CN1065432C

CN1065432C - 降脂红曲及其制备方法

Info

Publication number: CN1065432C
Application number: CN97116744A
Authority: CN
Inventors: 张茂良; 彭启秀; 周玉芳
Original assignee: Peking University
Current assignee: Beijing Peking University WBL Biotech Co Ltd
Priority date: 1997-08-13
Filing date: 1997-08-13
Publication date: 2001-05-09
Anticipated expiration: 2017-08-13
Also published as: CN1207902A; HK1017614A1

Abstract

本发明涉及十九个红曲菌菌种以及用其发酵制备的红曲，该红曲是一种既能降低血脂又可降低血清总胆固醇的中药，具有健脾消食、活血化瘀的功能，长期服用没有临床意义上的副作用。该药也可用于治疗与高脂血症相关的其它心脑血管疾病。上述红曲制备方法简单，成本低。

Description

降脂红曲及其制备方法

本发明涉及一种红曲制剂，具有治疗高脂血症及相关心脑血管疾病的作用；本发明还涉及制备具有所述医疗作用的红曲的方法。

红曲是常用的食品添加剂，也是一种中药材，它的使用在中国已有一千多年的历史。红曲的发明约在汉朝，唐朝以后的五代人陶谷在《清异录》中有用“红曲煮肉”的记载。红曲是用红曲菌(Monascus species)在煮熟的大米上发酵制成的。制作红曲的方法最早记载于明代的《天工开物》和《本草纲目》中，李时珍对红曲作了最为完整的论述，一直沿用至今。红曲具有健脾消食、活血化瘀的功效，在《中华人民共和国药典》和北京市、内蒙古、山东省、江苏省以及湖南等省的地方中药材标准中，将红曲作为中药材使用；在中国高等学校的《食品添加剂》和《食品化学》教科书里，将红曲作为食品和饮料中的添加剂，广泛用于豆腐乳、酿酒和肉类等加工业中。

但是，按以前的一般生产方法制备的红曲，由于使用的侧重目的不同，其降低血脂的功效甚微，逐渐失去其药用价值，也从未作为治疗高脂血症的药物使用过。目前，治疗高脂血症的常用药物洛伐他丁(Lovastatin)，辛伐他丁(Simvastatin)和普伐他丁(Pravastatin)等，疗效虽然较好，但有一定的副作用。另外，这类药物是以降低人体血清总胆固醇为主，降低甘油三酯的作用不够理想。

本发明目的在于提供一种具有降低血清胆固醇和甘油三酯的红曲制剂及其制备方法。

实现本发明目的的技术方案如下。

首先，制备本发明的红曲，制备工艺为：

1．配制液体培养基：

由甘油(或麦芽汁或土豆汁)、糖和酵母(或牛肉膏或蛋白胨)的混合物以及水组成，其中甘油(或麦芽汁或土豆汁)占2％～7％，糖占2％～6％，酵母粉占0．5％～3％，少量消泡剂如豆油或花生油，其余为水，用醋酸调节PH值为3．0～5．0。

2．本发明所使用的固体培养基，包括碳源、氮源和磷源以及少量其它无机盐等。

碳源包括如米(籼米、粳米、糯米、红米和黑米等)、小米、大麦、玉米等粮食；糖类和含糖物质；某些有机化合物如甘油、甘油酯等。

氮源包括各种豆类如黄豆、榨油后的黄豆饼、花生或榨油后的花生饼蛋白胨、酵母粉、牛肉膏、蚕蛹粉等以及含氮无机盐如NH₄NO₃等。

磷源包括KH₂PO₄、K₂HPO₄等含磷无机盐。

其它无机盐如MgSO₄、FeCl₃等。

3．按每100克米计，加入25～80毫升培养液，控制PH值在2．5～8．0之间，蒸气(100℃～121℃)灭菌。加入培养液的量根据固体发酵设备的类型而定。

4．接种红曲菌菌种：

本发明人经过长期的实验研究，筛选出了一批特殊的红曲菌菌株，用这些菌株制得的红曲即具有降低胆固醇又能降低甘油三酯的作用，且能健脾消食、活血化瘀而副作用极低，这也是本发明的关键之一。

能够实现本发明目的的红曲菌菌株有：

紫色红曲菌(Monascus purpureus Went)，该菌种已在中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心进行保藏，保藏号为CGMCC No．0272。

下述已知红曲菌菌种(参见《中国菌种目录》，1992，中国微生物菌种保藏委员会编著，机械工业出版社)也能够实现本发明的目的：

(1)发白红曲菌(Monascus albidus Sato)

AS 3．570

AS 3．4440

CGMCC No．0317

(2)丛毛红曲菌(Monascus pilosus Sato)

AS 3．4444

AS 3．4633

AS 3．4646

AS 3．4647

(3)软毛红曲菌(Monascus pubigerus Sato)

AS 3．4445

(4)红色红曲菌(Monascus ruber van Tieghem)

AS 3．549

CGMCC No．0315

CGMCC No．0316

(5)巴斯红曲菌(Monascus paxii Lingelsheim)

AS 3．4453

(6)烟色红曲菌(Monascus fuliginosus Sato)

AS 3．569

AS 3．1098

AS 3．2091

AS 3．2093

AS 3．2134

IFFI 05035(IFFI：中国轻工业部食品发酵研究所菌种保藏中心)

以上菌株可以培养成固体菌种或液体菌种。

5．将固体培养基灭菌后，接固体或液体菌种，在7℃～35℃下发酵培养4天以上，优选培养温度为20℃～28℃。在发酵过程中，为了防止杂菌污染和控制温度，用PH为3．5的醋酸水溶液喷洒培养物。优选培养时间为9天以上。

6．将发酵后的固体培养物，经80℃～121℃蒸气灭菌，降压烘干，粉碎，备用。

用上述方法制备的红曲，也可以用70％～95％乙醇提取，提取液降压浓缩，蒸发(60℃～80℃，0．06～0．08MPa)至干，贮存，备用。

上述方法制备的红曲或其粗提取物，可以按照常规的药物制备工艺，直接制备成各种制剂，例如，胶囊剂，片剂，丸剂，散剂或液体制剂等，用于药品、保健药品、保健食品和食品添加剂等领域。制备制剂时，可以加入常规的赋形剂。

本发明制备的红曲，含有洛伐他丁(Lovastatin)及其前体化合物，例如：

本发明强调的是用上述特指的一类红曲菌菌株，通过发酵制备出来的红曲，既具有传统红曲的药效，又大大提高其中的洛伐他丁(Lovastatin)等物质的含量，克服了原来两者各自的不足，强化了它们综合的医疗效果。本发明的药物具有显著降低胆固醇、降低甘油三酯、升高高密度脂蛋白胆固醇和降低动脉粥样硬化指数的作用。单纯的statin类药物以降低人体内总胆固醇为主，降低甘油三酯的作用不够理想。本发明制备的红曲具有降低血清总胆固醇的作用，而且强化了降低甘油三酯的作用，本发明药物远小于纯statin类药物的副作用。本发明的药物可用于防治高脂血症及与其相关的其它心脑血管疾病，如动脉粥样硬化、冠心病、心肌梗塞、糖尿病、高血压、脑梗塞等。所有这些效果是单独的传统红曲或洛伐他丁(Lovastatin)所难于达到的。

根据中国医学科学院阜外心血管病医院、中国卫生部北京医院、北京中医药大学东直门医院、哈尔滨医科大学临床药理基地的临床试验证明，本发明制备的药物在降低胆固醇方面具有综合疗效：降低血清总胆固醇(TC)的有效率为23．0％，降低血清甘油三酯(TG)的有效率为36．5％，降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)的有效率为28．5％，升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)的有效率为19．6％，降低动脉粥样硬化指数的有效率为34．2％。总有效率93．2％，总显效率79．7％。服用本发明药物15～20天即可缓解或消除胸闷、胸痛、气短、头晕、肢体麻木等症状，安全性高，未见毒副作用。

实施例1

(1)液体菌种培养液：葡萄糖2％～4％，甘油3％～5％，牛肉膏0％～3％，蛋白胨0．8％～1．6％，酵母粉0％～3％，KH₂PO₄ 0．1％，MgSO₄·7H₂O 0．05％，其余为水。蒸气(121℃)灭菌，将试管斜面或平板培养皿中的红曲菌菌种接到菌种培养液中。30℃～34℃培养24～36小时。优选菌种培养液的成份为葡萄糖2％，甘油3％，牛肉膏1．5％，蛋白胨0．8％，酵母粉3％，KH₂PO₄ 0．1％，MgSO₄·7H₂O0．05％，其余为水。

(2)配制液体培养液：麦芽汁或土豆汁4％，糖8％，酵母1．5％，牛肉膏3％，用醋酸调节PH值为3．5，其余为水。

(3)每100克粳米中，加入50毫升培养液，高温蒸气(121℃)灭菌。

(4)待(2)冷却到40℃以下后，接种紫色红曲菌(Monascus purpurens)菌种，保藏号为CGMCC No．0272。

(5)在34℃下发酵培养3天，25℃左右下继续发酵9天以上。

(6)将培养物高温(100℃～121℃)灭菌，降压(80℃)烘干，制得本发明的红曲。

(7)将红曲粉碎至60～100目，装胶囊剂，作为药品或保健食品。

实施例2

(1)配制液体培养液：麦芽汁或土豆汁4％，葡萄糖8％，牛肉膏3％，蛋白胨3％，其余为水，用醋酸调节PH值为3；

(2)将用75％～95％乙醇提取后的红曲，干燥后，以各种比例与米混合均匀。按每100克混合物计，加入10克黄豆粉，50毫升培养液，蒸气灭菌，冷却至30℃～40℃，接10～20毫升液体发白红曲菌(Monascus albidus)菌种，保藏号CGMCC No．0317。在30℃～34℃下培养3～4天后，在23℃～25℃下继续发酵培养5天以上。将培养物在100℃～121℃蒸气灭菌，降压烘干，制得本发明的红曲。

(3)将红曲粉碎至200目，加入一定的赋形剂，制成片剂，作为药品或保健食品。

实施例3

配制培养液：麦芽汁4％，葡萄糖6％，酵母粉1％，蛋白胨6％，其余为水，用醋酸调节PH值为3。

每100克粳米中，加入豆饼粉15克，50毫升培养液，用蒸气(121℃)灭菌；接种20毫升红曲菌菌种发白红曲菌(Monascus albidus)菌种AS 3．4440；在25℃发酵培养9天以上。将发酵物用蒸气灭菌后，80℃烘干，制得本发明的红曲。

将红曲用75％乙醇提取，提取液经减压蒸发，回收乙醇；得到浓缩物，根据使用要求，可加入一定量的红曲粉，混合均匀，真空减压烘干，作为制备胶囊剂或片剂的原料药。

实施例4

配制培养液：麦芽汁4％，糖8％左右，酵母粉2％，牛肉膏5％，其余为水，用醋酸调节PH值为3。

每100克米中，加入50毫升培养液，用蒸气(121℃)灭菌。待冷却至40℃以下后，接种红曲菌发白红曲菌(Monascus albidus)菌种AS 3．570；在25℃下发酵12天以上。将发酵物用蒸气灭菌后，烘干，制得本发明的红曲。

将红曲粉碎至200目，用乙醇制粒，作为散剂。

实施例5

配制培养液：土豆汁3％，糖6％，酵母粉1．5％，蛋白胨4％，其余为水，用醋酸调节PH值为3。

每100克米中，加入10％黄豆粉，花生粉5％，80毫升培养液，用蒸气(121℃)灭菌；待冷却到40℃以下后，接种丛毛红曲菌(Monascus pilosusSato)菌种AS 3．4444；在30℃～34℃下培养3～4天后，将培养温度降低到23℃～25℃，继续培养10天以上，培养结束后，将培养物在100℃～121℃下蒸气灭菌，烘干，制得本发明的红曲。

将红曲用75％乙醇提取后，提取液蒸发浓缩，回收乙醇，浓缩物中加入少量可溶性淀粉，制备成散剂，作为药品或保健食品。

实施例6

配制培养液：土豆汁3％，糖5％，牛肉膏6％，其余为水，用醋酸调节PH值为3。

每100克碎米中，加入10％～20％花生粉，80毫升培养液，蒸气(121℃)灭菌；待冷却至40℃以下后，接种丛毛红曲菌(Monascus pilosus Sato)菌种AS 3．4633；在30℃～34℃下培养3天后，将培养温度调节到24℃，继续培养15天以上；培养结束后，蒸气灭菌，烘干，制得本发明的红曲。

实施例7

配制培养液：玉米浆或土豆汁3％，糖6％，酵母1．5％，蛋白胨4．5％，其余为水，用醋酸调节PH值为3。

每100克小米中，加入5％～20％豆饼粉，80毫升培养液，高温(121℃)灭菌；待冷却至40℃以下后，接种丛毛红曲菌(Monascus pi1osus)菌种AS3．4647；在25℃下培养18天以上；培养结束后，蒸气(121℃)灭菌，降压(60℃～80℃)烘干，制得本发明的红曲。

实施例8

配制培养液：土豆汁4％，糖7％，牛肉膏8％，其余为水，用醋酸调节PH值为3。

每100克米中，加入60毫升培养液，蒸气(121℃)灭菌；待温度冷却至40℃以下时，接种软毛红曲菌(Monascus pubigerus Sato)菌种AS 3．4445；在30℃～34℃下培养3天后，在25℃下继续发酵培养9天以上；发酵结束后，用蒸气(121℃)灭菌，80℃下烘干，制得本发明的红曲。

实施例9

配制培养液：豆浆5％，葡萄糖5％，酵母粉2％，大豆蛋白胨5％，其余为水，用醋酸调节PH值为3。

每100克米中，加入80毫升培养液，蒸气(121℃)灭菌；待温度冷却到40℃以下时，接种巴斯红曲菌(Monascus paxii)菌种AS 3．4453；在30℃～34℃温度下培养3天后，在23～25℃下继续发酵9天以上；发酵结束后，将培养物用蒸气(121℃)灭菌，于80℃下降压烘干，制得本发明的红曲。

实施例10

配制培养液：土豆汁4％，糖4％，酵母3％，其余为水，用醋酸调节PH值为3。

每100克米中，加入蚕蛹粉5克，60毫升培养液，蒸气(121℃)灭菌；待温度冷却到40℃以下时，接种烟色红曲菌(Monascus fuliginosus Sato)菌种AS 3．350，在温度30℃～34℃下培养3天后，在23～25℃温度下继续发酵9天以上；发酵结束后，用蒸气(121℃)灭菌，降压(60℃～80℃)烘干，制得本发明的红曲。

实施例11

配制培养液：麦芽汁3％，糖5％，牛肉膏6％，其余为水，用醋酸调节PH值为3。

每100克米中，加入80毫升培养液，蒸气(121℃)灭菌；待温度冷却到40℃以下时，接种烟色红曲菌(Monascus fuliginosus Sato)菌种AS 3．1098或AS 3．2091，AS 3．2093，AS 3．2134，AS 3．2160，IFFI 05035；在温度30℃～34℃下培养3天后，于23℃～25℃下继续发酵9天以上，发酵结束后，用蒸气(121℃)灭菌，在80℃下烘干，制得本发明的红曲。

实施例12

利用一般的红曲生产工艺，用本发明提出的红曲菌菌种，按下述步骤进行：

(1)浸米将500公斤米逐次装入米筐内，放在水中淘去糠秕，再水浸16～24小时，捞起，沥干(含水量约22％～24％)。

(2)蒸饭木甑在沸水大釜上加热后，将沥干的米倒进甑内，用猛火蒸50～70分钟，蒸毕，将饭摊在曲池竹蔑上，打散，使冷却至40℃以下时，接红曲菌固体菌种约20公斤，醋酸2．5～3公斤，拌匀。

(3)发酵前三天，每天翻动数次，保持温度为30℃～34℃。三天后，通风降温至23℃～25℃，每天翻动一次，视发酵物的干湿程度适当浇(用醋酸调节PH为3．5的)水，发酵15天以上。

(4)贮存发酵完成，灭菌，烘干，贮存。

这种大池发酵方法，也可以按本发明中其它实施例，加入一定比例的其它营养成份。通风发酵，可以用循环风，补充的空气必须是无菌空气。

Claims

1、一种红曲制剂的制备方法，其特征在于该制剂的制备方法如下：

配制培养液，所述培养液的组成为甘油，麦芽汁或土豆汁2％～7％，糖2％～6％，蛋白胨0％～3％，酵母粉0％～3％，牛肉膏0％～3％的混合物，少量消泡剂如豆油或花生油2‰～4‰等，其余为水，用醋酸调节PH值为3．5左右；

以每100克粳米计加入30～80毫升培养液，控制PH值在3．0～5．0之间，121℃蒸气灭菌；

待温度冷却到40℃以下后，接红曲菌菌种，所述红曲菌种选自下列三种菌种中之一种或多种：1)红色霉曲菌CGMCC NO．0315，2)红色霉曲菌CGMCC NO．0316，3)发白红曲菌CGMCCNO．0317，在15℃～35℃下发酵培养9天以上，所述菌种可以培养成液体菌种或固体菌种；

将培养物在60℃～121℃温度下灭菌，真空降压60℃～80℃左右烘干获得所述红曲制剂。

2、根据权利要求1所述的红曲制剂的制备方法，其特征在于将所述红曲制剂粉碎至80目，装胶囊剂。

3、根据权利要求1所述的红曲制剂的制备方法，其特征在于将所述红曲制剂粉碎成细粉，加入少量赋形剂，制成片剂。

4、根据权利要求1所述的红曲制剂的制备方法，其特征在于所述的培养温度为20℃～28℃，培养时间为9天以上。

5、根据权利要求1所述的红曲制剂的制备方法，其特征在于所述的红曲菌种培养基碳源选自粮食、糖类、有机化合物；氮源选自豆、花生粉、蛋白胨、酵母粉、牛肉膏以及含氮无机盐NH₄NO₃等；磷源可以是KH₂PO₄等含磷无机盐。

6、根据权利要求1所述的红曲制剂的制备方法，其特征在于所述的红曲菌种液体培养含有甘油，麦芽汁或土豆汁2％～7％，糖2％～6％，蛋白胨0％～3％，酵母粉0％～3％，牛肉膏0％～3％，少量消泡剂如豆油或花生油2‰～4‰等，其余为水，用醋酸调节PH值为3．5左右；接种红曲菌菌种后，在20℃～35℃下培养1～7天，作为液体菌种。

7、根据权利要求1所述的红曲制剂，其特征在于所述的红曲菌种固体培养基是每100克米中，土豆汁0～5％，糖0～6％，酵母粉或牛肉膏0％～1．5％的混合物，加水30～80毫升，用醋酸调节PH值为3．0～5．0左右；接种红曲菌菌种后，在20℃～35℃下培养3～7天，作为固体菌种。

8、根据权利要求7所述的红曲制剂的制备方法，其特征在于其培养设备可以用玻璃三角瓶，曲盘或者是通风发酵池等。