0Hz,1H),3.55(t,J＝8.0Hz,2H),3.09-2.90(m,5H),2.40(d,J＝4.0Hz,1H),2.01-1.92(m,2H),1.81-1.61(m,8H),1.22-1.17(m,2H),0.87(d,J＝8.0Hz,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ160.5,158.0,155.9,137.0,133.6,128.8,116.0,57.9,54.3,48.1,46.4(2×),45.2,41.4,30.5,29.9,29.2,29.2,27.5,22.6,22.6ppm。纯度>99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.94分钟；(M+1)362。
实施例60
N-(联苯-2-基)-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
使用通用操作A，由1-异氰酸基联苯(50mg,0.26mmol)和1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷得到标题化合物，其为白色固体(55mgmg,65％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(d,J＝8.0Hz,1H),7.45-7.31(m,6H),7.16(d,J＝8.0Hz,1H),7.04(t,J＝8.0Hz,1H),6.47(br s,1H),3.63(br s,1H),3.57(t,J＝8.0Hz,2H),3.00-2.80(m,6H),1.68(m,2H),1.43(m,2H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ154.2,138.9,136.6,131.7,129.7,129.5,129.5,129.3,129.3,128.7,128.1,122.6,120.5,57.6,48.5,46.2,46.2,41.6,29.9,27.3ppm。纯度>99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.64分钟；(M+1)322。
实施例61
N-(萘-1-基)-1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬-4-甲酰胺
使用通用操作A，由1-异氰酸基萘(208mg,1.23mmol)和1,4-二氮杂二环[3.2.2]壬烷得到标题化合物，其为白色固体(150mg,48％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.80-7.72(m,2H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),7.56(d,J＝8.0Hz,1H),7.44-7.35(m,3H),6.65(br s,1H),4.18(br s,1H),3.64(t,J＝8.0Hz,2H),3.09-2.91(m,6H),2.08-1.93(m,2H),1.74-1.66(m,2H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ155.3,134.4,134.3,128.9,128.2,126.2,126.1,126.0,125.1,121.2,121.0,57.6,48.7,46.4,46.4,42.2,27.6,27.6ppm。纯度>99％UPLCMS(210nm)；保留时间0.53分钟；(M+1)296。
实施例62
2-(联苯-4-基)丙-2-基氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯
使用通用操作B，将溴苯甲腈(2.00g,11.0mmol)转化成相应的2-(4-溴苯基)丙-2-胺(1.20g,51％)，其为棕色油状物。
使用通用操作A，由2-(4-溴苯基)丙-2-胺(1.0g,4.7mmol)和(S)-奎宁环-3-醇得到2-(4-溴苯基)丙-2-基氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯(1.0g,58％)，其为棕色油状物。
使用通用操作E，由上述溴化物(200mg,0.540mmol)、苯基硼酸(133mg,1.10mmol)和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(70mg,35％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.60-7.53(m,4H),7.47(d,J＝8.5Hz,2H),7.42(t,J＝7.5Hz,2H),7.33(t,J＝7.5Hz,1H),5.26(br s,1H),4.64(m,1H),3.33-3.15(m,1H),3.10-2.45(m,5H),2.40-1.80(m,2H),1.78-1.58(m,7H),1.55-1.33(m,2H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ154.5,146.1,140.8,139.5,128.7,127.2,127.1,127.1,125.2,70.9,55.5,55.1,47.4,46.4,31.1,29.5,25.3,24.5,19.5ppm。纯度100％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.56分钟；(M+1)365。
实施例63
2-(4-(嘧啶-5-基)苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作E，由2-(4-溴苯基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(200mg,0.540mmol)、嘧啶-5-基硼酸(136mg,1.12mmol)和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(80mg,40％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ9.17(s,1H),8.92(s,2H),7.58-7.51(m,4H),5.34(s,1H),4.61(m,1H),3.20-3.10(m,1H),2.92-2.41(m,5H),2.00-1.76(m,2H),1.72-1.53(m,7H),1.52-1.32(m,2H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ157.4,154.8,154.5,148.2,134.0,132.5,127.0,126.0,71.2,55.6,55.0,47.4,46.3,29.7,29.4,25.4,24.5,19.5ppm。纯度>96％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.34分钟；(M+1)366。
实施例64
1-(联苯-4-基)环丙基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作G，将溴苯甲腈(3.00g,16.5mmol)转化成相应的1-(4-溴苯基)环丙胺(1.80g,51％)，其为黄色油状物。
使用通用操作A，由1-(4-溴苯基)环丙胺(1.0g,4.7mmol)和奎宁环-3-醇得到1-(4-溴苯基)环丙基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(1.3g,75％)，其为白色半固体。
使用通用操作E，由上述氨基甲酸酯(400mg,1.12mmol)、苯基硼酸(267mg,2.22mmol)和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为粘性油状物(100mg,25％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.47(d,J＝7.5Hz,2H),7.43(d,J＝8.0Hz,2H),7.33(t,J＝7.5Hz,2H),7.26-7.15(m,3H),5.93(br s,0.6H),5.89(br s,0.4H),4.67(m,1H),3.20-3.06(m,1H),2.88-2.42(m,5H),1.98-1.08(m,9H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ155.0,141.0,139.7,138.2,127.7,126.1,126.0,124.8,124.1,70.0,54.5,46.3,45.4,34.1,24.3,23.2,18.3,17.0ppm。纯度100％LCMC(214nm和254nm)；保留时间1.52分钟；(M+1)363。
制备R
实施例65
1-(4-(吡啶-2-基)苯基)环丙基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
向1-(4-溴苯基)环丙基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(870mg,2.43mmol)在30mL 1,4-二噁烷中的溶液中加入联硼酸二频那醇酯(1.81g,7.22mmol)、CH3COOK(2.10g,21.4mmol)和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2(97mg,0.12mmol)。将混合物在80℃搅拌18小时。蒸发溶剂且残留物用EtOAc萃取。将萃取物浓缩且通过硅胶柱色谱(用20/1至10/1的EtOAc/甲醇(含有1％TEA)洗脱)来纯化，得到1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)环丙基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(260mg,33％)，其为棕色半固体。
使用通用操作E，由上述硼酸酯(260mg,0.632mmol)、2-溴吡啶(149mg,0.941mmol)和Pd2(dba)3(32.0mg,0.036mmol)得到标题化合物，其为白色半固体(70mg,31％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.58(d,J＝4.5Hz,1H),7.82(d,J＝7.0Hz,2H),7.66-7.57(m,2H),7.23-7.15(m,2H),7.11(t,J＝5.0Hz,1H),6.16(br s,0.6H),5.97(br s,0.4H),4.63(m,1H),3.17-3.02(m,1H),2.90-2.38(m,5H),1.90-1.10(m,9H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ156.1,155.2,148.6,143.0,136.3,135.7,125.9,124.5,120.9,119.4,70.3,54.6,46.3,45.4,34.1,24.4,23.5,18.5,17.3ppm。纯度100％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.18(M+H)364。
实施例66
1-(4-(嘧啶-5-基)苯基)环丙基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作E，由上述1-(4-溴苯基)环丙基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(400mg,1.10mmol)、嘧啶-5-基硼酸(204mg,1.64mmol)和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为粘性油状物(110mg,28％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(s,1H),8.84(s,2H),7.44(d,J＝8.5Hz,2H),7.33-7.25(m,2H),6.02(br s,0.7H),6.02(br s,0.3H),4.65(m,1H),3.20-3.05(m,1H),2.86-2.40(m,5H),1.98-1.12(m,9H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ156.3,155.1,153.7,143.3,132.9,131.1,126.0,125.3,70.5,54.7,46.4,45.4,34.1,24.4,23.5,18.5,17.5ppm。纯度100％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.29分钟；(M+1)365。
实施例67
1-(4’-氟联苯-4-基)环丙基氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯
使用通用操作E，由1-(4-溴苯基)环丙基氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯、4-氟-苯基硼酸和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(45％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.06-7.83(d,1H),7.69-7.66(m,2H),7.59-7.55(m,2H),7.29-7.22(m,4H),4.56-4.54(m,1H),3.13-2.32(m,6H),1.91-1.19(m,9H)ppm。13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ163.2,161.2,156.4,143.7,136.9,128.9,128.8,126.8,125.6,116.2,116.0,70.7,55.8,47.4,46.4,34.8,25.7,24.6,19.6,18.7,18.6ppm。纯度>97％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.96分钟；(M+1)381.2。
实施例68
1-(4’-氟联苯-4-基)环丙基氨基甲酸1-氮杂二环[3.2.2]壬-4-基酯
使用通用操作E，由1-(4-溴苯基)-环丙基氨基甲酸1-氮杂二环[3.2.2]壬-4-基酯、4-氟-苯基硼酸和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(27％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.52-7.48(m,4H),7.33-7.28(m,2H),7.14-7.11(t,J＝8.5Hz,2H),5.47-5.33(d,1H),4.93-4.89(m,1H),3.15-2.75(m,6H),2.10-0.88(m,11H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ163.4,161.4,155.7,142.1,138.3,136.9,128.5,128.5,127.0,125.9,125.4,115.7,115.5,78.8,51.7,48.3,44.9,35.2,33.7,30.6,29.7,24.8,22.2,18.1ppm。纯度>99％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.56分钟；(M+1)395.2。
实施例69
1-(4-(5-氟吡啶-2-基)苯基)环丙基氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯
使用通用操作E，由(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)环丙基)氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯、2-溴-5-氟吡啶和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(34％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.51-8.52(d,J＝3.5Hz,1H),7.87-7.85(d,J＝10.5Hz,2H),7.69-7.67(m,1H),7.47-7.42(m,1H),7.32-7.27(m,2H),5.79-5.66(d,1H),4.73-4.71(t,J＝5.0Hz,1H),3.22-3.19(m,1H),2.87-2.61(m,5H),2.01-1.22(m,9H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ160.8,157.4,156.1,153.5,144.4,137.8,136.3,126.7,125.7,124.9,123.6,121.1,71.6,55.7,47.4,46.5,35.3,29.7,25.4,24.8,19.4,18.2ppm。纯度>99％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.41分钟；(M+1)382.2。
制备S
实施例70
(S)-1-(1-(4’-氟联苯-4-基)环丙基)-3-(3-甲基奎宁环-3-基)脲
在配备有两个压力均衡加料漏斗和与气体流量计连接的橡胶管的三颈圆底烧瓶中，将1-(4’-氟-[1,1’-联苯]-4-基)环丙胺(1.50g,7.07mmol)在20mL水和1mL浓HCl的混合物中的混悬液搅拌10分钟。加入甲苯(10mL)且将溶液保持在剧烈搅拌下并冷却至0℃。历时1小时滴加三光气(3.10g,10.6mmol)在20mL甲苯和40mL饱和NaHCO3水溶液中的溶液。将反应混合物再搅拌30分钟。终止搅拌，然后分离出上层甲苯，干燥(Na2SO4)并浓缩，得到相应的异氰酸酯，其无需进一步纯化即用于下一步。
向上述异氰酸酯(134mg,0.571mmol)在15mL甲苯中的溶液中加入(S)-3-甲基奎宁环-3-胺(80mg,0.57mmol)。将所得混合物加热回流过夜，冷却至环境温度并真空浓缩，得到残留物，其通过Combiflash反相色谱(0-20％MeCN的水溶液)来纯化，得到标题化合物，其为白色固体(73mg,33％)。1H NMR(500MHz CDCl3)δ7.52-7.48(m,4H),7.27-7.25(d,J＝10.0Hz,2H),7.13-7.09(m,2H),5.39(s,1H),4.78(s,1H),2.95-2.71(m,5H),2.65-2.64(m,1H),1.94-1.93(m,1H),1.69-1.68(m,1H),1.46-1.38(m,5H),1.36-1.33(m,4H),1.26-1.23(m,1H)ppm。13C NMR(125MHz CDCl3)δ163.5,161.5,157.5,141.5,138.5,136.6,136.6,128.5,128.4,127.2,124.7,115.8,115.6,63.8,52.3,46.6,46.3,34.9,31.0,25.0,23.2,22.5,20.2,20.0ppm。纯度>99％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.51分钟；(M+H+)394.2。
实施例71
[1-(2’,4’-二氟联苯-4-基)环丙基]氨基甲酸(S)-1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由1-(4-溴苯基)环丙基氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯(0.446g,1.22mmol)、2,4-二氟苯基硼酸(0.386g,2.44mmol)和Pd(OAc)2(0.015g,0.067mmol)得到标题化合物，其为褐色固体(0.111g,23％)。1H NMR(CDCl3)δ7.43(dd,J＝8.4,1.6Hz,2H),7.40-7.33(m,1H),7.31(d,J＝7.7Hz,2H),6.99-6.81(m,2H),5.54(d,J＝48.0Hz,1H),4.82-4.65(m,1H),3.30-3.07(m,1H),2.98-2.44(m,5H),1.97(d,J＝32.7Hz,1H),1.83(d,J＝10.3Hz,1H),1.64(s,1H),1.52(s,1H),1.39(s,1H),1.31(d,J＝6.8Hz,4H)ppm。13C NMR(主要的旋转异构体)(CDCl3)δ162.2(dd,J＝12.8,249.1Hz),159.8(dd,J＝11.8,251.0Hz),156.9,156.0,142.6,133.1,131.3(m),128.9,125.6,124.9,111.5(dd,J＝3.9,21.2Hz)104.4(dd,J＝25.2,29.4Hz),72.1,71.6,55.7,47.4,46.5,35.7,35.3,25.5,24.6,24.4,19.5,18.1ppm。纯度LCMS>99.3％(214nm和254nm)；保留时间0.90分钟；(M+1)399.0。
实施例72
[1-(4’-甲氧基联苯-4-基)环丙基]氨基甲酸1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作E，由1-(4-溴苯基)环丙基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(0.485g,1.33mmol)、4-甲氧基苯基硼酸(0.404g,2.66mmol)和Pd(OAc)2(0.016g,0.071mmol)得到标题化合物，其为灰色固体(0.337mg,65％)。1H NMR(CDCl3)δ7.48(dd,J＝8.6,5.5Hz,4H),7.29(d,J＝7.6Hz,2H),6.96(d,J＝8.8Hz,2H),5.58(d,J＝48.7Hz,1H),4.83-4.63(m,1H),3.84(s,3H),3.20(dd,J＝24.0,15.5Hz,1H),2.97-2.42(m,5H),1.97(d,J＝30.9Hz,1H),1.81(s,1H),1.75-1.33(m,3H),1.28(d,J＝6.8Hz,4H)ppm。13C NMR(主要的旋转异构体)(CDCl3)δ159.1,156.0,141.4,139.0,133.4,128.0,126.7,125.9,114.2,71.5,55.7,55.3,47.4,46.5,35.3,25.5,24.6,19.6,17.8ppm。纯度LCMS>97.1％(214nm和254nm)；保留时间0.88分钟；(M+1)393.4。
制备T
实施例73
2-(5-(4-氟苯基)噻吩-3-基)丙-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
历时20分钟向搅拌并冷却的(0℃)5-溴噻吩-3-甲酸乙酯(13.30g,56.57mmol)在THF(100mL)中的溶液中滴加甲基溴化镁在乙醚中的溶液[3.0M](55.0mL,165mmol)。2小时后，浓缩反应溶液。将残留物吸收在NH4Cl水溶液(200mL)中且用乙酸乙酯萃取(2×100mL)。将合并的萃取物干燥(Na2SO4)并浓缩。所得琥珀色油状物通过快速色谱(使用己烷/乙酸乙酯梯度)来纯化，得到2-(5-溴噻吩-3-基)丙-2-醇，其为浅琥珀色油状物(8.05g,64％)。
向搅拌的2-(5-溴噻吩-3-基)丙-2-醇(8.03g,36.3mmol)在二氯甲烷(80mL)中的溶液中先后加入叠氮化钠(7.08g,109mmol)和三氟乙酸(8.0mL；历时5-6分钟滴加)。将变稠的混悬液搅拌1.5小时，然后用水(350mL)稀释且用乙酸乙酯(1×200mL)萃取。有机层用NaHCO3水溶液(1×250mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，得到粗叠氮产物。向搅拌的该物质在THF(160mL)中的溶液中先后加入水(11mL)和三苯基膦(23.8g,90.7mmol)。将反应混合物搅拌2天，然后浓缩。将所得残留物溶于乙酸乙酯(250mL)且用1N HCl水溶液(4×75mL)萃取。合并的萃取物用浓NH4OH碱化且用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。然后将这些萃取物干燥(Na2SO4)并浓缩。所得琥珀色油状物通过快速色谱(使用二氯甲烷/甲醇/氨水梯度)来纯化，得到2-(5-溴噻吩-3-基)丙-2-胺和三苯基氧化膦的混合物(比例为约70/30)，其为粘性琥珀色油状物(1.32g,17％)。
向搅拌的奎宁环-3-醇(3.00g,23.6mmol)在THF(100mL)中的溶液中加入氯甲酸4-硝基苯基酯(5.94g,29.5)。搅拌4小时后，滤出析出物，用THF冲洗并在玻璃料上真空风干。将滤饼溶于乙酸乙酯(150mL)且用NaHCO3水溶液(1×150mL)和水(2×150mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩，得到粗碳酸4-硝基苯基酯·奎宁环-3-基酯产物，其无需纯化即用于下一步。
向搅拌的2-(5-溴噻吩-3-基)丙-2-胺(0.366g,1.66mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入碳酸4-硝基苯基酯·奎宁环-3-基酯(0.571g,1.95mmol)和几粒4-(二甲基氨基)吡啶。将混合物回流过夜，浓缩并在乙酸乙酯(50mL)和NaHCO3水溶液(50mL)之间分配。有机层再用NaHCO3水溶液(1×50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。所得不纯净的黄色胶状物通过快速色谱(使用氯仿/甲醇/氨水梯度)来纯化，得到(1-(5-溴噻吩-3-基)环丙基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯，其为灰白色固体(0.305g,49％)。
使用通用操作E，由(1-(5-溴噻吩-3-基)环丙基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯(0.227g,0.742mmol)、4-氟苯基硼酸(0.208g,1.49mmol)、三环己基膦(0.021g,0.075mmol)、磷酸钾(0.866,4.08mmol)和二乙酸钯(8.0mg,36μmol)得到标题化合物，其为灰色固体(0.142g,49％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.60-7.45(m,2H),7.24-7.19(m,1H),7.10-6.97(m,3H),5.23(br s,1H),4.72-4.61(m,1H),3.30-3.04(m,1H),3.03-2.25(m,5H),2.09-1.02(m,11H)ppm。13C NMR(400MHz,CDCl3)δ162.3(d,J＝247.1Hz),154.5,149.8,143.6,130.7,127.4(d,J＝8.1Hz),121.8,118.9,115.8(d,J＝21.6Hz),70.8,55.5,53.4,47.3,46.4,29.0,25.4,24.4,19.4ppm。纯度95.8％UPLCMS(210nm和254nm)；保留时间0.90分钟；(M+1)389。
制备U
实施例74
2-(3-(4-氟苯基)异噻唑-5-基)丙-2-基氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯
向搅拌的2-(3-(4-氟苯基)异噻唑-5-基)丙-2-胺(1.21g,5.12mmol)在甲苯中的溶液中加入光气在甲苯中的溶液[～1.9M](10.8mL,20.5mmol)。将反应混合物加热回流两小时，然后浓缩。将残留物与甲苯(2×15mL)共蒸发，得到粗异氰酸酯中间体，其为金色油状物。将该物质吸收在甲苯(10mL)中且用(S)-奎宁环-3-醇(0.749g,5.89mmol)处理。将反应混合物加热回流过夜并浓缩。残留物通过快速色谱(使用氯仿/甲醇/氨水梯度)来纯化，得到标题化合物，其为白色固体(0.971g,49％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.09-8.00(m,2H),7.87(br s,1H),7.75(s,1H),7.35-7.25(m,2H),4.54-4.45(m,1H),3.14-2.92(m,1H),2.87-2.17(m,5H),1.98-0.98(m,11H)ppm。13C NMR(400MHz,DMSO-d6)δ180.1,165.6,162.6(d,J＝246.4Hz),154.7,131.2(d,J＝3.0Hz),128.7(d,J＝8.4Hz),118.2,115.7(d,J＝21.8Hz),70.6,55.3,52.8,46.9,45.9,29.9,25.2,24.2,19.2ppm。纯度100％UPLCMS(210nm和254nm)；保留时间0.82分钟；(M+1)390。
制备V
实施例75
2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯
向搅拌的4-氟硫代苯甲酰胺(8.94g,57.6mmol)在乙醇(70mL)中的溶液中加入4-氯乙酰乙酸乙酯(7.8mL,58mmol)。将反应混合物加热回流4小时，再用4-氯乙酰乙酸乙酯(1.0mL,7.4mmol)的等分液处理并再回流3.5小时。然后浓缩反应混合物且将残留物在乙酸乙酯(200mL)和NaHCO3水溶液(200mL)之间分配。将有机层与水层的反萃取物(乙酸乙酯,1×75mL)合并，干燥(Na2SO4)并浓缩。所得琥珀色油状物通过快速色谱(使用己烷/乙酸乙酯梯度)来纯化，得到2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)乙酸乙酯，其为低熔点近无色固体(13.58g,89％)。
向搅拌的2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)乙酸乙酯(6.28g,23.7mmol)在DMF(50mL)中的溶液中加入氢化钠[在矿物油中的60％分散液](2.84g,71.0mmol)。将起泡的混合物搅拌15分钟，然后在冰浴中冷却并加入碘甲烷(4.4mL,71mmol)。将反应混合物搅拌过夜，其中使冷却浴缓慢温热至室温。然后将混合物浓缩且将残留物在乙酸乙酯(80mL)和水(200mL)之间分配。有机层用第二份水(1×200mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。所得琥珀色油状物通过快速色谱(使用己烷/乙酸乙酯梯度)来纯化，得到2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)-2-甲基丙酸乙酯，其为无色油状物(4.57g,66％)。
向搅拌的2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)-2-甲基丙酸乙酯(4.56g,15.5mmol)在1:1:1THF/乙醇/水(45mL)中的溶液中加入氢氧化锂一水合物(2.93g,69.8mmol)。将反应混合物搅拌过夜，浓缩并重新溶于水(175mL)。溶液用乙醚(1×100mL)洗涤，通过加入1.0N HCl(80mL)来酸化且用乙酸乙酯(2×70mL)萃取。将合并的萃取物干燥(Na2SO4)并浓缩，得到2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)-2-甲基丙酸，其为白色固体(4.04g,98％)。该物质无需纯化即用于下一步。
向搅拌并冷却的(0℃)2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)-2-甲基丙酸(4.02g,15.2mmol)在THF(100mL)中的溶液中先后加入三乙胺(4.2mL,30mmol)和氯甲酸异丁酯(3.0mL,23mmol)。将反应混合物再冷搅拌1小时，然后加入叠氮化钠(1.98g,30.5mmol)在水(20mL)中的溶液。将反应混合物搅拌过夜，其中使冷却浴缓慢温热至室温。然后混合物用水(100mL)稀释且用乙酸乙酯(2×60mL)萃取。合并的萃取物用NaHCO3水溶液(1×150mL)和盐水(1×100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。与甲苯(2×50mL)共蒸发后，将所得白色固体吸收在甲苯(100mL)中并回流4小时。然后加入(S)-奎宁环-3-醇(3.87g,30.4mmol)并继续回流过夜。浓缩反应混合物且将残留物在乙酸乙酯(100mL)和NaHCO3水溶液(150mL)之间分配。有机层用水(1×150mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。所得灰白色固体通过快速色谱(使用氯仿/甲醇/氨水梯度)来纯化，得到标题化合物，其为白色固体(4.34g,73％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.96-7.88(m,2H),7.16-7.04(m,3H),5.55(br s,1H),4.69-4.62(m,1H),3.24-3.11(m,1H),3.00-2.50(m,5H),2.01-1.26(m,11H)ppm。13C NMR(400MHz,CDCl3)δ166.4,165.1,163.8(d,J＝250.3Hz),162.9,155.0,130.1(d,J＝3.3Hz),128.4(d,J＝8.5Hz),115.9(d,J＝22.3Hz),112.5,71.2,55.7,54.2,47.5,46.5,28.0,25.5,24.7,19.6ppm。纯度100％UPLCMS(210nm和254nm)；保留时间0.83分钟；(M+1)390。
制备W
实施例76
2-(4-(4-氟苯基)噻唑-2-基)丙-2-基氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯
向搅拌的3-氨基-3-硫代丙酸乙酯(20.00g,135.9mmol)在乙醇(120mL)中的溶液中加入2-溴-4’-氟苯乙酮(29.49g,135.9mmol)。将混合物回流1小时，浓缩并在乙酸乙酯(300mL)和NaHCO3水溶液(400mL)之间分配。将有机层与水层的反萃取物(乙酸乙酯,1×100mL)合并，干燥(Na2SO4)并浓缩。所得浅棕色固体通过快速色谱(使用己烷/乙酸乙酯梯度)来纯化，得到2-(4-(4-氟苯基)噻唑-2-基)乙酸乙酯，其为灰白色固体(29.92g,83％)。
历时15分钟向搅拌并冷却的(-78℃)2-(4-(4-氟苯基)噻唑-2-基)乙酸乙酯(10.00g,37.69mmol)在THF(250mL)中的溶液中滴加叔丁醇钾在THF中的溶液[1.0M](136mL,136mmol)，然后加入18-冠-6(1.6mL,7.5mmol)。在-78℃再保持30分钟后，历时5分钟滴加碘甲烷(8.5mL)。将反应混合物再冷搅拌2小时，然后倒入水(450mL)中且用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。合并的萃取物用盐水(1×200mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。所得棕色油状物通过快速色谱(使用己烷/乙酸乙酯梯度)来纯化，得到2-(4-(4-氟苯基)噻唑-2-基)-2-甲基丙酸乙酯，其为浅琥珀色油状物(8.64g,78％)。
向搅拌的2-(4-(4-氟苯基)噻唑-2-基)-2-甲基丙酸乙酯(0.900g,3.07mmol)在1:1:1THF/乙醇/水(15mL)中的溶液中加入氢氧化锂一水合物(0.451g,10.7mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物浓缩并重新溶于水(80mL)。溶液用乙醚(1×50mL)洗涤，通过加入1N HCl(15mL)来酸化且用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的萃取物干燥(Na2SO4)并浓缩，得到2-(4-(4-氟苯基)噻唑-2-基)-2-甲基丙酸，其为浅金色固体(0.808g,99％)。
向搅拌并冷却的(0℃)2-(4-(4-氟苯基)噻唑-2-基)-2-甲基丙酸(0.784g,2.96mmol)在THF(25mL)中的溶液中先后加入三乙胺(0.82mL,5.9mmol)和氯甲酸异丁酯(0.58mL,4.4mmol)。将反应混合物再冷搅拌1小时，然后加入叠氮化钠(0.385g,5.92mmol)在水(7mL)中的溶液。将反应混合物搅拌过夜，其中使冷却浴缓慢温热至室温。然后混合物用水(100mL)稀释且用乙酸乙酯(2×60mL)萃取。合并的萃取物用NaHCO3水溶液(1×150mL)和盐水(1×100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。与甲苯(2×30mL)共蒸发后，将所得灰白色固体吸收在甲苯(250mL)中并回流4小时。然后加入(S)-奎宁环-3-醇(0.753g,5.92mmol)并继续回流3小时。将反应混合物浓缩且残留物通过快速色谱(使用氯仿/甲醇/氨水梯度)来纯化，得到标题化合物，其为白色固体(0.793g,69％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.90-7.81(m,2H),7.32(s,1H),7.14-7.05(m,2H),5.76(br s,1H),4.72-4.65(m,1H),3.26-3.10(m,1H),3.03-2.37(m,5H),2.05-1.23(m,11H)ppm。13C NMR(400MHz,CDCl3)δ177.6,162.6(d,J＝248.4Hz),154.8,153.6,130.8(d,J＝3.2Hz),128.1(d,J＝8.1Hz),115.9(d,J＝21.7Hz),112.2,71.6,55.7,47.4,46.5,29.1,25.4,24.7,19.6ppm。纯度100％UPLCMS(210nm和254nm)；保留时间0.82分钟；(M+1)390。
实施例77
1-(4-(苄基氧基)苯基)环丙基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
在100℃将4-氰基苯酚(5.0g,42mmol)、苄基溴(8.6g,50mmol)和碳酸钾(11.6g,84.0mmol)在DMF(40mL)中的混合物搅拌3小时。滤出析出物且滤液用EtOAc稀释且用水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩。所得粗产物通过硅胶柱色谱(用20/1至5/1的石油醚/EtOAc洗脱)来纯化，得到4-(苄基氧基)苯甲腈，其为白色固体(8.1g,92％)。
使用通用操作G，将4-(苄基氧基)苯甲腈(6.00g,28.7mmol)转化成相应的1-(4-(苄基氧基)苯基)环丙胺，其为黄色固体(1.8g,26％)。
使用通用操作A，由1-(4-(苄基氧基)苯基)环丙胺(600mg,2.51mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为粘性油状物(170mg,17％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.34(d,J＝7.0Hz,2H),7.30(t,J＝7.0Hz,2H),7.25(t,J＝7.0Hz,1H),7.16(d,J＝8.5Hz,1H),7.07(d,J＝7.0Hz,1H),6.83(d,J＝8.0Hz,2H),5.50(br s,0.6H),5.40(br s,0.4H),4.96(s,2H),4.64(m,1H),3.20-3.15(m,1H),2.88-2.50(m,5H),1.95-1.05(m,9H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ156.6,154.8,136.0,134.2,127.6,126.9,126.4,125.4,113.7,70.0,69.0,54.5,46.3,45.4,34.2,24.3,23.3,18.3,15.8ppm。纯度>90％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.57分钟；(M+1)393。
实施例78
联苯-3-基甲基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
历时2小时向搅拌并冷却的(0℃)三光气(0.80g,2.7mmol)在THF(20mL)中的溶液中滴加(3-溴苯基)甲胺(1.0g,5.4mmol)和三乙胺(1.08g,10.7mmol)在THF(30mL)中的混合物。加完后，将混合物回流1小时，然后冷却至室温。加入奎宁环-3-醇(1.40g,10.7mmol)且将混合物回流18小时。真空除去溶剂且将残留物溶于EtOAc，用水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。粗残留物通过硅胶柱色谱(用EtOAc/甲醇＝10/1洗脱)来纯化，得到3-溴苄基氨基甲酸奎宁环-3-基酯，其为无色液体(0.68g,37％)。
使用通用操作E，由3-溴苄基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(237mg,0.700mmol)、苯基硼酸(171mg,1.4mmol)和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为粘性半固体(110mg,47％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.57(d,J＝7.5Hz,2H),7.50(m,2H),7.62-7.38(m,3H),7.35(t,J＝7.5Hz,1H),7.28(d,J＝8.0Hz,1H),5.32-5.17(m,1H),7.78(m,1H),4.42(d,J＝6.0Hz,2H),3.26(m,1H),2.95-2.65(m,5H),2.05(m,1H),1.84(m,1H),1.70(m,1H),1.58(m,1H),1.42(m,1H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ155.2,140.7,139.8,138.0,128.1,127.8,126.4,126.1,125.5,125.4,125.3,70.1,54.4,46.2,45.3,44.1,24.3,23.1,18.2ppm。纯度>98％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.44分钟；(M+1)337。
实施例79
3-(嘧啶-5-基)苄基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作E，由3-溴苄基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(203mg,0.600mmol)、嘧啶-5-基硼酸(149mg,1.2mmol)和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为粘性半固体(110mg,54％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ9.20(s,1H),8.94(s,2H),7.51(m,3H),7.40(m,1H),5.62(m,1H),4.81(m,1H),4.50-4.40(m,2H),3.30(m,1H),2.97-2.65(m,5H),2.12(m,1H),1.92-1.82(m,1H),1.79-1.69(m,1H),1.65-1.56(m,1H),1.50-1.42(m,1H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ157.6,156.2,154.9,140.1,134.7,134.1,129.8,128.2,126.2,70.9,55.2,47.2,46.2,44.8,25.2,23.8,19.0ppm。纯度>95％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.22分钟；(M+1)339。
实施例80
3-(苄基氧基)苄基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
将2-(3-羟基苯基)乙酸(0.6g,3.95mmol)、苄基溴(0.710g,4.14mmol)、氢氧化钾(0.550g,9.87mmol)和KI(13mg,0.079mmol)在THF(20mL)中的混合物回流18小时。除去溶剂且将残留物溶于50mL水且用乙醚萃取。水层用1N HCl水溶液酸化且将所形成的白色析出物滤出，得到2-(3-(苄基氧基)苯基)乙酸，其为灰色固体(0.87g,91％)。
使用通用操作H，由2-(3-(苄基氧基)苯基)乙酸(242mg,1.00mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为粘性半固体(200mg,55％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.42(d,J＝7.5Hz,2H),7.38(t,J＝7.5Hz,2H),7.32(t,J＝7.0Hz,1H),7.24(d,J＝7.5Hz,1H),6.92(s,1H),6.88(d,J＝7.0Hz,2H),5.30(m,1H),5.05(s,2H),4.75(m,1H),4.32(d,J＝6.0Hz,2H),3.23(m,1H),2.93-2.60(m,5H),2.08-1.96(m,1H),1.88-1.75(m,1H),1.72-1.62(m,1H),1.60-1.50(m,1H),1.42-1.34(m,1H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ159.1,156.3,140.2,136.8,129.7,128.6,128.0,127.5,120.0,114.1,113.6,71.3,70.0,55.5,47.3,46.4,45.0,25.4,24.3,19.3ppm。纯度>95％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.51分钟；(M+1)367。
实施例81
4-苯氧基苄基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作H，由2-(3-苯氧基苯基)乙酸(228mg,1.00mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为粘性半固体(70mg,20％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.29-7.18(m,3H),7.03(t,J＝7.5Hz,1H),6.96-6.90(m,3H),6.86(s,1H),6.82(d,J＝8.5Hz,1H),5.40-5.15(m,1H),4.70(m,1H),4.25(d,J＝6.0Hz,2H),3.18(m,1H),2.90-2.60(m,5H),2.03-1.92(m,1H),1.82-1.74(m,1H),1.68-1.60(m,1H),1.57-1.45(m,1H),1.40-1.32(m,1H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ156.6,155.9,155.1,139.6,129.0,128.8,122.4,121.1,118.0,116.7,69.7,54.1,46.1,45.2,43.7,24.2,22.7,18.0ppm。纯度100％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.50分钟；(M+1)353。
实施例82
3-异丙氧基苄基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
将2-(3-羟基苯基)乙酸(0.800g,5.26mmol)、2-溴丙烷(0.971g,7.89mmol)、氢氧化钾(0.740g,13.2mmol)和KI(18mg,0.11mmol)在20mL EtOH中的混合物回流18小时。除去溶剂且将残留物溶于50mL水且用乙醚萃取。水层用1N HCl水溶液酸化且用EtOAc萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩，得到残留物，其通过硅胶柱色谱(石油醚/EtOAc 4:1)来纯化，得到2-(3-(苄基氧基)苯基)乙酸，其为白色固体(0.45g,44％)。
使用通用操作H，由2-(3-异丙氧基苯基)乙酸(291mg,1.50mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为粘性半固体(120mg,25％)。1H-NMR(500MHz,CDCl3)δ7.23(t,J＝7.5Hz,1H),6.86-6.77(m,3H),5.16-5.00(m,1H),4.78(m,1H),4.55(m,1H),4.32(d,J＝5.0Hz,2H),3.26(m,1H),2.95-2.70(m,5H),2.10-2.05(m,1H),1.90-1.80(m,1H),1.75-1.65(m,1H),1.63-1.53(m,1H),1.47-1.37(m,1H),1.33(d,J＝5.5Hz,6H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ158.1,156.2,140.1,129.7,119.6,115.2,114.6,71.0,69.8,55.3,47.2,46.3,45.0,25.3,24.1,22.0,19.2ppm。纯度>90％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.42分钟；(M+1)319。
实施例83
3-异丁氧基苄基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
将2-(3-羟基苯基)乙酸(1.0g,6.6mmol)、1-溴-2-甲基丙烷(1.08g,7.91mmol)、氢氧化钾(0.920g,16.4mmol)和KI(22mg,0.13mmol)在EtOH(20mL)中的混合物回流18小时。除去溶剂且将残留物溶于50mL水且用乙醚萃取。水层用1N HCl水溶液酸化且用EtOAc萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩，得到残留物，其通过硅胶柱色谱(石油醚/EtOAc 4:1)来纯化，得到2-(3-(苄基氧基)苯基)乙酸，其为白色固体(0.42g,31％)。
使用通用操作H，由2-(3-异丁氧基苯基)乙酸(208mg,1.00mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为粘性半固体(130mg,39％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.23(t,J＝7.5Hz,1H),6.86-6.76(m,3H),5.35-5.10(m,1H),4.77(m,1H),4.31(d,J＝5.5Hz,2H),3.69(d,J＝6.5Hz,2H),3.26(m,1H),2.95-2.70(m,5H),2.10-2.00(m,2H),1.88-1.80(m,1H),1.75-1.63(m,1H),1.62-1.52(m,1H),1.45-1.36(m,1H),1.01(d,J＝6.5Hz,6H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ159.6,156.1,139.9,129.7,119.6,113.9,113.4,74.4,70.9,55.3,47.2,46.3,45.1,28.3,25.3,23.9,19.3,19.1ppm。纯度>95％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.50分钟；(M+1)333。
实施例84
3-(环丙基甲氧基)苄基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
将2-(3-羟基苯基)乙酸(1.0g,6.6mmol)、(溴甲基)环丙烷(0.97g,7.2mmol)、氢氧化钾(0.920g,16.4mmol)和KI(22mg,0.13mmol)在EtOH(20mL)中的混合物回流18小时。真空除去溶剂且将残留物溶于50mL水且用乙醚萃取。水层用1N HCl水溶液酸化且用EtOAc萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩，得到残留物，其通过硅胶柱色谱(石油醚/EtOAc 4:1)来纯化，得到2-(3-(环丙基甲氧基)苯基)乙酸，其为白色固体(0.80g,59％)。
使用通用操作H，由2-(3-(环丙基甲氧基)苯基)乙酸(300mg,1.50mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为粘性油状物(90mg,19％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.24(t,J＝7.5Hz,1H),6.88-6.78(m,3H),5.13-4.95(m,1H),4.74(m,1H),4.33(d,J＝6.0Hz,2H),3.79(d,J＝7.0Hz,2H),3.23(m,1H),2.93-2.63(m,5H),2.04-1.98(m,1H),1.85-1.76(m,1H),1.72-1.60(m,1H),1.58-1.50(m,1H),1.41-1.22(m,2H),0.68-0.62(m,2H),0.37-0.32(m,2H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ158.2,155.5,139.3,128.6,118.6,112.8,112.3,71.7,70.4,54.5,46.2,45.3,43.9,24.4,23.5,18.5,9.3,2.2ppm。纯度>95％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.44分钟；(M+1)331。
制备X
实施例85
N-(2-(联苯-4-基)丙-2-基)-2-(奎宁环-3-基)乙酰胺
向2-(奎宁环-3-基)乙酸盐酸盐(0.97g,4.7mmol)在DMF(30mL)中的溶液中加入HATU(1.79g,4.72mmol)、2-(4-溴苯基)丙-2-胺(1.0g,4.7mmol)和三乙胺(3.9mL,28mmol)。将所得混合物在60℃搅拌16小时。真空浓缩混合物，用EtOAc稀释且用盐水洗涤。有机层用Na2SO4干燥并蒸发，得到粗产物，其通过硅胶柱色谱(EtOAc/甲醇50/1至3/1)来纯化，得到N-(2-(4-溴苯基)丙-2-基)-2-(奎宁环-3-基)乙酰胺，其为黄色固体(1.3g,76％)。
使用通用操作E，由N-(2-(4-溴苯基)丙-2-基)-2-(奎宁环-3-基)乙酰胺(200mg,0.550mmol)、苯基硼酸(134mg,1.00mmol)和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为粘性棕色油状物(58mg,32％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.58-7.50(m,4H),7.44-7.37(m,4H),7.31(t,J＝7.0Hz,1H),6.50(s,1H),3.16(m,1H),3.02(m,1H),2.92-2.78(m,3H),2.60(m,1H),2.40-2.20(m,3H),1.47-1.90(m,11H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ170.5,146.1,140.7,139.2,128.8,127.2,127.0 125.2,55.6,53.1,46.8,46.2,40.3,31.7,29.3,29.2,26.0,24.4,19.7ppm。纯度100％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.55分钟；(M+1)363。
实施例86
联苯-3-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
在室温向奎宁环-3-醇(635mg,5.00mmol)在THF(15mL)中的溶液中加入NaH[在矿物油中的60％分散液](260mg,6.50mmol)。将混合物搅拌15分钟并在搅拌下加入异氰酸3-溴苯基酯(990mg,5.00mmol)。将所得混合物在室温搅拌18小时，用盐水淬灭且用EtOAc萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱(用EtOAc/甲醇3:1洗脱)来纯化，得到3-溴苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯，其为白色固体(0.70g,43％)。
使用通用操作E，由上述氨基甲酸酯中间体(130mg,0.402mmol)、苯基硼酸(72mg,0.6mmol)和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(75mg,58％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.67(br s,1H),7.59(d,J＝7.5Hz,2H),7.43(t,J＝7.5Hz,2H),7.41-7.28(m,4H),6.77(br s,1H),4.85(m,1H),3.30(m,1H),2.98-2.75(m,5H),2.12(m,1H),1.93-1.68(m,2H),1.64-1.55(m,1H),1.47-1.40(m,1H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ153.3,142.3,140.7,138.3,129.5,128.8,127.5,127.2,122.3,117.4,72.1,55.4,47.4,46.5,30.9,25.4,24.5,19.5ppm。纯度100％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.53分钟；(M+1)323。
实施例87
2’-甲氧基联苯-3-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作E，由3-溴苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯、2-甲氧基-苯基硼酸和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(75mg,58％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.49(br s,1H),7.41(br s,1H),7.37-7.28(m,3H),7.23(d,J＝7.5Hz,1H),7.04-6.94(m,3H),4.83(m,1H),3.80(s,3H),3.29(m,1H),2.97-2.70(m,5H),2.10(m,1H),1.91-1.82(m,1H),1.74-1.65(m,1H),1.62-1.53(m,1H),1.46-1.37(m,1H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ156.4,153.4,139.4,137.6,130.9,130.2,128.8,128.6,124.8,120.8,119.9,117.3,111.2,72.0,55.6,55.4,47.4,46.5,25.4,24.5,19.5ppm。纯度>95％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.52分钟；(M+1)353。
实施例88
2’-乙基联苯-3-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作E，由3-溴苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯、2-乙基苯基硼酸和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(110mg,78％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.42-7.28(m,5H),7.25-7.16(m,2H),7.03-7.00(m,1H),6.88(br s,1H),4.83(m,1H),3.27(m,1H),2.98-2.70(m,5H),2.61(q,J＝7.6Hz,2H),2.08(m,1H),1.92-1.80(m,1H),1.75-1.65(m,1H),1.63-1.55(m,1H),1.46-1.37(m,1H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ152.1,141.7,140.4,139.9,136.4,128.6,127.5,127.4,126.4,124.3,123.2,118.4,115.9,71.0,54.3,46.2,45.3,25.0,24.2,23.4,18.3,14.5ppm。纯度100％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.61分钟；(M+1)351。
实施例89
3’-甲氧基联苯-3-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作E，由3-溴苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯、3-甲氧基苯基硼酸和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(100mg,71％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.63(br s,1H),7.40-7.27(m,4H),7.17(d,J＝8.0Hz,1H),7.11(m,1H),7.07(br s,1H),6.89(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),4.85(m,1H),3.85(s,3H),3.30(m,1H),2.99-2.70(m,5H),2.12(m,1H),1.92-1.84(m,1H),1.75-1.68(m,1H),1.62-1.55(m,1H),1.48-1.40(m,1H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ159.9,153.4,142.3,142.1,138.4,129.8,129.4,122.3,119.7,117.7,112.9,112.8,72.0,55.4,55.3,47.4,46.5,25.4,24.5,19.5ppm。纯度>97％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.52分钟；(M+1)353。
实施例90
3’-乙基联苯-3-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
向1-溴-3-乙基苯(370mg,2.00mmol)在5mL 1,4-二噁烷中的溶液中加入联硼酸二频那醇酯(609mg,2.40mmol)、CH3COOK(589mg,6.02mmol)和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2(75mg,0.09mmol)。将混合物在80℃搅拌5小时。将混合物冷却，用水稀释且用EtOAc萃取。将合并的萃取物干燥(Na2SO4)并浓缩，得到粗硼酸酯(410mg,>100％)，其无需纯化即用于下一步。
使用通用操作E，由3-溴苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯、3-乙基苯基硼酸和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(78mg,56％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.64(br s,1H),7.43-7.27(m,6H),7.24(br s,1H),7.18(d,J＝8.0Hz,1H),4.85(m,1H),3.30(m,1H),2.99-2.73(m,5H),2.70(q,J＝7.5Hz,2H),2.12(m,1H),1.92-1.84(m,1H),1.75-1.67(m,1H),1.62-1.55(m,1H),1.48-1.38(m,1H),1.27(t,J＝7.5Hz,3H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ153.5,144.8,142.4,140.8,138.4,129.4,128.8,127.1,126.8,124.6,122.3,117.4,72.1,55.4,47.4,46.5,29.0,25.4,24.5,19.5,15.7ppm。纯度>98％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.66分钟；(M+1)351。
实施例91
联苯-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
在室温向奎宁环-3-醇(382mg,3.00mmol)在THF(15mL)中的溶液中加入NaH[在矿物油中的60％分散液](156mg,3.90mmol)。将混合物搅拌15分钟并在搅拌下加入异氰酸2-溴苯基酯(594mg,3.00mmol)。将所得混合物在室温搅拌18小时，用盐水淬灭且用EtOAc萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。所得粗产物通过硅胶柱色谱(EtOAc/甲醇3:1)来纯化，得到产物2-溴苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯，其为粘性油状物(0.80g,82％)。
使用通用操作E，由2-溴苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯(130mg,0.400mmol)、苯基硼酸(96mg,0.8mmol)和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(112mg,87％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(br s,1H),7.55-7.33(m,6H),7.25-7.21(dd,J＝7.6和1.6Hz,1H),7.43(td,J＝8.0,1.2Hz,1H),6.65(br s,1H),4.78(m,1H),3.24(m,1H),2.90-2.68(m,5H),2.04(m,1H),1.80-1.62(m,2H),1.61-1.50(m,1H),1.41-1.30(m,1H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ151.2,135.9,132.5,129.5,128.0,127.0,126.9,126.2,125.7,121.4,117.9,69.9,53.1,45.1,44.3,23.1,22.3,17.2ppm。纯度100％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.47分钟；(M+1)323。
实施例92
2’-甲氧基联苯-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作E，由2-溴苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯、2-甲氧基苯基硼酸和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(102mg,72％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.95(br s,1H),7.42(t,J＝7.5Hz,1H),7.37(t,J＝7.5Hz,1H),7.25(d,J＝7.5Hz,1H),7.15(t,J＝7.5Hz,1H),7.09(t,J＝7.5Hz,1H),7.04(d,J＝8.5Hz,1H),6.72(br s,1H),4.76(m,1H),3.82(s,3H),3.23(m,1H),2.90-2.64(m,5H),1.98-2.08(m,1H),1.81-1.63(m,2H),1.60-1.50(m,1H),1.42-1.30(m,1H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ156.2,153.8,135.6,132.1,130.9,129.7,128.3,127.1,123.8,121.5,111.3,71.8,55.7,55.5,47.3,46.5,25.3,24.5,19.4ppm。纯度100％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.48分钟；(M+1)353。
实施例93
2’-乙基联苯-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作E，由2-溴苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯、2-乙基苯基硼酸和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(71mg,51％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.11(br s,1H),7.43-7.34(m,3H),7.33-7.28(m,1H),7.18-7.08(m,3H),6.24(br s,1H),4.75(m,1H),3.23(m,1H),2.85-2.65(m,5H),2.40(m,2H),2.02(m,1H),1.73-1.62(m,2H),1.61-1.50(m,1H),1.40-1.30(m,1H),1.05(m,3H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ153.3,142.9,136.4,135.3,130.6,130.3,130.1,129.0,128.7,128.4,126.4,123.0,119.1,72.1,55.2,47.3,46.4,26.0,25.3,24.5,19.3,15.2ppm。纯度>98％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.55分钟；(M+1)351。
实施例94
3’-甲氧基联苯-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作E，由2-溴苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯、3-甲氧基苯基硼酸和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(120mg,85％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.08(br s,1H),7.40(t,J＝7.5Hz,1H),7.36(t,J＝7.5Hz,1H),7.23(dd,J＝7.5,1.5Hz,1H),7.13(td,J＝7.5,1.5Hz,1H),6.96(dd,J＝8.0,2.0Hz,2H),6.91(t,J＝1.5Hz,1H),6.73(br s,1H),4.79(m,1H),3.84(s,3H),3.24(m,1H),2.90-2.70(m,5H),2.05(m,1H),1.80-1.70(m,2H),1.62-1.52(m,1H),1.41-1.32(m,1H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ160.1,153.4,139.5,134.7,131.5,130.1,130.1,128.5,123.5,121.4,119.9,114.7,113.6,72.1,55.3,55.3,47.3,46.5,25.3,24.5,19.4ppm。纯度>98％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.48分钟；(M+1)353。
实施例95
3’-乙基联苯-2-基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
使用通用操作E，由2-溴苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯、3-乙基苯基硼酸和[PdCl2(pddf)]CH2Cl2得到标题化合物，其为白色固体(120mg,86％)。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.09(br s,1H),7.41(t,J＝7.5Hz,1H),7.36(t,J＝7.5Hz,1H),7.26-7.18(m,4H),7.14(t,J＝7.5Hz,1H),6.71(br s,1H),4.79(m,1H),3.25(m,1H),2.90-2.65(m,7H),2.05(m,1H),1.80-1.64(m,2H),1.62-1.52(m,1H),1.40-1.32(m,1H),1.28(t,J＝7.5Hz,3H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ153.4,145.2,138.1,134.7,131.8,130.2,129.1,128.8,128.4,127.5,126.6,123.5,120.1,72.0,55.3,47.3,46.4,28.9,25.3,24.5,19.4,15.7ppm。纯度>95％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.55分钟；(M+1)351。
制备Y
实施例96
2-异丙氧基苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
历时30分钟向3-氨基苯酚(1.50g,13.8mmol)、异丙醇(3.3g,55mmol)和三苯基膦(14.4g,54.9mmol)在THF(15mL)中的混合物中滴加偶氮二羧酸二乙酯(9.60g,55.0mmol)。将混合物在室温搅拌3小时并浓缩。残留物用水稀释，用2N HCl水溶液酸化且用乙醚萃取。水相用2N NaOH水溶液碱化且用EtOAc萃取。干燥合并的有机层(Na2SO4)并浓缩。所得粗产物通过硅胶柱色谱(石油醚/EtOAc 10:1至5:1)来纯化，得到3-异丙氧基苯胺，其为黄色油状物(1.3g,64％)。
使用通用操作A，由3-异丙氧基苯胺(300mg,2.00mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为粘性油状物(130mg,22％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.20(br s,1H),7.09(t,J＝8.5Hz,1H),7.05(br s,1H),6.77(d,J＝8.0Hz,1H),6.51(d,J＝8.5Hz,1H),4.75(m,1H),4.46(m,1H),3.26-3.18(m,1H),2.92-2.65(m,5H),2.04(m,1H),1.80(m,1H),1.63(m,1H),1.52(m,1H),1.35(m,1H),1.28(d,J＝5.5Hz,6H)ppm。13C NMR(125MHz,CDCl3)δ157.5,152.2,138.2,128.7,110.1,109.6,105.1,70.7,68.9,54.3,46.3,45.4,28.7,24.3,23.3,21.0,18.3ppm。纯度>90％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.43分钟；(M+1)305。
实施例97
2-异丁氧基苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
历时30分钟向3-氨基苯酚(500mg,4.60mmol)、2-甲基丙-1-醇(1.40g,18.9mmol)和三苯基膦(4.80g,16.2mmol)在THF(10mL)中的混合物中滴加偶氮二羧酸二乙酯(3.20g,18.3mmol)。将混合物在室温搅拌3小时。蒸发溶剂且残留物用水稀释，用2N HCl水溶液酸化且用乙醚萃取。水相用2N NaOH水溶液碱化且用EtOAc萃取。干燥合并的有机层(Na2SO4)并浓缩。所得粗产物通过硅胶柱色谱(石油醚/EtOAc 15:1)来纯化，得到3-异丁氧基苯胺，其为黄色油状物(330mg,45％)。
使用通用操作A，由3-异丁氧基苯胺(330mg,2.00mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为粘性油状物(140mg,22％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.17(t,J＝8.0Hz,1H),7.15(br s,1H),6.81(d,J＝8.5Hz,1H),6.80(br s,1H),6.61(d,J＝8.5Hz,1H),4.83(m,1H),3.71(d,J＝6.5Hz,2H),3.34-3.21(m,1H),2.97-2.72(m,5H),2.12-2.04(m,2H),1.90-1.84(m,1H),1.75-1.67(m,1H),1.55-1.63(m,1H),1.46-1.38(m,1H),1.01(d,J＝6.5Hz,6H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ159.9,153.4,139.3,129.6,110.6,109.7,105.0,74.4,72.0,55.4,47.3,46.5,28.3,25.4,24.5,19.5,19.3ppm。纯度100％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.56分钟；(M+1)319。
实施例98
2-(环丙基甲氧基)苯基氨基甲酸奎宁环-3-基酯
历时30分钟向3-氨基苯酚(300mg,2.70mmol)、环丙基甲醇(793mg,11.0mmol)和三苯基膦(2.90g,11.0mmol)在THF(6mL)中的混合物中滴加偶氮二羧酸二乙酯(1.90g,11.0mmol)。将混合物在室温搅拌3小时。蒸发溶剂且残留物用水稀释，用2N HCl水溶液酸化且用乙醚萃取。水相用2N NaOH水溶液碱化且用EtOAc萃取。干燥合并的有机层(Na2SO4)并浓缩。所得粗产物通过硅胶柱色谱(石油醚/EtOAc 15:1)来纯化，得到3-(环丙基甲氧基)苯胺，其为棕色油状物(260mg,58％)。
使用通用操作A，由3-(环丙基甲氧基)苯胺(260mg,1.60mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为粘性油状物(80mg,16％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.72(br s,1H),7.14(br s,1H),7.13(t,J＝8.0Hz,1H),6.85(d,J＝8.0Hz,1H),6.57(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),4.85(m,1H),3.75(d,J＝6.8Hz,2H),3.35-3.26(m,1H),3.05-2.78(m,5H),2.18-2.12(m,1H),1.97-1.86(m,1H),1.80-1.67(m,1H),1.66-1.55(m,1H),1.52-1.42(m,1H),1.26-1.15(m,1H),0.61-0.55(m,2H),0.31-0.26(m,2H)ppm。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ158.6,152.1,138.3,128.6,109.9,108.9,104.0,71.7,69.7,53.8,46.0,45.2,28.7,24.1,22.4,17.8,9.2,2.2ppm。纯度100％LCMS(214nm和254nm)；保留时间1.46分钟；(M+1)317。
实施例99
1-苄基-3-(奎宁环-3-基)咪唑烷-2-酮
向搅拌的奎宁环-3-胺盐酸盐(324mg,0.199mmol)在DMF(30ml)中的溶液中先后小心加入三乙胺(3滴)和(异氰酸基甲基)苯(275mg,2.10mmol)。将所得混合物在25℃搅拌18小时。进行HPLC分离后，得到1-苄基-3-(奎宁环-3-基)脲(283mg,55％)。
在冰浴冷却下向1-苄基-3-(奎宁环-3-基)脲(260mg,1.00mmol)在DMF(30ml)中的溶液中加入NaH[在矿物油中的60％分散液](96mg,2.4mmol)。将所得混合物搅拌2小时，然后小心加入BrCH2CH2Br(0.75g,4.0mmol)。在约25℃将反应混合物再搅拌18小时。进行HPLC分离后，将水层冻干且通过制备性TLC来纯化(CHCl3至5％MeOH的CHCl3溶液至5％2N NH3(MeOH)的CHCl3溶液)，得到标题化合物(81mg,28％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.19-7.22(m,4H),7.11-7.14(m,1H),6.09(dd,J＝15.2,8.4Hz,1H),5.45(dd,J＝15.6,4.0Hz,1H),5.30(dd,J＝8.0,3.6Hz,1H),4.17-4.29(m,4H),3.66-3.75(m,2H),3.47(d,J＝12.4Hz,1H),3.19-3.27(m,3H),2.34(br s,1H),2.22(d,J＝2.4Hz,1H),1.92(br s,2H),1.75(br s,1H)ppm。13CNMR(400MHz,CDCl3)δ158.9,141.1,140.4,128.7,127.4,127.3,113.6,63.6,57.1,56.0,45.6,43.9,25.2,23.0,18.8ppm。纯度93.8％HPLCMS(210nm)；保留时间1.84分钟；(M+1)286。
实施例100
N-(1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基)-4-对甲苯基-丁酰胺
使用通用操作I，由1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基胺(200mg,1.00mmol)和4-对甲苯基-丁酸(220mg,1.2mmol)得到N-(1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基)-4-对甲苯基-丁酰胺(114mg,40％)，其为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.06(s,4H),4.19(m,1H),3.66-3.73(t,J＝8.4Hz,1H),3.29-3.33(m,4H),2.91(dd,J＝8.0,J＝3.6Hz,1H),2.59(t,J＝7.6Hz,2H),2.28(s,3H),2.24(t,J＝7.6Hz,2H),2.15-2.16(m,1H),2.02-2.14(m,1H),1.92-2.01(m,2H),1.81-1.91(m,3H)ppm。13C NMR(400MHz,CDCl3)δ175.1,138.6,135.1,128.8,128.2,52.7,47.4,47.3,44.5,34.8,27.3,24.3,21.6,19.8,17.1ppm。纯度99.7％HPLCMS(210nm)；保留时间1.76分钟；(M+1)287。
实施例101
N-(1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基)-4-(4-甲氧基-苯基)-丁酰胺
使用通用操作I，由1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基胺(200mg,1.00mmol)和4-(4-甲氧基-苯基)-丁酸得到标题化合物，其为白色固体(85mg,28％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.08(d,J＝8.4Hz,2H),6.81(d,J＝8.4Hz,2H),4.18(br s,1H),3.74(s,3H),3.68(d,J＝11.6Hz,1H),3.24-3.33(m,4H),2.98-3.03(m,1H),2.57(t,J＝7.6Hz,2H),2.24(t,J＝7.6Hz,2H),2.03-2.16(m,2H),2.02(br s,2H),1.85-1.91(m,3H)ppm。13C NMR(400MHz,CD3OD)δ175.2,158.3,133.6,129.2,113.6,54.5,52.6,47.2,46.4,44.5,34.9,34.2,27.5,24.4,21.5,17.1ppm。纯度96.4％HPLCMS(210nm)；保留时间1.76分钟；(M+1)303。
实施例102
联苯-3-甲酸(1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基)-酰胺
使用通用操作I，由1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基胺(200mg,1.00mmol)和联苯-3-甲酸得到标题化合物，其为白色固体(211mg,68％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.86(s,1H),7.59(d,J＝7.6Hz,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.40(d,J＝7.6Hz,2H),7.28(t,J＝7.6Hz,1H),7.19(t,J＝7.6Hz,2H),7.11(t,J＝7.6Hz,1H),4.21(br s,1H),3.56(t,J＝11.6Hz,1H),3.11-3.22(m,1H),3.05-3.10(m,4H),2.10(q,J＝3.2Hz,1H),1.95(br s,1H),1.79-1.83(m,2H),1.59-1.20(m,1H)ppm。13C NMR(400MHz,CD3OD)δ169.6,141.6,140.2,134.5,130.3,129.0,127.7,126.9,126.3,125.9,51.9,46.4,46.0,45.6,24.6,21.6,17.3ppm。纯度99.8％HPLCMS(210nm)；保留时间1.60分钟；(M+1)307。
实施例103
N-(1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基)-2-(联苯-4-基)-乙酰胺
使用通用操作I，由1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基胺(200mg,1.00mmol)和联苯-4-基-乙酸得到标题化合物，其为白色固体(140mg,44％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.56(t,J＝8.0Hz,4H),7.29-7.41(m,5H),4.19(br s,1H),3.70(t,J＝7.2Hz,1H),3.58(s,2H),3.24-3.31(m,5H),3.12-3.19(m,1H),2.16-2.17(m,2H),1.95-1.98(m,2H),1.82(br s,1H)ppm。13C NMR(400MHz,CD3OD)δ173.1,140.8,140.0,134.7,129.4,128.7,126.9,52.3,46.4,45.9,44.3,41.9,24.4,21.5,17.1ppm。纯度93.9％HPLCMS(210nm)；保留时间2.87分钟；(M+1)321。
制备Z
实施例104
2-(奎宁环-3-基)-N-(1-对甲苯基环丙基)乙酰胺
在0℃向2-(二甲氧基磷酰基)乙酸甲酯(2.70g,14.8mmol)在THF(200ml)中的溶液中加入NaH[在矿物油中的60％分散液](600mg,15.0mmol)。搅拌1小时后，加入奎宁环-3-酮(2.00g,12.4mmol)且将所得混合物在室温搅拌18小时。在0℃用50ml水将反应淬灭且用EtOAc萃取混合物。合并有机层并减压浓缩，得到粗2-(奎宁环-3-亚基)乙酸甲酯(1.2g,70％)，其无需纯化即用于下一步。
将2-(奎宁环-3-亚基)乙酸甲酯(70mg,0.38mmol)和Pd/C(100mg,20％w/w)在EtOH(10mL)中的混合物在H2(20psi)下在室温搅拌18小时。反应溶液用硅藻土过滤且将滤液减压浓缩，得到粗2-(奎宁环-3-基)乙酸甲酯(60mg,85％)，其无需纯化即用于下一步。
将2-(奎宁环-3-基)乙酸甲酯(1.1g,6.0mmol)和50mL浓HCl[12M]的混合物在70℃搅拌18小时。减压浓缩反应混合物(900mg,86％)，得到粗2-(奎宁环-3-基)乙酸，其无需纯化即用于下一步。
使用通用操作I，由2-(奎宁环-3-基)乙酸(169mg,1.00mmol)和1-对甲苯基环丙胺(149mg,1.10mmol)得到标题化合物，其为白色固体(60mg,18％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.86(s,1H),6.96-7.07(m,4H),3.22-3.37(m,2H),2.85-3.05(m,4H),2.39-2.45(m,2H),2.21(s,3H),1.45-1.92(m,5H),1.07-1.23(m,5H)ppm。13C NMR(400MHz,CDCl3)δ171.6,139.8,136.1,129.2,125.6,52.1,50.9,46.5,46.0,39.2,34.9,30.8,24.5,21.1,18.7,17.6ppm。纯度96.2％HPLCMS(210nm)；保留时间1.21分钟；(M+1)299。
实施例105
N-(2-(3-甲氧基苯基)丙-2-基)-2-(奎宁环-3-基)乙酰胺
使用通用操作I，由2-(奎宁环-3-基)乙酸(169mg,1.00mmol)和2-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺(182mg,1.10mmol)得到标题化合物，其为白色固体(126mg,40％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.39(s,1H),7.20(t,J＝8.0Hz,1H),6.92(d,J＝8.0Hz,1H),6.87(d,J＝2.0Hz,1H),6.71(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),3.75(s,3H),3.31-3.42(m,2H),3.00-3.19(m,4H),2.47-2.60(m,2H),2.27(dd,J＝14.0,6.0Hz,1H),1.83-2.06(m,4H),1.64-1.74(m,1H),1.61(d,J＝12.4Hz,6H)ppm。13C NMR(400MHz,CDCl3)δ170.0,159.7,149.3,129.5,117.5,111.8,111.0,55.9,55.4,52.0,50.6,46.6,46.0,39.7,30.9,29.7,29.1,24.3,18.8ppm。纯度93.7％HPLCMS(210nm)；保留时间0.76分钟；(M+1)317。
实施例106
2-(1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基)-N-[1-(3-异丙基-苯基)-1-甲基-乙基]-乙酰胺
向1-(1-异氰酸基-1-甲基-乙基)-3-异丙烯基-苯(10g,50mmol)在t-BuOH(1000mL)中的溶液中加入KOH(40.0g,71.6mmol)。将混合物回流搅拌3小时。将所得混合物冷却至室温，浓缩并溶于CH2Cl2。滤出固体残留物并使用浓HCl将有机层调节至pH<7。用水萃取铵盐。使用NaOH水溶液[5％w/w,200ml]使水层呈碱性，然后用CH2Cl2萃取游离的碱化胺。将有机层合并，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到1-(3-异丙烯基-苯基)-1-甲基-乙胺(3.3g,63％)。
将上述化合物(8.5g,48mmol)和PtO2(1.8g,8.0mmol)在EtOH(600mL)中的溶液在1atm H2下在室温搅拌18小时。反应混合物用硅藻土过滤并减压浓缩，得到1-(3-异丙基-苯基)-1-甲基-乙胺(5.0g,58％)。
使用通用操作I，由(1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基)-乙酸(200mg,1.20mmol)和1-(3-异丙基-苯基)-1-甲基-乙胺得到标题化合物，其为白色固体(42mg,10％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.15-1.20(m,3H),7.05(d,J＝8.4Hz,1H),3.41-3.45(m,1H),3.26(s,2H),3.15-3.22(m,2H),2.71-2.82(m,2H),2.41-2.47(m,3H),2.05-2.12(m,1H),1.79-1.90(m,4H),1.61(d,J＝8.0Hz,6H),1.21(d,J＝6.4Hz,6H)ppm。13C NMR(400MHz,DMSO-d6)δ171.1,148.7,147.3,128.1,123.9,122.8,122.2,55.6,52.1,46.5,45.9,38.8,34.5,30.7,28.9,28.5,23.8,23.4,18.0ppm。纯度96.8％HPLCMS(210nm)；保留时间1.93分钟；(M+1)329。
实施例107
2-(1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基)-N-[2-(2-甲氧基-苯基)-乙基]-乙酰胺
使用通用操作I，由(1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基)-乙酸(200mg,1.20mmol)和2-(2-甲氧基-苯基)-乙胺得到标题化合物，其为白色固体(60mg,15％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.17(t,J＝7.2Hz,1H),7.08(d,J＝7.2Hz,1H),6.89(d,J＝8.4Hz,1H),6.84(t,J＝7.6Hz,1H),3.89(s,3H),3.35-3.45(m,3H),3.21-3.31(m,3H),2.76-2.83(m,3H),2.29-2.45(m,3H),1.82-2.01(m,3H),1.72-1.81(m,2H)ppm。13C NMR(400MHz,CD3OD)δ172.0,158.0,130.4,127.8,127.2,120.2,110.4,54.6,52.0,46.4,45.9,39.1,38.3,30.7,30.2,23.8,17.9ppm。纯度92.4％HPLCMS(210nm)；保留时间1.59分钟；(M+1)303。
实施例108
1-(1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基)-3-[1-(3-异丙基-苯基)-环丙基]-脲
将3-异丙基-苯甲酸(5.00g,30.4mmol)在SOCl2(50ml)中的混合物在100℃搅拌2小时。浓缩反应混合物，得到3-异丙基-苯甲酰氯(5.00g,91％)。
在-70℃向上述酰氯(5.00g,27.0mmol)在CH2Cl2(20ml)中的溶液中滴加NH3/CH2Cl2溶液(200mL)。将混合物在室温搅拌18小时，然后浓缩，得到3-异丙基-苯甲酰胺(4.2g,93％)。
将上述酰胺(4.20g,25.7mmol)在POCl3(36.0g,236mmol)中的溶液在80℃搅拌18小时。浓缩溶液且将残留物倒入水(100mL)中。混合物用EtOAc萃取。将有机层合并，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到3-异丙基-苯甲腈(3.00g,80％)。
使用通用操作G，将3-异丙基-苯甲腈(3.00g,20.6mmol)转化成相应的1-(3-异丙基-苯基)-环丙胺(0.80g,22％)。
使用通用操作C，由上述胺(300mg,1.71mmol)、奎宁环-3-胺(215mg,1.71mmol)和CDI(290mg,2.05mmol)得到标题化合物，其为白色固体(88mg,46％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.18(t,J＝8.0Hz,1H),7.12(s,1H),7.01(dd,J＝19.2,7.6Hz,2H),3.74-3.77(m,1H),3.18-3.24(m,1H),2.71-2.87(m,5H),2.42-2.47(m,1H),1.63-1.82(m,4H),1.45(br s,1H),1.21-1.26(m,10H)ppm。13C NMR(400MHz,CD3OD)δ193.0,168.7,160.1,128.2,122.7,121.9,55.3,46.8,46.1,34.1,25.9,25.0,23.5,19.6,18.2ppm。纯度92.4％HPLCMS(210nm)；保留时间2.53分钟；(M+1)328。
实施例109
2-(1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基)-N-[1-(3-异丙基-苯基)-环丙基]-乙酰胺
使用通用操作I，由1-(3-异丙基-苯基)-环丙胺(278mg,1.58mmol)和(1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基)-乙酸(267mg,1.58mmol)得到标题化合物，其为白色固体(70mg,14％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.16(t,J＝8.0Hz,1H),7.07(s,1H),6.97(dd,J＝19.2,7.6Hz,2H),3.16-3.23(m,1H),2.79-2.97(m,5H),2.51-2.58(m,1H),2.23-2.41(m,3H),1.83-1.92(m,1H),1.68-1.81(m,3H),1.54-1.62(m,1H),1.15-1.25(m,10H)ppm。13C NMR(400MHz,CD3OD)δ173.6,148.5,142.4,127.8,123.6,123.1,122.0,73.0,53.1,46.6,45.9,39.3,34.1,32.3,28.1,26.4,24.4,19.7,16.8ppm。纯度96.9％HPLCMS(210nm)；保留时间2.55分钟；(M+1)327。
实施例110
[1-(3-异丙基-苯基)-环丙基]-氨基甲酸1-氮杂-二环[2.2.2]辛-3-基酯
使用通用操作A，由1-(3-异丙基-苯基)-环丙胺(278mg,1.58mmol)和奎宁环-3-醇得到标题化合物，其为白色固体(75mg,22％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.17(m,1H),7.09(s,1H),6.97-7.08(m,2H),4.72-4.79(m,1H),3.36-3.42(m,1H),2.79-3.08(m,5H),1.93-2.17(m,2H),1.81-1.90(m,1H),1.67-1.78(m,2H),1.31-1.54(m,1H),1.13-1.28(m,10H)ppm。13CNMR(400MHz,CD3OD)δ157.1,148.4,143.1,128.1,123.9,123.0,122.4,69.2,54.4,46.7,45.7,34.7,34.3,24.9,23.3,22.0,18.0,17.3ppm。纯度99.2％HPLCMS(210nm)；保留时间1.83分钟；(M+1)329。
实施例111
使用(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯(S)-2-羟基琥珀酸盐的小分子疗法对法布里病小鼠模型的体内有效性研究
本申请描述了在法布里病小鼠模型中使用GCS抑制剂的体内实验并证实底物减少疗法(SRT)在降低法布里病小鼠血浆、肾和尿中的Gb3和lyso-Gb3水平中是同等有效的。设计研究以评价使用本发明化合物类型的底物抑制(即“底物减少疗法”)能否减少贮存物质神经酰胺三己糖苷(Gb3)和溶血神经酰胺三己糖苷(lyso-Gb3)的蓄积。最近已提出尿中的lyso-Gb3可代表法布里病临床相关性的可靠生物标志物(Aerts等人,PNAS USA 105:2812-2817(2008)；和Auray-Blais等人,Clin Chim Acta 411:1906-1914(2010))。lyso-Gb3的代谢起源是未知的并可能是通过对Gb3进行脱酰化或通过由葡萄糖基鞘氨醇进行合成代谢来衍生的。
在图2中，黑色箭头为已证实的途径，灰色箭头为尚未记载的途径。已知使用α-半乳糖苷酶A的ERT既降解Gb3又降解lyso-Gb3。因此，若lyso-Gb3主要通过对Gb3进行脱酰化即GCS依赖性途径来产生，则使用GCS抑制剂的SRT就限制lyso-Gb3的蓄积而言可为最有效的。这些实验表明使用GCS抑制剂的SRT在法布里病小鼠模型中既减少Gb3又减少lyso-Gb3，由此支持了本发明化合物可用作针对法布里病患者的治疗选择。
在以下实验中以～60mg/kg/天的(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-奎宁环-3-基酯(S)-2-羟基琥珀酸盐(以下称为“GZ452”)或～300mg/kg/天的(1R,2R)-辛酸[2-(2’,3’-二氢-苯并[1,4]二氧杂环己二烯-6’-基)-2-羟基-1-(吡咯烷-1-基)甲基-乙基]-酰胺-L-酒石酸盐(以下称为“GZ638”)(形式为随意摄取的粒状食物中的组分)向小鼠给药GCS抑制剂。通过ESI/MS对脂质进行分析(参见Marshall等人,PLoS ONE 5:e15033(2010))。如以下更详细讨论的那样，当小鼠为3、8或12月龄时开始治疗以测试对不同疾病严重度的有效性。每月收集血液和尿且定期进行的组织采集提供用于评价疗法有效性的材料(Gb3和lyso-Gb3的水平)。先前的研究表明较早的葡萄糖基神经酰胺合酶抑制剂(P4样类别)可延缓Gb3蓄积的速率，然而如下所述，用Genz-452进行的治疗可不但防止或延缓进一步的蓄积，而且降低Gb3和lyso-Gb3在所测试的组织(肝、心、尿和血浆)中的绝对水平。如下所述，SMT的有效性受开始治疗时小鼠月龄的影响。通常，小鼠月龄越大，所贮存的Gb3水平越高且因此实现类似治疗益处所需要的治疗时段越长(参见图4)。以下进一步描述了实验和结果。
GCS抑制剂降低法布里病小鼠内脏组织中的Gb3水平
在该实验中，法布里病小鼠在8月龄时开始用在其饮食中的GCS抑制剂治疗4个月。发明人先前已报道剂量为300mg/kg/天的eliglustat tartrate(GZ638)(SRT GZ638)可有效抑制组织Gb3的进一步蓄积(在此参见Gb3相对于起始水平UNT(开始)的非显著性变化)。如图3所示，还评价了更强效的GCS抑制剂GZ452(剂量为60mg/kg/天)(SRT-GZ452)并发现其不但防止进一步的蓄积，而且相对于起始水平(UNT(开始))显著减少所贮存的Gb3。还显示了月龄匹配的野生型水平(WT)。这些结果表明GZ638为强效的GCS抑制剂且可有效降低法布里病小鼠内脏组织中的Gb3水平。
SRT在年幼和年长法布里病小鼠中减少尿Gb3和血浆Gb3
在该实验中，如图4A和4B所示，法布里病小鼠在3月龄或8月龄(月龄)时开始用在其饮食中的GZ452(Rx)治疗2个月或4个月。年幼小鼠和年长小鼠的尿Gb3水平对SRT治疗具有同等的响应，其中在治疗2个月的情况下实现～90％降低。Gb3的血浆水平对治疗具有较慢的响应，其中年长小鼠需要两倍于年幼小鼠的治疗时间(4个月对2个月)以实现～50％降低。这些结果表明GZ638在年幼和年长法布里病小鼠中可有效降低尿Gb3水平和血浆Gb3水平。
SRT减少法布里病小鼠肾中的Gb3和lyso-Gb3
在该实验中，法布里病小鼠在8月龄时开始用在其饮食中的Genz-452治疗4个月。如图5所示，对来自月龄匹配的未接受治疗的法布里病小鼠(UNT)、用GZ452治疗的法布里病小鼠(SRT)和野生型对照小鼠(WT)的肾组织中的(A)Gb3和(B)lyso-Gb3进行分析。SRT使Gb3的水平和lyso-Gb3的水平发生类似的显著的相对降低(60-70％)。这些结果表明GZ638可有效降低法布里病小鼠肾组织中的Gb3水平和lyso-Gb3水平。
实施例112
使用GZ452和α-半乳糖苷酶A的联合疗法对法布里病小鼠模型的体内有效性研究
法布里病小鼠用于测试以同时治疗模式将酶代替疗法与小分子疗法组合的体内有效性。设计研究以评价使用GZ452化合物的底物抑制(即“底物减少疗法”)能否减少贮存物质Gb3和lyso-Gb3的重新蓄积。研究方案需要由3月龄雄性法布里病小鼠组成的三个不同治疗组(图6A)。第一组以1mg/kg接受静脉内注射的α-半乳糖苷酶A(ERT)以降低Gb3水平且每2个月重复一次。第二组不但接受与第一组相同的酶注射，而且以～60mg/kg/天给药GZ452(形式为粒状食物中的组分)。第三组仅每天给药其饮食中的GZ452。第四组不接受任何治疗以作为媒介物对照且第五组即野生型动物提供“正常的”Gb3水平和lyso-Gb3水平。每月收集的尿和血液及每三个月采集的组织提供了用于评价疗法相对有效性的材料(图6A)。
2个月后(小鼠5月龄)，分析血浆(图6B,系列A和C)和尿(图6B,系列B和D)中的Gb3(图6B,系列A和B)和lyso-Gb3(图6B,系列C和D)。在血浆中，ERT和SRT使Gb3(系列A)和lyso-Gb3(系列C)的水平降低且所组合的ERT与SRT实现好于任一单独治疗剂的显著改善。尿中的Gb3水平不受ERT的影响，但是被SRT所显著降低(系列B)。尿中的lyso-Gb3被所有治疗所类似减少(系列D)，这提示尿中的Gb3和lyso-Gb3可能来自不同的来源。这些研究的结果显示SMT可有效减少肾和尿中的Gb3。ERT就减少血浆中的Gb3而言比SMT更有效，然而最有效的疗法源自将两种疗法组合。单独的SMT疗法或与ERT组合的SMT疗法还能影响lyso-Gb3(减少蓄积)。
实施例113
Gb3酰基链同工型特征
针对来自法布里病小鼠血浆、尿和肾的Gb3，确定具有不同碳链长度的由酰氨基连接的酰基的相对丰度。如图7所示，主要的血浆同工型为C16:0和C24:1。尿同工型特征和肾同工型特征是几乎相同的，其中C24:0和C22:0为占优势的链长度。这些数据与主要来自肾的尿Gb3(可能通过表皮外体脱落)一致。将这些结果与图6所示的结果(其中ERT降低血浆和尿中的lyso-Gb3，但是不降低尿中的Gb3)关联起来，由此提示尿中的lyso-Gb3源自血浆滤液。若在患者中也是如此，则尿Gb3和尿lyso-Gb3的来源分化可解释为什么认为就预测疾病严重度和治疗有效性而言lyso-Gb3比尿Gb3更准确。
实施例114
SRT而非ERT显著延缓热伤害性响应的损失
如上所述，三月龄法布里病小鼠用其饮食中的GZ452(SRT)、每2个月一次的αgal(ERT)或所述2种治疗的组合(E+S)治疗。进行联合疗法6个月后，热伤害性响应时间(潜伏期)如下评价：将小鼠置于55℃加热板上并记录响应时间(即特征性后爪颤动)。如图8所示，治疗7个月后(小鼠为10月龄)，仅用ERT治疗的组与未接受治疗的组(UNT)相比没有显著的不同。用SRT和联合疗法治疗的组对热刺激具有显著较短的响应时间。这些结果表明SRT(而非ERT)延缓了热伤害性响应的损失，而热伤害性响应为法布里病患者中常见的外周神经病的代替形式。
实施例115
nGD小鼠模型用于使用GZ161的SMT体内研究
K14lnl/lnl(简写为K14)小鼠得自Lund University(Enquist等人(2007))并在Institutional Animal Care and Use Committee所批准的方案下繁殖。将得自杂合子交配的幼仔断尾并在出生一天内确定基因型(通过P1)。DNA使用溶胞缓冲液(5mM EDTA、0.2％SDS、200mM NaCl和100mM Tris(pH 8.0)且补充有0.25mg/ml蛋白酶K(Invitrogen,Carlsbad,California))来提取，用100％异丙醇沉淀并重新溶解在1×Tris EDTA缓冲液中。然后DNA用于聚合酶链式反应(PCR)以确定GC基因在K14角蛋白启动子(CRE)下的存在(Enquist等人(2007))。为了确定鼠类葡萄糖脑苷脂酶基因(NEO)的新霉素耐药位点裂解，发明人使用三种引物措施：GC WT Fwd
5’-TGTTCCCCAACACAATGCTCTTT-3’、Rev
5’-TCTGTGACTCTGATGCCACCTTG-3’及Neo Rev
5’-AAGACAGAATAAAACGCACGG GTG-3’，如Cabrera-Salazar等人,ExperimentalNeurology 225:436-444(2010)所先前描述。
新生小鼠在出生后第4天开始每天以10μl/克体重的体积接受腹膜内注射的5mg/kg(2-(4’-氟-[1,1’-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯(以下称为“GZ161”)。在出生后第10天(出现症状前)和第14天(人道终点)将K14小鼠和野生型同窝幼仔人道处死以评价糖鞘脂(GSL)的水平。小鼠接受剂量为150mg/kg的戊巴比妥(Euthasol,Virbac Inc,Forth Worth,TX)且用冷的0.9％NaCl溶液经心灌注。将脑解剖并分离；一份脑半球用于GSL分析且将另一份脑半球在4％多聚甲醛中固定96小时并进行组织学处理。
为了确定出生前暴露于GZ161能否实现其它益处，一个小组的妊娠K14雌性小鼠在妊娠期最后5-7天接受食物中的GZ161，所述食物使用经计算而提供20mg/kg/天的制剂。将接受GZ161的雌性小鼠在分娩后转换至标准饮食且幼仔在P1开始每天接受IP注射的剂量为5mg/kg(10μl/克体重)的GZ161。将接受药物或标准处方的雌性小鼠所生的一组WT幼仔在出生后立即处死以确定子宫内暴露于GZ161能否降低脑GSL水平。
实施例116
对糖鞘脂进行定量
如Merrill等人,Methods 36:207-224(2005)所先前描述的那样，通过液相色谱和串联质谱(LC/MS/MS)对鞘脂进行定量分析。简言之，10μl脑组织匀浆(组织重量/水为100mg/ml)用1.00ml有机溶剂混合物(97％乙腈、2％甲醇和1％乙酸(v/v))提取并剧烈涡旋10分钟。所提取的鞘脂(GluCer和GluSph)通过亲水液相色谱(Atlantis HILIC柱,WatersCorp.)来直接分离且通过三重四级串联质谱(API 4000,Applied Biosystems/MDS SCIEX)来分析并与鞘脂标准品(Matreya,LLC；Pleasant Gap,PA)进行比较。
实施例117
重组人葡萄糖脑苷脂酶的重新配制
如Cabrera-Salazar等人(2010)所先前描述的那样，对重组人葡萄糖脑苷脂酶(rhGC)进行重新配制。简言之，rhGC使用阳离子交换色谱(CM Sepharose)来结合并向洗脱液中加入人血清白蛋白(HSA)作为稳定剂。用于ICV给药的制剂为2mg/ml rhGC在pH为7.2的含有135mM氯化钠、5mg/ml HSA和0.01％聚山梨酯80的10mM磷酸钠缓冲液中的溶液。
实施例118
脑室内注射
如先前所述那样(Cabrera-Salazar等人(2010))，将被鉴定为K14的神经病性戈谢病(nGD)动物模型低温麻醉并接受2μl两侧脑室内(ICV)注射的rhGC(2mg/ml)或媒介物。按照操作来监测接受注射的幼仔是否复原且返回至母鼠处。
实施例119
组织病理学
确定基因型后，将动物在10日龄人道处死，K14小鼠在该日龄是无症状的。小鼠接受腹膜内注射的150mg/kg戊巴比妥钠((Euthasol,Virbac Inc,Forth Worth,TX)且通过心内注入冷的0.9％氯化钠来灌注。将脑取出，然后在4％多聚甲醛中固定72小时。将组织转移到PBS中并用石蜡包埋。如下所述，切成5μm厚的矢状切片并染色。神经胶质增生和巨噬细胞系的细胞的存在通过神经胶质纤维酸性蛋白的染色及CD68和F4/80泛巨噬细胞标志物的表达使用Leica Bond Max Immunostainer系统(Leica Microsystems,Wetzlar,Germany)来评价。
GFAP染色：将石蜡切片置于固定片上并使用Bond Polymer Refine IHC系统(Leica Microsystems,Wetlzar,Germany)进行处理，其中在不含有血清的蛋白阻断液(Dako Systems,Glostrup,Denmark)中阻断10分钟，在第一抗体抗GFAP抗体在Dako抗体稀释液(Dako,Glostrup,Denmark)中的稀释度为1:1500的情况下孵育30分钟并使用BondPolymer Refine检测试剂盒(Leica Microsystems,Wetzlar,Germany)来染色。
F4/80染色：将石蜡切片置于固定片上并使用Bond Polymer Refine IHC系统(Leica Microsystems,Wetlzar,Germany)进行处理，其中在大鼠抗小鼠F4/80抗体(eBioscience,San Diego,CA)或大鼠IgG2a(eBioscience,San Diego,CA)(作为同种型对照)的稀释度为1:2500的情况下孵育30分钟。然后将载玻片与稀释度为1:250的第二抗体兔抗大鼠抗体(Vector Laboratories,Burlingame,CA)一起孵育并使用Bond PolymerRefine检测试剂盒(Leica Microsystems,Wetzlar,Germany)来染色。
CD68染色：将石蜡切片置于固定片上并使用Bond Polymer Refine IHC系统(Leica Microsystems,Wetlzar,Germany)进行处理，其中在大鼠抗小鼠CD68克隆FA-11抗体(AbD Serotec,Oxford,UK)或大鼠IgG2a同种型对照(AbD Serotec,Oxford,UK)的稀释度为1:2500的情况下孵育30分钟。然后将载玻片与稀释度为1:250的第二抗体兔抗大鼠抗体(Vector Laboratories,Burlingame,CA)一起孵育并使用Bond Polymer Refine检测试剂盒(Leica Microsystems,Wetzlar,Germany)来染色。
对于每种染色技术，使用Aperio ScanScope XT系统(Aperio Technologies,Vista,CA)由每个实验组的类似脑区得到与暴露匹配的数字图像。以高分辨率对经染色的载玻片进行数字化且在每块载玻片中标出所感兴趣的六个区域且通过组织形态计量学来独立分析。确定阳性染色区域和细胞核且定量数据先后通过单因素方差分析和Tukey’s多重比较检验使用Graph Pad Prism v4.0(GraphPad Software,San Diego,CA)来分析。其中p<0.05的组间平均值差异被认为是显著的。
实施例119
存活率
如上所述，K14小鼠每天接受剂量为5mg/kg体重的腹膜内注射的GZ161。另一组动物在出生后第1、2和3天还接受ICV注射的GC，然后每天接受IP注射的GZ161。到达断奶期的动物接受专门食物中的GZ161，所述专门食物被设计成提供60mg/kg/天的剂量。每天监测所有动物的神经学并发症进展。当小鼠到达人道终点(放置成侧卧后10秒内不能恢复正常)时，其通过注射150mg/kg戊巴比妥钠(Euthasol,Virbac Inc,Forth Worth,TX)来处死。将该时间点记录为生命终点并使用Kaplan-Meier曲线来分析。
实施例120
统计学分析
所显示的数值对应于平均值且误差棒表示平均值的标准误差。组间比较先后通过单因素方差分析和Tukey’s多重比较检验来分析。对子宫内底物减少进行的比较通过不成对的t检验(Welch校正)来分析。使用与Mantel-Haenszel检验等同的对数秩检验对Kaplan-Meier存活率曲线进行分析。所有统计学分析都使用Graph Pad Prism v4.0(GraphPadSoftware,San Diego,CA)来进行。其中p<0.05的组间平均值差异被认为是显著的。
实施例121
K14小鼠脑中的底物蓄积
在评价药物对脑脂质的作用前，发明人将K14小鼠脑中GluCer、GalCer和GluSph水平的时间依赖性变化与对照用野生型(WT)小鼠脑中GluCer、GalCer和GluSph水平的时间依赖性变化进行比较。图9系列A和B显示在WT小鼠脑中，在生命的最初几天内占优势的GL-1异构体为GluCer；截至出生后第14天(P14)占优势的异构体为GalCer。这些结果与在大鼠脑中进行的研究的结果一致，所述在大鼠脑中进行的研究发现在生命的第一周内GluCer以较高的速率合成，然后GalCer的合成在P8开始增加(Brenkert等人,Brain Research 36:183-193(1972))。图9系列A还显示与WT小鼠相比，K14小鼠中的GluCer升高10倍且该增加在生命的最初2周内持续直到小鼠在P14左右死亡。
与先前的神经病性戈谢病小鼠模型(Liu等人,PNAS 95:2503-2508(1998))一致，图9系列C显示与WT小鼠相比，出生时K14小鼠模型脑中的溶血糖鞘脂GluSph升高>20倍。该增加在生命的最初2周内持续且在终点所处死的动物中是甚至更高的(图9系列C)。在K14小鼠的WT同窝幼仔中，GluSph的水平低于检测阈值(0.3ng/mg组织)。图9系列D显示在K14小鼠中这些升高的糖鞘脂和溶血糖鞘脂对脑重量似乎没有影响(与WT小鼠的脑重量相比)。考虑到GluSph的已知毒性，可预期旨在减少K14小鼠脑中这些底物蓄积的治疗策略对疾病的病理学特征和动物的寿命具有影响。
实施例122
腹膜内给药的GZ161降低K14小鼠脑中的GluCer和GluSph水平
图10显示在人道终点(14-15日龄)时与用媒介物治疗的K14小鼠相比，GZ161的每天腹膜内(IP)给药使GluCer和GluSph的脑水平都降低>60％。用GZ161治疗的K14小鼠在该时间点是无症状的。即使GZ161的给药显著降低这些糖鞘脂的水平，图10显示它们仍然比日龄匹配的野生型小鼠高数倍；在来自WT或杂合子同窝幼仔的分析样品中没有检测到GluSph。全身性给药所引起的脑糖鞘脂的减少强烈提示GZ161既能够穿过血脑屏障，又能够抑制它的靶标酶即GCS。
实施例123
腹膜内给药的GZ161减少K14小鼠整个脑中的小神经胶质细胞/巨噬细胞染色
可使用针对抗原例如F4/80和CD68的抗体在鼠类脑中检测骨髓系的细胞。F4/80为在分枝的(休眠的)小神经胶质细胞和巨噬细胞上发现的跨膜糖蛋白，而CD68为溶酶体蛋白，其以相对高的水平在巨噬细胞和活化的(反应性)小神经胶质细胞中表达并以较低的水平在分枝的小神经胶质细胞中表达。脑中增加的F4/80和CD68染色可由于单核细胞的募集或小神经胶质细胞的增殖而发生且是对损伤和炎症的常见响应。图11定性和定量地显示在10日龄(P10)时与野生型小鼠相比，K14小鼠脑在多个部位(海马体、丘脑、脑干和小脑)具有数量增加的CD68+细胞。在丘脑和脑干中观察到最大浓度的CD68+细胞，就2型戈谢病患者而言这两个部位也显示出病理学(Conradi等人,Acta Neuropathologica 65:99-109(1984)；Conradi等人,Acta Neuropathologica 82:152-157(1991)；和Wong等人,MolecularGenetics and Metabolism 82:192-207(2004))。图11还显示GZ161的全身性给药在上述所有部位都减少CD68+细胞的数量；治疗还在嗅球和额皮质中减少CD68+细胞(数据未显示)。与CD68组织病理学一致，图12显示在P10与WT动物相比，F4/80染色在用媒介物治疗的K14小鼠中是增加的。GZ161的每天IP注射减少丘脑和脑干中F4/80+细胞的数量，但是在其它脑区域中具有很小的作用(marginal effect)。与CD68数据一起考虑，这些结果提示用GZ161在K14小鼠中进行的全身性治疗在多个脑区域中引起巨噬细胞/小神经胶质细胞的数量减少。
实施例124
腹膜内给药的GZ161减少K14小鼠几个脑区域中的神经胶质增生
星形胶质细胞可在对炎症和神经元损害或死亡的响应中经历肥大或增殖，该过程称为星形胶质细胞增生。神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)为中间丝蛋白，其在活化的(反应性)星形胶质细胞中大量表达且因此可用于监测星形胶质细胞增生。图13显示在P10与WT水平相比，GFAP染色在K14小鼠的几个脑区域(海马体、丘脑、脑干和小脑)中是增加的，这表明反应性星形胶质细胞的存在。图13还显示用GZ161对K14小鼠进行的全身性治疗在P10使海马体和小脑中的GFAP染色是减少的；嗅球和额皮质中的染色也是减少的(数据未显示)。因此，这些GFAP结果与上述巨噬细胞/小神经胶质细胞数据一致，这表明K14小鼠可能具有以下进行性炎症过程，所述进行性炎症过程可通过全身性给药GZ161来一定程度地减弱。
实施例125
腹膜内给药的GZ161增加K14小鼠的存活
考虑到用GZ161进行的治疗对脑糖鞘脂和组织病理学具有积极作用，发明人研究了这些作用能否转换成K14小鼠的存活增加。图14表明用媒介物治疗的K14小鼠具有15天的中位寿命，这与发明人先前在该小鼠模型中发现的结果一致(Cabrera-Salazar等人(2010))。用GZ161对K14小鼠进行的全身性(IP)治疗使中位寿命延长至18天(p<0.0001)，这与所述药物在脑中的分子和细胞作用所带来的上述益处一致。
在先前的实验中，在K14小鼠中显示新生时(P1-P3)脑室内注射的GC可更多地延长中位存活，即延长至23天(Cabrera-Salazar等人(2010))。由于GC和GZ161都具有降低同一种糖鞘脂即GluCer的水平的潜力(GC通过降解GluCer；GZ161通过抑制GluCer的合成)，因此发明人还研究了GZ161与脑室内(ICV)给药的GC的组合所提供的存活益处能否好于任一单独药物所实现的存活益处。图14表明ICV GC(在P1、2和3)与每天IP GZ161的组合实现26天的中位存活，这显著大于单独的GZ161或单独的ICV GC(p＝0.0007)。因此，全身性给药的GZ161似乎与ICV GC具有累加性并提供额外的存活益处。
实施例126
出生前给药的GZ161不能增加K14小鼠的存活
由于发现K14小鼠脑中的GluSph水平在P1与正常值相比提高至少10倍并已证实GluSph在受nGD影响的小鼠和人类的脑中甚至在出生前就是增加的(Orvisky等人,Pediatric Research 48:233-237(2000))，因此研究了能否通过在子宫内用GZ161对K14小鼠进行治疗而得到存活益处。图15显示用GZ161对WT母体小鼠进行的治疗使新生小鼠脑中的GluCer水平降低～5倍(P0)，这提示GZ161可穿过血液/胎盘屏障。然而，向K14母鼠给药GZ161，然后用IP GZ161对所得幼仔进行治疗，这不能使存活延长超过出生后单独全身性给药GZ161的小鼠的存活(18天)(图14和16)。因此，这些数据与图14所示的结果一致并提示尽管GZ161可减少糖鞘脂和神经病理学，但是当前治疗方案不足以救护CNS。这些结果与发明人先前在该模型中使用脑室内注射的重组人葡萄糖脑苷脂酶所发现的结果(Cabrera-Salazar等人(2010))一致且共同提示糖鞘脂例如GluCer的更强烈和连续的消耗是进一步改善存活所需要的。
这些数据定性和定量地显示对新生K14小鼠的GZ161全身性(IP)给药显著减少底物负载，缓解所述疾病的病理学特征并延长中位寿命。当与ICV给药的rhGC组合时，全身性给药的GZ161使寿命得以累加延长，这提示与单独的任意单一疗法相比，上述组合在nGD患者中可能是较有效的。考虑到这些研究提示GZ161似乎可穿过BBB并抑制其靶标酶即葡萄糖基神经酰胺合酶，可合理假设的是，该分子还可用于治疗由于GluCer下游底物的累积而引起的其它LSD。
应该注意到的是，在当前研究中，在以下时间框架内向K14小鼠给药GZ161，在所述时间框架内GluCer和GluSph以与WT小鼠相比相对高的水平在正在发育的小鼠脑中不断产生(图9)(Brenkert等人,1972)。每天用IP GZ161进行的治疗成功地降低K14脑中的GluCer和GluSph水平，但是不能使其达到正常(图10)。有若干证据提示GluSph及其它溶血鞘脂例如半乳糖基鞘氨醇可通过启动炎性介质的产生而促进CNS病理学(Giri等人,Journal oflipid research 47:1478-1492(2006)和等人,Molecular and Cell Biology ofLipids 1582:168-174(2002))。GZ161使GluSph水平降低并同时使巨噬细胞/小神经胶质细胞和星形胶质细胞染色减少的能力(图11-13)与该假设一致。由于GluSph还具有已知的神经毒性(Schueler等人,Neurobiology of Disease 14:595-601(2003)；Orvisky等人,Molecular Genetics and Metabolism 76:262-270(2002)；Sun等人,Hum Mol Genet 19:1088-1097(2010)；和Pelled等人,Journal of Inherited Metabolic Disease 23:175-184(2000))，因此用GZ161进行的治疗不能使GluSph水平达到正常与在该模型中观察到GluSph作为较早死亡的潜在促进因子一致。
综上，本申请在K14小鼠模型中显示的临床前结果提示GZ161的给药可在2型和3型戈谢病患者中减轻疾病进展和神经病症状。然而，难以预测上述治疗措施在症状性2型患者中的潜在益处，这是因为已知他们的脑在出生前含有非常高水平的GluSph(Goker-Alpan等人,The Journal of Pediatrics 143:273-276(2003))。3型戈谢病可能较易于对治疗产生响应，这是因为GluSph的脑水平是较低的(Nilsson,J Neurochem 39:709-718(1982)，所述疾病的进展是较慢的，尽管是表型连续群中的一部分(Goker-Alpan等人(2003))且在一些情况下，患者可在神经病表型发作前通过突变分析来鉴别(Ida等人,Human Genetics 105:120-126(1999))。基于当前结果，似乎将需要及早的强力的措施来治疗这些患者。葡萄糖基神经酰胺合酶的小分子抑制剂可代表综合措施中的一个分支。
实施例127
用GZ452、GZ161和GZ638对雄性和雌性法布里病小鼠进行治疗的SMT
法布里病小鼠在～8月龄时开始治疗且如下治疗4个月：60mg/kg/天GZ452(Fab452@60mkd)、120mg/kg/天GZ452(Fab 452@120mkd)、20mg/kg/天GZ161(Fab 161@20mkd)和300mg/kg/天GZ638(Fab 638@300mkd)。对来自12月龄雄性和雌性法布里病小鼠的肾组织中的Gb3水平进行测试。如图17所示，与未治疗的对照(Fab UNT 12mo)相比，GZ161和GZ452显著降低Gb3在肾组织中的存在量。

Claims (10)

1.化合物在制备用于在需要所述治疗的受试者中治疗由葡萄糖基神经酰胺合酶(GCS)介导的疾病或病症或治疗其中涉及GCS的疾病或病症的药物中的用途，其中所述疾病或病症为癌症、代谢障碍、神经性疾病、引起肾脏肥大或增生的疾病(例如糖尿病性肾病)、引起高血糖症或高胰岛素血症的疾病、其中发生过度糖脂合成的疾病(例如动脉粥样硬化、多囊性肾病和肾脏肥大)、与巨噬细胞募集和活化相关的炎性疾病或障碍(例如类风湿性关节炎、克罗恩病、哮喘和脓毒症)、神经元损伤或肥胖症，
其中所述化合物由以下结构式表示：
或其药用盐或前药，其中：
n为1、2或3；
m为0或1；
p为0或1；
t为0、1或2；
y为1或2；
z为0、1或2；
E为S、O、NH、NOH、NNO2、NCN、NR、NOR或NSO2R；
当m为1时，X1为CR1，或当m为0时，X1为N；
X2为O、-NH、-CH2-、SO2、NH-SO2、CH(C1-C6)烷基或-NR2；
X3为O、-NH、-CH2-、CO、-CH(C1-C6)烷基、SO2NH、-CO-NH-或-NR3；
X4为CR4R5、CH2CR4R5或CH2-(C1-C6)烷基-CR4R5；
X5为直接键、O、S、SO2、CR4R5、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)烯基氧基；
R为(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C1-C6)烷基、(C2-C9)杂芳基(C1-C6)烷基；
R1为H、CN、(C1-C6)烷基羰基或(C1-C6)烷基；
R2和R3各自独立为-H、任选被一个或多个取代基所取代的(C1-C6)烷基，所述取代基选自卤素、(C1-C6)烷基、(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C1-C6)烷基(C6-C12)芳基、卤代(C6-C12)芳基和卤代(C2-C9)杂芳基，或任选地，当X2为-NR2且X3为-NR3时，R2和R3可与它们所连接的氮原子一起形成任选取代有一个或多个取代基的非芳族杂环，所述取代基选自卤素、(C1-C6)烷基、(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C1-C6)烷基(C6-C12)芳基、卤代(C6-C12)芳基和卤代(C2-C9)杂芳基；
R4和R5独立选自H、(C1-C6)烷基，或与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；
R6为-H、卤素、-CN、(C6-C12)芳基、(C6-C12)芳基氧基、(C1-C6)烷氧基；任选被一个至四个卤素或(C1-C6)烷基所取代的(C1-C6)烷基；
A1为(C2-C6)炔基；(C3-C10)环烷基、(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C2-C9)杂环烷基或苯并(C2-C9)杂环烷基，所述基团任选取代有一个或多个选自以下的取代基：卤素、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷基；(C1-C6)烯基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)二烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、硝基、CN、-OH、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷氧基；(C1-C6)烷氧基羰基及(C1-C6)烷基羰基；
A2为H、(C3-C10)环烷基、(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C2-C9)杂环烷基或苯并(C2-C9)杂环烷基，所述基团任选取代有一个或多个选自以下的取代基：卤素、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷基；(C1-C6)烯基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)二烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、O(C3-C6环烷基)、(C3-C6)环烷氧基、硝基、CN、OH、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷氧基；(C3-C6)环烷基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基羰基、(C1-C6)卤代烷基；
条件是n+t+y+z的总和不大于6；
条件是当p为0时，X2为NH-SO2且X3为NH；
条件是当n为1；t为0；y为1；z为1；X2为NH；E为O；X3为NH；A2为H且X5为直接键时，A1不为未取代的苯基、卤代苯基或异丙烯基苯基；
条件是当n为1；t为0；y为1；z为1；X2为O；E为O；X3为NH；A1为(C6-C12)芳基且X5为直接键；A2为H且R4为H时，R5不为环己基；及
条件是当n为1；t为0；y为1；z为1；X2为NH；E为O；X3为CH2；R4和R5都为氢；A2为H且X5为直接键时，A1不为未取代的苯基。
2.由以下结构式表示的化合物或其药用盐或前药：
其中
n、m、p、t、y、z、E、X1、X2、X3、X4、X5、R、R1、R2、R3、R6、A1和A2如权利要求1中所定义；及
其中R4和R5独立选自(C1-C6)烷基；
条件是n+t+y+z的总和不大于6；
条件是当p为0时，X2为NH-SO2且X3为NH；及
条件是当n为1；t为0；y为1；z为1；X2为NH；E为O；X3为NH；A2为H且X5为直接键时，A1不为未取代的苯基、卤代苯基或异丙烯基苯基。
3.由以下结构式表示的化合物或其药用盐或前药：
其中
n、m、p、t、y、z、E、X1、X2、X3、X4、R、R1、R2、R3、R6和A1如权利要求1中所定义；及
其中X5为直接键、O、SO2、CR4R5、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)烯基氧基；
R4和R5为H；及
A2为(C3-C10)环烷基、(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C2-C9)杂环烷基或苯并(C2-C9)杂环烷基，所述基团取代有一个或多个选自以下的取代基：卤素、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷基；(C1-C6)烯基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)二烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、O(C3-C6环烷基)、(C3-C6)环烷氧基、硝基、CN、OH、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷氧基；(C3-C6)环烷基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基羰基、(C1-C6)卤代烷基；
条件是n+t+y+z的总和不大于6；及
条件是当p为0时，X2为NH-SO2且X3为NH。
4.由以下结构式表示的化合物或其药用盐或前药：
其中
n、m、p、t、y、z、E、X1、X2、X3、X4、X5、R、R1、R2、R3、R6和A1如权利要求1中所定义；及
其中R4和R5中一个为H且另一个为(C1-C6)烷基；及
A2为(C3-C10)环烷基、(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C2-C9)杂环烷基或苯并(C2-C9)杂环烷基，所述基团取代有一个或多个选自以下的取代基：卤素、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷基；(C1-C6)烯基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)二烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、O(C3-C6环烷基)、(C3-C6)环烷氧基、硝基、CN、OH、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷氧基；(C3-C6)环烷基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基羰基、(C1-C6)卤代烷基；
条件是n+t+y+z的总和不大于6；及
条件是当p为0时，X2为NH-SO2且X3为NH。
5.由以下结构式表示的化合物或其药用盐或前药：
其中
n、m、p、t、y、z、E、X1、X2、X3、X4、X5、R、R1、R2、R3、R6和A1如权利要求1中所定义；及
其中R4和R5与它们所连接的碳一起形成螺(C3-C10)环烷基环或螺(C3-C10)环烷氧基环；及
A2为(C3-C10)环烷基、(C6-C12)芳基、(C2-C9)杂芳基、(C2-C9)杂环烷基或苯并(C2-C9)杂环烷基，所述基团取代有一个或多个选自以下的取代基：卤素、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷基；(C1-C6)烯基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)二烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、O(C3-C6环烷基)、(C3-C6)环烷氧基、硝基、CN、OH、任选被一个至三个卤素所取代的(C1-C6)烷氧基；(C3-C6)环烷基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基羰基、(C1-C6)卤代烷基；
条件是n+t+y+z的总和不大于6；及
条件是当p为0时，X2为NH-SO2且X3为NH。
6.化合物或其药用盐或前药，所述化合物由以下结构式表示：
7.化合物或其药用盐或前药，所述化合物由以下结构式表示：
8.权利要求2-7中任一项的化合物在制备用于在需要所述治疗的受试者中治疗由葡萄糖基神经酰胺合酶(GCS)介导的疾病或病症或治疗其中涉及GCS的疾病或病症的药物中的用途。
9.权利要求2-7中任一项的化合物在制备用于在被诊断患有溶酶体贮积病的受试者中降低葡萄糖基神经酰胺合酶(GCS)活性的药物中的用途，其中所述化合物单独或以与酶代替疗法的联合疗法形式给药。
10.权利要求2-7中任一项的化合物在制备用于在被诊断患有溶酶体贮积病的受试者中减少GCS衍生物质蓄积的药物中的用途，其中所述化合物单独或以与酶代替疗法的联合疗法形式给药。
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Families Citing this family (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112013023774B1 (pt) * 2011-03-18 2022-01-11 Genzyme Corporation Inibidores de glicosilceramida sintase
MA37975B2 (fr) * 2012-09-11 2021-03-31 Genzyme Corp Inhibiteurs de synthase de glucosylcéramide
AU2019222801B2 (en) * 2012-09-11 2021-02-18 Genzyme Corporation Glucosylceramide synthase inhibitors
JO3713B1 (ar) * 2013-03-15 2021-01-31 Genzyme Corp أشكال ملح (s)-كوينوكليدين-3-يل(2-(2-(4-فلوروفينيل)ثيازول-4-يل)بروبان-2-يل)كارباميت
SG11201506415XA (en) * 2013-03-15 2015-09-29 Genzyme Corp Method of preparing glucosylceramide synthase inhibitors
CN104418851A (zh) * 2013-09-02 2015-03-18 上海龙翔生物医药开发有限公司 奎宁环衍生物的制备方法及纯化方法
US20160361301A1 (en) * 2013-12-11 2016-12-15 Genzyme Corporation Glucosylceramide synthase inhibitors
RU2016152499A (ru) * 2014-05-30 2018-07-04 Драг Дискавери Ресеч Сентэ Новые соединения в качестве противотуберкулезных препаратов
WO2016126572A2 (en) 2015-02-02 2016-08-11 The Regents Of The University Of Michigan Glucosylceramide synthase inhibitors and therapeutic methods using the same
TW201642855A (zh) * 2015-03-10 2016-12-16 健臻公司 用於治療蛋白質病變之方法
CN108290894A (zh) * 2015-07-01 2018-07-17 西北大学 被取代的4-甲基-吡咯并[1,2-a]嘧啶-8-甲酰胺类化合物及其调节葡糖脑苷脂酶活性的用途
WO2017004405A1 (en) 2015-07-01 2017-01-05 Northwestern University Substituted quinazoline compounds and uses thereof for modulating glucocerebrosidase activity
AR107483A1 (es) 2016-01-29 2018-05-02 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Conjugado de enzimas terapéuticas
AU2017238769A1 (en) 2016-03-25 2018-11-15 Genzyme Corporation Biomarkers of proteopathies and uses thereof
EP3318277A1 (en) 2016-11-04 2018-05-09 Institut du Cerveau et de la Moelle Epiniere-ICM Inhibitors of glucosylceramide synthase for the treatment of motor neuron diseases
US11001891B2 (en) 2016-11-14 2021-05-11 Berg Llc Methods for treating Parkinson's disease
CA3047700A1 (en) 2016-12-28 2018-07-05 Minoryx Therapeutics S.L. Isoquinoline compounds, methods for their preparation, and therapeutic uses thereof in conditions associated with the alteration of the activity of beta galactosidase
CA3048357A1 (en) 2016-12-29 2018-07-05 Minoryx Therapeutics S.L. Heteroaryl compounds and their use
CN108341822B (zh) * 2017-01-23 2021-04-16 广州市恒诺康医药科技有限公司 Fxr受体调节剂及其制备方法和应用
US11498904B2 (en) * 2017-11-14 2022-11-15 Merck Sharp & Dohme Llc Substituted biaryl compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) inhibitors
EP3728265A1 (en) 2017-12-21 2020-10-28 BIAL - BioTech Investments, Inc. Crystalline substituted cyclohexyl pyrazolo[1,5-a]pyrimidinyl carboxamide compound and therapeutic uses thereof
JP7317721B2 (ja) * 2018-01-31 2023-07-31 武田薬品工業株式会社 複素環化合物
US10519157B2 (en) * 2018-02-09 2019-12-31 X-Cutag Therapeutics, Inc. Deuterated compounds for treating Fabry, Gaucher, Parkinson's and related diseases and conditions, and compositions and methods thereof
KR102342901B1 (ko) * 2018-11-22 2021-12-24 (주)프로스테믹스 엑소좀 및 이의 다양한 용도
KR102233530B1 (ko) * 2018-11-22 2021-03-31 (주)프로스테믹스 엑소좀 및 이의 다양한 용도
KR102342902B1 (ko) * 2018-11-22 2021-12-24 (주)프로스테믹스 엑소좀 및 이의 다양한 용도
SG11202107842QA (en) * 2019-02-04 2021-08-30 Genzyme Corp Methods for treating symptoms and disorders associated with lysosomal storage diseases
EP3920912A1 (en) 2019-02-04 2021-12-15 Genzyme Corporation Treatment of ciliopathies using inhibitors of glucosylceramide synthase (gcs)
WO2020193746A1 (en) 2019-03-28 2020-10-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for predicting the survival of patients suffering from melanoma
EP4005638A4 (en) * 2019-07-29 2023-07-05 Takeda Pharmaceutical Company Limited HETEROCYCLIC COMPOUND
JP2022553107A (ja) 2019-10-23 2022-12-21 ザ・リージェンツ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・ミシガン グルコシルセラミドシンターゼ阻害剤およびそれを使用する治療方法
WO2021096241A1 (en) * 2019-11-15 2021-05-20 Yuhan Corporation Novel compounds having inhibitory activity against glucosylceramide synthase or pharmaceutically acceptable salt thereof, processes for preparing the same, and pharmaceutical compositions comprising the same
KR20210059632A (ko) * 2019-11-15 2021-05-25 주식회사유한양행 신규의 2,3-다이하이드로-1h-인덴 또는 2,3-다이하이드로벤조퓨란 모이어티를 갖는 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법, 및 이를 포함하는 약학 조성물
KR20220150880A (ko) 2019-11-25 2022-11-11 게인 테라퓨틱스 에스에이 아릴 및 헤테로아릴 화합물, 및 갈락토세레브로시다제의 활성 변경과 관련된 병태에서의 치료 용도
EP4065563A1 (en) 2019-11-25 2022-10-05 Gain Therapeutics SA Heteroaryl compounds and therapeutic uses thereof in conditions associated with the alteration of the activity of beta-glucocerebrosidase
EP4100015A1 (en) 2020-02-03 2022-12-14 Gain Therapeutics SA Combination therapy for treating mps1
TW202142236A (zh) * 2020-02-03 2021-11-16 美商健臻公司 用於治療與溶體儲積症相關的神經症狀之方法
WO2021214771A1 (en) 2020-04-23 2021-10-28 The Israel Institute of Biological Research (IIBR) Glucosylceramide synthase inhibitors for prevention and treatment of viral diseases
WO2021221953A1 (en) 2020-04-28 2021-11-04 The Regents Of The University Of Michigan Pyridine inhibitors of glucosylceramide synthase and therapeutic methods using the same
TW202220648A (zh) 2020-07-24 2022-06-01 美商健臻公司 包含芬谷司他(venglustat)之醫藥組合物
BR112023022015A2 (pt) * 2021-05-11 2023-12-26 Green Cross Corp Novos compostos que têm atividade inibidora contra glucosilceramida sintase ou sal farmaceuticamente aceitável da mesma, processos para preparar os mesmos e respectivas composições farmacêuticas
WO2023042177A1 (en) 2021-09-20 2023-03-23 Gt Gain Therapeutics Sa Enantiomers of 5-((7-chloroisoquinolin-1-yl)amino)-n-(6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-yl)picolinamide
WO2023239892A1 (en) * 2022-06-10 2023-12-14 Arkuda Therapeutics Compounds for modulation of cd68 and uses thereof
KR20240057365A (ko) * 2022-10-24 2024-05-02 주식회사유한양행 다이메틸-2,3-다이하이드로-1h-인덴 유도체의 개선된 제조방법
WO2024090917A1 (en) * 2022-10-24 2024-05-02 Yuhan Corporation Novel salt of dimethyl-2,3-dihydro-1h-indene derivative and processes for preparing the same

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004007453A1 (en) * 2002-07-17 2004-01-22 Oxford Glycosciences (Uk) Ltd Piperidinetriol derivatives as inhibitors of glycosylceramide synthase
CN1751041A (zh) * 2003-02-21 2006-03-22 塔加西普特公司 3－取代的－2－(芳基烷基)－1－氮杂二环烷烃及其使用方法
WO2010091164A1 (en) * 2009-02-06 2010-08-12 Exelixis, Inc. Inhibitors of glucosylceramide synthase
CN103917094B (zh) * 2011-03-18 2016-11-09 建新公司 葡萄糖基神经酰胺合酶抑制剂

Family Cites Families (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BE640616A (zh) 1962-12-19
US3492397A (en) 1967-04-07 1970-01-27 Warner Lambert Pharmaceutical Sustained release dosage in the pellet form and process thereof
US4060598A (en) 1967-06-28 1977-11-29 Boehringer Mannheim G.M.B.H. Tablets coated with aqueous resin dispersions
US3538214A (en) 1969-04-22 1970-11-03 Merck & Co Inc Controlled release medicinal tablets
US4173626A (en) 1978-12-11 1979-11-06 Merck & Co., Inc. Sustained release indomethacin
BR8707474A (pt) * 1986-10-03 1988-09-13 Micro Motion Inc Medidor de velocidade de fluxo de massa de coriolis de densidade insensivel
AU611976B2 (en) 1987-12-24 1991-06-27 John Wyeth & Brother Limited Aroyl urea and carbamic acid derivatives of azabicyclo compounds
US5549892A (en) 1988-12-23 1996-08-27 Genzyme Corporation Enhanced in vivo uptake of glucocerebrosidase
US5236838A (en) 1988-12-23 1993-08-17 Genzyme Corporation Enzymatically active recombinant glucocerebrosidase
IT1228293B (it) * 1989-02-06 1991-06-07 Angeli Inst Spa Benzoderivati di composti eterociclici contenenti azoto.
US5272071A (en) 1989-12-22 1993-12-21 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Method for the modification of the expression characteristics of an endogenous gene of a given cell line
US5968502A (en) 1991-11-05 1999-10-19 Transkaryotic Therapies, Inc. Protein production and protein delivery
WO1995021820A1 (fr) * 1994-02-10 1995-08-17 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Nouveau derive du carbamate et composition correspondante
JPH08198751A (ja) * 1995-01-19 1996-08-06 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd カルバメート誘導体
WO1997017348A1 (en) * 1995-11-08 1997-05-15 American Home Products Corporation 1-azabicycloheptane derivatives and their pharmaceutical use
DE69835367T2 (de) 1997-10-29 2007-08-02 Genzyme Corp., Framingham Gentherapie für gaucher-krankheit
FR2791678B1 (fr) 1999-03-30 2001-05-04 Synthelabo Derives de 1,4-diazabicyclo [3.2.2] nonane-4-carboxylates et -carboxamides, leur preparation et leur application en therapeutique
GB0010955D0 (en) * 2000-05-05 2000-06-28 Novartis Ag Organic compounds
PE20020719A1 (es) * 2000-12-22 2002-10-11 Almirall Prodesfarma Ag Derivados de carbamato de quinuclidina como agentes antimuscarinicos m3
EP1231212B1 (en) * 2001-02-06 2006-12-20 Pfizer Products Inc. Pharmaceutical compositions for the treatment of disorders of the CNS and other disorders
JP2003267977A (ja) * 2002-03-14 2003-09-25 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd キヌクリジン誘導体
ES2203327B1 (es) * 2002-06-21 2005-06-16 Almirall Prodesfarma, S.A. Nuevos carbamatos de quinuclidina y composiciones farmaceuticas que los contienen.
JPWO2004011430A1 (ja) 2002-07-25 2005-11-24 アステラス製薬株式会社 ナトリウムチャネル阻害剤
SE0202598D0 (sv) * 2002-09-02 2002-09-02 Astrazeneca Ab Alpha-7 Nicotinic receptor agonists and statins in combination
ATE378048T1 (de) * 2002-12-06 2007-11-15 The Feinstein Inst Medical Res Hemmung von entzündungen unter verwendungvon alpha-7-rezeptor verbindenden cholinergen agonisten
GB0400812D0 (en) 2004-01-14 2004-02-18 Celltech R&D Ltd Novel compounds
JP2007186422A (ja) 2004-01-28 2007-07-26 Astellas Pharma Inc アリールスルフィド誘導体
AU2005258274A1 (en) * 2004-06-23 2006-01-05 The Feinstein For Medical Research Method of treating ileus by pharmacological activation of cholinergic receptors
EP1811991B1 (en) 2004-11-10 2018-11-07 Genzyme Corporation Treatment of type 2 diabetes using inhibitors of glycosphingolipid synthesis
US20090318491A1 (en) * 2006-01-27 2009-12-24 Yale Univeristy Cytisine and Acetylcholine Analogs and Methods of Treating Mood Disorders
US7840109B2 (en) * 2006-08-14 2010-11-23 Adc Telecommunications, Inc. Factory spliced cable assembly
GB2466912B (en) * 2007-11-29 2012-01-04 Hospital For Sick Children Compositions and methods for treating lysosomal disorders
US8389517B2 (en) * 2008-07-28 2013-03-05 Genzyme Corporation Glucosylceramide synthase inhibition for the treatment of collapsing glomerulopathy and other glomerular disease
WO2010015816A2 (en) * 2008-08-06 2010-02-11 Summit Corporation Plc Treatment of lysosomal storage disorders and other proteostatic diseases
EP2154136A1 (en) * 2008-08-08 2010-02-17 CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. Quinuclidine carbonate derivatives and medicinal compositions thereof
WO2010091104A1 (en) * 2009-02-06 2010-08-12 Exelixis, Inc. Glucosylceramide synthase inhibitors
US20100242354A1 (en) * 2009-06-09 2010-09-30 Sundrop Fuels, Inc. Systems and methods for reactor chemistry and control
LT3482767T (lt) 2009-08-28 2022-01-10 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Didinamos dozės fermentų pakaitinė terapija, skirta rūgštinės sfingomielinazės nepakankamumui gydyti

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004007453A1 (en) * 2002-07-17 2004-01-22 Oxford Glycosciences (Uk) Ltd Piperidinetriol derivatives as inhibitors of glycosylceramide synthase
CN1751041A (zh) * 2003-02-21 2006-03-22 塔加西普特公司 3－取代的－2－(芳基烷基)－1－氮杂二环烷烃及其使用方法
WO2010091164A1 (en) * 2009-02-06 2010-08-12 Exelixis, Inc. Inhibitors of glucosylceramide synthase
CN103917094B (zh) * 2011-03-18 2016-11-09 建新公司 葡萄糖基神经酰胺合酶抑制剂

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