CN106950327A - 复杂基质中贝类毒素的筛查与确证方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种复杂基质中贝类毒素的筛查与确证方法,包括下列步骤:(1)基质样品的制备、(2)基质样品的纯化与毒素分离、(3)质谱库的建立、(4)样品信息采集与结果的判定、(5)疑似阳性样品以及代谢产物进行高分辨质谱测定、(6)确定精确分子质量定性。本发明构建了24种贝类毒素的质谱数据库,可用于样品筛查过程中的高精准定性分析,实现了无毒素标品的盲查与准确定性。解决了标准品昂贵,到货周期长以及受出入境管控等影响因素,大大降低日常监控过程中的检测成本,同时,降低贝类检测对操作人员的技术水平要求,使其更易于操作。
Description
技术领域
本发明涉及一种复杂基质中贝类毒素的筛查与确证数据库以及高分辨确证方法,属于生物技术领域。
背景技术
我国拥有丰富的海洋生态资源和养殖资源,而随着近海环境污染程度的加剧,有害藻华以及伴生的贝类毒素已成为重大食品安全问题之一。因贝类毒素污染问题,自上世纪九十年代以来,以欧盟为首的发达国家全面禁止对我国贝类进口,给我国贝类产业造成了巨大的经济损失。近几年,因误食用贝类毒素污染超限量双壳贝类,已多次造成群体中毒甚至死亡事件,如2012年浙江宁波“紫贻贝腹泻性毒素”致200余人群体中毒事件、2016年秦皇岛贻贝麻痹性毒素中毒事件等。更有甚者,多毒素复合污染的常态性和普遍性两大异常现象日益严峻,改变了贝类毒素污染的季节性相关这一常态认识。由此可见,我国已经全面遭受多种贝类毒素复合污染,且分布范围几乎覆盖整个沿海地区。而目前缺乏对这一自然灾害的有效治理手段,监控预警是目前保障消费者食用安全最为有效的手段。
随着科学技术的发展,贝类毒素的检测要求已经从原始的小鼠生物法测定总量发展到目前应用质谱检测方法精确定性化合物种类及含量。且自2015年,欧盟已全面禁止小鼠生物法用于贝类毒素的检测,要求所有进出口水产品尤其是双壳贝类需要出具贝类毒素质谱检测方法检测结果。常规定性要求在同样测试条件下,试样溶液中保留时间与标准物质保留时间相对偏差在±3%以内,且检测到的定性离子的相对丰度,应与浓度相当的标准溶液中定性离子的相对丰度一致。基峰与次强碎片离子丰度比应符合表1要求。但目前复杂基质中贝类毒素的筛查方法不完善,仅包含母离子与两个碎片离子丰度比,而水产品样品尤其是双壳贝类基质复杂,给质谱检测定性造成极大困难。因此,完善的质谱检测与定量方法,是我国突破双壳贝类贸易壁垒亟待解决的新问题。
表1基峰与次强碎片离子丰度比要求
次强碎片离子相对丰度% | >50 | >20~50 | >10~20 | ≤10 |
允许相对偏差% | ±20 | ±25 | ±30 | ±50 |
基质效应是指样本中除了被测化合物以外的样本特征,对被测物质的检测过程以及测定结果产生影响。双壳贝类是目前贝类毒素的主要受体,由于双壳贝类种类繁多,且样品及其提取物中内源物质,如蛋白、碳水化合物、脂质、小分子和盐溶液等组分以及目标物的代谢 产物所造成的基质效应,严重影响定性定量结果判定。其中的离子强度为贝类毒素检测过程中产生假阳性现象的主要因素。因此,解决基质干扰就是对贝类毒素准确定性的关键和技术难点所在。通常通过优化样品前处理方法对样本进行净化,可排除大部分基质干扰。而当样品中目标物残留较低时,应用常规的四级杆质谱定性过程中,部分化合物的两对MRM离子比率偏差较大,给定性工作带来极大困难。
发明内容
针对目前复杂基质中贝类毒素的筛查方法不完善并且因定性缺失造成的假阳性结果,本发明提供了一种复杂基质中贝类毒素的筛查与确证数据库以及高分辨确证方法。
本发明可提供11种脂溶性贝类毒素包括:腹泻性贝类毒素(OA,DTX1,DTX2),蛤毒素(PTX2),虾夷扇贝毒素(YTX,OH-HomoYTX),环亚胺类毒素(SPX1、GYM),原多甲藻酸毒素(AZA1,AZA2,AZA3)目标化合物质谱数据库。
本方法可提供13种麻痹性贝类毒素包括:STX、NEO、dcSTX、GTX2、GTX3、GTX1、GTX4、GTX5、C1、C2、dcGTX2、dcGTX3、dcNEO目标化合物质谱数据库。
本发明提供的方法中基质谱图库可以作为定性确证的判定方法以及依据。
本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。
本发明是针对目前复杂基质中贝类毒素的筛查方法不完善并且因定性缺失造成的假阳性结果,提供了一种复杂基质中贝类毒素液相色谱串联质谱数据库以及高分辨确证方法,尤其是对未知样品进行筛查与谱库确证的检测方法,具体流程见图1。
1、基质样品的制备
分别配置浓度为10μg/kg~50μg/kg的11种脂溶性贝类毒素混合标准溶液(腹泻性贝类毒素(OA,DTX1,DTX2),蛤毒素(PTX2),虾夷扇贝毒素(YTX,OH-HomoYTX),环亚胺类毒素(SPX1、GYM),原多甲藻酸毒素(AZA1,AZA2,AZA3))以及13种麻痹性贝类毒素混合标准溶液(STX、NEO、dcSTX、GTX2、GTX3、GTX1、GTX4、GTX5、C1、C2、dcGTX2、dcGTX3、dcNEO),使用注射器,分别注射入活体扇贝、贻贝、牡蛎以及蛤四种样品基质的内脏组织中,使注射后的生物体内各种毒素的含量为1~5ug/kg,样品量为10g。将上述生物样本,至于0.45μm过滤后海水中暂养,充氧气,至注射后12~48h,取全组织样本,沥干水分,匀浆后,-18℃冷冻,制得基质样品的。
2、基质样品的纯化与毒素分离
脂溶性贝类毒素:将样品置于50mL离心管中,加入10~50mL甲醇,涡旋混合1min,超声提取5min。4000r/min离心5min,取上清液置于梨形瓶中,残渣中加入10~50mL甲醇,重复提取一次,合并两次提取液。50℃旋转蒸发至干,加入5ml 25%~50%甲醇水溶液,充 分超声溶解后,待净化。依次用1mL甲醇、1~3mL 30%~50%甲醇水溶液活化StrataTM-X固相萃取柱,注入提取液,再用1~5mL 20~30%甲醇水溶液淋洗,最后用1mL甲醇溶液洗脱,收集洗脱液,甲醇定容至1mL。洗脱液过0.22μm滤膜后,得基质标准品用于谱库建立。
麻痹性贝类毒素:将样品置于50mL离心管中,加入20~50mL 1%~10%乙酸水溶液,涡旋混合90s。将离心管密封置于沸水中煮沸5min,取出置于流水下冷却至室温。4500r/min离心10min,待净化。移取上述提取液1mL于2mL离心管中,加入5μL氨水,涡旋混匀。依次用2mL乙腈,2~4mL 20%~50%乙腈水溶液(含1%乙酸)、2~6mL 0.1%~0.5%氨水溶液活化Supelco ENVI-Carb固相萃取柱,加入500μL提取液,再用700μL超纯水淋洗,正压挤干,最后用1mL 75%~80%乙腈水(含0.25%甲酸)洗脱混匀,过0.22μm滤膜于进样小瓶中,得基质标准品用于谱库建立。
3、质谱库的建立:
以上述基质标准品为样品,应用LC-MS-Qtrap质谱采集条件。调节液相条件为乙腈与水的流速分别为0.15mL/min,采用等度洗脱方法。通过自动进样器采样,不接色谱柱,改用两通,采集时间2min。分别选取有代表性,具有丰富的离子碎片信息的质谱图,分别建立并储存碰撞能为20,35,50和35±15eV时的全扫描质谱图至质谱谱库。同时描述贝类毒素的名称,CAS号、精确分子质量、结构式、采集条件、常规保留时间等信息。
4、样品信息采集与结果的判定
对样品进行提取,通过固相萃取柱净化后,通过LC-MS-Qtrap特定的MRM质谱采集条件进样,检测24种目标贝类毒素。在实际样品检测过程中,调节Q2中的碰撞能量获得丰富的碎片,将所获得的EPI谱图与谱库中该化合物的谱图匹配,当匹配值(Fit值)超过85时,为确证分析的有效判据。当Fit值小于50可判为阴性。通过LC-MS-Qtrap特定的MIM质谱采集条件进样,检测贝类毒素目标代谢产物与未知贝类毒素。在实际样品检测过程中,调节Q2中的碰撞能量获得丰富的碎片,然后对其主要碎片做MS3,归属碎片来源,确定化合物结构。
5、疑似阳性样品以及代谢产物进行高分辨质谱,确定精确分子质量
对Fit>85%的疑似阳性样品和疑似贝类毒素代谢产物样品进行高分辨质谱检测,精确分子质量定性分析。通过特定的液相色谱条件,结合四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱系统的Full MS/dd-MS2监测模式,以Full MS一级质谱全扫描提取母离子精确质量数所得的色谱峰面积进行定量,以保留时间和dd-MS2数据依赖子离子扫描所得的二级子离子质谱图进行定性确证。25种贝类毒素的精确质量数偏差不大于3×106(见表2)。将目标代谢产物与未知贝类毒素代谢产物的二级子离子进行碎片归属,通过特征子离子的相对丰度值进行定性分析,从而确定代谢产物类型。
表2 24种贝类毒素名称,分子式以及理论与实际检测精确质量数范围
本发明的有益效果:
本发明构建了一个贝类毒素质谱数据库,涵盖包括软骨藻酸、脂溶性贝类毒素、麻痹性贝类毒素共24种目标化合物及其代谢产物,在主要经济贝类扇贝、贻贝、牡蛎以及蛤样品提取物中,在三重四级杆质谱不同能量条件下的质谱数据库以及高分辨确证方法。可用于样品筛查过程中的高精准定性分析,实现了无毒素标品的盲查与准确定性。解决了标准品昂贵,到货周期长以及受出入境管控等影响因素,大大降低日常监控过程中的检测成本,同时,降 低贝类检测对操作人员的技术水平要求,使其更易于操作。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明。
图1是贝类毒素的筛查与谱库确证流程示意图。
图2是贻贝的定性结果判定图。
图3是厚壳贻贝的定性结果判定图。
图4是扇贝样品中GTX2高分辨质谱定性图。
图5是扇贝样品中GTX3高分辨质谱定性图。
具体实施方式
实施例1
下面通过实施例结合附图来对本发明的技术方案作进一步解释,但本发明的保护范围不受实施例任何形式上的显著。
下述实例中所用的实验方法如无特殊要求,均为常规方法。实例中所用的材料、试剂等,如无特殊要求,均可从商业途径得到。
本实施例是针对目前复杂基质中贝类毒素的筛查方法不完善并且因定性缺失造成的假阳性结果,提供了一种复杂基质中贝类毒素液相色谱串联质谱数据库以及高分辨确证方法,尤其是对未知样品进行筛查与谱库确证的检测方法,具体流程见图1。
(1)基质样品的制备
分别配置浓度为10μg/kg的11种脂溶性贝类毒素混合标准溶液(腹泻性贝类毒素(OA,DTX1,DTX2),蛤毒素(PTX2),虾夷扇贝毒素(YTX,OH-HomoYTX),环亚胺类毒素(SPX1、GYM),原多甲藻酸毒素(AZA1,AZA2,AZA3))以及13种麻痹性贝类毒素混合标准溶液(STX、NEO、dcSTX、GTX2、GTX3、GTX1、GTX4、GTX5、C1、C2、dcGTX2、dcGTX3、dcNEO),使用注射器,分别注射入活体扇贝、贻贝、牡蛎以及蛤四种样品基质的内脏组织中,使注射后的生物体内各种毒素的含量为1ug/kg,样品量为10g。将上述生物样本,至于0.45μm过滤后海水中暂养,充氧气,至注射后12h,取全组织样本,沥干水分,匀浆后,-18℃冷冻,制得基质样品的。
(2)基质样品的纯化与毒素分离
脂溶性贝类毒素:将样品置于50mL离心管中,加入10mL甲醇,涡旋混合1min,超声提取5min。4000r/min离心5min,取上清液置于梨形瓶中,残渣中加入10mL甲醇,重复提取一次,合并两次提取液。50℃旋转蒸发至干,加入5ml 25%甲醇水溶液,充分超声溶解 后,待净化。依次用1mL甲醇、1mL 30%甲醇水溶液活化StrataTM-X固相萃取柱,注入提取液,再用1mL 20%甲醇水溶液淋洗,最后用1mL甲醇溶液洗脱,收集洗脱液,甲醇定容至1mL。洗脱液过0.22μm滤膜后,得基质标准品用于谱库建立。
麻痹性贝类毒素:将样品置于50mL离心管中,加入20mL 1%乙酸水溶液,涡旋混合90s。将离心管密封置于沸水中煮沸5min,取出置于流水下冷却至室温。4500r/min离心10min,待净化。移取上述提取液1mL于2mL离心管中,加入5μL氨水,涡旋混匀。依次用2mL乙腈,2mL 20%乙腈水溶液(含1%乙酸)、2mL 0.1%氨水溶液活化Supelco ENVI-Carb固相萃取柱,加入500μL提取液,再用700μL超纯水淋洗,正压挤干,最后用1mL 75%乙腈水(含0.25%甲酸)洗脱混匀,过0.22μm滤膜于进样小瓶中,得基质标准品用于谱库建立。
(3)质谱库的建立:
以上述基质标准品为样品,应用特定的LC-MS-Qtrap质谱采集条件。调节液相条件为乙腈与水的流速分别为0.15mL/min,采用等度洗脱方法。通过自动进样器采样,不接色谱柱,改用两通,采集时间2min。分别选取有代表性,具有丰富的离子碎片信息的质谱图,分别建立并储存碰撞能为20,35,50和35±15eV时的全扫描质谱图至质谱谱库。同时描述贝类毒素的名称,CAS号、精确分子质量、结构式、特定的采集条件、常规保留时间等信息。
表3 24种贝类毒素谱库主要碎片及其相对丰度(35±15eV)
(4)样品信息采集与结果的判定
对样品进行提取,通过固相萃取柱净化后,通过LC-MS-Qtrap特定的MRM质谱采集条件进样,检测24种目标贝类毒素。在实际样品检测过程中,调节Q2中的碰撞能量获得丰富的碎片,将所获得的EPI谱图与谱库中该化合物的谱图匹配,当匹配值(Fit值)超过85时,为确证分析的有效判据。当Fit值小于50可判为阴性。通过LC-MS-Qtrap特定的MIM质谱采集条件进样,检测贝类毒素目标代谢产物与未知贝类毒素。在实际样品检测过程中,调节Q2中的碰撞能量获得丰富的碎片,然后对其主要碎片做MS3,归属碎片来源,确定化合物结构。
(5)疑似阳性样品进行高分辨质谱,确定精确分子质量
对Fit>85%的疑似阳性样品进行高分辨质谱检测,精确分子质量定性分析。通过特定的液相色谱条件,结合四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱系统的Full MS/dd-MS2监测模式,以FullMS一级质谱全扫描提取母离子精确质量数所得的色谱峰面积进行定量,以保留时间和dd-MS2数据依赖子离子扫描所得的二级子离子质谱图进行定性确证。24种目标物的精确质量数偏差均小于3×10-6,见表4。将目标代谢产物与未知贝类毒素代谢产物的二级子离子进行碎片归属,通过特征子离子的相对丰度值进行定性分析,从而确定代谢产物类型。
表4 24种贝类毒素名称,分子式以及理论与实际检测精确质量数
(6)代谢产物定性与结构鉴定
将检测过程中发现的代谢产物,应用LC-MS-Qtrap与液相色谱高分辨质谱所获得的二级碎片进行子离子匹配,比较离子相对丰度,检测并成功定性AZA19代谢产物。获得其结构分析定性谱图。
实施例2是应用本方法在实际检测过程中的定性结果判定。
应用本方法对购买自青岛某水产品批发市场的牡蛎、扇贝、贻贝、厚壳贻贝样品,通过本发明的方法进行检测,获得的结果如下:
表5 4种贝类样品中24种贝类毒素含量(μg/kg)
其中,图2是贻贝的定性结果判定图。图3是厚壳贻贝的定性结果判定图。
与本发明的贝类毒素的数据库进行对比可以,样品中所含的毒素见表5所示,其中对厚壳贻贝中的AZA2进行定性(见图3),为AZA检出,谱库匹配度为92.5%,判定为AZA2检出后进行定量分析。
另外扇贝样品检出疑似STX,两个样品目标峰的液相保留时间偏差<3%,且两对MRM离子对离子比率偏差<10%。通过本发明采用的方法,采用四级杆-离子阱质谱法检测,应用特定的MRM-IDA-EPI模式,获得二级全扫描质谱。将样品中STX的EPI谱图与谱库中STX相同高能量下的EPI谱图比对,其匹配度IF值为52.6%<85.0%判定值,故可判定样品中未检出STX。
对扇贝样品中的GTX2和GTX3进行高分辨质谱定性(图4-5),因两种化合物为同分异构提,是质谱检测的难点所在,因此常规的四级杆检测方法,无法进行精确定性分析,应用本发明中的高分辨质谱,确定精确分子质量同时采用Full MS/dd-MS2,能将两种化合物精确定性。
实施例3本发明的方法与传统的四级杆质谱检测方法结果比对
1、采用本方法与传统四级杆质谱检测方法在假阳性样本检测中的应用
传统的串联四级杆质谱,仅能通过定量与定性两对离子对,对检测结果进行定性分析,如附图2中的样品检测结果可见,两个样品目标峰的液相保留时间偏差<3%,且两对MRM离子对离子比率偏差<10%,既通过传统的定性方法,采用与标准品的保留时间和离子比率定性,则该样品为STX阳性样品。通过本发明采用的方法,采用四级杆-离子阱质谱法检测,应用特定的MRM-IDA-EPI模式,获得二级全扫描质谱。将样品中STX的EPI谱图与谱库中STX相同高能量下的EPI谱图比对,其匹配度IF值为52.6%<85.0%判定值,故可判定样品中未检出STX。
2.采用本方法与传统四级杆质谱检测方法在其他目标代谢产物分析上的比较
传统的四级杆质谱检测方法,对于缺少代谢产物标准品的目标化合物通常采用SIM模式,即母离子检测进行检测。而由于质谱干扰往往存在假阳性的现象。且由于四级杆质谱的分辨率较差,即便有检出,也无法提供其离子碎片进行结构推演。
通过本发明采用的方法,采用四级杆-离子阱质谱检测方法应用MRM-IDA-EPI模式,对全扫描质谱图进行结构归属分析,最终确定目标化合物结构,对代谢产物进行初步定性。结合高分辨质谱检测方法的模式,能够确定化合物的精确分子质量与结构,完成代谢产物的定量与定性分析。
3.采用本方法与传统四级杆质谱检测方法在其他未知代谢产物分析上的比较
传统的四级杆质谱检测方法,由于其分辨率差,无法检测缺少代谢产物标准品的未知代谢产物。从而无法进行风险评估相关研究。
通过本发明采用的方法,采用MIM-IDA-EPI模式,对全扫描质谱图进行结构归属分析,最终确定目标化合物结构,对代谢产物进行初步定性。结合高分辨质谱Full MS/dd-MS2检测方法的模式,进行的子离子检测,能够确定化合物的精确分子质量与结构,完成代谢产物的定量与定性分析。
以上所述,仅是本发明的较佳实施例而已,并非是对本发明作其它形式的限制,任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容,依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型,仍属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (1)
1.一种复杂基质中贝类毒素的筛查与确证方法,其特征在于,包括下列步骤:
(1)基质样品的制备
分别配置浓度为10μg/kg~50μg/kg的11种脂溶性贝类毒素混合标准溶液(腹泻性贝类毒素(OA,DTX1,DTX2),蛤毒素(PTX2),虾夷扇贝毒素(YTX,OH-HomoYTX),环亚胺类毒素(SPX1、GYM),原多甲藻酸毒素(AZA1,AZA2,AZA3))以及13种麻痹性贝类毒素混合标准溶液(STX、NEO、dcSTX、GTX2、GTX3、GTX1、GTX4、GTX5、C1、C2、dcGTX2、dcGTX3、dcNEO),使用注射器,分别注射入活体扇贝、贻贝、牡蛎以及蛤四种样品基质的内脏组织中,使注射后的生物体内各种毒素的含量为1~5ug/kg,样品量为10g;将上述生物样本,至于0.45μm过滤后海水中暂养,充氧气,至注射后12~48h,取全组织样本,沥干水分,匀浆后,-18℃冷冻,制得基质样品的;
(2)基质样品的纯化与毒素分离
脂溶性贝类毒素:将样品置于50mL离心管中,加入10~50mL甲醇,涡旋混合1min,超声提取5min;4000r/min离心5min,取上清液置于梨形瓶中,残渣中加入10~50mL甲醇,重复提取一次,合并两次提取液;50℃旋转蒸发至干,加入5ml的25%~50%甲醇水溶液,充分超声溶解后,待净化;依次用1mL甲醇、1~3mL 30%~50%甲醇水溶液活化StrataTM-X固相萃取柱,注入提取液,再用1~5mL 20~30%甲醇水溶液淋洗,最后用1mL甲醇溶液洗脱,收集洗脱液,甲醇定容至1mL;洗脱液过0.22μm滤膜后,得基质标准品用于谱库建立;
麻痹性贝类毒素:将样品置于50mL离心管中,加入20~50mL 1%~10%乙酸水溶液,涡旋混合90s;将离心管密封置于沸水中煮沸5min,取出置于流水下冷却至室温;4500r/min离心10min,待净化;移取上述提取液1mL于2mL离心管中,加入5μL氨水,涡旋混匀;依次用2mL乙腈,2~4mL 20%~50%乙腈水溶液(含1%乙酸)、2~6mL 0.1%~0.5%氨水溶液活化Supelco ENVI-Carb固相萃取柱,加入500μL提取液,再用700μL超纯水淋洗,正压挤干,最后用1mL 75%~80%乙腈水(含0.25%甲酸)洗脱混匀,过0.22μm滤膜于进样小瓶中,得基质标准品用于谱库建立;
(3)质谱库的建立:
以上述基质标准品为样品,应用LC-MS-Qtrap质谱采集条件;调节液相条件为乙腈与水的流速分别为0.15mL/min,采用等度洗脱方法;通过自动进样器采样,不接色谱柱,改用两通,采集时间2min;分别选取有代表性,具有丰富的离子碎片信息的质谱图,分别建立并储存碰撞能为20,35,50和35±15eV时的全扫描质谱图至质谱谱库;同时描述贝类毒素的名称,CAS号、精确分子质量、结构式、采集条件、常规保留时间信息;
(4)样品信息采集与结果的判定
对样品进行提取,通过固相萃取柱净化后,通过LC-MS-Qtrap的MRM质谱采集条件进样,检测24种目标贝类毒素;在实际样品检测过程中,调节Q2中的碰撞能量获得丰富的碎片,将所获得的EPI谱图与谱库中该化合物的谱图匹配,当匹配值(Fit值)超过85时,为确证分析的有效判据;当Fit值小于50可判为阴性;通过LC-MS-Qtrap的MIM质谱采集条件进样,检测贝类毒素目标代谢产物与未知贝类毒素;在实际样品检测过程中,调节Q2中的碰撞能量获得丰富的碎片,然后对其主要碎片做MS3,归属碎片来源,确定化合物结构;
(5)疑似阳性样品以及代谢产物进行高分辨质谱,确定精确分子质量
对Fit>85%的疑似阳性样品和疑似贝类毒素代谢产物样品进行高分辨质谱检测,精确分子质量定性分析;通过液相色谱条件,结合四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱系统的FullMS/dd-MS2监测模式,以Full MS一级质谱全扫描提取母离子精确质量数所得的色谱峰面积进行定量,以保留时间和dd-MS2数据依赖子离子扫描所得的二级子离子质谱图进行定性确证;24种贝类毒素的精确质量数偏差不大于3×106;将目标代谢产物与未知贝类毒素代谢产物的二级子离子进行碎片归属,通过特征子离子的相对丰度值进行定性分析,从而确定代谢产物类型;
24种贝类毒素名称,分子式以及理论与实际检测精确质量数范围见下表:
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