CN103756912A - 一种桑黄复壮培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明提供的一种桑黄复壮培养基，至少由以下重量份的组分制成：马铃薯200-400份，葡萄糖15-25份，琼脂15-20份；桑枝、桑叶和桑葚中的一种或几种，其用量占其余组分总质量的0.1-5%。该培养基原料来源丰富、成本低廉、制备工艺简单、使用方便，能够使桑黄活力增加，菌丝体增多，缩短培养周期，使桑黄在大规模培养之前得以复壮，从而达到更加高效快速的培养；其原料天然，无毒无害，是一种绿色的培养基，保证了桑黄的质量。
Description
技术领域
本发明属于微生物培养领域，特别涉及一种桑黄复壮培养基。
背景技术
桑黄，基原为多孔菌科针层孔菌的子实体，拉丁学名：phellinus igniarius，又名火木层孔菌，子实体无柄，菌盖扁半球形或马蹄形，（2-12）cm×（3-21）cm，厚1.5-10cm，木质，浅肝褐色至暗灰色或黑色，老时常龟裂，无皮壳，初期有细微绒毛，后变无毛，有同心环棱。边缘钝，深肉桂色至浅咖啡色，下侧无子实层。菌肉深咖啡色，硬，木质。菌管与菌肉近同色，多层，但层次不明显，年老的菌管层充满白色菌丝。管口锈褐色至酱色，圆形，每毫米4-5个。孢子近球形，光滑，无色，（5-6）μm×（3-4）μm。刚毛顶端尖锐，基部膨大，（10-25）μm×（5-7）μm。菌丝不分枝，无横隔，直径3-5μm。生于杨、柳、桦、栎等树干上。分布东北、华北、西北及四川、云南等地。
桑黄中含有丰富的多糖，桑黄多糖被认为是有效的预防和治疗肝纤维化和肝癌的物质之一，由于其强大的抗炎、抗氧化和抗癌特性，已应用于中医药治疗肿瘤、月经不调等疾病。桑黄的抗癌作用研究比较多见，对H-22、S-180和Lewis肺癌均表现出较好的抑瘤作用，激活巨噬细胞、增强其吞噬功能、诱导巨噬细胞产生和分泌肿瘤坏死因子是桑黄抗肿瘤作用的重要机制之一。另外，还具有抗突变、抗肝纤维化、抗脂质过氧化、增强人外周血单个核细胞（PMNCs）产生γ-干扰素（IFN-γ）抗血管形成、降血脂以及抗肺炎等作用。
然而，桑黄的生长对环境要求相对苛刻，需要在特殊的纬度以及特殊的环境中才能较好的生长，难以大范围的人工栽培种植，目前使用中的桑黄大部分是在自然环境中采集以及在实验室里的小规模培养研究，这就很大程度上限制了它的研究和应用，进一步增加了利用它为人类谋福利的难度。
发明内容
发明目的：本发明的目的在于提供一种桑黄复壮培养基，该培养基能够有效解决桑黄在液体培养及大规模培养时菌种活力不足造成的培养周期长、菌丝体不足等问题。
技术方案：本发明提供的一种桑黄复壮培养基，至少由以下重量份的组分制成：马铃薯200-400份，葡萄糖15-25份，琼脂15-20份；桑枝、桑叶和桑葚中的一种或几种， 其用量占其余组分总质量的0.1-5%。
优选地，所述桑黄复壮培养基，至少由以下重量份的组分制成：马铃薯250-350份，葡萄糖15-25份，琼脂15-20份；桑枝、桑叶和桑葚中的一种或几种，其用量占其余组分总质量的1-5%。
更优选地，所述桑黄复壮培养基，至少由以下重量份的组分制成：马铃薯300份，葡萄糖20份，琼脂20份；桑枝、桑叶和桑葚中的一种或几种，其用量占其余组分总质量的1-5%。
本发明还提供了上述桑黄复壮培养基在桑黄培养中的应用。
有益效果：本发明提供的桑黄复壮培养基原料来源丰富、成本低廉、制备工艺简单、使用方便，能够使桑黄活力增加，菌丝体增多，缩短培养周期，使桑黄在大规模培养之前得以复壮，从而达到更加高效快速的培养；其原料天然，无毒无害，是一种绿色的培养基，保证了桑黄的质量。
该培养基不但适宜实验室使用，工业企业同样适用，由于所需材料并没有特别严格的要求，因此，不但成本低廉，可操作性强，而且能够避免由于操作者操作失误而造成严重的损失。
附图说明
图1为编号为1-6的桑黄培养基中桑黄菌丝体重量。
图2为编号为7-12的桑黄培养基中桑黄菌丝体重量。
图3为编号为13-18的桑黄培养基中桑黄菌丝体重量。
图4为编号1、3、5的桑黄复壮培养基中菌落生长情况。
图5为编号3、9、15的桑黄复壮培养基中菌落生长情况。
图6为对比培养基中菌落生长情况。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1
桑黄复壮培养基的制备，包括以下步骤：
选取桑树枝条清洗干净后，在60℃烘箱内48h烘干，粉碎后过20目筛，得桑枝粉；
取马铃薯200-400克，葡萄糖15-25克，琼脂15-20克，桑枝条粉分别按马铃薯、葡萄糖和琼脂总质量的0.1%、0.3%、0.5%、1%、3%、5%量加入。
分别用250ml锥形瓶分装，经121℃灭菌20分钟，取出后摇匀倒平板，制得编号为1-6的桑黄复壮培养基，其配方见表1。
表1编号为1-6的桑黄复壮培养基配方
| 编号 | 马铃薯g | 葡萄糖g | 琼脂g | 桑枝条粉% | 水mL |
| 1 | 200 | 25 | 15 | 0.1 | 1000 |
| 2 | 250 | 15 | 20 | 0.3 | 1000 |
| 3 | 300 | 20 | 15 | 0.5 | 1000 |
| 4 | 300 | 25 | 20 | 1.0 | 1000 |
| 5 | 350 | 20 | 15 | 3.0 | 1000 |
| 6 | 400 | 15 | 20 | 5.0 | 1000 |
将桑黄分别接入编号为1-6的桑黄培养基中，22-26℃培养箱内培养10d，刮取全部菌丝体，称重，结果见图1，由图1和对比例1可知，加入桑枝粉后，能够大大增加菌丝体的质量。
菌落生长情况见图4；其中，图4自左向右三个培养皿中依次为编号1、3、5的桑黄复壮培养基中菌落生长情况。
实施例2
桑黄复壮培养基的制备，包括以下步骤：
选取桑叶清洗干净后，在60℃烘箱内48h烘干，粉碎后过20目筛，得桑叶粉；
马铃薯200-400克，葡萄糖15-25克，琼脂15-20克，桑叶粉按马铃薯、葡萄糖和琼脂总质量的0.1%、0.3%、0.5%、1%、3%、5%量加入。
分别用250ml锥形瓶分装，经121℃灭菌20分钟，取出后摇匀倒平板，制得编号为7-12的桑黄复壮培养基。
表2编号为7-12的桑黄复壮培养基配方
| 编号 | 马铃薯g | 葡萄糖g | 琼脂g | 桑枝条粉g | 水ml |
| 7 | 200 | 25 | 15 | 0.1 | 1000 |
| 8 | 250 | 15 | 20 | 0.3 | 1000 |
| 9 | 300 | 20 | 15 | 0.5 | 1000 |
| 10 | 300 | 25 | 20 | 1.0 | 1000 |
| 11 | 350 | 20 | 15 | 3.0 | 1000 |
| 12 | 400 | 15 | 20 | 5.0 | 1000 |
将桑黄分别接入编号为7-12的桑黄培养基中，22-26℃培养箱内培养10d，刮取全部菌丝体，称重，结果见图2，由图2和对比例1可知，加入桑叶粉后，能够大大增加菌丝体的质量。
实施例3
桑黄复壮培养基的制备，包括以下步骤：
选取成熟桑椹清洗干净后，-20℃冷冻48小时冷冻干燥，磨粉后过20目筛，得桑葚粉；
马铃薯200-400克，葡萄糖15-25克，琼脂15-20克，桑椹粉按马铃薯、葡萄糖和琼脂总质量的0.1%、0.3%、0.5%、1%、3%、5%量加入。
分别用250ml锥形瓶分装，经121℃灭菌20分钟，取出后摇匀倒平板，制得编号为13-18的桑黄复壮培养基。
表3编号为13-18的桑黄复壮培养基配方
| 编号 | 马铃薯g | 葡萄糖g | 琼脂g | 桑枝条粉g | 水ml |
| 13 | 200 | 25 | 15 | 0.1 | 1000 |
| 14 | 250 | 15 | 20 | 0.3 | 1000 |
| 15 | 300 | 20 | 15 | 0.5 | 1000 |
| 16 | 300 | 25 | 20 | 1.0 | 1000 |
| 17 | 350 | 20 | 15 | 3.0 | 1000 |
[0043]
| 18 | 400 | 15 | 20 | 5.0 | 1000 |
将桑黄分别接入编号为13-18的桑黄培养基中，22-26℃培养箱内培养10d，刮取全部菌丝体，称重，结果见图3，由图3和对比例1可知，加入桑葚粉后，能够大大增加菌丝体的质量。
菌落生长情况见图5；其中，图5自左向右三个培养皿中依次为编号3、9、15的桑黄复壮培养基中菌落生长情况。
对比例1
对比培养基的制备，包括以下步骤：马铃薯200-400克，葡萄糖15-25克，琼脂15-20克；分别用250ml锥形瓶分装，经121℃灭菌20分钟，取出后摇匀倒平板，制得对比培养基。
将桑黄接入对比培养基中，22-26℃培养箱内培养10d，刮取全部菌丝体，称重。菌丝体重量为97。
菌落生长情况见图6。
Claims (4)
1.一种桑黄复壮培养基，其特征在于：至少由以下重量份的组分制成：马铃薯200-400份，葡萄糖15-25份，琼脂15-20份；桑枝、桑叶和桑葚中的一种或几种，其用量占其余组分总质量的0.1-5%。
2.根据权利要求1所述的一种桑黄复壮培养基，其特征在于：至少由以下重量份的组分制成：马铃薯250-350份，葡萄糖15-25份，琼脂15-20份；桑枝、桑叶和桑葚中的一种或几种，其用量占其余组分总质量的1-5%。
3.根据权利要求1所述的一种桑黄复壮培养基，其特征在于：至少由以下重量份的组分制成：马铃薯300份，葡萄糖20份，琼脂20份；桑枝、桑叶和桑葚中的一种或几种，其用量占其余组分总质量的1-5%。
4.权利要求1至3所述的桑黄复壮培养基在桑黄培养中的应用。
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