CN101983955A - 桑黄菌丝体培养基及采用该培养基发酵桑黄菌丝体的工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了桑黄菌丝体培养基及采用该培养基发酵桑黄菌丝体的工艺，每升中各组份重量为：麦芽糖25-35g，酵母粉18-25g，矿质元素2.4-4.2g，维生素B15-10mg、维生素B23-5mg、维生素B60.5-1mg、烟酰胺20-30mg、泛酸钙2-3mg，桑枝水提物3-10g，其余为水。将桑黄菌丝体放入培养液中培养时间4-6天，接种量10-20％，培养温度22-29℃，摇瓶装液量50-70％，往复式摇床转速100-150rpm，发酵时间为5-10天。本发明的优点是：本发明具有成分清晰、质量稳定，且提供桑黄专属营养源，可用于具有药用活性的桑黄菌丝体大规模培养。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体的说，是涉及桑黄菌丝体培养基及采用该培养基发酵桑黄菌丝体的工艺。
背景技术
桑黄，担子菌亚门，层菌纲，多孔菌目，多孔菌科，针层孔菌类真菌。学名Phellinus Linteus，中文名裂蹄针层孔菌，俗称桑臣、桑黄菇等；是寄生于桑树等阔叶树的一种药用真菌，因为具有独特的抗癌等功效，已引起国内外医药界与保健品行业的关注。近年来，日本、韩国相继对其进行开发，主要应用于肝炎及癌症的治疗，疗效显著。据有关资料显示，桑黄对肿瘤抑制率高达96.78％，是目前国际公认的生物抗癌领域中有效率最佳的药用真菌。
在我国，桑黄入药已有2000多年的历史，最早记载始于《本草纲目》。由于桑黄的生长需要较为特殊的自然气候环境、生长期长，因而，天然的桑黄数量非常稀少。虽然桑黄菌能寄生于杨、柳、桦、栎等阔叶树种及松树的树干及枯木上，但采自这些树种上的桑黄其营养成分及抗病效果均远不及产自桑树的桑黄，故自古以来，唯桑树上的桑黄才是正品和极品。民间有“如得到附生于桑树上的黄色疙瘩(桑黄)，死人也可复活”的传说。由于国内外市场对桑黄的需求量越来越大，致使国内各产地药农掠夺性采集，子实体孢子无法大量形成，结果造成桑黄资源在我国已难觅踪影，即将枯竭。因此采用液体深层培养技术大规模生产桑黄菌丝体是满足国内外市场需要的有效途径。在现有生产技术和文献报道中，桑黄液体培养采用的发酵培养基主要采用天然农副产品为碳氮源，如土豆汁、糖蜜、黄豆饼粉、玉米浆等，
在这种培养基条件下培养出的桑黄菌丝体是否具有野生桑黄等效的药用价值有待进一步研究。
发明内容
为了解决上述问题，本发明的主要目的在于提供桑黄菌丝体培养基，以提供桑黄菌寄生于桑树时所摄取的营养物质，同时提供采用该培养基发酵桑黄菌丝体的工艺。
为了解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：桑黄菌丝体培养基，包括以下组份，每升中各组份重量为：麦芽糖25-35g，酵母粉18-25g，MgSO4 0.8-1.5g，KH2PO4 0.8-1.2g，柠檬酸三铵0.8-1.5g，维生素B15-10mg、维生素B23-5mg、维生素B6 0.5-1mg、烟酰胺20-30mg、泛酸钙2-3mg，桑枝水提物3-10g，其余为水。
优选的，所述每升中各组份重量为：麦芽糖28g，酵母粉22g，MgSO4 1.2g，KH2PO4 0.9g，柠檬酸三铵1.1g，维生素B18mg、维生素B25mg、维生素B60.6mg、烟酰胺28mg、泛酸钙3.0mg，桑枝水提物5g，其余为水；
优选的，所述每升中各组份重量为：麦芽糖30g，酵母粉20g，MgSO4 1.0g，KH2PO41.0g，柠檬酸三铵1.0g，维生素B18mg、维生素B24mg、维生素B60.52mg、烟酰胺26mg、泛酸钙2.6mg，桑枝水提物5g，其余为水；能达到最佳效果的培养液配方。
优选的，所述每升中各组份重量为：麦芽糖35g，酵母粉22g，MgSO4 1.1g，KH2PO4 1.2g，柠檬酸三铵1.1g，维生素B17mg、维生素B26mg、维生素B60.6mg、烟酰胺28mg、泛酸钙3.0mg，桑枝水提物4g，其余为水；
采用上述该培养基发酵桑黄菌丝体的工艺，将桑黄菌丝体放入培养液中培养时间4-6天，接种量10-20％，培养温度22-29℃，摇瓶装液量50-70％，往复式摇床转速100-150rpm，发酵时间为5-10天。
优选的，所述桑黄菌丝体放入培养液中培养时间为4天，接种量13％，培养温度25℃，摇瓶装液量50％，往复式摇床转速110rpm，发酵时间为9天；
优选的，所述桑黄菌丝体放入培养液中培养时间为5天，接种量15％，培养温度27℃，摇瓶装液量60％，往复式摇床转速120rpm，发酵时间为7天；能达到最佳效果的桑黄菌丝体发酵工艺。
优选的，所述桑黄菌丝体放入培养液中培养时间为4天，接种量14％，培养温度28℃，摇瓶装液量70％，往复式摇床转速120rpm，发酵时间为7天；
与现有技术相比，本发明的优点是：采用本发明培养基液体发酵过程中桑黄菌丝体生长迅速，桑黄菌丝体产量最高可达25g/L，是目前深层培养桑黄菌丝体产量最高报道；同时培养基中引入桑枝提取物，为桑黄菌丝体的药用活性成分合成提供桑树营养元素，使培养出的桑黄菌丝体的药用活性更接近野生桑黄。本发明具有成分清晰、质量稳定，且提供桑黄专属营养源(桑枝提取物)，可用于具有药用活性的桑黄菌丝体大规模培养。
具体实施方式
实施例1：
配置本发明中所述的桑黄菌丝体培养基1L，每升中各组份重量为：麦芽糖28g，酵母粉22g，MgSO4 1.2g，KH2PO4 0.9g，柠檬酸三铵1.1g，维生素B18mg、维生素B25mg、维生素B60.6mg、烟酰胺28mg、泛酸钙3.0mg，桑枝水提物5g。将培养基分装到50mL摇瓶中，装液量为装25mL，培养基灭菌温度120℃，灭菌时间30min。
采用该培养基发酵桑黄菌丝体的工艺：将桑黄菌丝体放入培养液中培养4天，接种量13％(V/V)，培养温度25℃，摇瓶装液量50％，往复式摇床转速110rpm，发酵时间为9天。每24h取样，8000rpm离心10min，用蒸馏水洗涤菌丝体3次，-50℃真空冷冻干燥至恒重，称重第9天可达21g/L。
实施例2：
配置本发明中所述的桑黄菌丝体培养基1L，每升中各组份重量为：麦芽糖30g，酵母粉20g，MgSO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，柠檬酸三铵1.0g，维生素B1 8mg、维生素B24mg、维生素B60.52mg、烟酰胺26mg、泛酸钙2.6mg，桑枝水提物5g。将培养基分装到50mL摇瓶中，装液量为装30mL，培养基灭菌温度：121℃，灭菌时间：30min。
采用该培养基发酵桑黄菌丝体的工艺：将桑黄菌丝体放入培养液中培养5天，接种量15％(V/V)，培养温度27℃，摇瓶装液量60％，往复式摇床转速120rpm，发酵时间为7天。每24h取样，8000rpm离心10min，用蒸馏水洗涤菌丝体3次，-50℃真空冷冻干燥至恒重，称重第7天可达25g/L。
实施例3：
配置本发明中所述的桑黄菌丝体培养基1L，每升中各组份重量为：麦芽糖35g，酵母粉22g，MgSO4 1.1g，KH2PO4 1.2g，柠檬酸三铵1.1g，维生素B17mg、维生素B26mg、维生素B60.6mg、烟酰胺28mg、泛酸钙3.0mg，桑枝水提物4g。将培养基分装到50mL摇瓶中，装液量为装35mL，培养基灭菌温度：122℃，灭菌时间：30min。
采用该培养基发酵桑黄菌丝体的工艺：将桑黄菌丝体放入培养液中培养4天，接种量14％(V/V)，培养温度28℃，摇瓶装液量70％，往复式摇床转速120rpm，发酵时间为7天。每24h取样，8000rpm离心10min，用蒸馏水洗涤菌丝体3次，-50℃真空冷冻干燥至恒重，称重第7天可达23g/L。
以上所述仅为本发明的具体实施例，但本发明的技术特征并不局限于此，任何本领域的技术人员在本发明的领域内，所作的变化或修饰皆涵盖在本发明的专利范围之中。
Claims (8)
1.桑黄菌丝体培养基，其特征在于：包括以下组份，每升中各组份重量为：麦芽糖25-35g，酵母粉18-25g，MgSO4 0.8-1.5g，KH2PO4 0.8-1.2g，柠檬酸三铵0.8-1.5g，维生素B15-10mg、维生素B23-5mg、维生素B60.5-1mg、烟酰胺20-30mg、泛酸钙2-3mg，桑枝水提物3-10g，其余为水。
2.如权利要求1所述的桑黄菌丝体培养基，其特征在于：所述每升中各组份重量为：麦芽糖28g，酵母粉22g，MgSO4 1.2g，KH2PO4 0.9g，柠檬酸三铵1.1g，维生素B18mg、维生素B25mg、维生素B60.6mg、烟酰胺28mg、泛酸钙3.0mg，桑枝水提物5g，其余为水。
3.如权利要求1所述的桑黄菌丝体培养基，其特征在于：所述每升中各组份重量为：麦芽糖30g，酵母粉20g，MgSO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，柠檬酸三铵1.0g，维生素B18mg、维生素B24mg、维生素B60.52mg、烟酰胺26mg、泛酸钙2.6mg，桑枝水提物5g，其余为水。
4.如权利要求1所述的桑黄菌丝体培养基，其特征在于：所述每升中各组份重量为：麦芽糖35g，酵母粉22g，MgSO4 1.1g，KH2PO4 1.2g，柠檬酸三铵1.1g，维生素B 17mg、维生素B26mg、维生素B60.6mg、烟酰胺28mg、泛酸钙3.0mg，桑枝水提物4g，其余为水。
5.采用如权利要求1所述的桑黄菌丝体培养基发酵桑黄菌丝体的工艺，其特征在于：将桑黄菌丝体放入培养液中培养时间4-6天，接种量10-20％，培养温度22-29℃，摇瓶装液量50-70％，往复式摇床转速100-150rpm，发酵时间为5-10天。
6.如权利要求5所述的培养基发酵桑黄菌丝体的工艺，其特征在于：所述桑黄菌丝体放入培养液中培养时间为4天，接种量13％，培养温度25℃，摇瓶装液量50％，往复式摇床转速110rpm，发酵时间为9天。
7.如权利要求5所述的培养基发酵桑黄菌丝体的工艺，其特征在于：所述桑黄菌丝体放入培养液中培养时间为5天，接种量15％，培养温度27℃，摇瓶装液量60％，往复式摇床转速120rpm，发酵时间为7天。
8.如权利要求5所述的培养基发酵桑黄菌丝体的工艺，其特征在于：所述桑黄菌丝体放入培养液中培养时间为4天，接种量14％，培养温度28℃，摇瓶装液量70％，往复式摇床转速120rpm，发酵时间为7天。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20110309 |