CN106867956A - 一种促进桑黄菌丝生长的培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种促进桑黄菌丝生长的培养基，该培养基以用麦芽糖作为桑黄菌菌丝培养最佳碳源，酒石酸铵作为其最佳氮源，选择成分准确的高纯化学试剂进行配制，保证了培养基的成分精确，便于进行菌种质量控制。针对桑黄菌丝生长所需营养成分进行优化，加快了桑黄菌丝的生长速度，接种后7‑9天，桑黄菌丝即可长满斜面，较PDA培养基，菌丝生长速度提升了20%左右。减少桑黄菌菌丝生长时间，且本发明培养基配方简单、原料来源广、价格低廉，可降低桑黄的生产成本，为桑黄的后续应用提供可靠的技术支持。
Description
技术领域
本发明涉及食药用菌栽培领域，具体涉及一种通过优化培养基来促进桑黄菌丝生长的方法。
背景技术
桑黄是一种珍贵的多年生大型药用真菌，由于大多生长在桑属植物上且子实体为黄褐色而得名。桑黄的药物功效最早见于《本草纲目》、《药性论》记载桑黄味苦、性寒。在我国传统中医药中用于治疗痢疾、盗汗、血崩、脱肛泻血等症状。最新研究表明，桑黄还具有独特的抗癌功效，是目前国际公认的生物治癌药剂中有效率最高的一种药用真菌。桑黄的主要药理活性成分是桑黄多糖，对桑黄进行人工培养的主要目的是获得桑黄多糖入药或用于保健品制剂生产，桑黄多糖一般通过发酵液、菌丝体和子实体提取途径获得。由于桑黄的使用量日益加大，加上日韩两国对我国野生桑黄掠夺式的收购，导致野生桑黄的资源濒临枯竭；而我国对于桑黄的研究才刚刚起步，现阶段针对桑黄菌的合适的母种培养基、液体培养基配方以及人工栽培技术还亟待完善。
发明内容
本发明的目的在于克服现有培养基配方的缺陷，提供一种能够促进桑黄菌菌丝生长的方法，以解决桑黄菌菌丝供应不足的缺陷，提高桑黄多糖的产量。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种促进桑黄菌丝生长的培养基，所述培养基配方如下：麦芽糖16-20g/L；酒石酸铵0.25-0.30g/L；KH2PO4 0.8-1.2g/L；MgSO4•7H2O 0.3-0.5g/L；VB1 8-12mg/L；琼脂18-22g/L。
其配置方法为：称取麦芽糖、酒石酸铵、KH2PO4、MgSO4•7H2O、VB1，溶解于1L水中加入，充分搅拌均匀，加入琼脂后加热搅拌直至琼脂融化；分装入三角瓶中，在瓶口用封口膜密封好，121℃灭菌30min备用。
本发明的另一目的在于提供一种利用上述促进桑黄菌丝生长的培养基进行桑黄培养的方法，其具体步骤如下：
（1）接种：待培养基温度降至36-40℃时，接种桑黄，按菌丝与培养料体积为1：50接种封口膜密封后放入培养箱培养；
（2）菌丝生长：桑黄在上述培养基上共生长10天，接种第三天开始划线用签字笔在培养皿上描绘最外圈的菌丝并用尺子测量直径，之后每24小时划一次线，共划6次线；同时，观察菌丝颜色、粗细、浓密程度和菌落长势。
本发明的优点在于：
本发明优化了桑黄培养基的碳源和氮源使其更符合桑黄生长所需营养需求，加快了桑黄菌菌丝生长速率，降低生产桑黄多糖的成本；
采用麦芽糖作为培养桑黄菌丝培养基的碳源，其来源广泛、价格低廉，且麦芽糖作为一种可食用多糖添加到培养基中安全无有害物质。酒石酸铵不仅可以提供丰富的氮源，还可以有效的控制培养基中的碳氮比，使桑黄处于一种最佳的生长环境。
采用优化后的培养基不仅可以提高桑黄菌菌丝生长速度还可防止由于菌丝生长时间过长导致的菌种退化。
具体实施方式
实施例1 碳源、氮源的优化试验
碳源：在基础培养基中分别添加2％的葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、可溶性淀粉、玉米粉、面粉作为碳源，配成七种不同碳源的培养基以基础培养基作为无碳源对照组，研究不同碳源对桑黄菌丝生长的影响。
研究发现麦芽糖为桑黄菌最适碳源。以麦芽糖作为碳源的作用效果最好，菌丝生长速率为2,89mm/d，菌丝直径为42.59mm，菌丝生长指数有13.50。从菌丝生长指数上分析，麦芽糖的菌落直径比对照组有明显的增长。
氮源：在基础培养基中分别添加0.3％的蛋白胨、酵母粉、黄豆粉、酒石酸铵、硫酸铵、硝酸铵作为氮源，配成六种不同氮源的培养基，以基础培养基作为无氮源对照组，研究不同氮源对桑黄菌丝生长的影响。
发现酒石酸铵为桑黄最适氮源。以酒石酸铵作为氮源时，菌丝生长速率可为2.52mm/d。
实施例2
一种促进桑黄菌丝生长的培养基，其培养基配方如下：麦芽糖16g/L；酒石酸铵0.25g/L；KH2PO4 0.8g/L；MgSO4•7H2O 0.3g/L；VB1 8mg/L；琼脂18g/L。
其配置方法为：称取麦芽糖、酒石酸铵、KH2PO4、MgSO4•7H2O、VB1，溶解于1L水中加入，充分搅拌均匀，加入琼脂后加热搅拌直至琼脂融化；分装入三角瓶中，在瓶口用封口膜密封好，121℃灭菌30min备用。
桑黄培养：
（1）接种：待培养基温度降至36℃时，接种桑黄，封口膜密封后放入培养箱培养；
（2）菌丝生长：桑黄在上述培养基上共生长10天，接种第三天开始划线，之后每24小时划一次线，共划6次线；同时，观察菌丝颜色、粗细、浓密程度和菌落长势。
实施例3
一种促进桑黄菌丝生长的培养基，其培养基配方如下：麦芽糖18g/L；酒石酸铵0.28g/L；KH2PO4 1.0g/L；MgSO4•7H2O 0.4g/L；VB110mg/L；琼脂20gg/L。
其配置方法为：称取麦芽糖、酒石酸铵、KH2PO4、MgSO4•7H2O、VB1，溶解于1L水中加入，充分搅拌均匀，加入琼脂后加热搅拌直至琼脂融化；分装入三角瓶中，在瓶口用封口膜密封好，121℃灭菌30min备用。
桑黄培养：
（1）接种：待培养基温度降至38℃时，接种桑黄，封口膜密封后放入培养箱培养；
（2）菌丝生长：桑黄在上述培养基上共生长10天，接种第三天开始划线，之后每24小时划一次线，共划6次线；同时，观察菌丝颜色、粗细、浓密程度和菌落长势。
实施例4
一种促进桑黄菌丝生长的培养基，其培养基配方如下：麦芽糖20g/L；酒石酸铵0.30g/L；KH2PO4 1.2g/L；MgSO4•7H2O 0.5g/L；VB1 12mg/L；琼脂22g/L。
其配置方法为：称取麦芽糖、酒石酸铵、KH2PO4、MgSO4•7H2O、VB1，溶解于1L水中加入，充分搅拌均匀，加入琼脂后加热搅拌直至琼脂融化；分装入三角瓶中，在瓶口用封口膜密封好，121℃灭菌30min备用。
本发明的另一目的在于提供一种利用上述促进桑黄菌丝生长的培养基进行桑黄培养的方法，其具体步骤如下：
（1）接种：待培养基温度降至40℃时，接种桑黄，封口膜密封后放入培养箱培养；
（2）菌丝生长：桑黄在上述培养基上共生长10天，接种第三天开始划线，之后每24小时划一次线，共划6次线；同时，观察菌丝颜色、粗细、浓密程度和菌落长势。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (3)
1. 一种促进桑黄菌丝生长的培养基，其特征在于，所述培养基配方如下：麦芽糖16-20g/L；酒石酸铵0.25-0.30g/L；KH2PO4 0.8-1.2g/L；MgSO4•7H2O 0.3-0.5g/L；VB1 8-12mg/L；琼脂18-22g/L。
2.根据权利要求1所述的一种促进桑黄菌丝生长的培养基，其特征在于，其配置方法为：称取麦芽糖、酒石酸铵、KH2PO4、MgSO4•7H2O、VB1，溶解于1L水中加入，充分搅拌均匀，加入琼脂后加热搅拌直至琼脂融化；分装入三角瓶中，在瓶口用封口膜密封好，121℃灭菌30min备用。
3.利用权利要求1所述一种促进桑黄菌丝生长的培养基进行桑黄培养的方法，其特征在于，其具体步骤如下：
（1）接种：待培养基温度降至36-40℃时，接种桑黄，按菌丝与培养料体积为1：50接种，封口膜密封后放入培养箱培养；
（2）菌丝生长：桑黄在上述培养基上共生长10天，于接种的第三天开始测量菌丝生长速度具体方法为：用签字笔在培养皿上描绘最外圈菌丝，并用尺子测量菌落直径，每24小时测量一次，共测量6次以记录菌丝生长情况；同时，观察菌丝颜色、粗细、浓密程度和菌落长势。
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