CN106841498A - 一种测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法 - Google Patents

一种测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法，包括以下步骤：(1)烟草冷杉醇的超声提取：取烟草或烟草制品碾成的烟草粉末，置于离心玻璃管中，加入提取溶剂，并加入一定体积的水，超声提取烟草冷杉醇；(2)烟草冷杉醇提取液的分离：提取液冷却至室温，充分振荡，离心；(3)精确移取上层溶液，在氮气保护条件下吹干，再用流动相溶解后，过0.22um有机滤膜过滤至液相谱安培瓶中，待测；(4)对所得待测液进行液相色谱测定。采用超声波技术，降低了烟草冷杉醇的提取时间，且烟草冷杉醇的提取、分离均在离心管中完成，溶剂用量少，操作简单，节约成本，减少污染，提高工作效率，适用于批量样品分析，且测定结果准确性及精密度高。

Description

一种测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法
技术领域
本发明属于检测技术领域，具体涉及一种测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法。
背景技术
冷杉醇，又名十六元醇，因最早在杉属植物冷杉中提取而出得名，顺-冷杉醇常用于烟草行业，以增加烟草香气。顺-冷杉醇经调制、醇化后，90％的冷杉醇发生氧化、降解和转化，其降解产物主要是C-16的化合物，包括降龙涎香醚、龙涎香内酯等具有强烈的龙涎香香气的物质，对增加卷烟香气和吸味非常有效。常用于烟草浸膏中。到目前为止，冷杉醇的测定方法的报导很少，也没有形成常规的测定方法。Severson等人采用气相色谱测定了主要的表皮蜡质成分，但易引起冷杉醇分析时的降解得不到好的峰型难以定量。也有采用正相液相色谱方法测定了烟叶中顺冷杉醇，但纯化步骤较为繁琐，测定周期长。本发明是采用反相液相色谱方法进行测定，尚未发现相关报道。
发明内容
针对冷杉醇测定方法的缺少及仅有几项技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法。该方法应用超声波技术，降低了烟草冷杉醇的提取时间，使烟草冷杉醇的提取、分离均在离心管中完成，适用于批量检测，且溶剂用量少，操作简单，节约成本，减少污染，提高工作效率，测定结果准确性及精密度高。
为达到上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法，包括以下步骤：
(1)烟草冷杉醇的超声提取：取烟草或烟草制品碾成的烟草粉末，置于离心玻璃管中，加入提取溶剂，并加入一定体积的水，超声提取烟草冷杉醇；
(2)烟草冷杉醇提取液的分离：提取液冷却至室温，充分振荡，离心；
(3)精确移取上层溶液，在氮气保护条件下吹干，再用流动相溶解后，过0.22um有机滤膜过滤至液相谱安培瓶中，待测；
(4)对所得待测液进行液相色谱测定。
进一步的，所述步骤(1)中烟草或烟草制品为各种类型的调制后烟叶、青烟叶、烟梗以及提取烟碱后的烟草残渣中的任意一种，烘干粉碎成烟草粉末。
进一步的，所述步骤(1)中的提取溶剂为二氯甲烷，二氯甲烷和水的加入量的体积比为1:1。通过实验二氯甲烷提取量最大，提取效果最好。
进一步的，所述步骤(1)中的离心玻璃管上设有聚四氟乙烯密封盖，冷杉醇在提取过程中，旋紧密封盖，以防止溶剂挥发影响结果测定的准确性。
进一步的，所述步骤(1)中超声提取的条件是：超声频率40KHz，温度30℃，时间10min。
进一步的，所述步骤(2)中超声提取完成后，离心过程采用3000转/分离心10min，利用液液分配原理，将烟草中的冷杉醇转移至上层二氯甲烷相中，提取后样品残渣保留在下层水相中。
进一步的，步骤(4)中液相色谱测定条件是，使用超高效液相色谱仪，色谱柱：BEHC18(1.7um 2.1*50mm)，流动相的体积比为水：乙腈＝30：70，流速：0.3mL/min，柱温：36℃，检测波长：273nm。
本发明的有益效果是：
本发明采用超声波技术，降低了烟草冷杉醇的提取时间，且烟草冷杉醇的提取、分离均在离心管中完成，溶剂用量少，操作简单，节约成本，减少污染，提高工作效率，适用于批量样品分析，且测定结果准确性及精密度高。
附图说明
图1为本发明烟草冷杉醇标准品及样品的液相色谱图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1
一种测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法，其步骤包括：
(1)烟草冷杉醇的超声提取：取烟草或烟草制品碾成的烟草粉末，置于离心玻璃管中，加入提取溶剂，并加入一定体积的水，超声提取烟草冷杉醇；
(2)烟草冷杉醇提取液的分离：提取液冷却至室温，充分振荡，离心；
(3)精确移取上层溶液1mL，在氮气保护条件下吹干，再用1ml流动相溶解后，过0.22um有机滤膜过滤至液相谱安培瓶中，待测；
(4)对所得待测液进行液相色谱测定。
进一步的，所述步骤(1)中烟草或烟草制品为各种类型的调制后烟叶、青烟叶、烟梗以及提取烟碱后的烟草残渣中的任意一种，烘干粉碎成烟草粉末，称量0.2g，精确至0.0001g，采用的提取溶剂为二氯甲烷，加入量为5ml，加入水的体积也为5ml。
进一步的，所述步骤(1)中的离心玻璃管体积≥20ml，并设有聚四氟乙烯密封盖，冷杉醇在提取过程中，旋紧密封盖，以防止溶剂挥发影响结果测定的准确性。
进一步的，所述步骤(1)、步骤(2)中，超声提取的条件是：超声频率40KHz，温度30℃，时间10min；提取完成后，冷却至室温，充分振荡，3000转/分离心10min，利用液液分配原理，将烟草中的冷杉醇转移至上层二氯甲烷相中，提取后样品残渣保留在下层水相中。
进一步的，所述步骤(4)中液相色谱测定条件是，采用超高效液相色谱仪，色谱柱：BEHC181.7um2.1*50mm，流动相的体积比为水：乙腈＝30：70，流速：0.3mL/min，柱温：36℃，检测波长：273nm。
实施例2
称取过60目筛烟草粉末样品0.1g，精确至0.0001g，放入20mL带有聚四氟乙烯密封盖的离心玻璃管中，准确加入5mL提取溶剂二氯甲烷，旋紧密封盖，放入恒温超声提取仪中，在超声频率为45kHz，温度30℃、时间10min条件下进行目标化合物提取。提取完成后，待提取液冷却至室温，在3000转/分条件下离心10min。
精确移取上清液1mL，在氮气保护条件下吹干，再用1mL流动相溶解后，用0.22um有机滤膜过滤至液相色谱安培瓶中，应用液相色谱进行检测，如图1所示。冷杉醇在3.991分钟时出峰，样品冷杉醇含量0.062％。
本发明是采用反相液相色谱方法进行测定，尚未发现同类相关研究报道，与仅有的气相色谱测定及正相液相色谱方法相比，提取效果好，回收率高，且较稳定，方法的重现性较好，溶剂用量少，提取时间短，操作简单，可提高工作效率，节约成本，测定结果准确性及精密度高。
表1为添加回收率试验结果
表2为精密度试验结果，具体试验结果参考表2.1和表2.2
表2.1不同烟草样品的平行试验结果
2.2同一烟草样品不同测定日期试验结果
时间 第一天 第二天 第三天 第四天 第五天 第六天 平均值 RSD％
测定值％ 0.056 0.051 0.053 0.053 0.051 0.054 0.053 3.58
表3不同提取溶剂冷杉醇提取率比较研究结果％(n＝6)
以上所述并非是对本发明的限制，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，并不局限于此，在不脱离本发明实质范围的前提下，还可以做出若干变化、改型、添加或替换，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)烟草冷杉醇的超声提取：取烟草或烟草制品碾成的烟草粉末，置于离心玻璃管中，加入提取溶剂，并加入一定体积的水，超声提取烟草冷杉醇；
(2)烟草冷杉醇提取液的分离：提取液冷却至室温，充分振荡，离心；
(3)精确移取上层溶液，在氮气保护条件下吹干，再用流动相溶解后，过0.22um有机滤膜过滤至液相谱安培瓶中，待测；
(4)对所得待测液进行液相色谱测定。
2.根据权利要求1所述测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法，其特征在于，所述步骤(1)中烟草或烟草制品为各种类型的调制后烟叶、青烟叶、烟梗以及提取烟碱后的烟草残渣中的任意一种，烘干粉碎成烟草粉末。
3.根据权利要求1所述测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的提取溶剂为二氯甲烷，二氯甲烷和水的加入量的体积比为1:1。
4.根据权利要求1所述测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的离心玻璃管上设有聚四氟乙烯密封盖，冷杉醇在提取过程中，旋紧密封盖。
5.根据权利要求1所述测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法，其特征在于，所述步骤(1)中超声提取的条件是：超声频率40KHz，温度30℃，时间10min。
6.根据权利要求1所述测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法，其特征在于，所述步骤(2)中超声提取完成后，离心过程采用3000转/分离心10min，利用液液分配原理，将烟草中的冷杉醇转移至上层二氯甲烷相中，提取后样品残渣保留在下层水相中。
7.根据权利要求1所述测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法，其特征在于，步骤(4)中液相色谱测定条件是，使用超高效液相色谱仪，色谱柱：BEHC18 1.7um2.1*50mm，流动相的体积比为水：乙腈＝30：70，流速：0.3mL/min，柱温：36℃，检测波长：273nm。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109957393A (zh) * 2017-12-26 2019-07-02 中国农业科学院烟草研究所 一种具有化学发光性质的烟叶提取物及其化学发光体系
CN111700078A (zh) * 2020-05-14 2020-09-25 中国农业科学院烟草研究所 一种烟花提取物在植物病毒病防治中的应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58150527A (ja) * 1982-03-04 1983-09-07 Japan Tobacco Inc アビエノ−ル誘導体および該誘導体からなるたばこ用香喫味改良剤
JPH0853382A (ja) * 1994-08-12 1996-02-27 Rinyachiyou Shinrin Sogo Kenkyusho シス−アビエノール含有物質の製造方法
CN102986391A (zh) * 2011-09-08 2013-03-27 郑州大学 一种提高烟草次生代谢产物含量和香气的方法
CN103561595A (zh) * 2011-04-27 2014-02-05 R·J·雷诺兹烟草公司 源自烟草的组分和材料
CN105177162A (zh) * 2015-10-14 2015-12-23 中国农业科学院烟草研究所 检测烟草冷杉醇合成关键基因NtCPS2单核苷酸突变的特异引物及检测方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58150527A (ja) * 1982-03-04 1983-09-07 Japan Tobacco Inc アビエノ−ル誘導体および該誘導体からなるたばこ用香喫味改良剤
JPH0853382A (ja) * 1994-08-12 1996-02-27 Rinyachiyou Shinrin Sogo Kenkyusho シス−アビエノール含有物質の製造方法
CN103561595A (zh) * 2011-04-27 2014-02-05 R·J·雷诺兹烟草公司 源自烟草的组分和材料
CN102986391A (zh) * 2011-09-08 2013-03-27 郑州大学 一种提高烟草次生代谢产物含量和香气的方法
CN105177162A (zh) * 2015-10-14 2015-12-23 中国农业科学院烟草研究所 检测烟草冷杉醇合成关键基因NtCPS2单核苷酸突变的特异引物及检测方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
D. A. DANEHOWER ET AL: "A rapid method for the analysis of Z-abienol", 《TOBACCO SCIENCE》 *
席元肖 等: "不同颜色及成熟度烤烟香气前体物及降解产物含量的差异分析", 《中国烟草科技》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109957393A (zh) * 2017-12-26 2019-07-02 中国农业科学院烟草研究所 一种具有化学发光性质的烟叶提取物及其化学发光体系
CN109957393B (zh) * 2017-12-26 2022-03-08 中国农业科学院烟草研究所 一种具有化学发光性质的烟叶提取物及其化学发光体系
CN111700078A (zh) * 2020-05-14 2020-09-25 中国农业科学院烟草研究所 一种烟花提取物在植物病毒病防治中的应用

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