CN1634413A - 一种勒马回注射制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种勒马回注射制剂及其制备方法，其特征在于从中药水蔓菁中提取纯化的有效部位，与药用辅料组合，制备成水针剂、输液剂、粉针剂；其特征还在于本发明对制剂有效部位和药用辅料进行限定；药理实验结果表明，本发明各组制剂具有很好的安全性，与市售同类品种比较具有更好的药理作用。
Description
技术领域
本发明属于中药制药技术领域，具体涉及一种勒马回注射制剂及其制备方法。
背景技术
水蔓菁为玄参科婆婆纳属植物水蔓菁的干燥全草，该植物广布于甘肃至云南以东、陕西、山西和河北以南各省区，为多年生草本，高30-80cm，其性味苦、微寒，具有清热解毒、利尿、止咳化痰的功效，用于支气管炎、肺脓、急性肾炎、尿路感染、疖肿，水蔓菁别名蜈蚣草、斩龙剑(山东)、追风草(河北)、一支香、细叶婆婆纳(江苏)；以水蔓菁为原料药制备的勒马回注射液，在临床应用广泛，效果很好，具有清热解毒，止咳化痰，利尿的作用，用于痈肿疮毒，肺痈，咳嗽气喘，久咳不止，热淋涩痛，小便不利。
肺为五脏之华盖，位于胸中，上通喉咙，开窍于鼻，其主要生理功能是司呼吸，主一身之气，主宣发与肃降，外合皮毛，性喜清肃，与心、脾、肾多脏器关系密切，病理也相互影响，因此，肺部疾病会给患者带来巨大的痛苦，而肺痈是发生在肺部的一种脓疡病疾，是现代医学所称肺脓肿病，肺痈的发生和发展，大致可分为热邪壅肺及血肉腐败两期，热邪壅肺时期具有咳嗽、咳痰、发热恶寒、拌有胸痛、痰多等症状，血肉腐败时期具有痰热内结、热壅血瘀、肉腐血败，肺痈的治疗，西医主要应用大量的抗生素进行治疗，治疗过程中虽然缓解一系列症状，但导致人体菌群失调、耐药性增强等等不良反应，而中医药从五脏六腑的关系出发，进行辨证施治，从而从根本上解决了病症。
勒马回注射液在临床上具有很好的效果，但在临床应用过程中，只是简单进行了水提醇沉过程，因此，药材中很多鞣质等杂质没有除尽，容易出现临床副反应，因此在制剂制备过程中加入苯甲醇减少刺激性，但由于苯甲醇对婴幼儿有极为严重的副作用，因此这种方法效果不是很理想，给患者用药带来了很多肉体方面的痛苦。
查阅专利文献资料未检索到勒马回注射制剂资料。
发明内容
基于上述原因，本发明通过水提醇沉后，用聚酰胺柱除去杂质、富集有效成分，得到的有效部位，与药用辅料混合，制备成水针剂、输液剂、粉针剂，药理实验结果表明，本发明各组制剂具有更好的药理作用。
标准号为WS3-B-2775-97的勒马回注射液标准中提供了水蔓菁的提取过程，该方法采用水提取三次，每次时间依次为2、1、0.5小时，醇沉过程采用两次不同浓度乙醇沉淀，分别为60％、80％，水蔓菁属于草类植物，含有大量的果胶、纤维素，醇沉除杂的过程会导致有效成分被裹挟下来，从而降低了提取率，而本发明采用水提醇沉过程，充分考虑植物细胞组织结构，从而增加了提取率，使得制剂中有效成分含量进一步提高。
本发明通过以下技术方案实现的。
一.工艺制法
(1)取水蔓菁，粉碎，加水10-20倍，提取2-4次，每次1-3小时，合并提取液，滤过，滤液加入乙醇，使溶液乙醇的浓度为60％-70％，静置24小时，过滤，上清液回收乙醇至尽，得到浓缩液；
(2)取上述浓缩液，上聚酰胺柱，用4-8倍柱体积的水洗，再用6-8倍柱体积、60％-80％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩干燥，得到水蔓菁有效部位；
(3)勒马回注射制剂处方为：
水针剂水蔓菁有效部位12-18重量份；
输液剂水蔓菁有效部位为12-18重量份，药用辅料为32-38重量份；
粉针剂水蔓菁有效部位为12-18重量份，药用辅料为32-38重量份。
(4)取水蔓菁有效部位加入注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，滤液灌装、灯检，得到勒马回水针剂；取水蔓菁有效部位、药用辅料，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装、灯检，得到勒马回输液剂；取水蔓菁有效部位、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装，干燥，得到勒马回冻干粉针剂。
输液剂药用辅料氯化钠、葡萄糖。
粉针剂药用辅料赋形剂为甘露醇、蔗糖、乳糖。
二.检测分析
分光光度法进行检测分析
实验药物：勒马回注射液(万荣三九药业有限公司)
本发明水针剂(广东天之骄药物开发有限公司提供，制备成与市售勒
马回注射液生药量相同的溶液)
本发明输液剂(广东天之骄药物开发有限公司提供，制备成与市售勒
马回注射液生药量相同的溶液)
本发明粉针剂(广东天之骄药物开发有限公司提供，制备成与市售勒
马回注射液生药量相同的溶液)
实验方法：
对照品溶液的制备：精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置
100ml量瓶中，加适量60％乙醇，加热使溶解，放冷，用60％
乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取25ml，置50ml容量瓶中，
加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含无水芦丁0.1mg)。
供试品溶液的制备：分别精密量取实验药物1ml，置50ml量瓶中，加30％乙醇至
刻度，摇匀，即得。
测定法：精密量取供试品溶液和对照品溶液各2ml，分别置10ml量瓶中，各加入
30％乙醇3ml，摇匀，精密加入亚硝酸钠溶液(1→20)0.3ml，摇匀，放置
6分钟，精密加入三氯化铝溶液(1→10)0.3ml，摇匀，放置10分钟，加
入1mol/L氢氧化钠溶液4ml，再加30％乙醇至刻度，摇匀，放置10分
钟，同时量取上述两种溶液各2ml，分别置10ml量瓶中，加30％乙醇至
刻度，摇匀，作为空白。照分光光度法，在510nm波长处分别测定吸收
度，计算，即得。
实验结果：见表1
表1 不同制剂含量比较
总黄酮含量
组别
(以芦丁计，mg/ml)
市售勒马回注射液 4.913
本发明水针剂 7.156
本发明输液剂 7.423
本发明粉针剂 7.392
结论：通过以上检测分析实验表明，本发明各组制剂有效成分含量提高，充分说明本发明工艺具有实际意义。
三.药理实施例
实施例1
刺激性实验
实验药物：勒马回注射液(万荣三九药业有限公司)
本发明水针剂(广东天之骄药物开发有限公司提供，制备成与市售勒
马回注射液生药量相同的溶液)
本发明输液剂(广东天之骄药物开发有限公司提供，制备成与市售勒
马回注射液生药量相同的溶液)
本发明粉针剂(广东天之骄药物开发有限公司提供，制备成与市售勒
马回注射液生药量相同的溶液)
注射用水(广东天之骄药物开发有限公司提供)
实验动物：家兔40只，1500-2500克。
实验方法：取家兔，在腿部一侧的四头肌处注射药液1ml，在腿部另一侧同样部位
注射用水1ml做对照，每天给药一次，连续给药7天，处死家兔，进
行解剖，对注射部位进行病理解剖，记录组织有硬结、变性情况。
实验结果：见表2
表2 不同制剂对家兔腿部肌肉组织刺激情况比较
变化率
组别 实验动物(只) 腿部肌肉组织发生变化的动物(只)
(％)
市售勒马回注射液 10 4 40
本发明水针剂 10 1 10
本发明输液剂 10 - 0
本发明粉针剂 10 1 10
注：-代表家兔腿部肌肉组织没有任何变化。
实施例2
体外抗菌作用研究
实验药物：勒马回注射液(万荣三九药业有限公司)
本发明水针剂(广东天之骄药物开发有限公司提供，制备成与市售勒
马回注射液生药量相同的溶液)
本发明输液剂(广东天之骄药物开发有限公司提供，制备成与市售勒
马回注射液生药量相同的溶液)
本发明粉针剂(广东天之骄药物开发有限公司提供，制备成与市售勒
马回注射液生药量相同的溶液)
注射用水(广东天之骄药物开发有限公司提供)
实验菌种：金黄葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、青霉菌、黑曲霉、啤酒酵母菌
(上述菌种均由北京大学微生物教研室提供)
实验方法：
滤纸片法测定抑菌作用：取直径6mm的滤纸片，放入四种药物中浸泡16h，120℃
下湿热灭菌备用。将上述供试菌液各取0.5ml与相应固体
培养基，在超净工作台内制成含菌平板，取含浸出汁的滤
纸片贴在含菌平板上，每皿贴5片，每菌做3次重复，细菌
置37℃、霉菌及酵母菌置27℃的生化培养箱内培养48
h，测定24h、48h后滤纸片的抑菌圈大小，比较抑菌效
果见表3：
最低抑菌浓度(Mic)测定：配制上述菌种分别所需的培养基，准确量取9ml分装
试管，准确加入8％、4％、2％、1％、0.5％、0.25％药物
系列浓度溶液1ml，配成系列培养基，120℃高压湿热
灭菌，冷却后，每系列接种一个菌种，每系列做3次重
复，细菌置37℃、霉菌及酵母菌置27℃的生化培养
箱内培养48h，观察菌种生长情况，以完全没有菌生
长的最低浓度为最低抑菌浓度，见表4：
表3对供试菌种的抑制效果
供试菌种 市售勒马回注射液 本发明水针剂 本发明输液剂 本发明粉针剂
抑菌直径mm 抑菌直径mm 抑菌直径mm 抑菌直径mm
24h 48h 24h 48h 24h 48h 24h 48h
金黄葡萄球菌 9.0 9.0 9.5 9.5 9.6 9.6 9.5 9.5
大肠杆菌 10.0 10.3 10.9 11.3 11.2 11.3 11.0 11.0
枯草杆菌 5.8 5.8 6.3 6.3 6.1 6.1 6.3 6.4
青霉菌 6.5 5.7 7.2 6.9 7.3 7.2 7.4 7.0
黑曲霉菌 5.7 3.6 6.5 5.2 6.3 5.2 6.3 5.3
酵母菌 7.0 6.0 7.8 7.3 7.9 7.0 7.6 6.9
表4最低抑制浓度
供试菌种 市售勒马回注射液 本发明水针剂 本发明输液剂 本发明粉针剂
最低抑制浓度 最低抑制浓度 最低抑制浓度 最低抑制浓度
金黄葡萄球菌 0.5％ 0.25％ 0.25％ 0.25％
大肠杆菌 1％ 0.5％ 0.5％ 0.25％
枯草杆菌 0.5％ 0.25％ 0.5％ 0.25％
青霉菌 4％ 2％ 2％ 2％
黑曲霉菌 8％ 4％ 4％ 4％
酵母菌 8％ 4％ 4％ 4％
结论：通过以上药理实验表明，本发明各组制剂具有更好的药理作用。
四.制备实施例
实施例1
(1)取水蔓菁1000克，粉碎，加水10倍，提取2次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液加入乙醇，使溶液乙醇的浓度为60％，静置24小时，过滤，上清液回收乙醇至尽，得到浓缩液；
(2)取上述浓缩液，上聚酰胺柱，用4倍柱体积的水洗，再用6倍柱体积、60％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩干燥，得到水蔓菁有效部位12克；
(3)勒马回注射制剂处方为：
水针剂水蔓菁有效部位12克；
输液剂水蔓菁有效部位为12克，药用辅料氯化钠为38克；
粉针剂水蔓菁有效部位为12克，药用辅料甘露醇为38克。
(4)取水蔓菁有效部位加入注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，滤液灌装、灯检，得到勒马回水针剂1000瓶；或取水蔓菁有效部位、药用辅料，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装、灯检，得到勒马回输液剂1000瓶；或取水蔓菁有效部位、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装，干燥，得到勒马回冻干粉针剂1000瓶。
实施例2
(1)取水蔓菁1000克，粉碎，加水20倍，提取4次，每次3小时，合并提取液，滤过，滤液加入乙醇，使溶液乙醇的浓度为70％，静置24小时，过滤，上清液回收乙醇至尽，得到浓缩液；
(2)取上述浓缩液，上聚酰胺柱，用8倍柱体积的水洗，再用8倍柱体积、80％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩干燥，得到水蔓菁有效部位18克；
(3)勒马回注射制剂处方为：
水针剂水蔓菁有效部位18克；
输液剂水蔓菁有效部位为18克，药用辅料葡萄糖为32克；
粉针剂水蔓菁有效部位为18克，药用辅料蔗糖为32克。
(4)取水蔓菁有效部位加入注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，滤液灌装、灯检，得到勒马回水针剂1000瓶；或取水蔓菁有效部位、药用辅料，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装、灯检，得到勒马回输液剂1000瓶；或取水蔓菁有效部位、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装，干燥，得到勒马回冻干粉针剂1000瓶。
实施例3
(1)取水蔓菁1000克，粉碎，加水15倍，提取3次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液加入乙醇，使溶液乙醇的浓度为65％，静置24小时，过滤，上清液回收乙醇至尽，得到浓缩液；
(2)取上述浓缩液，上聚酰胺柱，用6倍柱体积的水洗，再用7倍柱体积、70％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩干燥，得到水蔓菁有效部位16.8克；
(3)勒马回注射制剂处方为：
水针剂水蔓菁有效部位16.8克；
输液剂水蔓菁有效部位为16.8克，药用辅料氯化钠为33.2克；
粉针剂水蔓菁有效部位为16.8克，药用辅料乳糖为33.2克。
(4)取水蔓菁有效部位加入注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，滤液灌装、灯检，得到勒马回水针剂1000瓶；或取水蔓菁有效部位、药用辅料，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装、灯检，得到勒马回输液剂1000瓶；取水蔓菁有效部位、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装，干燥，得到勒马回冻干粉针剂1000瓶。
实施例4
(1)取水蔓菁1000克，粉碎，加水12倍，提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液加入乙醇，使溶液乙醇的浓度为65％，静置24小时，过滤，上清液回收乙醇至尽，得到浓缩液；
(2)取上述浓缩液，上聚酰胺柱，用5倍柱体积的水洗，再用6倍柱体积、75％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩干燥，得到水蔓菁有效部位14.1克；
(3)勒马回注射制剂处方为：
水针剂水蔓菁有效部位14.1克；
输液剂水蔓菁有效部位为14.1克，药用辅料为氯化钠35.9克；
粉针剂水蔓菁有效部位为14.1克，药用辅料甘露醇为35.9克。
(4)取水蔓菁有效部位加入注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，滤液灌装、灯检，得到勒马回水针剂1000瓶；或取水蔓菁有效部位、药用辅料，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装、灯检，得到勒马回输液剂1000瓶；取水蔓菁有效部位、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装，干燥，得到勒马回冻干粉针剂1000瓶。
实施例5
(1)取水蔓菁10000克，粉碎，加水18倍，提取2次，每次3小时，合并提取液，滤过，滤液加入乙醇，使溶液乙醇的浓度为65％，静置24小时，过滤，上清液回收乙醇至尽，得到浓缩液；
(2)取上述浓缩液，上聚酰胺柱，用7倍柱体积的水洗，再用7倍柱体积、70％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩干燥，得到水蔓菁有效部位158克；
(3)勒马回注射制剂处方为：
水针剂水蔓菁有效部位158克；
输液剂水蔓菁有效部位为158克，药用辅料葡萄糖为342克；
粉针剂水蔓菁有效部位为158克，药用辅料甘露醇、蔗糖为342克。
(4)取水蔓菁有效部位加入注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，滤液灌装、灯检，得到勒马回水针剂1000瓶；或取水蔓菁有效部位、药用辅料，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装、灯检，得到勒马回输液剂1000瓶；取水蔓菁有效部位、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装，干燥，得到勒马回冻干粉针剂1000瓶。
Claims (5)
1.一种勒马回注射制剂，其特征在于制剂的组成为水针剂水蔓菁有效部位12-18重量份，输液剂为12-18重量份，药用辅料为32-38重量份，粉针剂为12-18重量份，药用辅料为32-38重量份。
2.根据权利要求1所述勒马回注射制剂，其特征在于该注射制剂是将水蔓菁采用水提醇沉、聚酰胺柱纯化的方法，得到水蔓菁有效部位与药用辅料混合，制备成的。
3.一种水蔓菁冻干粉针剂的制备方法，其特征包括以下步骤：
(1)取水蔓菁，粉碎，加水10-20倍，提取2-4次，每次1-3小时，合并提取液，滤过，滤液加入乙醇，使溶液乙醇的浓度为60％-70％，静置24小时，过滤，上清液回收乙醇至尽，得到浓缩液；
(2)取上述浓缩液，上聚酰胺柱，用4-8倍柱体积的水洗，再用6-8倍柱体积、60％-80％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽，浓缩干燥，得到水蔓菁有效部位；
(3)取水蔓菁有效部位加入注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，滤液灌装、灯检，得到勒马回水针剂；
(4)取水蔓菁有效部位、药用辅料，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装、灯检，得到勒马回输液剂；
(5)取水蔓菁有效部位、药用辅料赋形剂，加注射用水溶解完全，用0.22滤芯过滤，灌装，干燥，得到勒马回冻干粉针剂
4.根据权利要求1和2所述的输液剂药用辅料氯化钠、葡萄糖。
5.根据权利要求1和2所述的粉针剂药用辅料赋形剂为甘露醇、蔗糖、乳糖。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |