CN106509331A - 一种富含gaba的桑叶蛋白粉的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，包括萎凋、富集GABA处理、浸提、酸沉和干燥。本发明对桑叶采用富集GABA处理，使得制得的蛋白粉中GABA的含量显著提高，经试验证明富集处理后的桑叶中的GABA含量可达3.396mg/g，蛋白粉中的GABA含量为13.627mg/g；本发明方法不仅提高了蛋白质的提取率，而且使蛋白质的溶解性大大增高；在精制步骤通过无水乙醇进行脱色脱腥，提高了桑叶蛋白粉的色泽与口感；本发明方法操作简单、制备方便、成本低、适用于工业化大规模生产。

Description

一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法
技术领域
本发明属于食品加工技术领域，具体涉及一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法。
背景技术
长期以来，桑叶被用作养蚕的主要饲料，然而随着对桑叶研究的深入，桑叶的营养价值和药用价值已越来越引起人物的关注。桑叶中不但含有大量人们所需的蛋白子、脂肪、碳水化合物、维生素及矿物质成分等。而且还含有多糖、多酚、1一脱氧野民霉素(DNJ)、γ一氨基丁酸（GABA）。现代研究证明：桑叶具有降血糖、降血压、降血脂, 提高体内超氧化物歧化酶的活性, 具有类似人参的补益和抗衰老作用等。
桑叶中蛋白质的含量为干基重量的15%-30%，是蛋白含量较高的植物。同时桑叶蛋白氨基酸组成同脱脂大豆粉大体一致，其中人体所必需的氨基酸较为齐全，占总氨基酸含量的34.7%，E/N值为0.531，接近FAO/WHO标准规定的必须氨基酸含量（40%）和E/N值（0.6）。桑叶中的γ一氨基丁酸是一种以自由态广泛存在于原核生物和真核生物的四碳非蛋白质氨基酸，又称GABA。桑叶中含有丰富的γ-氨基丁酸（GABA），占到氨基酸总量的1.12%，而γ-氨基丁酸的前体物质谷氨酸则占到氨基酸含量的13.7%。γ-氨基丁酸是具有极强的生理活性，是中枢神经系统的主要抑制性递质，具有延长记忆，改善视觉功能，镇定神经，抗焦虑，降血压，改善肝功能的作用。
目前对桑叶中GABA的研究主要集中在茶叶中，在蛋白质的提取上还鲜有研究，而新鲜桑叶中的GABA含量虽然较其他的植物较高，但是含量仍然略低。目前提取桑叶蛋白的方法多为直接加热法、酸法、碱法。这类方法易操作且成本低廉。然而当采用干桑叶进行蛋白质提取时，这些方法的蛋白质提取率并不高。除此之外，也有一些通过酶法，加热法提取蛋白质的研究，但这类方法应用在工业上时，生产成本过大，且对设备要求高，且目前生产的桑叶蛋白多有浓重的青草味和较深的颜色，严重影响口感。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种提取率高、无异味的富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，它包括以下步骤：
S1. 萎凋：将新鲜桑叶置于遮光处薄摊，萎凋至桑叶含水量为60～70%；所述萎凋的温度为15～30℃，萎凋时间为8～15h；
S2. 富集GABA处理：将萎凋后的桑叶喷洒谷氨酸和谷氨酸钠的混合溶液，喷洒后遮光处理3～5h后，常温下充入二氧化碳密封处理1～3h，再在有氧环境下处理1～2h，最后再充入二氧化碳密封处理1～3h；
S3. 浸提：将富集GABA处理的桑叶干燥后粉碎成细粉，细粉中加入蒸馏水和氢氧化钠，混合均匀后用组织捣碎机捣碎20～40min，并在50～60℃的温度下浸提30～45min；
S4. 酸沉：将浸提液离心后取上清液，调上清液的pH值至3～5后静置沉淀30～45min，离心收集沉淀；
S5.干燥：将沉淀在-50～-60℃、压力为2～3.5Pa的条件下冷冻干燥，制得富含GABA的桑叶蛋白粉。
进一步地，步骤S1中所述薄摊的厚度为2～3cm。
进一步地，步骤S2中所述桑叶与混合溶液的重量比为1:5～13，所述混合溶液中谷氨酸和谷氨酸钠的重量比为1～2:1，且混合溶液的质量百分比浓度为1～2%。
进一步地，步骤S3中所述干燥的方法为将桑叶薄摊，厚度为2～4cm，用45～55℃的热风干燥4～7h。
进一步地，步骤S3中所述桑叶粉、氢氧化钠和蒸馏水的重量比为5～10:1:16～25。
进一步地，所述离心的温度为8～13℃，转速为3500～4500rmp，离心时间为10～20min。
进一步地，它还包括精制的步骤，具体为：将制得的富含GABA的桑叶蛋白粉中加入浸提剂无水乙醇，60～70℃的温度下浸提5～6h，浸提液在5～15℃、3500～4500rmp的转速下离心10～20min，收集沉淀，将沉淀在35～45℃的温度下热风干燥3～5h，即制得精制的桑叶蛋白粉。
进一步地，所述桑叶蛋白粉与浸提剂的料液比为1:18～25。
由于GABA是一种重要的抑制性神经传递物质，具有极强的生理活性，具有抗焦虑、降血压的保健功效，本发明方法采用添加外源谷氨酸、谷氨酸钠和厌氧好氧交替来提高了桑叶中GABA的含量。干桑叶粉利于贮藏，但是由于桑叶细胞失水后，细胞壁缩小的同时，纤维化增强，使得蛋白质的提取效率降低，一般在10～15%。因此在使用酸沉法提取蛋白质的同时，通过使用组织捣碎机对浸提液进行组织捣碎，从而提高蛋白质得率。目前制得的桑叶蛋白多有浓重的青草味和很深的绿色，桑叶中的色素主要为叶绿素类，不溶于水，溶于有机溶剂，本发明通过无水乙醇进行脱色脱腥，由于乙醇容易挥发，最后热风干燥除去其中的乙醇，从而制得使人更易于接受的桑叶蛋白粉。
本发明具有以下优点：本发明对桑叶采用富集GABA处理，使得制得的蛋白粉中GABA的含量显著提高，经试验证明富集处理后的桑叶中的GABA含量可达3.396mg/g，蛋白粉中的GABA含量为13.627mg/g；本发明方法不仅提高了蛋白质的提取率，而且使蛋白质的溶解性大大增高；在精制步骤通过无水乙醇进行脱色脱腥，提高了桑叶蛋白粉的色泽与口感；本发明方法操作简单、制备方便、成本低、适用于工业化大规模生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的描述，本发明的保护范围不局限于以下所述。
实施例1：一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，它包括以下步骤：
S1. 萎凋：将新鲜桑叶置于遮光处薄摊，所述薄摊的厚度为2cm，萎凋至桑叶含水量为60%；所述萎凋的温度为15℃，萎凋时间为8h；
S2. 富集GABA处理：将萎凋后的桑叶喷洒谷氨酸和谷氨酸钠的混合溶液，喷洒后遮光处理3h后，常温下充入二氧化碳密封处理1h，再在有氧环境下处理1h，最后再充入二氧化碳密封处理1h；所述桑叶与混合溶液的重量比为1:5，所述混合溶液中谷氨酸和谷氨酸钠的重量比为1:1，且混合溶液的质量百分比浓度为1%；
S3. 浸提：将富集GABA处理的桑叶干燥后粉碎成细粉，细粉中加入蒸馏水和氢氧化钠，所述桑叶粉、氢氧化钠和蒸馏水的重量比为5:1:16，混合均匀后用组织捣碎机捣碎20min，并在50℃的温度下浸提30min；所述干燥的方法为将桑叶薄摊，厚度为2cm，用45℃的热风干燥4h；
S4. 酸沉：将浸提液离心后取上清液，调上清液的pH值至3后静置沉淀30min，离心收集沉淀；所述离心的温度为8℃，转速为3500rmp，离心时间为10min；
S5.干燥：将沉淀在-50℃、压力为2Pa的条件下冷冻干燥，制得富含GABA的桑叶蛋白粉。
实施例2：一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，它包括以下步骤：
S1. 萎凋：将新鲜桑叶置于遮光处薄摊，所述薄摊的厚度为3cm，萎凋至桑叶含水量为70%；所述萎凋的温度为30℃，萎凋时间为15h；
S2. 富集GABA处理：将萎凋后的桑叶喷洒谷氨酸和谷氨酸钠的混合溶液，喷洒后遮光处理5h后，常温下充入二氧化碳密封处理3h，再在有氧环境下处理2h，最后再充入二氧化碳密封处理3h；所述桑叶与混合溶液的重量比为1:13，所述混合溶液中谷氨酸和谷氨酸钠的重量比为2:1，且混合溶液的质量百分比浓度为2%；
S3. 浸提：将富集GABA处理的桑叶干燥后粉碎成细粉，细粉中加入蒸馏水和氢氧化钠，所述桑叶粉、氢氧化钠和蒸馏水的重量比为10:1:25，混合均匀后用组织捣碎机捣碎40min，并在60℃的温度下浸提45min；所述干燥的方法为将桑叶薄摊，厚度为4cm，用55℃的热风干燥7h；
S4. 酸沉：将浸提液离心后取上清液，调上清液的pH值至5后静置沉淀45min，离心收集沉淀；所述离心的温度为13℃，转速为4500rmp，离心时间为20min；
S5.干燥：将沉淀在-60℃、压力为3.5Pa的条件下冷冻干燥，制得富含GABA的桑叶蛋白粉；
S6. 精制：将制得的富含GABA的桑叶蛋白粉中加入浸提剂无水乙醇，所述桑叶蛋白粉与浸提剂的料液比为1:18，60℃的温度下浸提5h，浸提液在5℃、3500rmp的转速下离心10min，收集沉淀，将沉淀在35℃的温度下热风干燥3h，即制得精制的桑叶蛋白粉。
实施例3：一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，它包括以下步骤：
S1. 萎凋：将新鲜桑叶置于遮光处薄摊，所述薄摊的厚度为2～3cm，萎凋至桑叶含水量为63%；所述萎凋的温度为20℃，萎凋时间为10h；
S2. 富集GABA处理：将萎凋后的桑叶喷洒谷氨酸和谷氨酸钠的混合溶液，喷洒后遮光处理3.5h后，常温下充入二氧化碳密封处理1.5h，再在有氧环境下处理1.5h，最后再充入二氧化碳密封处理2.5h；所述桑叶与混合溶液的重量比为1:7，所述混合溶液中谷氨酸和谷氨酸钠的重量比为1.3:1，且混合溶液的质量百分比浓度为1.3%；
S3. 浸提：将富集GABA处理的桑叶干燥后粉碎成细粉，细粉中加入蒸馏水和氢氧化钠，所述桑叶粉、氢氧化钠和蒸馏水的重量比为6:1:18，混合均匀后用组织捣碎机捣碎25min，并在53℃的温度下浸提35min；所述干燥的方法为将桑叶薄摊，厚度为2～4cm，用48℃的热风干燥5h；
S4. 酸沉：将浸提液离心后取上清液，调上清液的pH值至4后静置沉淀35min，离心收集沉淀；所述离心的温度为10℃，转速为3800rmp，离心时间为12min；
S5.干燥：将沉淀在-54℃、压力为2.5Pa的条件下冷冻干燥，制得富含GABA的桑叶蛋白粉；
S6. 精制：将制得的富含GABA的桑叶蛋白粉中加入浸提剂无水乙醇，所述桑叶蛋白粉与浸提剂的料液比为1:25，70℃的温度下浸提6h，浸提液在15℃、4500rmp的转速下离心20min，收集沉淀，将沉淀在45℃的温度下热风干燥5h，即制得精制的桑叶蛋白粉。
实施例4：一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，它包括以下步骤：
S1. 萎凋：将新鲜桑叶置于遮光处薄摊，所述薄摊的厚度为3cm，萎凋至桑叶含水量为65%；所述萎凋的温度为20℃，萎凋时间为12h；
S2. 富集GABA处理：将萎凋后的桑叶喷洒谷氨酸和谷氨酸钠的混合溶液，喷洒后遮光处理4h后，常温下充入二氧化碳密封处理2h，再在有氧环境下处理1.5h，最后再充入二氧化碳密封处理2h；所述桑叶与混合溶液的重量比为1:10，所述混合溶液中谷氨酸和谷氨酸钠的重量比为1.8:1，且混合溶液的质量百分比浓度为1.8%；
S3. 浸提：将富集GABA处理的桑叶干燥后粉碎成细粉，细粉中加入蒸馏水和氢氧化钠，所述桑叶粉、氢氧化钠和蒸馏水的重量比为7:1:20，混合均匀后用组织捣碎机捣碎30min，并在56℃的温度下浸提38min；所述干燥的方法为将桑叶薄摊，厚度为4cm，用50℃的热风干燥6h；
S4. 酸沉：将浸提液离心后取上清液，调上清液的pH值至4后静置沉淀38min，离心收集沉淀；所述离心的温度为10℃，转速为4000rmp，离心时间为15min；
S5.干燥：将沉淀在-55℃、压力为3Pa的条件下冷冻干燥，制得富含GABA的桑叶蛋白粉；
S6. 精制：将制得的富含GABA的桑叶蛋白粉中加入浸提剂无水乙醇，所述桑叶蛋白粉与浸提剂的料液比为1:22，65℃的温度下浸提5.5h，浸提液在10℃、4000rmp的转速下离心15min，收集沉淀，将沉淀在40℃的温度下热风干燥3.5h，即制得精制的桑叶蛋白粉。

Claims (8)

1.一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，它包括以下步骤：
S1. 萎凋：将新鲜桑叶置于遮光处薄摊，萎凋至桑叶含水量为60～70%；所述萎凋的温度为15～30℃，萎凋时间为8～15h；
S2. 富集GABA处理：将萎凋后的桑叶喷洒谷氨酸和谷氨酸钠的混合溶液，喷洒后遮光处理3～5h后，常温下充入二氧化碳密封处理1～3h，再在有氧环境下处理1～2h，最后再充入二氧化碳密封处理1～3h；
S3. 浸提：将富集GABA处理的桑叶干燥后粉碎成细粉，细粉中加入蒸馏水和氢氧化钠，混合均匀后用组织捣碎机捣碎20～40min，并在50～60℃的温度下浸提30～45min；
S4. 酸沉：将浸提液离心后取上清液，调上清液的pH值至3～5后静置沉淀30～45min，离心收集沉淀；
S5.干燥：将沉淀在-50～-60℃、压力为2～3.5Pa的条件下冷冻干燥，制得富含GABA的桑叶蛋白粉。
2.如权利要求1所述的一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述薄摊的厚度为2～3cm。
3.如权利要求1所述的一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述桑叶与混合溶液的重量比为1:5～13，所述混合溶液中谷氨酸和谷氨酸钠的重量比为1～2:1，且混合溶液的质量百分比浓度为1～2%。
4.如权利要求1所述的一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述干燥的方法为将桑叶薄摊，厚度为2～4cm，用45～55℃的热风干燥4～7h。
5.如权利要求1所述的一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述桑叶粉、氢氧化钠和蒸馏水的重量比为5～10:1:16～25。
6.如权利要求1所述的一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，所述离心的温度为8～13℃，转速为3500～4500rmp，离心时间为10～20min。
7.如权利要求1所述的一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，它还包括精制的步骤，具体为：将制得的富含GABA的桑叶蛋白粉中加入浸提剂无水乙醇，60～70℃的温度下浸提5～6h，浸提液在5～15℃、3500～4500rmp的转速下离心10～20min，收集沉淀，将沉淀在35～45℃的温度下热风干燥3～5h，即制得精制的桑叶蛋白粉。
8.如权利要求7所述的一种富含GABA的桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，所述桑叶蛋白粉与浸提剂的料液比为1:18～25。
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