CN106053808A - 一种测定脂蛋白磷脂酶a2的试剂盒及其制备方法 - Google Patents
一种测定脂蛋白磷脂酶a2的试剂盒及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106053808A CN106053808A CN201610358103.4A CN201610358103A CN106053808A CN 106053808 A CN106053808 A CN 106053808A CN 201610358103 A CN201610358103 A CN 201610358103A CN 106053808 A CN106053808 A CN 106053808A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- reagent
- mmol
- buffer
- preservative
- lipoprotein phospholipase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/916—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1), e.g. phosphatases (3.1.3), phospholipases C or phospholipases D (3.1.4)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒及其制备方法，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，试剂R1：缓冲液、无机盐离子、加速剂、螯合剂、防腐剂，试剂R2：缓冲液、稳定剂、防腐剂、乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体，制备方法为：按照组分含量配制好试剂；将待测样本与试剂R1和试剂R2混合，使其充分反应；用全自动生化分析仪测定反应后的吸光度差值；根据吸光度变化值计算出样本中的脂蛋白磷脂酶A2的浓度。本发明具有测定准确度高等优点。
Description
技术领域
本发明涉及医学及生物化学技术领域，具体来说是一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒及其制备方法。
背景技术
脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）是磷脂酶超家族中的亚型之一，也被称为是血小板活化因子乙酰水解酶，由血管内膜中的巨噬细胞、T细胞和肥大细胞分泌，动脉粥样硬化斑块中Lp-PLA2表达上调，并且在易损斑块纤维帽的巨噬细胞中强表达，Lp-PLA2可水解氧化低密度脂蛋白ox-LDL中的氧化磷脂，生成脂类促炎物质，如溶血卵磷脂和氧化游离脂肪酸，进而产生多种致动脉粥样硬化作用，包括内皮细胞死亡和内皮功能异常，刺激粘附因子和细胞因子的产生，这些物质可通过趋化炎症细胞进一步产生自我强化的循环，生成更多促炎物质。
释放到血液循环中的脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）主要与富含载脂蛋白（Apo）B的脂蛋白结合，低密度脂蛋白（LDL）占80%，其余与高密度脂蛋白（HDL）、脂蛋白a[Lp（a）]和极低密度脂蛋白（VLDL）结合，在动脉粥样硬化性疾病患者中，脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）水平与LDL亚组分水平呈正相关。
目前，检测脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）主要采取酶联免疫吸附法，但其操作复杂，耗时长，且对操作人员有较高专业技术要求，且该检测法无法定量，受外界影响的因素较多，而且测定准确度低，需要作出进一步的改进。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是为了克服现有技术操作复杂、测定准确度低的缺陷，而提供一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒及其制备方法。
本发明解决上述技术问题提供的技术方案是：本发明公开了一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1：
缓冲液 20~180 mmol/L
无机盐离子 200~400 mmol/L
加速剂 5~25 g/L
螯合剂 15~45 mmol/L
防腐剂 0.2~0.8 g/L
其溶剂为纯化水
试剂R2：
缓冲液 50~150 mmol/L
稳定剂 4~18 g/L
防腐剂 0.6~0.9 g/L
乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体 1~9 g/L
其溶剂为纯化水。
作为优选，本发明公开了一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1：
缓冲液 100mmol/L
无机盐离子 300 mmol/L
加速剂 10 g/L
螯合剂 25 mmol/L
防腐剂 0.6 g/L
其溶剂为纯化水
试剂R2：
缓冲液 100 mmol/L
稳定剂 11 g/L
防腐剂 0.7 g/L
乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体 5 g/L
其溶剂为纯化水。
作为优选，所述的试剂R1中，所述的缓冲液采用Tris缓冲液、MES缓冲液、磷酸盐缓冲液、MOPSO缓冲液中的一种或多种的组合，所述的无机盐离子采用氯化钾、硫酸钾、氯化钠中的一种或多种的组合，所述的加速剂采用聚乙二醇-2000、聚乙二醇-8000、聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种的组合，所述的螯合剂采用EDTA·2Na、二乙基三胺五乙酸、乙二醇双四乙酸中的一种或多种的组合，所述的防腐剂采用山梨酸钠、苯甲酸钠、叠氮钠、硫柳汞、苯酚中的一种或多种的组合。
作为优选，所述的试剂R2中，所述的缓冲液采用Tris缓冲液、MES缓冲液、磷酸盐缓冲液、MOPSO缓冲液中的一种或多种的组合，所述的稳定剂为牛血清白蛋白，所述的防腐剂采用山梨酸钠、苯甲酸钠、叠氮钠、硫柳汞、苯酚中的一种或多种的组合。
作为优选，所述的试剂R2中，所述的乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体的制备方法为：先用50 mmol/L的MES缓冲液将粒径为80-500nm的聚苯乙烯微球稀释成为所含的聚苯乙烯微球的质量浓度为1%-5%的溶液，然后每毫升溶液中加入1.0 mg 的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐，在20℃-37℃的条件下反应1小时，然后使用离心机，在25000rpm/min的转速下离心30分钟，去上清，将沉淀用50 mmol/L的MES缓冲液进行稀释，然后使用超声分散仪进行超声分散，然后使用离心机，在25000 rpm/min的转速下离心30分钟，去上清，再将沉淀用50 mmol/L的MES缓冲液进行稀释，直至聚苯乙烯微球的质量浓度为1%-4%，使用超声分散仪进行分散，然后边分散边加入抗脂蛋白磷脂酶A2抗体，直至聚苯乙烯微球的质量浓度为0.5%-2.0%时为止，最后加入牛血清白蛋白，直至牛血清白蛋白的浓度为20g/L时为止，4℃封闭16-24小时，即可制备得到乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体。
作为优选，本发明还公开了上述测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒的制备方法和使用方法，包括以下步骤：
（a）按照下列组分含量配制好试剂：
试剂R1：
缓冲液 20~180 mmol/L
无机盐离子 200~400 mmol/L
加速剂 5~25 g/L
螯合剂 15~45 mmol/L
防腐剂 0.2~0.8 g/L
其溶剂为纯化水
试剂R2：
缓冲液 50~150 mmol/L
稳定剂 4~18 g/L
防腐剂 0.6~0.9 g/L
乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体 1~9 g/L
其溶剂为纯化水；
（b）将待测样本与试剂R1和试剂R2混合，使其充分反应；
（c）用全自动生化分析仪测定反应后的吸光度差值；
（d）根据吸光度变化值计算出样本中的脂蛋白磷脂酶A2的浓度。
作为优选，步骤（b）中，所述的试剂R1和试剂R2的体积比为4:1；
作为优选，步骤（b）中，所述的待测样本与试剂R1和试剂R2的总体积的体积比在1:10到1:150之间。
本发明的检测原理是：本发明利用的是抗原抗体反应的原理，脂蛋白磷脂酶A2与超敏化的抗脂蛋白磷脂酶A2抗体胶乳颗粒试剂反应，出现凝集反应，在特定的波长下检测其吸光度，其变化程度与样本中的Lp-PLA2含量成正比。
样本中脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）的活性（ng/mL）= CS ×（ng/mL）
式中：ΔAT以空白管吸光度作对照的样品管吸光度值
ΔAS以空白管吸光度作对照的校准管吸光度值
CS校准液中Lp-PLA2的浓度。
与现有技术相比，本发明具有以下有益优点：本发明在试剂R1中添加了金属离子螯合剂，在样本和试剂R1反应的过程中，去除了样本中金属离子的干扰，因此测定准确度得到大大的提高，且在加速剂聚乙二醇作用下，可快速发生反应，检测比较方便，灵敏度比较高，而且无放射性污染。
具体实施方式
以下结合具体实施例进一步说明，但本发明并不仅限于这些实施例。
实施例1
本发明的试剂盒包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，其中
试剂R1：
MES缓冲液 100mmol/L
氯化钾 300 mmol/L
聚乙二醇-2000 10 g/L
EDTA·2Na 25 mmol/L
山梨酸钠 0.6 g/L
其溶剂为纯化水
试剂R2：
MES缓冲液 100 mmol/L
牛血清白蛋白 11 g/L
叠氮钠 0.7 g/L
乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体 5 g/L
其溶剂为纯化水。
实施例2
本发明的试剂盒包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，其中
试剂R1：
Tris缓冲液 20 mmol/L
硫酸钾 200 mmol/L
聚乙烯吡咯烷酮 25 g/L
二乙基三胺五乙酸 45 mmol/L
山梨酸钠 0.2 g/L
其溶剂为纯化水
试剂R2：
Tris缓冲液 150 mmol/L
牛血清白蛋白 18 g/L
山梨酸钠 0. 9 g/L
乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体 1 g/L
其溶剂为纯化水。
实施例3
试剂盒的制备和使用方法
1、乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体的制备：先用50 mmol/L的MES缓冲液将粒径为120nm的聚苯乙烯微球稀释成为所含的聚苯乙烯微球的质量浓度为5%的溶液，然后每毫升溶液中加入1.0 mg 的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐，在26℃的条件下反应1小时，然后使用离心机，在25000 rpm/min的转速下离心30分钟，去上清，将沉淀用50mmol/L的MES缓冲液进行稀释，然后使用超声分散仪进行超声分散，然后使用离心机，在25000 rpm/min的转速下离心30分钟，去上清，再将沉淀用50 mmol/L的MES缓冲液进行稀释，直至聚苯乙烯微球的质量浓度为4%，使用超声分散仪进行分散，然后边分散边加入抗脂蛋白磷脂酶A2抗体，直至聚苯乙烯微球的质量浓度为1.0%时为止，最后加入牛血清白蛋白，直至牛血清白蛋白的浓度为20g/L时为止，4℃封闭18小时，即可制备得到乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体；
2、按照下列组分含量配制好试剂：
试剂R1：
MES缓冲液 100mmol/L
氯化钾 300 mmol/L
聚乙二醇-2000 10 g/L
EDTA·2Na 25 mmol/L
山梨酸钠 0.6 g/L
其溶剂为纯化水
试剂R2：
MES缓冲液 100 mmol/L
牛血清白蛋白 11 g/L
叠氮钠 0.7 g/L
乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体 5 g/L
其溶剂为纯化水；
3、全自动生化分析仪参数设置
（a）检测温度：37℃；
（b）检测波长：主波长600nm；
（c）反应时间 ：10min，其中，孵育时间 5min，加入试剂 R2 后立即测定读取吸光度A1，5min后读取吸光度 A2，计算吸光度变化 ΔA ＝ A2-A1 ；
(d) 反应方向：正反应；
4、检测步骤
（a）取200μl试剂R1与2.5μl待测样本混匀；
（b）将混匀后的溶液在37℃的条件下孵育5min；
（c）加入50μl试剂R2，立即测定读取吸光度A1，5min后读取吸光度A2，计算吸光度变化ΔA ＝ A2-A1；
(d) 根据样本中的脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）的活性（ng/mL）= CS × （ng/mL）计算出样本中的脂蛋白磷脂酶A2的浓度。
实施例4
试剂盒的制备和使用方法
1、乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体的制备：先用50 mmol/L的MES缓冲液将粒径为120nm的聚苯乙烯微球稀释成为所含的聚苯乙烯微球的质量浓度为5%的溶液，然后每毫升溶液中加入1.0 mg 的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐，在26℃的条件下反应1小时，然后使用离心机，在25000 rpm/min的转速下离心30分钟，去上清，将沉淀用50mmol/L的MES缓冲液进行稀释，然后使用超声分散仪进行超声分散，然后使用离心机，在25000 rpm/min的转速下离心30分钟，去上清，再将沉淀用50 mmol/L的MES缓冲液进行稀释，直至聚苯乙烯微球的质量浓度为4%，使用超声分散仪进行分散，然后边分散边加入抗脂蛋白磷脂酶A2抗体，直至聚苯乙烯微球的质量浓度为1.0%时为止，最后加入牛血清白蛋白，直至牛血清白蛋白的浓度为20g/L时为止，4℃封闭18小时，即可制备得到乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体；
2、按照下列组分含量配制好试剂：
试剂R1：
Tris缓冲液 20 mmol/L
硫酸钾 200 mmol/L
聚乙烯吡咯烷酮 25 g/L
二乙基三胺五乙酸 45 mmol/L
山梨酸钠 0.2 g/L
其溶剂为纯化水
试剂R2：
Tris缓冲液 150 mmol/L
牛血清白蛋白 18 g/L
山梨酸钠 0. 9 g/L
乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体 1 g/L
其溶剂为纯化水；
3、全自动生化分析仪参数设置
（a）检测温度：37℃；
（b）检测波长：主波长600nm；
（c）反应时间 ：10min，其中，孵育时间 5min，加入试剂 R2 后立即测定读取吸光度A1，5min后读取吸光度 A2，计算吸光度变化 ΔA ＝ A2-A1 ；
(d) 反应方向：正反应；
4、检测步骤
（a）取200μl试剂R1与2.5μl待测样本混匀；
（b）将混匀后的溶液在37℃的条件下孵育5min；
（c）加入50μl试剂R2，立即测定读取吸光度A1，5min后读取吸光度A2，计算吸光度变化ΔA ＝ A2-A1；
(d) 根据样本中的脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）的活性（ng/mL）= CS × （ng/mL）计算出样本中的脂蛋白磷脂酶A2的浓度。
表1为实施例1所制得的测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒以及实施例2所制得的测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒分别对质控品1进行测定的结果，其中质控品1中的脂蛋白磷脂酶A2的浓度为 114 ng/mL，测定结果见表1：
表1
| 第1次（ng/mL） | 第2次（ng/mL） | 第3次（ng/mL） | 均值（ng/mL） | 偏差（%） | |
| 实施例1 | 113 | 116 | 114 | 114.3 | 0.26 |
| 实施例2 | 115 | 112 | 110 | 112.3 | 1.49 |
由表1可知，本发明所制得的测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒对质控品1的测定结果偏差较小，因此测定准确度高，而且实施例1为最优的选择。
表2为实施例1所制得的测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒以及实施例2所制得的测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒分别对质控品2进行测定的结果，其中质控品2中的脂蛋白磷脂酶A2的浓度为 373 ng/mL，测定结果见表2：
表2
| 第1次（ng/mL） | 第2次（ng/mL） | 第3次（ng/mL） | 均值（ng/mL） | 偏差（%） | |
| 实施例1 | 371 | 379 | 375 | 374.7 | 0.46 |
| 实施例2 | 375 | 376 | 376 | 375.6 | 0.70 |
由表2可知，本发明所制得的测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒对质控品2的测定结果偏差较小，因此测定准确度高，而且实施例1为最优的选择。
表3为实施例3所制得的测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒对同一待测样本进行的多次反复测定以及实施例4所制得的测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒对同一待测样本进行的多次反复测定，对所得的结果进行SD和CV的计算，结果如下：
表3
由表3可知本发明所制得的测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒的精密度比较好，而且由表3可知，实施例3为最优的选择。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。
Claims (8)
1.一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒，其特征在于：包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1：
缓冲液 20~180 mmol/L
无机盐离子 200~400 mmol/L
加速剂 5~25 g/L
螯合剂 15~45 mmol/L
防腐剂 0.2~0.8 g/L
其溶剂为纯化水
试剂R2：
缓冲液 50~150 mmol/L
稳定剂 4~18 g/L
防腐剂 0.6~0.9 g/L
乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体 1~9 g/L
其溶剂为纯化水。
2.根据权利要求1所述的一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒，其特征在于：包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1：
缓冲液 100mmol/L
无机盐离子 300 mmol/L
加速剂 10 g/L
螯合剂 25 mmol/L
防腐剂 0.6 g/L
其溶剂为纯化水
试剂R2：
缓冲液 100 mmol/L
稳定剂 11 g/L
防腐剂 0.7 g/L
乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体 5 g/L
其溶剂为纯化水。
3.根据权利要求1或2所述的一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒，其特征在于：所述的试剂R1中，所述的缓冲液采用Tris缓冲液、MES缓冲液、磷酸盐缓冲液、MOPSO缓冲液中的一种或多种的组合，所述的无机盐离子采用氯化钾、硫酸钾、氯化钠中的一种或多种的组合，所述的加速剂采用聚乙二醇-2000、聚乙二醇-8000、聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种的组合，所述的螯合剂采用EDTA·2Na、二乙基三胺五乙酸、乙二醇双四乙酸中的一种或多种的组合，所述的防腐剂采用山梨酸钠、苯甲酸钠、叠氮钠、硫柳汞、苯酚中的一种或多种的组合。
4.根据权利要求1或2所述的一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒，其特征在于：所述的试剂R2中，所述的缓冲液采用Tris缓冲液、MES缓冲液、磷酸盐缓冲液、MOPSO缓冲液中的一种或多种的组合，所述的稳定剂为牛血清白蛋白，所述的防腐剂采用山梨酸钠、苯甲酸钠、叠氮钠、硫柳汞、苯酚中的一种或多种的组合。
5.根据权利要求1或2所述的一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒，其特征在于：所述的试剂R2中，所述的乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体的制备方法为：先用50 mmol/L的MES缓冲液将粒径为80-500nm的聚苯乙烯微球稀释成为所含的聚苯乙烯微球的质量浓度为1%-5%的溶液，然后每毫升溶液中加入1.0 mg 的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐，在20℃-37℃的条件下反应1小时，然后使用离心机，在25000 rpm/min的转速下离心30分钟，去上清，将沉淀用50 mmol/L的MES缓冲液进行稀释，然后使用超声分散仪进行超声分散，然后使用离心机，在25000 rpm/min的转速下离心30分钟，去上清，再将沉淀用50 mmol/L的MES缓冲液进行稀释，直至聚苯乙烯微球的质量浓度为1%-4%，使用超声分散仪进行分散，然后边分散边加入抗脂蛋白磷脂酶A2抗体，直至聚苯乙烯微球的质量浓度为0.5%-2.0%时为止，最后加入牛血清白蛋白，直至牛血清白蛋白的浓度为20g/L时为止，4℃封闭16~24小时，即可制备得到乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体。
6.根据权利要求1或2所述的一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒的制备方法和使用方法，其特征在于：包括以下步骤：
（a）按照下列组分含量配制好试剂：
试剂R1：
缓冲液 20~180 mmol/L
无机盐离子 200~400 mmol/L
加速剂 5~25 g/L
螯合剂 15~45 mmol/L
防腐剂 0.2~0.8 g/L
其溶剂为纯化水
试剂R2：
缓冲液 50~150 mmol/L
稳定剂 4~18 g/L
防腐剂 0.6~0.9 g/L
乳胶包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体 1~9 g/L
其溶剂为纯化水；
（b）将待测样本与试剂R1和试剂R2混合，使其充分反应；
（c）用全自动生化分析仪测定反应后的吸光度差值；
（d）根据吸光度变化值计算出样本中的脂蛋白磷脂酶A2的浓度。
7.根据权利要求6所述的一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒的制备方法和使用方法，其特征在于：步骤（b）中，所述的试剂R1和试剂R2的体积比为4:1。
8.根据权利要求6所述的一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒的制备方法和使用方法，其特征在于：步骤（b）中，所述的待测样本与试剂R1和试剂R2的总体积的体积比在1:10到1:150之间。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610358103.4A CN106053808A (zh) | 2016-05-26 | 2016-05-26 | 一种测定脂蛋白磷脂酶a2的试剂盒及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610358103.4A CN106053808A (zh) | 2016-05-26 | 2016-05-26 | 一种测定脂蛋白磷脂酶a2的试剂盒及其制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106053808A true CN106053808A (zh) | 2016-10-26 |
Family
ID=57175338
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610358103.4A Pending CN106053808A (zh) | 2016-05-26 | 2016-05-26 | 一种测定脂蛋白磷脂酶a2的试剂盒及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106053808A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109917131A (zh) * | 2019-03-26 | 2019-06-21 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 一种脂蛋白磷脂酶a2检测试剂及其制备和使用方法 |
| CN111999501A (zh) * | 2020-08-20 | 2020-11-27 | 安徽伊普诺康生物技术股份有限公司 | 一种测定人血清脂蛋白磷脂酶a2试剂盒及其制备和使用方法 |
| CN113238049A (zh) * | 2021-05-07 | 2021-08-10 | 迪瑞医疗科技股份有限公司 | 脂蛋白相关磷脂酶a2试剂盒及其制备方法 |
Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050244913A1 (en) * | 2004-04-16 | 2005-11-03 | Yaping Shou | Methods for detecting Lp-PLA2 activity and inhibition of Lp-PLA2 activity |
| CN102507957A (zh) * | 2011-11-01 | 2012-06-20 | 北京利德曼生化股份有限公司 | 一种用免疫透射比浊法测定载脂蛋白a2的方法及试剂盒 |
| CN102692507A (zh) * | 2011-07-29 | 2012-09-26 | 南京诺尔曼生物技术有限公司 | 脂蛋白相关磷脂酶a2(lppla2)测定试剂盒(胶乳增强免疫比浊法) |
| CN103033629A (zh) * | 2012-12-12 | 2013-04-10 | 元升生物科技（上海）有限公司 | 一种脂蛋白磷脂酶a2的测定试剂及试剂的制备方法 |
| CN103792353A (zh) * | 2013-10-17 | 2014-05-14 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 一种脂蛋白相关磷脂酶a2含量检测试剂盒及其制备方法 |
| CN104198725A (zh) * | 2014-08-14 | 2014-12-10 | 上海睿康生物科技有限公司 | 抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒 |
| CN104655843A (zh) * | 2014-05-19 | 2015-05-27 | 宁波普瑞柏生物技术有限公司 | 一种胃癌检测方法、试剂以及其试剂盒 |
| CN104749375A (zh) * | 2013-12-30 | 2015-07-01 | 上海川至生物技术有限公司 | 人血清中c肽含量的检测方法及其用试剂盒和试剂盒的制备方法 |
| CN105067615A (zh) * | 2015-08-28 | 2015-11-18 | 深圳市汇松科技发展有限公司 | 一种基于酰胺基团纳米胶乳增强比浊法动物c-反应蛋白的检测试剂盒及检测方法 |
| CN105606809A (zh) * | 2015-09-14 | 2016-05-25 | 绍兴圣康生物科技有限公司 | 一种脂蛋白磷脂酶a2测定试剂盒及其使用方法 |
-
2016
- 2016-05-26 CN CN201610358103.4A patent/CN106053808A/zh active Pending
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050244913A1 (en) * | 2004-04-16 | 2005-11-03 | Yaping Shou | Methods for detecting Lp-PLA2 activity and inhibition of Lp-PLA2 activity |
| CN102692507A (zh) * | 2011-07-29 | 2012-09-26 | 南京诺尔曼生物技术有限公司 | 脂蛋白相关磷脂酶a2(lppla2)测定试剂盒(胶乳增强免疫比浊法) |
| CN102507957A (zh) * | 2011-11-01 | 2012-06-20 | 北京利德曼生化股份有限公司 | 一种用免疫透射比浊法测定载脂蛋白a2的方法及试剂盒 |
| CN103033629A (zh) * | 2012-12-12 | 2013-04-10 | 元升生物科技（上海）有限公司 | 一种脂蛋白磷脂酶a2的测定试剂及试剂的制备方法 |
| CN103792353A (zh) * | 2013-10-17 | 2014-05-14 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 一种脂蛋白相关磷脂酶a2含量检测试剂盒及其制备方法 |
| CN104749375A (zh) * | 2013-12-30 | 2015-07-01 | 上海川至生物技术有限公司 | 人血清中c肽含量的检测方法及其用试剂盒和试剂盒的制备方法 |
| CN104655843A (zh) * | 2014-05-19 | 2015-05-27 | 宁波普瑞柏生物技术有限公司 | 一种胃癌检测方法、试剂以及其试剂盒 |
| CN104198725A (zh) * | 2014-08-14 | 2014-12-10 | 上海睿康生物科技有限公司 | 抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒 |
| CN105067615A (zh) * | 2015-08-28 | 2015-11-18 | 深圳市汇松科技发展有限公司 | 一种基于酰胺基团纳米胶乳增强比浊法动物c-反应蛋白的检测试剂盒及检测方法 |
| CN105606809A (zh) * | 2015-09-14 | 2016-05-25 | 绍兴圣康生物科技有限公司 | 一种脂蛋白磷脂酶a2测定试剂盒及其使用方法 |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109917131A (zh) * | 2019-03-26 | 2019-06-21 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 一种脂蛋白磷脂酶a2检测试剂及其制备和使用方法 |
| CN109917131B (zh) * | 2019-03-26 | 2021-12-17 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 一种脂蛋白磷脂酶a2检测试剂及其制备和使用方法 |
| CN111999501A (zh) * | 2020-08-20 | 2020-11-27 | 安徽伊普诺康生物技术股份有限公司 | 一种测定人血清脂蛋白磷脂酶a2试剂盒及其制备和使用方法 |
| CN113238049A (zh) * | 2021-05-07 | 2021-08-10 | 迪瑞医疗科技股份有限公司 | 脂蛋白相关磷脂酶a2试剂盒及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106324239B (zh) | C-反应蛋白免疫胶乳微球制备方法及应用 | |
| CN103134934B (zh) | 可以同时检测尿液和血清样本中视黄醇结合蛋白的试剂盒 | |
| CN102628864B (zh) | 胶乳增强免疫比浊法测定血清或尿液中心脏型脂肪酸结合蛋白的试剂盒 | |
| CN108362688B (zh) | 一种25羟基维生素d磁微粒化学发光检测试剂盒 | |
| Hillström et al. | Validation of a commercially available automated canine‐specific immunoturbidimetric method for measuring canine C‐reactive protein | |
| CN103033629B (zh) | 一种脂蛋白磷脂酶a2的测定试剂及试剂的制备方法 | |
| JP2019054811A (ja) | 迅速な、低サンプル容積のコレステロールおよびトリグリセリド検定 | |
| CN106093422A (zh) | 一种测定中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的试剂盒 | |
| CN105652021B (zh) | 一种测定小而密脂蛋白的试剂、方法和试剂盒 | |
| CN108303544A (zh) | 一种全血c反应蛋白检测试剂盒 | |
| CN106568978A (zh) | 血清淀粉样蛋白a检测方法及试剂 | |
| CN106093407A (zh) | 一种测定脂蛋白(a)的试剂盒及其制备方法 | |
| CN106198415A (zh) | 一种测定糖化血红蛋白的试剂盒及其制备方法 | |
| JP2008511839A (ja) | 新規の安定な脂質標準 | |
| CN107449748A (zh) | 高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其使用方法 | |
| CN101000349A (zh) | 前白蛋白检测试剂盒 | |
| CN106053808A (zh) | 一种测定脂蛋白磷脂酶a2的试剂盒及其制备方法 | |
| KR101665999B1 (ko) | 시스타틴 ｃ 흡착 억제제 | |
| CN106093418A (zh) | 一种测定肌钙蛋白i的试剂盒及其制备方法 | |
| CN106086161A (zh) | 一种脂蛋白磷脂酶a2检测试剂及其制备与使用方法 | |
| CN106093423A (zh) | 一种测定视黄醇结合蛋白的试剂盒及其制备方法 | |
| EP2913670B1 (en) | Method for increasing the sensitivity of immunoassay system through pretreatment of urine with denaturant | |
| CN112763731B (zh) | 一种脂蛋白(a)测定试剂盒及其检测方法 | |
| CN106093425A (zh) | 一种测定抗角蛋白抗体的试剂盒及其制备方法 | |
| CN111426845B (zh) | 一种血清载脂蛋白b测定试剂盒及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20161026 |