BR112013023774B1 - Inibidores de glicosilceramida sintase - Google Patents

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Abstract

inibidores de glicosilceramida sintase. a presente invenção refere-se aos inibidores de glicosilceramida sintase (gcs) úteis para o tratamento de doenças metabólicas, tais como doenças de armazenagem lisossômica, sozinhos ou em combinação com a terapia de reposição de enzima, e para o tratamento do câncer.

Description

ANTECEDENTE DA INVENÇÃO Campo da Invenção
[0001] A presente invenção geralmente refere-se ao campo de terapêuticos para câncer e doenças metabólicas. Mais especificamente, a invenção refere-se a inibidores de glicosilceramida sintase (GCS) úteis para o tratamento de doenças metabólicas, tais como doenças de armazenamento lisossômico, sozinhos ou em combinação com terapia de reposição de enzima, e ao tratamento de câncer.
Sumário da Técnica Relacionada
[0002] Glicosilceramida sintase (GCS) é uma enzima principal que catalisa a etapa de glicosilação inicial da biossíntese de glicoesfingolipídios baseados em glicosilceramida (GSLs), isto é, por meio da transferência principal de glicose da UDP-glicose (UDP-Glc) para ceramida para formar a glicosilceramida (Veja Fig. 1). GCS é uma proteína integral tipo III, transmembrana localizada no Golgi cis/médio. Glicoesfingolipídios (GSLs) são acreditados ser integral para a dinâmica de muitos eventos de membrana celular, incluindo interações, sinalização e tráfego celulares. A síntese de estruturas de GSL foi mostrada (veja, Yamashita e outro, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1999, 96(16), 9142-9147) ser essencial para o desenvolvimento embrionário e para a diferenciação de alguns tecidos. A ceramida desempenha um papel central no metabolismo de esfingolipídio e a subregulação da atividade de GCS mostrou ter efeitos marcados no padrão de esfingolipídio com a expressão diminuída de glicoesfingolipídios. Esfingolipídios (SLs) têm um papel biomodulador nas condições cardiovasculares fisiológicas, bem como patológicas. Em particular, os esfingolipídios e suas enzimas reguladoras parecem desempenhar um papel nas respostas adaptáveis para hipóxia crônica no coração de rato neonatal (veja, El Alwanit e outro, Prostaglandins & Other Lipid Mediators 2005, 78(1-4), 249-263).
[0003] Inibidores de GCS foram propostos para o tratamento de uma variedade de doenças (veja, por exemplo, WO2005068426). Tais tratamentos incluem o tratamento de doenças de armazenamento de glicolipídio (por exemplo, doenças de Tay Sachs, Sandhoffs, deficiência do ativador de GM2, gangliosidose GM1 e doença de Fabry), doenças associadas com o acúmulo de glicolipídio (por exemplo, doença de Gaucher; Miglustat (Zavesca), um inibidor de GCS, foi aprovado para terapia em pacientes com doença de Gaucher tipo 1, veja, Treiber e outro, Xenobiotica 2007, 37(3), 298-314), doenças que causam hipertrofia renal ou hiperplasia tal como nefropatia diabética; doenças que causam hiperglicemia ou hiperinsulemia; cânceres nos quais a síntese de glicolipídio é anormal, doenças infecciosas causadas por organismos que usam glicolipídios de superfície de célula como receptores, doenças infecciosas nas quais a síntese de glicosilceramida é essencial ou importante, doenças nas quais a síntese de glicosilceramida é essencial ou importante, doenças nas quais a síntese de glicolipídio excessiva ocorre (por exemplo, aterosclerose, doença renal policística e hipertrofia renal), distúrbios neuronais, lesão neuronal, doenças ou distúrbios inflamatórios associados com recrutamento e ativação de macrófago (por exemplo, artrite reumatoide, doença de Crohn, asma e sepse) e diabetes mellitus e obesidade (veja, WO 2006053043).
[0004] Em particular, foi mostrado que a superexpressão de GCS está implicada na resistência à múltiplos fármacos e rompe a apoptose induzida por ceramida. Por exemplo, Turzanski e outro, (Experimental Hematology 2005, 33 (1), 62-72 mostrou que a ceramida induz apoptose nas células de leucemia mieloide aguda (AML) e que a glicoproteína P (p-gp) confere resistência à apoptose induzida por ceramida, com modulação da série de reação de ceramida-glicosilceramida preparando uma contribuição marcada para esta resistência em células TF-1. Desse modo, os inibidores de GCS podem ser úteis para o tratamento de distúrbios proliferativos induzindo-se a apoptose em células doentes.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[0005] A presente invenção refere-se a um composto representado pela seguinte fórmula estrutural,
Figure img0001
ou um sal farmaceuticamente aceitável ou profármaco do mesmo, em que: n é 1, 2 ou 3; m é 0 ou 1; p é 0 ou 1; t é 0, 1 ou 2; y é 1 ou 2; z é 0, 1 ou 2; E é S, O, NH, NOH, NNO2, NCN, NR, NOR ou NSO2R;
[0006] X1 é CR1 quando m for 1 ou N quando m for 0;
[0007] X2 é O, -NH, -CH2-, SO2, NH-SO2;CH(CI-C6) alquila ou -NR2 ;
[0008] X3 é O, -NH, -CH2-, CO, - CH(C1-C6) alquila, SO2NH, -CO- NH- ou -NR3;
[0009] X4 é CR4R5, CH2 CR4R5 ou CH2 -(C1-C6) alquil-CR4R5;
[00010] X5 é uma ligação direta, O, S, SO2, CR4R5; (C1-C6)alquila, (C1-C6)alquilóxi, (C1-C6)alquenila, (C1-C6)alquenilóxi;
[00011] R é (C6-C12)arila, (C2-C9)heteroarila, (C1-C6)alquila, (C2- C9)heteroaril(C1-C6)alquila;
[00012] R1 é H, CN, (C1-C6)alquilcarbonila, ou (C1-C6)alquila;
[00013] R2 e R3 são cada qual independentemente -H, (C1- C6)alquila opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, (C1-C6)alquila, (C6-C12)arila, (C2-C9)heteroarila, (C1-C6)alquil(C6-C12)arila, halo(C6- Ci2)arila, e halo(C2-C9)heteroarila, ou opcionalmente quando X2 for - NR2 e X3 for -NR3, R2 e R3 podem ser empregados juntamente com os átomos de nitrogênio aos quais eles são ligados para formar um anel heterocíclico não aromático opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir de halogênio, (C1-C6)alquila, (C6- C12)arila, (C2-C9)heteroarila, (C1-C6)alquil(C6-C12)arila, halo(C6-C12)arila, e halo(C2-C9)heteroarila;
[00014] R4 e R5 são independentemente selecionados a partir de H, (C1-C6)alquila, ou empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi;
[00015] R6 é -H, halogênio, -CN, (C6-C12)arila, (C6-C12)arilóxi, (C1- C6)alquilóxi;
[00016] (C1-C6)alquila opcionalmente substituída por um a quatro halo ou (C1-C6)alquila;
[00017] A1 é (C2-C6)alquinila; (C6-C12)arila, (C2-C9)heteroarila, (C2- C9)heterocicloalquila ou benzo(C2-C9)heterocicloalquila opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em halo, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída por um a três halo; (C1-C6)alquenila, amino, (C1-C6)alquilamino, (C1-C6) dialquilamino, (C1-C6)alcóxi, nitro, CN, -OH, (C1-C6)alquilóxi opcionalmente substituído por um a três halo; (C1-C6)alcoxicarbonila, e (C1-C6) alquilcarbonila;
[00018] A2 é H, (C6-C12)arila, (C2-C9)heteroarila, (C2- C9)heterocicloalquila ou benzo(C2-C9)heterocicloalquila opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em halo, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída por um a três halo; (C1-C6)alquilenila, amino, (C1-C6) alquilamino, (C1- C6)dialquilamino, (C1-C6)alcóxi, O(C3-C6 cicloalquil), (C3-C6) cicloalcóxi, nitro, CN, OH, (C1-C6)alquilóxi opcionalmente substituído por um a três halo; (C3-C6) cicloalquila, (C1-C6) alcoxicarbonila, (C1-C6) alquilcarbonila, (C1-C6) haloalquila;
[00019] com a condição que a soma de n + t + y + z não seja maior que 6;
[00020] com a condição que quando p for 0; X2 seja NH-SO2 e X3 seja NH;
[00021] com a condição que quando n for 1; t seja 0; y seja 1; z seja 1; X2 seja NH; E seja O; X3 seja NH; A2 seja H e X5 seja uma ligação direta; A1 não seja fenila não substituída, halofenila ou isopropenila fenila;
[00022] com a condição que quando n for 1; t seja 0; y seja 1; z seja 1; X2 seja O; E seja O; X3 seja NH; A1 seja (C6-C12)arila e X5 seja uma ligação direta; A2 seja H e R4 ou H em seguida R5 não seja ciclo-hexila; e
[00023] com a condição que quando n for 1; t seja 0; y seja 1; z seja 1; X2 seja NH; E seja O; X3 seja CH2; R4 e R5 sejam igualmente hidrogênio; A2 seja H e X5 seja uma ligação direta; em seguida A1 não seja fenila não substituída. Certos aspectos da invenção incluem administrar o composto anterior a um paciente como parte da terapia de combinação que inclui uma terapia de reposição de enzima (ERT) e terapia de molécula pequena (SMT) para reduzir a quantidade de e/ou inibir o acúmulo de substrato em um paciente diagnosticado com uma doença de armazenamento lisossômico.
[00024] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; t é 0; y é 1 e z é 1.
[00025] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; t é 1; y é 1 e z é 1.
[00026] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 2; t é 0; y é 1 e z é 1.
[00027] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 2; t é 1; y é 1 e z é 1.
[00028] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 3; t é 0; y é 1 e z é 1.
[00029] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; t é 2; y é 1 e z é 1.
[00030] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; t é 0; y é 1 e z é 0.
[00031] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; t é 1; y é 1 e z é 0.
[00032] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I,em que n é 2; t é 0; y é 1 e z é 0.
[00033] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 2; t é 1; y é 1 e z é 0.
[00034] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 3; t é 0; y é 1 e z é 0.
[00035] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; t é 2; y é 1 e z é 0.
[00036] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; t é 1; y é 2 e z é 0.
[00037] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 2; t é 0; y é 2 e z é 0.
[00038] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que m é 1 e X1 é CR1.
[00039] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que m é 0 e X1 é N.
[00040] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que m é 1; E é O; X2 é O e X3 ou NH.
[00041] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que m é 1; E é O; X2 é NH e X3 ou NH.
[00042] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que m é 1; E é O; X2 é CH2 e X3 ou NH.
[00043] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que m é 1; E é O; X2 é NH e X3 ou CH2.
[00044] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que m é 1; E é S; X2 é NH e X3 ou NH.
[00045] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que m é 0; E é O; X1 é NH e X3 ou NH.
[00046] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que m é 1; E é O; X2 é NH e X3 ou CO-NH.
[00047] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que m é 1; p é 0; X2 é NH-SO2 e X3 ou NH.
[00048] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que R4 e R5 são cada qual (C1-C6)alquila ou empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)ciclo- alquila ou um anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi.
[00049] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que R4 e R5 são cada qual metila.
[00050] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila.
[00051] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro ciclopropila.
[00052] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi.
[00053] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A1 é (C2-C6)alquinila ou (C6-C12)arila.
[00054] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A1 é (C2-C9)heteroarila.
[00055] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A1 é tiofene, tiazol, isotiazol, furano, oxazol, isoxazol, pirrol, imidazol, pirazol, triazol, piridina, pimiridina, piridazina, indol, benzotiazol, benzoisoxazol, benzopirazol, benzoimidazol, benzofurano, benzooxazol ou benzoisoxazol.
[00056] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A1 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[00057] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A1 é pirrolidinila, tetra-hidrofuranila, di-hidrofuranila, tetra-hidropiranila, piranila, tiopiranila, aziridinila, azetidinila, oxiranila, metilenodioxila, cromenila, barbiturila, isoxazolidinila, 1,3-oxazolidin-3- ila, isotiazolidinila, 1,3-tiazolidin-3-ila, 1,2-pirazolidin-2-ila, 1,3- pirazolidin-1-ila, piperidinila, tiomorfolinila, 1,2-tetra-hidrotiazin-2-ila, 1,3-tetra-hidrotiazin-3-ila, tetra-hidrotiadiazinila, morfolinila, 1,2-tetra- hidrodiazin-2-ila, 1,3-tetra-hidrodiazin-1-ila, tetra-hidroazepinila, piperazinila, piperizin-2-onila, piperizin-3-onila, cromanila, 2-pirrolinila, 3-pirrolinila, imidazolidinila, 2-imidazolidinila, 1,4-dioxanila, 8- azabiciclo[3.2.1]octanila, 3-azabiciclo[3.2.1]octanila, 3,8- diazabiciclo[3.2.1]octanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5- diazabiciclo[2.2.2]octanila, octa-hidro-2H-pirido[1,2-a]pirazinila, 3- azabiciclo[4.1.0]heptanila, 3-azabiciclo[3.1.0]hexanila, 2- azaespiro[4.4]nonanila, 7-oxa-1-aza-espiro[4.4]nonanila, 7- azabiciclo[2.2.2]heptanila ou octa-hidro-1H-indolila.
[00058] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A1 é benzo(C2-C9)heterocicloalquila.
[00059] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A1 é 2,3-di-hidrobenzo[b][1,4] dioxina ou 2,2- difluorobenzo[d][1,3]dioxol.
[00060] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que R6 é H.
[00061] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, X5 é uma ligação direta.
[00062] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, X5 é a CR4R5.
[00063] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que R4 e R5 são cada qual metila.
[00064] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila.
[00065] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro ciclopropila.
[00066] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi.
[00067] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A2 é (C6-C12)arila.
[00068] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A2 é (C2-C9)heteroarila.
[00069] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A2 é piridina.
[00070] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[00071] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A2 é pirrolidinila, tetra-hidrofuranila, di-hidrofuranila, tetra-hidropiranila, piranila, tiopiranila, aziridinila, azetidinila, oxiranila, metilenodioxila, cromenila, barbiturila, isoxazolidinila, 1,3-oxazolidin-3- ila, isotiazolidinila, 1,3-tiazolidin-3-ila, 1,2-pirazolidin-2-ila, 1,3- pirazolidin-1-ila, piperidinila, tiomorfolinila, 1,2-tetra-hidrotiazin-2-ila, 1,3-tetra-hidrotiazin-3-ila, tetra-hidrotiadiazinila, morfolinila, 1,2-tetra- hidrodiazin-2-ila, 1,3-tetra-hidrodiazin-1-ila, tetra-hidroazepinila, piperazinila, piperizin-2-onila, piperizin-3-onila, cromanila, 2-pirrolinila, 3-pirrolinila, imidazolidinila, 2-imidazolidinila, 1,4-dioxanila, 8- azabiciclo[3.2.1]octanila, 3-azabiciclo[3.2.1]octanila, 3,8- diazabiciclo[3.2.1]octanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5- diazabiciclo[2.2.2]octanila, octa-hidro-2H-pirido[1,2-a]pirazinila, 3- azabiciclo[4.1.0]heptanila, 3-azabiciclo[3.1.0]hexanila 2- azaespiro[4.4]nonanila, 7-oxa-1-aza-espiro[4.4]nonanila, 7- azabiciclo[2.2.2]heptanila ou octa-hidro-1H-indolila.
[00072] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A2 é benzo(C2-C9)heterocicloalquila.
[00073] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, onde R1 é hidrogênio ou metila.
[00074] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00075] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00076] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[00077] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[00078] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00079] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00080] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00081] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00082] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[00083] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[00084] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00085] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00086] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00087] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00088] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[00089] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[00090] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00091] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00092] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00093] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00094] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[00095] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[00096] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00097] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00098] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[00099] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000100] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000101] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000102] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000103] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000104] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000105] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000106] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000107] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000108] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000109] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000110] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000111] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000112] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000113] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000114] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000115] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000116] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000117] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000118] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000119] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000120] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000121] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000122] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000123] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000124] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6- C12)arila.
[000125] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6- C12)arila.
[000126] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000127] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000128] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000129] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6- C12)arila.
[000130] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000131] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000132] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000133] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6- C12)arila.
[000134] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000135] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000136] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000137] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6- C12)arila.
[000138] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000139] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000140] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000141] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6- C12)arila.
[000142] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000143] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000144] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000145] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6- C12)arila.
[000146] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000147] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000148] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000149] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000150] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000151] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000152] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000153] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6- C12)arila.
[000154] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000155] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000156] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000157] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000158] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000159] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000160] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000161] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000162] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000163] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000164] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000165] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000166] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000167] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000168] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000169] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000170] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000171] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000172] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000173] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000174] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000175] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000176] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000177] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000178] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000179] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000180] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000181] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000182] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heterocicloalquila.
[000183] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heterocicloalquila.
[000184] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000185] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heterocicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000186] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000187] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000188] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000189] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000190] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000191] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000192] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000193] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000194] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000195] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000196] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000197] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000198] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000199] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000200] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000201] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000202] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000203] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000204] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000205] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000206] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000207] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000208] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000209] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000210] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000211] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000212] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000213] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000214] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000215] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000216] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000217] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000218] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000219] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000220] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000221] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000222] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000223] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000224] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000225] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000226] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000227] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000228] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000229] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000230] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6-C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000231] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C6- C12)arila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000232] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000233] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C6-C12)arila.
[000234] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000235] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3- C10)cicloalquila.
[000236] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3- C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000237] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; p é 1; E é O; X2 é O; X3 é NH; R1 é H; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000238] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000239] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3- C10)cicloalquila.
[000240] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000241] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000242] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000243] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3- C10)cicloalquila.
[000244] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000245] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CH2; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000246] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000247] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3- C10)cicloalquila.
[000248] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000249] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é CH2; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000250] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000251] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3- C10)cicloalquila.
[000252] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000253] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é S; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000254] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000255] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3- C10)cicloalquila.
[000256] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000257] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é SO2; X2 é NH; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000258] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000259] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000260] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3- C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000261] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é N; m é 0; E é O; X3 é NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000262] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2-C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000263] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C2- C9)heteroarila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C3- C10)cicloalquila.
[000264] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são empregados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados para formar um anel de espiro (C3-C10)cicloalquila ou anel de espiro (C3-C10)cicloalcóxi; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3-C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2-C9)heteroarila.
[000265] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que n é 1; 2 ou 3; t é 0, 1 ou 2; y é 0 ou 1; z é 0, 1 ou 2; X1 é CR1; m é 1; E é O; X2 é NH; X3 é CO-NH; R4 e R5 são cada qual independentemente metila; R6 é um hidrogênio ou metila; A1 é (C3- C10)cicloalquila; X5 é uma ligação direta, O é CR4R5 e A2 é (C2- C9)heteroarila.
[000266] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A1 é (C3-C10)cicloalquila.
[000267] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, em que A2 é (C3-C10)cicloalquila.
[000268] A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou profármaco do mesmo, selecionado a partir do grupo que consiste em: 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[2-(2,4'-difluorobifenil-4-il)propan- 2-il]carbamato; 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{2-[4-(1,3-benzotiazol-6- il)fenil]propan-2-il}carbamato; 1-azabiciclo[3.2.2]non-4-il{1-[5-(4-fluorofenil)piridin-2- il]ciclopropil}carbamato; 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{1-[3-(4- fluorofenóxi)fenil]ciclopropil}carbamato; 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{1-[4-(1,3-benzotiazol-5- il)fenil]ciclopropil}carbamato; 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[1-(4'-flúor-3'-metoxibifenil- 4il)ciclopropil]carbamato; 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[3-(4'-fluorobifenil-4-il)oxetan-3- il]carbamato; 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{1-[6-(4-fluorofenóxi)piridin-2- il]ciclopropil}carbamato; 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[3-(4'-fluorobifenil-4-il)pentan-3- il]carbamato; 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{2-[2-(4-fluorofenil)-2H-indazol-6- il]propan-2 il}carbamato; 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{2-[2-(1H-pirrol-1-il)piridin-4- il]propan-2-il}carbamato; 1-(3-etil-1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)-3-[1-(4'-fluorobifenil-4- il)ciclopropil]ureia; N-(1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)-N'-[1-(4'-fluorobifenil- 4il)ciclopropil]ethanediamida; 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-(1- {4[(4,4difluorociclohexil)oxi]fenil}ciclopropil) carbamato; 1-(4-metil-1-azabiciclo[3.2.2]non-4-il)-3-[1-(5-fenilpiridin-2- il)ciclopropil]ureia; 1-[1-(4'-fluorobifenil-4-il)ciclopropil]-1-metil-3-(3-metil-1- azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)ureia; 1-[1-(4'-fluorobifenil-4-il)ciclopropil]-1-metil-3-(3-metil-1- azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)ureia; 1-{2-[4'-(2-metoxietóxi)bifenil-4-il]propan-2-il}-3-(3-metil-1- azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)ureia; 2-(1-azabiciclo[3.2.2]non-4-il)-N-[1-(5-fenilpiridin-2- il)ciclopropil]acetamida; 3-(4'-fluorobifenil-4-il)-3-metil-N-(4-metil-1- azabiciclo[3.2.2]non-4-il)butanamida; diamidaN-[2-(bifenil-4-il)propan-2-il]-N’-(3-metil-1- azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)sulfúrica; diamidaN-[2-(4’-fluorobifenil-4-il)propan-2-il]-N’-(3-metil-1- azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)sulfúrica; 1-(3-butil-1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)-3-{2-[1-(4-fluorofenil)- 1H-pirazol-4-il]propan-2-il}ureia; 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[4-(4-fluorofenil)-2-metilbut-3-in-2- il]carbamato; 1-(3-butil-1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)-3-[4-(4-fluorofenil)-2- metilbut-3-in-2-il]ureia; N-[1-(4'-fluorobifenil-4-il)ciclopropil]-1,4- diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida; 1-(2-(4'-flúor-[1,1'-bifenil]-4-il)propan-2-il)-3-(3-metil-1- azabiciclo[3.2.2]nonan-3-il)ureia; 1-(2-(4'-flúor-[1,1'-bifenil]-4-il)propan-2-il)-3-(4-metil-1- azabiciclo[4.2.2]decan-4-il)ureia; 1-(2-(4'-flúor-[1,1'-bifenil]-4-il)propan-2-il)-3-(3-metil-1- azabiciclo[4.2.2]decan-3-il)ureia; e 1-(2-(4'-flúor-[1,1'-bifenil]-4-il)propan-2-il)-3-(5-metil-1- azabiciclo[4.2.2]decan-5-il)urea.
[000269] A presente invenção também refere-se a uma composição farmacêutica para tratar uma doença ou distúrbio mediado por glicosilceramida sintase (GCS) ou uma doença ou distúrbio em que GCS está implicada em um indivíduo em necessidade de tal tratamento compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz do composto de Fórmula I.
[000270] A presente invenção também se refere a um método para tratar uma doença ou distúrbio mediado por glicosilceramida sintase (GCS) ou uma doença ou distúrbio em que a GCS está implicada em um indivíduo em necessidade de tal tratamento compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz do composto de Fórmula I.
[000271] A presente invenção também se refere a um método para tratar uma doença ou distúrbio tal como câncer.
[000272] A presente invenção também se refere a um método para tratar uma doença ou distúrbio tal como um distúrbio metabólico.
[000273] A presente invenção também se refere a um método para tratar uma doença ou distúrbio tal como uma doença neuropática.
[000274] A presente invenção também se refere a um método em que a doença neuropática é doença de Alzheimer.
[000275] A presente invenção também se refere a um método em que a doença neuropática é doença de Parkinson.
[000276] A presente invenção também se refere ao método para induzir atividade catalítica de glicosilceramida sintase diminuída em uma célula, in vitro, compreendendo contatar a célula com uma quantidade de efeito do composto de Fórmula I.
[000277] A presente invenção também se refere ao composto de fórmula I, representado pela seguinte fórmula estrutural,
Figure img0002
ou um sal farmaceuticamente aceitável ou profármaco do mesmo.
[000278] A presente invenção também se refere ao composto de fórmula I, representado pela seguinte fórmula estrutural,
Figure img0003
ou um sal farmaceuticamente aceitável ou profármaco do mesmo.
[000279] A presente invenção também se refere a um método de tratar um indivíduo diagnosticado como tendo uma doença de armazenamento lisossômico, o método incluindo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz do composto de fórmula I, e em certas modalidades o composto é representado pela seguintes fórmulas estruturais,
Figure img0004
ou um sal farmaceuticamente aceitável ou profármaco do mesmo, ou
Figure img0005
ou um sal farmaceuticamente aceitável ou profármaco do mesmo.
[000280] Em certas modalidades da invenção, a doença de armazenamento lisossômico resulta de um defeito na via de glicoesfingolipídio.
[000281] Em certas modalidades da invenção, a doença de armazenamento lisossômico é Gaucher, Fabry, GM1-gangliosidose, Deficiência do Ativador de GM2, Tay-Sachs ou Sandhoff.
[000282] A presente invenção também se refere a um método de tratar um indivíduo diagnosticado como tendo uma doença de armazenamento lisossômico, o método incluindo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz do composto de fórmula I e administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma enzima lisossômica.
[000283] Em certas modalidades da invenção, a enzima lisossômica é glicocerebrosidase, alfa-galactosidase A, Hexosaminidase A, Hexosaminidase B ou GM1-ganglioside-β-galactosidase.
[000284] Em certas modalidades da invenção, o indivíduo tem níveis elevados de um substrato lisossômico antes do tratamento e logo que passando por tratamento o indivíduo tem quantidades combinadas mais baixas do substrato lisossômico na urina e plasma do que um indivíduo tratado com a enzima lisossômica ou apenas composto.
[000285] Em certas modalidades da invenção, o substrato é globotriaosilceramida ou liso-globotriaosilceramida, e combinações dos mesmos.
[000286] A presente invenção também se refere a um método de reduzir a atividade de glicosilceramida sintase (GCS) em um indivíduo diagnosticado como tendo uma doença de armazenamento lisossômico, incluindo administrar ao paciente uma quantidade eficaz do composto de fórmula I, sozinho ou como uma terapia de combinação com uma terapia de reposição de enzima.
[000287] A presente invenção também se refere a um método de reduzir o acúmulo de um material derivado de GCS em um indivíduo diagnosticado como tendo uma doença de armazenamento lisossômico, incluindo administrar ao paciente uma quantidade eficaz do composto de fórmula I, ou sozinho ou como uma terapia de combinação com uma terapia de reposição de enzima.
[000288] Esta invenção fornece um método de terapia de combinação para o tratamento de um indivíduo diagnosticado como tendo uma doença de armazenamento lisossômico compreendendo alternar entre a administração de uma terapia de reposição de enzima e uma terapia de molécula pequena.
[000289] Esta invenção fornece um método de terapia de combinação para o tratamento de um indivíduo diagnosticado como tendo uma doença de armazenamento lisossômico que compreende simultaneamente administrar uma terapia de reposição de enzima e uma terapia de molécula pequena.
[000290] Nas várias terapias de combinação da invenção, será entendido que a administração da terapia de molécula pequena pode ocorrer antes de, simultaneamente com, ou depois da administração da terapia de reposição de enzima. Semelhantemente, a administração da terapia de reposição de enzima pode ocorrer antes de, simultaneamente com, ou depois da administração da terapia de molécula pequena.
Definições
[000291] Quando aqui usado, o termo "sal farmaceuticamente aceitável" significa um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável ou um sal de adição de base farmaceuticamente aceitável de um composto atualmente descrito que pode ser administrado sem qualquer(quaisquer) efeito(s) biológico(s) resultante(s) indese- jável(áveis) ou qualquer(quaisquer) interação(ções) danosa(s) resultante(s) com qualquer outro componente de uma composição farmacêutica em que pode estar contida.
[000292] Quando aqui usado, o termo "profármaco" significa um derivado farmacológico de uma molécula de fármaco de origem que requer a biotransformação, espontânea ou enzimática, dentro do organismo para liberar o fármaco ativo. Por exemplo, profármacos são variações ou derivados dos compostos de Fórmula I que têm grupos cliváveis sob certas condições metabólicas, que quando clivadas, tornam-se os compostos de Fórmula I. Tais profármacos são em seguida farmaceuticamente ativos in vivo, quando eles sofrem solvólise sob condições fisiológicas ou sofrem degradação enzimática. Os compostos de profármaco aqui podem ser chamados únicos, duplos, triplos, etc., dependendo do número de etapas de biotransformação exigidas para liberar o fármaco ativo dentro do organismo, e o número de funcionalidades presentes em uma forma tipo precursora. As formas de profármaco frequentemente oferecem as vantagens de solubilidade, compatibilidade de tecido, ou liberação atrasada no organismo mamífero (Veja, Bundgard, Design of Prodrugs, pp. 7-9, 21-24, Elsevier, Amsterdam 1985 e Silverman, The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action, pp. 352-401, Academic Press, San Diego, Calif., 1992). Profármacos geralmente conhecidos na técnica incluem derivados de ácido conhecidos, tais como, por exemplo, ésteres preparados por reação dos ácidos de origem com um álcool adequado, amidas preparadas por reação do composto ácido de origem com um grupo básico, de amina reagido para formar um derivado de base acilada, etc., Claro, outros derivados de profármaco podem ser combinados com outros aspectos descritos aqui para realçar a biodisponibilidade. Como tais, aqueles de experiência na técnica apreciarão que certos compostos agora descritos que têm grupos amino livre, amido, hidróxi ou carboxílicos podem ser convertidos em profármacos. Profármacos incluem compostos que têm um resíduo de aminoácido, ou uma cadeia de polipeptídeo de dois ou mais (por exemplo, dois, três ou quatro) resíduos de aminoácido que são covalentemente ligados por ligações de peptídeo em três grupos amino livre, hidróxi ou de ácido carboxílico dos compostos presentemente descritos. Os resíduos de aminoácido incluem os 20 aminoácidos de ocorrência natural designados por símbolos de três letras e da mesma forma incluem 4-hidroxiprolina, hidroxilisina, demosina, isodemosina, 3-metilistidina, norvalina, beta- alanina, ácido gama-aminobutírico, citrulina, homocisteína, homosserina, ornitina e metionina sulfona. Profármacos também incluem compostos que têm uma porção de carbonato, carbamato, amida ou alquil éster covalentemente ligada a quaisquer dos substituintes anteriores descritos aqui.
[000293] Quando aqui usado, o termo "(C1-C6)alquila" significa um radical livre linear ou ramificado saturado que consiste essencialmente em 1 a 6 átomos de carbono e um número correspondente de átomos de hidrogênio. Grupos (C1-C6)alquila exemplares incluem metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, etc.. Claro, outros grupos (C1- C6)alquila ficará facilmente evidente para aqueles de experiência na técnica dado o benefício da presente descrição.
[000294] Quando aqui usado, o termo "(C3-C10)cicloalquila" significa um radical livre saturado não aromático que forma pelo menos um anel que consiste essencialmente em 3 a 10 átomos de carbono e um número correspondente de átomos de hidrogênio. Como tais, grupos (C3-C10)cicloalquila podem ser monocíclicos ou multicíclicos. Anéis individuais de tais grupos cicloalquila multicíclicos podem ter conectividades diferentes, por exemplo, fundidas, em ponte, espiro, etc. além de substituição de ligação covalente. Grupos exemplares (C3- C10)cicloalquila incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, norbornanila, biciclo[3.2.1]octanila, octa-hidro-pentalenila, espiro[4.5]decanila, ciclopropila substituída com ciclobutila, ciclobutila substituída com ciclopentila, ciclo-hexila substituída com ciclopropila, etc.. Claro, outros grupos (C3-C10)cicloalquila ficarão facilmente evidentes para aqueles de experiência na técnica dado o benefício da presente descrição.
[000295] Quando aqui usado, o termo "(C2-C9)heterocicloalquila" significa um radical livre não aromático tendo 3 a 10 átomos (isto é, átomos de anel) que forma pelo menos um anel, em que 2 a 9 dos átomos de anel são carbono e o(s) átomo(s) de anel restante(s) (isto é, heteroátomo(s) de anel) é(são) selecionados a partir do grupo que consiste em nitrogênio, enxofre, e oxigênio. Como tal, grupos (C2-C9)heterocicloalquila podem ser monocíclicos ou multicíclicos. Anéis individuais de tais grupos heterocicloalquila multicíclicos podem ter conectividades diferentes, por exemplo, fundidas, em ponte, espiro, etc. além de substituição de ligação covalente. Grupos (C2-C9)heterocicloalquila exemplares incluem pirrolidinila, tetra-hidrofuranoíla, di-hidrofuranila, tetra-hidropiranila, piranila, tiopiranila, aziridinila, azetidinila, oxiranila, metilenodioxila, cromenila, barbiturila, isoxazolidinila, 1,3-oxazolidin-3-ila, isotiazolidinila, 1,3-tiazolidin-3-ila, 1,2-pirazolidin-2-ila, 1,3-pirazolidin-1-ila, piperidinila, tiomorfolinila, 1,2-tetra-hidrotiazin-2-ila, 1,3-tetra-hidrotiazin-3-ila, tetra- hidrotiadiazinila, morfolinila, 1,2-tetra-hidrodiazin-2-ila, 1,3-tetra- hidrodiazin-1-ila, tetra-hidroazepinila, piperazinila, piperizin-2-onila, piperizin-3-onila, cromanila, 2-pirrolinila, 3-pirrolinila, imidazolidinila, 2- imidazolidinila, 1,4-dioxanila, 8-azabiciclo[3.2.1]octanila, 3- azabiciclo[3.2.1]octanila, 3,8-diazabiciclo[3.2.1]octanila, 2,5- diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.2]octanila, octa-hidro-2H- pirido[1,2-a]pirazinila, 3-azabiciclo[4.1.0]heptanila, 3- azabiciclo[3.1.0]hexanila, 2-azaspiro[4.4]nonanila, 7-oxa-1-aza- espiro[4.4]nonanila, 7-azabiciclo[2.2.2]heptanila, octa-hidro-1H-indolila, etc. Em geral, o grupo (C2-C9)heterocicloalquila é tipicamente ligado à estrutura principal por meio de um átomo de carbono ou um átomo de nitrogênio. Claro, outros grupos (C2-C9)heterocicloalquila ficarão facilmente evidentes para aqueles de experiência na técnica dado o benefício da presente descrição.
[000296] Quando aqui usado, o termo "(C2-C9)heteroarila" significa um radical livre aromático tendo 5 a 10 átomos (isto é, átomos de anel) que forma pelo menos um anel, em que 2 a 9 dos átomos de anel são carbono e o(s) átomo(s) de anel restante(s) (isto é, heteroátomo(s)) é(são) selecionado(s) a partir do grupo que consiste em nitrogênio, enxofre e oxigênio. Como tais, grupos (C2-C9)heteroarila podem ser monocíclicos ou multicíclicos. Anéis individuais de tais grupos heteroarila multicíclicos podem ter conectividades diferentes, por exemplo, fundidas, etc. além de substituição de ligação covalente. Grupos (C2-C9)heteroarila exemplares incluem furila, tienila, tiazolila, pirazolila, isotiazolila, oxazolila, isoxazolila, pirrolila, triazolila, tetrazolila, imidazolila, 1,3,5-oxadiazolila, 1,2,4-oxadiazolila, 1,2,3-oxadiazolila, 1,3,5-tiadiazolila, 1,2,3-tiadiazolila, 1,2,4-tiadiazolila, piridila, pirimidila, pirazinila, piridazinila, 1,2,4-triazinila, 1,2,3-triazinila, 1,3,5-triazinila, pirazolo[3,4-b]piridinila, cinolinila, pteridinila, purinila, 6,7-di-hidro-5H- [1]pirindinila, benzo[b]tiofenila, 5,6,7,8-tetra-hidro-quinolin-3-ila, benzoxazolila, benzotiazolila, benzisotiazolila, benzisoxazolila, benzimidazolila, tianaftenila, isotianaftenila, benzofuranila, isobenzofuranila, isoindolila, indolila, indolizinila, indazolila, isoquinolila, quinolila, ftalazinila, quinoxalinila, quinazolinila e benzoxazinila, etc.. Em geral, o grupo (C2-C9)heteroarila é tipicamente ligado à estrutura principal por meio de um átomo de carbono, entretanto, aqueles de experiência na técnica perceberão quando certos outros átomos, por exemplo, heteroátoms de anel, podem ser ligados à estrutura principal. Claro, outros grupos (C2-C9)heteroarila ficarão facilmente evidente para aqueles de experiência na técnica dado o benefício da presente descrição.
[000297] Quando aqui usado, o termo "(C6-C10)arila" significa fenila ou naftila.
[000298] Quando aqui usado, o termo "halo" significa flúor, cloro, bromo ou iodo.
[000299] Quando aqui usado, o termo "amino" significa um radical livre que tem um átomo de nitrogênio e 1 a 2 átomos de hidrogênio. Como tal, o termo amino geralmente refere-se as aminas primária secundária. Neste respeito, quando aqui usado e nas reivindicações anexas, uma amina terciária é representada pela fórmula geral RR'N-, em que R e R’ são radicais de carbono que podem ou não podem ser idênticos. Não obstante, o termo "amino" geralmente pode ser usado aqui para descrever uma amina primária, secundária ou terciária, e estas experiências na técnica poderão facilmente averiguar a identificação do qual devido ao contexto em que este termo é usado na presente descrição.
[000300] Quando aqui usado, o termo "terapia de combinação" significa o tratamento de um paciente com duas ou mais plataformas terapêuticas (por exemplo, terapia de substituição de enzima e terapia de molécula pequena) em horários de tratamento rotacionais, alternados e/ou simultâneos. Exemplos de horários de tratamento podem incluir, porém não estão limitados a: (1) terapia de reposição de enzima, em seguida terapia de molécula pequena; (2) terapia de molécula pequena, em seguida terapia de reposição de enzima; (3) terapia de reposição de enzima simultânea com terapia de molécula pequena, e (4) e qualquer combinação dos antecedentes. Terapia de combinação pode fornecer uma sobreposição temporal de plataformas terapêuticas, quando necessário, dependendo do curso clínico de uma determinada doença de armazenamento em um determinado indivíduo.
[000301] Quando aqui usado, o termo "terapia de reposição de enzima", ou "ERT" significa administrar uma enzima recombinante ou natural exogenamente produzida a um paciente que está em necessidade da mesma. No caso de uma doença de armazenamento lisossômico, por exemplo, o paciente acumula níveis prejudiciais de um substrato (isto é, material armazenado) em lisossomas devido a uma deficiência ou defeito em uma enzima responsável para metabolizar o substrato, ou devido a uma deficiência em um ativador enzimático requerido para própria função enzimática. A terapia de reposição de enzima é fornecida ao paciente para reduzir os níveis de (isto é, diminuição do volume) substrato acumulado em tecidos afetados. A Tabela 1 fornece uma lista de doenças de armazenamento lisossômico e identifica a deficiência de enzima correspondente e substrato acumulado para cada doença. Terapias de reposição de enzima para tratar doenças de armazenamento lisossômico são conhecidas na técnica. De acordo com uma terapia de combinação da invenção, as enzimas lisossômicas identificadas na Tabela 1 podem ser usadas para terapia de reposição de enzima para reduzir os níveis de substrato correspondente em um paciente diagnosticado com a doença de armazenamento lisossômico respectiva.
[000302] Quando aqui usado, "quantidade eficaz" de uma enzima ou molécula pequena, quando liberada a um indivíduo em uma terapia de combinação da invenção, é uma quantidade suficiente para melhorar o curso clínico de uma doença de armazenamento lisossômico onde a melhoria clínica é bem medida por qualquer dentre variedade de parâmetros definidos conhecidos pelo técnico versado. Abreviações ACN refere-se à acetonitrila. DMF refere-se à N,N-dimetilformamida. DMSO refere-se a dimetilsulfóxido. EtOAc refere-se a acetato de etila. EtOH refere-se a etanol. Base de Hunig refere-se a diisopropiletil amina ("DIPEA"). MeOH refere-se a metanol. NaOH refere-se a hidróxido de sódio. THF refere-se a tetra-hidrofurano. TFA refere-se a ácido trifluoroacético.
[000303] Aspectos e vantagens adicionais de compostos descritos aqui ficarão evidentes a partir da seguinte descrição detalhada de certas modalidades.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[000304] FIG. 1 Apresenta a série de reação metabólica para a síntese potencial de Gb3 e lyso-Gb3. As séries de reação sintéticas documentadas são mostradas com setas pretas e as séries de reação não documentadas (potenciais) são mostradas com setas cinzentas.
[000305] FIG. 2A Estrutura química de (S)-Quinuclidin-3-il-(2-(2-(4- fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)carbamato
[000306] FIG. 2B Estrutura química de Quinuclidin-3-il-(2-(4'-flúor- [1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)carbamato
[000307] FIG. 3 Concentração de Gb3 no rim (A) e coração (B) de camundongos Fabry com 12 meses de idade tratados com 300mg/kg/dia de sal de ácido [2-(2',3'-di-hidro-benzo[1,4]dioxin-6'-il)-2- hidróxi-1-pirrolidin-1-ilmetil-etil]-amida-L-tartárico de ácido (1R,2R)- octanoico ("GZ 638") ou 60 mg/kg/dia de sal de (S)-2-hidroxissucinato de (S)-quinuclidin-3-il-(2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2- il)carbamato ("GZ 452").
FIG. 4A
[000308] O calendário de estudo que mostra o tratamento de partida de camundongos Fabry com 60 mg/kg/dia de GZ 452 começando em 3, 8 e 12 meses de idade. Retiradas de sangue periódicas, coleta de urina, ensaios de câmara de atividade e placa quando foram realizados como indicado.
FIG. 4B
[000309] A concentração de Gb3 na urina (A) e plasma (B) de camundongos Fabry que começam o tratamento com 60 mg/kg/dia de GZ 452 em 3 ou 8 meses de idade. O tratamento com fármaco (Rx) foi durante 2 ou 4 meses.
FIG. 5
[000310] A concentração de Gb3 (A) e lyso-Gb3 (B) no tecido renal de camundongos Fabry com 12 meses de idade que foram não tratados (UNT) ou tratados com 60 mg/kg/dia de GZ 452 durante 4 meses (SRT).
FIG. 6A
[000311] O calendário de estudo que mostra camundongos Fabry que são tratados com alfa-galactosidase A (1 mg/kg a cada 2 meses) ou com 60 mg/kg/dia de GZ 452 ou uma combinação dos 2 tratamentos que começam em 3 meses de idade. Retiradas de sangue periódicas, coleta de urina, ensaios de câmara de atividade e placa quando foram realizados como indicado.
FIG. 6B
[000312] Concentrações de plasma (A&C) e urina (B&D) Gb3 (A&C) e lyso-Gb3 (C&D) de camundongos Fabry com 5 meses de idade tratados com alfa-galactosidase A sozinha (ERT), GZ 452 sozinha (SRT) ou uma combinação dos dois (E+S) durante 2 meses.
FIG. 7
[000313] A análise de isoforma de cadeia de acila ligada a N de Gb3 isolada de plasma, urina e rim de camundongo Fabry.
FIG. 8
[000314] A latência (tempo para responder) a um estímulo de calor (placa quente a 55°C) de camundongos Fabry com 10 meses de idade seguindo 7 meses de tratamento com alfa-galactosidase A (ERT), GZ 452 (SRT) ou uma combinação dos dois (E+S) em relação aos camundongos não tratados (UNT) e camundongos tipo selvagem (WT).
[000315] FIG. 9 Glicosil ceramida (GluCer) e Glicosil esfingosina (GluSf) são significativamente elevadas nos cérebros de camundongos K14 neonatais. A análise da espectrometria de massa de glicosil- e galactosilceramidas mostra que (A) GluCer foi elevada 10 vezes em camundongos K14 (um modelo animal de doença de Gaucher Neonatal, da mesma forma conhecida como doença de Gaucher Tipo 2) em comparação a camundongos WT pelas primeiras 2 semanas de vida, (B) níveis de GalCer foram similares com o passar do tempo igualmente para camundongos K14 e WT, (C) níveis de GluSf foram > (10 mais altos em camundongos K14 do que camundongos WT comparados por idade durante as primeiras 2 semanas de vida; níveis de GluSf em animais WT estavam abaixo do nível de detecção (< 0,3 ng/mg). (D) Não houve diferença significante nos pesos de cérebro entre camundongos K14 e WT durante as primeiras 2 semanas de vida. Os pontos de dados representam valores médios e barras de erro SEM para N=4.
[000316] FIG. 10 A administração sistêmica de Quinuclidin-3-il-(2- (4'-flúor-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)carbamato ("GZ 161") reduz níveis de GluCer e GluSf no cérebro de camundongo K14. Os camundongos K14 e WT foram tratados diariamente (IP) começando em P4 com veículo ou 5 mg/kg de GZ 161, e os cérebros analisaram para GluCer e GluSf em P10. Animais tratados com GZ 161foram assintomáticos neste momento. O tratamento com GZ 161 reduziu (A) os níveis de GluCer por ~70% e (B) níveis de GluSf por ~60% de K14. Os níveis pós-tratamento de ambos glicoesfingolipídios permaneceram significativamente elevados em comparação aos seus filhotes de WT e os genótipos foram confirmados por análise de DNA pós-morte. *p < 0,05. N=4/grupo.
[000317] FIG. 11 A administração sistêmica de GZ 161 reduz a marcação para CD68 ao longo do cérebro dos camundongos K14. (Painéis superiores) Marcação imuno-histoquímica para CD 68 representativa em P10 no hipocampo, tálamo, tronco encefálico e cerebelo de camundongos K14 tratados diariamente (IP) começando no dia 4 pós-natal (P4) com veículo ou camundongos GZ 161 e WT. (Painéis inferiores). A quantificação da marcação nos grupos mostrados acima, mostrando que o tratamento sistêmico com GZ 161 resulta em reduções significantes nas células CD68+ em todas as regiões do cérebro. As reduções similares foram observadas em outras estruturas tal como o bulbo olfatório e córtex frontal (dados não mostrados). **p < 0,01. N=4/grupo.
[000318] FIG. 12 A administração sistêmica de GZ 161 reduz a marcação para F4/80 em algumas regiões do cérebro dos camundongos K14. (Painéis superiores) A marcação imuno- histoquímica para F4/80 representativa em P10 no hipocampo, tálamo, tronco encefálico e cerebelo de camundongos K14 tratados diariamente (IP) começando em P4 com veículo ou GZ 161, e camundongos de WT. (Painéis inferiores) A quantificação da marcação nos grupos mostrados acima, mostrando que o tratamento sistêmico com GZ 161 resulta nas reduções significantes das células F4/80+ no tálamo e tronco encefálico. Reduções similares foram observadas em outras estruturas tal como o bulbo olfatório e córtex frontal; diferenças estatísticas foram observadas em ambas as estruturas (dados não mostrados). *p<0,05. N=4/grupo.
[000319] FIG. 13 A administração sistêmica de GZ 161 diminui a gliose em camundongos K14. (Painéis superiores) A marcação imuno-histoquímica para GFAP representativa em P10 no hipocampo, tálamo, tronco encefálico e cerebelo de camundongos K14 tratados diariamente (IP) começando em P4 com veículo ou GZ 161, e camundongos WT. (Painéis inferiores) A quantificação da marcação nos grupos mostrados acima, mostrando que o tratamento sistêmico com GZ 161 resulta em reduções significantes nas células GFAP+ no hipocampo e cerebelo; diferenças estatísticas foram observadas em ambas estruturas (dados não mostrados).
[000320] FIG. 14 A administração sistêmica de GZ 161 aumenta o período de vida mediano de camundongos K14. Camundongos K14 foram injetados (IP) diariamente começando em P4 com veículo ou GZ 161 ou dado um tratamento combinado de três injeções intracerebroventriculares (ICV) de rhGC em P1, 2, 3 juntamente com injeções diárias (IP) de GZ 161 começando em P4. Camundongos tratados com veículo tiveram um período de vida mediano de 15 dias (N=25); camundongos tratados com GZ 161 tiveram um período de vida mediano de 18 dias (N=12; p < 0,0001 em comparação aos tratados com veículo); camundongos co-administrados com GZ 161 e rhGC tiveram um período de vida mediano de 26 dias (N=13)
[000321] FIG. 15 GZ 161 parece cruzar a barreira sangue/placenta. A administração sistêmica (20 mg/kg/dia em alimento) de GZ 161 em camundongos fêmeas WT grávidas reduz a carga de GluCer em homogeneizados de cérebro inteiro de camundongos no nascimento (P0). N=7; p < 0,0001)
[000322] FIG. 16 O tratamento de camundongos K14 com GZ 161 no útero tem um efeito mínimo sobre a sobrevivência. Camundongos K14 tratados diariamente (IP) começando em P4 com veículo tiveram um período de vida mediano de 14 dias (N=13). A administração sistêmica (20 mg/kg/dia em alimento) de GZ 161 em camundongos fêmeas K14 grávidas e em seguida a administração sistêmica diariamente (IP) de GZ 161 (5 mg/kg) aos filhotes de cachorro começando no período de vida estendido P0 em 19 dias (N=13), um resultado similar para tratar filhotes de cachorro sistemicamente diariamente (IP) com GZ 161 em 5 mg/kg começando em P4 (N=12).
[000323] FIG. 17 Níveis de Gb3 no tecido renal de camundongos Fabry machos e fêmeas de 12 meses de idade tratados com GZ 452, GZ 161 e GZ 638. Camundongos começaram o tratamento em ~8 meses de idade e foram tratados durante 4 meses com: 60 mg/kg/dia de GZ 452, 120 mg/kg/dia de GZ 452, 20 mg/kg/dia de GZ 161, 300 mg/kg/dia de GZ 638, controles positivo WT e UNT.
DESCRIÇÃO DETALHADA
[000324] Embora as modalidades específicas da presente descrição serão descritas agora com referência às preparações e esquemas, deveria ser entendido que tais modalidades são por meio de exemplo apenas e meramente ilustrativas de um pequeno número das muitas possíveis modalidades específicas, que podem representar aplicações dos princípios da presente descrição. Várias alterações e modificações serão óbvias para aqueles de experiência na técnica, dado o benefício da presente descrição, e julgarão estar dentro do espírito e escopo da presente descrição como também definidas nas reivindicações anexas.
[000325] A menos que de outro modo definido, todos os termos técnicos e científicos aqui usados têm o mesmo significado como geralmente entendido por alguém que tem experiência ordinária na técnica a qual esta descrição pertence. Embora outros compostos ou métodos possam ser usados na prática ou teste, certos métodos preferidos são descritos agora no contexto das seguintes preparações e esquemas. PREPARAÇÃO A
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PREPARAÇÃO B
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PREPARAÇÃO C
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PREPARAÇÃO D
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PREPARAÇÃO E
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ESQUEMA 1
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ESQUEMA 2
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ESQUEMA 3
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[000326] Na reação 1 da Preparação A, o composto de fórmula A-7 é convertido para o composto correspondente de fórmula A-1, em que X é OH, reduzindo-se A-7 com um agente de redução, preferivelmente hidreto de alumínio de lítio em solvente aprótico tal como tetra- hidrofurano. A reação é agitada a uma temperatura entre 0°C e temperatura ambiente durante um período de tempo entre cerca de 15 minutos para cerca de 2 horas, preferivelmente cerca de 30 minutos. Alternativamente, o composto de fórmula A-7 é convertido para o composto correspondente de fórmula A-1, em que X é OH, reduzindo- se A-7 sob aproximadamente 1 atmosfera de hidrogênio na presença de um catalisador, preferivelmente óxido de platina, e um solvente polar tal como metanol ou etanol durante um período de 2 horas a 6 horas, preferivelmente 4 horas. Alternativamente, o composto de fórmula A-7 é convertido para o composto correspondente de fórmula A-1, em que X é NH, reagindo-se A-7 com cloridrato de hidroxilamina e acetato de sódio em um solvente polar tais como etanol, metanol, isopropanol, preferivelmente isopropanol. A mistura reacional é agitada a uma temperatura entre 50-80°C durante um período de 2 horas a 7 horas, preferivelmente 3 horas. Subsequentemente, o composto desse modo formado acima é convertido para o composto de fórmula A-1 com um agente de redução, preferivelmente sódio metálico em um solvente prótico polar, tais como etanol, metanol, propanol, preferivelmente n- propanol. A reação é agitada durante a noite a 50-80°C, preferivelmente temperatura de refluxo de solvente.
[000327] Na reação 2 da Preparação A, o composto de fórmula A-7 é convertido para o composto correspondente de fórmula A-5, em que R1, n e z são como definido acima, adicionando-se uma solução de R1- brometo de magnésio em éter a uma solução de A-7 em um solvente aprótico, tal como éter, a uma temperatura entre cerca de -60°C a cerca de -90°C, preferivelmente cerca de -78°C durante um período de tempo entre cerca de 1 hora a cerca de 4 horas, preferivelmente cerca de 2 horas. Alternativamente, o composto de fórmula A-7 pode ser reagido com R1-lítio para proporcionar o composto de fórmula A-5.
[000328] Na reação 3 da Preparação A, o composto de fórmula A-5 é convertido para o composto correspondente de fórmula A-4, em que R1, n e z são como definido acima, tratando-se A-5 com um ácido forte, preferivelmente ácido sulfúrico, na presença de acetonitrila. A reação é agitada durante a noite em temperatura ambiente.
[000329] Na reação 4 da Preparação A, o composto de fórmula A-4 é convertido para o composto correspondente de fórmula A-3, em que R1, n e z são como definido acima, tratando-se A-4 com um ácido, preferivelmente ácido clorídrico. A reação é agitada em refluxo durante um período de 18 horas a 72 horas, preferivelmente 24 horas e basificada em pH=8 por tratamento com uma base inorgânica em solução aquosa, tal como hidróxido de sódio.
[000330] Na reação 5 da Preparação A, o composto de fórmula A-7 é convertido para o composto correspondente de fórmula A-6, em que R1, n e z são como definido acima, reagindo-se A-7 com um ilídio de trifenil fosfônio para produzir o composto de alceno correspondente de fórmula A-6. A reação é agitada durante a noite em temperatura ambiente.
[000331] Na reação 6 da Preparação A, o composto de fórmula A-6 é convertido para o composto correspondente de fórmula A-3, em que R1, n e z são como definido acima, reduzindo-se A-6 sob aproximadamente 1 atmosfera de hidrogênio na presença de um catalisador, preferivelmente paládio em carbono, e um solvente polar, tal como metanol, etanol ou acetato de etila. A reação é agitada em temperatura ambiente durante um período de tempo entre cerca de 2 horas a cerca de 24 horas, preferivelmente cerca de 18 horas. Subsequentemente, o composto desse modo formado é tratado com uma base, preferivelmente hidróxido de lítio, em uma mistura de solvente tal como tetra-hidrofurano, metanol e água para proporcionar o composto de A3. A reação é agitada durante a noite em temperatura ambiente.
[000332] Na reação 1 da Preparação B, o composto de fórmula B-2 é convertido para o composto correspondente de fórmula B-1, reduzindo- se B-2 com um agente de redução, preferivelmente hidreto de alumínio de lítio em solvente aprótico tal como tetra-hidrofurano. A reação é agitada a uma temperatura entre 0°C e temperatura ambiente durante um período de tempo entre cerca de 15 minutos a cerca de 2 horas, preferivelmente cerca de 30 minutos.
[000333] Na reação 1 da Preparação C, o composto de C-4 é convertido para o composto correspondente de fórmula C-3, em que X é bromo ou cloreto, reagindo-se C-4 com ácido borônico na presença de um catalisador, preferivelmente dicloreto de 1,1'-bis(difenilfosfi- no)ferroceno-paládio(II) e carbonato de potássio. A reação é submetida a micro-ondas em uma mistura de dimetoxietano e água a uma temperatura entre cerca de 130°C a cerca de 170°C, preferivelmente cerca de 150°C, durante um período de tempo entre cerca de 15 min a cerca de 1 hora, preferivelmente cerca de 30 min. Alternativamente, a reação pode ser realizada usando solvente tal como dioxano e agitada durante a noite a 100° C sob aquecimento convencional.
[000334] Na reação 2 da Preparação C, o composto de C-3 é convertido para o composto correspondente de fórmula C-1, em que f é que 1 a 8 e A1, X5 e A2 são como definido acima, adicionando-se brometo de etil magnésio gota a gota a uma mistura de C-3 e isopropóxido de titânio em éter. A reação é agitada a uma temperatura entre cerca de -50°C a cerca de -90°C, preferivelmente cerca de -70°C. A mistura reacional resultante é permitida aquecer a cerca de 20° C a cerca de 30°C, preferivelmente cerca de 25°C, e permitida agitar durante um período de tempo adicional entre cerca de 30 minutos a cerca de 2 horas, preferivelmente cerca de 1 hora. Dietil eterato de trifluoreto de boro é em seguida adicionado à mistura gota a gota a uma temperatura entre cerca de 20°C a cerca de 30°C, preferivelmente cerca de 25°C.
[000335] Na reação 3 da Preparação C, o composto de C-3 é convertido para o composto correspondente de fórmula C-2, em que A1, X5 e A2 são como definido acima, agitando-se primeiro uma suspensão de cloreto de cério (III) em um solvente aprótico, tal como tetra- hidrofurano, em temperatura ambiente durante um período de tempo entre cerca de 30 minutos a cerca de 2 horas, preferivelmente cerca de 1 hora. A suspensão resultante é resfriada a uma temperatura entre cerca de -60°C a cerca de -90°C, preferivelmente cerca de -78°C e um agente de organolítio é adicionado, preferivelmente metillítio em uma solução de éter. O complexo de organocério resultante é permitido formar-se durante um período de tempo entre cerca de 30 minutos a cerca de 2 horas, preferivelmente cerca de 1 hora, seguido pela adição de C-3 em um solvente aprótico, tal como tetra-hidrofurano. A mistura reacional resultante é em seguida aquecida em temperatura ambiente e permitida agitar durante um período de tempo entre cerca de 16 horas a cerca de 20 horas, preferivelmente cerca de 18 horas.
[000336] Na reação 1 da Preparação D, o composto de D-5, em que R é CO2Et ou CN e X é bromo ou cloreto, é convertido para o composto correspondente de fórmula D-3, reagindo-se D-5 com um dialeto de alquila tal como 1,2-dibromoetano. Subsequentemente, o composto desse modo formado é tratado com uma base inorgânica tal como hidróxido de lítio ou hidróxido de potássio, em uma mistura de solvente tal como tetra-hidrofurano, metanol, glicol e água para proporcionar o composto de D-3, em que f é 1 a 8. A reação é agitada durante a noite a uma temperatura entre 25°C e 130°C. Alternativamente, para formar o composto correspondente de fórmula D-3, em que X é X5-A2, D-5 deve ser reagido primeiro de acordo com o procedimento discutido acima na reação 1 da Preparação C.
[000337] Na reação 2 da Preparação D, o composto de D-3 é convertido para o composto correspondente de fórmula D-1 reagindo- se D-3 com uma base tal como trietilamina e difenilfosforil azida em solvente aprótico tal como tolueno. A reação foi aquecida a uma faixa de temperatura entre 80°C-110°C, preferivelmente a 110°C durante 15 min a 1 hora, preferivelmente 30 minutos. O intermediário desse modo formado é em seguida tratado com álcool terc-butílico durante um período durante a noite a 60-110°C, preferivelmente 90°C. Subsequentemente, o carbamato desse modo formado é convertido para o composto correspondente de fórmula D-1, em que f é 1 a 8, por um tratamento sob meios ácidos usando preferivelmente ácido trifluoroacético em diclorometano em temperatura ambiente durante um período de 30 min a 5 horas, preferivelmente 2 horas.
[000338] Na reação 3 da Preparação D, o composto de D-5, em que R é CO2Et ou CN e X é bromo ou cloreto, é convertido para o composto correspondente de fórmula D-4, reagindo-se D-5 com um haleto de alquila tal como Mel. Subsequentemente, o composto desse modo formado é tratado com uma base inorgânica tal como hidróxido de lítio ou hidróxido de potássio, em uma mistura de solvente tal como tetra- hidrofurano, metanol, glicol e água para proporcionar o composto de D4. A reação é agitada durante a noite a uma temperatura entre 25°C e 130°C. Alternativamente, para formar o composto correspondente de fórmula D-4, em que X é X5-A2, D-5 deve ser reagido primeiro de acordo com o procedimento discutido acima na reação 1 da Preparação C.
[000339] Na reação 4 da Preparação D, o composto de D-4 é convertido para o composto correspondente de fórmula D-2, reagindo- se D-4 com uma base tal como trietilamina e difenilfosforil azida em solvente aprótico tal como tolueno. A reação foi aquecida a uma faixa de temperatura entre 80°C-110°C, preferivelmente a 110°C durante 15 min a 1 hora, preferivelmente 30 minutos. O intermediário desse modo formado é em seguida tratado com álcool terc-butílico durante um período durante a noite a 60-110°C, preferivelmente 90°C. Subsequentemente, o carbamato desse modo formado é convertido para o composto correspondente de fórmula D-1 por um tratamento sob meios ácidos usando preferivelmente ácido trifluoroacético em diclorometano em temperatura ambiente durante um período de 30 min a 5 horas, preferivelmente 2 horas.
[000340] Na reação 1 da Preparação E, o composto de fórmula E-2, em que X é brometo ou cloreto, é convertido para o composto correspondente de fórmula E-1, reagindo-se E-2 com brometo de metil magnésio em éter, a uma temperatura entre cerca de -60°C a cerca de -90°C, preferivelmente cerca de -78°C durante um período de tempo entre cerca de 30 min a cerca de 3 horas, preferivelmente cerca de 2 horas. Alternativamente, para formar o composto correspondente de fórmula E-1, em que X é X5-A2, E-2 deve ser reagido primeiro de acordo com o procedimento discutido acima na reação 1 da Preparação C.
[000341] Na reação 2 da Preparação E, o composto de fórmula E-1 é convertido para o composto correspondente de D-2 tratando-se E-1 com um ácido forte, preferivelmente ácido sulfúrico, na presença de cloroacetonitrila. A reação é agitada durante a noite em temperatura ambiente. Subsequentemente, o composto desse modo formado é tratado com tioureia em um solvente prótico polar tal como etanol durante um período durante a noite a 80°C para formar o composto correspondente de fórmula D-2. Alternativamente, E-1 é tratado com azida de sódio e ácido trifluoroacético em um solvente aprótico tal como diclorometano a uma faixa de temperatura de -10°C a temperatura ambiente, preferivelmente 0°C. O composto desse modo formado é reduzido na presença de trifenilfosfina em uma solução de tetra- hidrofurano e água para formar o composto correspondente de fórmula D-2. A reação é agitada a uma faixa de temperatura de 25-80°C, preferivelmente em temperatura ambiente durante um período de 2 horas a 24 horas, preferivelmente 18 horas.
[000342] Na reação 1 do Esquema 1, os compostos de fórmula A-1 ou A-2 são convertidos para os compostos correspondentes de Fórmula II, em que f é 1 a 8, ou III, respectivamente, adicionando-se trifosgênio a uma suspensão de C-1 ou C-2 e trietilamina em um solvente aprótico, tal como tetra-hidrofurano. A reação é agitada em temperatura ambiente durante um período de tempo entre cerca de 5 minutos a cerca de 20 minutos, preferivelmente cerca de 15 minutos, e uma pequena quantidade de éter foi adicionada. O sal de trietilamônio gerado é filtrado. Separadamente, hidreto de sódio é adicionado a uma suspensão de A-1 ou A-2, em que X é OH ou NH, em um solvente aprótico, tal como tetra-hidrofurano, em 0°C ou temperatura ambiente. A reação é agitada em temperatura ambiente durante um período de tempo entre cerca de 5 minutos a cerca de 20 minutos, preferivelmente cerca de 15 minutos, e a solução de isocianato tetra-hidrofurano/éter desse modo formada acima é adicionada gota a gota. Alternativamente, os compostos de Fórmula II e III podem ser formados reagindo-se os compostos de D3 ou D4 com A-1 e A-2 na presença de uma base tal como trietilamina e difenilfosforil azida em solvente aprótico tal como tolueno, como descrito no procedimento discutido acima na reação 4 da Preparação D.
[000343] Na reação 1 do Esquema 2, os compostos de fórmula A-1, A-2 ou B-1 são convertidos para os compostos correspondentes de Fórmula IV, V, VI e VII, em que f é 1 a 8, respectivamente, adicionando- se trifosgênio a uma suspensão de C-1, C-2, D-1 ou D-2 e trietilamina em um solvente aprótico, tal como tetra-hidrofurano ou tolueno. A reação é agitada em temperatura ambiente durante um período de tempo entre cerca de 5 minutos a cerca de 20 minutos, preferivelmente cerca de 15 minutos, e uma pequena quantidade de éter foi adicionada. Subsequentemente, A-1 ou A-2, em que X é NH, é adicionado à solução de isocianato desse modo formada acima, e a reação é agitada a uma faixa de temperatura de 25-100°C, preferivelmente em temperatura ambiente durante um período de cerca de 2 horas a 24 horas, preferivelmente 18 horas.
[000344] Na reação 1 do Esquema 3, o composto de fórmula A-3 é convertido para os compostos correspondentes de Fórmula VIII, em que f é 1 a 8, e IX, respectivamente reagindo-se A3 com C1, C-2, D-1 ou D2 por meio de acoplamento peptídico usando agente de acoplamento de carbodiimida tal como 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida e 1-hidróxi-benzotriazol ou hexafluorofosfato de 2-(1H-7-azabenzotriazol- 1-il)-1,1,3,3-tetrametilurônio em solvente tal como tetra-hidrofurano ou dimetilformamida. A reação é agitada em temperatura ambiente durante a noite.
[000345] Embora as modalidades específicas da presente descrição sejam agora descritas com referência as preparações e esquemas, deve ser entendido que tais modalidades são por meio de exemplo apenas e meramente ilustrativos, porém um número pequeno das muitas possíveis modalidades específicas que podem representar pedidos dos princípios da presente descrição. Várias alterações e modificações serão óbvias para aqueles de experiência na técnica dado o benefício da presente descrição e devem ser julgadas dentro do espírito e escopo da presente descrição como também definido nas reivindicações anexas.
[000346] A menos que definido de outra maneira, todos os termos técnicos e científicos usados aqui têm o mesmo significado como geralmente entendido por alguém tendo experiência ordinária na técnica a qual esta descrição pertence. Embora outros compostos ou métodos possam ser usados na prática ou teste, certos métodos preferidos são agora descritos no contexto das seguintes preparações e esquemas.
[000347] Todos os sais farmaceuticamente aceitáveis, profármacos, tautômeros, hidratos e solvatos dos compostos agora descritos estão da mesma forma dentro do escopo da presente descrição.
[000348] Compostos agora descritos que são básicos na natureza são geralmente capazes de formar uma ampla variedade de sais diferentes com vários ácidos inorgânicos e/ou orgânicos. Embora tais sais sejam geralmente farmaceuticamente aceitáveis para administração aos animais e humanos, é frequentemente desejável na prática isolar inicialmente um composto da mistura reacional como um sal farmaceuticamente inaceitável e em seguida simplesmente converter o último outra vez ao composto de base livre por tratamento com um reagente alcalino, e subsequentemente converter a base livre em um sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável. O sal de adição de ácida dos compostos básicos pode ser facilmente preparado usando técnicas convencionais, por exemplo, tratando-se o composto básico com uma quantidade substancialmente equivalente do ácido mineral ou orgânico escolhido em um meio de solvente aquoso ou em um solvente orgânico adequado tal como, por exemplo, metanol ou etanol. Na evaporação cuidadosa do solvente, o sal sólido desejado é obtido.
[000349] Ácidos que podem ser usados para preparar o sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável dos compostos básicos são aqueles que podem formar sais de adição de ácida não tóxicos, isto é, sais que contêm ânions farmacologicamente aceitáveis, tais como sais de cloreto, brometo, iodeto, nitrato, sulfato ou bissulfato, fosfato ou fosfato ácido, acetato, lactato, citrato ou citrato ácido, tartarato ou bitartarato, sucinato, maleato, fumarato, gliconato, sacarato, benzoato, metanossulfonato e pamoato [isto é, 1,1'-metileno-bis-(2-hidróxi-3- naftoato)].
[000350] Compostos agora descritos que são ácidos na natureza, por exemplo, contém uma porção de COOH ou tetrazol, são geralmente capazes de formar uma ampla variedade de sais diferentes com várias bases inorgânicas e/ou orgânicas. Embora tais sais geralmente sejam farmaceuticamente aceitáveis para administração aos animais e humanos, é frequentemente desejável na prática inicialmente isolar um composto da mistura reacional como um sal farmaceuticamente inaceitável e em seguida simplesmente converter o último outra vez ao composto de ácido livre por tratamento com um reagente ácido, e subsequentemente converter o ácido livre em um sal de adição de base farmaceuticamente aceitável. Estes sais de adição de base podem ser facilmente preparados usando técnicas convencionais, por exemplo, tratando-se os compostos ácidos correspondentes com uma solução aquosa contendo os cátions farmacologicamente aceitáveis desejados, e em seguida evaporar a solução resultante até a secura, preferivelmente sob pressão reduzida. Alternativamente, eles também podem ser preparados misturando-se soluções alcanólicas inferiores dos compostos ácidos e o alcóxido de metal de álcali desejado juntamente, e em seguida evaporando a solução resultante até a secura da mesma maneira como anteriormente. Em ambos os casos, quantidades estequiométricas de reagentes são empregadas preferivelmente para assegurar a perfeição da reação e os rendimentos de produto máximos do sal sólido desejado.
[000351] Bases que podem ser usadas para preparar os sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis dos compostos básicos são aquelas que podem formar os sais de adição de base não tóxicos, isto é, sais que contêm cátions farmacologicamente aceitáveis, tais como, cátions de metal de álcali (por exemplo, potássio e sódio), cátions de metal alcalino terroso (por exemplo, cálcio e magnésio), amônio ou outros sais de adição de amina solúveis em água tal como N- metilglicamina-(meglumina), alcanolamônio inferior e outras tais bases de aminas orgânicas.
[000352] Compostos isotopicamente rotulados estão da mesma forma dentro do escopo da presente descrição. Quando aqui usado, um "composto isotopicamente rotulado" refere-se a um composto agora descrito que inclui sais farmacêuticos e profármacos dos mesmos, cada qual como descrito aqui, em que um ou mais átomos são substituídos por um átomo que tem uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa normalmente encontrado na natureza. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados em compostos agora descritos incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, oxigênio, fosforoso, flúor e cloro, tais como 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F, e 36Cl, respectivamente.
[000353] Ao marcar isotopicamente os compostos aqui descritos, os compostos podem ser úteis nos ensaios de distribuição de fármaco e/ou substrato pelo tecido. Compostos marcados com trítio (3H) e carbono- 14 (14C) são particularmente preferidos por sua facilidade de preparação e detectabildade. Além disso, a substituição com isótopos mais pesados tal como deutério (2H) pode dispor certas vantagens terapêuticas que resultam da maior estabilidade metabólica, por exemplo meia-vida in vivo aumentada ou exigências de dosagem reduzidas e, consequentemente, pode ser preferida em algumas circunstâncias. Compostos isotopicamente marcados descritos aqui, incluindo sais farmacêuticos e profármacos dos mesmos, podem ser preparados por quaisquer meios conhecidos na técnica.
[000354] Estereoisômeros (por exemplo, cis e trans isômeros) e todos os isômeros óticos de um composto agora descrito (por exemplo, enantiômeros R e S), bem como misturas racêmicas, diastereoméricas e outras de tais isômeros estão dentro do escopo da presente descrição.
[000355] Os compostos, sais, profármacos, hidratos e solvatos aqui descritos podem existir em várias formas tautoméricas, incluindo a forma de enol e imina, e a forma de ceto e enamina e isômeros geométricos e misturas dos mesmos. Tautômeros existem como misturas de um conjunto tautomérico na solução. Em forma sólida, normalmente um tautômero predomina. Mesmo que um tautômero possa ser descrito, todos os tautômeros estão dentro do escopo da presente descrição.
[000356] Atropisômeros estão da mesma forma dentro do escopo da presente descrição. Atropisômeros referem-se a compostos que podem ser separados em isômeros rotacionalmente restringidos.
[000357] A presente descrição também fornece composições farmacêuticas que compreendem pelo menos um composto agora descrito e pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável. O veículo farmaceuticamente aceitável pode ser qualquer tal veículo conhecido na técnica que inclui aqueles descritos em, por exemplo, Remington’s Pharmaceutical Sicences, Mack Publishing Co., (A. R. Gennaro edit. 1985). Composições farmacêuticas dos compostos agora descritos podem ser preparadas por meios convencionais conhecidos na técnica incluindo, por exemplo, misturar pelo menos um composto agora descrito com um veículo farmaceuticamente aceitável.
[000358] Composições farmacêuticas agora descritas podem ser usadas em um animal ou humano. Desse modo, um composto agora descrito pode ser formulado como uma composição farmacêutica para administração oral, bucal, parenteral (por exemplo, intravenosa, intramuscular ou subcutânea), tópica, retal ou intranasal ou na forma adequada para administração por inalação ou insuflação.
[000359] Os compostos agora descritos podem ser formulados da mesma forma para liberação prolongada de acordo com métodos conhecidos por aqueles versados na técnica. Exemplos de tais formulações podem ser encontrados nas Patentes dos Estados Unidos 3.119.742, 3.492.397, 3.538.214, 4.060.598, e 4.173.626.
[000360] Para administração oral, a composição farmacêutica pode tomar a forma de, por exemplo, um comprimido ou cápsula preparado por meios convencionais com um excipiente(s) farmaceuticamente aceitável(áveis) tal como um agente de ligação (por exemplo, amido de milho pré-gelatinizado, polivinilpirrolidona ou hidroxipropilmetilcelulose); carga (por exemplo, lactose, celulose micro cristalina ou fosfato de cálcio); lubrificante (por exemplo, estearato de magnésio, talco ou sílica); desintegrante (por exemplo, amido de batata ou glicolato de amido de sódio); e/ou agente de umectação (por exemplo, laurilsulfato de sódio). Os comprimidos podem ser revestidos por métodos bem conhecidos na técnica. Preparações líquidas para administração oral podem tomar a forma de, por exemplo, uma solução, xarope ou suspensão, ou elas podem ser apresentadas como um produto seco para constituição com água ou outro veículo adequado antes do uso. Tais preparações líquidas podem ser preparadas por meios convencionais com um aditivo(s) farmaceuticamente aceitável(véis) tal como um agente de suspensão (por exemplo, xarope de sorbitol, metil celulose ou gorduras comestíveis hidrogenadas); agente emulsificante (por exemplo, lecitina ou acácia); veículo não aquoso (por exemplo, óleo de amêndoa, ésteres oleosos ou álcool etílico); e/ou preservativo (por exemplo, p-hidroxibenzoatos de metila ou propila ou ácido sórbico).
[000361] Para administração bucal, a composição pode tomar a forma de comprimidos ou pastilhas formulados de uma maneira convencional.
[000362] Os compostos agora descritos podem ser formulados para administração parenteral por injeção, incluindo usar técnicas de cateterização convencionais ou infusão. As formulações para injeção podem ser apresentadas em forma de dosagem unitária, por exemplo, em ampolas ou em recipientes de múltiplas doses, com um preservativo adicionado. As composições podem tomar tal forma como suspensões, soluções ou emulsões em veículos oleosos ou aquosos, e podem conter um agente de formulação tal como um agente de suspensão, estabilização e/ou dispersão reconhecido por aqueles de experiência na técnica. Alternativamente, o ingrediente ativo pode ser na forma de pó para reconstituição com um veículo adequado, por exemplo, água livre de pirogênio esteril, antes do uso.
[000363] Para administração tópica, um composto agora descrito pode ser formulado como um unguento ou creme.
[000364] Compostos agora descritos podem da mesma forma ser formulados em composições retais tais como supositórios ou enemas de retenção, por exemplo, contendo bases de supositório convencionais tal como manteiga de cacau ou outros glicerídeos.
[000365] Para administração intranasal ou administração por inalação, compostos agora descritos podem ser convenientemente liberados na forma de uma solução ou suspensão de um recipiente de spray de bomba que é apertado ou bombeado pelo paciente ou como uma apresentação em spray aerossol de um recipiente pressurizado ou um nebulizador, com o uso de um propulsor adequado, por exemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono ou outro gás. No caso de um aerossol pressurizado, a unidade de dosagem pode ser determinada fornecendo-se uma válvula para liberar uma quantidade medida. O recipiente pressurizado ou nebulizador pode conter uma solução ou suspensão do composto. Cápsulas e cartuchos (feitos, por exemplo, de gelatina) para uso em um inalador ou insuflador podem ser formulados contendo uma mistura de pó de um composto agora descrito e uma base em pó adequada tal como lactose ou goma.
[000366] Uma dose proposta de um composto agora descrito para administração oral, parenteral ou bucal para o humano adulto médio para o tratamento ou prevenção de um estado de doença relacionado a TPO é de cerca de 0,1 mg a cerca de 2000 mg. Em certas modalidades, a dose proposta é de cerca de 0,1 mg a cerca de 200 mg do ingrediente ativo por dose unitária. Independente da quantidade da dose proposta, a administração do composto pode ocorrer, por exemplo, 1 a 4 vezes por dia.
[000367] As formulações em aerossol para o tratamento ou prevenção das condições referidas acima no humano adulto médio são preferivelmente organizadas de forma que cada dose medida ou "sopro" de aerossol contém cerca de 20mg a cerca de 10,000mg, preferivelmente, cerca de 20mg a cerca de 1000mg de um composto descrito agora. A dose diária global com um aerossol estará dentro da faixa de cerca de 100mg a cerca de 100 mg. Em certas modalidades, a dose diária global com um aerossol estará geralmente dentro da faixa de cerca de 100mg a cerca de 10 mg. A administração pode ser várias vezes diariamente, por exemplo 2, 3, 4 ou 8 vezes, produzindo por exemplo, 1, 2 ou 3 doses por vez.
[000368] Formulações de combinação em aerossol para o tratamento ou prevenção das condições referidas acima no humano adulto médio são preferivelmente organizadas de forma que cada dose medida ou "sopro" de aerossol contém de cerca de 0,01 mg a cerca de 1000 mg de uma combinação que compreende um composto descrito agora. Em certas modalidades, cada dose medida ou "sopro" de aerossol contém cerca de 0,01 mg a cerca de 100 mg de uma combinação que compreende um composto descrito agora. Em certas modalidades, cada dose medida ou "sopro" de aerossol contém cerca de 1 mg a cerca de 10 mg de uma combinação que compreende um composto. A administração pode ser várias vezes por dia, por exemplo 2, 3, 4 ou 8 vezes, produzindo por exemplo, 1, 2 ou 3 doses por vez.
[000369] Composições farmacêuticas e métodos de tratamento ou prevenção compreendendo administrar profármacos de pelo menos um composto agora descrito está da mesma forma dentro do escopo da presente descrição.
Ensaio de Glicosilceramida Sintase
[000370] Um ensaio de enzima usando microssomas como uma fonte de atividade de glicosilceramida sintase. O substrato de ceramida fluorescente é liberado à enzima ligada à membrana como um complexo com albumina. Após a reação, ceramida e glicosilceramida são separadas e quantificadas por HPLC de fase reversa com detecção de fluorescência.
Procedimento Preparação de Microssomas de células de melanoma humano A375:
[000371] A suspensão celular foi sonicada em gelo para completar a lise celular seguido por centrifugação em rotação em 10.000 g durante 10 min. a 4oC
[000372] O sobrenadante foi depurado novamente por centrifugação em 100.000 g durante 1 hora a 4oC no pellet e foi ressuspenso em tampão de dissolução (lise), repartido e armazenado a -80° C.
[000373] O pellet foi ressuspenso em tampão de lise, aliquotado e armazenado a -80oC.
Ensaio de Glicosilceramida Sintase
[000374] O substrato e microssoma foram combinados 1:1, misturar bem em um agitador de placa, selar a placa e incubar 1 hora em temperatura ambiente no escuro.
[000375] A lavagem foi interrompida com solução de interrupção na placa de reação e a placa de análise transferida; Análise de RP-HPLC - coluna: MercuryMSTM (Phenomenex) cartucho substituível (Luna C8, 3 □m, 20 x 4 mm) - sistema: Agilent 1100 com detector de fluorescência série Agilent 1200 - fase móvel: 1% de ácido fórmico em 81% de metanol, 19% de água, taxa de fluxo 0,5 mL/min, ciclo isocrático, 4 min, - diluente de amostra: 0,1 mM de C8 ceramida (bloqueador de adsorção) em 50% de isopropanol, 50% de água (v/v) - detecção de fluorescência: *Dex = 470 nm, Oem =() 530 nm - sob destas condições, NBD C6 GluCer teve um tempo de retenção de cerca de 1,7 min e NBD C6 Cer conduzido em cerca de 2,1 min; os picos foram claramente separados à linha de referência e foram automaticamente integrados pelo software HPLC - % de conversão de substrato para produto foi usado como o estágio de leitura para inibidor o teste para evitar a variabilidade devido ao erro de diluição ou evaporação de amostra
[000376] Todos os compostos exemplificados tiveram um valor de IC50 menor que 5 μM no Ensaio Repórter.
EXPERIMENTAL Procedimento geral A: Formação de carbamato/ureia com trifosgênio
[000377] A uma suspensão de cloridrato de amina (1 equivalente) e trietilamina (3-4 equivalentes) em um THF (concentração ~ 0,2M) em temperatura ambiente foi adicionado trifosgênio (0,35 equivalente). A mistura reacional foi agitada durante 10 min e quantidade pequena de éter (1-2 mL) foi adicionada. O sal de trietilamônio foi filtrado para proporcionar uma solução clara de isocianato em THF/éter.
[000378] Em uma solução de álcool (1,5 equivalente) em THF (concentração ~ 0,2M) em temperatura ambiente foi adicionado NaH [60%, óleo] (1,5 equivalente). A mistura reacional foi agitada durante 15 min, e a solução anterior (isocianato em THF/éter) foi adicionada gota a gota.
[000379] Em uma preparação padrão, a reação foi extinguida com salmoura. A solução foi extraída com EtOAc, e a camada orgânica foi secada em Na2SO4, filtrada e concentrada. O material bruto foi purificado em combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar o carbamato correspondente.
[000380] Alternativamente: Em uma suspensão de cloridrato de amina A (1 equivalente) e trietilamina (3-4 equivalentes) em um THF (concentração ~ 0,2M) em temperatura ambiente foi adicionado trifosgênio (0,35 equivalente). A mistura reacional foi agitada durante 10 min, e pequena quantidade de éter (1-2 mL) foi adicionada. O sal de trietilamônio foi filtrado para proporcionar uma solução clara de isocianato em THF/éter.
[000381] Em uma solução de amina B (1 equivalente) em THF (concentração ~ 1,0M) em temperatura ambiente foi adicionada a solução anterior (isocianato em THF/éter) gota a gota. A reação foi agitada durante um período de 18 h e concentrada. O material bruto foi purificado em combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar a ureia correspondente.
Procedimento geral B: Alquilação com organocério
[000382] Uma suspensão de CeCl3 (4 equivalentes) em THF (concentração ~ 0,2M) foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h. A suspensão foi resfriada durante -78°C e MeLi / Éter [1,6M] (4 equivalentes) foi adicionado gota a gota. O complexo de organocério foi permitido formar-se durante um período de 1 h, e uma solução de nitrila (1 equivalente) em THF (concentração 2,0M) foi adicionada gota a gota. A mistura reacional foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada durante 18 h. A solução foi resfriada a 0°C e extinguida com água (~ 1 mL), seguido por adição de solução aquosa a 50% de hidróxido de amônio (~ 3 mL) até o precipitado formar-se e depositar-se no fundo do frasco. A mistura foi filtrada por uma almofada de celite e concentrada. O material bruto foi tratado com uma solução de HCl/dioxano [4,0M]. O intermediário cloridrato de arilpropan-2-amina foi triturado em éter e usado no estado em que se encontra para a próxima etapa. Alternativamente, a amina de base livre crua foi purificada em combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar a arilpropilamina correspondente.
Procedimento geral C: Formação de ureia com carbonil diimidazol (CDI)
[000383] Uma solução de amina A (1 equivalente) e CDI (1,3 equivalente) em THF (concentração ~ 0,15M) foi agitada em refluxo durante 1 h. Uma solução de amina B (1,3 equivalente) em THF foi adicionada, e a mistura reacional foi agitada durante um adicional de 1,5 h. A reação foi resfriada em temperatura ambiente e diluída com éter. O composto desejado foi precipitado e filtrado. O material bruto foi purificado em combiflash (cartucho de Al2O3 básico, CHCl3 e MeOH) ou (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar a ureia correspondente.
Procedimento geral D: Formação de ureia com trifosgênio
[000384] Em uma suspensão de amina A (1 equivalente) e trietilamina (4 equivalentes) em um THF (concentração ~ 0,15M) em temperatura ambiente foi adicionado trifosgênio (0,35 equivalente). A mistura reacional foi agitada durante 15 min, e amina B (1,1 equivalente) foi adicionada. A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 18 h, e em seguida diluída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com NaOH aquoso [1,0 M], secada em Na2SO4, filtrada e concentrada. O material bruto foi purificado em combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar a ureia correspondente.
Procedimento geral E: Acoplamento de Suzuki
[000385] Em uma solução de haleto de arila (1 equivalente) em uma mistura de DME/água [4:1] (concentração ~ 0,2M) foram adicionados ácido borônico (2 equivalentes), catalisador de paládio (0,1-0,25 equivalente) e carbonato de sódio (2 equivalentes). A mistura reacional foi submetida a micro-ondas durante 25 min a 150 °C. Depois de filtrar por uma tomada de celite e concentrar, o produto bruto foi purificado em combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar o aduzido de acoplamento correspondente.
[000386] Alternativamente: Em uma solução de haleto de arila (1 equivalente) em uma mistura de tolueno/água [20:1] (concentração ~ 0,2 M) foram adicionados ácido borônico (1,3-2,5 equivalentes), catalisador de paládio (0,05-0,15 equivalente), triciclo-hexilfosfina (0,150,45 equivalente) e fosfato de potássio (5 equivalentes). A mistura reacional foi submetida a micro-ondas durante 25 min a 150° C. Depois de filtrar por uma tomada de celite e concentrar, o produto bruto foi purificado em combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar o aduzido de acoplamento correspondente.
Procedimento geral F: Hidrogenação
[000387] Em uma solução de substrato em metanol, etanol ou EtOAc (concentração ~ 0,2M) foi adicionado catalisador de paládio (20% em p/p de substrato). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente sob 1 atm de H2 até a conclusão. A reação foi filtrada por uma tomada de celite, seguido por dois enxágues com clorofórmio. O produto bruto foi concentrado e purificado em combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar o produto hidrogenado. Alternativamente, o material final foi purificado por precipitação ou recristalização.
Procedimento geral G: Ciclopropanação
[000388] Em uma mistura de arilnitrila (1 equivalente) e Ti(Oi-Pr)4 (1,7 equivalentes) agitação a -70°C, foi adicionado gota a gota EtMgBr [3,0 M em éter] (1,1 equivalente). A mistura reacional foi permitida aquecer a 25 °C e agitada durante 1 h. À mistura anterior foi adicionado BF3^O (3 equivalentes) gota a gota a 25°C. Depois da adição, a mistura foi agitada durante outras 2 h, e em seguida extinguida com HCl aquoso [2M]. A solução resultante foi em seguida basificada adicionando-se NaOH aquoso [2M]. O material orgânico foi extraído com etil éter. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O material bruto foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (eluindo com éter de petróleo/EtOAc: 10/1 a 1/1) para produzir o 1-aril-ciclopropanamina correspondente.
Procedimento geral H: Acoplamento por meio de redisposição de Curtius in-situ
[000389] Uma mistura de ácido (1 equivalente), trietilamina (2,5 equivalentes), DPPA (1,0 equivalente) em tolueno (concentração ~ 0,3M) foi refluxada durante 30 min. A mistura foi resfriada em temperatura ambiente e álcool (1 equivalente) foi adicionado. Depois da adição, a mistura foi aquecida a 90 °C durante 18 h. A reação foi arrefecida em temperatura ambiente, diluída com EtOAc e lavada com dicarbonato de sódio aquoso saturado. A fase orgânica foi secada em Na2SO4, concentrada e purificada por TLC prep. (EtOAc/MeOH 5:1, contendo 1% de TEA) para proporcionar o carbamato correspondente.
Procedimento geral I: Formação de amida usando EDCI
[000390] Em uma solução de amina (1 equivalente) em DMF ou THF (concentração ~ 0,3M) foram adicionados EDCI (1,2-2,5 equivalentes), HOBT (1,2-2,5 equivalentes), DIPEA (1,2-2,5 equivalentes) e trietilamina (poucas gotas). A mistura reacional foi agitada, e o ácido (1,2 equivalente) foi adicionado. A reação foi agitada em temperatura ambiente durante 18 h, e em seguida concentrada. O resíduo foi dissolvido em EtOAc e lavado com salmoura. A camada orgânica foi secada em Na2SO4 e concentrada. O material bruto foi purificado por HPLCMS prep. ou por combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH).
Preparação A Intermediário 1 cloridrato de 2-(3-bromofenil)propan-2-amina
[000391] Em uma solução de metil-3-bromobenzoato (15,0 g, 69,8 mmol) em THF (140 mL) a -78°C foi adicionado gota a gota uma solução de MeMgBr/dietil éter [3,0M] (58 mL). A mistura reacional foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada durante 2 h. A solução foi vertida em uma solução saturada aquosa de cloreto de amônio, e o material orgânico foi extraído com EtOAc. A camada orgânica foi secada em Na2SO4, filtrada e concentrada para proporcionar o álcool correspondente (14,9 g) que foi usado sem outra purificação.
[000392] Em uma solução de 2-(3-bromofenil)propan-2-ol (17,2 g, 79,8 mmol) em cloroacetonitrila (160 mL) foi adicionado ácido acético (14 mL). A mistura reacional foi resfriada a 0°C e H2SO4 (14 mL) foi adicionado gota a gota. A mistura reacional foi aquecida em temperatura ambiente e agitada durante 18 h. A reação foi em seguida vertida em gelo e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com solução de NaOH aquosa [1,0M] e salmoura, secada em Na2SO4 e concentrada para proporcionar a cloroacetamida correspondente (21,4 g), que foi usada sem outra purificação.
[000393] Em uma solução de N-(2-(3-bromofenil)propan-2-il)-2- cloroacetamida (20,3 g) em etanol (120 mL) foi adicionado ácido acético (20 mL). A mistura reacional foi agitada em refluxo durante 18 h. A solução foi resfriada em temperatura ambiente, e o precipitado foi filtrado em uma almofada de celite. O filtrado foi concentrado, e o resíduo foi dissolvido em EtOAc. A camada orgânica foi tratada com solução de NaOH aquosa [1,0M], secada em Na2SO4 e concentrada. O material bruto foi tratado com uma solução de HCl/dioxano [4M]. O intermediário cloridrato de 2-(3-bromofenil)propan-2-amina foi triturado em éter e usado no estado em que se encontra para a próxima etapa (7,50 g, 43%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7,69 (q, J = 1,8 Hz, 1H), 7,55 (ddd, J = 1,0, 1,8, 7,9 Hz, 1H), 7,49 (ddd, J = 1,0, 2,0, 8,0 Hz, 1H), 7,38 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 1,71 (s, 6H) ppm.
Preparação B Intermediário 2 cloridrato de 2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-amina
[000394] Em uma solução de ácido 5-bromo-2-fluorobenzoico (4,85 g, 22,8 mmol) em metanol (45 mL) foi adicionado H2SO4 (4,5 mL). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 18 h, e a solução foi concentrada. O resíduo foi tratado com uma solução de NaOH aquosa [10% em p/v], e o material orgânico foi extraído com CHCl3. A camada orgânica foi secada em Na2SO4, filtrada e concentrada para proporcionar o éster correspondente (4,69 g, 91%) que foi usado sem outra purificação.
[000395] O intermediário de éster (4,69 g, 20,1 mmol) foi convertido para o intermediário 2 usando o mesmo procedimento relatado em intermediário de exemplo 1 para proporcionar o sal de amônio correspondente (3,94 g, 67% de rendimento total) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7,67-7,57 (m, 2H), 7,21 (dd, J = 8,7, 12,3 Hz, 1H), 1,77 (s, 6H) ppm.
Intermediário 3 cloridrato de 2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-amina
[000396] Ácido 5-bromo-2-fluorobenzoico foi transformado para o intermediário 3 usando o mesmo procedimento relatado no intermediário de exemplo 2 para proporcionar o sal de amônio correspondente (2,79 g, 49% de rendimento total) como um sólido branco.
Intermediário 4 2-(3-bromo-2-fluorofenil)propan-2-amina
[000397] Ácido 3-bromo-2-fluorobenzoico foi transformado para o intermediário 4usando o mesmo procedimento relatado no intermediário de exemplo 2 para proporcionar a amina correspondente como óleo amarelo pálido.
Intermediário 5 cloridrato de 2-(4-bromofenil)propan-2-amina
[000398] Usando o procedimento geral B, bromobenzonitrila (2,00 g, 11,0 mmol) foi convertida para o 2-(4-bromofenil)propan-2-amina corres-pondente, que foi proporcionado como um óleo marrom (1,20 g, 51%).
Preparação C Intermediário 6 1,4-Diazabiciclo[3.2.2]nonano
[000399] Em uma solução agitada de 1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonan-3- ona (1,0 g, 7,2 mmol) em 1,4-dioxano (7,2 mL) em temperatura ambiente foi adicionado hidreto de alumínio de lítio [2,0M/THF] (4,1 mL, 8,2 mmol). A mistura reacional foi em seguida aquecida em refluxo durante 6 horas antes de resfriar em temperatura ambiente. A reação foi extinguida pela adição em etapas de 200 DL de H2O, 200 DL de NaOH aquoso a 15% e 600 DL de H2O. A mistura foi filtrada através de Celite, que foi subsequentemente lavado com EtOAc. O filtrado combinado foi concentrado em vácuo para proporcionar o produto (0,82 g, 90%) que foi usado sem outra purificação. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 3,28-3,25 (m, 1H), 2,99-2,95 (m, 8H), 1,86-1,80 (m, 3H), 1,69-1,64 (m, 2H) ppm.
Preparação D Intermediário 7 2-Metilquinuclidin-3-ol
[000400] Uma solução de carbonato de potássio (11,4 g, 82,8 mmol) e hidrato de quinuclidina (5,00 g, 20,4 mmol) foi dissolvida em H2O (15,6 mL). Quando completamente dissolvida, diclorometano (20,4 mL) foi adicionado, e a reação foi agitada durante a noite em temperatura ambiente. A fase orgânica foi separada, e a fase aquosa extraída com clorofórmio (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas em MgSO4, filtradas e concentradas em vácuo. O produto foi usado sem outra purificação. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 2,79 (s, 1H), 5,19 (s, 1H), 3,14-3,06 (m, 2H), 2,99-2,91 (m, 2H), 2,57-2,55 (m, 1H), 1,98-1,93 (m, 4H) ppm.
[000401] O 2-metilenoquinuclidin-3-ona (3,50 g) em etanol (30 mL) foi reduzido em 10% de Pd/C (50 % em peso) sob uma atmosfera de H2. Quando julgado completo por TLC (~3 dias), o catalisador foi filtrado, e a massa filtrante lavada com acetato de etila. O solvente foi removido em vácuo para proporcionar o produto desejado (2,80 g, 80%) que foi obtido e usado sem outra purificação. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 3,373,31 (m, 1H), 3,21-3,13 (m, 2H), 3,09-3,00 (m, 1H), 2,97-2,89 (m, 1H), 2,46-2,43 (m, 1H), 2,05-1,91 (m, 4H), 1,34 (d, J = 7,6 Hz, 3H) ppm.
[000402] Em 2-metilquinuclidin-3-ona (0,50g, 3,60 mmol) em 1,4- dioxano (18 mL) em temperatura ambiente, foi adicionado hidreto de alumínio de lítio [1,0M/THF] (4,1, 4,1 mmol). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 15 minutos. A reação foi extinguida pela adição em etapas de 116 DL de H2O, 116 DL de NaOH aquoso a 15% e 348 DL de H2O. A mistura foi filtrada em Celite, que foi subsequentemente lavado com EtOAc. O solvente foi removido em vácuo para proporcionar o produto (0,48 g, 95%), que foi usado sem outra purificação como uma mistura 2:1 de diastereômeros.
Preparação E Intermediário 8 1-azabiciclo[3.2.2]nonan-4-ol
[000403] Em 1-azabiciclo[3.2.2]nonan-4-ona (0,20 g, 1,4 mmol) em 1,4-dioxano (2,8 mL) a 0°C foi adicionado hidreto de alumínio de lítio [1,0M/THF] (1,7 mL, 1,7 mmol). A mistura reacional foi mantida a 0°C durante 15 minutos. A reação foi extinguida pela adição em etapas de 46 DL de H2O, 46 DL de NaOH aquoso a 15% e 138 DL de H2O(pag 118). A mistura foi filtrada por Celite, que foi subsequentemente lavado com EtOAc. O solvente foi removido em vácuo para proporcionar o produto (0,19 g, 96%), que foi usado sem outra purificação. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 3,90-3,86 (m, 1H), 3,09-3,03 (m, 1H), 2,96-2,91 (dd, J = 9,2, 6,8 Hz, 1H), 2,86-2,75 (m, 3H), 2,71-2,64 (m, 1H), 2,34-2,27 (bs s, 1H), 1,98-1,86 (m, 3H), 1,71-1,59 (m, 3H), 1,51-1,35 (m, 1H) ppm.
Preparação F Intermediário 9 1-Azabiciclo[2.2.1]heptan-3-ol
[000404] Em uma mistura de metóxido de sódio (2,00 g, 37,9 mmol) em metanol (9 mL) a 0°C foi adicionado cloridrato de glicina metil éster (4,76 g, 37,9 mmol) e dimetil itaconato (5,00 g, 31,6 mmol). A reação foi aquecida em refluxo durante 16 horas antes de resfriar em temperatura ambiente. O sólido foi filtrado e lavado com diclorometano. O filtrado foi concentrado, e o resíduo diluído com HCl a 5N (50 mL). A camada aquosa foi extraída com diclorometano (4 x 50 mL), secada em MgSO4, filtrada e concentrada em vácuo. O produto foi usado sem outra purificação. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4,04 (dd, J = 82,0, 17,6 Hz), 3,74-3,64 (m, 8H), 3,32-3,24 (m, 1H), 2,77-2,63 (m, 2H) ppm.
[000405] Em metil-1-(2-metóxi-2-oxoetil)-5-oxopirrolidina-3-carboxila- to (3,40 g, 16,0 mmol) em THF (20 mL) a 0°C foi adicionado borano- THF [1,0M/THF] (32,0 mL, 32,0 mmol). A reação foi agitada em refluxo durante 1 hora, e em seguida resfriada em temperatura ambiente, onde foi permitida agitar durante um adicional de 12 horas. A reação foi extinguida pela adição de uma solução saturada de carbonato de potássio (5,52 g em 20 mL de H2O) e aquecida em refluxo durante uma 1 hora adicional antes de resfriar em temperatura ambiente. O solvente foi removido em vácuo, e o resíduo tornado ácido pela adição de HCl a 5N (25 mL). A camada aquosa foi extraída com diclorometano (2 x 30 mL). O pH da camada aquosa foi em seguida tornado básico pela adição de carbonato de potássio sólido. A camada aquosa também foi extraída com diclorometano (5 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas em MgSO4, filtradas e concentradas em vácuo. O produto foi usado sem outra purificação. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 3,66 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 3,29 (ABq, 2H, J = 24,0, 16,8 Hz), 3,06-3,02 (m, 2H), 2,87-2,81 (m, 1H), 2,71-2,65 (m, 1H), 2,56-2,50 (m, 1H), 2,092,04 (m, 2H) ppm.
[000406] Em uma solução de refluxo de terc-butóxido de potássio (2,46 g, 22,0 mmol) em tolueno (32 mL) foi adicionado gota a gota uma solução de metil 1-(2-metóxi-2-oxoetil)pirrolidina-3-carboxilato (2,00 g, 10,0 mmol) em tolueno (10 mL) durante 1 hora. A reação foi permitida agitar e durante 3 horas adicionais em refluxo, antes de primeiro resfriar em temperatura ambiente, em seguida resfriar a -10°C. Ácido acético (1,3 mL) foi em seguida adicionado com agitação. A camada de tolueno foi extraída com HCl a 5N (4 x 50 mL). As camadas aquosas combinadas foram aquecidas a 110°C durante 8 horas. A reação foi em seguida resfriada em temperatura ambiente, e o volume reduzido pela metade em vácuo. O pH da mistura reacional foi tornado básico pela adição de carbonato de potássio sólido. A camada aquosa foi extraída com diclorometano (5 x 50 mL), e as camadas orgânicas combinadas foram concentradas em vácuo. Ao produto bruto foi adicionado etil éter. O sólido foi filtrada para proporcionar o produto desejado (0,30 g, 27%), que foi usado sem outra purificação. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 3,05-2,96 (m, 3H), 2,76 (s, 2H), 2,72-2,66 (m, 2H), 2,09-2,01 (m, 1H), 1,781,71 (m, 1H) ppm.
[000407] O 1-azabiciclo[2.2.1]heptan-3-ona (0,30 g, 2,7 mmol) em etanol (2-3 mL) foi reduzido em PtO2 (50% em peso) sob uma atmosfera de H2. Depois de agitar durante 4 horas, o catalisador foi filtrado, e a massa filtrante lavada com etanol. O etanol foi removido em vácuo para proporcionar o produto desejado (0,29 g, 95%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4,36-4,35 (m, 1H), 3,10-3,05 (m, 1H), 2,95-2,88 (m, 1H), 2,722,66 (m, 1H), 2,63-2,57 (m, 2H), 2,48-2,44 (dd, J = 10,0, 3,2 Hz, 1H), 2,11-2,05 (m, 2H), 1,51-1,44 (m, 1H) ppm.
Preparação G Intermediário 10 (R)-3-metilquinuclidin-3-amina e (S)-3-metilquinuclidin-3-amina
[000408] Em uma solução bem agitada de MeLi [3,0M/dietil éter] (67,0 mL, 201 mmol) em dietil éter anidroso (150 mL) a -78°C foi adicionado, gota a gota, uma solução de quinuclidin-3-ona (12,5 g, 100 mmol) em dietil éter (100 mL). A solução resultante foi mantida a -78°C durante 1 hora, em seguida em temperatura ambiente durante 18 horas. Água (60 mL) foi adicionada gota a gota a 0°C, e a mistura foi concentrada em vácuo para produzir um resíduo, que foi purificado por cromatografia de coluna em óxido de alumínio neutro (0-20% de MeOH em CHCl3) para produzir 3-metilquinuclidin-3-ol (10,0 g, 71%) como um sólido amarelo claro. Em acetonitrila agitada (250 mL) a 0°C foi adicionado lentamente ácido sulfúrico concentrado (100 mL). A solução resultante foi adicionada gota a gota a uma mistura de 3-metilquinuclidin-3-ol (9,10 g, 64,5 mmol) em acetonitrila (250 mL) a 0°C. A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 60 horas, em seguida resfriada com um banho de gelo e basificada com solução de hidróxido de sódio aquosa em pH 10. A mistura foi extraída com 5:1 (v/v) CHCl3/i- PrOH. A camada orgânica foi concentrada para proporcionar um resíduo, que foi diluído com HCl aq. a 2N e lavado com 5:1 (v/v) CHCl3/i- PrOH. A camada aquosa restante foi em seguida basificada com NaOH a 2N e extraída com 5:1 (v/v) CHCl3/i-PrOH. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secadas (Na2SO4) e concentradas para produzir 9,5 g (82%) do composto desejado como um óleo amarelo claro. Os 2 enantiômeros do intermediário anterior são separados um do outro usando coluna quiral em sistema de cromato- grafia de fluido supercrítica (SFC).
[000409] Uma solução do intermediário de acetamida quiral anterior (9,50 g, 52,0 mmol) em HCl conc. (100 mL) foi refluxada durante 3 dias, resfriada com um banho de gelo e neutralizada com solução de hidróxido de sódio aquosa em pH 1. A mistura foi lavada com 5:1 (v/v) CHCl3/i-PrOH. A camada aquosa foi em seguida basificada com NaOH a 2N e extraída com 5:1 (v/v) CHCl3/i-PrOH). Os extratos combinados foram lavados com água, secados (Na2SO4) e concentrados para produzir 5,00 g (69%) do composto quiral desejado como um semissólido amarelo claro. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 2,72-2,39 (m, 6H), 2,01-1,96 (m, 1H), 1,67-1,61 (m, 1H), 1,43-1,36 (m, 2H), 1,231,17 (m, 1H), 1,09 (s, 3H) ppm. 13C RMN (125 MHz, DMSO-d6) δ 65,3, 48,3, 46,6, 46,4, 34,2, 30,0, 24,8, 22,8 ppm. Pureza: > 99% (GC-MS); tempo de retenção 6,63 min; (M) 140,1.
Preparação H Intermediário 11 2-(3-(4-fluorofenil)isotiazol-5-il)propan-2-amina
[000410] Em uma suspensão agitada de 4-fluorobenzamida (70,00 g, 503,1 mmol) em tolueno (900 mL) foi adicionado cloreto de clorocarbonil sulfenila (83,0 mL, 1,00 mol). A mistura foi aquecida durante a noite a 60 °C e concentrada. O sólido castanho resultante foi triturado com metilenocloreto (200 mL), coletado por filtração por sucção e enxaguado com cloreto de metileno adicional (4 x 70 mL). O produto bruto foi impregnado em sílica (100 g) e cromatografado em um funil filtrante grande carregado seco com sílica usando um gradiente de hexano/acetato de etila. O produto 5-(4-fluorofenil)-1,3,4-oxatiazol-2- ona foi proporcionado como um sólido esbranquiçado (55,98 g, 56%).
[000411] Em uma solução agitada de 5-(4-fluorofenil)-1,3,4-oxatiazol- 2-ona (42,80 g, 217,1 mmol) em o-diclorobenzeno (600 mL) foi adicionado etil propiolato (66,0 mL, 651 mmol). A mistura foi aquecida durante a noite a 135°C e concentrada. O óleo residual foi purificado por cromatografia flash usando um gradiente de hexano/acetato de etila para proporcionar etil 3-(4-fluorofenil)isotiazol-5-carboxilato como um sólido dourado pálido (17,35 g, 32%). O isômero de etil 3-(4- fluorofenil)isotiazol-4-carboxilato mais polar (gerado na relação ~57/43 versus o produto desejado) foi descartado.
[000412] Em uma solução agitada e resfriada (0°C) de etil 3-(4- fluorofenil)isotiazol-5-carboxilato (38,50 g, 153,2 mmol) em THF (400 mL) foi adicionado uma solução de brometo de metilmagnésio em dietil éter (3,0 M, 128 mL, 384 mmol), gota a gota durante 20 minutos. Depois de outra 1,5 hora a 0 °C, a reação foi extinguida pela adição lenta de acetato de etila (20 mL) e concentrada. O resíduo foi apreendido em NH4Cl aquoso (400 mL) e extraído com acetato de etila (2 x 150 mL). Os extratos combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados. O xarope ambarino resultante foi purificado por cromatografia flash usando um gradiente de hexano/acetato de etila para proporcionar 2-(3- (4-fluorofenil)isotiazol-5-il)propan-2-ol como um sólido macio, dourado (29,02 g, 80%).
[000413] 2-(3-(4-Fluorofenil)isotiazol-5-il)propan-2-ol (29,00 g, 122,2 mmol) foi apreendido em cloreto de tionila (75 mL). A mistura foi resfriada (banho de gelo) brevemente e agitada. Depois de 4 horas, a reação foi concentrada, e o resíduo foi dividido entre acetato de etila (200 mL) e NaHCO3 aquoso (300 mL). A camada orgânica foi combinada outra vez com um extrato da camada aquosa (acetato de etila, 1 x 100 mL), secada (Na2SO4) e concentrada para proporcionar uma mistura do produto 5-(2- cloropropan-2-il)-3-(4-fluorofenil)isotiazol e subproduto de eliminação 3-(4- fluorofenil)-5-(prop-1-en-2-il)isotiazol (~63/39 relação) como um óleo ambarino escuro (29,37 g). Este material foi usado sem purificação na próxima reação.
[000414] Em uma solução agitada do produto da etapa anterior em DMSO (80 mL) foi adicionado azida de sódio (14,89 g, 229,0 mmol). A mistura foi aquecida durante a noite a 50°C, diluída com acetato de etila (250 mL) e lavada com água (6 x 400 mL). A camada orgânica foi secada (Na2SO4) e concentrada para proporcionar uma mistura de 5-(2- azidopropan-2-il)-3-(4-fluorofenil)isotiazol e 3-(4-fluorofenil)-5-(prop-1- en-2-il)isotiazol (relação ~56/44) como um óleo ambarino escuro (29,10 g). Este material foi usado sem purificação na próxima reação.
[000415] O produto da etapa anterior foi combinado com 10% de paládio em carbono (50% de água; 7,50 g) e apreendido em metanol (350 mL). A suspensão agitada foi ciclizada entre vácuo e uma purga de nitrogênio três vezes. Depois de uma evacuação adicional, a reação foi preenchida novamente com gás hidrogênio (reservatório de balão) e agitada durante a noite. A reação foi filtrada por Celite. O filtrado foi combinado com enxágues de metanol de Celite e concentrado. O óleo ambarino escuro resultante purificado por cromatografia flash usando um gradiente de cloreto de metileno/metanol para proporcionar 2-(3-(4- fluorofenil)isotiazol-5-il)propan-2-amina como óleo viscoso, ambarino (14,23 g, 49% em 3 etapas).
[000416] Vários métodos estão sendo usados ou procurados para o tratamento de LSDs, a maioria dos quais focam-se na terapia de reposição de enzima para uso sozinho no controle da doença. Numerosas terapias de reposição de enzima aprovadas estão comercialmente disponíveis para tratar LSDs (por exemplo, Miozime® para doença de Pompe, Aldurazime® para Mucopolissacaridose I, Cerezime® para doença de Gaucher e Fabrazime® para doença de Fabry). Adicionalmente, os inventores identificaram várias moléculas pequenas sozinhas para uso na administração de LSDs. Os métodos terapêuticos da invenção descritos aqui fornecem opções de tratamento para o médico voltado com o controle de várias doenças de armazenamento lisossômico, como descrito em detalhes abaixo.
[000417] Em certos aspectos da invenção, os compostos da presente invenção podem ser usados para tratar uma doença metabólica, tal como uma doença de armazenamento lisossômico (LSD), sozinhos ou como uma terapia de combinação com uma terapia de reposição de enzima. Em outros aspectos da invenção, os compostos da presente invenção podem ser usados para inibir ou reduzir a atividade de GCS em um indivíduo diagnosticado com uma doença metabólica, tal como uma LSD, sozinhos ou como uma terapia de combinação com uma terapia de reposição de enzima. Em outros aspectos da invenção, os compostos da presente invenção podem ser usados para reduzir e/ou inibir o acúmulo de um material armazenado (por exemplo, substrato lisossômico) em um indivíduo diagnosticado com uma doença metabólica, tal como uma LSD. Em certas modalidades dos aspectos precedentes, a LSD é Gaucher (tipo 1, tipo 2 ou tipo 3), Fabry, GM1- gangliosidose ou GM2-gangliosidoses (por exemplo, Deficiência do Ativador de GM2, Tay-Sachs e Sandhoff). A Tabela 1 alista numerosas LSDs e identifica a enzima deficiente correspondente que pode ser usada como uma ERT nos aspectos precedentes da invenção.
[000418] Em outras conjunturas pode ser necessário fornecer SMT a um paciente cuja condição requer a redução de substratos no cérebro e desse modo não é tratável por administração sistêmica de ERT. Enquanto a administração intracerebroventricular direta ou intatecal puderem reduzir os níveis de substrato no cérebro, a administração sistêmica de ERT não é amena para LSD com o envolvimento do Sistema Nervoso Central (CNS) devido a sua incapacidade de cruzar a Barreira Hematoencefália (BBB) e SMT pode mostrar benéfico em pacientes que têm atividades enzimáticas residuais no CNS.
[000419] De acordo com a presente invenção, SMT é fornecida a um paciente para tratar um câncer e/ou doença metabólica, tal como, uma doença de armazenamento lisossômico. A SMT pode incluir um ou mais moléculas menores. A SMT inclui administrar ao paciente os compostos da presente invenção. Em modalidades particulares, o composto é (S)- Quinuclidin-3-il-(2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)carbamato ou Quinuclidin-3-il-(2-(4'-flúor-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)carbamato, ou combinações dos mesmos.
[000420] Em certas modalidades, os compostos da invenção, tais como, por exemplo, (S)-Quinuclidin-3-il-(2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4- il)propan-2-il)carbamato e Quinuclidin-3-il-(2-(4'-flúor-[1,1'-bifenil]-3- il)propan-2-il)carbamato podem ser usados para o tratamento de virtualmente qualquer doença de armazenamento que resulta de um defeito na via de glicoesfingolipídio (por exemplo, Gaucher (isto é, tipo 1, tipo 2 tipo 3), Fabry, GM1-gangliosidose, GM2-gangliosidoses (por exemplo, Deficiência do Ativador de GM2, Tay-Sachs e Sandhoff)). Em uma modalidade particularmente preferida, (S)-Quinuclidin-3-il- (2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)carbamato ou um sal farmaceuticamente aceitável ou profármaco do mesmo é usado para inibir e/ou reduzir o acúmulo de Gb3 e/ou lyso-Gb3 em um paciente com Doença de Fabry, sozinho ou como uma terapia de combinação com terapia de reposição de enzima (veja Exemplos). Em uma modalidade preferida, a terapia de reposição de enzima inclui a administração de alfa-galactosidase A ao paciente com Fabry. Realmente, os Exemplos abaixo demonstram que um inibidor de GCS da invenção reduz Armazenamento de Gb3 e lyso-Gb3 eficazmente em um modelo de camundongo com doença de Fabry, desse modo suportando seu uso como um método viável para o tratamento da doença de Fabry. Além disso, os dados de terapia de combinação in vivo fornecidos nos Exemplos sugerem fortemente que um método terapêutico combinado pode ser aditivo e complementar.
[000421] Em certas modalidades, os compostos da invenção, tais como, por exemplo, (S)-Quinuclidin-3-il-(2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4- il)propan-2-il)carbamato e Quinuclidin-3-il-(2-(4'-flúor-[1,1'-bifenil]-3- il)propan-2-il)carbamato podem ser usados para reduzir o nível de GluCer e GluSf no cérebro de um indivíduo diagnosticado com doença Gaucher neuropática, sozinhos ou em combinação com ERT (por exemplo, administração de glicocerebrosidase).
[000422] Regimes de dosagem para um componente de terapia de molécula pequena de uma terapia de combinação da invenção são geralmente determinados pelo clínico versado e espera-se que variem, dependendo significativamente da doença de armazenamento particular a ser tratada e do estado clínico do indivíduo afetado particular. Os princípios gerais para determinar um regime de dosagem para uma determinada SMT da invenção para o tratamento de qualquer doença de armazenamento são conhecidos pelo técnico versado. A orientação para regimes de dosagem pode ser obtida de quaisquer das muitas referências bem conhecidas na técnica neste tópico. Outra orientação está disponível, inter alia, de uma revisão das referências específicas citadas aqui. Em certas modalidades, tais dosagens podem variar de cerca de 0,5 mg/kg a cerca de 300 mg/kg, preferivelmente de cerca de 5 mg/kg a cerca de 60 mg/kg (por exemplo, 5 mg/kg, 10 mg/kg, 15, mg/kg, 20 mg/kg, 25 mg/kg, 30 mg/kg, 35 mg/kg, 40 mg/kg, 45 mg/kg, 50 mg/kg, 55 mg/kg and 60 mg/kg) por administração intraperitoneal, oral ou equivalente de uma a cinco vezes por dia. Tais dosagens podem variar de cerca de 5 mg/kg a cerca de 5 g/kg, preferivelmente de cerca de 10 mg/kg a cerca de 1 g/kg por administração oral, intraperitoneal ou equivalente de uma a cinco vezes diariamente. Em uma modalidade, a faixa de doses de cerca de cerca de 10 mg/dia a cerca de 500 mg/dia (por exemplo, 10 mg/dia, 20 mg/dia, 30 mg/dia, 40 mg/dia, 50 mg/dia, 60 mg/dia, 70 mg/dia, 80 mg/dia, 90 mg/dia, 100 mg/dia, 110 mg/dia, 120 mg/dia, 130 mg/dia, 140 mg/dia, 150 mg/dia, 160 mg/dia, 170 mg/dia, 180 mg/dia, 190 mg/dia, 200 mg/dia, 210 mg/dia, 220 mg/dia, 230 mg/dia, 240 mg/dia, 250 mg/dia, 260 mg/dia, 270 mg/dia, 280 mg/dia, 290 mg/dia, 300 mg/dia). Uma faixa de dose oral particularmente preferida é de cerca de 50 mg a cerca de 100 mg, em que a dose é administrada duas vezes por dia. Uma faixa de dose oral particular para um composto da presente invenção é de cerca de 5 mg/kg/dia a cerca de 600 mg/kg/dia. Em uma faixa de dose oral particular para um composto da presente invenção é de cerca de 1 mg/kg/dia a cerca de 120 mg/kg/dia, por exemplo, 1 mg/kg/dia, 5 mg/kg/dia, 10 mg/kg/dia, 15 mg/kg/dia, 20 mg/kg/dia, 25 mg/kg/dia, 30 mg/kg/dia, 35 mg/kg/dia, 40 mg/kg/dia, 45 mg/kg/dia, 50 mg/kg/dia, 55 mg/kg/dia ou 60 mg/kg/dia, 65 mg/kg/dia, 70 mg/kg/dia, 75 mg/kg/dia, 80 mg/kg/dia, 85 mg/kg/dia, 90 mg/kg/dia, 95 mg/kg/dia, 100 mg/kg/dia, 105 mg/kg/dia, 110 mg/kg/dia, 115 mg/kg/dia ou 120 mg/kg/dia.
[000423] Em certas modalidades, a invenção refere-se às terapias de combinação de SMT que usa os compostos da invenção e terapia ERT para o tratamento de doenças de armazenamento lisossômico. Uma lista parcial de doenças de armazenamento lisossômico conhecidas que podem ser tratadas de acordo com a invenção é mencionada na Tabela 1, incluindo o nome de doença comum, material armazenado, e deficiência de enzima correspondente (adaptada da Tabela 38-4 de Kolodny e outro, 1998, id.). TABELA 1
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[000424] Qualquer método conhecido pelo técnico versado pode ser usado para monitorar o estado de doença e a eficácia de uma terapia de combinação da invenção. Monitores clínicos do estado de doença podem incluir, porém, podem não limitar o volume do órgão (por exemplo, fígado, baço), hemoglobina, contagem de eritrócito, hematócrito, trombocitopenia, caquexia (debilitação), e níveis de quitinase de plasma (por exemplo, quitotriosidase). Quitotriosidase, uma enzima da família de quitinase, é conhecida por ser produzida por macrófagos em níveis altos em indivíduos com doenças de armazenamento lisossômico (veja Guo e outro, 1995, J. Inherit. Metab. Dis. 18, 717-722; den Tandt e outro, 1996, J. Inherit. Metab. Dis. 19, 344-350; Dodelson de Kremer e outro, 1997, Medicina (Buenos Aires) 57, 677-684; Czartoryska e outro, 2000, Clin. Biochem. 33, 147-149; Czartoryska e outro, 1998, Clin. Biochem. 31, 417-420; Mistry e outro, 1997, Baillieres Clin. Haematol. 10, 817-838; Young e outro, 1997, J. Inherit. Metab. Dis. 20, 595-602; Hollak e outro, 1994, J. Clin. Invest. 93, 1288-1292). Quitotriosidase é preferivelmente medida juntamente com a enzima conversora de angiotensina e fosfatase ácida não resistente ao tartarato para monitorar a resposta ao tratamento de pacientes com Gaucher.
[000425] Métodos e formulações para administrar as terapias de combinação da invenção incluem todos os métodos e formulações bem conhecidas na técnica (veja, por exemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 1980 e anos subsequentes, 16th ed. e edições subsequentes, A. Oslo editor, Easton Pa.; Controlled Drug Delivery, 1987, 2a rev., Joseph R. Robinson & Vincent H. L. Lee, eds., Marcel Dekker, ISBN: 0824775880; Enciclopedia of Controlled Drug Delivery, 1999, Edith Matiowitz, John Wiley & Sons, ISBN: 0471148288; Pat. U.S. No. 6.066.626 e referências citadas nisto; veja da mesma forma, referências citadas nas seções abaixo).
[000426] De acordo com a invenção, os seguintes métodos gerais são fornecidos para terapia de combinação no tratamento de doenças de armazenamento lisossômico. Cada método geral envolve combinar a terapia de reposição de enzima até certo ponto com a terapia de molécula pequena consistente com a otimização do benefício clínico enquanto minimizando as desvantagens associadas com o uso de cada terapia sozinha.
[000427] Em uma modalidade da invenção, a terapia de reposição de enzima (sozinha ou em combinação com terapia de molécula pequena) é administrada para iniciar o tratamento (isto é, para diminuir o volume do indivíduo), e terapia de molécula pequena é administrada depois da fase de diminuição do volume obtida e manter um, efeito terapêutico a longo prazo, estável sem a necessidade de injeções de ERT intravenosas frequentes. Por exemplo, a terapia de reposição de enzima pode ser administrada intravenosamente (por exemplo, durante um período de uma a duas horas) uma vez, em uma base semanal, uma vez a cada duas semanas, ou uma vez a cada dois meses, durante várias semanas ou meses, ou por mais tempo (por exemplo, até que um órgão indicador envolvido tal como baço ou fígado mostre uma diminuição no tamanho). Além disso, a fase de ERT do tratamento de diminuição do volume inicial pode ser realizada sozinha ou em combinação com uma terapia de molécula pequena. Um componente terapêutico de molécula pequena é preferido particularmente onde a molécula pequena é compatível com a administração oral, desse modo fornecendo-se outro alívio de intervenção intravenosa frequente.
[000428] A alternância entre ERT e SMT, ou suplementação de SMT com ERT quando necessário, fornece uma estratégia para simultaneamente levar vantagem das intensidades e controlar as fraquezas associadas com cada terapia quando usada sozinha. Uma vantagem de ERT, se usada para diminuição do volume e/ou para mais cuidado a longo prazo, é a experiência clínica muito mais ampla disponível para informar as decisões do médico. Além disso, um indivíduo pode ser eficazmente titulado com ERT durante a fase de diminuição do volume, por exemplo, monitorando-se os metabólitos bioquímicos em amostras de urina ou outras corporais, ou medindo-se o volume do órgão afetado. Uma desvantagem de ERT, entretanto, é a frequência da administração requerida, tipicamente envolvendo a injeção intravenosa em uma base semanal ou bissemanal devido ao re- acúmulo constante do substrato. O uso da terapia de molécula pequena para reduzir a quantidade de ou inibir o acúmulo de substrato em um paciente pode, por sua vez, reduzir a frequência da administração de ERT. Por exemplo, um regime de dosagem para terapia de reposição de enzima bissemanal pode ser oferecida em um "feriado de ERT" (por exemplo, usando uma SMT) de modo que as injeções de enzima frequentes não sejam a terapia requerida. Além disso, o tratamento de uma doença de armazenamento lisossômico com terapia de combinação pode fornecer métodos terapêuticas complementares. Realmente, como demonstrado nos Exemplos abaixo, uma terapia de combinação SMT e ERT pode fornecer melhorias significantes em qualquer plataforma terapêutica sozinha. Estes dados sugerem que a terapia de combinação usando SMT e ERT pode ser igualmente aditiva e complementar. Em uma modalidade, ERT pode ser usada como uma estratégia de diminuição do volume (isto é, para iniciar o tratamento), seguido por ou simultaneamente suplementado com SMT usando um composto da presente invenção. Em outra modalidade, um paciente é tratado primeiro com SMT usando um composto da presente invenção, seguido por ou simultaneamente suplementado com ERT. Em outras modalidades, uma SMT é usada para inibir ou reduzir o outro acúmulo de substrato (ou re-acúmulo de substrato se usado depois da diminuição do volume com ERT) em um paciente com uma doença de armazenamento lisossômico, e ERT opcionalmente fornecida quando necessário para reduzir qualquer outro acúmulo de substrato. Em uma modalidade, esta invenção fornece um método de terapia de combinação para o tratamento de um indivíduo diagnosticado como tendo uma doença de armazenamento lisossômico compreendendo a alternância entre a administração de uma terapia de reposição de enzima e uma terapia de molécula pequena. Em outra modalidade, esta invenção fornece um método de terapia de combinação para o tratamento de um indivíduo diagnosticado como tendo uma doença de armazenamento lisossômico que compreende simultaneamente administrar uma terapia de reposição de enzima e uma terapia de molécula pequena. Nas várias terapias de combinação da invenção, será entendido que a administração da terapia de molécula pequena pode ocorrer antes de, simultaneamente com, ou depois da administração da terapia de reposição de enzima. Semelhantemente, a administração da terapia de reposição de enzima pode ocorrer antes de, simultaneamente com, ou depois da administração de terapia de molécula pequena.
[000429] Em quaisquer das modalidades da invenção, a doença de armazenamento lisossômico é selecionada a partir do grupo que consiste em Gaucher (tipos 1, 2 e 3), Niemann-Pick, Farber, GM1- gangliosidose, GM2-gangliosidoses (por exemplo, GM2 Activator Deficiency, Tay-Sachs e Sandhoff), Krabbe, Hurler-Scheie (MPS I), Hunter (MPS II), Sanfilippo (MPS III) Tipo A, Sanfilippo (MPS III) Tipo B, Sanfilippo (MPS III) Tipo C, Sanfilippo (MPS III) Tipo D, Marquio (MPS IV) Tipo A, Marquio (MPS IV) Tipo B, Maroteaux-Lamy (MPS VI), Sly (MPS VII), mucosulfatidose, sialidoses, mucolipidose II, mucolipidose III, mucolipidose IV, Fabry, Schindler, Pompe, doença de armazenamento de ácido siálico, fucosidose, manosidose, aspartilglicosaminúria, Wolman, e ceroide lipofucsinoses neuronais.
[000430] Além disso, a ERT fornece uma quantidade eficaz de pelo menos uma das seguintes enzimas; glicocerebrosidase, esfingo- mielinase, ceramidase, GM1-gangliosídeo-beta-galactosidase, hexosaminidase A, hexosaminidase B, beta-galactocerebrosidase, alfa-L- iduronidase, iduronate sulfatase, heparan-N-sulfatase, N-acetil-alfa- glicosaminidase, acetil CoA:alfa-glicosaminida acetil-transferase, N- acetil-alfa-glicosamina-6-sulfatase, galactosamina-6-sulfatase, betagalactosidase, galactosamina-4-sulfatase (arilsulfatase B), beta- glicuronidase, arilsulfatase A, arilsulfatase C, alfa-neuraminidase, N- acetil-glicosamina-1-fosfato transferase, alfa-galactosidase A, alfa-N- acetilgalactosaminidase, alfa-glicosidase, alfa-fucosidase, alfa- manosidase, aspartilglicosamina amidase, lipase ácida, palmitoil- proteína tioesterase (CLN-1), PPT1, TPP1, CLN3, CLN5, CLN6, CLN8, NPC1 ou NPC2.
[000431] De acordo com a invenção, a SMT e/ou ERT produze(m) uma diminuição em pelo menos um dos seguintes materiais armazenados; glicocerebrosídeo, esfingomielina, ceramida, GM1- gangliosídeo, GM2-gangliosídeo, globosídeo, galactosilceramida, sulfato de dermatana, sulfato de heparana, sulfato de ceratana, sulfatídeos, mucopolissaccarídeos, sialiloligossacarídeos, glicoproteínas, sialiloli- gossacarídeos, glicolipídeos, globotriaosilceramida, glicopeptídeos ligados a O, glicogênio, ácido siálico livre, fucoglicolipídeos, fucosiloligossacarídeos, manosiloligossacarídeos, aspartilglicosamina, ésteres de colesterila, triglicérides, depósitos osmofílicos granulares - Saposinas A e D, subunidade c de ATP sintase, NPC1 ou NPC2
[000432] Em certas modalidades da invenção, a terapia de molécula pequena compreende administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de (S)-Quinuclidin-3-il-(2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)carba- mato (veja Fig. 2A). Em outras modalidades, a terapia de molécula pequena compreende administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de Quinuclidin-3-il-(2-(4'-flúor-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)carbamato (veja Fig. 2B). A terapia de molécula pequena pode incluir admininstrar a um indivíduo um ou mais compostos. Em certas modalidades, pelo menos um dos compostos é um composto da presente invenção, tais como aqueles mostrados nas Figs. 2A e/ou 2B.
[000433] Terapia de reposição de enzima pode provocar respostas imunes indesejadas. Consequentemente, os agentes imunos- supressores podem ser usados juntamente com uma componente de terapia de reposição de enzima de uma terapia de combinação da invenção. Tais agentes podem da mesma forma ser usados com um componente de terapia de molécula pequena, porém, a necessidade de intervenção aqui é geralmente menos provável. Qualquer agente imunossupressor conhecido pelo técnico versado pode ser empregado juntamente com uma terapia de combinação da invenção. Tais agentes imunossupressores incluem porém não estão limitados à ciclosporina, FK506, rapamicina, CTLA4-Ig, e agentes anti-TNF tal como etanercepte (veja, por exemplo, Moder, 2000, Ann. Allergy Asthma Immunol. 84, 280-284; Nevins, 2000, Curr. Opin. Pediatr. 12, 146-150; Kurlberg e outro, 2000, Scand. J. Immunol. 51, 224-230; Ideguchi e outro, 2000, Neuroscience 95, 217-226; Potteret al., 1999, Ann. N.Y. Acad. Sci. 875, 159-174; Slavik e outro, 1999, Immunol. Res. 19, 1-24; Gaziev e outro, 1999, Bone Marrow Transplant. 25, 689-696; Henry, 1999, Clin. Transplant. 13, 209-220; Gummert e outro, 1999, J. Am. Soc. Nephrol. 10, 1366-1380; Qi e outro, 2000, Transplantation 69, 1275-1283). O anticorpo do receptor anti-IL2 (.alfa.-subunidade) daclizumabe (por exemplo, Zenapax.TM.), que foi demonstrado eficaz em pacientes transplantados, pode da mesma forma ser usado como um agente imunossupressor (veja, por exemplo, Wiseman e outro, 1999, Drugs 58, 1029-1042; Beniaminovitz e outro, 2000, N. Engl J. Med. 342, 613-619; Ponticelli e outro, 1999, Drugs R. D. 1, 55-60; Berard e outro, 1999, Pharmacotherapy 19, 1127-1137; Eckhoff e outro, 2000, Transplantation 69, 1867-1872; Ekberg e outro, 2000, Transpl. Int. 13, 151-159). Os agentes imunossupressores adicionais incluem, porém não estão limitados a ligante anti-CD2 (Branco e outro, 1999, Transplantation 68, 1588-1596; Przepiorka e outro, 1998, Blood 92, 4066-4071), anti-CD4 (Marinova-Mutafchieva e outro, 2000, Arthritis Rheum. 43, 638-644; Fishwild e outro, 1999, Clin. Immunol. 92, 138-152), e anti-CD40 (Hong e outro, 2000, Semin. Nephrol. 20, 108-125; Chirmule e outro, 2000, J. Virol. 74, 3345-3352; Ito e outro, 2000, J. Immunol. 164, 1230-1235).
[000434] Qualquer combinação de agentes imunossupressores conhecidos pelo técnico versado pode ser usando juntamente com uma terapia de combinação da invenção. Uma combinação de agente imunossupressor de utilidade particular é tacrolimus (FK506) mais sirolimus (rapamicina) mais daclizumabe (anticorpo anti a subunidade alfa do receptor de IL2). Esta combinação é comprovada ser eficaz como uma alternativa para esteroides e ciclosporina, e ao especificamente obter como alvo o fígado. Além disso, esta combinação foi recentemente mostrada para permitir transplantes de célula de ilhota pancreáticas bem sucedidos. Veja Denise Grady, The New York Times, Saturday, May 27, 2000, páginas A1 e A11. Veja da mesma forma A. M. Shapiro e outro, Jul. 27, 2000, "Islet Transplantation In Seven Patients With Tipo 1 Diabetes Mellitus Using A Glucocorticoid-Free Immunosuppressive Regimen", N. Engl. J. Med. 343, 230-238; Ryan e outro, 2001, Diabetes 50, 710-719. Plasmaforese por qualquer método conhecido na técnica pode da mesma forma ser usada para remover ou esgotar os anticorpos que podem desenvolver contra vários componentes de uma terapia de combinação.
[000435] Indicadores de estado imune de uso com a invenção incluem porém não estão limitados a anticorpos e quaisquer das citocinas conhecidas pelo técnico versado, por exemplo, as interleucinas, CSFs e interferons (veja geralmente, Leonard e outro, 2000, J. Allergy Clin. Immunol. 105, 877-888; Oberholzer e outro, 2000, Crit. Care Med. 28 (4 Suppl.), N3-N12; Rubinstein e outro, 1998, Cytokina Growth Factor Rev. 9, 175-181). Por exemplo, anticorpos especificamente imunorreativos podem ser monitorados com a enzima de reposição para determinar o estado imune do indivíduo. Entre as duas dúzias ou desse modo as interleucinas conhecidas, indicadores do estado imune particularmente preferidos são IL-1 alfa., IL-2, IL-4, IL-8 e IL-10. Entre os fatores estimuladores de colônia (CSFs), indicadores do estado imune particularmente preferidos são G-CSF, GM-CSF e M-CSF. Entre os interferons, um ou mais alfa, beta ou gama interferons são preferidos como indicadores de estado imune.
[000436] Nas seções que seguem, vários componentes que podem ser usados para oito doenças de armazenamento lisossômico específicas são fornecidos (isto é, Gaucher (inclusive tipos 1, 2 e 3), Fabry, Niemann-Pick B, Hunter, Morquio, Maroteaux-Lamy, Pompe e Hurler-Scheie). Nas seções subsequentes, também permitindo a descrição para terapia de reposição de enzima e terapia de molécula pequena, componentes de uma terapia de combinação da invenção são fornecidos.
Gaucher
[000437] Como notado acima, a doença de Gaucher é causada pela deficiência da enzima glicocerebrosidase (beta-D-glicosil-N- acilsfingosina glicohidrolase, EC 3.2.1.45) e acúmulo de glico- cerebrosídeo (glicosilceramida). Para o componente da terapia de reposição de enzima, de uma terapia de combinação da invenção para o tratamento da doença de Gaucher, várias referências estão disponíveis as quais mencionam regimes de dosagem satisfatórios e outra informação úteis em relação ao tratamento (veja Morales, 1996, Gaucher's Disease: A Review, The Annals of Pharmacotherapy 30, 381388; Rosenthal e outro, 1995, Enzyme Replacement Therapy for Gaucher Doença: Skeletal Responses to Macrophage-targeted Glucocerebrosidase, Pediatrics 96, 629-637; Barton e outro, 1991, Replacement Therapy for Inherited Enzyme Deficiency--Macrophage- targeted Glucocerebrosidase for Gaucher's Disease, New England Journal of Medicina 324, 1464-1470; Grabowski e outro, 1995, Enzyme Therapy in Type 1 Gaucher Disease: Comparative Efficacy of Manose- terminated Glucocerebrosidase from Natural and Recombinant Sources, Annals of Internal Medicine 122, 33-39; Pastores e outro, 1993, Enzyme Therapy in Gaucher Disease Type 1: Dosage Efficacy and Adverse Effects in 33 Patients treated for 6 to 24 Months, Blood 82, 408-416); e Weinreb e outro, Am. J. Med.;113(2):112-9 (2002).
[000438] Em uma modalidade, um regime de dosagem de ERT de 2,5 unidades por quilograma (U/kg) três vezes por semana para 60 U/kg uma vez a cada duas semanas é fornecido, onde a enzima é administrada por infusão intravenosa durante 1-2 horas. Uma unidade de glicocerebrosidase é definida como a quantidade de enzima que catalisa a hidrólise de um micromol do substrato sintético para-nitrofenil- p-D-glicopiranosídeo por minuto a 37 °C. Em outra modalidade, um regime de dosagem de 1 U/kg três vezes por semana para 120 U/kg uma vez a cada duas semanas é fornecido. Em ainda outra modalidade, um regime de dosagem de 0,25 U/kg diariamente ou três vezes por semana para 600 U/kg uma vez a cada duas a seis semanas são fornecidas.
[000439] Desde 1991, alglucerase (Ceredase®) esteve disponível pela Genzyme Corporation. Alglucerase é uma forma modificada placentalmente derivada de glicocerebrosidase. Em 1994, imiglucerase (Cerezime®) da mesma forma ficou disponível de Genzyme Corporation. Imiglucerase é uma forma modificada de glicocere- brosidase derivada da expressão de DNA recombinante em um sistema de cultura de célula mamífera (células de ovário de hamster chinês). Imiglucerase é uma glicoproteína monomérica de 497 aminoácidos contendo quatro sítios de glicosilação ligados a N. Imiglucerase tem as vantagens de um fornecimento teoricamente ilimitado e uma chance reduzida dos contaminantes biológicos em relação à aglucerase derivada da placenta. Estas enzimas são modificadas em seus sítios de glicosilação para expor resíduos de manose, uma manobra que melhora o direcionamento lisossômico por meio do receptor de manose-6- fosfato. Imiglucerase difere-se de glicocerebrosidase placentária por um aminoácido na posição 495 onde a histidina é substituído por arginina. Vários regimes de dosagem destes produtos são conhecidos por ser eficazes (veja Morales, 1996, Id.; Rosenthal e outro, 1995, Id.; Barton e outro, 1991, Id.; Grabowski e outro, 1995, Id.; Pastores e outro, 1993, Id.). Por exemplo, um regime de dosagem de 60 U/kg uma vez a cada duas semanas são de benefício clínico em indivíduos com doença moderada a severa. As referências citadas acima e os encartes de embalagem para estes produtos deveria ser consultado pelo médico versado para regime de dosagem adicional e informação de administração. Veja da mesma forma, U.S. Pat. Nos. 5.236.838 e 5.549.892 nomeadas por Genzyme Corporation.
[000440] Como notado acima, Doença de Gaucher resulta de uma deficiência da enzima lisossômica glicocerebrosidase (GC). No fenótipo mais comum da doença de Gaucher (tipo 1), patologia é limitada aos sistemas esqueléticos e retículoendoteliais e não há sintoma neuropático. Veja Barranger, Glucosylceramida lipidose: Gaucher disease. In: Scriver CR BA, Sly WS, Valle D, editor. The Metabolic Basis of Inherited Disease. New York: McGraw-Hill. pp. 3635-3668 (2001). Na doença de Gaucher neuropática (nGD), subdividida em doença de Gaucher tipo 2 e tipo 3, a deficiência de glicocerebrosidase (GC) faz a glicosilceramida (GluCer; GL- 1) e glicosilesfingosina (GluSf) acumularem-se no cérebro, levando ao prejuízo neurológico. Doença de Gaucher tipo 2 é caracterizada pelo começo precoce, progresso rápido, patologia extensa nas vísceras e sistema nervoso central, e morte normalmente por 2 anos de idade. Doença de Gaucher tipo 3, da mesma forma conhecida como nGD subaguda, é um fenótipo intermediário com idade variada de começo e graus diferentes de severidade e taxas de progresso. Goker-Alpan e outro, The Journal of Pediatrics 143: 273-276 (2003). Um recente desenvolvimento produziu o modelo de camundongo K14 InI/InI da doença de Gaucher tipo 2 (em seguida, o "camundongo K14"); este modelo de camundongo recapitula intimamente a doença humana que mostra a ataxia, convulsões, espasticidade e um período de vida mediano reduzido de apenas 14 dias. Enquist e outro, PNAS 104: 17483-17488 (2007).
[000441] Como em pacientes com nGD, vários modelos de camundongo da doença aumentaram os níveis de GluCer e GluSf no cérebro devido à deficiência da atividade de GC. Liu e outro, PNAS 95: 2503-2508 (1998) e Nilsson, J. Neurochem 39: 709-718 (1982). O camundongos "K14" exibem um fenótipo neuropático que compartilha muitos aspectos patológicos com doença de Gaucher tipo 2, tais como neurodegeneração, astrogliose, proliferação de microglia, e níveis aumentados de GluCer e GluSf em regiões do cérebro específicas. Enquist et al. (2007).
[000442] O tratamento clínico de pacientes afetados por nGD propõe um desafio para tratar os médicos igualmente por causa da severidade da doença tipo 2 e da inabilidade das terapias atuais de cruzar a barreira hematoencefálica (BBB). O tratamento atual de não nGD depende da liberação intravenosa da glicocerebrosidase humana recombinante (Imiglucerase; CerezymeTM) para substituir a enzima perdida ou a administração de inibidores de glicosilceramida sintase para atenuar a produção de substrato (GL-1). Entretanto, estes fármacos não cruzam a barreira hematoencefálica, e desse modo não é esperado fornecer o benefício terapêutico para pacientes com nGD. Inibidores de glicosilceramida sintase de molécula pequena atual na clínica não são prováveis de tratarem os fenótipos neuropáticos de nGD. Uma avaliação de um composto da presente invenção, Quinuclidin-3-il-(2-(4'-flúor-[1,1'- bifenil]-3-il)propan-2-il)carbamato (em seguida, "Gz161"), no modelo de camundongo K14 de doença de Gaucher tipo 2 demonstrou que poderia de fato reduzir GluCer e GluSph do cérebro (veja Exemplos 122-125). Também reduziu a neuropatologia do cérebro e prolongou o período de vida deste modelo. Além disso, um método combinado usando igualmente a reposição de enzima e redução de substrato de molécula pequena pode representar uma terapia superior para doença de Gaucher tipo 2.
Fabry
[000443] Como previamente notado, a doença de Fabry é causada pela deficiência da enzima lisossômica alfa-galactosidase A. O defeito enzimático leva à deposição sistêmica de glicoesfingolipídios tendo porções de alfa-galactosila terminais, predominantemente globotriaosil- ceramida (GL3 ou Gb3) e, em uma menor extensão, galabiosilceramida e glicoesfingolipídios de grupo sanguíneo B.
[000444] Vários ensaios estão disponíveis para monitorar o progresso da doença e determinar quando trocar de uma modalidade de tratamento para outra. Em uma modalidade, um ensaio para determinar a atividade específica de alfa-galactosidase A em uma amostra de tecido pode ser usado. Em outra modalidade, um ensaio para determinar o acúmulo de Gb3 pode ser usado. Em outra modalidade, o médico pode analisar a deposição de substratos de glicoesfingolipídio nos fluidos corporais e nos lisossomas do endotelial vascular, peritelial e células do músculo liso dos vasos sanguíneos. Outras manifestações clínicas que podem ser indicadores úteis da administração da doença incluem proteinúria, ou outros sinais de insuficiência renal tais como eritrócitos ou glóbulos de lipídio na urina, e taxa de sedimentação de eritrócito elevada. A pessoa pode da mesma forma monitorar a anemia, concentração de ferro de soro diminuída, concentração alta de beta- tromboglobulina, e contagens de reticulócito elevado ou agregação de plaqueta. De fato, qualquer aproximação para monitorar o progresso da doença que é conhecido pelo técnico versado pode ser usado (Veja geralmente Desnick RJ e outro, 1995, alpha-Galactosidase A Deficiency: Fabry Disease, In: The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Disease, Scriver e outro, eds., McGraw-Hill, N.Y., 7.sup.th ed., páginas 2741-2784). Um marcador substituto preferido é a dor para monitorar o controle da doença de Fabry. Outros métodos preferidos incluem a medida da depuração total da enzima e/ou substrato de um fluido corporal ou espécime de biópsia. Um regime de dosagem preferido para terapia de reposição de enzima na doença de Fabry é 110 mg/kg i.v. a cada dois dias. Um regime de dosagem de 0,1 a 100 mg/kg i.v. em uma frequência a cada dois dias a uma vez por semana ou a cada duas semanas pode ser usado.
Niemann-Pick B
[000445] Como previamente notado, a doença de Niemann-Pick B é causada por atividade reduzida da enzima lisossômica esfingomielinase ácida e acúmulo de lipídio de membrana, principalmente esfingomielina. Uma dosagem eficaz de esfingomielinase ácida de reposição a ser liberada pode variar de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 10 mg/kg de peso corporal a uma frequência de cada dois dias por semanário, uma vez a cada duas semanas, ou uma vez a cada dois meses. Em outras modalidades, uma dosagem eficaz pode variar de cerca de 0,03 mg/kg a cerca de 1 mg/kg; de cerca de 0,03 mg/kg a cerca de 0,1 mg/kg; e/ou de cerca de 0,3 mg/kg a cerca de 0,6 mg/kg. Em uma modalidade particular, um paciente está sendo administrado com esfingomielinase ácida em um regime de dose de aumento progressivo nas seguintes doses sequenciais: 0,1 mg/kg; 0,3 mg/kg; 0,6 mg/kg; e 1,0 mg/kg, em que cada dose de esfingomielinase ácida é administrada pelo menos duas vezes, e cada dose é administrada em intervalos de duas semanas, e em que o paciente é monitorado quanto aos efeitos colaterais tóxicos antes de elevar a dose para o próximo nível (Veja, Publicação de Pedido de Patente U.S. No. 2011/0052559.
Hurler-Scheie (MPS I)
[000446] Doença de Hurler, Scheie, e Hurler-Scheie, da mesma forma conhecida como MPS I, é causada por inativação de alfa-iduronidase e acúmulo de sulfato de dermatana e sulfato de heparana. Vários ensaios estão disponíveis para monitorar o progresso da doença de MPS. Por exemplo, a atividade da enzima alfa-iduronidase pode ser monitorada em espécimes de biópsia de tecido ou células cultivadas obtidas de sangue periférico. Além disso, uma medida conveniente do progresso de doença em MPS I e outras mucopolissacaridoses é uma excreção urinária do sulfato de dermatana de glicosaminoglicanos e sulfato de heparana (veja Neufeld e outro, 1995, id.). Em uma modalidade particular, a enzima alfa-iduronidase é administrada uma vez por semana como uma infusão intravenosa em uma dosagem de 0,58 mg/kg de peso corporal.
Hunter (MPS II)
[000447] A doença de Hunter (a.k.a. MPS II) é causada por inativação de iduronato sulfatase e acúmulo de sulfato de dermatana e sulfato de heparana. A doença de Hunter apresenta-se clinicamente em formas severas e moderadas. Um regime de dosagem de enzima terapêutica de 1,5 mg/kg a cada duas semanas para 50 mg/kg por semana é preferido.
Morquio (MPS IV)
[000448] A síndrome de Morquio (a.k.a. MPS IV) é o resultado do acúmulo de sulfato de ceratana devido à inativação de qualquer uma de duas enzimas. Em MPS IVA, a enzima inativada é galactosamina-6- sulfatase e em MPS IVB a enzima inativada é beta-galactosidase. Um regime de dosagem de enzima terapêutica de 1,5 mg/kg a cada duas semanas para 50 mg/kg por semana é preferido.
Maroteaux-Lamy (MPS VI)
[000449] Síndrome de Maroteaux-Lamy (a.k.a. MPS VI) é causada por inativação de alactosamina-4-sulfatase (arilsulfatase B) e acúmulo de sulfato de dermatana. Um regime de dosagem de 1,5 mg/kg a cada duas semanas para 50 mg/kg por semana é uma faixa preferida da enzima terapêutica eficaz fornecida por ERT. Idealmente, a dosagem empregada é menor que ou igual a 10 mg/kg por semana. Um marcador substituto preferido para o progresso da doença de MPS VI é os níveis de proteoglicano.
Pompe
[000450] A doença de Pompe é causada por inativação da enzima ácido alfa-glicosidase enzima e o acúmulo de glicogênio. O gene de ácido alfa-glicosidase de ácido reside no cromossoma 17 humano e é designado GAA. H. G. Hers primeiro propuseram o conceito de doença lisossômica inata com base em seus estudos desta doença, que é referida como doença de armazenamento de glicogênio tipo II (GSD II) e que é agora da mesma forma denominada deficiência de maltase ácida (AMD) (veja Hers, 1965, Gastroenterology 48, 625). Em uma modalidade particular, GAA é administrada a cada 2 semanas como uma infusão intravenosa em uma dosagem de 20 mg/kg de peso corporal.
[000451] Vários ensaios estão disponíveis para monitorar o progresso de doença de Pompe. Qualquer ensaio conhecido pelo técnico versado pode ser usado. Por exemplo, alguém pode analisar o acúmulo intralisossômico de grânulos de glicogênio, particularmente no miocárdio, fígado e fibras musculoesqueléticas obtidas de biópsia. A atividade de enzima de alfa-glicosidase pode ser monitorada da mesma forma em espécimes de biópsia ou células cultivadas obtidas de sangue periférico. A elevação de soro de creatina cinase (CK) pode ser monitorada como uma indicação de progresso da doença. CK de soro pode ser elevado até dez vezes em pacientes com início na infância e é normalmente elevado a um grau menor em pacientes com início na vida adulta. Veja Hirschhorn R, 1995, Glycogen Storage Disease Type II: Acid alpha-Glucosidase (Acid Maltase) Deficiency, In: The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Disease, Scriver e outro, eds., McGraw-Hill, N.Y., 7.sup.th ed., páginas 2443-2464.
Terapia de Reposição de Enzima
[000452] As seguintes seções mencionam a descrição específica e modalidades alternativas disponíveis para o componente de terapia de reposição de enzima de uma terapia de combinação da invenção. Geralmente, os regimes de dosagem para um componente de terapia de reposição de enzima de uma terapia de combinação da invenção é geralmente determinado pelo clínico versado. Vários exemplos de regimes de dosagem para o tratamento da doença de Gaucher com glicocerebrosidase são fornecidos acima. Os princípios gerais para determinar um regime de dosagem para qualquer determinado componente de ERT de uma terapia de combinação da invenção para o tratamento de qualquer LSD ficarão evidentes ao técnico versado da informação publicamente disponível, tal como, por exemplo, uma revisão das referências específicas citadas nas seções para cada LSD específica. Uma ERT pode ser administrada a um paciente por infusão intravenosa. A infusão intracerebroventricular e/ou intratecal pode ser usada (por exemplo, além da infusão intravenosa) para administrar ERT a um paciente diagnosticado com uma doença de armazenamento lisossômico tendo manifestações no CNS.
[000453] Qualquer método conhecido na técnica pode ser usado para a fabricação das enzimas a ser usadas em um componente de terapia de reposição de enzima de uma terapia de combinação da invenção. Muitos tais métodos são conhecidos e incluem porém não estão limitado à Gene Activation technology developed by Shire plc (veja Pat. U.S. Nos. 5.968.502 e 5.272.071).
Terapia de Molécula Pequena
[000454] A seguinte seção também menciona as descrições específicas e modalidades alternativas disponíveis para o componente de terapia de molécula pequena de uma terapia de combinação da invenção. Regimes de dosagem para um componente de terapia de molécula pequena de uma terapia de combinação da invenção são geralmente determinados pelo clínico versado e espera-se que variem, dependendo significativamente da doença de armazenamento particular a ser tratada e do estado clínico do indivíduo afetado particular. Os princípios gerais para determinar um regime de dosagem para um determinado componente de SMT de qualquer terapia de combinação da invenção para o tratamento de qualquer doença de armazenamento são bem conhecidos pelo técnico versado. A orientação para os regimes de dosagem pode ser obtida de quaisquer das muitas referências bem conhecidas na técnica neste tópico. Outra orientação está disponível, inter alia, de uma revisão das referências específicas citadas nisto.
[000455] Geralmente, os compostos da presente invenção, tais como, por exemplo, (S)-Quinuclidin-3-il-(2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2- il)carbamato e Quinuclidin-3-il-(2-(4'-flúor-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2- il)carbamato podem ser usados nas terapias de combinação da invenção para o tratamento de virtualmente qualquer doença de armazenamento que resulta de uma lesão na via de glicoesfingolipídio (por exemplo, doença de Gaucher, Fabry, GM1-gangliosidose e GM2- gangliosidoses (por exemplo, Deficiência do Ativador de GM2, doença de Tay-Sachs e Sandhoff)). Da mesma maneira, aminoglicosídeos (por exemplo, gentamicina, G418) podem ser usados nas terapias de combinação da invenção para qualquer indivíduo com doença de armazenamento tendo uma mutação de códon de interrupção prematura (isto é, mutação sem sentido). Tais mutações são particularmente prevalecentes na síndrome de Hurler. Um componente da terapia de molécula pequena de uma terapia de combinação da invenção é preferido particularmente onde há uma manifestação do sistema nervoso central à doença de armazenamento a ser tratada (por exemplo, doenças de Sandhoff, Tay-Sachs, Niemann-Pick Tipo A, e Gaucher tipos 2 e 3), visto que as moléculas pequenas podem geralmente cruzar a barreira hematoencefálica com facilidade quando em comparação a outras terapias.
[000456] Dosagens preferidas de inibidores de substrato usadas em uma terapia de combinação da invenção são facilmente determinadas pelo técnico versado. Em certas modalidades, tais dosagens podem variar de cerca de 0,5 mg/kg a cerca de 300 mg/kg, preferivelmente de cerca de 5 mg/kg a cerca de 60 mg/kg (por exemplo, 5 mg/kg, 10 mg/kg, 15, mg/kg, 20 mg/kg, 25 mg/kg, 30 mg/kg, 35 mg/kg, 40 mg/kg, 45 mg/kg, 50 mg/kg, 55 mg/kg and 60 mg/kg) por administração intraperitoneal, oral ou equivalente de uma a cinco vezes por dia. Tais dosagens podem variar de cerca de 5 mg/kg a cerca de 5 g/kg, preferivelmente de cerca de 10 mg/kg a cerca de 1 g/kg por administração oral, intraperitoneal ou equivalente de uma a cinco vezes diariamente. Em uma modalidade, a faixa de doses de cerca de cerca de 10 mg/dia a cerca de 500 mg/dia (por exemplo, 10 mg/dia, 20 mg/dia, 30 mg/dia, 40 mg/dia, 50 mg/dia, 60 mg/dia, 70 mg/dia, 80 mg/dia, 90 mg/dia, 100 mg/dia, 110 mg/dia, 120 mg/dia, 130 mg/dia, 140 mg/dia, 150 mg/dia, 160 mg/dia, 170 mg/dia, 180 mg/dia, 190 mg/dia, 200 mg/dia, 210 mg/dia, 220 mg/dia, 230 mg/dia, 240 mg/dia, 250 mg/dia, 260 mg/dia, 270 mg/dia, 280 mg/dia, 290 mg/dia, 300 mg/dia). Uma faixa de dose oral particularmente preferida é de cerca de 50 mg a cerca de 100 mg, em que a dose é administrada duas vezes por dia. Uma faixa de dose oral particular para um composto da presente invenção é de cerca de 5 mg/kg/dia a cerca de 600 mg/kg/dia. Em uma faixa de dose oral particular para um composto da presente invenção é de cerca de 1 mg/kg/dia a cerca de 100 mg/kg/dia, por exemplo, 1 mg/kg/dia, 5 mg/kg/dia, 10 mg/kg/dia, 15 mg/kg/dia, 20 mg/kg/dia, 25 mg/kg/dia, 30 mg/kg/dia, 35 mg/kg/dia, 40 mg/kg/dia, 45 mg/kg/dia, 50 mg/kg/dia, 55 mg/kg/dia ou 60 mg/kg/dia, 65 mg/kg/dia, 70 mg/kg/dia, 75 mg/kg/dia, 80 mg/kg/dia, 85 mg/kg/dia, 90 mg/kg/dia, 95 mg/kg/dia ou 100 mg/kg/dia.
[000457] Uma combinação giratória de plataformas terapêuticas (isto é, terapia de reposição de enzima e de molécula pequena) é preferida. Entretanto, indivíduos podem ser tratados da mesma forma sobrepondo-se ambos métodos quando necessário, como determinado pelo clínico versado. Exemplos de horários de tratamento podem incluir, porém, não estão limitados a: (1) SMT seguida por ERT; (2) ERT seguida por SMT; e (3) ERT e SMT fornecidas em torno do mesmo tempo. Como previamente notado, a sobreposição temporal de plataformas terapêuticas pode ser realizada da mesma forma, quando necessário, dependendo do curso clínico de uma determinada doença de armazenamento em um determinado indivíduo.
[000458] Intervalos de tratamento para várias terapias de combinação podem variar amplamente e podem geralmente ser diferentes entre doenças de armazenamento diferentes e indivíduos diferentes dependendo de como agressivamente os produtos de armazenamento são acumulados. Por exemplo, o acúmulo de produto de armazenamento de Fabry pode ser lento em comparação ao acúmulo de produto de armazenamento rápido em Pompe. A titulação de uma doença de armazenamento particular em um indivíduo particular é realizada pelo técnico versado monitorando-se os sinais clínicos de progresso da doença e sucesso do tratamento.
[000459] As várias macromoléculas que acumulam-se nas doenças de armazenamento lisossômico não são distribuídas uniformemente, porém ao invés são depositada em certos sítios anatômicos preferidos para cada doença. Entretanto, uma enzima exogenamente fornecida é geralmente apreendida por células do sistema retículoendotelial e separada ao compartimento lisossômico onde age para hidrolisar o substrato acumulado. Além disso, a captação celular da enzima terapêutica pode ser aumentada por certas manobras para aumentar o direcionamento lisossômico (veja por exemplo Pat. U.S. No. 5.549.892 por Friedman e outro, nomeado em Genzyme Corporation, que descreve a glicocerebrosidase recombinante tendo farmacocinéticas melhoradas em virtude de cadeias laterais de oligossacarídeo remodeladas reconhecidas por receptores de manose de superfície celular que são endocitados e transportados aos lisossomas).
[000460] Algumas modalidades de tratamento têm como alvo alguns órgãos afetados melhores do que outros. Em Fabry, por exemplo, se ERT não alcança bem o rim o suficiente para um resultado clínico satisfatório, SMT pode ser usada para reduzir os níveis de substrato no rim. Como demonstrado no Exemplo 112 e Fig. 6B, níveis de Gb3 eficazmente reduzido de SMT (isto é, o substrato acumulou-se em pacientes com Fabry) na urina de um modelo de camundongo com Fabry para uma maior extensão do que ERT. Acredita-se que os rins sejam a fonte principal de Gb3 de urina. Em comparação, a Fig. 6B mostra que ERT reduziu eficazmente os níveis de Gb3 no plasma a uma maior extensão do que SMT. Estes resultados demonstram que uma terapia de combinação ERT e SMT fornece uma estratégia terapêutica complementar que leva a vantagem das intensidades e controla as fraquezas associadas com cada terapia empregada sozinha. SMT pode cruzar a BBB, fornecendo-se um método poderoso, quando combinado com ERT, para tratar LSDs tendo manifestações do CNS, tal como Niemann Pick Tipo A e doença de Gaucher Neuropática (nGD). Além disso, a redução do substrato por SMT combinada com a reposição de enzima controla o problema de armazenamento em pontos de intervenção separados e distintos que podem realçar o resultado clínico.
[000461] Será entendido que referência à administração simultânea ou concorrente de duas ou mais terapias não requer que eles sejam administrados ao mesmo tempo, apenas que eles estão agindo ao mesmo tempo no indivíduo.
Exemplo 1 quinuclidin-3-il-1-fenilciclobutilcarbamato
[000462] Usando o procedimento geral A, cloridrato de 1- fenilciclobutanamina (100 mg, 0,540 mmol) e quinuclidin-3-ol (103 mg, 0,810 mmol) produziu quinuclidin-3-il-1-fenilciclobutilcarbamato (76 mg, 47%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,43 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 7,34 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 7,23 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 5,75-5,25 (m, 1H), 4,60 (br s, 1H), 3,25-2,22 (m, 9H), 2,16-2,03 (m, 1H), 2,02-0,94 (m, 6H), 0,88 (t, J = 6,8 Hz, 1H) ppm, 13C RMN (100 MHz, CDCl3), 158,1, 128,5, 126,9, 125,6, 71,4, 59,4, 55,7, 47,5, 46,6, 34,0, 31,8, 29,9, 25,5, 24,7, 22,9, 19,7, 15,3, 14,4 ppm. Pureza: >99,9% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,62 min; (M+1) 331.
Exemplo 2 quinuclidin-3-il-2-(benzo[d][1,3]dioxol-5-il)propan-2-ilcarbamato
[000463] Usando o procedimento geral B, benzo[d][1,3]dioxol-5- carbonitrila (1,00 g, 6,81 mmol) foi convertido em cloridrato de 2- (benzo[d][1,3]dioxol-5-il)propan-2-amina (692 mg, 47%).
[000464] Usando o procedimento geral A, o intermediário de cloreto de amônio anterior (150 mg, 0,695 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin-3-il-2-(benzo[d][1,3]dioxol-5-il)propan-2-ilcarbamato (125 mg, 54%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 6,91 (dd, J = 1,9 Hz, 1H), 6,87 (dd, J = 1,9, 8,2 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,93 (s, 2H), 5,12 (s, 1H), 4,69-4,66 (m, 1H), 3,26-2,11 (m, 7H), 2,03-1,07 (m, 4H), 1,63 (s, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 156,7, 147,9, 118,0, 108,1, 106,1, 101,2, 71,2, 55,9, 55,3, 47,6, 46,7, 29,9, 29,7, 25,6, 24,8, 19,8 ppm. Pureza: 97,5% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,65 min; (M+1) 333.
Exemplo 3 quinuclidin-3-il-2-(naftalen-1-il)propan-2-ilcarbamato
[000465] Usando o procedimento geral A, cloridrato de 2-(naftalen-1- il)propan-2-amina (100 mg, 0,450 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin-3-il-2-(naftalen-1-il)propan-2-ilcarbamato (115 mg, 59%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,79-8,46 (m, 1H), 7,99-7,72 (m, 2H), 7,69-7,36 (m, 4H), 5,86-5,37 (m, 1H), 4,72-4,34 (m, 1H), 3,25-2,20 (m, 6H), 2,16-0,41 (m, 5H), 1,93 (s, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 154,6, 135,2, 130,7, 129,7, 128,8, 125,9, 125,3, 123,9, 72,2, 71,1, 56,5, 55,7, 47,6, 46,6, 31,8, 31,2, 25,5, 24,8, 22,9, 19,7, 14,4 ppm. Pureza: 100% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,80 min; (M+1) 339.
Preparação I Exemplo 4 (R)-quinuclidin-3-il-2-(3-(prop-1-en-2-il)fenil)propan-2-ilcarbamato
[000466] Em uma solução de (R)-quinuclidin-3-ol (194 mg, 1,52 mmol) em THF (5 mL) em temperatura ambiente foi adicionado NaH [60%, óleo] (64 mg, 1,6 mmol). A mistura reacional foi agitada durante 15 min, e 1-(2-isocianatopropan-2-il)-3-(prop-1-en-2-il)benzeno (302 uL, 1,53 mmol) foi adicionado gota a gota. A reação foi agitada durante um período de 30 min e extinguida com salmoura. A solução foi extraída com EtOAc, e a camada orgânica foi secada em Na2SO4 e concentrada. O material bruto foi purificado em uma combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar o carbamato correspondente (475 mg, 95%) como um óleo claro. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,49 (s, 1H), 7,31 (br s, 3H), 5,33 (s, 1H), 5,17 (s, 1H), 5,08 (s, 1H), 4,77-4,61 (m, 1H), 3,33-2,27 (m, 5H), 2,14 (s, 3H), 2,25-0,75 (m, 6H), 1,68 (br s, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 154,7, 147,2, 143,7, 141,6, 128,5, 124,2, 122,1, 112,8, 70,9, 55,7, 55,5, 47,5, 46,6, 32,2, 31,5, 29,9, 29,6, 25,5, 24,6, 22,9, 22,2, 19,6 ppm. Pureza: 100% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,84 min; (M+1) 329,2. Análise Calculada para C2QH28N2O2^Q,Q6 (CHCI3): C, 71,59; H, 8,40; N, 8,58. Encontrado: C, 71,51; H, 9,05; N, 8,60.
Preparação J Exemplo 5 quinuclidin-3-il-2-(3-isopropoxifenil)propan-2-ilcarbamato
[000467] Uma solução de 3-cianofenol (1,00 g, 8,39 mmol), 2- iodopropano (839 uL, 8,39 mmol) e carbonato de césio (2,73 g, 8,39 mmol) em 1:1 CH2Cl2/CH3CN (16 mL) foi agitada em refluxo durante 18 h. A mistura reacional foi resfriada em temperatura ambiente e filtrada por Celite. O filtrado foi concentrado, e o material bruto purificado em uma combiflash (cartucho de SiO2, CH2Cl2) para proporcionar o éter correspondente (763 mg, 57%) como um sólido branco.
[000468] Usando o procedimento geral B, 3-isopropoxibenzonitrila (763 mg, 4,24 mmol) foi convertido para o 2-(3-isopropoxifenil)propan- 2-amina correspondente (362 mg, 45%) como um óleo claro.
[000469] Usando o procedimento geral A, a amina anterior (100 mg, 0,520 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin-3-il-2-(3- isopropoxifenil)propan-2-ilcarbamato (110 mg, 61%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,17 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,89 (t, J = 2,1 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 5,38-5,13 (m, 1H), 4,58 (br s, 1H), 4,49 (hept, J = 6,1 Hz, 1H), 3,31-2,04 (m, 6H), 2,00-0,79 (m, 5H) 1,60 (br s, 6H), 1,28 (d, J = 6,1 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 158,1, 129,5, 117,2, 113,6, 71,1, 69,9, 55,8, 55,4, 47,6, 46,6, 29,4, 25,6, 24,8, 22,3, 19,7 ppm. Pureza: >99,9% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,83 min; (M+1) 347.
Exemplo 6 quinuclidin-3-il-2-(3-bromo-2-fluorofenil)propan-2-ilcarbamato
[000470] Usando o procedimento geral A, 2-(3-bromo-2- fluorofenil)propan-2-amina (1,0 g, 4,3 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin-3-il-2-(3-bromo-2-fluorofenil)propan-2- ilcarbamato (957 mg, 58%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,45 (ddd, J = 1,6, 6,3, 7,9 Hz, 1H), 7,31 (td, J = 1,6, 7,7 Hz, 1H), 6,99 (td, J = 1,0, 8,0 Hz, 1H), 5,31-5,15 (br s, 1H), 4,59 (br s, 1H), 3,25-2,19 (m, 6H), 2,06-0,81 (m, 5H), 1,73 (s, 3H), 1,71 (s, 3H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 158,1, 155,6, 132,5, 127,1, 127,0, 124,8, 124,8, 110,6, 110,4, 71,5, 55,7, 54,2, 47,5, 46,7, 29,9, 28,4, 25,5, 24,8, 19,7 ppm. Pureza: >99,9% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,79 min; (M+1) 385.
Exemplo 7 (+/-) quinuclidin-3-il-(1R,2S)-2-fenilciclopropilcarbamato
[000471] Usando o procedimento geral A, (+/-) ((1S,2R)-2- isocianatociclopropil)benzeno (117 uL, 0,780 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram (+/-) quinuclidin-3-il-(1R,2S)-2-fenilciclopropilcarbamato (63 mg, 28%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,307,05 (m, 5H), 5,43 (br s, 1H), 4,77 (br s, 1H), 3,23 (dd, J = 9,0, 14,0 Hz, 1H), 2,97-2,65 (m, 6H), 2,15-1,12 (m, 8H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 157,1, 140,7, 140,2, 128,5, 126,8, 126,3, 71,5, 55,7, 47,5, 46,6, 32,7, 25,6, 25,2, 24,5, 19,5, 16,2 ppm. Pureza: >99,9% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,67 min; (M+1) 287.
Exemplo 8 quinuclidin-3-il-1-fenilciclo-hexilcarbamato
[000472] Usando o procedimento geral A, 1-fenilciclo-hexanamina (36 mg, 0,21 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin-3-il-1- fenilciclo-hexilcarbamato (40 mg, 58%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,41 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,32 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 7,21 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 5,19-4,98 (br s, 1H), 4,70-4,56 (s, 1H), 3,34-0,83 (m, 21H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 158,4, 128,3, 126,5, 124,9, 57,2, 46,3, 36,1, 25,4, 24,2, 22,0, 19,2, 15,2 ppm. Pureza: >99,9% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,84 min; (M+1) 329.
Preparação K Exemplo 9 (R)-1-(2-(3-(prop-1-en-2-il)fenil)propan-2-il)-3-(quinuclidin-3-il)ureia
[000473] Em uma solução de dicloridrato de (R)-quinuclidin-3-amina (120 mg, 0,603 mmol) e 1-(2-isocianatopropan-2-il)-3-(prop-1-en-2- il)benzeno (119 mg, 0,597 mmol) em THF (3 mL) foi adicionado trietilamina (168 uL, 1,21 mmol). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 18 h, e em seguida extinguida com salmoura. A mistura foi extraída com CHCl3, e a camada orgânica foi secada (Na2SO4) e concentrada. O material bruto foi purificado em uma combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar a ureia correspondente (163 mg, 50%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,62 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,44 (dt, J = 1,9, 7,0 Hz, 1H), 7,41-7,33 (m, 2H), 5,35 (br s, 1H), 5,11 (p, J = 1,4 Hz, 1H), 4,84 (s, 1H), 4,21 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 3,70-3,61 (m, 1H), 3,13 (ddd, J = 2,3, 9,3, 14,2 Hz, 1H), 2,71-2,54 (m, 3H), 2,30-2,22 (m, 1H), 2,15 (dd, J = 0,8, 1,4, 3H), 2,05-1,96 (m, 1H), 1,65 (s, 3H), 1,64 (s, 3H), 1,651,60 (m, 1H) 1,54-1,45 (m, 2H), 1,22-1,12 (m, 1H), 0,95-0,80 (m, 1H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CDCl3) δ 157,4, 148,5, 143,8, 141,3, 128,4, 124,4, 123,8, 122,2, 112,6, 55,2, 53,4, 46,2, 46,1, 44,5, 30,5, 30,4, 25,0, 22,2, 17,7, 8,9 ppm. Pureza: 97,5% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,83 min; (M+1) 328.
Exemplo 10 1-(2-(naftalen-2-il)propan-2-il)-3-(quinuclidin-3-il)ureia
[000474] Usando o procedimento geral B, naftalina-2-carbonitrila (1,00 g, 6,53 mmol) foi convertido para o 2-(naftalen-2-il)propan-2-amina correspondente (294 mg, 25%) como um óleo claro.
[000475] Usando o procedimento geral C, quinuclidin-3-amina (102 mg, 0,808 mmol), CDI (131 mg, 0,808 mmol) e 2-(naftalen-2-il)propan- 2-amina (150 mg, 0,819 mmol) produziram 1-(2-(naftalen-2-il)propan-2- il)-3-(quinuclidin-3-il)ureia (132 mg, 49%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,94-7,78 (m, 4H), 7,69 (dd, J = 2,0, 8,7 Hz, 1H), 7,53-7,46 (m, 2H), 4,84 (s, 1H), 4,23 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 3,68-3,54 (m, 1H), 3,07 (ddd, J = 2,3, 9,3, 14,1 Hz, 1H), 2,61-2,51 (m, 2H), 2,422,32 (m, 1H), 1,95-1,83 (m, 2H), 1,75 (s, 3H), 1,74 (s, 3H), 1,58-1,54 (m, 1H), 1,46-1,40 (m, 2H), 1,03-0,91 (m, 1H), 0,72-0,60 (m, 1H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 157,5, 143,7, 133,4, 132,8, 129,3, 128,1, 127,8, 126,9, 126,7, 124,4, 124,0, 57,0, 55,0, 47,1, 47,1, 46,6, 30,5, 30,3, 26,0, 25,9, 20,0 ppm. Pureza: >99,9% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,71 min; (M+1) 338.
Exemplo 11 1-(2-metil-2-(m-tolil)propil)-3-(3-metilquinuclidin-3-il)ureia
[000476] Usando o procedimento geral D, cloridrato de 2-metil-2-(m- tolil)propan-1-amina (100 mg, 0,501 mmol), trietilamina (279 uL, 2,00 mmol), trifosgênio (47 mg, 0,18 mmol) e 2,2,2-trifluoroacetato de 3- metilquinuclidin-3-amina (140 mg, 0,550 mmol) produziram 1-(2-metil-2- (m-tolil)propil)-3-(3-metilquinuclidin-3-il)ureia (41 mg, 25%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,23 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,18-7,12 (m, 2H), 7,04 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 4,12 (s, 1H), 4,08 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 3,39-3,22 (m, 2H), 2,81-2,62 (m, 6H), 2,34 (s, 3H), 1,98-1,89 (m, 1H), 1,80-1,63 (m, 2H), 1,51-1,23 (m, J = 26,9 Hz, 2H), 1,37 (s, 3H), 1,30 (s, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 157,9, 147,1, 138,2, 128,6, 127,1, 127,1, 123,3, 64,0, 52,2, 52,1, 46,9, 46,7, 39,2, 31,2, 27,1, 26,8, 25,4, 23,5, 22,7, 21,9. Pureza: >99,9% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,79 min; (M+1) 330.
Exemplo 12 1-(2-(3-metoxifenil)propan-2-il)-3-(quinuclidin-3-il)ureia
[000477] Usando o procedimento geral C, quinuclidin-3-amina (380 mg, 3,01 mmol), CDI (489 mg, 3,01 mmol) e 2-(3-metoxifenil)propan-2- amina (506 mg, 3,07 mmol) produziram 1-(2-(3-metoxifenil)propan-2-il)- 3-(quinuclidin-3-il)ureia (560 mg, 59%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,35-7,29 (m, 1H), 7,14-7,07 (m, 2H), 6,87-6,81 (ddd, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,19 (d, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,70-3,62 (m, 1H), 3,19-3,10 (m, 1H), 2,74-2,59 (m, 3H), 2,37-2,26 (m, 1H), 2,07-1,98 (dd, 1H), 1,80 (br s, 1H), 1,69-1,63 (m, 1H), 1,63 (s, 3H), 1,62 (s, 3H), 1,581,44 (m, 2H), 1,28-1,14 (m, 1H), 1,02-0,90 (m, 1H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 160,0, 157,5, 148,4, 129,9, 117,7, 112,0, 111,9, 56,7, 55,3, 54,6, 47,2, 46,8, 46,4, 30,1, 25,8, 20,0 ppm. Pureza: >99,4% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,73 min; (M+1) 318.
Exemplo 13 quinuclidin-3-il-2-(3-metoxifenil)propan-2-ilcarbamato
[000478] Usando o procedimento geral A, 1-(3-metoxifenil)propan-2- amina (327 mg, 1,98 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin-3- il-2-(3-metoxifenil)propan-2-ilcarbamato (370 mg, 59%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,30-7,20 (m, 1H), 7,03-6,97 (m, 1H), 6,97-6,93(m, 1H), 6,80-6,74 (dd, 1H), 5,18-5,00 (br s, 1H), 4,674,57 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,30-2,12 (br m, 7H), 2,02-1,00 (m, 10H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 159,7, 154,5, 149,0, 129,3, 117,2, 111,4, 111,0, 70,9, 55,7, 55,1, 47,4, 46,5, 29,4, 25,4, 24,6, 19,6 ppm. Pureza: >99,9% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,85 min; (M+1) 319.
Exemplo 14 quinuclidin-3-il-2-(3-metoxifenil)propan-2-ilcarbamato
[000479] Usando o procedimento geral A, cloridrato de 1-(4- metoxifenil)propan-2-amina (316 mg, 1,57 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin-3-il-2-(3-metoxifenil)propan-2-ilcarbamato (370 mg, 59%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,33 (d, 2H), 6,86 (d, 2H), 5,15-5,01(br s, 1H), 4,66-4,57 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,33-2,12 (m, 7H), 2,10-0,96 (m, 10H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 158,1, 154,5, 139,2, 125,8, 113,5, 70,7, 55,7, 55,2, 54,6, 47,2, 46,3, 31,2, 29,4, 25,3, 24,5, 19,4 ppm. Pureza: >94,1% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,81 min; (M+1) 319.
Exemplo 15 quinuclidin-3-il-2-(4-terc-butilfenil)propan-2-ilcarbamato
[000480] Usando o procedimento geral A, 1-(4-terc-butilfenil)propan- 2-amina (348 mg, 1,82 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin- 3-il-2-(4-terc-butilfenil)propan-2-ilcarbamato (427 mg, 68%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,34 (s, 4H), 5,09 (br s, 1H), 4,69-4,52 (m, 1H), 3,47-2,05 (m, 7H), 3,33-2,12 (m, 7H), 2,00-0,80 (m, 20H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 156,2, 149,4, 144,5, 125,3, 124,5, 70,9, 55,8, 55,1, 47,5, 46,6, 34,4, 31,4, 29,8, 29,3, 25,5, 24,6, 19,6 ppm. Pureza: >98,2% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 2,29 min; (M+1) 345.
Exemplo 16 quinuclidin-3-il-2-(4-isopropilfenil)propan-2-ilcarbamato
[000481] Usando o procedimento geral A, 1-(4-isopropilfenil)propan-2- amina (158 mg, 0,891 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin- 3-il-2-(4-isopropilfenil)propan-2-ilcarbamato (205 mg, 70%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,33 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,19 (s, 1H), 7,17 (s, 1H), 5,09 (s, 1H) 4,69-4,51 (br s, 1H) 3,30-1,30 (m, 17 H), 1,24(s, 3H), 1,22 (s, 3H), 1,06-0,77 (m, 1H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 156,2, 147,1, 144,4, 126,4, 124,7, 70,9, 55,7, 55,0, 47,4, 46,5, 33,6, 29,8, 29,4, 25,4, 24,6, 24,0, 19,5 ppm. Pureza: >98,3% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 2,19 min; (M+1) 331.
Exemplo 17 quinuclidin-3-il-2-(4-etilfenil)propan-2-ilcarbamato
[000482] Usando o procedimento geral A, 1-(4-etilfenil)propan-2- amina (230 mg, 1,41 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin-3- il-2-(4-etilfenil)propan-2-ilcarbamato (248 mg, 56%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,33 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,19 (s, 1H), 7,17 (s, 1H), 5,09 (s, 1H) 4,69-4,51 (br s, 1H) 3,34-0,73 (m, 22 H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 154,5, 144,3, 142,4, 127,8, 124,7, 71,0, 55,6, 55,1, 47,4, 46,5, 29,6, 28,3, 25,4, 24,6, 19,5, 15,8, 15,4 ppm. Pureza: >99,5% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 2,07 min; (M+1) 317.
Exemplo 18 quinuclidin-3-il-2-o-tolilpropan-2-ilcarbamato
[000483] Usando o procedimento geral A, 2-o-tolilpropan-2-amina (230 mg, 1,52 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin-3-il-2-o- tolilpropan-2-ilcarbamato (200 mg, 44%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) (rotâmeros) δ 7,33 (s, br, 1H), 7,15-7,10 (m, 3H), 5,35-5,20 (m, 1H), 4,60 (br s, 1H), 3,20-2,60 (m, 5H), 2,5 (s, 3H), 2,15 (br s, 1H), 1,80-1,30 (m, 10 H). 13C RMN (100 MHz, CDCl3) (rotâmeros) δ 154,2, 144,5, 140,2, 133,0, 127,1, 126,2, 126,1, 72,2, 71, 56,0, 46,6, 46,7, 31,0, 29,0, 26,0, 24,7, 22,3, 19,7. Pureza: >95% de UPLCMS (210 nm); (M+1) 303.
Exemplo 19 quinuclidin-3-il-2-(2-metoxifenil)propan-2-ilcarbamato
[000484] Usando o procedimento geral A, 2-(2-metoxifenil)propan-2- amina (150 mg, 0,908 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin- 3-il-2-(2-metoxifenil)propan-2-ilcarbamato (60 mg, 21%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) (rotâmeros) δ 7,3 (m, 1H), 7,2 (m, 1H), 6,9 (m, 2H), 5,4 (s, br, 1H), 4,6 (m, 1H), 3,8 (s, 1H), 3,1 (m, 1H), 2,4-2,8 (m, 5H), 1,9 (s, 1H), 1,3-1,7 (m, 10H). 13C RMN (100 MHz, CDCl3) (rotâmeros) δ 157, 155, 140, 134, 129, 127, 121, 111, 70, 56, 55, 48, 47, 29, 26, 25, 20. Pureza: > 99% de UPLCMS (210 nm); (M+1) 319.
Preparação L Exemplo 20 1-(3-cianoquinuclidin-3-il)-3-(2-(3-(prop-1-en-2-il)fenil)propan-2- il)ureia
[000485] 3-amino-3-cianoquinuclidina foi preparado como descrito na literatura (Fernandez, M. A.; Gonzalez, G.; Martinez, M.; Galvez, E., Anales de la Real Academia de Farmacia 1988, 54, 502).
[000486] Em uma solução de 3-amino-3-cianoquinuclidina (100 mg, 0,661 mmol) em CH2Cl2 (5 mL) foi adicionado, gota a gota, isocianato de 3-isoprenil-Q,D-dimetilbenzila (0,13 mL, 0,66 mmol). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 18 horas, concentrada e submetida a cromatografia flash em sílica-gel (19:1 CH2Cl2/NH3 a 7M(CH3OH)). O produto título foi obtido como um sólido branco (155 mg, 67%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7,52 (s, 1H), 7,35-7,25 (m, 3H), 5,34 (s, 1H), 5,05 (s, 1H), 2,60-3,41 (m, 6H), 2,25-2,32 (m, 1H), 2,13 (s, 3H), 1,42-2,10 (m, 4H), 1,64 (s, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CD3OD) δ 157,0, 147,9, 144,0, 141,4, 128,1, 124,0, 123,4, 121,9, 121,7, 111,5, 61,0, 55,1, 50,4, 30,9, 23,3, 22,5, 21,0 19,0 ppm. Pureza: >99,9% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,82 min; (M+1) 353.
Preparação M Exemplo 21 1-[(3S)-1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il]-3-{2-[3-(prop-1-en-2- il)fenil]propan-2-il}ureia
[000487] Em uma suspensão de dicloridrato de (S)-(-)-3- aminoquinuclidina (120 mg, 0,603 mmol) e trietilamina (168 uL, 1,21 mmol) em THF (2 mL) em temperatura ambiente foi adicionado 3- isopropenil-'-.-'-dimetilbenzil-isocianato (121 mg, 0,601 mmol). A mistura reacional foi agitada durante 18 hr, e em seguida lavada com NaHCO3 aquoso saturado. A fase orgânica foi secada em Na2SO4 e concentrada. O material bruto foi purificado em uma combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar o composto do título (29 mg, 47%) como um sólido esbranquiçado. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7,51 (dt, J = 2,5, 1,2 Hz, 1H), 7,41-7,14 (m, 3H), 5,32 (dd, J = 1,6, 0,8 Hz, 1H), 5,06 (s, 1H), 3,74-3,60 (m, 1H), 3,313,29 (m, 2H), 3,19 (ddd, J = 13,7, 9,5, 1,6 Hz, 1H), 2,88-2,50 (m, 4H), 2,37 (ddd, J = 14,0, 4,9, 2,2 Hz, 1H), 2,14 (ddd, J = 2,3, 1,8, 1,0 Hz, 3H), 1,81-1,63 (m, 4H), 1,62 (d, J = 6,2 Hz, 6H), 1,55-1,38 (m, 1H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CD3OD) δ 158,4, 148,4, 144,0, 141,3, 128,0, 124,1, 123,3, 121,9, 111,4, 55,7, 54,7, 46,7, 46,4, 46,0, 29,6, 29,4, 28,4, 26,1, 25,1, 21,0, 19,4 ppm. Pureza: >96% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,81 min; (M+1) 329,5.
Preparação N Exemplo 22 1-(1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)-3-{2-[3-(propan-2-il)fenil]propan-2- il}ureia
[000488] Em uma solução de 3-aminoquinuclidina (150 mg, 1,19 mmol) em THF (5 mL) foi adicionado 3-isopropenil-^,^- dimetilbenzilisocianato. A solução foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min, em seguida concentrada em sílica-gel e purificada em uma combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar um sólido esbranquiçado (299 mg, 77%).
[000489] Usando o procedimento geral F, a isoprenil ureia anterior (150 mg, 1,19 mmol) e hidróxido de paládio (30 mg, 20 % em peso em carbono) produziram 1-(1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)-3-{2-[3-(propan-2- il)fenil]propan-2-il}ureia (116 mg, 77%) como um sólido esbranquiçado. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,38-7,28 (m, 3H), 7,16 (dt, J = 6,9, 1,6 Hz, 1H), 4,93 (s, 1H), 4,26 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 3,70-3,58 (m, 1H), 3,11 (ddd, J = 14,1, 9,4, 2,3 Hz, 1H), 2,90 (hept, J = 6,9 Hz, 1H), 2,71-2,52 (m, 4H), 2,31-2,19 (m, 1H), 1,98 (dd, J = 14,2, 2,9 Hz, 1H), 1,61 (d, J = 2,0 Hz, 6H), 1,52-1,43 (m, 2H), 1,23 (d, J = 6,9 Hz, 6H), 1,19-1,09 (m, 1H), 0,920,79 (m, 1H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 157,6, 150,1, 146,1, 129,2, 125,8, 124,1, 123,3, 57,1, 54,9, 47,4, 47,0, 46,6, 34,5, 30,7, 30,5, 26,1, 26,0, 24,3, 24,2, 20,3 ppm. Pureza: 94% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,87 min; (M+1) 329,3.
Exemplo 23 1-(1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)-3-[1-(naftalen-1-il)etil]ureia
[000490] Dicloridrato de 3-aminoquinuclideno (150 mg, 0,753 mmol) foi misturado com THF (3 mL) e trietilamina (152 mg, 1,50 mmol) antes de adicionar 1-(1-naftil)etilisocianato (149 mg, 0,752 mmol). A mistura foi agitada 48 h em temperatura ambiente. A solução de reação foi concentrada e purificada em uma combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar o composto do título como um sólido esbranquiçado (46 mg, 19%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,20-8,05 (m, 1H), 7,85 (dd, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,59-7,34 (m, 4H), 5,55 (hept, 1H), 5,35-5,19 (m, 1H), 4,84 (dd, 1H), 3,70-3,53 (m, 1H), 3,09 (ddd, 1H), 2,74-2,28 (m, 4H), 2,17 (ddd, J = 1,8, 4,5, 14,1 Hz, 1H), 1,75-1,62 (m, 1H), 1,55 (dd, J = 1,8, 6,8 Hz, 3H), 1,521,06 (m, 4H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 157,7, 140,0, 134,1, 130,9, 129,2, 128,3, 126,8, 126,7, 126,7, 126,0, 125,6, 123,2, 123,1, 122,8, 122,7, 56,9, 56,7, 47,4, 47,3, 46,7, 46,4, 26,1, 25,9, 22,7, 22,6, 20,1, 20,0 ppm. Pureza: 97% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,68 min; (M+1) 324,2
Exemplo 24 1-(1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)-3-[2-(3-bromofenil)propan-2-il]ureia
[000491] Usando o procedimento geral C, quinuclidin-3-amina (100 mg, 0,792 mmol), CDI (128 mg, 0,789 mmol) e 2-(3-bromofenil)propan-2-amina (170 mg, 0,791 mmol) produziram o composto do título como um sólido branco (166 mg, 75%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,50 (s, 1H), 7,30 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 7,15 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 5,54 (d, J = 22,7 Hz, 1H), 5,16 (d, J = 29,7 Hz, 1H), 3,60 (s, 1H), 3,14 (ddd, J = 13,3, 9,4, 1,6 Hz, 1H), 2,61 (d, J = 52,6 Hz, 4H), 2,18 (dd, J = 14,1, 2,8 Hz, 1H), 1,66 (d, J = 3,0 Hz, 2H), 1,51 (d, J = 7,6 Hz, 6H), 1,28 (s, 3H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 157,1, 150,4, 130,3, 130,0, 128,6, 124,0, 123,0, 57,0, 54,6, 47,6, 47,2, 46,8, 30,5, 30,3, 26,3, 26,2, 20,2 ppm. Pureza: 100% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,66 min; (M+1) 367,8.
Exemplo 25 1-(1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)-3-[2-(bifenil-3-il)propan-2-il]ureia
[000492] Usando o procedimento geral E, 1-(1-azabiciclo[2.2.2]oct-3- il)-3-[2-(3-bromofenil)propan-2-il]ureia (111 mg, 0,301 mmol), ácido fenilborônico (78,8 mg, 0,606 mmol) e tetracis(trifenilfosfina)paládio(0) produziram o composto do título como um sólido esbranquiçado (21 mg, 11%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,74 (s, 1H), 7,52-7,40 (m, 8H), 4,89 (s, 1H), 4,28 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 3,75-3,59 (m, 1H), 3,15 (ddd, J = 1,9, 9,3, 13,9 Hz, 1H), 2,46 (m, 4H), 2,05 (dd, J = 3,5, 14,0 Hz, 1H), 1,68 (d, J = 4,7 Hz, 6H), 1,66-0,76 (m, 5H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 157,4, 146,9, 142,5, 141,1, 129,7, 129,1, 127,8, 127,4, 126,7, 124,8, 124,7, 57,1, 55,1, 30,7, 30,1, 26,1, 26,0, 20,2 ppm. Pureza: 100% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,78 min; (M+1) 364,0.
Exemplo 26 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{2-[3-(propan-2-il)fenil]propan-2- il}carbamato
[000493] Usando o procedimento geral F, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- {2-[3-(prop-1-en-2-il)fenil]propan-2-il}carbamato (48,8 mg, 0,146 mmol) e hidróxido de paládio (30 mg, 20 % em peso em carbono) produziram o composto do título como um sólido esbranquiçado (16 mg, 33%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,24 (d, J = 5,1Hz, 3H), 7,10 (d, 1H), 5,12 (s, 1H), 4,63 (s, 1H), 3,54-2,96 (m, 1H), 2,89 (s, 1H), 2,68 (s, 5H), 2,17-1,75 (m, 2H), 1,67 (s, 6H), 1,62-1,30 (m, 2H), 1,24 (d, J = 6,9 Hz, 6H), 1,150,85 (m, 1H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 149,1, 128,5, 124,9, 123,1, 122,5, 55,8, 55,6, 46,6, 34,5, 25,6, 24,6, 24,3, 19,7 ppm. Pureza: 94% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,89 min; (M+1) 331,1.
Exemplo 27 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[2-(3-bromofenil)propan-2-il]carbamato
[000494] Usando o procedimento geral A, cloridrato de 2-(3- bromofenil)propan-2-amina (2,00 g, 7,89 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram o composto do título como um sólido branco (2,23 g, 76%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,54 (s, 1H), 7,41-7,30 (m, 2H), 7,19 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,68-4,54 (m, 1H), 3,51-2,11 (m, 6H), 2,041,68 (m, 2H), 1,63 (d, J = 10,2 Hz, 6H), 1,51-0,67 (m, 3H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 156,0, 154,7, 150,6, 149,7, 130,2, 130,0, 128,4, 123,7, 72,5, 71,6, 71,5, 55,8, 55,1, 47,6, 46,7, 31,2, 29,9, 29,8, 29,5, 25,6, 24,8, 19,7 ppm. Pureza: 100% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,69 min; (M+1) 368,8.
Exemplo 28 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[2-(3-ciclopropilfenil)propan-2- il]carbamato
[000495] Usando o procedimento geral E, 11-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(3-bromofenil)propan-2-il]carbamato (44,3 mg, 0,121 mmol), ácido ciclopropil borônico (14 mg, 0,16 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido esbranquiçado (21 mg, 11%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,54 (s, 1H), 7,41-7,30 (m, 2H), 7,19 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,68-4,54 (m, 1H), 3,51-2,11 (m, 6H), 2,04-1,68 (m, 2H), 1,63 (d, J = 10,2 Hz, 6H), 1,36 (d, J = 9,5 Hz, 3H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 147,2, 144,2, 128,6, 128,4, 125,0, 123,7, 122,8, 122,1, 110,0, 72,2, 71,4, 55,9, 55,4, 47,7, 47,3, 46,7, 33,1, 31,6, 30,0, 29,6, 25,6, 24,8, 19,8, 19,3, 15,8, 9,5 ppm. Pureza: 91% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,75 min; (M+1) 329,0.
Exemplo 29 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[2-(bifenil-3-il)propan-2-il]carbamato
[000496] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(3-bromofenil)propan-2-il]carbamato (600 mg, 1,63 mmol), ácido fenilborônico (398 mg, 3,27 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido branco (379 mg, 64%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,61 (s, 1H), 7,56 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,50-7,38 (m, 4H), 7,34 (m, 2H), 5,16 (s, 1H), 4,63 (s, 1H), 3,39-2,09 (m, 6H), 1,72 (s, 6H), 2,02-0,73 (m, 5H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 154,8, 147,8, 141,6, 129,0, 129,0, 128,6, 127,5, 125,8, 125,0, 124,0, 71,6, 71,3, 55,9, 55,5, 47,6, 46,8, 31,5, 30,2, 30,0, 29,5, 25,6, 24,8, 19,8 ppm. Pureza: 99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,84 min; (M+1) 365,0. Análise Calculada para C23H28N2O2^0,29 (CHCls): C, 70,02; H, 7,14; N, 7,01. Encontrado: C, 70,02; H, 7,37; N, 6,84.
Exemplo 30 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{2-[3-(2-metilpropil)fenil]propan-2- il}carbamato
[000497] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(3-bromofenil)propan-2-il]carbamato (75 mg, 0,20 mmol), ácido 2- metilpropil borônico (28,1 mg, 0,276 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido branco (50 mg, 71%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,21 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 7,16 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 5,17 (s, 1H), 4,60 (s, 1H), 3,35-2,10 (m, 6H), 2,45 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 1,82 (dt, J = 6,8, 13,5 Hz, 1H), 2,03-0,94 (m, 5H), 1,65 (s, 6H), 0,89 (d, J = 6,6 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 172,6, 172,1, 170,8, 170,2, 160,1, 160,0, 157,8, 157,7, 140,4, 139,8, 130,5, 130,4, 130,0, 129,8, 129,5, 129,3, 127,9, 127,7, 120,8, 120,7, 120,3, 113,9, 113,6, 113,2, 113,0, 110,5, 110,4, 66,6, 66,5, 56,8, 56,3, 55,4, 55,4, 54,0, 53,7, 51,1, 46,6, 43,8, 43,7, 42,0, 38,4, 37,8, 37,7, 33,8, 33,2, 27,4, 27,0, 25,7, 25,5, 20,9, 20,9 ppm. Pureza: 90% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,89 min; (M+1) 345.
Exemplo 31 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2- il]carbamato
[000498] Usando o procedimento geral A, cloridrato de 2-(5-bromo-2- fluorofenil)propan-2-amina (100 mg, 0,372 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram o composto do título como um sólido branco (90,3 mg, 98%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,45 (dd, J = 2,3, 7,3 Hz, 1H), 7,31 (ddd, J = 2,5, 4,2, 8,6 Hz, 1H), 6,88 (dd, J = 8,6, 11,9 Hz, 1H), 5,38 (s, 1H), 4,82-4,33 (m, 1H), 3,28-2,28 (m, 6H), 1,68 (d, J = 9,0 Hz, 6H), 1,98-1,27 (m, 5H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 161,1, 158,6, 131,7, 131,6, 131,0, 131,0, 118,6, 118,3, 116,8, 55,8, 54,0, 47,6, 46,7, 28,5, 25,6, 24,8, 19,7 ppm. Pureza: 100% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,81 min; (M+1) 386,7. Análise Calculada para Ci7H22BrFN2O2-Q,37 (CHCI3): C, 52,20; H, 5,66; N, 7,14. Encontrado: C, 52,21; H, 5,57; N, 7,13.
Exemplo 32 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[2-(4'-fluorobifenil-3-il)propan-2- il]carbamato
[000499] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(3-bromofenil)propan-2-il]carbamato (600 mg, 1,63 mmol), ácido 4- fluorofenil borônico (457 mg, 3,27 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido branco (373 mg, 60%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,56 (s, 1H), 7,52 (dd, J = 5,4, 8,4 Hz, 2H), 7,42-7,38 (m, 3H), 7,12 (m, 2H), 5,18 (s, 1H), 4,62 (s, 1H), 2,66 (m, 6H), 1,72 (s, 6H), 2,01-0,83 (m, 5H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 125,0, 124,0, 123,8, 116,0, 116,0, 71,3, 55,9, 55,5, 47,6, 46,7, 29,6, 25,6, 24,8, 19,8 ppm. Pureza: 98,0% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,95 min; (M+1) 382,9. Análise Calculada para C23H27FN2O2^0,37 (CHCl3): C, 65,86; H, 6,47; N, 6,57. Encontrado: C, 65,85; H, 6,69; N, 6,49.
Exemplo 33 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[2-(4-fluorobifenil-3-il)propan-2- il]carbamato
[000500] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-il]carbamato (990 mg, 2,57 mmol), ácido fenilborônico (209 mg, 1,71 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido branco (257 mg, 26%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,58-7,49 (m, 3H), 7,44-7,38 (m, 3H), 7,357,29 (m, 1H), 7,08 (dd, J = 8,4, 12,1 Hz, 1H), 5,30 (s, 1H), 4,75-4,42 (m, 1H), 2,89 (d, J = 10,2 Hz, 6H), 1,81-1,66 (m, 6H), 2,04-1,18 (m, 5H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 161,7, 159,3, 140,7, 137,3, 137,3, 131,7, 131,7, 131,0, 129,0, 127,5, 127,3, 126,7, 117,1, 116,9, 71,4, 55,8, 54,3, 47,6, 46,7, 28,6, 25,6, 24,8, 19,8 ppm. Pureza: 92,0% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,95 min; (M+1) 382,9. Análise Calculada para C23H27FN2O2^0,4 (CHCl3): C, 65,39; H, 6,43; N, 6,52. Encontrado: C, 65,39; H, 6,51; N, 6,42.
Exemplo 34 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{2-[2-flúor-5-(2-metilpropil)fenil]propan- 2-il}carbamato
[000501] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-il]carbamato (120 mg, 0,312 mmol), ácido 2-metilpropilborônico (79,4 mg, 0,779 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido branco (37 mg, 33%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,08 (dd, J = 2,0, 8,2 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 6,93-6,85 (m, 1H), 5,23 (s, 1H), 4,72-4,52 (m, 1H), 3,20-2,47 (m, 6H), 2,41 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 1,89-1,76 (m, 1H), 2,02-1,26 (m, 5H), 1,70 (d, J = 7,6 Hz, 6H), 0,88 (d, J = 6,6 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 160,4, 158,0, 137,1, 137,1, 129,2, 129,1, 128,1, 116,2, 116,0, 71,2, 55,8, 54,2, 47,6, 46,7, 45,1, 30,5, 29,9, 28,6, 27,0, 25,6, 24,8, 22,5, 19,8, 19,5 ppm. Pureza: 95,0% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,02 min; (M+1) 363.
Exemplo 35 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[2-(5-ciclopropil-2-fluorofenil)propan-2- il]carbamato
[000502] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-il]carbamato (750 mg, 0,649 mmol), ácido ciclopropilborônico (139 mg, 1,62 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido branco (727 mg, 86%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,08 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 6,97-6,78 (m, 2H), 5,19 (s, 1H), 4,65-4,57 (m, 1H), 2,66 (s, 6H), 1,85 (tt, J = 5,1, 8,4 Hz, 1H), 2,00-1,17 (m, 5H), 1,71 (d, J = 8,7 Hz, 6H), 0,92 (ddd, J = 4,6, 6,3, 8,4 Hz, 2H), 0,62 (dt, J = 4,7, 6,4 Hz, 2H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 160,2, 157,8, 139,2, 139,2, 125,6, 125,5, 125,4, 116,5, 116,3, 71,3, 55,8, 54,2, 47,6, 46,7, 29,9, 29,6, 28,6, 25,6, 24,8, 19,6, 15,2, 9,1 ppm. Pureza: 100% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,87 min; (M+1) 347,2. Análise Calculada para C20H27FN2Or0,07(CHCl3): C, 68,00; H, 7,70; N, 7,90. Encontrado: C, 67,99; H, 7,86; N, 7,81.
Exemplo 36 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2- il]carbamato
[000503] Usando o procedimento geral A, cloridrato de 2-(3-bromo-4- fluorofenil)propan-2-amina (1,00 g, 3,72 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram o composto do título como um sólido branco (434 mg, 30%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,57 (s, 1H), 7,38-7,25 (m, 1H), 7,06 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 5,62 (s, 1H), 4,86-4,32 (m, 1H), 3,33-2,12 (m, 6H), 1,73 (t, J = 7,2 Hz, 5H), 1,61 (d, J = 9,6 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 159,1, 156,7, 154,6, 130,4, 125,8, 125,7, 116,4, 116,2, 109,1, 108,9, 71,3, 55,7, 54,7, 47,4, 46,5, 29,9, 29,6, 25,5, 24,6, 22,9, 19,6 ppm. Pureza: 100% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,79 min; (M+1) 387,8. Análise Calculada para CiyH22BrFN2O2^0,27 (CHCI3): C, 49,68; H, 5,38; N, 6,71. Encontrado: C, 49,67; H, 5,39; N, 6,74.
Exemplo 37 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[2-(6-fluorobifenil-3-il)propan-2- il]carbamato
[000504] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]carbamato (750 mg, 1,95 mmol), ácido fenil borônico (418 mg, 4,87 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido branco (195 mg, 29%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,49 (s, 2H), 7,46-7,38 (m, 3H), 7,35 (dd, J = 4,3, 11,7 Hz, 2H), 7,08 (dd, J = 8,6, 10,1 Hz, 1H), 5,10 (s, 1H), 4,60 (s, 1H), 3,33-2,10 (m, 6H), 1,67 (d, J = 7,9 Hz, 6H), 1,67 (m, 5H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 159,9, 157,4, 136,2, 129,3, 129,0, 128,7, 127,9, 127,6, 125,7, 125,6, 71,0, 66,1, 55,7, 55,1, 47,5, 46,6, 29,9, 29,6, 25,5, 24,5, 19,5, 15,5 ppm. Pureza: 98% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,95 min; (M+1) 382,9. Análise Calculada para C23H27FN2θ2^0,29(CHCh): C, 67,08; H, 6,60; N, 6,72. Encontrado: C, 67,09; H, 6,95; N, 6,37.
Exemplo 38 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il{2-[4-flúor-3-(2-metilpropil)fenil]propan-2- il}carbamato
[000505] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]carbamato (125 mg, 0,324 mmol), ácido 2-metilpropilborônico (66 mg, 0,65 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido branco (27 mg, 23%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,23-7,11 (m, 2H), 7,04-6,82 (m, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,59 (s, 1H), 3,32-2,12 (m, 6H), 2,48 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 1,86 (d, J = 6,7, Hz, 1H), 2,05-0,96 (m, 5H), 1,62 (d, J = 5,8 Hz, 6H), 0,90 (d, J = 6,6 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 161,4, 159,0, 154,7, 142,5, 128,3, 124,0, 115,1, 114,9, 71,2, 66,1, 55,8, 55,0, 47,6, 46,7, 38,7, 29,9, 29,6, 25,6, 24,8, 22,6, 19,7, ppm. Pureza: 85% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,0 min; (M+1) 362,9.
Exemplo 39 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[2-(4',6-difluorobifenil-3-il)propan-2- il]carbamato
[000506] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]carbamato (125 mg, 0,324 mmol), ácido 4-fluoroborônico (64 mg, 0,46 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido branco (76 mg, 56%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,48 (t, 2H), 7,44-7,29 (m, 2H), 7,21-7,00 (m, 3H), 5,27 (s, 1H), 4,68-4,55 (m, 1H), 3,29-2,10 (m, 6H), 1,67 (d, J = 9,4 Hz, 6H), 2,01-0,69 (m, 5H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 163,9, 161,4, 159,8, 157,3, 154,8, 143,5, 132,2, 130,9, 127,9, 127,8, 127,4, 125,9, 125,8, 116,2, 116,0, 115,7, 115,5, 71,4, 66,1, 55,9, 47,6, 46,7, 30,0, 39,7, 25,6, 24,8, 19,8 ppm. Pureza: 98% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,96 min; (M+1) 400,9.
Exemplo 40 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{2-[4-flúor-3-(pirimidin-5-il)fenil]propan- 2-il}carbamato
[000507] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]carbamato (150 mg, 0,389 mmol), ácido pirimidina-5-borônico (75,9 mg, 0,613 mmol) e tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) produziram o composto do título como um sólido branco (49 mg, 31%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 9,22 (s, 1H), 8,92 (s, 2H), 7,55-7,41 (m, 2H), 7,19 (dd, J = 8,7, 9,9 Hz, 1H), 5,37 (s, 1H), 4,72-4,49 (m, 1H), 3,34-2,04 (m, 6H), 2,04-0,98 (m, 5H), 1,66 (t, J = 10,9 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 159,9, 157,9, 157,4, 156,6, 154,7, 130,2, 127,85, 127,77, 126,9, 122,0, 121,8, 116,7, 116,5, 116,2, 71,6, 55,9, 54,9, 47,6, 46,7, 30,3, 29,6, 25,6, 24,8, 19,8 ppm. Pureza: 93% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,63 min; (M+1) 384,9
Exemplo 41 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{2-[4-flúor-3-(piridin-3-il)fenil]propan-2- il}carbamato
[000508] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]carbamato (110 mg, 0,286 mmol), ácido piridina-3-borônico (53 mg, 0,43 mmol) e tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) produziram o composto do título como um sólido branco (42 mg, 39%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,78 (s, 1H), 8,62 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,46 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,38 (dd, J = 4,9, 7,9 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 8,7, 9,9 Hz, 1H), 5,32 (s, 1H), 4,69-4,57 (m, 1H), 2,68 (s, 6H), 1,70 (d, J = 11,3 Hz, 6H), 2,08-0,94 (m, 5H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 160,0, 157,5, 149,9, 149,0, 136,6, 132,1, 127,3, 126,8, 126,7, 125,5, 125,3, 123,5, 116,4, 116,2, 71,5, 55,9, 55,0, 47,6, 46,7, 30,1, 29,66, 25,6, 24,8, 19,7 ppm. Pureza: 100% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,54 min; (M+1) 367,8.
Exemplo 42 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{2-[4-flúor-3-(furan-3-il)fenil]propan-2- il}carbamato
[000509] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]carbamato (110 mg, 0,296 mmol), ácido furan-3-borônico (47,9 mg, 0,428 mmol) e tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) produziram o composto do título como um sólido branco (47 mg, 44%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,88 (ddd, J = 0,9, 1,5, 2,5 Hz, 1H), 7,53 (dd, J = 2,5, 7,1 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,31-7,23 (m, 1H), 7,08 (dd, J = 8,6, 10,6 Hz, 1H), 6,76 (dt, J = 0,8, 1,7 Hz, 1H), 5,22 (s, 1H), 4,62 (s, 1H), 3,40-2,11 (m, 6H), 2,020,87 (m, 5H), 1,59 (dd, J = 11,6, 70,3 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 160,0, 157,5, 150,2, 143,9, 127,44, 127,36, 127,0, 126,1, 123,8, 116,6, 116,4, 71,5, 55,9, 55,0, 47,6, 46,7, 30,1, 29,9, 25,6, 24,8, 19,8 ppm. Pureza: 96% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,85 min; (M+1) 372,9.
Exemplo 43 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{2-[4-flúor-3-(piridin-4-il)fenil]propan-2- il}carbamato
[000510] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il- [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]carbamato (130 mg, 0,291 mmol), ácido piridina-4-borônico (54 mg, 0,43 mmol) e tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) produziram o composto do título como um sólido branco (46 mg, 41%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,68 (dd, J = 1,6, 4,5 Hz, 2H), 7,61-7,39 (m, 4H), 7,15 (dd, J = 8,6, 10,2 Hz, 1H), 5,31 (s, 1H), 4,69-4,57 (m, 1H), 3,40-2,07 (m, 6H), 1,69 (d, J = 10,8 Hz, 6H), 2,06-0,74 (m, 5H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 160,0, 157,6, 143,3, 141,6, 141,5, 126,7, 126,6, 124,9, 124,8, 120,1, 119,9, 116,1, 115,9, 115,4, 115,1, 109,2, 71,4, 55,9, 55,0, 47,6, 46,7, 29,9, 25,6, 24,8, 19,8 ppm. Pureza: 97% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,82 min; (M+1) 384,6.
Exemplo 44 1-(1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)-3-(2-fenilpropan-2-il)ureia
[000511] Usando o procedimento geral C, quinuclidin-3-amina (102 mg, 0,6 mmol), CDI (131 mg, 0,789 mmol) e cumilamina (95 mg, 0,70 mmol) produziram o composto do título como um sólido branco (21 mg, 10%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,61-7,47 (m, 2H), 7,44-7,37 (m, 2H), 7,34-7,28 (m, 1H), 4,86 (s, 1H), 4,20 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 3,71-3,60 (m, 1H), 3,14 (ddd, J = 2,3, 9,4, 14,2 Hz, 1H), 2,79-1,89 (m, 6H), 1,64 (d, J = 3,3 Hz, 6H), 1,58-1,10 (m, 5H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 157,4, 146,2, 129,3, 127,8, 125,8, 57,1, 54,9, 47,7, 47,1, 46,7, 30,6, 30,5, 26,0, 20,3 ppm. Pureza: 79% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,61 min; (M+1) 288,2.
Preparação O Exemplo 45 3-ciano-1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-{2-[3-(prop-1-en-2- il)fenil]propan-2-il}carbamato
[000512] Em uma solução de 3-hidroxiquinuclidina-3-carbonitrila (38 mg, 0,25 mmol) em acetonitrila/dioxano (3 mL) em temperatura ambiente foi adicionado trietilamina (7,0 uL, 0,05 mmol). A mistura reacional foi agitada durante 15 min, e 1-(2-isocianatopropan-2-il)-3- (prop-1-en-2-il)benzeno (49,0 uL, 0,248 mmol) foi adicionado gota a gota. A reação foi agitada durante um período de 18 h a 65°C e concentrado. O material bruto foi purificado em uma combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar o carbamato correspondente como um óleo claro (57 mg, 65%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,42-7,20 (s, 5H), 6,61(s, 1H), 5,11 (s, 1H), 3,29 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,09 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 2,93 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 2,792,68 (m, 2H), 2,13 (s, 6H) 2,05-2,00 (m, 2H),1,91 (s, 3H), 1,87 (s, 2H),1,50-1,37 (m, 2H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 135,4, 128,7, 125,2, 124,5, 124,0, 122,0, 112,9, 61,2, 47,0, 46,2, 32,4, 31,8, 29,9, 29,4, 29,2, 26,6, 25,7, 23,7, 22,8, 22,2, 19,2 ppm. Pureza: >99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,81 min; (M+1) 354.
Preparação P Exemplo 46 N-(2-(3-(prop-1-en-2-il)fenil)propan-2-il)-1,4- diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida
[000513] Em uma solução de 1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano (350 mg, 2,77 mmol) e 1-(2-isocianatopropan-2-il)-3-(prop-1-en-2-il)benzeno (1,09 mL, 5,55 mmol) em clorofórmio (2 mL) foi adicionado 3-4 peças de peneiras moleculares. A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 18 h, e em seguida concentrada. O material bruto foi purificado em uma combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar a ureia correspondente como um sólido esbranquiçado (650 mg, 36%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,48 (s, 1H), 7,31-7,26 (m, 3H), 5,34(s, 1H), 5,07 (s, 1H), 4,73 (br s, 1H), 4,03 (BR s, 1H), 3,64 (m, 2H), 3,14-3,03 (m, 6H), 2,15 (s, 3H) 2,06 (m, 2H), 1,72 (m, 8H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 155,7, 148,3, 143,8, 141,3, 128,5, 124,1, 123,9, 122,0, 112,5, 57,8, 55,8, 48,1, 46,4 (2x), 41,2, 30,2 (2x), 27,3 (2x), 22,1 ppm. Pureza: >98% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,71 min; (M+1) 328
Exemplo 47 bifenil-2-il-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxilato
[000514] Bifenil-2-il-carbonocloridrato (83,0 mg, 0,358 mmol) foi tratado com 1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano (113 mg, 0,896 mmol) usando o mesmo procedimento relatado no exemplo 46 para proporcionar o composto do título como um sólido esbranquiçado (17 mg, 15%). Pureza: >99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,75 min; (M+1) 323.
Exemplo 48 N-{2-[3-(propan-2-il)fenil]propan-2-il}-1,4- diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida
[000515] Usando o procedimento geral F, N-(2-(3-(prop-1-en-2- il)fenil)propan-2-il)-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida (100 mg, 0,305 mmol) e paládio, (20 mg, 20 % em peso em carbono) produziram o composto do título como um sólido esbranquiçado (60 mg, 57%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,28-7,21 (m, 3H), 7,11 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,02 (s, 1H), 3,66 (t, J = 8,0 Hz, 2H) 3,15 (m, 7H), 2,06 (br s, 2H), 1,77 (s, 7H) 1,26 (d, J = 4,0 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 155,8, 148,9, 148,5, 128,5,1, 124,7, 123,1, 122,4, 57,8, 56,0, 48,1, 46,4, 41,2, 34,5, 32,2, 30,4, 30,0, 29,9, 27,3, 24,3, 22,9 ppm. Pureza: >91% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,74 min; (M+1) 330.
Preparação Q Exemplo 49 (+/-)-(3S,4S)-1-azabiciclo[2.2.1]heptan-3-il-2-(3-(prop-1-en-2- il)fenil)propan-2-ilcarbamato
[000516] Em uma solução de (+/-)-(3S,4S)-1-azabiciclo[2.2.1]heptan- 3-ol (294 mg, 2,6 mmol) em THF (5 mL) em temperatura ambiente foi adicionado NaH [60%, óleo] mg (107, 2,67 mmol). A mistura reacional foi agitada durante 15 min e 1-(2-isocianatopropan-2-il)-3-(prop-1-en-2- il)benzeno (344 uL, 1,73 mmol) foi adicionado gota a gota. A reação foi agitada durante um período de 30 min e extinguida com salmoura. A solução foi extraída com EtOAc, e a camada orgânica foi secada em Na2SO4 e concentrada. O material bruto foi purificado em uma combiflash (cartucho de SiO2, CHCl3 e NH3 a 2N em MeOH) para proporcionar o carbamato correspondente como um óleo claro (140 mg, 26%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,26-7,20 (m, 3H), 7,11 (m, 1H), 5,18 (s, 1H), 5,19 (br s, 1H), 5,01 (s, 1H), 4,81 (br s, 1H), 2,99 (br s, 1H), 2,82(br s, 1H), 2,70 (br s, 1H), 2,53 (br s, 2H), 2,33 (br s, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,76 (br s, 1H) 1,61 (br s, 6H), 1,52 (br s, 1H), 1,37 (br s, 1H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 147,1, 143,7, 141,5, 128,5, 124,1, 122,1, 112,7, 75,6, 60,6, 59,4, 55,4, 54,3, 53,9, 41,5, 29,9, 29,8, 29,4, 22,2, 21,6 ppm. Pureza: >98% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,83 min; (M+1) 315
Exemplo 50 (+/-)-(3S,4S)-1-azabiciclo[2.2.1]hept-3-il{2-[3-(propan-2- il)fenil]propan-2-il}carbamato
[000517] Usando o procedimento geral F, (+/-)-(3S,4S)-1- azabiciclo[2.2.1]heptan-3-il 2-(3-(prop-1-en-2-il)fenil)propan-2- ilcarbamato (110 mg, 0,350 mmol) e paládio (20 mg, 20 % em peso em carbono) produziram o composto do título como um sólido esbranquiçado (36 mg, 46%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,25-7,19 (m, 3H), 7,11 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,19 (s, 1H), 4,91 (s, 1H), 3,44 (t, J = 4,0 Hz, 2H) 3,19 (br s, 1H), 3,02 (br s, 1H), 2,89 (m, 2H), 2,69 (br s, 1H), 2,39 (br s, 1H), 1,91 (br s, 1H), 1,66 (br s, 7H) 1,26 (d, J = 4,0 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 128,5 (2x), 124,8, 123,1 (2x), 122,4 (2x), 77,4, 60,6, 59,4, 55,5, 41,5, 34,5, 29,9, 29,9, 29,5, 24,3 (2x), 21,6 ppm. Pureza: >95% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,88 min; (M+1) 317.
Exemplo 51 N-[2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]-1,4- diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida
[000518] Usando o procedimento geral A, cloridrato de 2-(3-bromo-4- fluorofenil)propan-2-amina (1,00 g, 3,72 mmol) e 1,4- diazabiciclo[3.2.2]nonano produziram o composto do título como um sólido branco (265 mg, 18%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,54-7,52 (m, 1H), 7,31-7,25 (m, 1H), 7,04 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,71(s, 1H), 3,99 (br s, 1H), 3,59 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 3,13-2,95 (m, 6H), 2,04-1,97 (m, 2H) 1,77-1,67 (m, 2H), 1,65 (s, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 158,9, 156,4, 155,4, 145,9, 130,2, 125,6, 116,2, 57,8, 54,9, 48,3, 46,6, 46,6, 41,6, 30,5, 30,5, 27,6, 27,6 ppm. Pureza: >99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,73 min; (M+1) 384.
Exemplo 52 N-[2-(6-fluorobifenil-3-il)propan-2-il]-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano- 4-carboxamida
[000519] Usando o procedimento geral E, N-[2-(3-bromo-4- fluorofenil)propan-2-il]-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida (100 mg, 0,261 mmol), ácido fenilborônico (79 mg, 0,65 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido esbranquiçado (66 mg, 66%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,54 (m, 2H), 7,44-7,40 (m, 5H), 7,08(m, 1H), 4,78(br s, 1H), 4,00 (br s, 1H), 3,60 (m, 2H), 3,11-2,92 (m, 6H), 2,00 (m, 2H) 1,67(m, 7H), 1,26 (s, 1H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 159,6, 155,6, 144,6, 136,5, 129,3, 128,6, 128,5, 127,8, 127,5, 125,7, 125,6, 116,1, 115,9, 57,9, 55,3, 48,2, 46,4, 46,4, 41,6, 30,6, 30,5, 29,9, 27,6 ppm. Pureza: >99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,88 min; (M+1) 382.
Exemplo 53 N-[2-(4',6-difluorobifenil-3-il)propan-2-il]-1,4- diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida
[000520] Usando o procedimento geral E, N-[2-(3-bromo-4- fluorofenil)propan-2-il]-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida (100 mg, 0,261 mmol), ácido 4-fluorofenil borônico (91 mg, 0,65 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido esbranquiçado (64 mg, 62%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,48 (m, 2H), 7,37-7,30 (m, 2H), 7,10-7,03 (m, 3H), 4,77 (s, 1H), 3,99 (br s, 1H), 3,58 (m, 2H), 3,10-2,90 (m, 6H), 1,98 (m, 2H) 1,71 (m, 8H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 163,7, 161,3, 159,5, 157,1, 155,6, 144,6, 131,0, 130,9, 127,4, 127,2, 125,7, 116,1, 115,6, 57,9, 55,2, 48,2, 46,4, 46,4, 41,5, 30,6, 30,6, 27,6, 27,6 ppm. Pureza: >99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,90 min; (M+1) 400.
Exemplo 54 N-[2-(naftalen-1-il)propan-2-il]-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano-4- carboxamida
[000521] Usando o procedimento geral A, cloridrato de 2-(naftalen-1- il)propan-2-amina (227 mg, 1,23 mmol) e 1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano produziram o composto do título como um sólido branco (206 mg, 50%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,63-8,60 (m, 1H), 7,90-7,87 (m, 1H), 7,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,0 Hz, 1H),), 7,47-7,42 (m, 3H), 4,86 (s, 1H), 3,94 (br s, 1H), 3,61 (m, 2H), 3,11-2,88 (m, 7H), 2,01-1,91 (m, 7H), 1,68-1,62 (m, 2H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 176,2, 155,5, 142,6, 135,3, 130,6, 129,9, 128,8, 126,3, 125,4, 125,2, 123,9, 57,3, 57,1, 47,7, 45,8, 45,8, 40,7, 29,4, 29,4, 26,9, 26,9 ppm. Pureza: >99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,72 min; (M+1) 338.
Exemplo 55 N-(2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-il)-1,4- diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida
[000522] Usando o procedimento geral A, cloridrato de 2-(5-bromo-2- fluorofenil)propan-2-amina (100 mg, 0,372 mmol) e 1,4- diazabiciclo[3.2.2]nonano produziram o composto do título como um sólido branco (70 mg, 49%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,48 (m, 1H), 7,28 (m, 1H), 6,86 (m, 1H), 4,85 (s, 1H), 3,98 (br s, 1H), 3,56 (m, 2H), 3,14-2,91 (m, 7H), 1,99 (m, 2H) 1,71 (m, 7H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 161,1, 158,6, 155,7, 131,3, 113,1, 118,3, 118,0 57,8, 54,0, 48,1, 46,4, 46,4, 41,5, 29,1, 29,1, 27,5, 27,5 ppm. Pureza: >99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,73 min; (M+1) 384.
Exemplo 56 N-[2-(4-fluorobifenil-3-il)propan-2-il]-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano- 4-carboxamida
[000523] Usando o procedimento geral E, N-(2-(5-bromo-2- fluorofenil)propan-2-il)-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida (100 mg, 0,261 mmol), ácido fenil borônico (30 mg, 0,25 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido esbranquiçado (27 mg, 39%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,56-7,51 (m, 3H), 7,41-7,37 (m, 3H), 7,32-7,30 (m, 1H), 7,03 (m, 1H), 4,90 (s, 1H), 4,00 (br s, 1H), 3,59 (m, 2H), 3,11-2,92 (m, 6H), 2,04-1,98 (m, 2H) 1,78 (s, 6H), 1,73-1,67 (m, 2H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 161,8, 159,4, 155,9, 140,9, 137,2, 134,6, 128,9, 127,4, 127,3, 127,2, 127,1, 127,0, 116,9, 57,9, 54,4, 48,1, 46,5, 46,5, 41,4, 29,9, 29,3, 27,5, 27,5 ppm. Pureza: >99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,90 min; (M+1) 400.
Exemplo 57 N-(2-(3-isopropoxifenil)propan-2-il)-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano- 4-carboxamida
[000524] Usando o procedimento geral A, cloridrato de 2-(3- isopropoxifenil)propan-2-amina (60 mg, 0,31 mmol) e 1,4- diazabiciclo[3.2.2]nonano produziram o composto do título como um sólido branco (70 mg, 57%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,17 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,92-6,87 (m, 2H), 6,69 (d, J = 8,0 Hz, 1H) 4,66 (br s, 1H), 4,48 (m, 1H), 3,94 (br s, 1H) 3,56 (m, 2H), 3,08-2,90 (m, 5H), 1,96 (m, 2H) 1,69-1,60 (m, 7H), 1,27 (d, J = 8,0 Hz, 6H), 1,17 (br s, 2H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 158,0, 155,7, 150,3, 129,4, 117,1, 113,4, 113,1, 77,5, 69,8, 55,7, 48,2, 46,4, 46,4, 46,3, 41,5, 30,3, 30,0, 29,9, 27,6, 22,3 ppm. Pureza: >99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,75 min; (M+1) 346.
Exemplo 58 N-(bifenil-3-il)-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida
[000525] Usando o procedimento geral A, bifenil-3-amina (100 mg, 0,592 mmol) e 1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano produziram o composto do título como um sólido esbranquiçado (93 mg, 49%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,60 (m, 1H), 7,56-53 (m, 2H), 7,39-7,21(m, 6H), 6,67 (br s, 1H), 4,85 (s, 1H), 4,16 (br s, 1H), 3,66-3,61 (m, 2H), 3,07-2,86 (m, 6H), 1,97 (m, 2H) 1,68 (m, 2H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 154,7, 142,0, 141,1, 139,9, 129,3, 128,8,. 128,8, 127,5, 127,3, 127,3, 122,0, 119,4, 119,2, 57,5, 48,4, 46,3, 46,3, 42,1, 27,5, 27,5 ppm. Pureza: >96% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,75 min; (M+1) 333.
Exemplo 59 N-{2-[2-flúor-5-(2-metilpropil)fenil]propan-2-il}-1,4- diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida
[000526] Usando o procedimento geral E, N-(2-(5-bromo-2- fluorofenil)propan-2-il)-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida (100 mg, 0,261 mmol), com ácido isopropil borônico (66 mg, 0,65 mmol) e acetato de paládio (II) produziram o composto do título como um sólido esbranquiçado (27 mg, 39%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,08 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,93-6,81 (m, 2H), 4,85 (s, 1H), 3,96 (br s, 1H), 3,65 (q, J = 8,0 Hz, 1H), 3,55 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 3,09-2,90 (m, 5H), 2,40 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 2,01-1,92 (m, 2H) 1,81-1,61 (m, 8H), 1,22-1,17 (m, 2H), 0,87 (d, J = 8,0 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 160,5, 158,0, 155,9, 137,0, 133,6, 128,8, 116,0, 57,9, 54,3, 48,1, 46,4 (2x), 45,2, 41,4, 30,5, 29,9, 29,2, 29,2, 27,5, 22,6, 22,6 ppm. Pureza: >99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,94 min; (M+1) 362.
Exemplo 60 N-(bifenil-2-il)-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida
[000527] Usando o procedimento geral A, 1-isocianatobifenila (50 mg, 0,26 mmol) e 1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano produziram o composto do título como um sólido branco (55 mg, 65%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,15 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45-7,31 (m, 6H), 7,16 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,04 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,47 (br s, 1H), 3,63 (br s, 1H), 3,57 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 3,00-2,80 (m, 6H), 1,68 (m, 2H) 1,43 (m, 2H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 154,2, 138,9, 136,6, 131,7, 129,7, 129,5, 129,5, 129,3, 129,3, 128,7, 128,1, 122,6, 120,5, 57,6, 48,5, 46,2, 46,2, 41,6, 29,9, 27,3 ppm. Pureza: >99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,64 min; (M+1) 322.
Exemplo 61 N-(naftalen-1-il)-1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano-4-carboxamida
[000528] Usando o procedimento geral A, 1-isocianatonaftaleno (208 mg, 1,23 mmol) e 1,4-diazabiciclo[3.2.2]nonano produziram o composto do título como um sólido branco (150 mg, 48%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,80-7,72 (m, 2H), 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44-7,35 (m, 3H), 6,65 (br s, 1H), 4,18 (br s, 1H), 3,64 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 3,09-2,91 (m, 6H), 2,08-1,93 (m, 2H) 1,74-1,66 (m, 2H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 155,3, 134,4, 134,3, 128,9, 128,2, 126,2, 126,1, 126,0, 125,1, 121,2, 121,0, 57,6, 48,7, 46,4, 46,4, 42,2, 27,6, 27,6 ppm. Pureza: >99% de UPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,53 min; (M+1) 296.
Exemplo 62 (S)-quinuclidin-3-il-2-(bifenil-4-il)propan-2-ilcarbamato
[000529] Usando o procedimento geral B, bromobenzonitrila (2,00 g, 11,0 mmol) foi convertido para o 2-(4-bromofenil)propan-2-amina correspondente (1,20 g, 51%) como um óleo marrom.
[000530] Usando o procedimento geral A, 2-(4-bromofenil)propan-2- amina (1,0 g, 4,7 mmol) e (S)-quinuclidin-3-ol produziu (S)-quinuclidin- 3-il-2-(4-bromofenil)propan-2-ilcarbamato (1,0 g, 58%) como um óleo marrom.
[000531] Usando o procedimento geral E, o brometo anterior (200 mg, 0,540 mmol), ácido fenilborônico (133 mg, 1,10 mmol) e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (70 mg, 35%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,60-7,53 (m, 4H), 7,47 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,42 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,33 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 5,26 (br s, 1H), 4,64 (m, 1H), 3,33-3,15 (m, 1H), 3,10-2,45 (m, 5H), 2,40-1,80 (m, 2H), 1,78-1,58 (m, 7H), 1,55-1,33 (m, 2H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 154,5, 146,1, 140,8, 139,5, 128,7, 127,2, 127,1, 127,1, 125,2, 70,9, 55,5, 55,1, 47,4, 46,4, 31,1, 29,5, 25,3, 24,5, 19,5 ppm. Pureza: 100% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,56 min; (M+1) 365.
Exemplo 63 quinuclidin-3-il-2-(4-(pirimidin-5-il)fenil)propan-2-ilcarbamato
[000532] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-2-(4- bromofenil)propan-2-ilcarbamato (200 mg, 0,540 mmol), ácido pirimidin- 5-ilborônico (136 mg, 1,12 mmol) e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (80 mg, 40%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 9,17 (s, 1H), 8,92 (s, 2H), 7,58-7,51 (m, 4H), 5,34 (s, 1H), 4,61 (m, 1H), 3,20-3,10 (m, 1H), 2,92-2,41 (m, 5H), 2,00-1,76 (m, 2H), 1,72-1,53 (m, 7H), 1,52-1,32 (m, 2H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 157,4, 154,8, 154,5, 148,2, 134,0, 132,5, 127,0, 126,0, 71,2, 55,6, 55,0, 47,4, 46,3, 29,7, 29,4, 25,4, 24,5, 19,5 ppm. Pureza: > 96% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,34 min; (M+1) 366.
Exemplo 64 quinuclidin-3-il-1-(bifenil-4-il)ciclopropilcarbamato
[000533] Usando o procedimento geral G, bromobenzonitrila (3,00 g, 16,5 mmol) foi convertido para o 1-(4-bromofenil)ciclopropanamina correspondente (1,80 g, 51%) como um sólido amarelo.
[000534] Usando o procedimento geral A, 1-(4- bromofenil)ciclopropanamina (1,0 g, 4,7 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram quinuclidin-3-il-1-(4-bromofenil)ciclopropil-carbamato (1,3 g, 75%) como um semissólido branco.
[000535] Usando o procedimento geral E, o carbamato anterior (400 mg, 1,12 mmol), ácido fenilborônico (267 mg, 2,22 mmol) e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um óleo viscoso (100 mg, 25%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,47 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,33 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,26-7,15 (m, 3H), 5,93 (br s, 0,6H), 5,89 (br s, 0,4H), 4,67 (m, 1H), 3,20-3,06 (m, 1H), 2,88-2,42 (m, 5H), 1,98-1,08 (m, 9H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 155,0, 141,0, 139,7, 138,2, 127,7, 126,1, 126,0, 124,8, 124,1, 70,0, 54,5, 46,3, 45,4, 34,1, 24,3, 23,2, 18,3, 17,0 ppm. Pureza: 100% LCMC (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,52 min; (M+1) 363.
Preparação R Exemplo 65 quinuclidin-3-il-1-(4-(piridin-2-il)fenil)ciclopropilcarbamato
[000536] Em uma solução de quinuclidin-3-il-1-(4-bromofenil)ciclo- propilcarbamato (870 mg, 2,43 mmol) em 30 mL de 1,4-dioxano, foi adicionado bis(pinacolato)diboro (1,81 g, 7,22 mmol), CH3COOK (2,10 g, 21,4 mmol), e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 (97 mg, 0,12 mmol). A mistura foi agitada a 80 °C durante 18 h. O solvente foi evaporado, e o resíduo foi extraído com EtOAc. Os extratos foram concentrados e purificados por cromatografia de coluna em sílica-gel (eluindo com EtOAc/metanol de 20/1 a 10/1, contendo 1% de TEA) para produzir quinuclidin-3-il-1-(4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)ciclopropilcarbamato (260 mg, 33%) como um semissólido marrom.
[000537] Usando o procedimento geral E, o boronato anterior (260 mg, 0,632 mmol), 2-bromopiridina (149 mg, 0,941 mmol) e Pd2(dba)3 (32,0 mg, 0,036 mmol) produziram o composto do título como um semissólido branco (70 mg, 31%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,58 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 7,66-7,57 (m, 2H), 7,23-7,15 (m, 2H), 7,11 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 6,16 (br s, 0,6H), 5,97 (br s, 0,4H), 4,63 (m, 1H), 3,17-3,02 (m, 1H), 2,90-2,38 (m, 5H), 1,90-1,10 (m, 9H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 156,1, 155,2, 148,6, 143,0, 136,3, 135,7, 125,9, 124,5, 120,9, 119,4, 70,3, 54,6, 46,3, 45,4, 34,1, 24,4, 23,5, 18,5, 17,3 ppm. Pureza: 100% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,18 (M+H) 364.
Exemplo 66 quinuclidin-3-il-1-(4-(pirimidin-5-il)fenil)ciclopropilcarbamato
[000538] Usando o procedimento geral E, o quinuclidin-3-il-1-(4- bromofenil)ciclopropil-carbamato anterior (400 mg, 1,10 mmol), ácido pirimidin-5-ilborônico (204 mg, 1,64 mmol) e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um óleo viscoso (110 mg, 28%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ (s, 1H), D,Q (s, 2H), 7,44 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,33-7,25 (m, 2H), 6,02 (br s, 0,7H), 6,02 (br s, 0,3H), 4,65 (m, 1H), 3,20-3,05 (m, 1H), 2,86-2,40 (m, 5H), 1,98-1,12 (m, 9H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 156,3, 155,1, 153,7, 143,3, 132,9, 131,1, 126,0, 125,3, 70,5, 54,7, 46,4, 45,4, 34,1, 24,4, 23,5, 18,5, 17,5 ppm. Pureza: 100% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,29 min; (M+1) 365.
Exemplo 67 (S)-quinuclidin-3-il-1-(4'-fluorobifenil-4-il)ciclopropilcarbamato
[000539] Usando o procedimento geral E, (S)-quinuclidin-3-il-1-(4- bromofenil)ciclopropilcarbamato, ácido 4-F-fenilborônico e [PdCl2(pddf- )]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (45%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,06-7,83 (d, 1H), 7,69-7,66 (m, 2H), 7,59-7,55 (m, 2H), 7,29-7,22 (m, 4H), 4,56-4,54 (m, 1H), 3,13-2,32 (m, 6H), 1,91-1,19 (m, 9H) ppm. 13C RMN (125 MHz, DMSO-d6) δ 163,2, 161,2, 156,4, 143,7, 136,9, 128,9, 128,8, 126,8, 125,6, 116,2, 116,0, 70,7, 55,8, 47,4, 46,4, 34,8, 25,7, 24,6, 19,6, 18,7, 18,6 ppm. Pureza: > 97% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,96 min; (M+1) 381,2.
Exemplo 68 1-azabiciclo[3.2.2]nonan-4-il 1-(4'-fluorobifenil-4- il)ciclopropilcarbamato
[000540] Usando o procedimento geral E, 1-azabiciclo[3.2.2]nonan-4- il 1-(4-bromofenil)-ciclopropilcarbamato, ácido 4-F-fenilborônico e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (27%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,52-7,48 (m, 4H), 7,33-7,28 (m, 2H), 7,14-7,11 (t, J = 8,5 Hz, 2H), 5,47-5,33 (d, 1H), 4,93-4,89 (m, 1H), 3,15-2,75 (m, 6H), 2,10-0,88 (m, 11H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 163,4, 161,4, 155,7, 142,1, 138,3, 136,9, 128,5, 128,5, 127,0, 125,9, 125,4, 115,7, 115,5, 78,8, 51,7, 48,3, 44,9, 35,2, 33,7, 30,6, 29,7, 24,8, 22,2, 18,1 ppm. Pureza: > 99% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,56 min; (M+1) 395,2.
Exemplo 69 (S)-quinuclidin-3-il-1-(4-(5-fluoropiridin-2- il)fenil)ciclopropilcarbamato
[000541] Usando o procedimento geral E, (S)-quinuclidin-3-il-(1-(4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxa-borolan-2-il)fenil)ciclopropil)carbamato, 2-bromo-5-fluoropiridina e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (34%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,51-8,52 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 7,87-7,85 (d, J = 10,5 Hz, 2H), 7,69-7,67 (m, 1H), 7,47-7,42 (m, 1H), 7,32-7,27 (m, 2H), 5,79-5,66 (d, 1H), 4,734,71 (t, J = 5,0 Hz ,1H), 3,22-3,19 (m, 1H), 2,87-2,61 (m, 5H), 2,01-1,22 (m, 9H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 160,8, 157,4, 156,1, 153,5, 144,4, 137,8, 136,3, 126,7, 125,7, 124,9, 123,6, 121,1, 71,6, 55,7, 47,4, 46,5, 35,3, 29,7, 25,4, 24,8, 19,4 ,18,2 ppm. Pureza: > 99% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,41 min; (M+1) 382,2.
Preparação S Exemplo 70 (S)-1-(1-(4'-fluorobifenil-4-il)ciclopropil)-3-(3-metilquinuclidin-3- il)ureia
[000542] Em um frasco de base arredondada com três gargalos equipado com dois funis de adição de equalização de pressão e um tubo de borracha conectado com um fluxômetro de gás, uma suspensão de 1-(4'-flúor-[1,1'-bifenil]-4-il)ciclopropanamina (1,50 g, 7,07 mmol) em uma mistura de 20 mL de água e 1 mL de HCl conc. foi agitada durante 10 min. Tolueno (10 mL) foi adicionado, e a solução foi mantida sob agitação vigorosa e arrefecida a 0 °C. Uma solução de trifosgênio (3,10 g, 10,6 mmol) em 20 mL de tolueno e 40 mL de NaHCO3 aquoso saturado foi adicionada gota a gota durante um período de 1h. A mistura reacional foi agitada durante um adicional de 30 min. A agitação foi interrompida, e a camada de tolueno superior foi em seguida separada, secada (Na2SO4) e concentrada para proporcionar o isocianato correspondente, que é usado na próxima etapa sem outra purificação.
[000543] Em uma solução do isocianato anterior (134 mg, 0,571 mmol) em 15 mL de tolueno foi adicionado (S)-3-metilquinuclidin-3- amina (80 mg, 0,57 mmol). A mistura resultante foi aquecida durante a noite em refluxo, resfriada em temperatura ambiente e concentrada em vácuo para produzir um resíduo, que foi purificado por cromatografia de fase reversa em uma combiflash (0-20% de MeCN em água) para proporcionar o composto do título como um sólido branco (73 mg, 33%). 1H RMN (500 MHz CDCl3) δ 7,52-7,48 (m, 4H), 7,27-7,25 (d, J = 10,0 Hz, 2H), 7,13-7,09 (m, 2H), 5,39 (s, 1H), 4,78 (s, 1H), 2,95-2,71 (m, 5H), 2,65-2,64 (m, 1H), 1,94-1,93 (m, 1H), 1,69-1,68 (m, 1H), 1,46-1,38 (m, 5H), 1,36-1,33 (m, 4H), 1,26-1,23 (m, 1H) ppm. 13C RMN (125 MHz CDCl3) δ 163,5, 161,5, 157,5, 141,5, 138,5, 136,6, 136,6, 128,5, 128,4, 127,2, 124,7, 115,8, 115,6, 63,8, 52,3, 46,6, 46,3, 34,9, 31,0, 25,0, 23,2, 22,5, 20,2, 20,0 ppm. Pureza: > 99% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,51 min; (M+H+) 394,2.
Exemplo 71 (S)-1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[1-(2',4'-difluorobifenil-4- il)ciclopropil]carbamato
[000544] Usando o procedimento geral E, (S)-quinuclidin-3-il-1-(4- bromofenil)ciclopropilcarbamato (0,446 g, 1,22 mmol), ácido 2,4- difluorofenil borônico (0,386 g, 2,44 mmol) e Pd(OAc)2 (0,015 g, 0,067 mmol) produziram o composto do título como um sólido castanho (0,111 g, 23%). 1H RMN (CDCl3) δ 7,43 (dd, J = 8,4, 1,6 Hz, 2H), 7,40-7,33 (m, 1H), 7,31 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 6,99-6,81 (m, 2H), 5,54 (d, J = 48,0 Hz, 1H), 4,82-4,65 (m, 1H), 3,30-3,07 (m, 1H), 2,98-2,44 (m, 5H), 1,97 (d, J = 32,7 Hz, 1H), 1,83 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 1,64 (s, 1H), 1,52 (s, 1H), 1,39 (s, 1H), 1,31 (d, J = 6,8 Hz, 4H) ppm. rotâmero principal de 13C RMN (CDCl3) δ 162,2 (dd, J = 12,8, 249,1 Hz), 159,8 (dd, J = 11,8, 251,0 Hz), 156,9, 156,0, 142,6, 133,1, 131,3 (m), 128,9, 125,6, 124,9, 111,5 (dd, J = 3,9, 21,2 Hz) 104,4 (dd, J = 25,2, 29,4 Hz), 72,1, 71,6, 55,7, 47,4, 46,5, 35,7, 35,3, 25,5, 24,6, 24,4, 19,5, 18,1 ppm. Pureza: LCMS > 99,3% (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 0,90 min; (M+1) 399,0
Exemplo 72 1-azabiciclo[2.2.2]oct-3-il-[1-(4'-metoxibifenil-4- il)ciclopropil]carbamato
[000545] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-1-(4- bromofenil)ciclopropilcarbamato (0,485 g, 1,33 mmol), ácido 4- metoxifenil borônico (0,404 g, 2,66 mmol) e Pd(OAc)2 (0,016 g, 0,071 mmol) produziram o composto do título como um sólido cinzento (0,337 mg, 65%). 1H RMN (CDCl3) δ 7,48 (dd, J = 8,6, 5,5 Hz, 4H), 7,29 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 6,96 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 5,58 (d, J = 48,7 Hz, 1H), 4,83-4,63 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,20 (dd, J = 24,0, 15,5 Hz, 1H), 2,97-2,42 (m, 5H), 1,97 (d, J = 30,9 Hz, 1H), 1,81 (s, 1H), 1,75-1,33 (m, 3H), 1,28 (d, J = 6,8 Hz, 4H) ppm. rotâmero principal de 13C RMN (CDCl3) δ 159,1, 156,0, 141,4, 139,0, 133,4, 128,0, 126,7, 125,9, 114,2, 71,5, 55,7, 55,3, 47,4, 46,5, 35,3, 25,5, 24,6, 19,6, 17,8 ppm. Pureza: LCMS >97,1% (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 0,88 min; (M+1) 393,4.
Preparação T Exemplo 73 quinuclidin-3-il-2-(5-(4-fluorofenil)tiofen-3-il)propan-2-ilcarbamato
[000546] Em uma solução agitada e resfriada (0 °C) de etil5- bromotiofeno-3-carboxilato (13,30 g, 56,57 mmol) em THF (100 mL) foi adicionado uma solução de brometo de metilmagnésio em dietil éter [3,0 M] (55,0 mL, 165 mmol), gota a gota durante 20 minutos. Depois de 2 horas, a solução de reação foi concentrada. O resíduo foi apreendido em NH4Cl aquoso (200 mL) e extraído com acetato de etila (2 x 100 mL). Os extratos combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados. O óleo ambarino resultante foi purificado por cromatografia flash usando um gradiente de hexano/acetato de etila para proporcionar 2-(5- bromotiofen-3-il)propan-2-ol como um óleo ambarino pálido (8,05 g, 64%).
[000547] Em uma solução agitada de 2-(5-bromotiofen-3-il)propan-2- ol (8,03 g, 36,3 mmol) em cloreto de metileno (80 mL) foi adicionado azida de sódio (7,08 g, 109 mmol) seguido por ácido trifluoroacético (8,0 mL; gota a gota durante 5-6 minutos). A suspensão de espessamento foi agitada durante 1,5 hora antes de diluir com água (350 mL) e extrair com acetato de etila (1 x 200 mL). A camada orgânica foi lavada com NaHCO3 aquoso (1 x 250 mL), secada (Na2SO4) e concentrada para proporcionar o produto de azida bruto. Em uma solução agitada deste material em THF (160 mL) foi adicionado água (11 mL) seguido por trifenilfosfina (23,8 g, 90,7 mmol). A reação foi agitada durante 2 dias antes de concentrar. O resíduo resultante foi dissolvido em acetato de etila (250 mL) e extraído com HCl a 1 N aquoso (4 x 75 mL). Os extratos combinados foram basificados com NH4OH concentrado e extraídos com acetato de etila (2 x 100 mL). Estes extratos foram, por sua vez, secados (Na2SO4) e concentrados. O óleo ambarino resultante foi purificado por cromatografia flash usando um gradiente de cloreto de metileno/metanol/amônia para proporcionar uma mistura de 2-(5- bromotiofen-3-il)propan-2-amina e óxido de trifenilfosfina (relação ~70/30) como um óleo ambarino viscoso (1,32 g, 17%).
[000548] Em uma solução agitada de 3-quinuclidinol (3,00 g, 23,6 mmol) em THF (100 mL) foi adicionado cloroformato de 4-nitrofenila (5,94 g, 29,5). Depois de agitar durante 4 horas, o precipitado foi filtrado, enxaguado com THF e secado a ar na frita sob vácuo local. A massa filtrante foi dissolvida em acetato de etila (150 mL) e lavada com NaHCO3 aquoso (1 x 150 mL) e água (2 x 150 mL). A camada orgânica foi secada (Na2SO4) e concentrada para proporcionar o produto de 4- nitrofenil quinuclidin-3-il-carbonato bruto, que foi usado na próxima etapa sem purificação.
[000549] Em uma solução agitada de 2-(5-bromotiofen-3-il)propan-2- amina (0,366 g, 1,66 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado 4-nitrofenil quinuclidin-3-il-carbonato (0,571 g, 1,95 mmol) e alguns grânulos de 4- (dimetilamino)piridina. A mistura foi refluxada durante a noite, concentrada e dividida entre acetato de etila (50 mL) e NaHCO3 aquoso (50 mL). A camada orgânica foi lavada novamente com NaHCO3 aquoso (1 x 50 mL), secada (Na2SO4) e concentrada. A goma amarelo suja resultante foi purificada por cromatografia flash usando um gradiente de clorofórmio/metanol/amônia para proporcionar quinuclidin-3-il-(1-(5- bromotiofen-3-il)ciclopropil)carbamato como um sólido esbranquiçado (0,305 g, 49%).
[000550] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-(1-(5- bromotiofen-3-il)ciclopropil)carbamato (0,227 g, 0,742 mmol), ácido 4- fluorofenil borônico (0,208 g, 1,49 mmol), triciclo-hexilfosfina (0,021 g, 0,075 mmol), fosfato de potássio (0,866, 4,08 mmol) e acetato de paládio (8,0 mg, 36 □mol) produziram o composto do título como um sólido cinza (0,142 g, 49%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,60-7,45 (m, 2H), 7,24-7,19 (m, 1H), 7,10-6,97 (m, 3H), 5,23 (br s, 1H), 4,72-4,61 (m, 1H), 3,30-3,04 (m, 1H), 3,03-2,25 (m, 5H), 2,09-1,02 (m, 11H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CDCl3) δ 162,3 (d, J = 247,1 Hz), 154,5, 149,8, 143,6, 130,7, 127,4 (d, J = 8,1 Hz), 121,8, 118,9, 115,8 (d, J = 21,6 Hz), 70,8, 55,5, 53,4, 47,3, 46,4, 29,0, 25,4, 24,4, 19,4 ppm. Pureza: 95,8% de UPLCMS (210 nm & 254 nm); tempo de retenção 0,90 min; (M+1) 389.
Preparação U Exemplo 74 (S)-quinuclidin-3-il-2-(3-(4-fluorofenil)isotiazol-5-il)propan-2- ilcarbamato
[000551] Em solução agitada de 2-(3-(4-fluorofenil)isotiazol-5- il)propan-2-amina (1,21 g, 5,12 mmol) em tolueno, uma solução de fosgênio foi adicionada em tolueno [~1,9 M] (10,8 mL, 20,5 mmol). A reação foi aquecida em refluxo durante duas horas, e em seguida concentrada. O resíduo foi coevaporado com tolueno (2 x 15 mL) para proporcionar o intermediário de isocianato como óleo dourado bruto. Este material foi apreendido em tolueno (10 mL) e tratado com (S)-3- quinuclidinol (0,749 g, 5,89 mmol). A reação foi aquecida durante a noite em refluxo e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando um gradiente de clorofórmio/metanol/amônia para proporcionar o composto do título como um sólido branco (0,971 g, 49%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,09-8,00 (m, 2H), 7,87 (br s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,35-7,25 (m, 2H), 4,54-4,45 (m, 1H), 3,14-2,92 (m, 1H), 2,87-2,17 (m, 5H), 1,98-0,98 (m, 11H) ppm. 13C RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 180,1, 165,6, 162,6 (d, J = 246,4 Hz), 154,7, 131,2 (d, J = 3,0 Hz), 128,7 (d, J = 8,4 Hz), 118,2, 115,7 (d, J = 21,8 Hz), 70,6, 55,3, 52,8, 46,9, 45,9, 29,9, 25,2, 24,2, 19,2 ppm. Pureza: 100% de UPLCMS (210 nm & 254 nm); tempo de retenção 0,82 min; (M+1) 390.
Preparação V Exemplo 75 (S)-quinuclidin-3-il-2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2- ilcarbamato
[000552] Em uma solução agitada de 4-fluorotiobenzamida (8,94 g, 57,6 mmol) em etanol (70 mL) foi adicionado etil 4-cloroacetoacetato (7,8 mL, 58 mmol). A reação foi aquecida em refluxo durante 4 horas, tratada com uma alíquota de adição de etil 4-cloroacetoacetato (1,0 mL, 7,4 mmol) e refluxada durante um adicional de 3,5 horas. A reação foi em seguida concentrada, e o resíduo foi dividido entre acetato de etila (200 mL) e NaHCO3 aquoso (200 mL). A camada orgânica foi combinada outra vez com um extrato da camada aquosa (acetato de etila, 1 x 75 mL), secada (Na2SO4) e concentrada. O óleo ambarino resultante foi purificado por cromatografia flash usando um gradiente de hexano/acetato de etila para proporcionar etil 2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4- il)acetato como um sólido quase incolor de baixa fusão (13,58 g, 89%).
[000553] Em uma solução agitada de etil 2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4- il)acetato (6,28 g, 23,7 mmol) em DMF (50 mL) foi adicionado hidreto de sódio [60% de dispersão em óleo mineral] (2,84 g, 71,0 mmol). A mistura espumosa foi agitada durante 15 minutos antes de resfriar em um banho de gelo e adicionando-se iodometano (4,4 mL, 71 mmol). A reação foi agitada durante a noite, permitindo o banho de resfriamento para lentamente aquecer em temperatura ambiente. A mistura foi em seguida concentrada, e o resíduo dividido entre acetato de etila (80 mL) e água (200 mL). A camada orgânica foi lavada com uma segunda porção de água (1 x 200 mL), secada (Na2SO4) e concentrada. O óleo ambarino resultante foi purificado por cromatografia flash usando um gradiente de hexano/acetato de etila para proporcionar etil 2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4- il)-2-metilpropanoato como um óleo incolor (4,57 g, 66%).
[000554] Em uma solução agitada de etil 2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)- 2-metilpropanoato (4,56 g, 15,5 mmol) em 1:1:1 THF/etanol/água (45 mL) foi adicionado monoidrato de hidróxido de lítio (2,93 g, 69,8 mmol). A reação foi agitada durante a noite, concentrada e redissolvida em água (175 mL). A solução foi lavada com éter (1 x 100 mL), acidificada pela adição de HCl a 1,0 N (80 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 70 mL). Os extratos combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados para proporcionar ácido 2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)-2- metilpropanoico como um sólido branco (4,04 g, 98%). Este material foi usado na próxima etapa sem purificação.
[000555] Em uma solução agitada e resfriada (0°C) de ácido 2-(2-(4- fluorofenil)tiazol-4-il)-2-metilpropanoico (4,02 g, 15,2 mmol) em THF (100 mL) foi adicionado trietilamina (4,2 mL, 30 mmol) seguido por cloroformato de isobutila (3,0 mL, 23 mmol). A reação foi agitada fria durante outra 1 hora antes de adicionar uma solução de azida de sódio (1,98 g, 30,5 mmol) em água (20 mL). A reação foi agitada durante a noite, permitindo o banho de resfriamento para lentamente aquecer em temperatura ambiente. A mistura foi em seguida diluída com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 60 mL). Os extratos combinados foram lavados com NaHCO3 aquoso (1 x 150 mL) e salmoura (1 x 100 mL), secados (Na2SO4) e concentrados. Depois da coevaporação com tolueno (2 x 50 mL), o sólido branco resultante foi apreendido em tolueno (100 mL) e refluxado durante 4 horas. (S)-3-quinuclidinol (3,87 g, 30,4 mmol) foi em seguida adicionado, e o refluxo foi continuado durante a noite. A reação foi concentrada, e o resíduo dividido entre acetato de etila (100 mL) e NaHCO3 aquoso (150 mL). A camada orgânica foi lavada com água (1 x 150 mL), secada (Na2SO4) e concentrada. O sólido esbranquiçado resultante foi purificado por cromatografia flash usando um gradiente de clorofórmio/metanol/- amônia para proporcionar o composto do título como um sólido branco (4,34 g, 73%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,96-7,88 (m, 2H), 7,16-7,04 (m, 3H), 5,55 (br s, 1H), 4,69-4,62 (m, 1H), 3,24-3,11 (m, 1H), 3,00-2,50 (m, 5H), 2,01-1,26 (m, 11H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CDCl3) δ 166,4, 165,1, 163,8 (d, J = 250,3 Hz), 162,9, 155,0, 130,1 (d, J = 3,3 Hz), 128,4 (d, J = 8,5 Hz), 115,9 (d, J = 22,3 Hz), 112,5, 71,2, 55,7, 54,2, 47,5, 46,5, 28,0, 25,5, 24,7, 19,6 ppm. Pureza: 100% de UPLCMS (210 nm & 254 nm); tempo de retenção 0,83 min; (M+1) 390.
Preparação W Exemplo 76 (S)-quinuclidin-3-il-2-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)propan-2- ilcarbamato
[000556] Em uma solução agitada de etil 3-amino-3-tioxopropanoato (20,00g, 135,9 mmol) em etanol (120 mL) foi adicionado 2-bromo-4'- fluoroacetofenona (29,49 g, 135,9 mmol). A mistura foi refluxada durante 1 hora, concentrada e dividida entre acetato de etila (300 mL) e NaHCO3 aquoso (400 mL). A camada orgânica foi combinada outra vez com um extrato da camada aquosa (acetato de etila, 1 x 100 mL), secada (Na2SO4) e concentrada. O sólido marrom claro resultante foi purificado por cromatografia flash usando um gradiente de hexano/acetato de etila para proporcionar etil 2-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)acetato como um sólido esbranquiçado (29,92 g, 83%).
[000557] Em uma solução agitada e resfriada (-78°C) de etil 2-(4-(4- fluorofenil)tiazol-2-il)acetato (10,00 g, 37,69 mmol) em THF (250 mL) foi adicionado uma solução de t-butóxido de potássio em THF [1,0 M] (136 mL, 136 mmol), gota a gota durante 15 minutos, seguido por 18-coroa- 6 (1,6 mL, 7,5 mmol). Depois de um adicional de 30 minutos a -78 °C, iodometano (8,5 mL) foi adicionado, gota a gota durante 5 minutos. A reação foi agitada fria durante outras 2 horas antes de verter em água (450 mL) e extrair com acetato de etila (2 x 150 mL). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (1 x 200 mL), secados (Na2SO4) e concentrados. O óleo marrom resultante foi purificado por cromatografia flash usando um gradiente de hexano/acetato de etila para proporcionar etil 2-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)-2-metilpropanoato como um óleo ambarino pálido (8,64 g, 78%).
[000558] Em uma solução agitada de etil 2-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)- 2-metilpropanoato (0,900 g, 3,07 mmol) em 1:1:1 THF/etanol/água (15 mL) foi adicionado monoidrato de hidróxido de lítio (0,451 g, 10,7 mmol). Depois de agitar durante a noite, a reação foi concentrada e redissolvida em água (80 mL). A solução foi lavada com éter (1 x 50 mL), acidificada com a adição de HCl a 1 N (15 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). Os extratos combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados para proporcionar ácido 2-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)-2- metilpropanoico como um sólido dourado pálido (0,808 g, 99%).
[000559] Em solução agitada e resfriada (0°C) de ácido 2-(4-(4- fluorofenil)tiazol-2-il)-2-metilpropanoico (0,784 g, 2,96 mmol) em THF (25 mL) foi adicionado trietilamina (0,82 mL, 5,9 mmol) seguido por cloroformato de isobutila (0,58 mL, 4,4 mmol). A reação foi agitada fria durante outra 1 hora antes de adicionar uma solução de azida de sódio (0,385 g, 5,92 mmol) em água (7 mL). A reação foi agitada durante a noite, permitindo o banho de resfriamento para lentamente aquecer em temperatura ambiente. A mistura foi em seguida diluída com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 60 mL). Os extratos combinados foram lavados com NaHCO3 aquoso (1 x 150 mL) e salmoura (1 x 100 mL), secados (Na2SO4) e concentrados. Depois de coevaporação com tolueno (2 x 30 mL), o sólido esbranquiçado resultante foi apreendido em tolueno (25 mL) e refluxado durante 4 horas. (S)-3-quinuclidinol (0,753 g, 5,92 mmol) foi em seguida adicionado, e o refluxo foi continuado durante 3 horas. A reação foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia flash usando um gradiente de clorofórmio/metanol/amônia para proporcionar o composto do título como um sólido branco (0,793 g, 69%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,90-7,81 (m, 2H), 7,32 (s, 1H), 7,14-7,05 (m, 2H), 5,76 (br s, 1H), 4,72-4,65 (m, 1H), 3,26-3,10 (m, 1H), 3,03-2,37 (m, 5H), 2,05-1,23 (m, 11H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CDCl3) δ 177,6, 162,6 (d, J = 248,4 Hz), 154,8, 153,6, 130,8 (d, J = 3,2 Hz), 128,1 (d, J = 8,1 Hz), 115,9 (d, J = 21,7 Hz), 112,2, 71,6, 55,7, 47,4, 46,5, 29,1, 25,4, 24,7, 19,6 ppm. Pureza: 100% de UPLCMS (210 nm & 254 nm); tempo de retenção 0,82 min; (M+1) 390.
Exemplo 77 quinuclidin-3-il-1-(4-(benzilóxi)fenil)ciclopropilcarbamato
[000560] Uma mistura de 4-cianofenol (5,0 g, 42 mmol), brometo de benzila (8,6 g, 50 mmol), carbonato de potássio (11,6 g, 84,0 mmol) em DMF (40 mL) foi agitada a 100 °C durante 3 h. O precipitado foi filtrado, e o filtrado foi diluído com EtOAc e lavado com água. A camada orgânica foi secada (Na2SO4) e concentrada. O produto bruto resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (eluindo com éter de petróleo/EtOAc de 20/1 a 5/1) para produzir 4-(benzilóxi)benzonitrila como um sólido branco (8,1 g, 92%).
[000561] Usando o procedimento geral G, 4-(benzilóxi)benzonitrila (6,00 g, 28,7 mmol) foi convertido para o 1-(4-(benzilóxi)fenil)ciclopropanamina correspondente como um sólido amarelo (1,8 g, 26%).
[000562] Usando o procedimento geral A, 1-(4- (benzilóxi)fenil)ciclopropanamina (600 mg, 2,51 mmol) e quinuclidin-3- ol produziram o composto do título como um óleo viscoso (170 mg, 17%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,34 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 7,30 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 7,25 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 5,50 (br s, 0,6H), 5,40 (br s, 0,4H), 4,96 (s, 2H), 4,64 (m, 1H), 3,20-3,15 (m, 1H), 2,88-2,50 (m, 5H), 1,95-1,05 (m, 9H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 156,6, 154,8, 136,0, 134,2, 127,6, 126,9, 126,4, 125,4, 113,7, 70,0, 69,0, 54,5, 46,3, 45,4, 34,2, 24,3, 23,3, 18,3, 15,8 ppm. Pureza: > 90% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,57 min; (M+1) 393.
Exemplo 78 quinuclidin-3-il-bifenil-3-ilmetilcarbamato
[000563] Em uma solução agitada e resfriada (0°C) de trifosgênio (0,80 g, 2,7 mmol) em THF (20 mL) foi adicionado, gota a gota, uma mistura de (3-bromofenil)metanamina (1,0 g, 5,4 mmol) e trietilamina (1,08 g, 10,7 mmol) em THF (30 mL) durante 2 h. Depois que a adição foi concluída, a mistura foi refluxada durante 1 h, e em seguida resfriada em temperatura ambiente. Quinuclidin-3-ol (1,40 g, 10,7 mmol) foi adicionado, e a mistura foi refluxada durante 18 h. O solvente foi removido em vácuo, e o resíduo foi dissolvido em EtOAc, lavado com água, secado em Na2SO4 e concentrado. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (eluindo com EtOAc/metanol = 10/1) para produzir quinuclidin-3-il-3-bromobenzilcarbamato como um líquido incolor (0,68 g, 37%).
[000564] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-3- bromobenzilcarbamato (237 mg, 0,700 mmol), ácido fenilborônico (171 mg, 1,4 mmol) e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um semissólido viscoso (110 mg, 47%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,57 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,50 (m, 2H), 7,62-7,38 (m, 3H), 7,35 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,32-5,17 (m, 1H), 7,78 (m, 1H), 4,42 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,26 (m, 1H), 2,95-2,65 (m, 5H), 2,05 (m, 1H), 1,84 (m, 1H), 1,70 (m, 1H), 1,58 (m, 1H), 1,42 (m, 1H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 155,2, 140,7, 139,8, 138,0, 128,1, 127,8, 126,4, 126,1, 125,5, 125,4, 125,3, 70,1, 54,4, 46,2, 45,3, 44,1, 24,3, 23,1, 18,2 ppm. Pureza: > 98% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,44 min; (M+1) 337.
Exemplo 79 quinuclidin-3-il-3-(pirimidin-5-il)benzilcarbamato
[000565] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-3- bromobenzilcarbamato (203 mg, 0,600 mmol), ácido pirimidin-5- ilborônico (149 mg, 1,2 mmol) e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um semissólido viscoso (110 mg, 54%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 9,20 (s, 1H), 8,94 (s, 2H), 7,51 (m, 3H), 7,40 (m, 1H), 5,62 (m, 1H), 4,81 (m, 1H), 4,50-4,40 (m, 2H), 3,30 (m, 1H), 2,97-2,65 (m, 5H), 2,12 (m, 1H), 1,92-1,82 (m, 1H), 1,79-1,69 (m, 1H), 1,65-1,56 (m, 1H), 1,50-1,42 (m, 1H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 157,6, 156,2, 154,9, 140,1, 134,7, 134,1, 129,8, 128,2, 126,2, 70,9, 55,2, 47,2, 46,2, 44,8, 25,2, 23,8, 19,0 ppm. Pureza: > 95% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,22 min; (M+1) 339.
Exemplo 80 quinuclidin-3-il-3-(benzilóxi)benzilcarbamato
[000566] Uma mistura de ácido 2-(3-hidroxifenil)acético (0,6 g, 3,95 mmol), brometo de benzila (0,710 g, 4,14 mmol), hidróxido de potássio (0,550 g, 9,87 mmol), KI (13 mg, 0,079 mmol) em THF (20 mL) foi refluxada durante 18 h. O solvente foi removido, e o resíduo foi dissolvido em 50 mL de água e extraído com éter. A camada aquosa foi acidificada com HCl a 1N aquoso, e o precipitado branco que formou-se foi filtrado para proporcionar ácido 2-(3-(benzilóxi)fenil)acético como um sólido cinza (0,87 g, 91%).
[000567] Usando o procedimento geral H, ácido 2-(3- (benzilóxi)fenil)acético (242 mg, 1,00 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram o composto do título como um semissólido viscoso (200 mg, 55%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,42 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,38 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,32 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,92 (s, 1H), 6,88 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 5,30 (m, 1H), 5,05 (s, 2H), 4,75 (m, 1H), 4,32 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,23 (m, 1H), 2,93-2,60 (m, 5H), 2,08-1,96 (m, 1H), 1,88-1,75 (m, 1H), 1,72-1,62 (m, 1H), 1,60-1,50 (m, 1H), 1,42-1,34 (m, 1H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 159,1, 156,3, 140,2, 136,8, 129,7, 128,6, 128,0, 127,5, 120,0, 114,1, 113,6, 71,3, 70,0, 55,5, 47,3, 46,4, 45,0, 25,4, 24,3, 19,3 ppm. Pureza: > 95% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,51 min; (M+1) 367
Exemplo 81 quinuclidin-3-il-4-fenoxibenzilcarbamato
[000568] Usando o procedimento geral H, ácido 2-(3- fenoxifenil)acético (228 mg, 1,00 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram o composto do título como um semissólido viscoso (70 mg, 20%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,29-7,18 (m, 3H), 7,03 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,966,90 (m, 3H), 6,86 (s, 1H), 6,82 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,40-5,15 (m, 1H), 4,70 (m, 1H), 4,25 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,18 (m, 1H), 2,90-2,60 (m, 5H), 2,03-1,92 (m, 1H), 1,82-1,74 (m, 1H), 1,68-1,60 (m, 1H), 1,57-1,45 (m, 1H), 1,40-1,32 (m, 1H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 156,6, 155,9, 155,1, 139,6, 129,0, 128,8, 122,4, 121,1, 118,0, 116,7, 69,7, 54,1, 46,1, 45,2, 43,7, 24,2, 22,7, 18,0 ppm. Pureza: 100% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,50 min; (M+1) 353.
Exemplo 82 quinuclidin-3-il-3-isopropoxibenzilcarbamato
[000569] Uma mistura que contém ácido 2-(3-hidroxifenil)acético (0,800 g, 5,26 mmol), 2-bromopropano (0,971 g, 7,89 mmol), hidróxido de potássio (0,740 g, 13,2 mmol), KI (18 mg, 0,11 mmol) em 20 mL de EtOH foi refluxada durante 18 h. O solvente foi removido, e o resíduo foi dissolvido em 50 mL de água e extraída com éter. A camada aquosa foi acidificada com HCl a 1N aquoso e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas foram secadas (Na2SO4) e concentradas para proporcionar um resíduo, que foi purificado por cromatografia em sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc 4:1) para adquirir ácido 2-(3-(benzilóxi)fenil)acético como um sólido branco (0,45 g, 44%).
[000570] Usando o procedimento geral H, ácido 2-(3- isopropoxifenil)acético (291 mg, 1,50 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram o composto do título como um semissólido viscoso (120 mg, 25%). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,23 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,86-6,77 (m, 3H), 5,16-5,00 (m, 1H), 4,78 (m, 1H), 4,55 (m, 1H), 4,32 (d, J = 5,0 Hz, 2H), 3,26 (m, 1H), 2,95-2,70 (m, 5H), 2,10-2,05 (m, 1H), 1,90-1,80 (m, 1H), 1,75-1,65 (m, 1H), 1,63-1,53 (m, 1H), 1,47-1,37 (m, 1H), 1,33 (d, J = 5,5 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 158,1, 156,2, 140,1, 129,7, 119,6, 115,2, 114,6, 71,0, 69,8, 55,3, 47,2, 46,3, 45,0, 25,3, 24,1, 22,0, 19,2 ppm. Pureza: > 90% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,42 min; (M+1) 319.
Exemplo 83 quinuclidin-3-il-3-isobutoxibenzilcarbamato
[000571] Uma mistura que contém ácido 2-(3-hidroxifenil)acético (1,0 g, 6,6 mmol), 1-bromo-2-metilpropano (1,08 g, 7,91 mmol), hidróxido de potássio (0,920 g, 16,4 mmol), KI (22 mg, 0,13 mmol) em EtOH (20 mL) foi refluxada durante 18 h. O solvente foi removido, e o resíduo foi dissolvido em 50 mL de água e extraída com éter. A camada aquosa foi acidificada com HCl a 1N aquoso e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas foram secadas (Na2SO4) e concentradas para proporcionar um resíduo, que foi purificado por cromatografia em sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc 4:1) para adquirir ácido 2-(3-(benzilóxi)fenil)acético como um sólido branco (0,42 g, 31%).
[000572] Usando o procedimento geral H, ácido 2-(3- isobutoxifenil)acético (208 mg, 1,00 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram o composto do título como um semissólido viscoso (130 mg, 39%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,23 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,86-6,76 (m, 3H), 5,35-5,10 (m, 1H), 4,77 (m, 1H), 4,31 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 3,69 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 3,26 (m, 1H), 2,95-2,70 (m, 5H), 2,10-2,00 (m, 2H), 1,88-1,80 (m, 1H), 1,75-1,63 (m, 1H), 1,62-1,52 (m, 1H), 1,45-1,36 (m, 1H), 1,01 (d, J = 6,5 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 159,6, 156,1, 139,9, 129,7, 119,6, 113,9, 113,4, 74,4, 70,9, 55,3, 47,2, 46,3, 45,1, 28,3, 25,3, 23,9, 19,3, 19,1 ppm. Pureza: > 95% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,50 min; (M+1) 333.
Exemplo 84 quinuclidin-3-il-3-(ciclopropilmetóxi)benzilcarbamato
[000573] Uma mistura que contém ácido 2-(3-hidroxifenil)acético (1,0 g, 6,6 mmol), (bromometil)ciclopropano (0,97 g, 7,2 mmol), hidróxido de potássio (0,920 g, 16,4 mmol), KI (22 mg, 0,13 mmol) em EtOH (20 mL) foi refluxada durante 18 h. O solvente foi removido em vácuo, e o resíduo foi dissolvido em 50 mL de água e extraído com éter. A camada aquosa foi acidificada com HCl a 1N aquoso e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas foram secadas (Na2SO4) e concentradas para proporcionar um resíduo, que foi purificado por cromatografia em sílica- gel (éter de petróleo/EtOAc 4:1) para adquirir ácido 2-(3- (ciclopropilmetóxi)fenil)acético como um sólido branco (0,80 g, 59%).
[000574] Usando o procedimento geral H, ácido 2-(3- (ciclopropilmetóxi)fenil)acético (300 mg, 1,50 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram o composto do título como um óleo viscoso (90 mg, 19%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,24 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,88-6,78 (m, 3H), 5,13-4,95 (m, 1H), 4,74 (m, 1H), 4,33 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,79 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 3,23 (m, 1H), 2,93-2,63 (m, 5H), 2,04-1,98 (m, 1H), 1,85-1,76 (m, 1H), 1,72-1,60 (m, 1H), 1,58-1,50 (m, 1H), 1,41-1,22 (m, 2H), 0,680,62 (m, 2H), 0,37-0,32 (m, 2H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 158,2, 155,5, 139,3, 128,6, 118,6, 112,8, 112,3, 71,7, 70,4, 54,5, 46,2, 45,3, 43,9, 24,4, 23,5, 18,5, 9,3, 2,2 ppm. Pureza: > 95% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,44 min; (M+1) 331.
Preparação X Exemplo 85 N-(2-(bifenil-4-il)propan-2-il)-2-(quinuclidin-3-il)acetamida
[000575] Em uma solução de cloridrato de ácido 2-(quinuclidin-3- il)acético (0,97 g, 4,7 mmol) em DMF (30 mL) foram adicionados HATU (1,79 g, 4,72 mmol), 2-(4-bromofenil)propan-2-amina (1,0 g, 4,7 mmol) e trietilamina (3,9 mL, 28 mmol). A mistura resultante foi agitada a 60 °C durante 16 h. A mistura foi concentrada em vácuo, diluída com EtOAc e lavada com salmoura. A camada orgânica foi secada em Na2SO4 e evaporada para proporcionar o produto bruto, que foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (EtOAc/metanol 50/1 a 3/1) para obter N-(2-(4-bromofenil)propan-2-il)-2-(quinuclidin-3-il)acetamida como um sólido amarelo (1,3 g, 76%).
[000576] Usando o procedimento geral E, N-(2-(4-bromofenil)propan- 2-il)-2-(quinuclidin-3-il)acetamida (200 mg, 0,550 mmol), ácido fenilborônico (134 mg, 1,00 mmol) e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um óleo marrom viscoso (58 mg, 32%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,58-7,50 (m, 4H), 7,44-7,37 (m, 4H), 7,31 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 6,50 (s, 1H), 3,16 (m, 1H), 3,02 (m, 1H), 2,92-2,78 (m, 3H), 2,60 (m, 1H), 2,40-2,20 (m, 3H), 1,47-1,90 (m, 11H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 170,5, 146,1, 140,7, 139,2, 128,8, 127,2, 127,0 125,2, 55,6, 53,1, 46,8, 46,2, 40,3, 31,7, 29,3, 29,2, 26,0, 24,4, 19,7 ppm. Pureza: 100% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,55 min; (M+1) 363.
Exemplo 86 quinuclidin-3-il-bifenil-3-ilcarbamato
[000577] Em uma solução de quinuclidin-3-ol (635 mg, 5,00 mmol) em THF (15 mL) foi adicionado NaH [60% de dispersão em óleo mineral] (260 mg, 6,50 mmol) em temperatura ambiente. A mistura foi agitada durante 15 min e 3-bromofenil isocianato (990 mg, 5,00 mmol) foi adicionado sob agitação. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 18 h, extinguida com salmoura e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas em Na2SO4 e concentradas. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (eluindo com EtOAc/metanol 3:1) para produzir quinuclidin-3-il-3-bromofenilcarbamato como um sólido branco (0,70 g, 43%).
[000578] Usando o procedimento geral E, o intermediário de carbamato anterior (130 mg, 0,402 mmol), ácido fenilborônico (72 mg, 0,6 mmol) e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (75 mg, 58%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,67 (br s, 1H), 7,59 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,43 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,41-7,28 (m, 4H), 6,77 (br s, 1H), 4,85 (m, 1H), 3,30 (m, 1H), 2,98-2,75 (m, 5H), 2,12 (m, 1H),1,93-1,68 (m, 2H), 1,64-1,55 (m, 1H), 1,47-1,40 (m, 1H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 153,3, 142,3, 140,7, 138,3, 129,5, 128,8, 127,5, 127,2, 122,3, 117,4, 72,1, 55,4, 47,4, 46,5, 30,9, 25,4, 24,5, 19,5 ppm. Pureza: 100% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,53 min; (M+1) 323.
Exemplo 87 quinuclidin-3-il-2'-metoxibifenil-3-ilcarbamato
[000579] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-3- bromofenilcarbamato, ácido 2-metóxi-fenilborônico e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (75 mg, 58%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,49 (br s, 1H), 7,41 (br s, 1H), 7,37-7,28 (m, 3H), 7,23 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,04-6,94 (m, 3H), 4,83 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,29 (m, 1H), 2,97-2,70 (m, 5H), 2,10 (m, 1H), 1,91-1,82 (m, 1H), 1,74-1,65 (m, 1H), 1,62-1,53 (m, 1H), 1,46-1,37 (m, 1H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 156,4, 153,4, 139,4, 137,6, 130,9, 130,2, 128,8, 128,6, 124,8, 120,8, 119,9, 117,3, 111,2, 72,0, 55,6, 55,4, 47,4, 46,5, 25,4, 24,5, 19,5 ppm. Pureza: > 95% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,52 min; (M+1) 353.
Exemplo 88 quinuclidin-3-il-2'-etilbifenil-3-ilcarbamato
[000580] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-3- bromofenilcarbamato, ácido 2-etilfenilborônico e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (110 mg, 78%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,42-7,28 (m, 5H), 7,25-7,16 (m, 2H), 7,03-7,00 (m, 1H), 6,88 (br s, 1H), 4,83 (m, 1H), 3,27 (m, 1H), 2,98-2,70 (m, 5H), 2,61 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,08 (m, 1H), 1,92-1,80 (m, 1H), 1,75-1,65 (m, 1H), 1,63-1,55 (m, 1H), 1,46-1,37 (m, 1H), 1,10 (t, J = 7,6 Hz, 3H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 152,1, 141,7, 140,4, 139,9, 136,4, 128,6, 127,5, 127,4, 126,4, 124,3, 123,2, 118,4, 115,9, 71,0, 54,3, 46,2, 45,3, 25,0, 24,2, 23,4, 18,3, 14,5 ppm. Pureza: 100% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,61 min; (M+1) 351.
Exemplo 89 quinuclidin-3-il-3'-metoxibifenil-3-ilcarbamato
[000581] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-3- bromofenilcarbamato, ácido 3-metoxifenilborônico e [PdCl2(pddf)- ]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (100 mg, 71%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,63 (br s, 1H), 7,40-7,27 (m, 4H), 7,17 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,11 (m, 1H), 7,07 (br s, 1H), 6,89 (dd, J = 8,0, 2,0 Hz, 1H), 4,85 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,30 (m, 1H), 2,99-2,70 (m, 5H), 2,12 (m, 1H), 1,92-1,84 (m, 1H), 1,75-1,68 (m, 1H), 1,62-1,55 (m, 1H), 1,48-1,40 (m, 1H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 159,9, 153,4, 142,3, 142,1, 138,4, 129,8, 129,4, 122,3, 119,7, 117,7, 112,9, 112,8, 72,0, 55,4, 55,3, 47,4, 46,5, 25,4, 24,5, 19,5 ppm. Pureza: > 97% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,52 min; (M+1) 353
Exemplo 90 quinuclidin-3-il-3'-etilbifenil-3-ilcarbamato
[000582] Em uma solução de 1-bromo-3-etilbenzeno (370 mg, 2,00 mmol) em 5 mL de 1,4-dioxano, foram adicionados bis(pinacolato)diboro (609 mg, 2,40 mmol), CH3COOK (589 mg, 6,02 mmol) e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 (75 mg, 0,09 mmol). A mistura foi agitada a 80°C durante 5 h. A mistura foi resfriada, diluída com água e extraída com EtOAc. Os extratos combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados para proporcionar o boronato bruto (410 mg, >100%), que foi usado sem purificação na próxima etapa.
[000583] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-3- bromofenilcarbamato, ácido 3-etilfenilborônico e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (78 mg, 56%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,64 (br s, 1H), 7,43-7,27 (m, 6H), 7,24 (br s, 1H), 7,18 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,85 (m, 1H), 3,30 (m, 1H), 2,99-2,73 (m, 5H), 2,70 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 2,12 (m, 1H), 1,92-1,84 (m, 1H), 1,751,67 (m, 1H), 1,62-1,55 (m, 1H), 1,48-1,38 (m, 1H), 1,27 (t, J = 7,5 Hz, 3H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 153,5, 144,8, 142,4, 140,8, 138,4, 129,4, 128,8, 127,1, 126,8, 124,6, 122,3, 117,4, 72,1, 55,4, 47,4, 46,5, 29,0, 25,4, 24,5, 19,5, 15,7 ppm. Pureza: > 98% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,66 min; (M+1) 351.
Exemplo 91 quinuclidin-3-il-bifenil-2-ilcarbamato
[000584] Em uma solução de quinuclidin-3-ol (382 mg, 3,00 mmol) em THF (15 mL) foi adicionado NaH [60% de dispersão em óleo mineral] (156 mg, 3,90 mmol) em temperatura ambiente. A mistura foi agitada durante 15 min e 2-bromofenil isocianato (594 mg, 3,00 mmol) foi adicionado sob agitação. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 18 h, extinguida com salmoura e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas em Na2SO4 e concentradas. O produto bruto resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (EtOAc/metanol 3:1) para produzir o quinuclidin-3-il-2-bromofenilcarbamato de produto como óleo viscoso (0,80 g, 82%).
[000585] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-2- bromofenilcarbamato (130 mg, 0,400 mmol), ácido fenilborônico (96 mg, 0,8 mmol) e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (112 mg, 87%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,07 (br s, 1H), 7,55-7,33 (m, 6H), 7,25-7,21 (dd, J = 7,6 & 1,6 Hz, 1H), 7,43 (td, J = 8,0, 1,2 Hz, 1H), 6,65 (br s, 1H), 4,78 (m, 1H), 3,24 (m, 1H), 2,902,68 (m, 5H), 2,04 (m, 1H),1,80-1,62 (m, 2H), 1,61-1,50 (m, 1H), 1,411,30 (m, 1H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 151,2, 135,9, 132,5, 129,5, 128,0, 127,0, 126,9, 126,2, 125,7, 121,4, 117,9, 69,9, 53,1, 45,1, 44,3, 23,1, 22,3, 17,2 ppm. Pureza: 100% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,47 min; (M+1) 323.
Exemplo 92 quinuclidin-3-il-2'-metoxibifenil-2-ilcarbamato
[000586] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-2- bromofenilcarbamato, ácido 2-metoxifenilborônico e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (102 mg, 72%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,95 (br s, 1H), 7,42 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,37 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,15 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,09 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,72 (br s, 1H), 4,76 (m, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,23 (m, 1H), 2,90-2,64 (m, 5H), 1,98-2,08 (m, 1H), 1,81-1,63 (m, 2H), 1,60-1,50 (m, 1H), 1,42-1,30 (m, 1H) ppm,13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 156,2, 153,8, 135,6, 132,1, 130,9, 129,7, 128,3, 127,1, 123,8, 121,5, 111,3, 71,8, 55,7, 55,5, 47,3, 46,5, 25,3, 24,5, 19,4 ppm. Pureza: 100% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,48 min; (M+1) 353.
Exemplo 93 quinuclidin-3-il-2'-etilbifenil-2-ilcarbamato
[000587] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-2- bromofenilcarbamato, ácido 2-etilfenilborônico e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (71 mg, 51%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,11 (br s, 1H), 7,43-7,34 (m, 3H), 7,337,28 (m, 1H), 7,18-7,08 (m, 3H), 6,24 (br s, 1H), 4,75 (m, 1H), 3,23 (m, 1H), 2,85-2,65 (m, 5H), 2,40 (m, 2H), 2,02 (m, 1H), 1,73-1,62 (m, 2H), 1,61-1,50 (m, 1H), 1,40-1,30 (m, 1H), 1,05 (m, 3H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 153,3, 142,9, 136,4, 135,3, 130,6, 130,3, 130,1, 129,0, 128,7, 128,4, 126,4, 123,0, 119,1, 72,1, 55,2, 47,3, 46,4, 26,0, 25,3, 24,5, 19,3, 15,2 ppm. Pureza: > 98% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,55 min; (M+1) 351.
Exemplo 94 quinuclidin-3-il-3'-metoxibifenil-2-ilcarbamato
[000588] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-2- bromofenilcarbamato, ácido 3-metoxifenilborônico e [PdCl2(pddf- )]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (120 mg, 85%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,08 (br s, 1H), 7,40 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,36 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,23 (dd, J = 7,5, 1,5 Hz, 1H), 7,13 (td, J = 7,5, 1,5 Hz, 1H), 6,96 (dd, J = 8,0, 2,0 Hz, 2H), 6,91 (t, J = 1,5 Hz, 1H), 6,73 (br s, 1H), 4,79 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,24 (m, 1H), 2,90-2,70 (m, 5H), 2,05 (m, 1H), 1,80-1,70 (m, 2H), 1,62-1,52 (m, 1H), 1,41-1,32 (m, 1H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 160,1, 153,4, 139,5, 134,7, 131,5, 130,1, 130,1, 128,5, 123,5, 121,4, 119,9, 114,7, 113,6, 72,1, 55,3, 55,3, 47,3, 46,5, 25,3, 24,5, 19,4 ppm. Pureza: > 98% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,48 min; (M+1) 353
Exemplo 95 quinuclidin-3-il-3'-etilbifenil-2-ilcarbamato
[000589] Usando o procedimento geral E, quinuclidin-3-il-2- bromofenilcarbamato, ácido 3-etilfenilborônico e [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 produziram o composto do título como um sólido branco (120 mg, 86%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,09 (br s, 1H), 7,41 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,36 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,26-7,18 (m, 4H), 7,14 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,71 (br s, 1H), 4,79 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 2,90-2,65 (m, 7H), 2,05 (m, 1H), 1,80-1,64 (m, 2H), 1,62-1,52 (m, 1H), 1,40-1,32 (m, 1H), 1,28 (t, J = 7,5 Hz, 3H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 153,4, 145,2, 138,1, 134,7, 131,8, 130,2, 129,1, 128,8, 128,4, 127,5, 126,6, 123,5, 120,1, 72,0, 55,3, 47,3, 46,4, 28,9, 25,3, 24,5, 19,4, 15,7 ppm. Pureza: > 95% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,55 min; (M+1) 351.
Preparação Y Exemplo 96 quinuclidin-3-il-2-isopropoxifenilcarbamato
[000590] Em uma mistura de 3-aminofenol (1,50 g, 13,8 mmol), isopropanol (3,3 g, 55 mmol) e trifenilfosfina (14,4 g, 54,9 mmol) em THF (15 mL), foi adicionado dietilazodicarboxilato gota a gota (9,60 g, 55,0 mmol) durante um período de 30 min. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 3 h e concentrada. O resíduo foi diluído com água, acidificado com HCl a 2N aquoso e extraído com éter. A fase aquosa foi basificada com NaOH a 2N aquoso e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secadas (Na2SO4) e concentradas. O produto bruto resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc 10:1 a 5:1) para proporcionar 3-isopropoxibenzenamina como óleo amarelo (1,3 g, 64%).
[000591] Usando o procedimento geral A, 3-isopropoxibenzenamina (300 mg, 2,00 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram o composto do título como um óleo viscoso (130 mg, 22%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,20 (br s, 1H), 7,09 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 7,05 (br s, 1H), 6,77 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,51 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,75 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 3,26-3,18 (m, 1H), 2,92-2,65 (m, 5H), 2,04 (m, 1H), 1,80 (m, 1H), 1,63 (m, 1H), 1,52 (m, 1H), 1,35 (m, 1H), 1,28 (d, J = 5,5 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ 157,5, 152,2, 138,2, 128,7, 110,1, 109,6, 105,1, 70,7, 68,9, 54,3, 46,3, 45,4, 28,7, 24,3, 23,3, 21,0, 18,3 ppm. Pureza: > 90% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,43 min; (M+1) 305.
Exemplo 97 quinuclidin-3-il-2-isobutoxifenilcarbamato
[000592] Em uma mistura de 3-aminofenol (500 mg, 4,60 mmol), 2- metilpropan-1-ol (1,40 g, 18,9 mmol) e trifenilfosfina (4,80 g, 16,2 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado dietilazodicarboxilato gota a gota (3,20 g, 18,3 mmol) durante um período de 30 min. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 3 h. O solvente foi evaporado, e o resíduo foi diluído com água, acidificado com HCl a 2N aquoso e extraído com éter. A fase aquosa foi basificada com NaOH a 2N aquoso e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secadas (Na2SO4) e concentradas. O produto bruto resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc 15:1) para proporcionar 3-isobutoxibenzenamina como óleo amarelo (330 mg, 45%).
[000593] Usando o procedimento geral A, 3-isobutoxibenzenamina (330 mg, 2,00 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram o composto do título como um óleo viscoso (140 mg, 22%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,17 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,15 (br s, 1H), 6,81 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,80 (br s, 1H), 6,61 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,83 (m, 1H), 3,71 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 3,343,21 (m, 1H), 2,97-2,72 (m, 5H), 2,12-2,04 (m, 2H), 1,90-1,84 (m, 1H), 1,75-1,67 (m, 1H), 1,55-1,63 (m, 1H), 1,46-1,38 (m, 1H), 1,01 (d, J = 6,5 Hz, 6H) ppm,13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 159,9, 153,4, 139,3, 129,6, 110,6, 109,7, 105,0, 74,4, 72,0, 55,4, 47,3, 46,5, 28,3, 25,4, 24,5, 19,5, 19,3 ppm. Pureza: 100% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,56 min; (M+1) 319.
Exemplo 98 quinuclidin-3-il-2-(ciclopropilmetóxi)fenilcarbamato
[000594] Em uma mistura de 3-aminofenol (300 mg, 2,70 mmol), ciclopropilmetanol (793 mg, 11,0 mmol) e trifenilfosfina (2,90 g, 11,0 mmol) em THF (6 mL) foi adicionado dietilazodicarboxilato gota a gota (1,90 g, 11,0 mmol) durante um período de 30 min. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 3 h. O solvente foi evaporado, e o resíduo foi diluído com água, acidificado com HCl a 2N aquoso e extraído com éter. A fase aquosa foi basificada com NaOH a 2N aquoso e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secadas (Na2SO4) e concentradas. O produto bruto resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc 15:1) para proporcionar 3-(ciclopropilmetóxi)benze- namina como um óleo marrom (260 mg, 58%).
[000595] Usando o procedimento geral A, 3-(ciclopropilmetóxi)benze- namina (260 mg, 1,60 mmol) e quinuclidin-3-ol produziram o composto do título como um óleo viscoso (80 mg, 16%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,72 (br s, 1H), 7,14 (br s, 1H), 7,13 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,57 (dd, J = 8,0, 2,0 Hz, 1H), 4,85 (m, 1H), 3,75 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,35-3,26 (m, 1H), 3,05-2,78 (m, 5H), 2,18-2,12 (m, 1H), 1,97-1,86 (m, 1H), 1,80-1,67 (m, 1H), 1,66-1,55 (m, 1H), 1,52-1,42 (m, 1H), 1,261,15 (m, 1H), 0,61-0,55 (m, 2H), 0,31-0,26 (m, 2H) ppm. 13C RMN (100 MHz, CDCl3) δ 158,6, 152,1, 138,3, 128,6, 109,9, 108,9, 104,0, 71,7, 69,7, 53,8, 46,0, 45,2, 28,7, 24,1, 22,4, 17,8, 9,2, 2,2 ppm. Pureza: 100% LCMS (214 nm & 254 nm); tempo de retenção 1,46 min; (M+1) 317.
Exemplo 99 1-benzil-3-(quinuclidin-3-il)imidazolidin-2-ona
[000596] Em uma solução agitada de cloridrato de quinuclidin-3-amina (324 mg, 0,199 mmol) em DMF (30 ml) foi adicionado trietilamina (3 gotas) seguido por (isocianatometil)benzeno (275 mg, 2,10 mmol) cuidadosamente. A mistura resultante foi agitada a 25°C durante 18 h. Depois da separação de HPLC, 1-benzil-3-(quinuclidin-3-il)ureia (283 mg, 55%) foi obtido.
[000597] Em uma solução de 1-benzil-3-(quinuclidin-3-il)ureia (260 mg, 1,00 mmol) em DMF (30 ml) foi adicionado NaH [60% de dispersão em óleo mineral] (96 mg, 2,4 mmol) com resfriamento com banho de gelo. A mistura resultante foi agitada durante 2 h antes de BrCH2CH2Br (0,75 g, 4,0 mmol) ter sido adicionado cuidadosamente. A reação foi agitada durante um adicional de 18 h a cerca de 25°C. Depois da separação por HPLC, a camada aquosa foi liofilizada e purificada por TLC prep. (CHCl3 a 5% de MeOH em CHCl3 a 5% de NH3 a 2N (MeOH) em CHCl3) para produzir o composto do título (81 mg, 28%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,19-7,22 (m, 4H), 7,11-7,14 (m, 1H), 6,09 (dd, J = 15,2, 8,4 Hz, 1H), 5,45 (dd, J = 15,6, 4,0 Hz, 1H), 5,30 (dd, J = 8,0, 3,6 Hz, 1H), 4,17-4,29 (m, 4H), 3,66-3,75 (m, 2H), 3,47 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,19-3,27 (m, 3H), 2,34 (br s, 1H), 2,22 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 1,92 (br s, 2H), 1,75 (br s, 1H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CDCl3) δ 158,9, 141,1, 140,4, 128,7, 127,4, 127,3, 113,6, 63,6, 57,1, 56,0, 45,6, 43,9, 25,2, 23,0, 18,8 ppm. Pureza: 93,8% HPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,84 min; (M+1) 286.
Exemplo 100 N-(1aza-biciclo[2.2.2]oct-3-il)-4-p-tolil-butiramida
[000598] Usando o procedimento geral I, 1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3- ilamina (200 mg, 1,00 mmol) e ácido -p-tolil-butírico (220 mg, 1,2 mmol) produziram N-(1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3-il)-4-p-tolil-butiramida (114 mg, 40%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,06 (s, 4H), 4,19 (m, 1H), 3,66-3,73 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,29-3,33 (m, 4H), 2,91 (dd, J = 8,0, J = 3,6 Hz, 1H), 2,59 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,24 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,15-2,16 (m, 1H), 2,02-2,14 (m, 1H), 1,92-2,01 (m, 2H), 1,81-1,91 (m, 3H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CDCl3) δ 175,1, 138,6, 135,1, 128,8, 128,2, 52,7, 47,4, 47,3, 44,5, 34,8, 27,3, 24,3, 21,6, 19,8, 17,1 ppm. Pureza: 99,7% HPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,76 min; (M+1) 287.
Exemplo 101 N-(1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3-il)-4-(4-metóxi-fenil)-butiramida
[000599] Usando o procedimento geral I, 1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3- ilamina (200 mg, 1,00 mmol) e ácido 4-(4-metóxi-fenil)-butírico produziram o composto do título como um sólido branco (85 mg, 28%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7,08 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,81 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,18 (br s, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,68 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,243,33 (m, 4H), 2,98-3,03 (m, 1H), 2,57 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,24 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,03-2,16 (m, 2H), 2,02 (br s, 2H), 1,85-1,91 (m, 3H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CD3OD) δ 175,2, 158,3, 133,6, 129,2, 113,6, 54,5, 52,6, 47,2, 46,4, 44,5, 34,9, 34,2, 27,5, 24,4, 21,5, 17,1 ppm. Pureza: 96,4% HPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,76 min; (M+1) 303.
Exemplo 102 (1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3-il)-amida de ácido bifenil-3-carboxílico
[000600] Usando o procedimento geral I, 1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3- ilamina (200 mg, 1,00 mmol) e ácido bifenil-3-carboxílico produziram o composto do título como um sólido branco (211 mg, 68%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7,86 (s, 1H), 7,59 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,28 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,19 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 7,11 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 4,21 (br s, 1H), 3,56 (t, J = 11,6 Hz, 1H), 3,11-3,22 (m, 1H), 3,05-3,10 (m, 4H), 2,10 (q, J = 3,2 Hz, 1H), 1,95 (br s, 1H), 1,79-1,83 (m, 2H), 1,59-1,20 (m, 1H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CD3OD) δ 169,6, 141,6, 140,2, 134,5, 130,3, 129,0, 127,7, 126,9, 126,3, 125,9, 51,9, 46,4, 46,0, 45,6, 24,6, 21,6, 17,3 ppm. Pureza: 99,8% HPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,60 min; (M+1) 307.
Exemplo 103 N-(1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3-il)-2-bifenil-4-il-acetamida
[000601] Usando o procedimento geral I, 1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3- ilamina (200 mg, 1,00 mmol) e ácido bifenil-4-il-acético produziram o composto do título como um sólido branco (140 mg, 44%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7,56 (t, J = 8,0 Hz, 4H), 7,29-7,41 (m, 5H), 4,19 (br s, 1H), 3,70 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 3,58 (s, 2H), 3,24-3,31 (m, 5H), 3,12-3,19 (m, 1H), 2,16-2,17 (m, 2H), 1,95-1,98 (m, 2H), 1,82 (br s, 1H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CD3OD) δ 173,1, 140,8, 140,0, 134,7, 129,4, 128,7, 126,9, 52,3, 46,4, 45,9, 44,3, 41,9, 24,4, 21,5, 17,1 ppm. Pureza: 93,9% HPLCMS (210 nm); tempo de retenção 2,87 min; (M+1) 321.
Preparação Z Exemplo 104 2-(quinuclidin-3-il)-N-(1-p-tolilciclopropil)acetamida
[000602] Em uma solução de metil 2-(dimetoxifosforil)acetato (2,70 g, 14,8 mmol) em THF (200 ml) a 0°C foi adicionado NaH [60% de dispersão em óleo mineral] (600 mg, 15,0 mmol). Depois de 1 h de agitação, quinuclidin-3-ona (2,00 g, 12,4 mmol) foi adicionado, e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 18 h. A reação foi extinguida com 50 ml de água a 0°C, e a mistura foi extraída com EtOAc. As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para proporcionar metil 2-(quinuclidin-3- ilideno)acetato bruto, que foi usado em próxima etapa sem purificação (1,2 g, 70%).
[000603] Uma mistura de metil 2-(quinuclidin-3-ilideno)acetato (70 mg, 0,38 mmol) e Pd/C (100 mg, 20% em p/p) em EtOH (10 mL) foi agitada sob H2 (1,41 kg/cm2) em temperatura ambiente durante 18 h. A solução de reação foi filtrada por Celite, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para proporcionar metil 2-(quinuclidin-3-il)acetato bruto (60 mg, 85%), que foi usado com purificação na próxima etapa.
[000604] Uma mistura de metil 2-(quinuclidin-3-il) acetato (1,1 g, 6,0 mmol) e 50 mL de HCl conc. [12M] foi agitada a 70°C durante 18 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para proporcionar ácido 2-(quinuclidin-3-il)acético bruto, que foi usado sem purificação na próxima etapa (900 mg, 86%).
[000605] Usando o procedimento geral I, ácido 2-(quinuclidin-3- il)acético (169 mg, 1,00 mmol) e 1-p-tolilciclopropanamina (149 mg, 1,10 mmol) produziram o composto do título como um sólido branco (60 mg, 18%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,86 (s, 1H), 6,96-7,07 (m, 4H), 3,223,37 (m, 2H), 2,85-3,05 (m, 4H), 2,39-2,45 (m, 2H), 2,21 (s, 3H), 1,451,92 (m, 5H), 1,07-1,23 (m, 5H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CDCl3) δ 171,6, 139,8, 136,1, 129,2, 125,6, 52,1, 50,9, 46,5, 46,0, 39,2, 34,9, 30,8, 24,5, 21,1, 18,7, 17,6 ppm. Pureza: 96,2% HPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,21 min; (M+1) 299.
Exemplo 105 N-(2-(3-metoxifenil)propan-2-il)-2-(quinuclidin-3-il)acetamida
[000606] Usando o procedimento geral I, ácido 2-(quinuclidin-3- il)acético (169 mg, 1,00 mmol) e 2-(3-metoxifenil)propan-2-amina (182 mg, 1,10 mmol) produziram o composto do título como um sólido branco (126 mg, 40%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,39 (s, 1H), 7,20 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,87 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,71 (dd, J = 8,0, 2,0 Hz, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,31-3,42 (m, 2H), 3,00-3,19 (m, 4H), 2,47-2,60 (m, 2H), 2,27 (dd, J = 14,0, 6,0 Hz, 1H), 1,83-2,06 (m, 4H), 1,64-1,74 (m, 1H), 1,61 (d, J = 12,4 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CDCl3) δ 170,0, 159,7, 149,3, 129,5, 117,5, 111,8, 111,0, 55,9, 55,4, 52,0, 50,6, 46,6, 46,0, 39,7, 30,9, 29,7, 29,1, 24,3, 18,8 ppm. Pureza: 93,7% HPLCMS (210 nm); tempo de retenção 0,76 min; (M+1) 317.
Exemplo 106 2-(1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3-il)-N-[1-(3-isopropil-fenil)-1-metil-etil]- acetamida
[000607] Em uma solução de 1-(1-isocianato-1-metil-etil)-3- isopropenil-benzeno (10 g, 50 mmol) em t-BuOH (1000 mL) foi adicionado KOH (40,0 g, 71,6 mmol). A mistura foi agitada em refluxo durante 3 h. A mistura resultante foi arrefecida em temperatura ambiente, concentrada e dissolvida em CH2Cl2. O resíduo sólido foi filtrado, e a camada orgânica foi ajustada em pH < 7 usando HCl conc.. O sal de amônio foi extraído com água. A camada aquosa foi tornada básica usando uma solução de NaOH aquosa [5% em p/p, 200 ml] e amina com base livre foi em seguida extraída com CH2Cl2. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas em Na2SO4, filtradas e concentrada sob pressão reduzida para produzir 1-(3-isopropenil-fenil)- 1-metil-etilamina (3,3 g, 63%).
[000608] Uma solução do composto anterior (8,5 g, 48 mmol) e PtO2 (1,8 g, 8,0 mmol) em EtOH (600 mL) foi agitada em temperatura ambiente sob 1 atm de H2 durante 18 h. A reação foi filtrada por Celite e concentrada sob pressão reduzida para produzir 1-(3-isopropil-fenil)- 1-metil-etilamina (5,0 g, 58%).
[000609] Usando o procedimento geral I, ácido (1-aza-biciclo[2.2.2]oct- 3-il)-acético (200 mg, 1,20 mmol) e 1-(3-isopropil-fenil)-1-metil-etilamina produziram o composto do título como um sólido branco (42 mg, 10%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,15-1,20 (m, 3H), 7,05 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,41-3,45 (m, 1H), 3,26 (s, 2H), 3,15-3,22 (m, 2H), 2,71-2,82 (m, 2H), 2,412,47 (m, 3H), 2,05-2,12 (m, 1H), 1,79-1,90 (m, 4H), 1,61 (d, J = 8,0 Hz, 6H), 1,21 (d, J = 6,4 Hz, 6H) ppm. 13C RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 171,1, 148,7, 147,3, 128,1, 123,9, 122,8, 122,2, 55,6, 52,1, 46,5, 45,9, 38,8, 34,5, 30,7, 28,9, 28,5, 23,8, 23,4, 18,0 ppm. Pureza: 96,8% de HPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,93 min; (M+1) 329.
Exemplo 107 2-(1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3-il)-N-[2-(2-metóxi-fenil)-etil]-acetamida
[000610] Usando o procedimento geral I, ácido (1-aza- biciclo[2.2.2]oct-3-il)-acético (200 mg, 1,20 mmol) e 2-(2-metóxi-fenil)- etilamina produziram o composto do título como um sólido branco (60 mg, 15%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7,17 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,84 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,35-3,45 (m, 3H), 3,21-3,31 (m, 3H), 2,76-2,83 (m, 3H), 2,292,45 (m, 3H), 1,82-2,01 (m, 3H), 1,72-1,81 (m, 2H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CD3OD) δ 172,0, 158,0, 130,4, 127,8, 127,2, 120,2, 110,4, 54,6, 52,0, 46,4, 45,9, 39,1, 38,3, 30,7, 30,2, 23,8, 17,9 ppm. Pureza: 92,4% de HPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,59 min; (M+1) 303.
Exemplo 108 1-(1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3-il)-3-[1-(3-isopropil-fenil)-ciclopropil]- ureia
[000611] Uma mistura de ácido 3-isopropil-benzoico (5,00 g, 30,4mmol) em SOCl2 (50 ml) foi agitada a 100°C durante 2 h. A mistura reacional foi concentrada para para produzir cloreto de 3-isopropil- benzoila (5,00 g, 91%).
[000612] Em uma solução do cloreto ácido anterior (5,00 g, 27,0 mmol) em CH2Cl2 (20 ml) a -70°C foi adicionada, gota a gota, uma solução de NH3/CH2Cl2 (200 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 18 h, e em seguida concentrada para produzir 3-isopropil- benzamida (4,2 g, 93%).
[000613] Uma solução da amida anterior (4,20 g, 25,7 mmol) em POCl3 (36,0 g, 236 mmol) foi agitada a 80°C durante 18 h. A solução foi concentrada, e o resíduo foi vertido em água (100 mL). A mistura foi extraída com EtOAc. As camadas orgânicas foram combinadas, lavada por salmoura, secadas em Na2SO4 e concentradas para produzir 3- isopropil-benzonitrila (3,00 g, 80%).
[000614] Usando o procedimento geral G, 3-isopropil-benzonitrila (3,00 g, 20,6 mmol) foi convertida para a 1-(3-isopropil-fenil)- ciclopropilamina correspondente (0,80 g, 22%).
[000615] Usando o procedimento geral C, a amina anterior (300 mg, 1,71 mmol), quinuclidin-3-amina (215 mg, 1,71 mmol) e CDI (290 mg, 2,05 mmol) produziram o composto do título como um sólido branco (88 mg, 46%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7,18 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,12 (s, 1H), 7,01 (dd, J = 19,2, 7,6 Hz, 2H), 3,74-3,77 (m, 1H), 3,18-3,24 (m, 1H), 2,71-2,87 (m, 5H), 2,42-2,47 (m, 1H), 1,63-1,82 (m, 4H), 1,45 (br s, 1H), 1,21-1,26 (m, 10H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CD3OD) δ 193,0, 168,7, 160,1, 128,2, 122,7, 121,9, 55,3, 46,8, 46,1, 34,1, 25,9, 25,0, 23,5, 19,6, 18,2 ppm. Pureza: 92,4% de HPLCMS (210 nm); tempo de retenção 2,53 min; (M+1) 328.
Exemplo 109 2-(1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3-il)-N-[1-(3-isopropil-fenil)-ciclopropil]- acetamida
[000616] Usando o procedimento geral I, 1-(3-isopropil-fenil)- ciclopropilamina (278 mg, 1,58 mmol) e (ácido 1-aza-biciclo[2.2.2]oct-3- il)-acético (267 mg, 1,58 mmol) produziram o composto do título como um sólido branco (70 mg, 14%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7,16 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,07 (s, 1H), 6,97 (dd, J = 19,2, 7,6 Hz, 2H), 3,16-3,23 (m, 1H), 2,79-2,97 (m, 5H), 2,51-2,58 (m, 1H), 2,23-2,41 (m, 3H), 1,831,92 (m, 1H), 1,68-1,81 (m, 3H), 1,54-1,62 (m, 1H), 1,15-1,25 (m, 10H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CD3OD) δ 173,6, 148,5, 142,4, 127,8, 123,6, 123,1, 122,0, 73,0, 53,1, 46,6, 45,9, 39,3, 34,1, 32,3, 28,1, 26,4, 24,4, 19,7, 16,8 ppm. Pureza: 96,9% de HPLCMS (210 nm); tempo de retenção 2,55 min; (M+1) 327.
Exemplo 110 1-aza-biciclo[2,2,2]oct-3-il éster de ácido [1-(3-isopropil-fenil)- ciclopropil]-carbâmico
[000617] Usando o procedimento geral A, 1-(3-isopropil-fenil)-ciclo- propilamina (278 mg, 1,58 mmol) e quinuclidin-3-ol forneceu o composto do título como um sólido branco (75 mg, 22%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7,17 (m, 1H), 7,09 (s, 1H), 6,97-7,08 (m, 2H), 4,72-4,79 (m, 1H), 3,36-3,42 (m, 1H), 2,79-3,08 (m, 5H), 1,93-2,17 (m, 2H), 1,81-1,90 (m, 1H), 1,67-1,78 (m, 2H), 1,31-1,54 (m, 1H), 1,13-1,28 (m, 10H) ppm. 13C RMN (400 MHz, CD3OD) δ 157,1, 148,4, 143,1, 128,1, 123,9, 123,0, 122,4, 69,2, 54,4, 46,7, 45,7, 34,7, 34,3, 24,9, 23,3, 22,0, 18,0, 17,3 ppm. Pureza: 99,2% de HPLCMS (210 nm); tempo de retenção 1,83 min; (M+1) 329.
Exemplo 111 Estudos de eficácia in vivo de terapia de molécula pequena usando sal de (S)-2-hidroxissuccinato de (2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4- il)propan-2-il)carbamato de (S)-quinuclidin-3-ila em modelo de camundongo Fabry
[000618] Aqui, os experimentos in vivo são descritos usando um inibidor de GCS em um modelo de camundongo Fabry e demonstram que a terapia de redução de substrato (SRT) é igualmente eficaz na redução dos níveis tanto de Gb3 quanto liso-Gb3 no plasma, rim e urina de camundongo Fabry. O estudo foi designado para avaliar se a inibição de substrato (isto é, a "terapia de redução de substrato") um composto dos tipos da invenção pode reduzir o acúmulo do material de armazenagem globotriaosilceramida (Gb3) e lisoglobotriaosilceramida (liso-Gb3). Recentemente foi proposto que a liso-Gb3 urinária pode representar um biomarcador confiável de relevância clínica quanto à doença de Fabry (Aerts e outro, PNAS USA 105:2812-2817 (2008); e Auray-Blais e outro, Clin Chim Acta 411:1906-1914 (2010)). A origem metabólica da liso-Gb3 não é conhecida e pode concebivelmente ser derivada através de desacilação de Gb3 ou através da síntese metabólica de glicosilsfingosina.
[000619] Na figura 2, as setas pretas indicam as séries de reação demonstradas, as setas cinzas são séries de reação não documentadas. ERT usando α-Galactosidase A é conhecido degradar tanto a Gb3 quanto a liso-Gb3. Consequentemente, SRT usando um inibidor de GCS pode ser mais eficaz em limitar o acúmulo de liso-Gb3 se a liso-Gb3 for gerada principalmente através da desacilação de Gb3, uma série de reação de GCS. Estes experimentos demonstram que SRT usando inibidores GCS em um modelo de camundongo de doença de Fabry reduziu tanto Gb3 quanto liso-Gb3, desse modo, suportando o uso de composto da invenção como operações terapêuticas viáveis para os pacientes de Fabry.
[000620] Nos seguintes experimentos, os camundongos dosados com os inibidores de GCS a ~60 mg/kg/dia de sal de (S)-2-hidroxissuccinato de (S)-Quinuclidin-3-il-(2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2- il)carbamato (aqui a seguir "GZ 452") ou ~300 mg/kg/dia de sal de ácido [2-(2’,3’-di-hidro-benzo [1,4] dioxin-6’-il)-2-hidróxi-1-pirrolidin-1-ilmetil- etil]-amida-L-tartárico de ácido (1R,2R)-octanóico (aqui a seguir "GZ 638") como um componente da dieta alimentícia peletizado ad libitum. A análise de lipídio foi por ESI/MS como descrito em Marshall e outro, PLoS ONE 5:e15033 (2010). Como descrito em maiores detalhes abaixo, o tratamento iniciou quando os camundongos estavam com 3, 8 ou 12 meses de idade para testar a eficácia em diferentes gravidades de doença. Sangue e urina foram coletados mensalmente e coletas de tecido periódicas forneceram materiais para avaliar a eficácia da terapia (níveis de Gb3 e liso-Gb3). Estudos anteriores demonstraram que os inibidores de glicossilceramida sintase de geração precoce (da classe semelhante à P4) podem retardar a taxa de acúmulo de Gb3, entretanto, como descrito abaixo, o tratamento com Genz-452 pode não apenas impedir ou retardar outro acúmulo, porém efetuar reduções dos níveis absolutos tanto de Gb3 quanto liso-Gb3 nos tecidos testados (fígado, coração, urina, plasma). Como também descrito abaixo, a eficácia de SMT foi afetada pela idade dos camundongos no início do tratamento. Geralmente, quanto mais velho o camundongo, maiores os níveis de Gb3 armazenados e, desse modo, um período mais longo de tratamento foi requerido a fim de atingir benefício terapêutico similar (veja a figura 4). Os experimentos e resultados são descritos também abaixo.
Inibidor de GCS Reduz os Níveis de Gb3 em Tecido Visceral de Camundongo Fabry
[000621] Neste exemplo, os camundongos Fraby foram tratados com inibidores de GCS em sua dieta durante 4 meses iniciando em 8 meses de idade. Reportamos anteriormente que o tartarato de eliglustate (GZ 638) em 300 mg/kg/dia (SRT GZ 638) é eficaz na inibição de outro acúmulo de tecido Gb3 (como mostrado aqui pelas mudanças não significantes em Gb3 com relação aos níveis de partida UNT (início)). Como mostrado na figura 3, um inibidor de GCS mais potente, GZ 452, foi também avaliado (em 60 mg/kg/dia) (SRT-Gz452) e constatado não apenas impedir outro acúmulo, porém também reduzir significante- mente a Gb3 armazenada com relação aos níveis de partida (UNT (início)). Os níveis do tipo selvagem pareados pela idade (WT) são também mostrados. Estes resultados demostram que a GZ 638 é um inibidor de GCS potente e e reduz efetivamente os níveis de Gb3 em tecidos viscerais do camundongo Fabry.
SRT Reduz a GB3 de Urina e Plasma tanto em Camundongos Fabri mais Jovens quanto mais Idosos
[000622] Neste exemplo, os camundongos Fraby foram tratados com GZ 452 em sua dieta (Rx:) durante 2 a 4 meses iniciando em 3 ou 8 meses de idade (Idade:) como indicado nas figuras 4A e 4B. Os níveis de Gb3 de urina de camundongos mais jovens e mais idosos foram igualmente responsivos ao tratamento com SRT, obtendo ~90% de redução com 2 meses de tratamento. Os níveis de Gb3 foram mais lentos para responder ao tratamento, com camundongos mais idosos requerendo duas vezes o tempo de tratamento de camundongos mais jovens (4 vs. 2 meses) para obter ~50 % de redução. Estes resultados demonstram que GZ 638 reduz efetivamente os níveis de Gb3 urina e plasma em camundongos Fabry mais jovens e mais idosos. SRT Reduz tanto Gb3 quanto Liso-Gb3 em Rim de Camundongo Fabry
[000623] Neste exemplo, os camundongos Fraby foram tratados com Genz-452 em sua dieta durante 4 meses iniciando em 8 meses de idade. Como mostrado na figura 5, o tecido de rim foi analisado quanto à (A) Gb3 e (B) liso-Gb3 de camundongos Fraby não tratados pareados pela idade (UNT), camundongos Fraby tratados com GZ 452 (SRT) e camundongos de controle do tipo selvagem (WT). SRT resultou em reduções relativas significantemente similares em níveis (60 a 70 %) tanto em Gb3 quanto liso-Gb3. Estes resultados demonstram que GZ 638 reduz eficazmente tanto os níveis de Gb3 quanto Liso-Gb3 em tecidos de rim de camundongos Fabry.
Exemplo 112 Estudos de eficácia In vivo de terapia de combinação em modelo de camundongo Fabry usando GZ 452 e alfa-galactosidase A
[000624] Os camundongos Fabry foram usados para testar a eficácia in vivo de combinar a terapia de substituição de enzima com a terapia de molécula pequena em um formato de tratamento atual. O estudo foi designado avaliar se a inibição de substrato (isto é, "terapia de redução de substrato") usando o composto de GZ 452 pode reduzir o reacúmulo do material de armazenagem Gb3 e liso-Gb3. O protocol de estudo demandou três grupos de tratamento distintos de camundongos Fraby machos de 3 meses de idade (Figura 6A). O primeiro grupo recebeu injeções intravesosas de enzima alfa-galactosidase A (ERT) em 1mg/kg para reduzir os níveis de Gb3 e foi repetido a cada 2 meses. O segundo grupo recebeu as mesmas injeções de enzima como o grupo 1, porém também foram dosagem com GZ 452 em ~60 mg/kg/dia como um componente da dieta peletada. O terceiro grupo recebeu apenas a dosagem diária de GZ 452 em sua dieta. Um quarto grupo não recebeu nenhum tratamento para server como controles de veículo e um quinto grupo de animais do tipo selvagem forneceu valores de Gb3 e liso-Gb3 ‘normais’. Coletas de urina e sangue mensais e coletas de tecido trimensais forneceram materiais para avaliar a eficácia relativa das terapias (Figura 6A).
[000625] Depois de 2 meses (os camundongos tinham 5 meses de idade), plasma (Figura 6B, painéis A e C) e urina (Figura 6B, painéis B & D) foram analisados quanto à Gb3 (Figura 6B, painéis A and B) e liso- Gb3 (Figura 6B, painéis C e D). No plasma, ERT e SRT reduziram tanto os níveis de Gb3 (painel A) e liso-Gb3 (painel C), e a combinação de ERT tanto SRT resultou em melhoras significantes sobre qualquer outro produto terapêutico sozinho. Os níveis de Gb3 de urina não foram afetados por ERT, porém significantemente reduzidos por SRT (painel B). A liso-Gb3 de urina foi similarmente reduzida por todos os tratamentos (painel D), sugerindo que a Gb3 e liso-Gb3 de urina podem se originar a partir de fontes distintas. Os resultados destes estudos mostram que a SMT foi eficaz na redução de Gb3 no rim e urina. ERT foi mais eficaz do que SMT na redução de Gb3 no plasma, entretanto, a terapia mais eficaz foi derivada da combinação de duas terapias. A terapia com SMT sozinha ou em combinação com ERT foi também capaz de afetar (reduzindo o acúmulo) de liso-Gb3.
Exemplo 113 Perfil de Isoforma de Cadeia de Gb3 Acila
[000626] A abundância relativa dos grupos acila ligados ao amido de comprimento de cadeia carbono diferente foi determinada quanto à Gb3 a partir do plasma, urina e rim de camundongos Fabry. Como mostrado na figura 7, as isoformas de plasma principais foram C16:0 e C24:1. Os perfis de isoforma de urina e rim foram quase idênticos, com as C24:0 e C22:0 sendo os comprimentos de cadeia predominantes. Estes dados são consistentes com a Gb3 de urina coming predominantemente do rim - provavelmente através da eliminação de exosoma epidérmico. A correlação destes resultados com aqueles na figura 6, em que ERT reduziu a liso-Gb3 de plasma e urina, porém não Gb3 de urina, sugere que a liso-Gb3 na urina é derivada de filtrado de plasma. Esta diferenciação de fonte quanto à Gb3 e liso-Gb3 de urina, se também real para os pacientes, pode explicar porque liso-Gb3 é acreditado ser um prenunciador mais seguro da gravidade da doença e eficácia de tratamento do que a Gb3 de urina.
Exemplo 114 SRT, Porém não ERT Retarda Significantemente a Perda de Resposta Nociceptiva Térmica
[000627] Os camundongos Fraby de três meses de idade foram tratados com GZ 452 em sua dieta (SRT), αgal uma vez a cada 2 meses (ERT), ou uma combinação dos 2 tratamentos (E+S), como acima descrito. Após 6 meses de terapia de combinação, o tempo de resposta nociceptiva térmica (latência) foi avaliado colocando os camundongos em uma placa quente 55°C e registrando o tempo à resposta (isto é, um movimento rápido da pata traseira característico). Como mostrado na figura 8, após 7 meses de tratamento (camundongo de 10 meses de idade), o grupo tratado apenas com ERT não foi significantemente diferente ao grupo não tratado (UNT). Os grupos tratados com SRT e combinação tiveram tempos de resposta significantemente mais curtos ao estímulo de calor. Estes resultados demonstram que SRT (porém não ERT) retardou a perda de resposta nociceptiva térmica, um substituto para a neuropatia periférica frequentemente observada em pacientes de Fabry.
Exemplo 115 Modelo de camundongo de nGD para estudos in vivo de SMT usando Gz161
[000628] Camundongos K14 lnl/lnl (abreviado como K14) foram obtidos de Lund University (Enquist et al. (2007)) e criados sob um protocol aprovado pelo Institutional Animal Care and Use Committee. Os filhotes obtidos de cruzamentos de heterozigoto tiveram a cauda cortada e genotipados dentro de um dia de nascimento (por P1). O DNA foi extraído usando um tampão de lise de EDTA a 5 mM, SDS a 0,2%, NaCl a 200 mM, pH 8,0 Tris a 100 mM suplementado com 0,25 mg/ml de Proteinase K (Invitrogen, Carlsbad, California), precipitado com 100 % de isopropanol e redissolvido em tampão 1X Tris EDTA. O DNA foi em seguida usado para reação de cadeia de polimerase (PCR) para determinar a presença do gene GC sob o promotor de K14 ceratina (CRE) (Enquist et al. (2007)). Para determinar o rompimento do sítio de resistência à neomicina do gene de murino glicocerebrosidase de murino (NEO) usamos um método de três iniciadores: GC WT Fwd 5’-TGTTCCCCAACACAATGCTCTTT-3’; Rev 5’-TCTGTGACTCTGATGCCACCTTG-3’ e Neo Rev 5’- AAGACAGAATAAAACGCACGG GTG-3’ como anteriormente descrito em Cabrera-Salazar e outro, Experimental Neurology 225: 436-444 (2010).
[000629] Os camundongos récem-nascidos receberam diariamente injeções intraperitoneais de 5 mg/kg de (2-(4'-flúor-[1,1'-bifenil]-3- il)propan-2-il)carbamato de quinuclidin-3-ila (aqui a seguir "GZ 161") em um volume de 10 μl/grama de peso corporal iniciando no dia 4 pós-natal. Os camundongos K14 e filhotes do tipo selvagem foram humanamente sacrificados no dia 10 pós-natal (pré-sintomático) e no dia 14 (finalidade humana) para avaliar os níveis de glicoesfingolipídio (GSL). Os camundongos receberam uma dose de 150 mg/kg de pentobarbital (Euthasol, Virbac Inc, Forth Worth, TX) e foram transcardialmente perfundidos com solução de NaCl a 0,9% fria. Os cérebros foram dissecados e divididos; um hemisfério foi usado para análise de GSL e o outro foi fixado em paraformaldeído a 4 % durante 96 horas e processados quanto à histologia.
[000630] Para determinar se outros benefícios poderiam ser obtidos por exposição pré-natal à GZ 161, um subgrupo de K14 fêmeas grávidas recebeu GZ 161 na comida usando uma formulação calculada para fornecer 20 mg/kg/dia durante os 5 a 7 dias finais de gestação. As fêmeas que receberam GZ 161 foram mudadas para dieta padrão após liberação e os filhotes receberam diariamente injeções IP de GZ 161 em uma dose de 5 mg/kg (10 μl por grama do peso corporal) iniciando em P1. Um grupo de filhotes WT nascidos de fêmeas recebendo o fármaco ou fórmula padrão foi sacrificado imediatamente após o nascimento para determinar se na exposição do útero à GZ 161 poderia reduzir os níveis de GSL cerebrais.
Exemplo 116 Quantificação de Glicoesfingolipídio
[000631] A análise de esfingolípido quantitativa foi realizada por cromatografia líquida e espectrometria de massa tandem (LC/MS/MS) como anteriormente descrito em Merrill e outro, Methods 36: 207-224 (2005). Resumidamente, 10 μl de homogeneizado de tecido cerebral (peso de tecido/água:100 mg/ml) foram extraídos com 1,00 ml de uma mistura de solvente orgânico (97% de acetonitrila, 2% de metanol, e 1% ácido acético, volume/volume) e turbilhonados vigorosamente durante 10 minutos. Os esfingolipídios extraídos GluCer e GluSph) foram diretamente separados por cromatografia líquida hidrofílica (Coluna Atlantis HILIC, Water Corp.) e analisados por espectrometria de massa tandem de triplo quadrupolo (API 4000, Applied Biosystems/MDS SCIEX) e comparados com esfingolipídios padrões (Matreya, LLC; Pleasant Gap, PA)
Exemplo 117 Reformulação de glicocerebrosidade humana recombinante
[000632] Glicocerebrosidade humana recombinante (rhGC) foi reformulada como anteriormente descrito em Cabrera-Salazar et al. (2010). Resumidamente, rhGC foi ligada usando uma permuta de cátion (CM Sepharose) e albumina de soro humano (HSA) foi adicionada ao eluíado como um estabilizante. A formulação para administração ICV foi de 2 mg/ml de rhGC em um tampão de fosfato de sódio a 10 mM em pH 7,2 contendo cloreto de sódio a 135 mM, 5 mg/ml de HSA e 0,01% de polissorbato 80.
Exemplo 118 Injeções intracerebroventriculares
[000633] Um modelo de animal de doença de Gaucher neuropática (nGD) identificado como K14 foram crioanestesiado e recebeu 2 μl de injeções intracerebroventriculares bilaterais (ICV) de rhGC a 2 mg/ml ou veículos como anteriormente descrito. (Cabrera-Salazar et al. (2010)). Os flhotes injetados foram monitorados durante a recuperação e retornaram para a mão após o procedimento.
Exemplo 119 Histopatologia
[000634] Após confimação de genótipo, os animais foram humanamente sacrificados com 10 dias de idade. Nesta idade os camundongos K14 são assitomáticos. Os camundongos receberam uma injeção intraperitoneal de 150 mg/kg de pentobarbital de sódio ((Euthasol, Virbac Inc, Forth Worth, TX) e foram perfundidos por uma infusão intracardial de cloreto de sódio a 0,9 % resfriado. Os cérebros for a removidos e pós fixados em paraformaldeído a 4% durante 72 horas. O tecido foi transferido para PBS e parafina incrustada. Seções sagitais de 5 μm de espessura foram cortadas e marcadas como descrito abaixo. A gliose e a presença de células da linhagem de macrófago foram avaliadas por métodos marcação da proteína acídica fibrilar e expressão de marcadores de pan-macrófago CD68 e F4/80 usando o sistema Leica Bond Max Immunostainer (Leica Microsystems, Wetzlar, Alemanha).
[000635] dMarcação para GFAP: Seções de parafina foram colocadas em laminas de montagem e processadas usando o sistema Bond Polymer Refine IHC (Leica Microsystems, Wetlzar, Alemanha) bloqueadas durante 10 minutos em bloco de proteína sem soro (Dako systems, Glostrup, Dinamarca), incubadas durante 30 minutos em uma diluição de 1:1500 de anticorpo anti-GFAP primário em diluente de anticorpo Dako (Dako, Glostrup, Dinamarca), e marcadas usando o kit de detecção Bond Polymer Refine (Leica Microsystems, Wetzlar, Alemanha).
[000636] Marcação para F4/80: Seções de parafina foram colocadas em lâminas de montagem e processadas usando the Bond Polymer Refine IHC system (Leica Microsystems, Wetlzar, Alemanha), incubadas durante 30 minutos em uma diluição de 1:2500 do anticorpo de rato anti-F4/80 de camundongo (eBioscience, San Diego, CA) ou IgG2a de rato (eBioscience, San Diego, CA) como um controle de isotipo. Lâminas foram então incubadas com uma diluição de 1:250 do anticorpo secundário de coelho anti-rato (Vector laboratories, Burlingame, CA) e marcado usando o kit de detecção Bond Polymer Refine (Leica Microsystems, Wetzlar, Alemanha).
[000637] Marcação para CD 68: Seções de parafina foram colocadas em lâminas de montagem e processadas usando o sistema Bond Polymer Refine IHC (Leica Microsystems, Wetlzar, Alemanha), incubadas durante 30 minutos em uma diluição de 1:2500 de um anticorpo anti-CD68 de camundongo do clone FA-11 (AbD Serotec, Oxford, UK) ou controle de isotipo IgG2a de Rato (AbD Serotec, Oxford, Reino Unido). As lâminas foram em seguida incubadas com uma diluição de 1:250 de anticorpo secundário de coelho anti-rato (Vector laboratories, Burlingame, CA) e marcadas usando o kit de detecção Bond Polymer Refine (Leica Microsystems, Wetzlar, Alemanha).
[000638] Para cada técnica de marcação, imagens digitais pareadas para exposição foram obtidas de regiões cerebrais similares de cada grupo experimental usando o sistema Aperio ScanScope XT (Aperio Technologies, Vista, CA). As lâminas marcadas foram digitalizadas em resolução elevada e seis áreas de interesse foram realçadas em cada lâmina e analisadas independentemente por histomorfometria. A área positivamente marcada e os núcleos foram determinados e os dados quantitativos foram analisados por uma análise unidirecional de variância seguido por teste de comparação múltiplo de Tukey usando o Graph Pad Prism V 4,0 (Software GraphPad, San Diego, CA). As diferenças entre as médias de grupo com p<0,05 foram consideradas significantes.
Exemplo 119 Sobrevivência
[000639] Os camundongos K14 receberam injeções intraperitoneais diárias de GZ 161 em uma dose de 5 mg/kg de peso corporal como acima descrito. Um coorte separado de animais também recebeu injeções ICV de GC nos dias 1, 2 e 3 pós-natal seguido por injeções IP diárias de GZ 161. Os animais que atigiram a idade de desmame receberam GZ 161 em uma ração especial designada para fornecer uma dose de 60 mg/kg/dia. Todos os animais foram monitorados diariamente durante o desenvolvimento de complicações neurológicas. Os camundongos foram sacrificados quando eles atigiram uma meta humana (incapacidade de endireitar-se dentro de 10 segundos após serem colocados em posição deitada) por uma injeção de 150 mg/kg de pentobarbital de sódio (Euthasol, Virbac Inc, Forth Worth, TX). Este ponto de tempo foi registrado como o término de vida e analisado usando plotagens Kaplan-Meier.
Exemplo 120 Análise estatística
[000640] Os valores mostrados correspondem às médias e as barras de erro representam o erro padrão da média. As comparações entre os grupos foram analisadas por uma análise unidirecional de variância seguida por teste de comparação múltipla de Tukey. A comparação de redução de substrato no útero foi analisada pelo teste t não pareado com correção de Welch. Curvas de sobrevivência AsKaplan-Meier foram analisadas usando o teste de classificação log equivalente ao teste Mantel-Haenszel. Todas as análises estatísticas foram realizadas usando GraphPad Prism v4,0 (Software GraphPad, San Diego, CA). As diferenças entre as médias de grupo com p<0,05 foram consideradas significantes.
Exemplo 121 Acúmulo de substrato em cérebro de camundongo K14
[000641] Antes da avaliação de efeitos de fármaco sobre os lipídios cerebrais, comparamos as mudanças dependentes de tempo nos níveis de GluCer, GalCer e GluSph l no cérebro de camundongo K14 àqueles de um controle de camundongo do tipo selvagem (WT). A figura 9, os painéis A e B mostram que em cérebro de camundongos WT, o isômero GL-1 predominante nos primeiros dias de vida foi o GluCer; no dia 14 pós-natal (P14) o isômero predominante foi o GalCer. Estes resultados são consistentes com aqueles de um estudo em cérebro de rato, que constatou que GluCer é sintetizado m uma taxa mais elevada durante a primeira semana de vida e seguida por uma síntese aumentada de GalCer iniciando em P8 (Brenkert e outro, Brain Research 36: 183-193 (1972)). Figura 9, painel A também mostra que nos camundongos K14, o GluCer foi elevado 10 vezes com relação aos camundongos WT e que este aumento foi prolongado através das 2 primeiras semanas de vida até os camundongos morrerem em torno do P14.
[000642] De acordo com os modelos de camundongos anteriores de doença de Gaucher neuropática (Liu e outro, PNAS 95: 2503-2508 (1998)), A figura 9, painel C mostra que no nascimento o lisoglicofingolipídio GluSph foi elevado >20 vezes nos cérebros do modelo de camundongo K14 com relação aos camundongos WT. Este aumento foi sustentado através das 2 primeiras semanas de vida e ainda maiores em animais sacrificados no estágio final (Figura 9, painel C). Em filhotes WT dos camundongos K14, os níveis de GluSph foram abaixos do limiar de detecção (0,3 ng/mg de tecido). A figura 9, painel D mostra que estes glicoesfingolipídios elevados e lisoglicoesfin- golipídios no camundongo K14 parecem não ter um impacto sobre o peso cerebral (com relação àquele de camundongos WT). Devido à toxicidade conhecida de GluSph, estratégias terapêuticas criadas para reduzir o acúmulo destes substrates no cérebro de camundongo K14 poderiam ser esperadas ter um impacto sobre as características patológicas da doença e o período de vida dos animais.
Exemplo 122 Administração Intraperitoneal de GZ 161 reduz os níveis de GluCer e GluSph nos cérebros de camundongos K14
[000643] A figura 10 mostra que em comparação com camundongos K14 tratado com o veículo na finalidade humana (14 a 15 dias de idade), administração intraperitoneal (IP) diária de GZ 161 reduziu os níveis cerebrais tanto de GluCer quanto GluSph em >60%. Os camundongos K14 tratados com GZ 161 estavam assintomáticos neste ponto de tempo. Mesmo embora a administração de GZ 161 reduza significantemente os níveis destes glicoesfingolipídios, a figura 10 mostra que eles apesar de tudo permaneceram elevados diversas vezes sobre aqueles de camundongos do tipo selvagem pareados pela idade; GluSph não foi detectada em amostras analisadas de filhotes WT ou de heterozigoto. A redução de glicoesfingolipídios de cérebro como uma consequência de administração de fármaco sistêmica sugere fortemente que GZ 161 é capaz tanto de atravessar a barreira hematoencefálica quanto inibir sua enzima alvo, GCS.
Exemplo 123 Administração Intraperitoneal de Gz 161 reduz a marcação de microglia/macrófago por todo o cérebro de camundongos K14
[000644] As células da linhagem mieloide podem ser detectadas no cérebro de murino usando anticorpos para antígenos tais como F4/80 e CD68. F4/80 é uma glicoproteína transmembrana descobertas em microglias e macrófagos ramificados (quiescentes), ao mesmo tempo em que o CD68 é uma proteína lipossômica expressa em níveis relativamente elevados em macrófagos e microglias ativadas (reativas), e em níveis mais baixos em microglias ramificadas. A marcação para F4/80 e CD68 crescente no cérebro pode ocorrer através do recrutamento de proliferação de monócitos ou microglia, e é uma resposta normal à lesão e inflamação. A figura 11 mostra qualitativa e quantitativamente que comparados aos camundongos do tipo selvagem em 10 dias de idade (P10), o cérebro de camundongo K14 tem números aumentados de células CD68+ em múltiplas localizações (hipocampo, tálamo, tronco cerebral, cerebelo). A concentração mais elevada de células CD68+ foi observada no tálamo e tronco cerebral, dois sítios que também mostram a patologia em pacientes de Gaucher de tipo 2. (Conradi e outro, Acta Neuropathologica 65: 99-109(1984); Conradi e outro, Acta Neuropathologica 82: 152-157 (1991); and Wong e outro, Molecular Genetics and Metabolism 82: 192-207 (2004)). A figura 11 também mostra que a administração sistêmica de GZ 161 reduz os números de células CD68+ em todas estas localizações; o tratamento também reduziu as células CD68+ no bulbo olfatório e córtex frontal (dados não mostrados). Consistente com a histopatologia para CD68, a figura 12 mostra a marcação para F4/80 aumentado com relação aos animais WT em camundongos K14 tratados com veículo em P10. Injeções IP diárias de GZ 161 reduziram o número de células F4/80+ no tálamo e tronco cerebral, porém tinham efeitos marginais em outras regiões do cérebro. Considerados juntamente com os dados de CD68, estes resultados sugerem que o tratamento sistêmico do camundongo K14 com os resultados de GZ 161 nos números diminuídos de macrófagos/microglias em múltiplas regiões do cérebro.
Exemplo 124 Administração Intraperitoneal de GZ 161 reduz a glióse em diversas regiões do cérebro de camundongos K14
[000645] Os astrócitos podem sofrer hipertrofia ou proliferar-se em resposta à lesão neuronal e inflamação ou morte, um processo conhecido como astroglióse. A proteína acídica fibrilar glial (GFAP) é uma proteína de filamento intermediário que é extensamente expressa em astrócitos ativados (reativos), e pode, portanto, ser usada para monitorar a astroglióse. A figura 13 mostra que no P10, a marcação para GFAP aumentou em comparação com os níveis de WT em diversas regiões do cérebro (hipocampo, tálamo, tronco cerebral, cerebelo) do camundongo K14, indicando a presença de astrócitos reativos. A figura 13 também mostra que o tratamento sistêmico de camundongos K14 com GZ 161 levou a marcação para GFAP diminuída no hipocampo e cerebelo no P10; a marcação foi também diminuída no bulbo olfatório e córtex frontal (dados não mostrados). Desse modo, estes resultados de GFAP são consistentes com os dados de macrófago/microglias acima demonstrando que o camundongo K14 provavelmente tem um processo inflamatório em andamento que pode ser atenuado até certo grau por administração sistêmica de GZ 161.
Exemplo 125 Administração intraperitoneal de GZ 161 aumenta a sobrevivência de camundongos K14
[000646] Devido aos efeitos positivos do tratamento com GZ 161 na histopatologia e glicoesfingolipídios cerebrais, questionou-se se estes efeitos transladaram em sobrevivência aumentada do camundongo K14. A figura 14 demonstra que os camundongos K14 tratados com o veículo têm um período de vida médio de 15 dias, consistente com nossas descobertas anteriores neste modelo de camundongo (Cabrera- Salazar et al. (2010)). O tratamento sistêmico (IP) de camundongos K14 com GZ 161 resultou em uma extensão no período de vida médio para 18 dias (p<0,0001), consistente com um benefício dos efeitos moleculares e celulares do fármaco no cérebro mostrado acima.
[000647] Em experimentos anteriores, mostrou-se no camundongo K14 que injeções intracerebroventriculares neonatais (P1-P3) de GC pode estender a sobrevivência média ainda mais, viz., para 23 dias (Cabrera-Salazar et al. (2010)). Porque GC e GZ 161 ambos têm o potencial de diminuir os níveis do mesmo glicoesfingolipídio, a saber, GluCer (GC por degradação de GluCer; GZ 161 por inibição de sua síntese) também questionamos se a combinação de Gz161 e administração intracerebroventricular (ICV) de GC pode fornecer benefício de sobrevivência superior àquele resultante de qualquer outro agente individual. A figura 14 demonstra que a combinação de ICV GC (em P1,2,3) e IP de Gz161 diariamente induziu a uma sobrevivência média de 26 dias, significantemente maior do que GZ 161 apenas ou ICV GC (p=0,0007). Desse modo, a administração sistêmica de GZ 161 parece ser aditiva à ICV GC, e fornece benefício de sobrevivência adicional.
Exemplo 126 A administração pré-natal de GZ 161 falha em aumentar a sobrevivência de camundongos K14
[000648] Porque os níveis GluSph no cérebro de camundongo K14 foram descobertos ser elevados em pelo menos 10 vezes acima do normal no P1, e foi documentado que o GluSph é elevado nos cérebros de camundongos e humanos afetados por nGD ainda pré-natalmente (Orvisky e outro, Pediatric Research 48: 233-237 (2000)), foi investigado se uma vantagem de sobrevivência poderia ser ganha pelo tratamento de camundongos K14 com GZ 161 no útero. A figura 15 mostra que o tratamento de mães de camundongos WT com GZ 161 levou a um decréscimo de ~5 vezes em níveis de GluCer em cérebro de camundongos récem-nascido (P0), sugerindo que GZ 161 poderia atravessar a barreira hemato/placental. Entretanto, fornecendo mães de K14 GZ 161 e então tratando os filhotes IP resultantes com GZ 161 não estendeu a sobrevivência além daquela de camundongos administrados apenas GZ 161 sistêmico pós-natalmente (18 dias) (figuras 14 e 16). Estes dados são, desse modo, consistentes com os resultados descritos na figura 14, e indica que embora a GZ 161 possa realizar reduções em glicoesfingolipídios e neuropatia, o regime de tratamento atual é insuficiente para salvar o CNS. Estes resultados são consistentes com nossos resultados anteriores neste modelo usando injeções intracerebroventriculares de glicocerebrosidase humana recombinante (Cabrera-Salazar et al. (2010)), e juntamente sugere que a depleção robusta e contínua de glicoesfingolipídios tal como GluCer será necessária para também melhorar a sobrevivência.
[000649] Estes dados mostram tanto qualitativa quanto quantitativamente que a administração sistêmica (IP) de GZ 161 aos camundongos K14 neonatais significantemente reduz a carga de substrato, melhora as características patológicas da doença e aumenta o período de vida médio. Quando combinada com o rhGC liberado por ICV, a administração sistêmica de GZ 161 resultou em aumentos aditivos no período de vida, indicando que tal combinação poderia ser mais eficaz do que qualquer outra monoterapia sozinha em pacientes de nGD. Devido às implicações destes estudos que o GZ 161 pode aparentemente atravessar a BBB e inibir a sua enzima alvo, glicosilceramida sintase, é razoável assumir que a molécula poderia também ser usada para tratar outras LSDs resultantes de uma formação de substratos a jusante de GluCer.
[000650] É importante notar que nos estudos atuais, GZ 161 foi administrado aos camundongos K14 em uma estrutura de tempo em que GluCer e GluSph foram sendo produzidas no cérebro de camundongo em desenvolvimento em níveis relativamente altos em comparação aos camundongos WT (Figura 9); Brenkert e outro, 1972). O tratamento IP diário com GZ 161 reduziu bem sucedidamente, porém não normalizou os níveis de GluCer e GluSph levels no cérebro de K14 (Figura 10). Há várias linhas de evidência sugerindo que GluSph e outros lisoesfingolipídios tal como galactosil esfingosina que podem contribuir para a patologia do CNS iniciando-se a produção de mediadores inflamatórios Giri e outro, Journal of lipid research 47: 14781492 (2006) e Graler e outro, Molecular and Cell Biology of Lipids 1582: 168-174 (2002). A capacidade de GZ 161 de diminuir os níveis de GluSph e concorrentemente resultar na marcação de macrófago/microglias e astrócitos diminuída (Figuras 11 a 13) é consistente com esta hipótese. Porque a GluSph também tem propriedades neurotóxicas (Schueler e outro, Neurobiology of Disease 14: 595-601 (2003); Orvisky e outro, Molecular Genetics and Metabolism 76: 262-270 (2002); Sun e outro, Hum Mol Genet 19: 1088-1097 (2010); e Pelled e outro, Journal of Inherited Metabolic Disease 23: 175-184 (2000)), a incapacidade do tratamento com GZ 161 de normalizar os níveis de GluSph é consistente com GluSph como um contribuidor potencial para a morte precoce observada neste modelo.
[000651] Considerados conjuntamente, os resultados pré-clínicos no modelo de camundongo K14 mostrados aqui sugerem que a administração de GZ 161 pode mitigar o progresso da doença e sintomas neurológicos em paciente com doença de Gaucher do tipo 2 e tipo 3. Entretanto, é difícil predizer os benefícios potenciais de tal método terapêutico em pacientes do tipo 2 sintomáticos visto que sabe- se que seus cérebros contém níveis muito elevados de GluSph que datam para a vida pré-natal. Goker-Alpan e outro, The Journal of Pediatrics 143: 273-276 (2003). A doença de Gaucher do tipo 3 pode ser mais submissa ao tratamento, visto que os níveis cerebrais de GluSph são menores (Nilsson, J Neurochem 39: 709-718 (1982), a progressão da doença é mais lenta apesar de ser parte de um fenotípico contínuo (Goker-Alpan et al. (2003)), e em alguns casos os pacientes podem ser identificados por análise mutacional antes do início do fenótipo neuropático (Ida e outro, Human Genetics 105: 120-126 (1999)). Com base nos resultados atuais, parece que um método precoce, agressivo será necessário para tratar estes pacientes. Inibidores de molécula pequena de glicosilceramida sintase pode representar uma subdivisão de um método comprensivo.
Exemplo 127 SMT de camundongos Fraby machos e fêmeas tratados com GZ 452, GZ 161 e GZ 638.
[000652] Os camundongos Fabry iniciaram o tratamento com ~8 meses de idade e foram tratados durante 4 meses com: 60 mg/kg/dia de GZ 452 (Fab 452@ 60mkd), 120 mg/kg/dia de GZ 452 (Fab 452 @120mkd), 20 mg/kg/dia de GZ 161 (Fab 161 @20mkd), 300 mg/kg/dia de GZ 638 (Fab 638 @300 mkd). O tecido do rim de camundongos fraby fêmeas e machos de 12 meses de idade foram testados quanto aos níveis de Gb3. Como mostrado na figura 17, GZ 161 e GZ 452 reduziram significantemente a quantidade de Gb3 presentes no tecido do rim com relação aos controles não tratados (Fab UNT 12mo).

Claims (14)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que é representado pela seguinte fórmula estrutural,
Figure img0017
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é para uso no tratamento de um indivíduo diagnosticado como tendo uma doença de armazenamento lisossômico.
3. Composto, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que a doença de armazenamento lisossômico resulta de um defeito na via de glicoesfingolipídio.
4. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que a doença de armazenamento lisossômico é selecionada a partir do grupo que consiste em Gaucher, Fabry, GM1- gangliosidose, Deficiência do Ativador de GM2, Tay-Sachs e Sandhoff.
5. Composto, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que a doença de armazenamento lisossômico é Fabry.
6. Composto, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que a doença de armazenamento lisossômico é Gaucher Tipo 2 ou Gaucher Tipo 3.
7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 6, caracterizado pelo fato de que ainda compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma enzima lisossômica.
8. Composto, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que a enzima lisossômica é selecionada a partir do grupo que consiste em glicocerebrosidase, alfa-galactosidase A, Hexosaminidase A, Hexosaminidase B e GM1-gangliosideo-β-galactosidase.
9. Composto, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que a enzima lisossômica é alfa-galactosidase A.
10. Composto, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que a enzima lisossômica é glicocerebrosidase.
11. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é para o uso na redução da atividade de glicosilceramida sintase (GCS) em um indivíduo diagnosticado como tendo uma doença de armazenamento lisossômico, em que o composto é para administração ou sozinho ou como uma terapia de combinação com uma terapia de reposição de enzima.
12. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é para o uso para tratar uma doença ou distúrbio mediado pela glicosilceramida sintase (GCS) ou uma doença ou distúrbio na qual GCS está implicada.
13. Composto, de acordo com a reivindicação 12, caracteri-zado pelo fato de que a referida doença ou distúrbio é câncer ou um distúrbio metabólico.
14. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é para o uso na redução do acúmulo de um material derivado de GCS em um indivíduo diagnosticado como tendo uma doença de armazenamento lisossômico, em que o composto é para administração ou sozinho ou como uma terapia de combinação com uma terapia de reposição de enzima.
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